Nghiên cứu tác dụng hạ glucose máu của dịch chiết cam thảo đất (scoparia dulcis l) và phân đoạn của dịch chiết này ở chuột nhắt trắng gây đái tháo đường thực nghiệm

1 Đặt vấn đề Đái tháo đờng (ĐTĐ)đợc Tổ chức Y tế giới (WHO) định nghĩa nh tình trạng tăng đờng huyết mạn tính, dẫn tới hôn mê tử vong không đợc điều trị[19] Đây bệnh rối loạn chuyển hóa mạn tính với tăng glucose máu thiếu tuyệt đối insulin giảm tác dụng sinh học insulin (hoặc hai nguyên nhân này)[30] Trên giới, bệnh ĐTĐ ngày trở nên phổ biến[19] Tỷ lệ mắc bệnh khác tùy theo địa d, chủng téc, møc sèng vµ lèi sèng, løa ti[5] Tû lƯ tăng lên với tuổi, mức sống, thành thị lớn nông thôn, nớc công nghiệp phát triển cao nớc chậm phát triển[19] châu Âu tỷ lệ mắc bệnh khoảng 3%; Mỹ năm 1991 6,6% châu á, bệnh ĐTĐ chiếm tû lƯ cao: ë Th¸i lan 3,58%, Philippin 4,27%, Hång Kông 3,0%[56] Theo tài liệu Viện nghiên cứu ĐTĐ quốc tế (International Diabetes Institute), số bệnh nhân ĐTĐ typ giới khoảng 98,9 triệu ngời năm 1994; 157,3 triệu ngời năm 2000 dự báo khoảng 215,6 triệu ngời năm 2010[23] ớc tính Mỹ, chi phí cho điều trị chăm sóc bệnh ĐTĐ 100 tỷ USD năm[43] Chính mà ĐTĐ trở thành gánh nặng kinh tế nhiều quốc gia giới Tại Việt nam, ĐTĐ bƯnh thêng gỈp, cã tû lƯ tư vong cao nhÊt bệnh nội tiết[23] Kết điều tra Hà nội năm 1991 công bố tỷ lệ mắc bệnh ĐTĐ ngời từ 15 tuổi trở lên 1,1% (ở nội thành 1,44 ngoại thành 0,63)[20] Năm 1994, Mai Thế Trạch cộng điều tra 5416 ngời thành phố Hå ChÝ Minh, tû lƯ m¾c bƯnh ë ngêi ti từ 15 trở lên 2,52% (ngời Kinh 2,49%, ngời Hoa 2,88%)[38].Năm 1996, Trần Hữu Dàng đà điều tra 4980 ngêi tõ ti 15 trë lªn ë H thấy tỷ lệ mắc bệnh 0,96% (nội thành 1,05%, ngoại thành 0,6%)[12] Viện Nội tiết Trung ơng tiến hành điều tra thành phố lớn: Hà nội, Hải phòng, Đà nẵng, TP Hồ Chí Minh ë løa ti 30 ®Õn 64 cho thÊy tû lƯ bệnh ĐTĐ nội thành 4,9%[3] Chính ĐTĐ bệnh đợc nhà khoa học giới quan tâm nguyên nhân gây bệnh, chế bệnh sinh, đặc điểm lâm sàng cận lâm sàng nhằm mục đích phòng, điều trị bệnh cách có hiệu Bệnh ĐTĐ đòi hỏi phải đợc điều trị kéo dài suốt đời ngời bệnh gây tốn cho bệnh nhân gánh nặng cho kinh tế Chính vậy, việc tìm loại thuốc mới, sẵn có, rẻ song hiệu điều trị cao việc làm cÊp thiÕt vµ lµ xu híng chung cđa thÕ giíi Hiện nay, thuốc điều trị bệnh ĐTĐ tăng nhanh số lợng chủng loại để đáp ứng nhu cầu chữa bệnh Ngoài thuốc có nguồn gốc Tây y nh: insulin, biguanid, thiazolidindion , thuốc có nguồn gốc từ thảo d, thuốc có nguồn gốc từ thảo dợc ngày đợc quan tâm nghiên cứu Các chuyên gia Tổ chức Y tế giới ĐTĐ đà khuyến nghị nên phát triển sản xuất thuốc điều trị ĐTĐ có nguồn gốc thảo dợc, nguồn dợc liệu sẵn có, dễ sử dụng, giá thành rẻ dễ dàng chấp nhận cho cộng đồng đặc biệt nớc phát triển[58] Theo khuynh hớng này, nghiên cứu thuốc điều trị ĐTĐ có nguồn gốc thảo dợc xu hớng phát triển nhiều nớc giới nh Trung quốc, ấn độ, Hoa kỳ kể Việt nam Trong năm gần Việt nam đà có số công trình khoa học công bố kết nghiên cứu thăm dò tác dụng hạ glucose máu số thảo dợc nh : Thổ phục linh[25,40,41], Sinh địa Tri mẫu[13], Cỏ mực[18] , thuốc có nguồn gốc từ thảo d đến kết luận thảo dợc có tác dụng làm hạ glucose máu số động vật thực nghiệm nớc ta, cam thảo đất (Scoparia dulcils L) đợc sử dụng Y học Cổ truyền nh loại thuốc nam dùng để chữa sốt, say sắn độc, giải độc thể[21] Đây loại thảo dợc mọc hoang khắp nơi đất nớc ta.Vì vậy, tiến hành đề tài: "Nghiên cứu tác dụng hạ glucose máu dịch chiết cam thảo đất (Scoparia dulcis L) phân đoạn dịch chiết chuột nhắt trắng gây đái tháo đờng thực nghiệm" nhằm mục tiêu: Chiết xuất đánh giá tác dụng hạ glucose máu dịch chiết cam thảo đất (Scoparia dulcil L) chuột nhắt trắng bình thờng chuột nhắt trắng đợc gây đái tháo đờng thực nghiệm Bớc đầu phân đoạn xác định thành phần bột chiết cam thảo đất có tác dụng hạ glucose máu Chơng Tổng quan 1.1 Bệnh đái tháo đờng 1.1.1 Định nghĩa WHO (1994) hiệp hội ĐTĐ Mỹ (America diabetes associationADA-1997) đà định nghĩa: Bệnh ĐTĐ biểu tăng đờng huyết rối loạn chuyển hóa glucid, lipid protein, thờng kết hợp với giảm tuyệt đối hay tơng đối tiết hay tác dụng insulin[43] Lịch sử đà ghi nhận bệnh có 3000 năm trớc ĐTĐ (diabetes mellitus) có nguồn gốc từ tiếng Hy Lạp.Diabetes có nghĩa chảy qua ống siphon, mellitus có nghĩa ngọt[19] 1.1.2 Dịch tễ học bệnh ĐTĐ Trên giới: ĐTĐ bệnh phổ biến hầu hết quốc gia giới Tỷ lệ mắc bệnh khác tùy theo địa d, chđng téc, løa ti, møc vµ lèi sèng[5] Tû lệ ngời dân mắc bệnh tăng lên với tuổi, mức sống; thành thị lớn nông thôn, nớc công nghiệp phát triển cao nớc chậm phát triển[19] Tỷ lệ mắc bệnh vùng lÃnh thổ có khác nhau: châu Âu tỷ lệ mắc bệnh khoảng 3%; Mỹ năm 1991 6,6; châu á, bệnh ĐTĐ chiếm tỷ lệ cao: ë Th¸i Lan 3,58%, Philippin 4,27%, Malaysia 3,0%, Hång kông 3,0%, Hàn Quốc 2,08%, Đài Loan 1,6% Tại Singapore năm 1975 tỷ lệ mắc bệnh 1,9%, năm 1984 4,7% năm 1992 8,6%[23] Bệnh có xu hớng tăng theo thời gian tăng trởng kinh tÕ T¹i Mü, theo NHANES II (The second National Health and Nutrition Examination Survey II) cho thấy: năm 1987, tỷ lệ ĐTĐ ngời nghiên cứu 6,6%, năm 1998 tỷ lệ tăng lên 7,8% đến năm 2002 tỷ lệ ĐTĐ dân số nói chung 8,6%[28] Tại Singapore tỷ lệ mắc ĐTĐ năm 1975 1,9%, đến năm 1984 4,7%, đến năm 1992 8,6% đến năm 1998 tỷ lệ đà lên tới 9%[11] Theo tài liệu công bố Hội nghị quốc tế ĐTĐ tháng 12 năm 1997 Singapore cho thấy số bệnh nhân bị ĐTĐ 10 nớc điển hình nh sau[29] : Tên nớc Số bệnh nhân ĐTĐ năm 1995 Số bệnh nhân ĐTĐ năm 2025 (Triệu) 19,4 16,0 13,9 8,9 6,3 4,5 4,9 3,8 4,3 3,6 (TriÖu) 57,2 37,6 21,9 12,2 8,5 12,4 11,6 11,7 14,5 8,8 Ên ®é Trung quèc Mü Nga NhËt Indonesia Brazil Mexico Pakistan Ukraine Tỉ chøc Y tÕ thÕ giíi ®· cảnh báo xuất đại dịch bệnh ĐTĐ châu kỷ 21[29] Theo tài liệu Viện nghiên cứu ĐTĐ quốc tế (International Diabetes Institute) số bệnh nhân mắc bệnh ĐTĐ typ giới khoảng 98,9 triệu ngời vào năm 1994 ; 157,3 triệu ngời vào năm 2000 dự báo khoảng 215,6 vào năm 2010[23] Tình hình mắc bệnh ĐTĐ Việt nam Việt nam, cha có công bố đầy đủ tỷ lệ ngời mắc bệnh ĐTĐ phạm vi nớc, nhng theo thông kê số bệnh viện lớn, bệnh có chiều hớng gia tăng theo nhịp độ phát triển kinh tế mà chứng số lợng bệnh nhân điều trị bệnh viện lớn tăng lên hàng năm[23] Thành phố Hà nội Năm 1990 Tác giả Phan Sĩ Quốc, Lê Huy Liệu[20] Tỷ lÖ (%) 1,1 HuÕ TP Hå ChÝ Minh 2002 Tạ Văn Bình [3] 2,42 1993 Trần Hữu Dàng [12] 0,96 1994 Mai Thế Trạch [38] 2,52 2002 Tạ Văn Bình [3] 4,7 Năm 2001, tỷ lệ bệnh ĐTĐ typ thành phố lớn (Hà nội, Hải phòng, Đà nẵng, thành phố Hồ Chí Minh) lên đến 4,1%, đến năm 2002, tỷ lệ ĐTĐ typ thành phố lớn 4,4%[4] Việt nam, tỷ lệ mắc bệnh khác theo địa d Tại Hà nội, tỷ lệ mắc bệnh nội thành năm 1990 1,6% ngoại thành 0,6%; đến năm 1999, tỷ lệ mắc bệnh nội thành 4% ngoại thành dới 1% Tại Long xuyên-An giang, tỷ lệ mắc bệnh thành phố 4,6% nông thôn 3,5%[29] Rõ ràng ĐTĐ có chiều hớng phát triển nhanh nớc ta ĐTĐ mét bƯnh thêng gỈp, cã tû lƯ tư vong cao nhÊt c¸c bƯnh néi tiÕt[23], cã rÊt nhiỊu biÕn chứng mạn tính cấp tính tim mạch, thần kinh, tổn thơng thận, gây mù lòa, cắt cụt chi, giảm tuổi thọ[19] Sự gia tăng nhanh chóng bệnh kèm theo biến chứng thực mối quan tâm chung ngành y tế nh xà hội 1.1.3 Chẩn đoán bệnh ĐTĐ Việc chẩn đoán bệnh ĐTĐ không khó khăn bệnh nhân có triệu chứng lâm sàng kinh điển nh : ăn nhiều, sụt cân, uống nhiều, đái nhiều, có đờng niệu glucose máu tăng cao Tuy nhiên, trờng hợp triệu chứng điển hình glucose máu lúc đói mức bình thờng việc chẩn đoán hoàn toàn dựa vào xét nghiệm hóa sinh[47,54] * Tiêu chuẩn chẩn đoán bệnh ĐTĐ theo WHO năm 2001: Glucose huyết tơng lúc đói > 7,0 mmol/l (làm xét nghiệm hai lần) Glucose huyết tơng bÊt kú > 11,1 mmol/l (lµm xÐt nghiƯm Ýt nhÊt hai lần) Glucose huyết tơng sau uèng 75 g glucose > 11,1 mmol/l 1.1.4 Ph©n loại bệnh ĐTĐ Dựa vào chế bệnh sinh nguy mắc bệnh, năm 1985, WHO phân loại bệnh ĐTĐ thành hai loại chính[19] 1.1.4.1 ĐTĐ typ ĐTĐ typ (hay gọi ĐTĐ phụ thuộc insulin-insulin dependent diabetes millitus-IDDM) bệnh tự miễn đợc đặc trng phá hủy tế bào tun tơy, thêng dÉn ®Õn thiÕu hơt insulin tut ®èi[19] Nguy để phát triển thành ĐTĐ typ xt hiƯn nh÷ng u tè tù miƠn hut nh : kháng thể kháng tế bào đảo tụy, kháng thể kháng insulin, glutamat decarboxylase (GAD) protein tyrosin phosphatase IA-2[23] Tính chất đặc trng : - Sự thiếu hụt tuyệt đối gần nh tuyệt đối insulin - Sự xuất triệu chứng trầm trọng - Khả xuất ceton niệu - Phụ thuộc vào insulin bên để đảm bảo sống - Thờng xuất ngời trẻ tuổi 1.1.4.2 ĐTĐ typ ĐTĐ typ (hay gọi ĐTĐ không phụ thuộc insulin-non insulin dependent diabetes mellitus-NIDDM), c¬ chÕ bƯnh sinh chđ yếu kháng insulin với thiếu hụt tiết insulin ĐTĐ typ chiếm 85% trờng hợp ĐTĐ chiếm tới 100 triệu dân toàn giới[23] Tính chất đặc trng[12] : - Sự tồn insulin - Sự xuất triệu chứng thờng ôn hòa - Không có khả xuất ceton niệu - Không phụ thuộc insulin ngoại sinh - Thờng xuất ngời 40 tuổi Phân biệt hai typ bệnh ĐTĐ Đặc điểm Typ Typ Ti khëi ph¸t < 30 > 30 Trọng lợng ban đầu Thờng gầy Thờng béo phì Cách khởi bệnh Đột ngột rầm rộ: ăn Không rõ ràng nhiều, uống nhiều, tiểu nhiều gầy nhiều Tăng ceto điều trị) máu(không Thờng có Không Biến chứng mạch máu Vi mạch Mạch lớn Tiết insulin Rất giảm Bình thờng giảm Phụ thuộc insulin Có Không Nồng độ insulin Rất thấp Bình thờng tăng Kháng thể kháng tiểu đảo Có từ lúc khởi bệnh Không có 1.1.4.3 Các typ khác ĐTĐ ĐTĐ liên quan đến thiếu dinh dỡng (ĐTĐ nhiệt đới)[5] Đặc điểm : - Bệnh trẻ (dới 30 tuổi) - Nguyên nhân : ăn uống thiếu thốn, đặc biệt thiếu protid - Nồng độ glucose máu cao - Không có biến chứng hôn mê nhiễm toan ceto ĐTĐ kết hợp víi mét sè bƯnh vµ héi chøng[5] - BƯnh vỊ tuyến tụy (viêm tụy mạn, K tụy, cắt tụy) - BƯnh néi tiÕt (Héi chøng Cushing, Basedow, U tđy thỵng thËn) - Dïng liỊu cao vµ kÐo dµi mét sè thc (corticoid, thc lỵi tiĨu thc nhãm thiiazit) ĐTĐ phụ nữ có thai: Là ĐTĐ kết hợp với tăng biến chứng lúc sinh đẻ kết hợp với nguy ĐTĐ năm sau đẻ[19] Các phụ nữ đợc xếp vào nhóm có nguy cao khi[23]: - Phụ nữ béo phì - Tiền sử gia đình có ngời mắc bệnh ĐTĐ - Tiền sử sinh kg - Tiền sử xảy thai thai chết lu không rõ nguyên nhân Giảm dung nạp glucose: Đó ngời cha mắc ĐTĐ nhng có nhiều nguy bị ĐTĐ biến chứng thoái hóa mạch máu so với ngời bình thờng[5] Thờng hay gặp ngời béo phì, thờng có insulin máu tăng kháng với insulin[23] Chẩn đoán Đờng máu giê sau uèng 75 g glucose (mmol/l) Mao m¹ch TÜnh mạch ĐTĐ 11,1 11,1 Rối loạn dung nạp glucose 7,8 7,8 1.1.5 Nguyên nhân chế bệnh sinh 1.1.5.1 Nguyên nhân chế bệnh sinh bệnh ĐTĐ typ Nguyên nhân: châu Âu, bệnh ĐTĐ typ chiếm 10% số bệnh nhân ĐTĐ Bệnh thờng xảy ngời trẻ dới 40 tuổi, trạng gầy[5] Khởi phát lâm sàng nói chung mang tÝnh chÊt cÊp tÝnh víi nh÷ng triƯu chøng kinh điển rầm rộ Nguyên nhân có thiếu hụt hoắc hầu nh insulin tế bào tuyến tụy bị phá hủy, việc điều trị bệnh phụ thuộc hoàn toàn vào việc cung cấp insulin từ vào[19] Cơ chế bệnh sinh: Cơ chế bệnh sinh ĐTĐ typ phức tạp đa yếu tố, có vai trò yếu tố di truyền, phản ứng miễn dịch đóng góp số yếu tố môi trờng nh: nhiễm virus, nhiễm độc, rối loạn dinh dỡng[23] Ngay sau ĐTĐ typ đợc phát phần lớn tế bào tụy đà bị phá hủy Có nhiều chứng cho thấy trình phá hủy có chất tự miễn gồm giai đoạn[19]: - Thứ nhất: phải có khả di trun cđa bƯnh - Thø hai: cã mét u tè nội sinh khởi động cho trình bệnh - Giai đoạn 3: tụy đáp ứng lại viêm nhiễm gọi viêm đảo tụy Các tế bào xâm nhập vào tiểu đảo Langerhans lympho T đà đợc hoạt hóa - Giai đoạn 4: hủy hoại biến đổi bề mặt tế bào Tế bào không đợc xem thể mà đợc hệ thống miễn dịch xem nh tế bào l¹