Nghiên cứu tạo vật liệu khởi đầu và nhân nhanh chồi in vitro cây ba gạc hoa đỏ (rauvolfia serpentina)

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC - - KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: “NGHIÊN CỨU TẠO VẬT LIỆU KHỞI ĐẦU VÀ NHÂN NHANH CHỒI IN VITRO CÂY BA GẠC HOA ĐỎ (RAUVOLFIA SERPENTINA)” HÀ NỘI – 2023 HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CƠNG NGHỆ SINH HỌC - - KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: “NGHIÊN CỨU TẠO VẬT LIỆU KHỞI ĐẦU VÀ NHÂN NHANH CHỒI IN VITRO CÂY BA GẠC HOA ĐỎ (RAUVOLFIA SERPENTINA)” Người thực : Phùng Văn Duy Khóa : 64 MSV : 640972 Ngành : Cơng nghệ sinh học Người hướng dẫn : ThS Vũ Hoài Sâm TS Nguyễn Thị Thúy Hạnh HÀ NỘI – 2023 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan kết nghiên cứu tơi thực Các số liệu kết khóa luận hồn tồn trung thực chưa sử dụng, cơng bố luận văn, luận án cơng trình khoa học trước Tôi xin cam đoan thơng tin trích dẫn sử dụng khóa luận rõ nguồn gốc, đảm bảo theo quy định Tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm lời cam đoan này! Hà Nội, ngày 25 tháng 01 năm 2023 Sinh viên thực Phùng Văn Duy i LỜI CẢM ƠN Trong suốt thời gian học tập khoa Cơng nghệ sinh học, đặc biệt q trình thực khóa luận tốt nghiệp Trung tâm Nghiên cứu Nguồn gen Giống trồng Quốc gia (Viện dược liệu), giúp đỡ bảo tận tình Cơ anh chị cán trung tâm với tất cố gắng, phấn đấu rèn luyện, tơi hồn thành khóa luận tốt nghiệp Lời đầu tiên, tơi xin phép chân thành gửi lời cảm ơn sâu sắc đến Thầy, Cô anh chị cán Trung tâm Nghiên cứu Nguồn gen Giống trồng Quốc gia (Viện Dược liệu) hướng dẫn, bảo tận tình tạo điều kiện thuận lợi suốt trình thực khóa luận tốt nghiệp Tơi xin chân thành cảm ơn Ban giám hiệu Học Viện Nông Nghiệp Việt Nam, Ban chủ nhiệm khoa Công nghệ sinh học, Thầy, Cô giáo cán thuộc môn Sinh học tận tình hướng dẫn giúp đỡ tơi suốt q trình thực khóa luận tốt nghiệp Đặc biệt, xin gửi lời cảm ơn chân thành sâu sắc tới ThS Vũ Hoài Sâm, TS Nguyễn Thị Thúy Hạnh bảo giúp đỡ suốt trình học tập nghiên cứu Cuối cùng, tất lòng chân thành biết ơn sâu sắc, xin gửi lời cảm ơn tới gia đình, anh chị em bạn bè suốt q trình học tập thực khóa luận tốt nghiệp Tôi xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 25 tháng 01 năm 2023 Sinh viên thực Phùng Văn Duy ii TÓM TẮT Đề tài thực nhằm bước đầu nghiên cứu nhân giống in vitro Ba gạc hoa đỏ (Rauvolfia serpentina) - lồi dược liệu có giá trị kinh tế cao Việt Nam Nội dung đề tài gồm nghiên cứu khử trùng vật liệu ban đầu, nghiên cứu tái sinh nghiên cứu nhân nhanh mẫu vật liệu Ba gạc hoa đỏ Kết xác định thời gian khử trùng mẫu cấy dung dịch thủy ngân clorua (HgCl2) 0,1% phút cho kết tốt với vật liệu khử trùng chồi đoạn thân mang mắt ngủ cho tỉ lệ mẫu 93,33% tỉ lệ mẫu tái sinh 86,67% Môi trường tái sinh chồi in vitro Ba gạc hoa đỏ MS + 30 g/l sucrose cho tỷ lệ tái sinh đạt 82,22% Môi trường nhân nhanh thích hợp với Ba gạc hoa đỏ môi trường MS bổ sung 1,0 mg/l BAP, cho hệ số nhân chồi cao đạt 7,0 chồi/mẫu, chất lượng chồi tốt, chồi phát triển đồng iii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii TÓM TẮT iii MỤC LỤC iv DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT vii DANH MỤC BẢNG viii DANH MỤC HÌNH ix PHẦN I MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích yêu cầu 1.2.1 Mục đích 1.2.2 Yêu cầu 1.3 Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài 1.3.1 Ý nghĩa khoa học 1.3.2 Ý nghĩa thực tiễn PHẦN II TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Giới thiệu chung Ba gạc hoa đỏ 2.1.1 Nguồn gốc 2.1.2 Phân bố 2.1.3 Phân loại 2.1.4 Đặc điểm thực vật học 2.1.5 Yêu cầu ngoại cảnh 2.2 Giá trị Ba gạc hoa đỏ 2.3 Các phương pháp nhân giống truyền thống Ba gạc hoa đỏ 12 2.4 Nhân giống dược liệu kĩ thuật nuôi cấy mô tế bào thực vật 13 2.4.1 Cơ sở lý luận nuôi cấy mô tế bào thực vật 13 2.4.2 Quy trình nhân giống kĩ thuật nuôi cấy mô tế bào thực vật 14 iv 2.4.3 Một số yếu tố ảnh hưởng đến nhân giống kĩ thuật ni cấy mô tế bào thực vật 15 2.5 Các nghiên cứu Ba gạc hoa đỏ giới nước 16 2.5.1 Các nghiên cứu giới 16 2.5.2 Các nghiên cứu Việt Nam 17 PHẦN III NỘI DUNG, PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 18 3.1 Đối tượng phạm vi nghiên cứu 18 3.1.1 Đối tượng nghiên cứu 18 3.1.2 Phạm vi nghiên cứu 18 3.2 Địa điểm thời gian nghiên cứu 18 3.2.1 Địa điểm nghiên cứu 18 3.2.2 Thời gian nghiên cứu 18 3.3 Điều kiện nghiên cứu 18 3.4 Nội dung nghiên cứu 18 3.5 Phương pháp nghiên cứu 19 3.5.1 Phương pháp nuôi cấy in vitro 19 3.5.2 Phương pháp khử trùng mẫu cấy 19 3.5.3 Phương pháp bố trí thí nghiệm 20 3.6 Các tiêu theo dõi 21 3.7 Phương pháp xử lý số liệu 22 PHẦN IV KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 23 4.1 Tạo vật liệu khởi đầu 23 4.2 Tái sinh chồi in vitro Ba gạc hoa đỏ 24 4.2.1 Ảnh hưởng nồng độ khoáng đến khả tái sinh chồi in vitro Ba gạc hoa đỏ 25 4.2.2 Ảnh hưởng nồng độ đường đến khả tái sinh chồi in vitro Ba gạc hoa đỏ 26 4.3 Nhân nhanh Ba gạc hoa đỏ 28 v 4.3.1 Ảnh hưởng nồng độ BAP đến khả nhân nhanh chồi Ba gạc hoa đỏ 29 4.3.2 Ảnh hưởng nồng độ Kinetin đến khả nhân nhanh chồi Ba gạc hoa đỏ 32 4.3.3 Ảnh hưởng tổ hợp BAP + α-NAA đến khả nhân nhanh chồi Ba gạc hoa đỏ 35 4.3.4 Ảnh hưởng tổ hợp Kinetin + α-NAA đến khả nhân nhanh chồi Ba gạc hoa đỏ 37 PHẦN V KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 40 5.1 Kết luận 40 5.2 Đề nghị 40 TÀI LIỆU THAM KHẢO 41 PHỤ LỤC 45 vi DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT STT Chữ viết tắt Chữ viết đầy đủ BAP 6-Benzyl amino purine cm Centimet CT Cơng thức CV% Sai số thí nghiệm ĐC Đối chứng IAA 3-Indole acetic acid Kin Kinetin LSD0,05 Độ lệch tiêu chuẩn mức ý nghĩa 5% mg/l Miligram/lít 10 MS Murashige and Skoog 11 TCN Trước công nguyên 12 α-NAA α-Naphtalene acetic acid vii DANH MỤC BẢNG Bảng 4.1 Ảnh hưởng thời gian xử lý mẫu HgCl2 0,1% đến hiệu khử trùng chồi Ba gạc hoa đỏ (theo dõi sau tuần) 24 Bảng 4.2 Ảnh hưởng nồng độ khoáng đến khả tái sinh chồi in vitro Ba gạc hoa đỏ sau tuần nuôi cấy 25 Bảng 4.3 Ảnh hưởng nồng độ đường đến khả tái sinh chồi in vitro Ba gạc hoa đỏ sau tuần nuôi cấy 27 Bảng 4.4 Ảnh hưởng BAP đến nhân nhanh chồi in vitro Ba gạc hoa đỏ sau tuần nuôi cấy 30 Bảng 4.5 Ảnh hưởng Kinetin đến nhân nhanh chồi in vitro Ba gạc hoa đỏ sau tuần nuôi cấy 33 Bảng 4.6 Ảnh hưởng tổ hợp BAP + α-NAA đến nhân nhanh chồi in vitro Ba gạc hoa đỏ sau tuần nuôi cấy 35 Bảng 4.7 Ảnh hưởng tổ hợp Kinetin + α-NAA đến nhân nhanh chồi in vitro Ba gạc hoa đỏ sau tuần nuôi cấy 37 viii 19 Mehrotra, S., Goel, M.K., Rahman, L.U et al (2013) Molecular and chemical characterization of plants regenerated from Ri-mediated hairy root cultures of Rauvolfia serpentina Plant Cell Tiss Organ Cult 114, 31-38 20 Mittal B, Meenakshi Sharma A, Gothecha VK (2012) Phytochemical and pharmacological activity of Rauvolfia Serpentina - a review, International Journal of Ayurvedic & Herbal Medicine (3): 427 - 434 21 Mitra, G.C (1976) Studies on the formation of viable and non-viable seed in R serpentine Benth Ind J Exp Biol., 14:521 22 O’Connor S.E., Maresh J (2006) Chemistry and biology of monoterpene indole alkaloid biosynthesis, Natural Product Reports, 23: 532-547 23 Pandey MM, Rastogi S & Rawat AKS (2013) Indian traditional ayurvedic system ofmedicine and nutritional supplementation Evidence-Based Complementary andAlternative Medicine 2013: 1-12 24 Pandey V.P., Cherian E., Patani G (2010) Effect of growth regulators and culture conditions on direct root induction of Rauvolfia serpentina L (Apocynaceae) Benth by leaf explants, Tropical Journal of Pharmaceutical Research, 9(1): 27-34 25 Poonam Agrawal S, Mishra S (2013) Physiological, biochemical and modern biotechnological approach to improvement of Rauvolfia serpentina, Journal of Pharmacy and Biological Science (2): 73 - 78 26 Prusoff W.H (1961) Effect of reserpine on the 5-hydroxytryptamine and adenosinetriphosphate of the dog intestinal mucosa, British Journal of Pharmacology, 17: 87-91 27 Quattrocchi U (2012) CRC world dictionary of medicinal and poisonous plants CRCpress 28 Rajbhandari, K.R (2001) Ethnobotany of Nepal Ethnobotanical Society of Nepal (ESON), Kathmandu pp:189 29 Rolf S., Bruns H.J, Wichter T., Kirchhof P., Ribbing M., Wasmer K., Paul M., Breithardt G., Haverkamp W., Eckardt L (2003) The ajmaline 43 challenge in Brugada syndrome: diagnostic impact, safety, and recommended protocol, European Heart Journal, 24(12): 1104-1112.’ 30 Sarker, K P., Islam, A., Islam, R., Hoque, A., & Joarder, O I (1996) In vitro propagation of Rauvolfia serpentina through tissue culture Planta medica, 62(04), 358-359 31.Sharma, P., Roy, M., & Roy, B (2022) A review on influence of floral biology, pollination efficiency and conservation strategies of endangered medicinal plant, Rauvolfia serpentina (L.) Benth ex Kurz Annals of Phytomedicine, 11(1), 86-98 32 Singh, P., Singh, A., Shukla, A K., Singh, L., Pande, V., & Nailwal, T K (2009) Somatic embryogenesis and in vitro regeneration of an endangered medicinal plant sarpgandha (Rauvolfia serpentina L.) Life Science Journal, 6(2), 57-62 33 Stanford JL, Martin EJ, Brinton LA &Hoover RN (1986) Rauvolfia uses and breast Cancer: A Case Control study Journal of the National Cancer Institute 76: 817-822 34 Susila, T., Reddy, G S., & Jyothsna, D (2013) Standardization of protocol for in vitro propagation of an endangered medicinal plant Rauvolfia serpentina Benth J Med Plants Res, 7(29), 2150-2153 35 Varadarajan, P D (1963) Climate and soil conditions of Rauvolfia serpentina in India Economic Botany, 133-138 44 PHỤ LỤC Ảnh hưởng nồng độ khoáng đến khả tái sinh chồi in vitro Ba gạc hoa đỏ BALANCED ANOVA FOR VARIATE SL FILE TNKHOANG 2/ 2/** 0:27 PAGE Anh huong cua nong khoang den kha nang tai sinh choi in vitro cay ba gac hoa VARIATE V003 SL LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= NL 123556E-01 617778E-02 CT 10.4264 * RESIDUAL 256444E-01 641111E-02 5.21321 0.96 0.457 813.15 0.000 * TOTAL (CORRECTED) 10.4644 1.30805 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CCC FILE TNKHOANG 2/ 2/** 0:27 PAGE Anh huong cua nong khoang den kha nang tai sinh choi in vitro cay ba gac hoa VARIATE V004 CCC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= NL 206666E-02 103333E-02 CT 3.71540 * RESIDUAL 873364E-02 218341E-02 1.85770 0.47 0.656 850.82 0.000 * TOTAL (CORRECTED) 3.72620 465775 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TNKHOANG 2/ 2/** 0:27 PAGE Anh huong cua nong khoang den kha nang tai sinh choi in vitro cay ba gac hoa MEANS FOR EFFECT NL - 45 NL NOS SL CCC 5.51000 4.24000 5.57667 4.25333 3 5.49000 4.21667 SE(N= 3) 0.462281E-01 0.269778E-01 5%LSD 4DF 0.181204 0.105747 MEANS FOR EFFECT CT CT NOS SL CCC 7.04333 5.14000 4.86667 3.87000 3 4.66667 3.70000 SE(N= 3) 0.462281E-01 0.269778E-01 5%LSD 4DF 0.181204 0.105747 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TNKHOANG 2/ 2/** 0:27 PAGE Anh huong cua nong khoang den kha nang tai sinh choi in vitro cay ba gac hoa F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD (N= SD/MEAN | 9) DEVIATION NO BASED ON BASED ON OBS TOTAL SS RESID SS C OF V |NL % |CT | | | | | | | | | SL 5.5256 1.1437 0.80069E-01 1.4 0.4570 0.0002 CCC 4.2367 0.68248 0.46727E-01 1.1 0.6561 0.0002 Ảnh hưởng nồng độ đường đến khả tái sinh chồi in vitro Ba gạc hoa đỏ BALANCED ANOVA FOR VARIATE SL FILE TNDUONG 2/ 2/** 0:30 PAGE Anh huong cua nong duong den kha nang tai sinh choi in vitro cay ba gac hoa 46 VARIATE V003 SL LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= NL 702889E-01 351445E-01 CT 6.19842 * RESIDUAL 145109E-01 362773E-02 3.09921 9.69 0.031 854.31 0.000 * TOTAL (CORRECTED) 6.28322 785403 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CCC FILE TNDUONG 2/ 2/** 0:30 PAGE Anh huong cua nong duong den kha nang tai sinh choi in vitro cay ba gac hoa VARIATE V004 CCC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= NL 800005E-03 400003E-03 CT 1.85627 * RESIDUAL 973350E-02 243338E-02 928133 0.16 0.853 381.42 0.000 * TOTAL (CORRECTED) 1.86680 233350 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TNDUONG 2/ 2/** 0:30 PAGE Anh huong cua nong duong den kha nang tai sinh choi in vitro cay ba gac hoa MEANS FOR EFFECT NL SL CCC NL NOS 6.55667 4.89000 6.38000 4.91000 3 6.57667 4.91000 SE(N= 3) 0.347742E-01 0.284803E-01 5%LSD 4DF 0.136307 0.111636 - 47 MEANS FOR EFFECT CT SL CCC CT NOS 7.02333 5.17667 5.33333 4.26333 3 7.15667 5.27000 SE(N= 3) 0.347742E-01 0.284803E-01 5%LSD 4DF 0.136307 0.111636 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TNDUONG 2/ 2/** 0:30 PAGE Anh huong cua nong duong den kha nang tai sinh choi in vitro cay ba gac hoa F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD (N= SD/MEAN | 9) DEVIATION NO BASED ON BASED ON OBS TOTAL SS RESID SS C OF V |NL % |CT | | | | | | | | | SL 6.5044 0.88623 0.60231E-01 0.9 0.0311 0.0002 CCC 4.9033 0.48306 0.49329E-01 1.0 0.8535 0.0003 Thí nghiệm ảnh hưởng nồng độ BA đến khả nhân nhanh chồi Ba gạc hoa đỏ BALANCED ANOVA FOR VARIATE SC FILE TNBA 2/ 2/** 0: PAGE Anh huong cua nong BA den kha nang nhan nhanh cay ba gac hoa VARIATE V003 SC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= NL 261334E-02 130667E-02 CT 58.7728 * RESIDUAL 611921E-01 764902E-02 48 14.6932 0.17 0.846 ****** 0.000 * TOTAL (CORRECTED) 14 58.8366 4.20261 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SL FILE TNBA 2/ 2/** 0: PAGE Anh huong cua nong BA den kha nang nhan nhanh cay ba gac hoa VARIATE V004 SL LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB SQUARES SQUARES ER LN ============================================================================= NL 126400E-01 632000E-02 CT 4.35100 1.08775 * RESIDUAL 151161 188951E-01 0.33 0.728 57.57 0.000 * TOTAL (CORRECTED) 14 4.51480 322486 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CCC FILE TNBA 2/ 2/** 0: PAGE Anh huong cua nong BA den kha nang nhan nhanh cay ba gac hoa VARIATE V005 CCC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= NL 581334E-02 290667E-02 CT 2.15216 * RESIDUAL 461199E-01 576499E-02 538040 0.50 0.626 93.33 0.000 * TOTAL (CORRECTED) 14 2.20409 157435 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TNBA 2/ 2/** 0: PAGE Anh huong cua nong BA den kha nang nhan nhanh cay ba gac hoa MEANS FOR EFFECT NL - 49 NL NOS SC SL CCC 3.73400 6.38800 4.54200 3.70600 6.37200 4.59000 3.70600 6.32000 4.57000 SE(N= 5) 0.391127E-01 0.614737E-01 0.339558E-01 5%LSD 8DF 0.127543 0.200459 0.110727 MEANS FOR EFFECT CT CT NOS SC SL CCC 1.00000 6.97667 5.17333 2.46667 6.46667 4.82000 3 6.93333 5.35667 4.33333 4.20000 6.42000 4.39000 3.97667 6.58000 4.12000 SE(N= 3) 0.504943E-01 0.793622E-01 0.438368E-01 5%LSD 8DF 0.164657 0.258792 0.142947 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TNBA 2/ 2/** 0: PAGE Anh huong cua nong BA den kha nang nhan nhanh cay ba gac hoa F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD (N= SD/MEAN | 15) DEVIATION NO BASED ON BASED ON OBS TOTAL SS RESID SS SC 15 3.7153 2.0500 SL 15 6.3600 CCC 15 4.5673 C OF V |NL % |CT | | | | | | | | | 0.87459E-01 2.4 0.8463 0.0000 0.56788 0.13746 2.2 0.7282 0.0000 0.39678 0.75928E-01 1.7 0.6258 0.0000 Thí nghiệm ảnh hưởng nồng độ kinetin đến khả nhân nhanh Ba gạc hoa đỏ BALANCED ANOVA FOR VARIATE SC FILE TNKIN 2/ 2/** 0:17 PAGE 50 Anh huong cua nong kinetin den kha nang nhan nhanh cay ba gac hoa VARIATE V003 SC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= NL 537331E-02 268666E-02 CT 56.9085 * RESIDUAL 724904E-01 906130E-02 14.2271 0.30 0.754 ****** 0.000 * TOTAL (CORRECTED) 14 56.9863 4.07045 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SL FILE TNKIN 2/ 2/** 0:17 PAGE Anh huong cua nong kinetin den kha nang nhan nhanh cay ba gac hoa VARIATE V004 SL LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= NL 344933E-01 172466E-01 CT 3.58803 * RESIDUAL 455731E-01 569663E-02 897007 3.03 0.104 157.46 0.000 * TOTAL (CORRECTED) 14 3.66809 262007 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CCC FILE TNKIN 2/ 2/** 0:17 PAGE Anh huong cua nong kinetin den kha nang nhan nhanh cay ba gac hoa VARIATE V005 CCC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= NL 515999E-02 258000E-02 CT 1.87429 * RESIDUAL 259069E-01 323836E-02 468573 0.80 0.487 144.69 0.000 - 51 * TOTAL (CORRECTED) 14 1.90536 136097 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TNKIN 2/ 2/** 0:17 PAGE Anh huong cua nong kinetin den kha nang nhan nhanh cay ba gac hoa MEANS FOR EFFECT NL NL NOS SC SL CCC 3.63800 6.17400 4.54000 3.64200 6.16000 4.49800 3.60000 6.26800 4.50400 SE(N= 5) 0.425707E-01 0.337539E-01 0.254494E-01 5%LSD 8DF 0.138819 0.110068 0.829880E-01 MEANS FOR EFFECT CT CT NOS SC SL CCC 1.00000 6.98000 5.02667 2.26667 6.40000 4.80667 3 6.75667 5.51000 4.29333 4.22333 6.18000 4.39000 3.88667 5.93333 4.05333 SE(N= 3) 0.549585E-01 0.435761E-01 0.328551E-01 5%LSD 8DF 0.179214 0.142097 0.107137 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TNKIN 2/ 2/** 0:17 PAGE Anh huong cua nong kinetin den kha nang nhan nhanh cay ba gac hoa F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD (N= SD/MEAN | NO 15) BASED ON DEVIATION BASED ON 52 C OF V |NL % | |CT | | | | | OBS TOTAL SS RESID SS | | | SC 15 3.6267 2.0175 0.95191E-01 2.6 0.7537 0.0000 SL 15 6.2007 0.51187 0.75476E-01 1.2 0.1042 0.0000 CCC 15 4.5140 0.36891 0.56907E-01 1.3 0.4865 0.0000 Thí nghiệm ảnh hưởng tổ hợp BA NAA đến khả nhân nhanh Ba gạc hoa đỏ BALANCED ANOVA FOR VARIATE SC FILE TNKHBA 2/ 2/** 0:23 PAGE Anh huong cua to hop BA va NAA den kha nang nhanh nhanh cay ba gac hoa VARIATE V003 SC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= NL 112167E-01 560834E-02 CT 1.68422 * RESIDUAL 392501E-01 654168E-02 561408 0.86 0.473 85.82 0.000 * TOTAL (CORRECTED) 11 1.73469 157699 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SL FILE TNKHBA 2/ 2/** 0:23 PAGE Anh huong cua to hop BA va NAA den kha nang nhanh nhanh cay ba gac hoa VARIATE V004 SL LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= NL 604667E-01 302334E-01 CT 21.4411 * RESIDUAL 640656E-01 106776E-01 7.14705 2.83 0.136 669.35 0.000 * TOTAL (CORRECTED) 11 21.5657 1.96052 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CCC FILE TNKHBA 2/ 2/** 0:23 PAGE 53 Anh huong cua to hop BA va NAA den kha nang nhanh nhanh cay ba gac hoa VARIATE V005 CCC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= NL 571664E-02 285832E-02 CT 1.88067 * RESIDUAL 266836E-01 444727E-02 626889 0.64 0.562 140.96 0.000 * TOTAL (CORRECTED) 11 1.91307 173915 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TNKHBA 2/ 2/** 0:23 PAGE Anh huong cua to hop BA va NAA den kha nang nhanh nhanh cay ba gac hoa MEANS FOR EFFECT NL NL NOS SC SL CCC 7.38000 6.08500 4.12750 7.40000 6.05000 4.11000 7.45250 6.21500 4.16250 SE(N= 4) 0.404403E-01 0.516662E-01 0.333439E-01 5%LSD 6DF 0.139890 0.178722 0.115342 MEANS FOR EFFECT CT CT NOS SC SL CCC 5.18000 4.20333 7.00000 7.20000 4.44333 3.47667 3 8.00000 7.60000 4.52333 7.44333 7.24333 4.33000 SE(N= 3) 0.466965E-01 0.596590E-01 0.385022E-01 5%LSD 6DF 0.161531 0.206370 0.133185 - 54 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TNKHBA 2/ 2/** 0:23 PAGE Anh huong cua to hop BA va NAA den kha nang nhanh nhanh cay ba gac hoa F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD (N= SD/MEAN | 12) DEVIATION NO BASED ON BASED ON OBS TOTAL SS RESID SS SC 12 7.4108 0.39711 SL 12 6.1167 1.4002 CCC 12 4.1333 0.41703 C OF V |NL % |CT | | | | | | | | | 0.80881E-01 1.1 0.4728 0.0001 0.10333 1.7 0.1357 0.0000 0.66688E-01 1.6 0.5617 0.0000 Thí nghiệm ảnh hưởng tổ hợp kinetin NAA đến khả nhân nhanh Ba gạc hoa đỏ BALANCED ANOVA FOR VARIATE SC FILE TNKHKIN 2/ 2/** 0:25 PAGE Anh huong cua to hop kinetin va NAA den kha nang nhanh nhanh cay ba gac hoa VARIATE V003 SC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= NL 126665E-02 633326E-03 CT 1.30356 * RESIDUAL 720666E-01 120111E-01 434519 0.05 0.949 36.18 0.001 * TOTAL (CORRECTED) 11 1.37689 125172 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SL FILE TNKHKIN 2/ 2/** 0:25 PAGE Anh huong cua to hop kinetin va NAA den kha nang nhanh nhanh cay ba gac hoa VARIATE V004 SL LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES 55 F RATIO PROB ER LN ============================================================================= NL 591501E-01 295750E-01 CT 9.11836 * RESIDUAL 593156E-01 988594E-02 3.03945 2.99 0.125 307.45 0.000 * TOTAL (CORRECTED) 11 9.23683 839711 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CCC FILE TNKHKIN 2/ 2/** 0:25 PAGE Anh huong cua to hop kinetin va NAA den kha nang nhanh nhanh cay ba gac hoa VARIATE V005 CCC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB SQUARES SQUARES ER LN ============================================================================= NL 635002E-02 317501E-02 CT 3.77969 * RESIDUAL 211832E-01 353054E-02 1.25990 0.90 0.458 356.86 0.000 * TOTAL (CORRECTED) 11 3.80723 346111 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TNKHKIN 2/ 2/** 0:25 PAGE Anh huong cua to hop kinetin va NAA den kha nang nhanh nhanh cay ba gac hoa MEANS FOR EFFECT NL NL NOS SC SL CCC 7.23250 6.05000 4.09500 7.21750 5.93250 4.04750 7.24250 6.10000 4.04500 SE(N= 4) 0.547976E-01 0.497140E-01 0.297092E-01 5%LSD 6DF 0.189554 0.171969 0.102769 MEANS FOR EFFECT CT CT NOS SC SL 56 CCC 6.80000 5.44333 4.06667 7.05667 4.95667 3.18000 3 7.66667 7.15667 4.72000 7.40000 6.55333 4.28333 SE(N= 3) 0.632748E-01 0.574048E-01 0.343052E-01 5%LSD 6DF 0.218878 0.198572 0.118667 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TNKHKIN 2/ 2/** 0:25 PAGE Anh huong cua to hop kinetin va NAA den kha nang nhanh nhanh cay ba gac hoa F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD (N= SD/MEAN | 12) DEVIATION NO BASED ON BASED ON OBS TOTAL SS RESID SS C OF V |NL % |CT | | | | | | | | | SC 12 7.2308 0.35380 0.10960 1.5 0.9491 0.0006 SL 12 6.0275 0.91636 0.99428E-01 1.6 0.1251 0.0000 CCC 12 4.0625 0.58831 0.59418E-01 1.5 0.4576 0.0000 57