Vi khuẩn đường ruột Họ khuẩn đường ruột Enterobacteriaceae Vibrionaceae Bateroidaceae GB chuyên biệt GB cơ hội •Salmonella •Shigella •Yersinia •E. coli •Klebsiella •Providencia •Serratia Vibrio cholerae Pseudomonaceae •Lactobacillus acidophilus •Bifidobacterium bifidum…
11/5/2019 Mục tiêu TRƯỜNG ĐH NGUYỄN TẤT THÀNH - KHOA DƯỢC BỘ MƠN VI SINH – KÝ SINH TRÙNG • Nắm phân loại vi khuẩn gây bệnh VI KHUẨN GÂY BỆNH • Đặc điểm hình thể • Đặc điểm ni cấy • Các loại KN độc tố GV: ThS Nguyễn Thị Ngọc Yến • Đặc điểm gây bệnh • Phòng ngừa – điều trị 1 2 Phân loại TRƯỜNG ĐH NGUYỄN TẤT THÀNH - KHOA DƯỢC BỘ MÔN VI SINH – KÝ SINH TRÙNG Vi khuẩn đường ruột Vi khuẩn gây bệnh đường ruột* Họ khuẩn đường ruột Enterobacteriaceae GB chuyên biệt Vibrionaceae Bateroidaceae Pseudomonaceae GB hội Vibrio cholerae •Salmonella •E coli •Shigella •Klebsiella •Yersinia •Providencia •Serratia •Lactobacillus acidophilus •Bifidobacterium bifidum… 3 Đặc điểm chung NUÔI CẤY Phát triển dễ dàng MT NC thông thường, để phân lập VK GB ĐR phải sử dụng hệ thống MT gồm MT phong phú, MT dinh dưỡng, MT phân biệt, MT chọn lọc • Trực khuẩn Gr(-) • Hiếu khí, kỵ khí tùy ý • Sống ống tiêu hóa, lây qua đường phân – miệng • Di động/ khơng di động, di động có lơng quanh thân • Khơng sinh bào tử Enterobacteriaceae Không lên men lactose Lên men lactose VK GB chuyên biệt VK GB hội Salmonella, Shigella, Proteus E coli, Klebsiella, Enterobacter 11/5/2019 Kháng nguyên O, H, K Năng lực gây bệnh • Khả xâm nhập biểu mơ • Sx nội/ ngoại độc tố KN Vị trí Bản chất Tính chất O Màng Lipopolysacharid Chịu nhiệt, cồn, hủy formol H Tiêm mao Protein Không chịu nhiệt, cồn, ko hủy formol K Nang Polysaccharid/ Protein →Gặp KT ngưng kết →Định danh VK dựa vào thành phần KN O, H, K 7 8 Độc tố VK đường ruột VK đường ruột, tùy lồi, có nội ngoại độc tố, 2: So sánh Vk Vị trí Ngoại độc tố Một số VK: tả, lỵ, E coli Sx TBC VK phóng thích ngồi MT Bản chất Protein (exotoxin) Bền nhiệt Ví dụ Shigatoxin, Enterotoxin Nội độc tố Tất VK đường ruột Trên thành tb VK phóng thích VK bị ly giải LPS (lipopolysaccharid) + Một số VK gây bệnh đường ruột • Chi Samonella • Chi Shigella • Vibrio cholerae • Escherichia coli 9 10 Chi Salmonella CHI SALMONELLA Dựa theo KN phân biệt 2500 type huyết thanh: •KN O S typhi •KN H S paratyphi •KN Vi (~ KN K) KN bề mặt S typhimurium Gr(-) Di động, nhiều pili Sốt thương hàn Phó thương hàn Hiếu khí tùy ý Lactose (-) H2S (+) Ngộ độc thức ăn Urea (-) 11 12 12 11/5/2019 Năng lực gây bệnh RUỘT Sốt thương hàn – Phó thương hàn* HẠCH BẠCH HUYẾT 105 - 107 Lực độc: nội độc tố yếu tố định • S typhi; S paratyphi A, B, C Cơ quan khác MÁU (TUẦN 1) • Ruột → Hạch bạch huyết → Nhiễm khuẩn huyết → CQ (bàng quang, túi mật) → Ruột • Sốt cao, lạnh run, suy nhược, biếng ăn, gan lách to → GAN (TUẦN 2) Xuất huyết, thủng ruột (nặng) Ngộ độc thức ăn RUỘT BÀNG QUANG PHÂN NƯỚC TIỂU • S typhimurium, S enteritidis • Nôn, tiêu chảy, sốt nhẹ, tự khỏi sau 3-5 ngày • Trẻ nhỏ: tổn thương hệ thống: phổi, xương, màng não… Salmonella typhi gây bệnh thương hàn 13 13 14 Chẩn đốn Phịng – Điều trị Trực tiếp Điều trị • Cấy máu (t1): VK huyết Nếu điều trị KS: cấy tủy xương • Sốt thương hàn – Phó thương hàn: KS + bù dịch • Cấy phân (t3-4): cần hệ thống MT chọn lọc tăng dần KS: Cepha III, cloramphenicol, floroquinolon, ampicillin Lưu ý: Làm KSĐ + dùng liều tăng dần để loại trừ định danh xác • Cấy nước tiểu • Ngộ độc TA: bù nước, điện giải Gián tiếp Test Widal (tìm KT O, H HT/bệnh nhân) Phịng ngừa • Kiểm sốt thực phẩm: thịt, sữa, trứng*, nguồn nước, người mang mầm bệnh • Vaccin TAB (Typhi, Paratyphi A, B), DTAB, DTTAB 15 15 16 16 CHI SHIGELLA Đề kháng kháng sinh • Chloramphenicol • Ampicillin • Chủng VK đề kháng • Sử dụng KS khơng hợp lý • VK nhận gen đề kháng Hiệu cao Thất bại !!! ➔ Chọn KS điều trị tốt dựa kết KHÁNG SINH ĐỒ T/hợp khơng có điều kiện làm KSĐ chưa có kết KSĐ Người lớn quinolone (ciprofloxacine ofloxacin) 17 Trẻ em cephalosporin III Bệnh lỵ trực khuẩn (cefotaxime) 18 11/5/2019 Chi Shigella Năng lực gây bệnh Gây bệnh: khả xâm nhập sản xuất độc tố Độc tố • Nội độc tố LPS có độc tính mạnh → kích thích thành ruột (co thắt), gây loét, hoại tử • Ngoại độc tố Shigatoxin (S dysenteriae type 1), Shiga- •Trực khuẩn Gr(-) •Khơng tiêm mao → khơng di động Dựa theo KN O (+), K, H (-): •Kỵ khí tùy ý •B: S flexneri Lactose (-) •C: S boydii liketoxin (S flexneri): phá hủy tế bào biểu mô ruột, tổn thương TKTW (hơn mê) •A: S dysenteriae Gây bệnh • Giới hạn ruột già, khơng vào máu • Hội chứng lỵ: sốt cao, đau quặn bụng, phân 10-20 •D: S sonnei H2S (-) Citrat (-) lần /ngày, phân nhày, máu Nặng TE, người già 19 19 20 20 Chẩn đốn Cấy phân (pp tốt nhất) • Bệnh phẩm: phân tươi chỗ nhày, gđ đầu, chưa dùng KS • VK yếu → xét nghiệm ngay/ MT chuyên chở • Dùng hệ MT: MT phong phú, MT MC, SS, BSA • Quan sát hiển vi phản ứng sinh hóa Huyết học: dùng Ngưng kết với huyết kháng (kháng KT) Shigella gây bệnh ruột già 21 21 22 22 Phòng – Điều trị Phòng ngừa: Vibrio cholerae • Vệ sinh ăn uống, sử dụng nước • Chẩn đốn sớm cách ly bệnh nhân, tẩy uế chất thải • Vaccin VK sống giảm độc lực: hiệu lực bảo vệ thấp Điều trị: phối hợp biện pháp • Bù nước + điện giải, cdd • KS: cephalosporin III, fluoroquinolone Shigella có tỉ lệ ĐKKS cao → dựa vào kết KSĐ để Gây đại dịch tả có chiến lược điều trị hiệu 23 23 24 11/5/2019 Vibrio cholerae Độc tố enzym Vibrio có chung KN H, khác KN O: •Vibrio cholerae chủng Eltor gây dịch tả lớn •Vibrio parahaemolyticus Độc tố: Cholera enterotoxin (protein không bền nhiệt) • Mơ đích: biểu mơ ruột non • Tăng tiết ạt dịch vào lòng ruột, tb ruột ko tổn thương → tiêu chảy cấp cân điện giải Enzym •Gr (-) • Hemolysin: ly giải HC •Cong dấu phẩy • Mucinase: bong tróc niêm mạc ruột •Di động nhanh nhờ tiêm mao đầu •Mọc tốt pH9 • Neuramiridase: tăng thụ thể tiếp nhận độc tố Saccharose (+) Glucose (+) 25 25 26 26 Năng lực gây bệnh* Chẩn đoán Bệnh tả Bệnh phẩm: phân, mảnh nhày/ phân • Ủ bệnh – ngày Yêu cầu: lấy sớm, chưa dùng KS • Triệu chứng đột ngột: nôn mửa, tiêu chảy dội → 10 – 20 lít nước/ ngày Soi tươi • Phân ~ nước vo gạo, lỏng, lợn cợn, ko máu, mùi • Trường hợp khẩn cấp • Nặng: tử vong vài trụy tim mạch • VK cong, di động nhanh Nhuộm Gram Cấy phân: Ngộ độc thức ăn: V parahaemolyticus • Phân lập VK lên MT pepton kiềm, TCBS • Ngưng kết huyết để xác định 27 27 28 28 Phòng – Điều trị Phịng ngừa ESCHERICHIA COLI • Nước nguồn lây quan trọng → dịch • Thức ăn bị nhiễm • Người mang mầm bệnh • Xử lý phân người bệnh • Vaccin uống: VK chết, VK sống giảm độc lực Điều trị • Bù nước, điện giải (quan trọng): ORS, Lactat Ringer • KS (tetracyclin) chủ yếu phịng dịch 29 29 30 11/5/2019 Escherichia coli Đặc điểm gây bệnh •Gr (-) •Cư trú: cộng sinh ruột già người đv, theo phân mt (nước, đất) •Chỉ số có vai trị gây tiêu chảy (TE) •VSV điểm xét nghiệm nước Yếu tố lực độc Glucose (+) Lactose (+) Gas (+) 4) β-lactamase 1) Sự bám dính niêm mạc – pili – khả xâm nhiễm vào bên tb biểu mô ruột 2) Sản xuất ngoại độc tố – Độc tố nhiệt hoại (LT) độc tố bền với nhiệt (ST) – Độc tố giống Shiga (Shiga-like toxin) 3) Nội độc tố: Lipid A phần LPS E coli không gây bệnh + yếu tố lực độc = Bệnh lý 31 31 32 32 E coli ruột Đặc điểm gây bệnh Gây bệnh hội: gây nhiều bệnh với TC khơng đặc trưng • E coli ruột: đứng hàng đầu VK gây tiêu chảy; E.coli Giải nghĩa Cơ chế gây bệnh Bệnh Đối tượng EPEC Chưa rõ Viêm ruột TE< tuổi EnteroPathogenic E.coli Giải nghĩa E.coli EHEC EnteroEPEC Hemorrhagic E EHEC gây tiêu chảy cấp TE < tuổi • E coli ngồi ruột EIEC coli EIEC Entero-Invasive ETEC Entero-Toxigenic ETEC E coli E.coli chảy TE Đối tượng Cơ chế gây bệnh tiêu Bệnh TC HC lỵ có VK xâm lấn ruột, xuất huyết tiết Shiga-like đại tràng toxin Phân có TC HC lỵ đàm, máu ngoại độc tố: •Độc tố nhiệt hoại (LT) giống VK tả •Độc tố bền nhiệt (ST) TC giống tả TE nước pt, du khách đến nước pt 33 33 34 34 Chẩn đoán – Điều trị TRƯỜNG ĐH NGUYỄN TẤT THÀNH - KHOA DƯỢC BỘ MÔN VI SINH – KÝ SINH TRÙNG Chẩn đốn • Bệnh phẩm: phân, nước tiểu, máu, … • Phân lập MT: MC, EMB Vi khuẩn gây bệnh qua đường sinh dục • Tìm độc tố: ngưng tập lame (EPEC), ELISA (ETEC) Điều trị Lựa chọn KS phù hợp vị trí nhiễm khuẩn 35 35 36 11/5/2019 Nhiễm trùng qua đường tình dục Dịch tễ học STI: Sexually Transmitted Infections (1990s) • WHO, 360-400 triệu người/năm mắc NTLTQĐTD (kể – Thuật ngữ nhiễm trùng vi khuẩn, virus ký nhiễm HIV), riêng châu Á TBD 36 triệu sinh trùng, chủ yếu lây qua quan hệ tình dục khơng an • Tại Mỹ, 19 triệu người/năm tuổi từ 25-29 bị mắc toàn, không bảo vệ NTLTQĐTD, đặc biệt nhiễm Chlamydia lậu cầu – Các nhiễm trùng có triệu chứng hay khơng • Tại Anh, năm 2008 có khoảng 400.000 người mắc giang có triệu chứng lâm sàng, khơng gây thương tổn quan mai, lậu, Chlamydia HPV • Ở Việt Nam, 200.000 người/năm bị mắc NTLTQĐTD – Thuật ngữ STI dùng cách rộng rãi so (theo báo cáo từ đơn vị Da liễu tỉnh) với thuật ngữ STD (Sexually Transmitted Diseases), ➢ Con số thực tế Việt Nam cao nhiều đặc biệt tuyến cộng đồng 37 37 38 38 Đặc điểm chung VKGBTD VI KHUẨN GÂY BỆNH LẬU Neisseria gonorrhoeae • Thuộc nhiều họ khác nhau: Nesseria, Treponema, Clamydia,… • Năng lực yếu, khó ni cấy MT nhân tạo • Khó tồn ngồi thể • Thơng thường tác nhân gây bệnh chuyên biệt người • Lây nhiễm tiếp xúc trực tiếp với nguồn bệnh • Đường lây nhiễm: quan hệ tình dục khơng an tồn, đường máu, từ mẹ sang 39 39 40 Bệnh lậu Đặc điểm • Là bệnh nhiễm khuẩn sinh dục - tiết niệu, hậu môn, họng lậu cầu (Neisseria gonorhoeae) •Song cầu khuẩn Gr (-), đối • Là tác nhân GB chuyên biệt có người, truyền nhiễm trực tiếp quan hệ với người bệnh mặt (hình hạt café úp lại • Nguồn lây: Bệnh lậu lây người bệnh •Nằm trong/ngồi BCĐNTT thời gian ủ bệnh chưa có triệu chứng •Pili bề mặt nhiều trường hợp bệnh nhân mắc bệnh lậu khơng •Khơng tạo bào tử Nesseria phân lập 1879 có triệu chứng bệnh, nguồn lây nhiễm quan trọng cộng đồng •Ký chủ người •Khó ni cấy/ MT nhân tạo •Ni cấy: MT phong phú 41 41 42 42 11/5/2019 Kháng nguyên Năng lực gây bệnh* Nam Cấu trúc KN không đồng nhất, thường thay đổi để tránh • Viêm niệu đạo cấp tính → chảy mủ, tiểu buốt, gắt, rắt sức đề kháng KC • Mạn tính: viêm tinh hồn, tuyến tiền liệt Nữ • Pili: bám dính • TC âm thầm, thường mạn tính • Protein: kết dính tb với nhau, gắn VK với tb vật chủ • Viêm âm đạo, cổ tử cung, niệu đạo:tiết chất nhày có mủ • LPS: chịu trách nhiệm cho độc tính VK • Biến chứng: viêm ống dẫn trứng Lậu CQSD Da, mắt, viêm khớp lậu, viêm nội tâm mạc, viêm màng não tủy, viêm kết mạc có mủ trẻ sơ sinh 43 43 44 44 Chẩn đoán – Điều trị Bệnh phẩm Bệnh giang mai • Nam: mủ niệu đạo • Nữ: dịch âm đạo, cổ tử cung Treponema pallidum XN trực tiếp • Trải mủ, nhuộm Gram* • Bệnh mãn tính→ Cấy mủ MT phong phú XN gián tiếp • Chưa xác, nhạy • Bệnh lậu khớp Điều trị: Penicillin: đề kháng nhiều → Cefixim, Cetriaxone, Spectinomycin, Cefotaxim 45 46 Bệnh giang mai Dịch tễ • Xoắn khuẩn Treponema palidum Pritz Schaudinn • Bệnh giang mai có từ thời thượng cổ, tài liệu Erch Hauffman tìm năm 1905 dịch tiết vết loét cổ Ấn Độ, Trung Quốc giang mai → tác nhân gây bệnh • Chỉ GB /người: niêm mạc mắt, miệng, da xây xát • Ở Châu Âu, bệnh xuất vào cuối thể kỷ 15 lan • Phương thức lây truyền tràn thành dịch vào đầu kỷ 16 – Trực tiếp qua QHTD khơng an tồn – Mẹ truyền sang • Ở Việt Nam, khơng rõ thời gian xuất • Nguồn lây – Trong thương tổn • Hiện bệnh giang mai chiếm khoảng 2-3% – Thời kỳ lây truyền mạnh TK I & II (thương tổn tổng số BLTQĐTD da niêm mạc chứa nhiều xoắn khuẩn giang mai) 47 47 48 48 11/5/2019 Đặc điểm* •Xoắn khuẩn, 6-10 vịng xoắn •Di động đặc trưng theo trục Năng lực gây bệnh* GM thời kỳ I •Khơng nhuộm Gram • Lây qua xây xát/ da, niêm mạc → hạch lympho vào máu •Khơng ni cấy •VK mảnh, yếu → chết •KN lipid (ko chun biệt) nhanh ngồi thể •KN protein (Treponema) • Đặc trưng: Săng Hạch (chùm, nhỏ, rắn, không đau) ➢ Sau 6-8 tuần dù không điều trị, hạch biến GM thời kỳ II • VK theo máu → khắp thể •KN polyosid (T.paldidum) • Tổn thương da niêm lan tỏa: Đào ban giang mai GM thời kỳ III: tổn thương phá hủy thể, gồm thể • GM lành tính: củ, gơm loét • GM thần kinh • GM tim mạch 49 49 50 50 GM bẩm sinh Chẩn đoán XN trực tiếp (GM I) • VK qua từ tháng thứ → chết lưu Trẻ sinh có • Bệnh phẩm: săng, hạch → Soi KHV đen tổn thương thời kì II III • Dễ sai dùng KS bừa bãi XN gián tiếp (GM II, III) • PƯ khơng đặc hiệu – Cố định bổ thể* – PƯ lên bơng • PƯ đặc hiệu – Bất động xoắn khuẩn – Miễn dịch huỳnh quang* – Ngưng kết hồng cầu* 51 51 52 52 Điều trị • Dùng penicillin (từ năm 1943 đến chưa thấy xoắn khuẩn đề kháng kháng sinh), thời gian hệ xoắn khuẩn dài từ 30-33 → dùng penicillin chậm procain penicillin G Hết! – Giang mai TK I, II tỉ lệ thành công – Giang mai trễ, tỉ lệ thành công giảm, cần tăng liều kháng sinh • Dùng tetracyclin erythromycin (nếu bị dị ứng penicillin) 53 53 54 54