Nghiên cứu bào chế hệ phân tán nano cao ớt chứa capsaicin

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH VÕ MỘNG THẮM NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ HỆ PHÂN TÁN NANO CAO ỚT CHỨA CAPSAICIN LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH NĂM 2021 BỘ Y BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH VÕ MỘNG THẮM NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ HỆ PHÂN TÁN NANO CAO ỚT CHỨA CAPSAICIN NGÀNH: C NG NGHỆ DƯỢC PH M VÀ ÀO CHẾ THUỐC M SỐ: 8720202 LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC NGƯỜI HƯỚNG D N HO HỌC: TS TRƯ NG C NG TR TS VÕ ĐỖ MINH HOÀNG THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH NĂM 2021 i LỜI C M ĐO N T C ế T V Mộ T ắ i MỤC LỤC LỜI C M ĐO N .i MỤC LỤC ii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT iii DANH MỤC CÁC BẢNG .iv DANH MỤC CÁC HÌNH ĐỒ TH vi MỞ Đ U C ươ TỔNG QUAN 1.1 Cao ớt 1.2 Tiểu phân nano .7 C ươ ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯ NG PHÁP NGHIÊN CỨU .15 21 Đ ng nghiên c u .15 22 P C ươ pháp nghiên c u 17 3 Xử ý ẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ BÀN LUẬN 29 ồ ầ 32 N ề 33 Đ 29 ế 29 â d ng tiêu chuẩ cho cao ớt 35 ều chế h phân tán nano cao ớt ch a capsaicin 3.4 Nghiên c u thiết l p công th t i thiểu 0,1% 41 ều chế h phân tán nano cao ớt ch a 0,15% capsaicin 47 3.5 Nghiên c Xâ d 3.7 Đ ẩ ộổ ờ ịnh p â p â ớ 15% 15% p 50 p 57 ẾT LUẬN VÀ IẾN NGH 60 D NH MỤC CÁC C NG TRÌNH Đ C NG Ố C LIÊN QU N 62 TÀI LIỆU THAM KHẢO 63 PHỤ LỤC 71 ii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Tiếng Anh AFM Atomic Force Microscopy BP British Pharmacopoeia ể D ử ển Anh B BVTV CAP Tiếng Việt Capsaicin Capsaicin D DĐVN ển Vi t Nam DSC Differential Scanning Calorimetry Q p â HPH High Pressure Homogenizer Đờng nh t hóa áp su t cao HPLC High performance liquid chromatography S ý KTTP ũ ể p â NE Nanoemulsions N NLC Nanostructured lipid carriers H mang lipid c u trúc nano SEM Scanning Electron Microscopy SLN Solid lipid nanoparticle ể ử Tiểu phân nano lipid r n T TCCS ẩ ể ử TEM Transmission Electron Microscopy USP The United States Pharmacopeia D ển Mỹ XDR X – Ray Diffraction N X qua ề v DANH MỤC CÁC BẢNG ớt theo s d B ng 1.1 Tiêu chuẩ B 12 T ý p ếp ẩ B ng 1.3 Một s B ng 2.1 T d ển a capsaicin cao ớt thị d ờng ế .15 B ng 2.2 Dung mơi hóa ch t dùng phân tích .15 B ng 2.3 Trang thiết bị sử dụng nghiên c u 16 B ng 3.1 Kết qu kh o sát dung môi .29 B ng 3.2 ế ộ 30 o sát nhi B ng 3.3 Kết qu kh o sát thời gian chiết .31 B ng 3.4 Kết qu kh o sát tỷ l d c li u:dung môi s lần chiết .32 B ng 3.5 ế d ị B ng 3.6 Kết qu a mẫu cao ớt .35 ng mẫu cao 36 B ng 3.7 Kết qu ng nonivamide 37 B ng 3.8 Kết qu i nặng 37 B ng 3.9 Tiêu chuẩ c a cao ớt .38 B ng 3.10 ế ến tính .40 B ng 3.11 Kết qu B 12 ế p â B ng 3.13 Kết qu B 14 ế B 15 ế ộổ B ng 18 T ỷ T 80 â 44 45 TTP p â ế p â B ng 3.19 Kết qu kh o sát t ế .46 ớc tiểu phân, p â zeta 47 ộ bền nhi t – ộng học 49 .45 ộ thời gian khu y 47 B ng 3.20 Kết qu p â B ng 3.21 Kết qu kh p d 41 â dầ 43 p â B ng 3.17 Kết qu p â 22 ịnh c a capsaicin dầu th c v t 42 p B ng 3.16 Kết qu B th ng 38 .50 v B ng 3.23 S ữa nồ B 24 Đ ộ lặp l i c B 25 Đ ộ ú B 28 T B 29 ẩ ng capsaicin HPLC .53 in vitro 56 a h phân tán nano cao ớt .57 ộổ ng capsaicin HPLC .52 t hóa lý h phân tán nano cao ớt 54 p ế nh c a capsaicin 51 ị ị B ng 3.26 Kết qu B ng 3.27 ế ộ di ị .58 i DANH MỤC CÁC HÌNH, ĐỒ TH H 11 C ộ p d .3 Hình 1.2 Cơng th c c u t o c a capsaicin Hình 2.1 Quy trình xử lí mẫu ớt .17 Hình 2.2 Quy trình chiết cao ớt 18 Hình 2.3 Qu ề ế H 31 Q ề ế H 32 C Hình 3.3 S ý ờ ẫ ẩ ữa nồ 35 ề p p 35 .36 ộ capsaicin di p â Hình 3.6 Q .21 34 ể 10% Hình 3.4 T H nh p â nh c a capsaicin .40 ộ d 42 ế h phân tán nano cao ớt 49 ặc hi u c Hình 3.7 Kết qu kh p p p ị ng capsaicin nano cao ớt HPLC 51 Hình 3.8 T ữa nồ H 39 H p â H 10 H p â H 11 Sơ ồ p ộ capsaicin di nh c a capsaicin .52 55 TE .55 in vitro .56 MỞ Đ U Trong y học cổ truyền Vi t Nam, ớt vị thu c quý p ầ p giúp gi ớp, b nh viêm dây thầ p dụ p ề d ầ p ụ ế 2014 R ằ d ổ ế ờ C d ằ p â p â d [43] N 2017 W p â 15% ờ ồ ếp capsaicin [51] T ế d [53] Do ú p ụ ử dụ ờ ử dụ p â p p ế p ế ế ếp ộ úp ẩ p â d p ớc, té ngã [38] N ị ị ề ộ nh về [18], [34], [49], [52] Tuy nhiên, ử dụ dụ 0,025% capsaicin d , kh ờ N ặc bi i chỗ v y, vi c nghiên c u phát triển d ng bào chế da, ồ ộng t ngo i vi tới Capsaicin làm gi m dẫn truyề h th ng thầ ể â sử dụng rộng rãi p p d ử dụ ề d ữ â p p Chính thế, p [50] o v da tránh kích ng, nâng cao hi u qu phân tán nano cao ớt ch cao ớt phát triển h phân tán nano Với nhữ ý d p c th c hi n ” ều trị, ề tài “N nhằm mục dụ ồ u bào chế h MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU Mục tiêu tổng quát Thiết l p công th c quy trình bào chế h phân tán nano cao ớt ch a t i thiểu 0,1% capsaicin, ổ ịnh nh t tháng ều ki n 30  °C, 75  5% RH Mục tiêu cụ thể Xâ d ế â tiêu chuẩn hóa cao ớt Xâ d cơng th c quy trình ều chế h phân tán nano cao ớt ch a capsaicin t i thiểu 0,1% Xâ d ẩ capsaicin t i thiểu 0,1% tháng ều ki n nhi ộổ ịnh cho h phân tán nano cao ớt ch a ộ 30  °C, 75  5% RH thời gian Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh 73 PHỤ LỤC T D Đ i họ Y D ẩ ệ â TIÊU CHU N HỆ PHÂN TÁN NANO CAO ỚT c c TPHCM S TC: Có hi u l c t : / ịnh ban hành s : , ngày tháng Quyế / 2020 I TIÊU CHU N KỸ THUẬT 1.1 CÔNG THỨC BÀO CHẾ CHO LÔ 100 G Cao ớt 10% capsaicin 1,5 g (bao gồm 0,15 g capsaicin) Dầ 20 g Tween 80 8g Lecithin 1g N ớc c t 100 g 1.2 TIÊU CHU N NGHUYÊN LIỆU Cao ớt TCCS Dầ TCCS Tween 80 TCCS Lecithin TCCS 1.3 CHẤT LƯỢNG SẢN PH M 1.3.1 C m quan nano cao H phân tách lớp, ồng nh t, không kết bông, không kem, không ổi màu s c , không xu t hi 132 ước tiểu phân H phân nano cao phân b mộ nh 133 H ể ọ :H ớc ể p â trung bình d ới 200 nm, kiểu ầ 1.3.4 Độ nhớt: < 15 Cp 1.3.5 pH: − 1.3.6 Định tính H p â 1.3.7 Đị d ng ế p Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh 74 Nằ  10% ớ ã 1.3.8 Hiệu su t nang hóa H tiểu phân nano cao ớt hi u su 80% II PHƯ NG PHÁP THỬ 2.1 C ờng, h tiể p â p â Quan sát m ồng nh t, không xu t hi n ổi màu s c, không kết bông, kem, tách lớp chuyể ế 2.2 ể â 2.2.1 Thiết bị p â ớc tiểu phân, zeta HORIBA ZS–100V2 2.2.2 Tiến hành ằ Tráng tế mẫ p â 2.3 H ớc c ờng nền vớ ẫu phân tích ể ọ ịnh thiết bị Thiết bị: Hình thể họ Chu n bị mẫu tiến hành: Mẫ ọ ẫ ãp ã ồ p 2% ể ẫ 24 TE Jeol, Nhật B n ớc c c pha loãng 200 lần vớ ã cho vào bình hút ẩ p ớc c t Tráng tế ặ c ph lớp ầ ờ ế ọ d C ĩ p dị d T ến hành phân tích theo quy trình thao tác chuẩn c a thiết bị 2.4 Độ ộ nhớt Brookfield – Model: RV Viscometer Thiết bị: Tiến hành: Cân 10 g h p â theo quy trình thao tác chuẩn c a máy với t ớt vào c Tế ộ quay 100 vòng/ phút, nhi ộ nhớt ộ 25 °C Lặp l i thí nghi m lần 2.5 pH pH I Thiết bị: M – Model: pH-220L Tiến hành: Cân 5,0 g h phân ớt cho vào túi thẩm tách (Spectra Por Regenerated Cellulose Membrane MWCO 12000 – 14000 Da, Spectrum, Mỹ), Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh 75 rồi cho vào c c ch 50 L ớc c t, khu y t giờ với t pH phút Tiế ộ 100 vòng/ ẩn c a máy Lặp l i thí nghi m lần 2.6 Đị Đị ằ ý ề ý p ầ ị ụ 2.7 P ầ ệ 2.7.1 Thiết bị Dụng cụ lọc với thẩm tách (Spectra Por Regenerated Cellulose Membrane MWCO 12.000 – 14.000 Da, Spectrum, Mỹ) 2.7.2 Tiến hành L ng capsaicin nang hóa tiể p â ị ng capsaicin t ịnh gián tiếp thông qua cách sử dụng túi thẩm tách (Spectra Por Regenerated Cellulose Membrane MWCO 12000 – 14000 Da, Spectrum, Mỹ) Cân 5,0 g h p â 50 L ớt cho vào túi thẩ ớc c t, khu y với t ặt túi vào c c ch a xác ộ 100 vịng/phút giờ L phần dị ị gián tiếp ng capsaicin nang hóa tiểu phân ng bằ p ng capsaicin t p p HPLC ịnh 2.7.3 Hi u su t nang hóa (EE) X ịnh thơng s hi u su t nang hóa (EE): EE (%) = L ng ho t ch t nang hóa hi u c mẫ ng ho t ch t t 2.8 Đị ng ho t ch 2.8.1 Đ ều ki n sắc ký Cột: Supelco L11 (250 mm x 4,6 mm; µm) Nhi P ộ cột: 30 °C ộng: Acetonitril – acid phosphoric 0,1% (40:60) Thể tích tiêm mẫu: 20 µl ị c Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh 76 T ộ dịng: 1,0 mL/phút D : PDA ớc sóng phát hi n UV 281 nm 2.8.2 Tiến hành ịnh Pha dung dịch mẫu chu n: Cân 5,0 mg capsaicin chuẩ m c 50 mL, thêm methanol, siêu âm 15 phút, bổ sung methanol v p Lọc qua màng lọ 22 µ thể tích ớc triển khai s c ký Pha dung dịch mẫu thử: Cân 1,0 g h tiểu phân nano cao â m c 50 mL, thêm methanol thể tích Ly tâm với t p ể yên 30 phút, bổ sung methanol v a ộ 10000 vòng/phút 15 phút, thu phần dịch d ới, lọc qua màng lọ 2.8.3 15 p ú ịnh p 22 µ ớc triển khai s c ký ng (%) capsaicin Đ nh kết qu : H ng % (kl/kl) c a capsaicin tồn phầ c tính theo cơng th c: ( ) T : , : Là di n tích peak c a dung dịch mẫu chuẩn mẫu thử ộ c a dung dịch mẫu chuẩn (mg/mL) : Nồ : Đội tinh khiết c a chuẩn (%) ng h tiểu phân nano cao ớt cân th c tế (g) : Kh III BẢO QUẢN B o qu n nhi ộ ộp , tránh ánh sáng tr c tiếp TP H Chí nh n … th n … năm 2020 N ười so n tiêu chuẩn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh 77 PHỤ LỤC Sắ đồ HPLC capsaicin chuẩn USP Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh 78 PHỤ LỤC Sắ đồ HPLC cao ớt lớp Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh 79 PHỤ LỤC Sắ đồ HPLC cao ớt lớ ưới Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh 80 PHỤ LỤC Sắ đồ HPLC hệ tiểu phân nano placebo Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh 81 PHỤ LỤC Sắ đồ HPLC hệ tiểu phân nano mang cao ớt Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh 82 PHỤ LỤC Kết qu đ ước tiểu phân nano placebo Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh 83 PHỤ LỤC Kết qu đ ước tiểu phân nano Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh 84 PHỤ LỤC Kết qu đ ước tiểu phân nano ỳ Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh 85 PHỤ LỤC 11 Kết qu đ ước tiểu phân nano â Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh 86 PHỤ LỤC 12 ế â ặ Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh 87 Ý KIẾN CỦA GIẢNG VIÊN HƯỚNG D N TP Hồ C N TS T Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn … C … Tị 2021