khảo sát tình trạng nhiễm các loại vi sinh staphylococcus spp, pseudomonas spp, corynebacterium spp và nấm men malassezia trên chó bị bệnh viêm tai ngoài

iii TÓM TẮT Khảo sát được tiến hành tại phòng vi sinh Bệnh viện Thú Y Đại học Nông Lâm TP.HCM trong thời gian từ tháng 2/2008 đến 6/2008 để khảo sát tình trạng nhiễm các loài vi sinh vật Staphylococcus spp, Pseudomonas spp, Corynebacterium spp và nấm men Malassezia trên chó bị bệnh viêm tai ngoài. Khảo sát được tiến hành trên 30 mẫu dịch tai viêm. Các mẫu bệnh phẩm được nhuộm đơn, xem tươi, đếm vi sinh vật (cho điểm 1+, 2+, 3+, 4+), được nuôi cấy, thử sinh hoá để phân lập vi khuẩn, nấm. Thử kháng sinh đồ các vi khuẩn phân lập được. Qua quá trình khảo sát chúng tôi thu được những kết quả sau: Tỉ lệ các mức độ bệnh trên các ca bệnh khảo sát nhẹ, trung bình, nặng, rất nặng lần lượt là 16,7%, 23,3%, 36,7%, 23,3%. Chó bị viêm tai ở mức độ nhẹ là thấp nhất chiếm 16,7%.Tỉ lệ bệnh trên các giống nội, ngoại lần lượt là 6,7% và 93,3%.Tỉ lệ đực cái nhiễm bệnh là 1:1. Chó mắc bệnh ở độ tuổi <6 tháng chiếm 13,3%; từ 6 tháng đến 24 tháng chiếm 36,7% và cao nhất ở độ tuổi >24 tháng chiếm 50%.Tỉ lệ bệnh trên những chó có tai cụp và đứng lần lượt là 56,7% và 43,3%. Điểm vi sinh 1+, 2+, 3+, 4+ tương ứng với các mức độ bệnh nhẹ, trung bình, nặng, rất nặng. Nhiễm đồng thời cầu khuẩn và trực khuẩn là nhiều nhất chiếm tỉ lệ 63,33%. Tỉ lệ nhiễm đồng thời cả cầu khuẩn, trực khuẩn, nấm men là 33,33%. Qua phân lập, thử kháng sinh đồ chúng tôi thu được các kết quả sau: Tỉ lệ nhiễm Staphylococcus spp là cao nhất 65,71% rồi đến Pseudomonas spp 28,57% và Corynebacterium spp là 14,28%. 3 loại kháng sinh mà Staphylococcus spp nhạy cảm nhất là amoxicillin-clavulanic acid, gentamicin, norfloxacin. 2 loại thuốc kháng sinh mà Pseudomonas spp nhạy cảm nhất là norfloxacin, tobramycin. 3 loại kháng sinh mà Corynebacterium spp nhạy cảm nhất là cephalexin, gentamicin và vancomycin. Tỉ lệ nhiễm nấm men là 53,33%. Từ khóa: viêm tai ngoài, chó, vi sinh vật. iv MỤC LỤC Trang Trang tựa i Lời cảm ơn ii Tóm tắt iii Mục lục iv Danh sách các chữ viết tắt vii Danh sách các bảng viii Danh sách các hình ix Danh sách các biểu đồ x Chương 1. MỞ ĐẦU 1 1.1. ĐẶT VẤN ĐỀ 1 1.2. MỤC ĐÍCH VÀ YÊU CẦU 1 1.2.1. Mục đích 1 1.2.2. Yêu cầu 1 Chương 2. TỔNG QUAN 3 2.1. SƠ LƯỢC VỀ CƠ THỂ VÀ SINH LÝ HỌC CỦA TAI CHÓ 3 2.1.1. Tai ngoài 3 2.1.2. Tai giữa 4 2.1.3. Tai trong 4 2.2. VIÊM TAI NGOÀI TRÊN CHÓ 5 2.2.1. Căn bệnh học 5 2.2.1.1. Nguyên nhân mở đường 5 2.2.1.2. Nguyên nhân khởi phát 7 2.2.1.3. Những nguyên nhân duy trì 9 2.2.2. Chẩn đoán 11 2.2.2.1. Dấu hiệu lâm sàng 11 2.2.2.2. Kiểm tra tế bào học 11 2.3. GIỚI THIỆU VỀ CÁC VI KHUẨN THƯỜNG CÓ MẶT TRONG TAI VIÊM 12 2.3.1. Staphylococcus spp 12 2.3.2. Corynebacterium spp 13 v 2.3.3. Pseudomonas spp 14 2.3.4. Malassezia 15 Chương 3. NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP KHẢO SÁT 16 3.1. THỜI GIAN VÀ ĐỊA ĐIỂM THỰC HIỆN 16 3.2. CÁC CHỈ TIÊU KHẢO SÁT 16 3.2.1. Đặc điểm của chó viêm tai ngoài 16 3.2.2. Sự hiện diện của vi khuẩn và nấm trong dịch tiết của tai viêm. 16 3.3. PHƯƠNG PHÁP LẤY MẪU 16 3.3.1. Dụng cụ 16 3.3.2. Đối tượng 17 3.3.3. Phương pháp 17 3.4.GHI CHÉP ĐÁNH GIÁ LÂM SÀNG 17 3.5. XÉT NGHIỆM 17 3.5.1. Nhuộm xem tươi 17 3.5.2. Nuôi cấy vi khuẩn và thử kháng sinh đồ 19 3.5.2.1. Phương pháp cấy 19 3.5.2.2. Đọc kết quả, thử sinh hóa 21 3.5.2.3. Định nhóm vi khuẩn 23 3.5.2.4. Thử kháng sinh đồ 24 3.5.3. Phân lập nấm men 25 Chương 4. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 26 4.1. LÂM SÀNG 26 4.1.1. Nhiễm chung 26 4.1.2. Các yếu tố ảnh hưởng 27 4.1.2.1. Giống 27 4.1.2.2. Giới tính 28 4.1.2.3. Tuổi 28 4.1.2.4. Hình dạng loa tai 29 4.2. XÉT NGHIỆM 30 4.2.1. Điểm vi sinh, điểm lâm sàng 30 4.2.2. Nuôi cấy và phân lập vi sinh vật 32 vi Chương 5. KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 41 5.1. KẾT LUẬN 41 5.2. ĐỀ NGHỊ 41 TÀI LIỆU THAM KHẢO 43 PHỤ LỤC 45 vii DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT Viết tắt Nguyên chữ nước ngoài BA :Blood Agar MC :Mac Conkey PDA :Potato Destrose Agar BHI :Brain Heart Infusion EMB :Eosin Methylene Blue SS agar :Salmonella, Shigella agar CV :Crystal violet NA :Nutrient Agar Ac :Amoxicillin-clavulanic acid Bt :Trimethoprim / Sulfamethoxazole (Bactrim) Kn :Kanamycin Er :Erythromycin Ge :Gentamicin Te :Tetracyclin Va :Vancomycin Nr :Norfloxacin Sm :Streptomycin Cp :Cephalexin Ne :Neomycin Dx :Doxycyclin Am :Ampicilline Co :Colistin Tb :Tobramycin viii DANH SÁCH CÁC BẢNG Trang Bảng 2.1. Căn bệnh học của viêm tai ngoài trên chó 6 Bảng 2.2. Đặc tính phân biệt giữa loài Staphylococcus với Micrococcus 12 Bảng 3.1. Bảng đếm tươi vi sinh vật 18 Bảng 3.2. Đánh giá điểm vi sinh 19 Bảng 4.1. Tỉ lệ các mức độ bệnh trên các ca bệnh 26 Bảng 4.2. Tỉ lệ chó bị mắc bệnh viêm tai ngoài theo nhóm giống 27 Bảng 4.3. Tỉ lệ chó mắc viêm tai theo giới tính 28 Bảng 4.4. Tỉ lệ bệnh viêm tai theo nhóm tuổi 28 Bảng 4.5. Tỉ lệ bệnh viêm tai ngoài theo dạng loa tai 30 Bảng 4.6. Bảng điểm vi sinh và điểm lâm sàng của các ca viêm tai 31 Bảng 4.8. Số lượng từng loại vi khuẩn phân lập được 34 Bảng 4.9. Nhạy cảm kháng sinh của Staphylococcus spp phân lập từ tai viêm 35 Bảng 4.10. Nhạy cảm kháng sinh của Pseudomonas spp phân lập từ tai viêm 37 Bảng 4.11. Nhạy cảm kháng sinh của Corynebacterium spp phân lập từ tai viêm 39 Bảng 4.12. Số lượng nhiễm Malassezia trên tổng số mẫu phân tích 40 ix DANH SÁCH CÁC HÌNH Trang Hình 2.1. Cấu tạo cơ thể học của tai chó 3 Hình 2.2. Chó Boxer một năm tuổi bị viêm da dị ứng 8 Hình 2.3. Viêm tai mủ trên một chó Shelter do nhiễm nấm da, mò Demodex và vi khuẩn 10 Hình 2.4. Quan sát bên ngoài tai chó bình thường và tai chó viêm. 11 Hình 2.5. Malassezia 15 Hình 3.1. Các đường cấy phân lập vi khuẩn và nấm 20 Hình 3.2. Staphylococcus 23 Hình 3.3. Nấm men Malassezia pachydermatis 25 x DANH SÁCH CÁC BIỂU ĐỒ Trang Biểu đồ 4.1. Tỉ lệ mức độ bệnh trên các ca bệnh 26 Biểu đồ 4.2. Tỉ lệ chó mắc viêm tai theo giống 27 Biểu đồ 4.3. Tỉ lệ bệnh viêm tai theo giới tính 28 Biểu đồ 4.4. Tỉ lệ bệnh viêm tai ngoài theo nhóm tuổi 29 Biểu đồ 4.5. Tỉ lệ bệnh viêm tai theo dạng loa tai 30 Biểu đồ 4.6.1. Biểu đồ các mức độ bệnh khảo sát 31 Biểu đồ 4.6.2. Đường biểu diễn các mức độ bệnh 31 Biểu đồ 4.7. Tỉ lệ nhiễm các loại vi sinh vật trong tai viêm 33 Biểu đồ 4.8. Phân lập vi khuẩn 35 Biểu đồ 4.9. Nhạy cảm kháng sinh của Staphylococcus spp phân lập từ tai viêm…. 36 Biểu đồ 4.10. Nhạy cảm kháng sinh của Pseudomonas spp phân lập từ tai viêm… 38 Biểu đồ 4.11. Nhạy cảm kháng sinh của Corynebacterium spp phân lập từ tai viêm .40 1 Chương 1 MỞ ĐẦU 1.1. ĐẶT VẤN ĐỀ Ngày nay, bệnh viêm tai ngoài là một trong những bệnh hay gặp trên chó. Tuy không gây nguy hiểm cho tính mạng nhưng bệnh viêm tai ngoài gây cho chó sự khó chịu với các cảm giác ngứa và đau. Viêm tai ngoài trên chó là một bệnh đa nguyên nhân bao gồm các nguyên nhân về dinh dưỡng, vệ sinh, …trong đó nhiễm vi sinh vật là yếu tố duy trì quá trình viêm, kéo dài và làm trầm trọng tình trạng bệnh (August, 1986). Việc điều trị viêm tai thường rất khó khăn, chó dễ bị tái đi tái lại nhiều lần và hay dẫn tới tình trạng viêm mãn tính. Theo nhiều nghiên cứu trước đây, các vi sinh vật tồn tại nhiều nhất ở trong các vết thương hay các ổ viêm, ổ mủ đó là Staphylococcus spp đại diện cho nhóm cầu khuẩn Gram dương, Corynebacterium spp đại diện cho nhóm trực khuẩn Gram dương, Pseudomonas spp đại diện cho nhóm cầu trực Gram âm và Malassezia đại diện cho nhóm vi nấm (Cole và ctv, 1998). Vì thế, việc khảo sát tình trạng nhiễm của các loại vi sinh vật kể trên trên các chó bị bệnh viêm tai là điều cần thiết. Được sự đồng ý của Khoa CNTY, Bệnh viện thú y trường đại học Nông Lâm Thành Phố Hồ Chí Minh cùng với sự hướng dẫn của ThS. Nguyễn Văn Phát, BSTY Phạm Ngọc Bích chúng tôi tiến hành đề tài “Khảo sát tình trạng nhiễm các loài vi sinh vật Staphylococcus spp, Pseudomonas spp, Corynebacterium spp và nấm men Malassezia trên chó bị bệnh viêm tai ngoài”. 1.2. MỤC ĐÍCH VÀ YÊU CẦU 1.2.1. Mục đích Tìm ra mối liên quan giữa các loại vi sinh vật kể trên với mức độ bệnh viêm tai ngoài trên chó và thông qua đó xác định loại thuốc điều trị cho phù hợp. 1.2.2. Yêu cầu - Ghi nhận triệu chứng và mức độ lâm sàng của từng ca bệnh. - Nhuộm xem tươi để xác định mức độ nhiễm vi trùng và nấm. 2 - Phân lập tìm Staphylococcus spp, Pseudomonas spp, Corynebacterium spp và nấm men Malassezia. - Thử kháng sinh đồ đối với các vi khuẩn phân lập được. [...]... trong kênh tai bình thư ng, nhưng chúng tăng sinh áp ng v i nh ng s n ph m vi m và kéo dài mãi tình tr ng vi m tai Khi b nhi m Staphylococcus spp, Streptococcus spp, và Proteus spp, tai chó thư ng ch y m màu s m Pseudomonas spp thư ng th y khi phân l p Nó làm chó au 9 n, b vi m, loét, ung nh t có d ch màu vàng sáng n xanh, d ch hôi tai Vi khu n này thư ng th y trong các trư ng h p vi m tai ngoài mãn... hóa m , và các b nh ngo i ký sinh khác Các gi ng chó như Cocker Spaniel và Irish Setter d b tăng ti t bã nh n t phát hơn các gi ng chó khác • Vi m da m trên chó nh Vi m da m thư ng x y trên chó con kho ng 8 – 12 tu n tu i B nh gây vi m chung quanh m t, mi ng và tai Chó con thư ng b s t và b vi m tai ngoài B nh t kh i trong vòng 3 – 4 tu n nhưng l i s o B nh này r t hi m g p trên chó l n • Vi sinh v... Gia Vinh (Lê 3.1.2.2 c Th , Gò V p, TPHCM) a i m phân tích m u: Phòng vi sinh, B nh vi n Thú y Trư ng i h c Nông Lâm 3.2 CÁC CH TIÊU KH O SÁT 3.2.1 c i m c a chó vi m tai ngoài Ghi nh n t l chó m c b nh vi m tai theo: - Gi ng - Tu i - Gi i tính - D ng loa tai 3.2.2 S hi n di n c a vi khu n và n m trong d ch ti t c a tai vi m - S lư ng vi sinh v t bao g m c u khu n, tr c khu n và n m men có trong tai vi m... loa tai và kênh tai ngang Ch t d ch tai, có th t d ch nh n n m , có màu hơi vàng n en (Carlotti, 2002) Hình 2.4 Quan sát bên ngoài tai chó bình thư ng (trái) và tai chó vi m (ph i) (Ngu n: Virbac) Theo Cole (2003), các d u hi u lâm sàng có th quan sát ư c c a b nh vi m tai ngoài trên chó bao g m: - Ng a tai - L c - u loa tai au tai Ch y d ch m Ngoài ra, qua soi tai b ng d ng c soi tai thú y (otoscope),... LƯ C V CƠ TH VÀ SINH LÝ H C C A TAI CHÓ Tai có hai ch c năng chính là nghe và gi thăng b ng Tai g m 3 ph n là tai ngoài, tai gi a và tai trong Tai trong là cơ quan dùng nghe và gi thăng b ng, trong khi ó tai ngoài, tai gi a l i có nhi m v thu th p âm thanh và truy n âm thanh n não Loa tai S n tai Kênh tai d c Cơ thái dương Các xương tai Kênh tai ngang c tai ng thính gíac Màng nhĩ Xoang tai gi a Bóng... sát - T l nhi m c a t ng lo i vi sinh v t trong tai vi m - Th kháng sinh các vi khu n phân l p ư c 3.3 PHƯƠNG PHÁP L Y M U 3.3.1 D ng c - Tăm bông vô trùng, nư c mu i sinh lý vô trùng, ng nghi m s ch vô trùng, môi trư ng chuyên ch Carry Blair 16 3.3.2 i tư ng T t c các chó ư c mang t i khám t i các phòng khám k trên có các bi u hi n c a b nh vi m tai ngoài 3.3.3 Phương pháp L y m u trên tai chó b vi m,... c tìm th y trên tai b vi m Hình 2.3 Vi m tai m trên m t chó Shelter do nhi m n m da, mò Demodex và vi khu n (Ngu n: Virbac) • Nh ng thay i trong quá trình vi m Quá trình vi m tai tr i qua m t s giai o n c n tr s lưu thông khí và tăng u tiên, kênh tai thu h p d n làm m t i ch K ti p, các tuy n bã nh n ban u tri n dư ng và trong trư ng h p mãn tính tr nên b t dư ng Tuy n ráy tai l n lên và ho t ng m... d ng ngoài c a tai, thói c i m v gi ng còn có liên quan v da và tình tr ng d ng Các y u t trên kh i phát ho c là i u ki n m n s nh y c m c a các b nh u có th là m t trong nh ng nguyên nhân ư ng c a b nh vi m tai ngoài (Calotti, 2002) Chúng tôi chia gi ng chó thành 2 nhóm gi ng n i và ngo i B ng 4.2 trình bày t l chó m c b nh vi m tai ngoài theo nhóm gi ng B ng 4.2 T l chó b m c b nh vi m tai ngoài. .. h c c a tai chó (Ngu n: Virbac) 2.1.1 Tai ngoài Tai ngoài là m t ng ư c c u t o b ng s n Nhi m v là truy n rung âm thanh xu ng kênh tai ng c a n màng nhĩ Tai ngoài g m loa tai, kênh tai d c và kênh 3 tai ngang Loa tai ư c nâng b i s n nhĩ v i nhi u hình d ng và c ng khác nhau tùy theo gi ng, t o nên hình dáng cho tai Tai có th to và rũ như chó Săn, th ng và di ng như Border Collie, ho c nh và c p d... kênh tai Khi b n ng, vi m gây hóa vôi c a kênh tai là tình tr ng không th thay trong quá trình vi m i ư c Vì th , nh ng thay tai làm b nh tr nên x u hơn và kéo dài mãi 10 i 2.2.2 Ch n oán 2.2.2.1 D u hi u lâm sàng D u hi u c a vi m tai ngoài là d a trên s “b t an” c a chó Thú b nh thư ng có bi u hi n l c u và cào gãi bên ngoài cũng như bên trong g c tai Quan sát tai s th y nh ng v t ph n dư i loa tai và . đề tài Khảo sát tình trạng nhiễm các loài vi sinh vật Staphylococcus spp, Pseudomonas spp, Corynebacterium spp và nấm men Malassezia trên chó bị bệnh vi m tai ngoài . 1.2. MỤC ĐÍCH VÀ YÊU. vật Staphylococcus spp, Pseudomonas spp, Corynebacterium spp và nấm men Malassezia trên chó bị bệnh vi m tai ngoài. Khảo sát được tiến hành trên 30 mẫu dịch tai vi m. Các mẫu bệnh phẩm được nhuộm. nhóm vi nấm (Cole và ctv, 1998). Vì thế, vi c khảo sát tình trạng nhiễm của các loại vi sinh vật kể trên trên các chó bị bệnh vi m tai là điều cần thiết. Được sự đồng ý của Khoa CNTY, Bệnh vi n