Chọn lọc một số chủng nấm men đỏ có khả năng sinh sắc tố carotenoid sử dụng trong chăn nuôi

HỌC VIỆN NƠNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CHĂN NI KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: CHỌN LỌC MỘT SỐ CHỦNG NẤM MEN ĐỎ CÓ KHẢ NĂNG SINH SẮC TỐ CAROTENOID SỬ DỤNG TRONG CHĂN NUÔI GÀ ĐẺ HÀ NỘI - 2021 HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CHĂN NUÔI KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: CHỌN LỌC MỘT SỐ CHỦNG NẤM MEN ĐỎ CÓ KHẢ NĂNG SINH SẮC TỐ CAROTENOID SỬ DỤNG TRONG CHĂN NUÔI GÀ ĐẺ Sinh viên thực : Phan Nguyễn Nhật Minh Lớp : K61CNTYB Khóa : 61 Ngành : CHĂN NI THÚ Y Người hướng dẫn : TS NGUYỄN THỊ TUYẾT LÊ Bộ môn : DINH DƯỠNG - THỨC ĂN HÀ NỘI - 2021 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan: Các số liệu kế khóa luận tơi theo dõi thu thập với thái độ hoàn toàn khách quan trung thực Tôi xin cam đoan giúp đỡ cho việc thực khóa luận cảm ơn thơng tin trích dẫn khóa luận ghi rõ nguồn gốc Hà Nội , ngày tháng năm 2021 Sinh viên Phan Nguyễn Nhật Minh i LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành khóa luận tốt nghiệp tơi xin gửi lời cảm ơn chân thành đến TS Nguyễn Thị Tuyết Lê – người tận tình giúp đỡ , hướng dẫn tơi suốt thời gian thực tập hồn thành khóa luận Tơi xin gửi lời cảm ơn tới Ban lãnh đạo Học viện Nông nghiệp Việt Nam , Ban chủ nhiệm khoa Chăn ni tồn thể thầy cô giáo môn Dinh dưỡng thức ăn truyền đạt kiến thức chuyên ngành tạo điều kiện tốt giúp đỡ suốt q trình học tập hồn thành làm khóa luận Trong suốt q trình thực tập , thân tơi cịn nhiều sai lầm thiếu sót kính mong thầy thơng cảm lượng thứ bỏ qua Cuối muốn gửi lời cảm ơn đến gia đình , bạn bè ln động viên giúp đỡ tơi hồn thành khóa luận tốt nghiệp Một lần xin chân thành cảm ơn ! Hà Nội , ngày tháng năm 2021 Sinh viên Phan Nguyễn Nhật Minh ii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC BẢNG v MỞ ĐẦU ĐẶT VẤN ĐỀ MỤC ĐÍCH – YÊU CẦU Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC CỦA NẤM MEN CỦA MỘT SỐ GIỐNG NẤM MEN ĐỎ 1.1.1 Rhodotorula 1.1.2 Rhodosporidium 11 1.1.3 Giá trị dinh dưỡng sinh khối nấm men Rhodotorula 13 1.2 GIỚI THIỆU VỀ CAROTENOID 13 1.2.1 Khái niệm 13 1.2.2 Cơ chế sinh tổng hợp sắc tố Carotenoid 14 1.2.3 Ứng dụng Carotenoid 14 1.3 CƠ SỞ CỦA VIỆC SỬ DỤNG NẤM MEN TRONG SẢN XUẤT VÀ CHẾ BIẾN THỨC ĂN 15 1.4 TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU TRONG VÀ NGOÀI NƯỚC VỀ NẤM MEN ĐỎ 16 1.4.1 Nghiên cứu nước 16 1.4.2 Tình hình nghiên cứu nước 18 Chương 2.ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNGVÀ KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 20 2.1 ĐỐI TƯỢNG- ĐỊA ĐIỂM- THỜI GIAN NGHIÊN CỨU 20 2.2 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 20 2.2.1 Chọn lọc chủng nấm men đỏ cho sản xuất sinh khối giàu carotenoid 20 iii 2.2.2 Tối ưu hóa mơi trường điều kiện sản xuất sinh khối nấm men đỏ giàu carotenoid 20 2.3 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 21 2.3.1 Nguyên vật liệu 21 2.3.2 Phương pháp theo dõi tiêu nghiên cứu nội dung 21 2.3.3 Xác định khả phân giải tinh bột 23 2.3.4 Xác định khả phân giải protein 23 2.3.5 Tối ưu hóa mơi trường điều kiện nuôi cấy rắn 24 2.4 PHƯƠNG PHÁP XỨ LÝ SỐ LIỆU 25 Chương KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 26 3.1 CHỌN LỌC CÁC CHỦNG RHODOTORULA ĐỂ SẢN XUẤT SINH KHỐI GIÀU CAROTENOID 26 3.1.1 Đánh giá đặc điểm hình thái khả lên men chủng giống nấm men đỏ 26 3.1.2 Đánh giá khả sinh trưởng chủng nấm men đỏ 30oC 30 3.1.3 Khả tích lũy sinh khối hàm lương carotenoid chủng nấm men đỏ 31 3.1.4 Xác định hoạt tính amylase tổng số 32 3.2 TỐI ƯU HÓA MÔI TRƯỜNG VÀ ĐIỀU KIỆN NUÔI CẤY 37 3.2.1 Xác định tỷ lệ tiếp giống môi trường ni cấy thích hợp 37 3.2.2 Đánh giá ảnh hưởng số yếu tố đến khả sinh trưởng tích lũy sắc tố nấm men đỏ 38 Chương KẾT LUẬN, TỒN TẠI VÀ ĐỀ NGHỊ 42 4.1 KẾT LUẬN 42 4.2 MỘT SỐ TỒN TẠI VÀ ĐỀ NGHỊ 43 TÀI LIỆU THAM KHẢO 44 iv DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Hình thái tế bào số lồi Rhdotorula sp ni cấy môi trường thạch malt Bảng 3.1 Đánh giá đặc điểm hình thái chủng nấm men đỏ 26 Bảng 3.2 Khả sinh trưởng chủng nấm men đỏ 30oC 30 Bảng 3.3 Khả tích lũy sinh khối tế bào chủng nấm men đỏ 31 Bảng 3.4 Kết xác định hoạt tính enzyme amylase tổng chủng nấm men đỏ 34 Bảng 3.5 Khả phân giải protein chủng nấm men 36 Bảng 3.6 Kết xác định tỷ lệ tiếp giống MT thích hợp 37 Bảng 3.7 Ảnh hưởng nhiệt độ nuôi cấy đến sinh trưởng nấm men đỏ 38 Bảng 3.8 Ảnh hưởng pH đến sinh trưởng nấm men đỏ 39 Bảng 3.9 Hàm lượng carotenoid thu chất khác 39 Bảng 3.10 Ảnh hưởng đường đến sinh trưởng chủng nấm men đỏ 40 Bảng 3.11 Ảnh hưởng N đến sinh trưởng chủng nấm men đỏ 41 v DANH MỤC HÌNH ẢNH, BIỂU ĐỒ Hình 3.1 Đặc điểm hình thái chủng nấm men đỏ 30 Hình 3.2 Đánh gia khả phân giải tinh bột chủng Rhodotorula môi trường có bổ sung tinh bột tan 33 Hình 3.3 Phản ứng Wohlgemuth xác định hoạt độ enzyme amylase chủng nấm men đỏ 35 Hình 3.4 Khả phân giải protein chủng nấm men đỏ 36 Hình 3.5 Bột gạo lên men với nấm men đỏ 40 vi DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT G : Gam H : Giờ Ml : Mililit Mm : Milimet o : Độ Celsius C TB : Tế bào VSV : Vi sinh vật DD : Dung dịch vii MỞ ĐẦU ĐẶT VẤN ĐỀ Nơng nghiệp nói chung ngành chăn ni nói riêng nước ta ngành nghề sản xuất có từ lâu đời chăn ni gia cầm lĩnh vực quan trọng chiếm vị trí lớn tổng giá trị sản phẩm ngành chăn nuôi nước ta Sự phát triển khoa học kĩ thuật ngày nhằm mang đến tiện nghi, chất lượng tốt cho người Khơng nằm ngồi xu hướng phát triển phát triển ngành chăn nuôi gia cầm coi trọng để đáp ứng nhu cầu số lượng chất lượng cho người tiêu dùng Các sản phầm từ gia cầm thịt,trứng nguồn thực phẩm có giá trị dinh dưỡng cao người tiêu dùng ưa chuộng Khi lựa chọn sản phẩm từ chăn nuôi trứng trứng lịng đỏ có màu vàng đậm lựa chọn hàng đầu người tiêu dùng Bên cạnh việc bổ sung chất giúp cải thiện màu sắc lòng đỏ trứng để tăng thị hiếu người tiêu dùng, chìa khóa thành cơng lĩnh vực sản xuất trứng gia cầm.Chính mà việc tìm tịi, nghiên cứu sản xuất chế phẩm từ nguồn vi sinh vật nói chung từ nấm men nói riêng hướng giúp cho ngành chăn nuôi phát triển mang lại hiệu kinh tế cao Nấm men nhóm vi sinh vật đơn bào, phân bố rộng rãi tự nhiên, tốc độ sinh sản nhanh Từ lâu nấm men sử dụng chế biến thực phẩm sản xuất nước uống có cồn, làm bánh …Trong vài thập kỷ gần đây,nấm men sử dụng nhiều chăn nuôi chế biến thức ăn giàu tinh bột, protein phụ phẩm nông nghiệp,sản xuất sinh khối protein, chất phụ gia chăn nuôi từ nguyên liệu phong phú,rẻ tiền Nấm men Rhodotorula sp chủng nấm men có khả sinh sắc tố carotenoid – chất có khả cải thiện màu sắc lòng đỏ trứng.Để thu chủng giống nấm men khâu phân lập, chọn lọc đóng vai trị then chốt.Tuy nhiên khâu chọn lọc tốn địi hỏi nhiều cơng sức, phụ thuộc nhiều vào công tác bảo quản giống sau phân lập Vitamin A có vai trị quan trọng đời sống người vật nuôi.Thực vật vi sinh vật xem nguồn cung cấp Kết cho thấy, tất chủng nấm men đỏ kiểm tra sinh trưởng chậm sau 48h nuôi cấy Số lượng tế bào tăng từ 1,75 – 4,30 lần so với số lượng ban đầu Tốc độ tăng trưởng lớn chủng SR7, SR6, SR3, SR5, SR2, SR1, SR8 SR4 Số lượng tế bào tiếp tục tăng sau 72h nuôi cấy nhiên tốc độ sinh trưởng giảm so với thời điểm nuôi cấy 48h Tốc độ tăng số lượng tế bào cao đạt 2,42 lần chủng SR7 So sánh chủng nấm men đỏ, số lượng tế bào đếm chủng có sai khác thống kê hai thời điểm theo dõi 48 72h với P