ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
Phương pháp nghiên cứu
Nghiên cứu tiến cứu, mô tả cắt ngang.
2.2.1.1 Chỉ tiêu chung của đối tượng nghiên cứu.
- Tuổi, giới phân bố thể bệnh
+ Biến dạng xương, bộ mặt tan máu.
- Tế bào máu ngoại vi các chỉ số Hb, MCV, MCH, MCHC.
- Điện di Hb khi bệnh nhân mới vào viện.
- Nghiệm pháp Coombs trực tiếp, gián tiếp trước truyền máu.
- Xét nghiệm thời gian prothrombin
- Sinh hoá: glucose, bilirubin toàn phần, bilirubin gián tiếp, ferritin huyết thanh, albumin.
2.2.1.4 Chỉ tiêu trong quá trình điều trị.
-Biến chứng đái tháo đường.
Sơ đồ nghiên cứu Tan máu
Thải sắt Truyền máu Đánh giá sau điều trị
2.3 Phương pháp thu thập số liệu.
2.3.1 Tiêu chuẩn chẩn đoán thalassemia [7].
- Điện di huyết sắc tố: bệnh HbH: điện di Hb có HbH, HbA1 giảm,
- Điện di huyết sắc tố: HbF tăng > 10%, HbA1 giảm hoặc bằng không, HbA2 bình thường hoặc tăng.
+ β 0 -thal: HbA1 bằng không, HbF tăng rất cao > 90%, HbA2 < 4%. + β + -thal: HbF tăng 10 – 50%, HbA2 > 4%, HbA1 xấp xỉ 30%.
- Điện di huyết sắc tố: HbF tăng trên 10%, HbE tăng, HbA1 giảm hoặc bình thường.
+ β 0 -thal/HbE: không có HbA1, điện di Hb chỉ có HbF và HbE.
+ β + -thal/HbE: HbF tăng > 10%, HbA1 xấp xỉ 50%.
-Tan máu bệnh lý không phải thalassemia.
-Hỏi phỏng vấn bệnh nhân về tuổi, giới, địa dư, dân tộc.
-Thu thập thông tin theo mẫu bệnh án.
-Khám lâm sàng: bác sĩ có kinh nghiệm ở khoa H4 Viện Huyết HọcTruyền Máu Trung Ương phát hiện các dấu hiệu: thiếu máu, vàng da, biến dạng xương mặt, gan to, lách to, xạm da.
-Điện di huyết sắc tố.
+ Máy sử dụng: máy Capillarys Sebia2 của Pháp làm xét nghiệm điện di huyết sắc tố.
+ Tiêu chuẩn đánh giá: Guidelines For The Clinical Management of Thalassemia (2008).
- Tế bào máu ngoại vi.
+ Máy sử dụng: máy đếm tế bào tự động ADVIA 2120 (Siemen - Đức) để xét nghiệm các chỉ số hồng cầu trưởng thành Xét nghiệm các thời điểm: vào viện, ra viện.
Các chỉ số hồng cầu theo tiêu chuẩn hằng số sinh học người Việt Nam
Phân độ thiếu máu theo phân loại của WHO [6].
Nhẹ: 90 ≤ Hb < 120g/l; vừa: 60 ≤ Hb < 90g/l; nặng: 30 ≤ Hb < 60g/l; rất nặng: Hb < 30g/l.
+Máy sử dụng: máy sinh hoá tự động Olympus AU 640 (Nhật Bản) để xét nghiệm các xét nghiệm hoá sinh.
+ Tiêu chuẩn đánh giá: theo tiêu chuẩn hằng số sinh học người Việt Nam 2003 và Clinical Laboratorry Dianostic (2004).
Nguyên lý xét nghiệm: so màu
Giá trị bilirubin bình thường: toàn phần < 17,1μmol/l: tự do < 12,7 mol/l: tự do < 12,7 μmol/l: tự do < 12,7 mol/l.
Nguyên lý xét nghiệm: đo độ đục.
Nguyên lý xét nghiệm: bằng phương pháp miễn dịch, đo độ đục
Giá trị ferritin bình thường: phụ nữ 15-200ng/ml: nam giới 30-300ng/ml. Glucose:
Nguyên lý xét nghiệm: theo phương pháp “GOD-PAP”- enzymmatic photometric test. Đánh giá theo bảng 2.2.
+ Máy sử dụng: máy đông máu tự động ACL 9000, ACL Advance (Italya) làm xét nghiệm thời gian Prothrombin.
+ Giá trị bình thường: Prothrombin >70%.
- Nghiệm pháp Coombs: xác định sự có mặt của kháng thể miễn dịch (kháng thể thiếu) đã được cảm nhiễm trên tế bào hồng cầu.
+ Nhận định kết quả: Kháng thể đủ (IgM) KN + KT đặc hiệu → phản ứng ngưng kết; Kháng thể thiếu (IgG) KN + KT đặc hiệu → không ngưng kết, huyết thanh Coombs làm cầu nối.
+ Máy sử dụng: máy siêu âm Philip (Nhật bản).
+ Người thực hiện: bác sĩ Viện Huyết Học Truyền Máu Trung Ương. + Tiêu chuẩn đánh giá: hình vòng cung có bóng cản phía sau.
+ Máy sử dụng: máy siêu âm tim Philip E23 (Nhật bản).
+ Người thực hiện: bác sĩ Viện Tim Mạch Bạch Mai siêu âm.
+ Tiêu chuẩn đánh giá: giá trị bình thường và bệnh lý của thông số tim mạch theo khuyến cáo ASE 2005 [31] Theo ba thông số: đường kính thất trái,tăng áp lực động mạch phổi, phân xuất tống máu thất trái.
2.3.5 Chỉ tiêu truyền máu và thải sắt
+ Chế phẩm sử dụng: khối hồng cầu.
+ Chỉ định truyền máu: Hb ≤ 70 g/l trong trong 2 lần xét nghiệm liên tiếp cách nhau > 2 tuần hoặc Hb>70g/l kèm theo các biểu hiện như biến dạng mặt, gẫy xương, tăng tạo máu ngoài tủy.
+ Xét nghiệm tế bào máu ngoại vi trước và sau khi kết thúc một đợt điều trị.
+ Nồng độ Hb cần đạt sau một đợt điều trị 105g/l.
+Tai biến truyền máu: tan máu cấp, dị ứng, sốt, nhiễm trùng, hội chứng Trali (tổn thương phổi cấp xảy trong vòng 6 giờ sau truyền chế phẩm máu).
+ Thời gian dùng: truyền tĩnh mạch trong 8 giờ, dùng 5 ngày/tuần. + Chỉ định: khi nồng độ ferritin>1000ng/ml hoặc sau khi truyền 15-20 đơn vị máu.
+ Xét nghiệm: ferritin sau 3 tháng, 6 tháng điều trị.
+ Biến chứng: xơ gan, đái tháo đường, suy tim, xạm da Đánh giá xơ gan, đái tháo đường theo các tiêu chuẩn sau.
Bảng 2.1 Tiêu chuẩn chẩn đoán đái tháo đường (WHO – 2000)
Nồng độ Glucose máu Chẩn đoán
6,1 – 7.0 Rối loạn chuyển hóa đường lúc đói
Bảng 2.2 Tiêu chuẩn đánh giá xơ gan [30].
Tiêu chuẩn đánh giá 01 điểm 02 điểm 03 điểm
Bilirubin huyết thanh (μmol/l: tự do < 12,7 mol/l) 50
Hội chứng não gan Không có + ++
Child A: 5-7 điểm, Child B 8-12 điểm, Child C 13-15 điểm.
Xử lý số liệu
Các số liệu trên được xử lý theo phương pháp thống kê y học trên chương trình SPSS 15.0, Epi info 6.04.
+Các biến số định lượng được trình bày theo giá trị trung bình và độ lệch chuẩn (X SD)
+ Các biến số định tính được trình bày theo tỷ lệ %.
-Đánh giá sự khác biệt:
+ Đối với biến định tính sử dụng test χ2 Sự khác biệt có ý nghĩa thống kê với p 3,84.
+Đối với các biến định lượng sử dụng test t- student Sự khác biệt có ý nghĩa thống kê với p < 0,05 khi t > 1,96.
Đạo đức nghiên cứu
Mọi thông tin thu thập được đảm bảo bí mật cho bệnh nhân, chỉ phục vụ mục đích nghiên cứu.
- Nghiên cứu được sự đồng ý của bệnh nhân và phê duyệt của lãnh đạo Viện.
- Từ kết quả nghiên cứu, lựa chọn một số thông tin cần thiết và có ích cho việc điều trị và tư vấn cho bệnh nhân.
KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU
Kết quả điều trị
Bảng 3.9 Hemoglobin trung bình trước và sau điều trị của đối tượng nghiên cứu. Đặc điểm Trước điều trị Sau điều trị
Nhận xét: Nồng độ Hb trung bình trước điều trị 69,97±14,60g/l, sau điều trị 97,63±13,33 g/l Sự khác biệt có ý nghĩa thống kê với p90g/l chung cho ba thể bệnh 75,49%, còn
0,98% mức thiếu máu nặng gặp ở bệnh βthal/HbE.
Bảng 3.11 Khối lƣợng hồng cầu đƣợc truyền sau một đợt điều trị. Đặc điểm Chung
Nhận xét: Khối lượng hồng cầu trong đợt điều trị 1365±647 ml.
Bảng 3.12 Tai biến truyền máu của đối tƣợng nghiên cứu.
Nhận xét: Tai biến trong quá trình truyền máu nổi mề đay 9,8%, sốt 1,96%.
Thời gian Trước thalđiều thaltrị 3 thaltháng 6 thaltháng
Biểu đồ 3.6 Nồng độ ferritin trung bình trước và sau điều trị thải sắt
Nhận xét: Nồng độ ferritin trung bình trước điều trị 4326 2019ng/ml sau điều trị 6 tháng 38321981ng/ml Sự khác biệt có ý nghĩa thống kê với p