Đề tài “PHÂN lập, TUYỂN CHỌN các CHỦNG VI KHUẨN LACTIC từ bã sắn’’

• Ở Việt Nam hiện nay, việc ứng dụng các chủng vi khuẩn lactic thuần chủng trong các sản phẩm lên men truyền thống ngày càng phổ biến.. • Axit lactic là một trong những sản phẩm lên men

KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP

Đề tài:

“PHÂN LẬP, TUYỂN CHỌN CÁC CHỦNG VI KHUẨN

LACTIC TỪ BÃ SẮN’’

Tr ng i H c Nông Lâm Khoa C Khí – Công Ngh

NỘI DUNG NGHIÊN CỨU

TỔNG QUAN TÀI LIỆU

KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN

PHẦN 1 ĐẶT VẤN ĐỀ

• Công nghệ lên men đã có từ lâu đời, đặc biệt là công

nghệ lên men lactic Quy trình này có từ khi loài

người chưa nắm rõ bản chất của nó nhưng đã được

sử dụng sớm nhất trong bảo quản và chế biến thực phẩm.

• Ở Việt Nam hiện nay, việc ứng dụng các chủng vi

khuẩn lactic thuần chủng trong các sản phẩm lên men truyền thống ngày càng phổ biến.

• Axit lactic là một trong những sản phẩm lên men

quan trọng của vi khuẩn lactic Xu hướng thế giới hiện nay là sử dụng axit lactic để tổng hợp chất dẻo phân huỷ sinh học.

• Sắn là một trong những cây công nghiệp quan trọng, gần

đây đã mang lại một nguồn thu nhập cho một số lượng lớn nông dân ở Việt Nam, đặc biệt là người nghèo nông thôn, nơi có điều kiện không thuận lợi cho canh tác cây trồng

khác Một số nghiên cứu gần đây người ta tìm thấy vi sinh vật điển hình của tinh bột sắn lên men là các vi khuẩn lactic

với ưu thế của chi Lactobacillus, tiếp theo Streptococcus,

Enterococcus, Leuconostoc, Pediococcus và Lactococcus.

• Xuất phát từ những vấn đề thực tế nêu trên, chúng tôi tiến

hành đề tài: “Phân lập, tuyển chọn các chủng vi khuẩn lactic

từ bã sắn’’

PHẦN 2 ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ

PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

2.1 Đối tượng nghiên cứu

• Vi khuẩn lactic được phân lập từ bã sắn của

nhà máy tinh bột sắn Thừa Thiên Huế.

2.2 Nội dung nghiên cứu

• Phân lập các chủng vi khuẩn lactic thuần chủng

từ bã sắn.

• Xác định được một số đặc điểm sinh học của

các chủng vi khuẩn lactic phân lập được.

Phương pháp vi sinh

• Phân lập vi sinh vật bằng phương pháp đổ đĩa

• Phương pháp nuôi cấy tăng sinh, cấy chuyền,

nhân giống

• Phương pháp nhuộm Gram

• Phương pháp xác định hoạt tính catalase

• Phương pháp định tính axit lactic trên môi

trường MRS có bổ sung CaCO3 0.5%

Phương pháp vật lý

• Đo OD

• Đo pH

Phương pháp hoá sinh

• Sử dụng dung dịch NaOH 0.1N với chỉ thị

phenolphtalein để chuẩn độ hàm lượng

axit lactic tạo thành.

A = (V – Vo) × 0.9 (g/l)

Phương pháp xử lí số liệu

• Sử dụng phương pháp phân tích phương

sai (Anova) để xác định sự sai khác giữa các trung bình và xử lý Duncan thể hiện

sự sai khác có ý nghĩa với p< 0,05.

PHẦN 3 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN

bóng, mép trơn, khá bằng phẳng, kích thước lớn.

mép trơn, kích thước nhỏ.

-Ghi chú: (+): có hoạt tính catalase, gram dương

(-): không có hoạt tính catalase, gram âm

Chủng L1

Chủng L2

Hình 3.1 Hình thái khuẩn lạc và hình dạng tế bào của các

chủng vi khuẩn phân lập được

2 Khả năng lên men các nguồn đường

Bảng 3.2 Khả năng lên men các nguồn đường

Đặc điểm Chủng L1 Chủng L2 Chủng L4 Chủng L5 Lên men đường:

++++

++++

++++

Sinh khí khi lên

-Ghi chú (-) : không có khả năng lên men, không sinh khí khi lên men glucose

Hình 3.2 Khả năng lên men glucose

3 Ảnh hưởng của nhiệt độ đến khả năng sinh trưởng của các chủng vi khuẩn lactic

Hình 3.3 Đồ thị biểu diễn sự sinh trưởng của chủng L1 ở các nhiệt độ

2.024 a

Hình 3.4 Đồ thị biểu diễn sự sinh trưởng của chủng L2 ở các nhiệt độ

Hình 3.5 Đồ thị biểu diễn sự sinh trưởng của chủng L4 ở các nhiệt độ

Hình 3.6 Đồ thị biểu diễn sự sinh trưởng của chủng L5 ở các nhiệt độ

5 Định tính và định lượng axit lactic

5.1 Định tính axit lactic

Hình 3.8 Khuẩn lạc phân giải CaCO3 bổ sung trong

môi trường MRS

3 Đối với vi khuẩn lactic khoảng thời gian sinh trưởng

nhanh nhất là khoảng 24 – 48h trong đó chủng L1 có giá trị OD cao nhất là 2.024 ở 400C ở thời điểm 24h.

4.1 Kết luận

4 Khoảng pH thích hợp cho vi khuẩn lactic sinh

trưởng nhanh nhất là khoảng 6.0 – 7.0

5 Khảo sát hàm lượng axit lactic của 4 chủng sinh

ra ở 3 thời điểm 24h, 48h, 72h nhận thấy chủng L4

có hàm lượng axit lactic sinh ra cao nhất là 15.66

1 Thử nghiệm nhân giống và làm các chế phẩm của

vi khuẩn lactic trên môi trường cải biến để thay

thế môi trường MRS đắt tiền.

2 Tiếp tục nghiên cứu một số đặc điểm sinh lí, sinh

hóa khác như: khả năng kháng khuẩn, khả năng sinh probiotic, khả năng chịu muối

3 Tiếp tục nghiên cứu khả năng sinh axit lactic từ

các chủng vi khuẩn lactic phân lập được để từ đó trên nguồn cơ chất là tinh bột sắn để sử dụng làm nguồn nguyên liệu sản xuất màng bao phân huỷ

sinh học.

4 Tiếp tục nghiên cứu để định danh chính xác chủng

vi khuẩn lactic đã được phân lập.

4.2 Kiến nghị

Xin chân thành cảm ơn quý thầy

cô giáo và các bạn đã chú ý

lắng nghe !