Nghiên cứu quy trình phân lập và nhân sinh khối nấm lim xanh ganoderma lucidum thu thập tại thanh hóa

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TRIỆU THỊ KIM Tên đề tài: NGHIÊN CƢ́U QUY TRÌNH PHÂN LẬP VÀ NHÂN SINH KHỐI NẤM LIM XANH Ganoderma lucidum THU THẬP TẠI THANH HÓA KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo : Chính quy Chuyên ngành : Cơng nghệ sinh học Khoa : CNSH - CNTP Khóa học : 2013 - 2017 Thái Nguyên – năm 2017 ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TRIỆU THỊ KIM Tên đề tài: NGHIÊN CƢ́U QUY TRÌNH PHÂN LẬP VÀ NHÂN SINH KHỐI NẤM LIM XANH Ganoderma lucidum THU THẬP TẠI THANH HÓA KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo : Chính quy Chuyên ngành : Công nghệ sinh học Lớp : K45 – CNSH Khoa : CNSH - CNTP Khóa học : 2013 - 2017 Ngƣời hƣớng dẫn : ThS Nguyễn Thị Tình Ngƣời hƣớng dẫn : ThS Vi Đại Lâm Thái Nguyên – năm 2017 i LỜI CẢM ƠN Sau thời gian thực tập phòng thí nghiệm khoa Cơng nghệ Sinh học Công nghệ Thực Phẩm,Trƣờng Đại học Nông Lâm Thái Nguyên,cùng với cố gắng thân giúp đỡ ngƣời em hoàn thành khóa luận tốt luận tốt nghiệp Trƣớc hết, em xin chân thành cảm ơn sâu sắc tới Th.S Nguyễn Thị Tình, giảng viên Khoa CNSH – CNTP,đã tạo điều kiện tận tình giúp đỡ em hồn thành khóa luận này,ngƣời hƣớng dẫn em cách thao tác thực hành cho em sai lầm giúp em hồn thành tốt khóa luận Em xin chân thành cảm ơn đến thầy cô Khoa CNSH – CNTP, Trƣờng Đại học Nông Lâm Thái Nguyên tận tình bảo,giúp đỡ em trình học tập hồn thành khóa luận Cuối em xin gửi lời cảm ơn đến gia đình, bạn bè, ngƣời bên cạnh động viên giúp đỡ em suốt thời gian thực khóa luận Em xin chân thành cảm ơn! Thái Nguyên, ngày tháng năm 2017 Người thực Triệu Thị Kim ii DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT CD Corn Detrose CDA Corn Detrose Agar PD Potato Detrose PDA Potato Detrose Agar iii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1: Các hóa chất sử dụng nghiên cứu .15 Bảng 2: Nghiên cứu ảnh hƣởng độ pH đến khả phát triển hệ sợi nấm .20 Bảng 3: Nghiên cứu ảnh hƣởng loại đƣờng đến khả phát triển hệ sợi nấm Lim xanh 20 Bảng 4: Nghiên cƣ́u ảnh hƣởng của hàm lƣợng cao nấm men đế n khả phát triể n ̣ sơ ̣i từ nấ m tƣ̀ mô thit.̣ 21 Bảng 5: Nghiên ảnh hƣởng hàm lƣợng Pepton đến khả phát triển hệ sợi nấm từ mô thịt 21 Bảng 6: Nghiên cƣ́u ảnh hƣởng của tố c đô ̣ lắ c đế n khả nhân sinh khối ̣ sơ ̣i nấ m Lim xanh 22 Bảng 1: Đƣờng kính sinh trƣởng hệ sợi nấm Lim xanh môi trƣờng PDA PDA + 10% nƣớc dừa 28 Bảng 2: Đƣờng kính sinh trƣởng hệ sợi nấm Lim xanh điều kiện pH khác 30 Bảng 3: Đƣờng kính sinh trƣởng hệ sợi nấm Lim xanh loại đƣờng khác 32 Bảng 4: Đƣờng kính sinh trƣởng hệ sợi nấm Lim xanh mơi trƣờng có bổ sung cao nấm men với tỷ lệ khác 34 Bảng 5: Đƣờng kính sinh trƣởng hệ sợi nấm Lim xanh mơi trƣờng có bổ sung pepton với tỷ lệ khác 36 Bảng 6: Sinh khối nấm thu đƣợc môi trƣờng khác 39 Bảng 7: Sinh khối nấm thu đƣợc tốc độ lắc khác 40 Bảng 8: Ảnh hƣởng dung môi tới hiệu trích ly polysaccharide nấm Lim xanh 42 Bảng 9: Ảnh hƣởng tỉ lệ nguyên liệu/dung mơi đến hiệu trích ly polysaccharide nấm Lim xanh 43 Bảng 10: Ảnh hƣởng nhiệt độ tới hiệu trích ly polysaccharide nấm Lim xanh 45 iv DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 2.1: Hình thái thể nấm Lim xanh thu nhận từ Thanh Hóa ni trồng trƣờng Đại học Nông Lâm Thái Nguyên Hình 3.1: Quy trình phân lập giống nấm Lim xanh .18 Hình 3.2: Sơ đồ quy trình ni sinh khối hệ sợi nấm Lim xanh .22 Hình 3.3: Sơ đồ quy trình trích ly polysaccharide từ sinh khối nấm Lim xanh 25 Hình 1: Nấm lim xanh phát triển số môi trƣờng bản(sau 13 ngày nuôi cấy) .27 Hình 2: Biểu đồ thể sinh trƣởng hệ sợi nấm Lim xanh môi trƣờng PDA PDA + 10% nƣớc dừa 29 Hình 3: Biểu đồ thể sinh trƣởng hệ sợi nấm Lim xanh điều kiện pH khác 30 Hình 4: Sự sinh trƣởng nấm Lim xanh mơi trƣờng có pH lần lƣợt 4; 6,5; (sau 12 ngày nuôi cấy) .32 Hình 5: Biểu đồ thể sinh trƣởng hệ sợi nấm Lim xanh loại đƣờng khác 33 Hình 6: Sự sinh trƣởng hệ sợi nấm Lim xanh loại đƣờng khác (sau 12 ngày nuôi cấy) 33 Hình 7: Biểu đồ thể sinh trƣởng hệ sợi nấm Lim xanh mơi trƣờng có bổ sung cao nấm men với tỉ lệ khác .34 Hình 8: Nghiên cƣ́u ảnh hƣởng của hàm lƣợng cao nấm men đế n khả phát triể n ̣ sơ ̣i từ nấ m tƣ̀ mô thiṭ (sau ngày nuôi cấy) 35 Hình 9: Biểu đồ thể sinh trƣởng hệ sợi nấm Lim xanh mơi trƣờng có bổ sung Pepton với tỉ lệ khác 36 Hình 10: Nghiên cƣ́u ảnh hƣởng của hàm lƣợng Pepton đế n khả phát triể n ̣ sơ ̣i từ nấ m tƣ̀ mô thiṭ (sau ngày nuôi cấy) 37 Hình 11: Sơ đồ quy trình kiểm tra giống nấm Lim xanh phân lập 37 Hình 12: Hình thái thể nấm Lim xanh đƣợc thu thập từ Thanh Hóa nấm v Lim xanh đƣợc nuôi trồng trƣờng ĐH Nông Lâm Thái Nguyên 38 Hình 13: Biểu đồ thể đƣờng cong sinh trƣởng sinh khối nấm Lim xanh môi trƣờng khác 39 Hình 14: Sự sinh trƣởng sinh khối nấm Lim xanh môi trƣờng khác (sau ngày nuôi cấy) 40 Hình 15: Biểu đồ thể đƣờng cong sinh trƣởng sinh khối nấm Lim xanh tốc độ lắc khác 41 Hình 16: Đồ thị biểu diễn ảnh hƣởng dung môi đến q trình trích ly polysaccharide nấm Lim xanh 42 Hình 17: Đồ thị biểu diễn ảnh hƣởng tỉ lệ ngun liệu/dung mơi đến hiệu trích ly polysaccharide nấm Lim xanh 44 Hình 18: Đồ thị biểu diễn ảnh hƣởng nhiệt độ tới hiệu trích ly polysaccharide nấm Lim xanh 45 Hình 1: Sơ đồ quy trình phân lập giống nấm Lim xanh 47 Hình 2: Sơ đồ quy trình ni cấy sinh khối giống nấm Lim xanh 49 Hình 3: Sơ đồ quy trình trích ly polysaccharide từ sinh khối nấm Lim xanh 50 vi MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN i DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT ii DANH MỤC CÁC BẢNG iii DANH MỤC CÁC HÌNH iv MỤC LỤC vi PHẦN MỞ ĐẦU .1 1.1.Đặt vấn đề .1 1.2 Mục đích nghiên cƣ́u 1.3 Yêu cầ u 1.4 Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài .3 PHẦN TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Nấm Lim xanh 2.1.1 Nguồ n gố c và phân loa ̣i nấm Linh xanh 2.1.2 Đặc điểm thực vật phân bố 2.1.3 Thành phần hoạt chất sinh học nấm Lim xanh 2.1.4 Tác dụng của nấ m Lim xanh 2.2 Giới thiệu polysaccharide 2.3 Tổng quan phân lập 2.4 Nuôi cấy sinh khối nấm Lim xanh môi trƣờng lỏng .9 2.4.1 Nuôi cấy hệ sợi nấm Lim xanh môi trƣờng lỏng .9 2.4.2 Ảnh hƣởng điều kiện nuôi cấy lỏng tới phát triển hệ sợi nấm Lim xanh 11 2.5 Tình hình nghiên cứu nấm Lim xanh nƣớc 12 2.5.1 Tình hình nghiên cứu nấm Lim xanh nƣớc 12 2.5.2 Tình hình nghiên cứu nấm Lim xanh nƣớc 13 Phần ĐỐI TƢỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .15 3.1 Đối tƣợng phạm vi nghiên cứu 15 vii 3.2 Điạ điể m thời gian nghiên cƣ́u 15 3.3 Nội dung nghiên cứu 16 3.4 Phƣơng pháp nghiên cứu 16 3.4.1.Phƣơng pháp nghiên cứu nội dung 1: Nghiên cứu kỹ thuật phân lâ ̣p giố ng nấ m Lim xanh Thanh Hóa ta ̣i trƣờng Đa ̣i ho ̣c Nông Lâm Thái Nguyên 16 3.4.2 Phƣơng pháp nghiên cứu nội dung 2: Nghiên cứu quy trình kỹ thuật nhân sinh khố i sơ ̣i nấ m Lim xanh bằ ng ̣ thố ng nuôi cấ y lỏng 21 3.4.3 Phƣơng pháp nghiên cứu nội dung 3: Nghiên cứu thu tách chiế t polysaccharides dich ̣ huyề n phù tế bào nấ m Lim xanh (thu sinh khối từ bào tử nấm lim xanh môi trƣờng lỏng) 23 3.5 Phƣơng pháp xử lý số liệu 26 PHẦN KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 27 4.1 Nghiên cứu kỹ thuật phân lâ ̣p giố ng nấ m Lim xanh Thanh Hóa ta ̣i trƣờng Đa ̣i học Nông Lâm Thái Nguyên .27 4.1.1 Nghiên cƣ́u ảnh hƣởng của môi trƣờng đế n khả tạo ̣ sơ ̣i nấ m tƣ̀ mô thịt nấm 27 4.1.2 Nghiên cƣ́u ảnh hƣởng của độ pH đế n khả phát triể n ̣ sơ ̣i từ nấ m tƣ̀ mô thit.̣ 30 4.1.3 Nghiên cƣ́u ảnh hƣởng của loại đƣờng đế n khả phát triể n ̣ sơ ̣i từ nấ m tƣ̀ mô thit.̣ 32 4.1.4 Nghiên cƣ́u ảnh hƣởng của hàm lƣợng cao nấm men đế n khả phát triể n ̣ sơ ̣i từ nấ m tƣ̀ mô thit.̣ 34 4.1.5 Nghiên cƣ́u ảnh hƣởng của hàm lƣợng Pepton đế n khả phát triể n ̣ sơ ̣i từ nấ m tƣ̀ mô thit.̣ 35 4.1.6 Kiểm tra giống, chất lƣợng giống nấm Lim xanh phân lập 37 4.2 Nghiên cứu quy trình kỹ thuật nhân sinh khối sợi nấm Lim xanh bằng hệ thống nuôi cấ y lỏng 38 4.2.1 Nghiên cƣ́u ảnh hƣởng của môi trƣờng đế n khả nhân sinh khố i của ̣ sơ ̣i nấ m Lim xanh 38 viii 4.2.2 Nghiên cƣ́u ảnh hƣởng tốc độ lắc đến khả nhân sinh khối hệ sợi nấ m Lim xanh 40 4.3 Nghiên cứu thu tách chiế t polysaccharides dich ̣ huyề n phù tế bào nấ m Lim xanh (thu sinh khối từ bào tử nấm lim xanh môi trƣờng lỏng) 41 4.3.1 Khảo sát dung môi phù hợp 41 4.3.2 Khảo sát tỷ lệ dung môi/nguyên liệu 43 4.3.3 Khảo sát nhiệt độ chiết xuất .44 PHẦN KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 46 5.1 Kết luận .46 5.2 Kiến nghị .51 TÀI LIỆU THAM KHẢO 52 PHỤ LỤC Hình 10: Quả thể nấm Lim xanh đƣợc nuôi trồng ĐH Nông Lâm Thái Nguyên PHỤ LỤC Một số hóa chất sử dụng q trình phân lập ni cấy sinh khối giống nấm Lim xanh PHỤ LỤC Các môi trƣờng sử dụng tiến hành đề tài (quy định lít mơi trƣờng) a Mơi trường PDA Thành phần nguyên liệu: Khoai tây 200g/l Đƣờng glucose 20g/l Agar 17g/l Pepton 4g/l b Môi trường PDA + 10% nước dừa già Thành phần nguyên liệu: Khoai tây 200g/l Đƣờng glucose 20g/l Agar 17g/l Pepton 4g/l Nƣớc dừa già 100ml/l c Môi trường CDA Thành phần nguyên liệu: Ngô non hạt 200g/l Đƣờng 20g/l Agar 17g/l Pepton 4g/l d Môi trường PD Thành phần nguyên liệu: Khoai tây 200g/l Đƣờng glucose 20g/l Pepton 4g/l e Môi trường CD Thành phần nguyên liệu: Ngô non hạt 200g/l Đƣờng glucose 20g/l Pepton 4g/l PHỤ LỤC MỘT SỐ KẾT QUẢ PHÂN TÍCH ANOVA a.Khảo sát dung mơi phù hợp BALANCED ANOVA FOR VARIATE KQ FILE THANHK 13/ 5/17 22:52 :PAGE ksdm VARIATE V003 KQ LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CTHUC$ 1.62107 810533 * RESIDUAL 113355E-02 188925E-03 ****** 0.000 * TOTAL (CORRECTED) 1.62220 202775 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE THANHK 13/ 5/17 22:52 :PAGE ksdm MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ NOS KQ 2.56333 3.45000 3 3.47667 SE(N= 3) 0.793568E-02 5%LSD 6DF 0.274508E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE THANHK 13/ 5/17 22:52 :PAGE ksdm F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE KQ GRAND MEAN STANDARD (N= SD/MEAN | 9) DEVIATION NO BASED ON BASED ON OBS TOTAL SS RESID SS 3.1633 0.45031 C OF V |CTHUC$ % | | | | | | 0.13745E-01 0.4 0.0000 b.Khảo sát nguyên liệu/dung môi :PAGE khao sat nguyen lieu/dung moi VARIATE V003 KQ LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB SQUARES SQUARES ER LN ============================================================================= CT$ 331822 165911 452.48 0.000 * RESIDUAL 220001E-02 366668E-03 * TOTAL (CORRECTED) 334022 417528E-01 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE KIMKIM 23/ 5/17 8:32 :PAGE khao sat nguyen lieu/dung moi MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS KQ 3.33333 3.72667 3 3.75333 SE(N= 3) 0.110554E-01 5%LSD 6DF 0.382425E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE KIMKIM 23/ 5/17 8:32 :PAGE khao sat nguyen lieu/dung moi F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE KQ GRAND MEAN STANDARD (N= SD/MEAN | 9) DEVIATION NO BASED ON BASED ON OBS TOTAL SS RESID SS 3.6044 0.20433 C OF V |CT$ % 0.19149E-01 | | | | | | 0.5 0.0000 c.Khảo sát nhiệt độ chiết xuất BALANCED ANOVA FOR VARIATE KQ FILE KIM 23/ 5/17 8:49 :PAGE khao sat nhiet chiet xuat VARIATE V003 KQ LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB SQUARES SQUARES ER LN ============================================================================= CTHUC$ 256822 128411 398.52 0.000 * RESIDUAL 193333E-02 322222E-03 * TOTAL (CORRECTED) 258755 323444E-01 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE KIM 23/ 5/17 8:49 :PAGE khao sat nhiet chiet xuat MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ NOS KQ 3.40000 3.73667 3 3.77667 SE(N= 3) 0.103638E-01 5%LSD 6DF 0.358499E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE KIM 23/ 5/17 8:49 :PAGE khao sat nhiet chiet xuat F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE KQ GRAND MEAN STANDARD (N= SD/MEAN | 9) DEVIATION NO BASED ON BASED ON OBS TOTAL SS RESID SS 3.6378 0.17985 C OF V |CTHUC$ % 0.17951E-01 | | | | | | 0.5 0.0000 d Ảnh hƣởng môi trƣờng tới sự sinh trƣởng phát triển hệ sợi nấm Lim xanh BALANCED ANOVA FOR VARIATE 3NGAY FILE MTRG1 19/ 6/17 22:49 :PAGE anh huong cua moi truong toi he soi nam lx VARIATE V003 3NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 64.8654 32.4327 ****** 0.000 * RESIDUAL 693191E-02 115532E-02 * TOTAL (CORRECTED) 64.8723 8.10904 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 6NGAY FILE MTRG1 19/ 6/17 22:49 :PAGE anh huong cua moi truong toi he soi nam lx VARIATE V004 6NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 324.249 162.125 ****** 0.000 * RESIDUAL 746737E-02 124456E-02 * TOTAL (CORRECTED) 324.257 40.5321 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 9NGAY FILE MTRG1 19/ 6/17 22:49 :PAGE anh huong cua moi truong toi he soi nam lx VARIATE V005 9NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 651.673 325.836 ****** 0.000 * RESIDUAL 856937E-02 142823E-02 * TOTAL (CORRECTED) 651.681 81.4602 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 12NGAY FILE MTRG1 19/ 6/17 22:49 :PAGE anh huong cua moi truong toi he soi nam lx VARIATE V006 12NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 789.198 394.599 ****** 0.000 * RESIDUAL 482549E-02 804249E-03 * TOTAL (CORRECTED) 789.203 98.6503 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 15NGAY FILE MTRG1 19/ 6/17 22:49 :PAGE anh huong cua moi truong toi he soi nam lx VARIATE V007 15NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 1272.35 636.177 ****** 0.000 * RESIDUAL 141240E-01 235400E-02 * TOTAL (CORRECTED) 1272.37 159.046 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE MTRG1 19/ 6/17 22:49 :PAGE anh huong cua moi truong toi he soi nam lx MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ PDA CDA PDA10%DUA SE(N= 5%LSD NOS 3 3) 6DF CT$ PDA CDA PDA10%DUA 3NGAY 10.2433 5.69333 12.0800 6NGAY 20.8100 9.03667 22.5500 9NGAY 30.3700 14.1733 33.6333 12NGAY 37.5633 19.2433 40.3567 0.196241E-01 0.203680E-01 0.218192E-01 0.163732E-01 0.678830E-01 0.704560E-01 0.754760E-01 0.566377E-01 NOS 3 15NGAY 43.6767 22.5300 50.4467 SE(N= 3) 0.280119E-01 5%LSD 6DF 0.968977E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE MTRG1 19/ 6/17 22:49 :PAGE anh huong cua moi truong toi he soi nam lx F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE 3NGAY 6NGAY 9NGAY 12NGAY 15NGAY GRAND MEAN (N= 9) NO OBS 9.3389 17.466 26.059 32.388 38.884 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 2.8476 0.33990E-01 0.4 0.0000 6.3665 0.35278E-01 0.2 0.0000 9.0255 0.37792E-01 0.1 0.0000 9.9323 0.28359E-01 0.1 0.0000 12.611 0.48518E-01 0.1 0.0000 | | | | e Ảnh hƣởng pH tới sự sinh trƣởng phát triển hệ sợi nấm Lim xanh BALANCED ANOVA FOR VARIATE 3NGAY FILE PH 20/ 6/17 9:11 :PAGE anh huong cua pH toi su sinh truong phat trien he soi nam lx VARIATE V003 3NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 22.0683 11.0341 ****** 0.000 * RESIDUAL 367993E-01 613321E-02 * TOTAL (CORRECTED) 22.1051 2.76314 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 6NGAY FILE PH 20/ 6/17 9:11 :PAGE anh huong cua pH toi su sinh truong phat trien he soi nam lx VARIATE V004 6NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 126.491 63.2454 ****** 0.000 * RESIDUAL 369990E-01 616650E-02 * TOTAL (CORRECTED) 126.528 15.8160 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 9NGAY FILE PH 20/ 6/17 9:11 :PAGE anh huong cua pH toi su sinh truong phat trien he soi nam lx VARIATE V005 9NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 368.094 184.047 ****** 0.000 * RESIDUAL 588766E-01 981276E-02 * TOTAL (CORRECTED) 368.153 46.0191 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 12NGAY FILE PH 20/ 6/17 9:11 :PAGE anh huong cua pH toi su sinh truong phat trien he soi nam lx VARIATE V006 12NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 500.628 250.314 ****** 0.000 * RESIDUAL 274246E-01 457076E-02 * TOTAL (CORRECTED) 500.656 62.5820 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 15NGAY FILE PH 20/ 6/17 9:11 :PAGE anh huong cua pH toi su sinh truong phat trien he soi nam lx VARIATE V007 15NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 815.270 407.635 ****** 0.000 * RESIDUAL 119972E-01 199953E-02 * TOTAL (CORRECTED) 815.282 101.910 - TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE PH 20/ 6/17 9:11 :PAGE anh huong cua pH toi su sinh truong phat trien he soi nam lx MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ 6,5 SE(N= 5%LSD NOS 3 3) 6DF CT$ 6,5 3NGAY 12.26667 10.1233 8.52333 6NGAY 19.2233 17.7133 10.0667 9NGAY 30.8800 28.7267 15.2333 12NGAY 38.4533 35.4167 20.5567 0.452151E-01 0.453376E-01 0.571920E-01 0.390331E-01 0.156406 0.156830 0.197836 0.135022 NOS 3 15NGAY 42.6500 41.1967 23.0773 SE(N= 3) 0.258168E-01 5%LSD 6DF 0.893046E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE PH 20/ 6/17 9:11 :PAGE anh huong cua pH toi su sinh truong phat trien he soi nam lx F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE 3NGAY 6NGAY 9NGAY 12NGAY 15NGAY GRAND MEAN (N= 9) NO OBS 10.061 14.454 22.977 28.462 32.611 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 1.6623 0.78315E-01 0.8 0.0000 3.9769 0.78527E-01 0.5 0.0000 6.7837 0.99059E-01 0.4 0.0000 7.9109 0.67607E-01 0.2 0.0000 10.095 0.44716E-01 0.1 0.0000 | | | | f.Ảnh hƣởng loại đƣờng tới sự sinh trƣởng phát triển hệ sợi nấm Lim xanh BALANCED ANOVA FOR VARIATE 3NGAY FILE DUONG 20/ 6/17 9:53 :PAGE anh huong cua cac loai duong toi su sinh truong phat trien nam lx VARIATE V003 3NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 366155 183078 44.65 0.000 * RESIDUAL 246000E-01 410000E-02 * TOTAL (CORRECTED) 390755 488444E-01 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 6NGAY FILE DUONG 20/ 6/17 9:53 :PAGE anh huong cua cac loai duong toi su sinh truong phat trien nam lx VARIATE V004 6NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 82.9072 41.4536 235.60 0.000 * RESIDUAL 1.05568 175947 - * TOTAL (CORRECTED) 83.9629 10.4954 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 9NGAY FILE DUONG 20/ 6/17 9:53 :PAGE anh huong cua cac loai duong toi su sinh truong phat trien nam lx VARIATE V005 9NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 208.743 104.371 438.06 0.000 * RESIDUAL 1.42955 238259 * TOTAL (CORRECTED) 210.172 26.2715 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 12NGAY FILE DUONG 20/ 6/17 9:53 :PAGE anh huong cua cac loai duong toi su sinh truong phat trien nam lx VARIATE V006 12NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 368.897 184.448 ****** 0.000 * RESIDUAL 395019 658365E-01 * TOTAL (CORRECTED) 369.292 46.1615 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 15NGAY FILE DUONG 20/ 6/17 9:53 :PAGE anh huong cua cac loai duong toi su sinh truong phat trien nam lx VARIATE V007 15NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 886.602 443.301 ****** 0.000 * RESIDUAL 1.18303 197172 * TOTAL (CORRECTED) 887.785 110.973 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE DUONG 20/ 6/17 9:53 :PAGE anh huong cua cac loai duong toi su sinh truong phat trien nam lx MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ Glucose Lactose Saccharose SE(N= 5%LSD NOS 3 3) 6DF CT$ Glucose Lactose Saccharose NOS 3 3NGAY 11.2867 8.1933 10.9333 6NGAY 18.8567 11.5200 16.2400 9NGAY 27.9367 16.3267 24.9200 12NGAY 35.5633 20.2433 30.0967 0.369685E-01 0.242175 0.127880 0.837724 0.281815 0.974843 0.148140 0.512441 15NGAY 47.6300 23.9600 38.7400 SE(N= 3) 0.256367 5%LSD 6DF 0.886813 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE DUONG 20/ 6/17 9:53 :PAGE anh huong cua cac loai duong toi su sinh truong phat trien nam lx F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE 3NGAY 6NGAY 9NGAY 12NGAY 15NGAY GRAND MEAN (N= 9) NO OBS 11.048 15.549 22.814 28.768 36.607 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.22101 0.64031E-01 0.6 0.0004 3.2397 0.41946 0.7 0.0000 5.1256 0.48812 0.1 0.0000 6.7942 0.25659 0.9 0.0000 10.534 0.44404 0.2 0.0000 | | | | g.Ảnh hƣởng hàm lƣợng cao nấm men tới sự sinh trƣởng hệ sợi nấm Lim xanh BALANCED ANOVA FOR VARIATE 3NGAY FILE CNM 20/ 6/17 10:17 :PAGE anh huong cua cao nam men VARIATE V003 3NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 29.6086 14.8043 ****** 0.000 * RESIDUAL 295339E-01 492232E-02 * TOTAL (CORRECTED) 29.6382 3.70477 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 6NGAY FILE CNM 20/ 6/17 10:17 :PAGE anh huong cua cao nam men VARIATE V004 6NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 99.1901 49.5950 ****** 0.000 * RESIDUAL 611351E-01 101892E-01 * TOTAL (CORRECTED) 99.2512 12.4064 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 9NGAY FILE CNM 20/ 6/17 10:17 :PAGE anh huong cua cao nam men VARIATE V005 9NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 364.395 182.197 ****** 0.000 * RESIDUAL 608219E-01 101370E-01 * TOTAL (CORRECTED) 364.455 45.5569 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 12NGAY FILE CNM 20/ 6/17 10:17 :PAGE anh huong cua cao nam men VARIATE V006 12NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 654.605 327.303 ****** 0.000 * RESIDUAL 314062E-01 523437E-02 * TOTAL (CORRECTED) 654.637 81.8296 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 15NGAY FILE CNM 20/ 6/17 10:17 :PAGE anh huong cua cao nam men VARIATE V007 15NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 1283.49 641.747 ****** 0.000 * RESIDUAL 421021E-01 701701E-02 * TOTAL (CORRECTED) 1283.54 160.442 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE CNM 20/ 6/17 10:17 :PAGE anh huong cua cao nam men MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ 2g 4g 6g SE(N= 5%LSD NOS 3 3) 6DF CT$ 2g 4g 6g 3NGAY 6.05667 10.2467 9.35000 6NGAY 7.34667 15.0933 13.2800 9NGAY 8.76667 22.9267 21.6267 12NGAY 10.2567 29.3267 27.1133 0.405065E-01 0.582786E-01 0.581291E-01 0.417707E-01 0.140118 0.201595 0.201078 0.144491 NOS 3 15NGAY 11.9333 38.8300 35.1567 SE(N= 3) 0.483632E-01 5%LSD 6DF 0.167296 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE CNM 20/ 6/17 10:17 :PAGE anh huong cua cao nam men F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE 3NGAY 6NGAY 9NGAY 12NGAY 15NGAY GRAND MEAN (N= 9) NO OBS 8.5378 11.887 17.693 22.252 28.607 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 1.9248 0.70159E-01 0.8 0.0000 3.5223 0.10094 0.8 0.0000 6.7496 0.10068 0.6 0.0000 9.0460 0.72349E-01 0.3 0.0000 12.667 0.83768E-01 0.3 0.0000 | | | | h.Ảnh hƣởng pepton tới sự sinh trƣởng phát triển hệ sợi nấm Lim xanh BALANCED ANOVA FOR VARIATE 3NGAY FILE PEPTON 20/ 6/17 14:26 :PAGE anh huong cua pepton VARIATE V003 3NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF SQUARES MEAN SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT$ 9.97416 4.98708 642.12 0.000 * RESIDUAL 465995E-01 776658E-02 * TOTAL (CORRECTED) 10.0208 1.25259 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 6NGAY FILE PEPTON 20/ 6/17 14:26 :PAGE anh huong cua pepton VARIATE V004 6NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 11.7398 5.86988 25.42 0.002 * RESIDUAL 1.38540 230900 * TOTAL (CORRECTED) 13.1252 1.64064 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 9NGAY FILE PEPTON 20/ 6/17 14:26 :PAGE anh huong cua pepton VARIATE V005 9NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 26.1469 13.0735 38.24 0.001 * RESIDUAL 2.05121 341868 * TOTAL (CORRECTED) 28.1982 3.52477 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 12NGAY FILE PEPTON 20/ 6/17 14:26 :PAGE anh huong cua pepton VARIATE V006 12NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 34.4420 17.2210 29.07 0.001 * RESIDUAL 3.55454 592423 * TOTAL (CORRECTED) 37.9966 4.74957 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 15NGAY FILE PEPTON 20/ 6/17 14:26 :PAGE anh huong cua pepton VARIATE V007 15NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 135.099 67.5493 102.00 0.000 * RESIDUAL 3.97361 662268 * TOTAL (CORRECTED) 139.072 17.3840 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE PEPTON 20/ 6/17 14:26 :PAGE anh huong cua pepton MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ 2g 4g NOS 3 3NGAY 9.27333 11.8567 6NGAY 13.5867 16.2267 9NGAY 20.9233 24.7167 12NGAY 26.8200 31.3367 6g SE(N= 5%LSD 3) 6DF CT$ 2g 4g 6g NOS 3 10.7333 14.8133 21.7633 28.0367 0.508808E-01 0.277429 0.176005 0.959671 0.337574 1.16772 0.444381 1.53718 15NGAY 33.5933 42.0933 36.5533 SE(N= 3) 0.469847 5%LSD 6DF 1.62528 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE PEPTON 20/ 6/17 14:26 :PAGE anh huong cua pepton F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE 3NGAY 6NGAY 9NGAY 12NGAY 15NGAY GRAND MEAN (N= 9) NO OBS 10.598 14.892 22.388 28.788 36.670 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 1.1192 0.88128E-01 0.8 0.0000 1.2809 0.48052 0.2 0.0015 1.8774 0.58469 0.6 0.0006 2.1794 0.76969 0.7 0.0011 4.1694 0.81380 0.2 0.0001 | | | | ... tài: NGHIÊN CƢ́U QUY TRÌNH PHÂN LẬP VÀ NHÂN SINH KHỐI NẤM LIM XANH Ganoderma lucidum THU THẬP TẠI THANH HÓA KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo : Chính quy Chuyên ngành : Công nghệ sinh. .. phân lập nhân sinh khối nấm Lim xanh Ganoderma Lucidum thu thập Thanh Hóa 1.2.2 Mục tiêu cụ thể - Xây dựng đƣơ ̣c quy trình phân lâ ̣p nấ m Lim xanh - Xây dựng đƣợc quy trình nhân sinh khớ i... Nghiên cƣ́u quy trình phân lập nhân sinh khố i nấ m Lim xanh Ganoderma Lucidum thu thập Thanh Hóa” 1.2 Mục tiêu c đề tài 1.2.1 Mục tiêu tổng quát Xây dựng thành công quy trình phân lập nhân