ĐỀ tài PHÂN lập, TUYỂN CHỌN và NGHIÊN cứu các đặc điểm HÌNH THÁI của một số CHỦNG nấm mốc có KHẢ NĂNG SINH CELLULASE CAO

TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM HÀ NỘI KHOA SINH – KTNN *** KIỀU NGỌC BÍCH PHÂN LẬP, TUYỂN CHỌN VÀ NGHIÊN CỨU CÁC ĐẶC ĐIỂM HÌNH THÁI CỦA MỘT SỐ CHỦNG NẤM MỐC CÓ KHẢ NĂNG SINH CELLULASE CAO KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC CHUYÊN NGÀNH: VI SINH VẬT Ngƣời hƣớng dẫn khoa học TS PHƢƠNG PHÚ CÔNG HÀ NỘI, 2012 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com LỜI CẢM ƠN Trước hết, em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới TS Phương Phú Công định hướng ý tưởng nghiên cứu, tận tình hướng dẫn nghiên cứu, sửa luận văn để em hoàn thành luận văn Em xin chân thành cảm ơn Ths Nguyễn Khắc Thanh - trưởng phòng Vi Sinh Vật trường ĐH Sư Phạm Hà Nội 2, PGS TS Đinh Thị Kim Nhung tập thể cán phòng Vi Sinh Vật trường ĐH Sư Phạm Hà Nội tận tình hướng dẫn thí nghiệm, thường xuyên bảo kiến thức chuyên môn, sửa luận văn tạo điều kiện tốt giúp em học tập rèn luyện suốt trình thực khóa luận tốt nghiệp đại học Em xin chân thành cảm ơn thầy cô giáo khoa Sinh trường ĐH Sư Phạm Hà Nội giảng dạy tạo điều kiện chu đáo cho em suốt q trình học tập hồn thành khóa luận Bên cạnh đó, em xin gửi lời cảm ơn đến gia đình, bạn bè người thân động viên giúp đỡ em suốt trình học tập để em có kết ngày hơm Với lòng biết ơn sâu sắc, em xin chân thành cảm ơn tất giúp đỡ quí báu ! Hà Nội, tháng 05 năm 2012 Sinh Viên Kiều Ngọc Bích LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng Các số liệu, kết thu khóa luận trung thực, chưa công bố công trình khoa học Nếu sai tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm Hà Nội, tháng 05 năm 2012 Sinh Viên Kiều Ngọc Bích LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH VÀ BẢNG TRONG LUẬN VĂN DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Các dạng Hyphomycetes Hình 1.2 Giá sinh bào tử Coelomycetes Hình 1.3 Cấu tạo Coelomycetes Hình 1.4 Các kiểu phát sinh bào tử trần Hình 1.5 Các kiểu phát triển bào tử trần Hình 1.6 Các dạng phát triển tế bào sinh bào tử trần Hình 1.7 Cuống sinh bào tử trần Hình 1.8 Các dạng cuống sinh bào tử trần đặc biệt Hình 1.9 Một số hình dạng bào tử trần Hình 1.10 Các hình dạng khác bào tử Hình 1.11 Chi Penicillium Link ex Fries Các thành phần chổi (bộ máy mang bào tử trần) Hình 1.12 Cấu tạo quan sinh bào tử trần Aspergillus Hình 1.13 Cấu tạo khuẩn ti quan sinh bào tử trần Penicillium Hình 14 Cấu trúc không gian cellulose LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Hình 1.15 Cấu trúc khơng gian CMC Hình3.1 Hoạt tính cellulase chủng mạnh Hình 3.2 Một số đặc điểm hình thái chủng M 4V Hình 3.3 Một số đặc điểm hình thái chủng M 151 Hình 3.4 Một số đặc điểm hình thái chủng M 251 DANH MỤC BẢNG Bảng 3.1 Kết đặc điểm chủng nấm mốc phân lập Bảng 3.2 Kết thử hoạt tính 25 chúng nấm mốc phân lập LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com CÁC THUẬT NGỮ VIẾT TẮT CBH : Cellobiohydrolase CMC : Cacboxyl methyl cellulose CMC –ase : cacboxylmethylcellulase CS : Cộng E1 : Exoglucanase E2 : Endoglucanase UV : Tia cực tím A.glaucus : Aspergillus glaucus A.restricus : Aspergillus restricus A.cervinus : Aspergillus cervinus A.ornatus : Aspergillus ornatus A.nidulans : Aspergillus nidulans A.versicolor : Aspergillus versicolor Austus : Aspergillus ustus A.flavipes : Aspergillus flavipes A.wentii : Aspergillus wentii LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com A.flavus : Aspergillus flavus A.niger : Aspergillus niger A.ocharaceus : Aspergillus ocharaceus A sparsus : Aspergillus sparsus A cremeus : Aspergillus cremeus A candidus : Aspergillus candidus H1 : Hình VSV : Vi sinh vật LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com MỤC LỤC MỞ ĐẦU .1 Lý chọn đề tài Mục đích đề tài Nội dung đề tài Ý nghĩa khoa học đề tài Điểm đề tài .3 NỘI DUNG CHƢƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Đại cương nấm mốc 1.1.1 Nấm bất toàn (Deuteromycetes) .4 1.1.1.1 Hyphomycetes 1.1.1.2 Coelomycetes 1.1.1.3 Agonomycetes 1.1.2 Các kiểu phát triển bào tử trần phát sinh bào tử dạng nảy chồi .8 1.1.3 Sự phát triển tế bào sinh bào tử trần 1.1.4 Cuống sinh bào tử trần 1.1.5 Bào tử trần 10 1.2 Chi Aspergillus Micheli ex Fries 11 1.2.1 Tình hình nghiên cứu phân loại Aspergillus giới 11 1.2.2 Đặc điểm sinh học Aspergillus 15 1.3 Sơ lược Penicillium 17 1.4 Cellulose va cellulase 19 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 1.4.1 Celulose 19 1.4.2 Cellulase .21 1.4.3 Ứng dụng cellulase 1.4.3.1 Ứng dụng enzyme cellulase chế biến thực phẩm 22 1.4.3.2 Trong công nghệ sử lý rác thải sản xuất phân bón vi sinh 23 1.5 Các nhóm vi sinh vật phân giải cellulose 24 CHƢƠNG 2: VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Vật liệu nghiên cứu 26 2.1.1 Mẫu phân lập 26 2.1.2 Thiết bị, dụng cụ hóa chất dùng cho nghiên cứu .26 2.2 Môi trường 27 2.3 Phương pháp nghiên cứu .27 2.3.1 Phương pháp phân lập 27 2.3.1.1 Thu thập mẫu 27 2.3.1.2 Chuẩn bị môi trường phân lập bảo quản 27 2.3.1.3 Tiến hành phân lập 28 2.3.2 Phương pháp thử hoạt tính 30 2.3.2.1 Phương pháp xác định hoạt tính enzyme phương pháp cấy chấm điểm 30 2.3.2.2 Xác định hoạt tính enzyme phương pháp khuếch tán mơi trường thạch ( William, 1983) 30 2.3.3 Phương pháp nghiên cứu định loại (Maren A Klich, 2002) 31 2.3.3.1 Phương pháp cấy chấm điểm chủng nấm mốc lên môi trường Crapek- Dox sở để nghiên cứu đặc điểm vĩ mô 31 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 2.3.3.2 Phương pháp cấy khối thạch để quan sát đặc điểm vi mô (Robert A Samson and Ellen S Hoekstra, Jens C Frisvad and Filtenborg, 1996) 31 2.3.4 Phương pháp quan sát đặc điểm phân loại 32 2.3.4.1 Quan sát đặc điểm vĩ mơ sau mắt thường kính hiển vi soi .32 2.3.4.2 Quan sát đặc điểm vi mơ kính hiển vi quang học chụp ảnh qua kính hiển vi ( Axioskop) .33 CHƢƠNG : KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 1.1 Kết phân lập 34 1.2 Kết thử hoạt tính 35 1.3 Kết định loại sơ 37 1.3.1 Bản mô tả chủng M4V 37 1.3.2 Bản mô tả chủng M151 40 1.3.3 Bản mô tả chủng M251 43 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 46 TÀI LIỆU THAM KHẢO .47 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Từ mục, đất mùn, gỗ mục, rơm rạ mục thu từ huyện Mỹ Đức (Hà Nội), Tam Dương ( Vĩnh Phúc) chia làm mẫu tiến hành phân lập 50 hộp petri, quan sát ngày thu được 25 chủng nấm mốc Đặc điểm 25 chủng nấm mốc nghi bảng 3.1 Kết bảng 3.1 cho thấy: Trong mẫu khác phân bố nấm khác nhau, hai mẫu gỗ mục rơm mục thu nhiều chủng mốc so với mục đất mùn Kết cho thấy chủng nấm mốc Tam Dương ( Vĩnh Phúc), Mỹ Đức (Hà Nội) mà nghiên cứu đa dạng, có tiềm cho nhiều ứng dụng thực tế sản xuất enzym, xử lý nước thải, 3.2 Kết thử hoạt tính Nhằm kiểm tra khả sinh cellulase 25 chủng nấm mốc phân lập được, sử dụng phương phấp chấm điểm mơi trường Crapexdox có 1% CMC, sau ngày đo đường kính phân giải cellulase Kết thử hoạt tính thể bảng 3.2 34 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Bảng 3.2 Kết thử hoạt tính 25 chúng nấm mốc phân lập đƣợc Mẫu Lá mục Gỗ mục Hoạt tính STT Chủng cellulase mốc D-d (cm) M1-51 1.7 M1-52 1.0 M1-61 0.6 M1-62 0.5 M1-9 0.6 M1-10 0.7 M2 -1 1.2 M2-3 0.5 M2-4 0.3 10 M2-51 1.9 11 M2 -52 1.2 12 M2-6 1.2 13 M2-7 0.6 14 M2-8 0.7 Mẫu Đất mùn Rơm mục STT Chủng mốc 15 M3-4 16 M3-8 17 M3-10 18 M4-1 19 M4-2 20 M4-3 21 M4 D 22 M4 XT 23 M4-V 24 M4 -7 25 M4- Hoạt tính cellulase D-d (cm) 0.5 0.8 0.5 1.4 0.5 0.4 1.0 0.4 2.0 0.6 0.6 Kết bảng 3.2 cho thấy: khả sinh tổng hợp cellulase chủng nấm mốc mẫu thu thập Tam Dương ( Vĩnh Phúc), Mỹ Đức ( Hà Nội ) đa dạng Trong mẫu rơm mục thu đa dạng chủng mốc Khả sinh tổng hợp cellulase mẫu, chủng khác khơng nhau, số 25 chủng có tới chủng đường kính phân giải cellulose lớn cm, 16 chủng cịn lại có đường kính phân giải cellulose nhỏ cm Trong có ba chủng có hoạt tính cellulase cao chủng M4-V có đường kính phân giải cm, chủng M2-51 đường kính phân giải 1,9 cm chủng M1-51 có đường kính phân giải 1,7 cm So sánh với nghiên cứu khác nước Lê Thị Hồng Nga (2005), Trịnh Đình Khá (2007) [6] ba chủng mà chúng tơi thu có hoạt tính cellulase cao Do chúng tơi chọn ba chủng để phục vụ cho nghiên cứu 35 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com M151 M251 M4V Hình 3.1 Hoạt tính cellulase chủng mạnh 3.3 Kết định loại sơ 3.3.1 Bản mô tả chủng M4V Bằng phương pháp nhận diện nấm mốc truyền thống (Maren A Klich, 2002), bước đầu xác định chủng M4V thuộc chi Penicillium có đặc điểm hình thái rât giống với đặc điểm hình thái chi Penicillium khóa phân loại Samson cs (1995) [25] Những đặc điểm hình thái chủng M4V miêu tả cụ thể sau: Đặc điểm hình thái khuẩn lạc Đường kính khuẩn lạc môi trường Crapek – Dox sở: 35 mm sau ngày nuôi cấy Đặc điểm mặt trước khuẩn lạc: Khuẩn lạc có màu xanh lục giữa, rìa màu xám xanh Khuẩn lạc hình trứng thon dài Đặc điểm mặt sau khuẩn lạc : có màu nâu tối, không nhăn 36 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Cấu tạo quan sinh sản vô tính Giá bào tử trần (condiophore, tipe): phát triển hầu hết từ hệ sợi, khơng có nhánh mang 1-2 nhánh Nhánh có nhẵn Bào tử: Khi riêng rẽ, bào tử trần không màu màu nhạt tụ họp thành đám, thường có màu lục, vàng lục, lục xanh, lục xám, xám Các bào tử trần tạo thành chuỗi dài miệng thể bình, xếp thành chuỗi song song hay dạng cột Bông nấm (conidial head): hình chổi Bọng đỉnh giá (vesicle): hình đế, bàn chang Bào tử trần (conidia): có hình ovan, cầu Các lớp thể bình (seriation): lưỡng tầng Cuống thể bình thành vòng 3-6 đỉnh giá bào tử trần đỉnh nhánh Hình thái khuẩn lạc Bào tử trần (X400) 37 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Bào tử trần ( X1000) Bọng đỉnh giá ( X1000) Giá bào tử ( X100) Giá bào tử ( X1000) Bông nấm ( X100) Bông nấm ( X400) Hình 3.2 Một số đặc điểm hình thái chủng M 4V 38 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 3.3.2 Bản mô tả chủng M 151 Bằng phương pháp nhận diện nấm mốc truyền thống (Maren A Klich, 2002), bước đầu xác định chủng M 151 thuộc chi Aspergillus có đặc điểm hình thái giống với đặc điểm hình thái chi Aspergillus khóa phân loại Samson cs (1995) Những đặc điểm hình thái chủng M 151 miêu tả cụ thể sau: Đặc điểm hình thái khuẩn lạc Đường kính khuẩn lạc mơi trường Crapek – Dox sở 40mm sau ngày nuôi cấy Đặc điểm mặt trước khuẩn lạc: bào tử màu vàng hoa cau, vàng tươi, hệ sợi khí sinh tử trắng đến vàng nhạt Đặc điểm mặt sau khuẩn lạc: màu vàng tối, không nhăn Cấu tạo quan sinh sản vơ tính Giá bào tử trần (condiophore, tipe): không phân nhánh, ráp, thành dày, dài 1,5 đến cm Bơng nấm (conidial head): hình bán cầu, gần cầu Bọng đỉnh giá (vesicle): hình bán cầu, hình cầu Bào tử trần (conidia): có hình cầu Khối bào tử trần đỉnh bọng hình cầu, sau hình tia tỏa trịn tách thành cột, đơi có khối bào tử trần nhỏ màu nâu đen Các lớp thể bình (seriation ): đơn tầng bao phủ 70- 90%, Cuống thể bình lớn 39 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Mặt trước khuẩn lạc Mặt sau khuẩn lạc Bông nấm ( X100) Bông nấm ( X400 ) Bông nấm ( X1000) Bọng đỉnh giá (X400) 40 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Bào tử trần (X1000) Bào tử trần ( X400) Hình 3.3 Một số đặc điểm hình thái chủng M 151 3.3.3 Bản mơ tả chủng M 251 Bằng phương pháp nhận diện nấm mốc truyền thống (Maren A Klich, 2002), bước đầu xác định chủng M 251 thuộc loài Aspergillus niger có đặc điểm hình thái rât giống với đặc điểm hình thái lồi Aspergillus niger khóa phân loại Samson cs (1995) Những đặc điểm hình thái chủng M 251 miêu tả cụ thể sau: Đặc điểm hình thái khuẩn lạc Đường kính khuẩn lạc mơi trường Crapek – Dox sở 55 mm sau ngày nuôi cấy Đặc điểm mặt trước khuẩn lạc: bào tử màu đen nâu,có vịng trắng ngăn cách phần khuẩn lạc với rìa khuẩn lạc hệ sợi khí sinh vàng nhạt Đặc điểm mặt sau khuẩn lạc: màu đỏ cam, nhăn Cấu tạo quan sinh sản vơ tính Giá bào tử trần (condiophore, tipe): không phân nhánh, thẳng, thành dày 41 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Bơng nấm (conidial head): hình cầu Bọng đỉnh giá (vesicle): hình bán cầu, hình cầu, thon dài, mang cuống thể bình thể bình Bào tử trần (conidia): đa số hình ovan, elip, số hình cầu Các lớp thể bình (seriation ): đơn tầng, bao phủ 50- 80% Mặt trước khuẩn lạc Mặt sau khuẩn lạc Bào tử trần ( X400) Bào tử trần (X1000) 42 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Giá bào tử (X400) Bọng dỉnh giá ( X1000) Bông nấm ( X100) Bơng nấm ( X1000) Hình 3.4 Một số đặc điểm hình thái chủng M 251 43 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN Từ mẫu mục, gỗ mục, đất mùn rơm mục, lấy Mỹ Đức ( Hà Nội), Tam Dương (Vĩnh Phúc) phân lập 25 chủng nấm mốc, tất 25 chủng nấm mốc có khả tổng hợp cellulase phân giải cellulose Trong 25 chủng nấm mốc có chủng M4V, M251, M151 có hoạt tính cellulase mạnh nhất, hoạt tính chủng 2.0 cm, 1.9 cm, 1.7 cm Bước đầu định loại sơ chủng nấm mốc M4V, M251, M151 Trong đó, M4V thuộc chi Penicillium, M51 thuộc chi Aspergillus, M251 thuộc loài Aspergillus niger KIẾN NGHỊ Các chủng M4V, M151, M251, định loại sơ phương pháp quan sát đặc điểm hình thái chủ yếu Kiến nghị kết hợp thêm phương pháp phân loại kĩ thuật sinh học phân tử Tiếp tục nghiên cứu số yếu tố ảnh hưởng đến khả sinh cellulase chủng ( nhiệt độ, nguồn cacbon, nguồn nitơ, độ pH thích hợp, độ ẩm ) phương pháp lên men rắn Nghiên cứu đánh giá tiềm ứng dụng chủng M4V, M251, M151 44 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com TÀI LIỆU THAM KHẢO TIẾNG VIỆT [1] Bùi Xuân Đồng, Nguyễn Huy Văn, (2001) Vi nấm dùng công nghệ sinh học, NXB KH & KT Hà Nội, trang: 13 – 16, 154 – 168 [2] Chu Thị Thanh Bình, Nguyễn Lân Dũng, Lương Thùy Dương “Phân lập, tuyển chọn nghiên cứu chủng nấm men có khả phân giải cellulose nhằm ứng dụng xử lý bã thải hoa thức ăn chăn nuôi” [3] Đặng Thị Thu, Lê Ngọc Tú, Tô Kim Anh, Phạm Thu Thủy, Nguyễn Xuân Sâm (2004) Công nghệ enzyme, Nxb Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội [4] Hồng Quốc Khánh, Ngơ Đức Duy, Nguyễn Duy Long (2003) Khả sinh tổng hợp đặc điểm cellulase Aspergillus niger RNNL- 363, Báo cáo khoa học, Hội nghị Cơng nghệ Sinh học tồn quốc, Nxb Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội: 304-307 [5] Nguyễn Đức Lượng (2003) Sản xuất cà phê theo phương pháp enzyme, Báo cáo khoa học, Hội nghị Cơng nghệ Sinh học tồn quốc, Nxb Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội: 318-320 [6] Trịnh Đình Khá (2006) Tuyển chọn, ni cấy chủng vi sinh vật sinh tổng hợp cellulase đánh giá tính chất lý hóa cellulase, Luận văn thạc sĩ khoa học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc Gia Hà Nội 45 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com [7] Vũ Duy Giảng (2009) Sử dụng enzyme để tăng hiệu sử dụng lượng giảm giá thành thức ăn chăn ni, Tạp chí Khoa học Công nghệ chăn nuôiViện chăn nuôi quốc gia: 16 TIẾNG ANH [8] Bergquist P, Gibbs M, Morris D, Teo V, Saul D, Morgan H (1999) Molecular diversity of thermophilic cellulolytic and hemicellulolytic bacteria, FEMS Microbiol Ecol 28: 99-110 [9] Bhat KM, Hay AJ, Claeyssens M, Wood TM (1990) Study of the mode of action and site-specificity of the endo-(1-4)-beta-D-glucanases of the fungus Penicillium pinophilum with normal, 1-3H-labelled, reduced and chromogenic cello oligosaccharides, Biochem J, 266: 371-378 [10] Coral G, Burhan A, Unaldi M, Guvenmez H (2002) Some properties of crude carboxymethyl cellulase of Aspergillus niger Z10 wild-type strain, Turk J Biol, 26: 209-213 [11] Dahot M, Noomrio M (1996) Microbial production of cellulase by Aspergillus fumigatus using wheat straw as a carbon source, J Islamic Acad Sci, 9: 119-124 [12] Ekperigin MM, Preliminary studies of cellulase production by Acinetobacter anitratus and Branhamella sp, African Journal of Biotechnology Vol 6, pp 028-033, January 2007 [13] Kang M, Rhee Y (1995) Cacboxymethyl cellulases active and stable at alkaline pH from alkalophilic cephalosporium sp RYM-202, Biotechnol Lette, 17: 507-512 46 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com [14] Katsuhiko Ando at al, 2004, Sampling and Isolation Methods of Fungi, Department of Biotechnology, National Institute of Technology and Evaluation (NITE), Japan [15] Katsuhiko Ando, 2002, Identification of Fungi Imperfecti, NITE Biological Resource Center National Intitute of Technology and Evaluation [16] Kiffer E., M Morelet, (2000), the Deuteromycetes (Mitosporic Fungi), Science Publishers TNC, U.S.A., 115pp [17] Maren A Klich, 2002 Identification of Common Aspergillus Speceies, Pulished by the Central bureau voor Schimmelcutues, Utrecht, The Nethrlands, 107 pp [18] Mc Kenzie Erick H.C., (2004), Fungal Taxonomy Workshop, Landcare Research Private Bag 92170 Auckland New Zealand, p 3,6 [19] Michael J.Carlie, Sarah C Watkinson, Graham, 1994, The Fungi [20] Milala M, Shehu B, Zanna H, Omosioda V (2009) Degradation of AgaroWaste by Cellulase from Aspergillus candidus, Asian Journal of Biotechnology, 1: 51-56 [21] Noyd R.K., (2002), Mycology Reference Card, The American Phytopathological Society 3340 Pilot Knob Road St Paul, Minnesota 55121 – 2079, USA, 18pp [22] Ojumu TV, Solomon BO, Betiku EL, Stephen K, Amigun B (2003) Cellulase production by Aspergillus flavus Linn Isolate NSPR 101 fermented in sawdust, bagasse and corncob, Afr Biotechnol, 2: 150-152 47 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com [23] Omojasola P, Jilani O (2008) Cellulase production by Trichoderma longi, Aspergillus niger and Saccharomyces cerevisae cultured on waste from orange, Pakistan Biol Sci, 11: 2382-2388 [24] Raper K B, Fennell D L (1965), the Gennus Aspergillus, Baltimore USA William and Wilkins, Preston street baltimore, Md 21202 U S A, p 570 [25] Robert A Samson and Ellen S.Hoekstra, Jens C Frisvad and Filtenborg (1996) Introduction to Food- borne Fungi, Centraalbureau voor Schimmelcutues Baarl Delft, Pg : 3,4, 52- 83 [26] Robert A Samson, John I Pitt (2000) Integration of modern taxonomic methods for Penicillium and Aspergillus classification, p: 83- 113 48 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com ... Do tơi chọn đề tài “ Phân lập, tuyển chọn nghiên cứu đặc điểm hình thái số chủng nấm mốc có khả sinh cellulase cao? ?? để nghiên cứu Mục đích đề tài 2.1 Phân lập tuyển chọn chủng nấm mốc có khả tổng... Hình 3.2 Một số đặc điểm hình thái chủng M 4V Hình 3.3 Một số đặc điểm hình thái chủng M 151 Hình 3.4 Một số đặc điểm hình thái chủng M 251 DANH MỤC BẢNG Bảng 3.1 Kết đặc điểm chủng nấm mốc phân. .. chủng nấm mốc có khả sinh cellulase phế phụ phẩm nông nghiệp miền Bắc Việt Nam 4.2 Nâng cao khả nghiên cứu đặc điểm phân loại số chủng nấm mốc có khả sinh cellulase Việt Nam 4.3 Tìm chủng nấm mốc