Nghiên cứu bào chế hệ tiểu phân nano lipid tải cao chiết mỏ quạ giàu amyrin

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH - VŨ THỊ PHƯƠNG VÂN NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ HỆ TIỂU PHÂN NANO LIPID TẢI CAO CHIẾT MỎ QUẠ GIÀU AMYRIN LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC Tp Hồ Chí Minh – Năm 2021 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH - VŨ THỊ PHƯƠNG VÂN NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ HỆ TIỂU PHÂN NANO LIPID TẢI CAO CHIẾT MỎ QUẠ GIÀU AMYRIN NGÀNH: CÔNG NGHỆ DƯỢC PHẨM VÀ BÀO CHẾ THUỐC MÃ SỐ: 8720202 LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS TS PHẠM ĐÌNH DUY Tp Hồ Chí Minh – Năm 2021 LỜI CAM ĐOAN Tơi cam đoan cơng trình nghiên cứu Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực chưa công bố cơng trình khác Tp Hồ Chí Minh, ngày 29 tháng 12 năm 2021 Vũ Thị Phương Vân LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC Khóa 2019 – 2021 NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ HỆ TIỂU PHÂN NANO LIPID TẢI CAO CHIẾT MỎ QUẠ GIÀU AMYRIN Vũ Thị Phương Vân Người Hướng dẫn Khoa học: PGS TS Phạm Đình Duy TĨM TẮT Đặt vấn đề Đề tài thực nhằm xây dựng công thức tối ưu để bào chế tiểu phân nano lipid tải cao chiết Mỏ quạ giàu amyrin phương pháp đồng hóa áp suất cao, nhiệt độ cao đánh giá số đặc tính tiểu phân nano tạo thành Phương pháp nghiên cứu Sàng lọc yếu tố ảnh hưởng lên hình thành đặc tính tiểu phân NLC tải cao chiết Mỏ quạ giàu amyrin Các yếu tố sàng lọc gồm có: loại lipid làm giá mang, tỉ lệ sáp : dầu công thức, tỉ lệ pha dầu công thức, tỉ lệ cao MQ phối hợp công thức, loại lượng chất diện hoạt, thơng số quy trình tốc độ thời gian khấy tốc độ cao để hình thành nhũ tương sơ bộ, áp suất số chu kỳ đồng hóa để hình thành A-NLC Xây dựng thẩm định phương pháp định lượng ß-amyrin coi hoạt chất chất điểm cao MQ phương pháp HPLC-PDA Khảo sát tính chất hệ tiểu phân bao gồm: cảm quan, kích thước tiểu phân nano (nm), số đa phân tán PDI, zeta (mV), hiệu suất bắt giữ (%) hiệu suất tải (%) Kết nghiên cứu Công thức hệ tiểu phân A-NLC gồm 10% lipid Compritol® 888 ATO – LauroglycolTM 90 (6 : 4), 5% Tween 80, 1% cao MQ nước cất lần vừa đủ 100 g Quy trình bào chế đồng hóa áp suất cao nhiệt độ cao với thông số, bước bào chế nhũ tương sơ sử dụng máy khuấy tốc độ cao 5.000 vịng/ phút 10 phút, sau HPH nóng 75 oC, áp suất 1000 bar với chu kỳ, quy mô bào chế 100 g/ mẻ Hệ tiểu phân A-NLC bào chế theo công thức thông số quy trình khảo sát có kích thước tiểu phân 208,8 ± 2,66 nm; PDI 0,2 ± 0,01; zeta – 20,17 ± 0,23 mV; hiệu suất bắt giữ 100%; hiệu suất tải 9,11 ± 0,016% Kết luận Đề tài xây dựng công thức tối ưu để bào chế hệ tiểu phân nano lipid tải cao chiết Mỏ quạ giàu amyrin phương pháp đồng hóa áp suất cao nhiệt độ cao, đánh giá yếu tố ảnh hưởng đến hình thành tiểu phân bước đầu khảo sát đặc tính hệ tiểu phân nano lipid tải cao chiết Mỏ quạ giàu amyrin PHARMACEUTICAL FINAL MASTER’S THESIS Academic course: 2019 – 2021 PREPARATION OF DISCHIDIA MAJOR MERR REFINED EXTRACT LOADED NANOSTRUCTURED LIPID CARRIERS Vu Thi Phuong Van Supervisor: Assoc Prof PhD Pham Dinh Duy ABSTRACT Introduction This essay was carried out to establish the optimal formula of Dischidia major (Vahl) Merr refined extract loaded nanostructured lipid carriers by hot high pressure homogenization method and to evaluate some characteristics of A-NLC Methods Screening for key factors influencing the formation and characterization of the Dischidia major (Vahl) Merr refined extract loaded nanostructured lipid carriers (ANLC) like lipids as the carriers, ratio of solid lipid : liquid lipid, ratio of lipid phase, ratio of Dischidia major (Vahl) Merr refined extract, surfactant of the formula Process parameters like stirring speed (rpm) and time for phase combinational process, homogenizational pressure (bar) and quantity of cycles for HPH process Developing and validating ß-amyrin (being active ingredient and being representation for Dischidia major (Vahl) Merr refined extract) quantitative method by HPLCPDA Evaluating some characteristics of A-NLC: nanoparticle size (nm), polydispersity index PDI, zeta potential (mV), entrapment efficiency (%) and drug loading (%) Results The optimal formula of A-NLC consist of 10% lipid Compritol® 888 ATO – LauroglycolTM 90 (6 : 4), 5% Tween 80, 1% Dischidia major (Vahl) Merr refined extract and times distilled water just enough 100 g Preparation process with 5000 rpm for 10 minutes and then 1000 bar by cycles HPH A-NLC preparing with the optimal formula has size of 208,8 ± 2,66 nm; PDI 0,2 ± 0,01; zeta potential – 20,17 ± 0,23 mV; entrapment efficiency 100%; drug loading 9,11 ± 0,016% Conclusion This essay has developed the optimal formula of Dischidia major (Vahl) Merr refined extract loaded nanostructured lipid carriers and evaluated the factors affecting the characteristics of A-NLC, then evaluated some characteristics of A-NLC MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU – CHỮ VIẾT TẮT iv DANH MỤC CÁC HÌNH vi DANH MỤC CÁC BẢNG vii ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Dược liệu Dây Mỏ quạ 1.2 Cao chiết Mỏ quạ giàu amyrin 1.3 Tính chất lý hố ß-amyrin 1.4 Tính chất dược lý Amyrin 1.4.1 Kháng viêm 1.4.2 Giảm đau 1.4.3 Bảo vệ gan 1.4.4 Chống viêm tụy 1.4.5 Hạ đường huyết, hạ lipid huyết 1.4.6 Điều trị béo phì 1.5 Khái niệm phân loại tiểu phân nano lipid 1.5.1 Khái niệm tiểu phân nano lipid ngành Dược 1.5.2 Tổng quan NLC 1.6 Phương pháp bào chế NLC 1.6.1 Sử dụng lượng cao (high-energy methods) 10 1.6.2 Sử dụng lượng thấp (low-energy methods) 11 1.7 Khảo sát đặc tính hệ tiểu phân nano lipid 11 1.7.1 Tính chất cảm quan 12 1.7.2 Kích thước số đa phân tán kích thước hạt 12 1.7.3 Thế zeta 12 1.7.4 Hình thể học tiểu phân nano 13 1.7.5 Hiệu suất bắt giữ khả tải thuốc tiểu phân nano 14 1.8 Các tá dược dùng bào chế hệ tiểu phân nano lipid 15 1.8.1 Thành phần cấu tạo NLC 15 1.8.2 Lipid rắn (sáp) 15 1.8.3 Chất diện hoạt 16 1.8.4 Một số tá dược sử dụng nghiên cứu 17 1.9 Những nghiên cứu liên quan 21 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 23 2.1 Đối tượng nghiên cứu 23 2.1.1 Cao chiết Mỏ quạ giàu amyrin (Cao MQ) 23 2.1.2 Chuẩn làm việc 23 2.1.3 Hóa chất – Thuốc thử – Vật tư tiêu hao 23 2.1.4 Các tá dược sử dụng 24 2.1.5 Dụng cụ, trang thiết bị 24 2.2 Phương pháp nghiên cứu 25 2.2.1 Xác định thành phần tỉ lệ lipid công thức NLC tải cao chiết Mỏ quạ giàu amyrin (A-NLC) 25 2.2.2 Phương pháp bào chế NLC tải cao chiết Mỏ quạ giàu amyrin (A- NLC) 26 2.2.3 Đánh giá tính chất A-NLC 29 2.2.4 Xây dựng tiêu chuẩn hệ tiểu phân A-NLC 35 CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 36 3.1 Thành phần tỉ lệ lipid công thức A-NLC 36 3.1.1 Kết sàng lọc thành phần lipid 36 3.1.2 Tỉ lệ thành phần sáp : dầu công thức A-NLC 36 3.1.3 Sự tương tác khả hỗn hòa hỗn hợp lipid 37 3.2 Phương pháp bào chế A-NLC 38 3.2.1 Công thức A-NLC 38 3.2.2 Quy trình bào chế A-NLC 44 3.3 Tính chất xây dựng tiêu chuẩn A-NLC 48 3.3.1 Tính chất hệ tiểu phân A-NLC 48 i 3.3.2 Tiêu chuẩn A-NLC 65 CHƯƠNG BÀN LUẬN 66 4.1 Về thành phần tỉ lệ lipid công thức A-NLC 66 4.1.1 Về sàng lọc thành phần lipid 66 4.1.2 Về tỉ lệ sáp : dầu hỗn hợp lipid 67 4.1.3 Về tương tác cao MQ hỗn hợp lipid 68 4.2 Về phương pháp bào chế A-NLC 68 4.2.1 Về công thức A-NLC 68 4.2.2 Về chất diện hoạt A-NLC 69 4.2.3 Về cần thiết chất bảo quản công thức A-NLC 70 4.2.4 Về quy trình bào chế A-NLC 70 4.3 Về tính chất A-NLC 70 4.3.1 Về kích thước tiểu phân số đa phân tán A-NLC 70 4.3.2 Về zeta A-NLC 71 4.3.3 Về hình thể học A-NLC 71 4.3.4 Về hiệu suất bắt giữ A-NLC 72 4.3.5 Về độ ổn định A-NLC 72 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 74 5.1 Kết luận 74 5.2 Kiến nghị 75 TÀI LIỆU THAM KHẢO 76 DANH MỤC PHỤ LỤC Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-27 Phụ lục Đánh giá tính chất hệ tiểu phân A-NLC Phụ lục 3.1 Kích thước phân tử CT35 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-28 Phụ lục 3.2 Thế zeta CT35 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn