Nghiên cứu chế tạo vật liệu nanochitosan ứng dụng trong dược phẩm và trong nông nghiệp

Nghiên cứu chế tạo vật liệu nanochitosan ứng dụng trong dược phẩm và trong nông nghiệp

B KHOA H C VÀ CÔNG NGH VI N KHOA H C VÀ CÔNG NGH VI T NAM

C quan ch trì tài: Vi n Hóa h c

Hà N i 5 - 2010

B KHOA H C VÀ CÔNG NGH VI N KHOA H C VÀ CÔNG NGH VI T NAM

PGS.TS Tr ng Thi n PGS.TS Nguy n V n Tuy!n

Ch nhi m ch ng trình B Khoa h c và Công ngh

V n phòng các Ch ng trình KHCN

Tr ng i m c p Nhà n c

GS.TSKH Thân "c Hi n Ths Xuân C ng

L#I C M N

Có c k t qu nghiên c u b c u này, t p th tác gi chân thành

c m n t i các cán b khoa h c ng nghi p, các n v nghiên c u, Vi n Hóa h c, Vi n Nghiên c u lúa – Tr ng i h c Nông nghi p I Hà N i, b môn D c l c – Tr ng i h c D c Hà N i… ã h p tác, chia s , và óng góp ý ki n c bi t, tài ã c Ban Ch nhi m Ch ng trình KHCN

tr ng i m c p Nhà n c KC-02: “Nghiên c u, phát tri n và ng d ng công ngh v t li u”; V n phòng các Ch ng trình KHCN tr ng i m c p nhà n c;

B Khoa h c và Công ngh ã tin t ng giao nhi m v và luôn theo sát, góp

ý, ng viên, giúp tài c th c hi n theo các yêu c u và quy nh

T p th tác gi c!ng xin chân thành c m n các t" ch c khuy n nông, cán b lãnh o và bà con nông dân các a ph ng c a các t#nh: H ng Yên, B$c Ninh, Th%a Thiên Hu , Sóc Tr ng ã nhi t thành tham gia th& nghi m và óng góp ý ki n tài t" ch c th& nghi m th c t t k t qu

1 Tên tài: Nghiên c"u ch! t)o v't li u nanochitosan "ng d,ng trong

d -c ph.m và trong nông nghi p

Tên t" ch c ang công tác: Vi n Hoá h c

a ch# t" ch c: 18- ng Hoàng Qu c Vi t- C0u Gi/y –Hà N i

H và tên th tr ng t" ch c: PGS.TS Nguy n V n Tuy!n

Th i gian (Tháng,

n m)

Kinh phí (Tr )

Ghi chú (S ngh quy t toán)

11/6/2008 189 24/12/2008 461

c p nhà n c cho phép chuy n n i dung và kinh phí t% oàn công tác Cana a Ch t o 40.000 lít ch t KTST-LA.01 ( ã quy i) th& nghi m cho cây lúa di n r ng v i quy mô 50 ha tài ã hoàn thành ch t o 40.000 lít quy "i ch t KTST-LA.01, 3200 lít ch t KTST-RQ.01 và t" ch c 2 bu"i t p hu n s& d ng ch t kích thích sinh tr ng KTST-LA.01, KTST-RQ.01 cho bà con nông dân xã Phú Th nh và Ph m Ng! Lão, huy n Kim

ng, t#nh H ng Yên th& nghi m cho 50 ha lúa và 2 ha rau qu

3 Các v n b5n hành chính trong quá trình th(c hi n tài/d( án:

"Nghiên c u, phát tri n và ng

d ng công ngh v t li u" Mã s' KC.02/06-10

2 Quy t nh s'

2686/Q -BKHCN,

Phê duy t kinh phí 03 tài, 01

d án s n xu t th& nghi m b$t

c p Nhà n c; Ban ch nhi m

Ch ng trình KC-02 v i Vi n Hóa h c và Ch nhi m tài

ch ng trình "Nghiên c u, phát tri n và ng d ng công ngh v t

4 T2 ch"c ph i h-p th(c hi n tài, d( án:

N i dung tham gia

ch y!u

S5n ph.m ch y!u

)t -c

Ghi chú

c u Lúa Lúa – i

h c Nông nghi p I –

Hà N i

ánh giá tác d ng kích thích sinh tr ng

c a s n ph+m quy

mô thí nghi m và quy mô th&

nghi m

r ng

- ánh giá các ch# tiêu theo quy trình nghiên

c u c b n cho cây lúa:

- ánh giá các ch# tiêu theo quy trình nghiên

c u cho cây lúa quy

mô r ng: 3 v ; 3 v trí (3 vùng: ng b,ng

mi n B$c (t#nh H ng Yên), mi n Trung (Th%a Thiên-Hu ho c

à N-ng) và mi n Nam ( ng b,ng sông C&u Long) v i t"ng

di n tích 9 ha

- ánh giá tác d ng

c a nanochitosan v i sâu b nh cho lúa theo tiêu chu+n quy nh v th& nghi m cho lúa:

th ng ngoài t%

S n ph m ch

y u t c

Ghi chú*

- 20 kg ch t KTST d ng b t

ánh giá tác

d ng kích thích sinh

tr ng c a

s n ph+m quy mô thí nghi m và quy mô th&

- ánh giá các ch#

tiêu theo quy trình nghiên c u cho cây lúa quy mô r ng: 3

v ; 3 v trí (3 vùng: ng b,ng

mi n B$c (t#nh

H ng Yên), mi n Trung (Th%a Thiên-Hu ho c

à N-ng) và

mi n Nam ( ng b,ng sông C&u Long) v i t"ng

di n tích 9 ha

- ánh giá theo tiêu chu+n quy

nh v th& nghi m cho lúa: tác d ng c a nanochitosan v i sâu b nh cho lúa

3 PGS.TS Lê

Lan Anh

PGS.TS Lê Lan Anh

Nghiên c u

nh l ng các h p

ch t hoá

h c và s n ph+m

Báo cáo các thông s' c u trúc

c a v t li u chitosan

ng c$t

m ch và khâu m ch

- Quy trình t"ng

h p nanochitosan nanochitosan t% d/n xu t th cacboxymetyl chitosan

- Quy trình t"ng

h p v t li u nanochitosan t%

ph n ng c a chitosan v i andehyt

- Xác nh thành

ph n hóa h c c a nanochitosan

5 Ths Tr n Th Ý Ths Tr n Th Nghiên c u - Quy trình t"ng

Nhi Ý Nhi các ph n

ng ghép

h p nanochitosan nanochitosan t% d/n xu t th trimetylchitosa

- Quy trình t"ng

h p b c-chitosan nanocomposit kích th c 5-100nm

Nghiên c u công ngh

ch t o các

v t li u nanochitosan

- C$t m ch chitosan b,ng các tác nhân oxy hoá

ho c quang hoá -T"ng h p nanochitosan t% chitosan v i axit succinic ho c axit xitric

-Xây d ng thành

ph n bào ch thu'c i u tr v t

th ng ph n

m m bên ngoài t% nanochitosan-Ag: d ng kem và

ph n ng

- Quy trình c$t

m ch chitosan b,ng các tác

deaxetyl hoá

nhân axit vô c

- Quy trình công ngh ch t o s n ph+m KTST-A

d ng dung d ch

nanochitosan tan trong n c Ch

t o th& nghi m

250 lít s n ph+m kích thích sinh

tr ng d ng l*ng (KTST-A)

8 Ths D ng Anh

V!

Ths D ng Anh V!

Nghiên c u t"ng h p nanochitosa

n

-Quy trình t"ng

h p nanochitosan t% ph n ng ng trùng ghép: metyl metacrylat lên chitosan v i tác nhân kh i mào amoni pesulfat

- Công ngh v t

li u nanochitosan theo ph ng pháp k t t a

9 TS Nguy.n V n

C ng

Ths D ng Anh V!

Nghiên c u ánh giá th& nghi m các ho t tính sinh

h c

- Nghiên c u tính

ch t kháng vi sinh v t ki m

nanochitosan cho lúa

Th& nghi m

d c l c cho thu'c ch(a v t

th ng ngoài t%

nanochitosa

n

ánh giá tác

d ng d c lý theo quy nh c a

B y t -Kháng khu+n, kháng n m trên in vitro

- Lý do thay "i: Do TS Nguy.n V n C ng chuy n công tác nên n i dung nghiên c u "Nghiên c u ánh giá th nghi m các ho t tính sinh h c" c giao cho Ths.D ng Anh V!

nghiên c u và trao "i h c

thu t v v t li u nano sinh

và V n

và 2 ha rau qu phòng các

ch ng trình cho phép

- Lý do thay "i: T% các k t qu r t kh quan khi th& nghi m th c t quy

mô r ng: 9 ha, tài xin phép th& nghi m quy mô l n h n: 50 ha có thêm các ánh giá th c t và ti n n s n xu t th&

- Th i gian: ngày 31/5/2009

- a i m: xã Ph m Ng!

Lão và xã Phú Th nh huy n Kim ng, H ng Yên

2 Không có theo k ho ch T p hu n cho bà con nông

dân v cách s& d ng ch t kích thích sinh tr ng cho lúa (KTST-LA.01) rau qu (KTST.RQ)

-Th i gian: 2/4/2010

- a i m: xã Ph m Ng!

Lão và xã Phú Th nh, huy n Kim ng, H ng Yên

Th c hi n thêm theo

c Xây d ng c ng tài 12/2007 12/2007 ) Tr ng Thi n-

12/2007-3/2008

Ph m Th Bích

H nh-Vi n Hóa

h c 1-2 Nghiên c u c$t m ch

chitosan b,ng các tác nhân

axit vô c

12/2007-3/2008

12/2007-3/2008

ông-Vi n Hóa

h c 1-3 Nghiên c u t"ng h p

nanochitosan t% d/n xu t th

cacboxymetyl chitosan

12/2007-3/2008

12/2007-3/2008

6/2008

6/2008

1/2009

4/2008-Ph m Th Bích

H nh-Vi n Hóa

h c 1-7 Nghiên c u t"ng h p

nanochitosan t% natri

tripolyphosphat và chitosan

1/2009

1/2009

Thành-Vi n Hóa

h c 1-8 Nghiên c u t"ng h p

nanochitosan t% ph n ng

ng trùng ghép: metyl

metacrylat lên chitosan v i

tác nhân kh i mào amoni

1/2009

1/2009

4/2008-D ng Anh

V!-Vi n Hóa h c

1/2009

1/2009

3/2009

6/2008-) Tr ng Thi n

- Vi n Hóa h c 2-2 Nghiên c u công ngh

ionic gelation và khâu m ch

nh! t ng

6/2008

6/2008

1/2010

l ng phân t& và phân b'

kh'i l ng phân t&

1/2010

1/2010

Thành - Vi n Hóa

h c 3-2 Nghiên c u kh o sát các

12/2008

6/2008-Lê Lan Anh -

Vi n Hóa h c

3-3 Xác nh nh l ng

thành ph n hóa h c c a v t

li u nanochitosan

6/2009

3/2010

6/2009

1/2010

1/2010

10/2009

5/2008-Nguy.n V n Hoan

- Vi n Nghiên c u Lúa

10/2009

5/2008-Nguy.n V n Hoan

- Vi n Nghiên c u Lúa

5-3 Nghiên c u ánh giá

tác d ng c a nanochitosan

v i sâu b nh cho lúa: Sâu

cu'n lá, sâu c thân, b nh

b c lá

12/2009

10/2009

5/2008-Nguy.n V n Hoan

- Vi n Nghiên c u Lúa

10/2009-5/2010

3/2010

1/2009-Ph m Th Bích

H nh – Vi n Hóa

h c 6-2 Nghiên c u i u ch

th& nghi m thu'c d ng t m

v i n n là chitin ho c

chitosan có ch a

nanochitosan-Ag

8/2010

5/2010

1/2010

12/2009

1/2009-) Th Nguy t

Qu - i h c

D c Hà N i 7-2 Th& tác d ng ch'ng

viêm

12/2009

12/2009

1/2009-) Th Nguy t

Qu - i h c

D c Hà N i 7-3 Th& tác d ng li n v t

b*ng trên mô hình gây b*ng

th c nghi m

8/2010

5/2010

1/2009-) Th Nguy t

Qu - i h c

D c Hà N i 7-4 Th& c tính c p tính

(ph ng pháp Lichfield-

Wilcoxen)

8/2010

4/2010

1/2009-) Th Nguy t

Qu - i h c

D c Hà N i 7-5 Th& c tính bán tr ng

di.n

8/2010

5/2010

1/2009-) Th Nguy t

Qu , i h c

D c Hà N i

7-6 Th& tác d ng gây d ng

thu'c

8/2010

5/2010

1/2010-) Th Nguy t

Qu - i h c

D c Hà N i Báo cáo khoa h c t"ng k t

tài

4/2010 5/2010 ) Tr ng Thi n

- Vi n Hóa h c

III S N PH M KH&CN C%A TÀI, D+ ÁN

1 S5n ph.m KH&CN ã t)o ra:

100000 Da

- Hàm

l ng 30g/lit

15-432 lít KTST-LA.01:

(43.20

0 lit quy

"i)

- Nanochitosan có kh'i l ng phân t& t%

5000-100000 Da

- Hàm

l ng 30g/lit

15 Làm thêm

432 lit KTST-LA.01 (43.200 lit quy "i) t% kinh phí

i u ch#nh oàn ra

100000 Da Hàm l ng 15-30g/lit

RQ.01:

KTST-30lit (3000 lit quy

"i)

- Nanochitosan có kh'i l ng phân t& t%

5000-100000 Da

- Hàm

l ng 30g/lit

100000 Da

l ng 0,5%

0,1-kh'i l ng phân t& t%

5000-100000 Da

- Hàm

l ng 0,5%

- Hàm

l ng nanochitosa

l p

- Hàm

l ng nanochitosa

5.000 Da; 5.000–

20.000Da; 20.000 – 100.000Da

Kh'i l ng phân t& theo 3 lo i: <

5.000 Da; 5.000–

20.000Da; 20.000 – 100.000Da

qu'c t

- T p chí: Carbohydrate Polymer: 02 (thu c danh m c SCI)

- T p chí: ASEAN journal on Science and Technology for Development: 01

Theo quy

nh c a B Khoa h c và Công ngh

th s& d ng cho

ào t o i h c, trên i h c

Là tài li u chuyên kh o

v nanochitosan

s n ph+m ng

d ng trong nông nghi p

- 01 ng ký sáng ch ( ã g&i n c ch p nh n

01 gi i pháp h(u ích

- 02 s n ph+m LA.01 và KTST-RQ.01

KTST-d ki n ng ký t i B Nông nghi p và Phát tri n nông thôn cho nông nghi p sau khi nghi m thu

e) Th ng kê danh m,c s5n ph.m KHCN ã -c "ng d,ng vào th(c t!

- T#nh H ng Yên

- T#nh Th%a Thiên Hu

- T#nh Sóc

Tr ng

ã cho n ng su t cao h n 'i

ch ng:

- V i cây lúa:

t ng t% 7,5%

n 32 % - Trung bình t 19,9%

c b n và th c t

di n r ng

- V i rau qu (cây d a chu t,

cà pháo): t ng

n ng su t t% 20÷ 150%

2 ánh giá v hi u qu5 do tài, d( án mang l)i:

a) Hi u qu v khoa h c và công ngh :

- tài ã ti p c n v i l2nh v c khoa h c công ngh v t li u nano có

ho t tính sinh h c - là l2nh v c KH-CN m i và phát tri n m nh m3 v i nhi u

ti m n ng ng d ng K t qu th hi n qua 3 công b' Qu'c t , trong ó có 2 công b' trong danh m c SCI

- T% các k t qu nghiên c u c b n v khoa h c, k t h p s& d ng, v n

d ng các thi t b và ph ng pháp nghiên c u hi n i hi n có trong n c, tài ã v n d ng xây d ng công ngh ch t o v t li u naonochitosan có tính

kh thi trong n c và t% ó có th ti p t c phát tri n ng d ng quy mô l n

h n

- tài ã xây d ng công ngh và ch t o s n ph+m có tác d ng kích thích sinh tr ng cho: cây lúa và rau qu S n ph+m có ho t tính sinh h c và thân thi n v i môi tr ng

b) Hi u qu v kinh t xã h i:

- S n ph+m kích thích sinh tr ng cho lúa và rau qu có tính an toàn sinh h c, không c h i cho cây tr ng và nông s n ây là s n ph+m góp ph n vào "s n xu t s ch" ang r t c chú tr ng hi n nay B c u s n ph+m ã

c bà con nông dân ón nh n t't và mong mu'n có s n ph+m cung c p cho

s n xu t lúa, rau qu

- Qua 7 v th& nghi m, trong ó có 3 v th& nghi m quy mô r ng (12 ha) cho cây lúa 3 mi n cho th y n ng su t lúa t ng t% 12,5% n 30%, trung bình t 19,9% Tính bình quân m)i ha lúa cho l i nhu n t% 2 n 3 tri u ng so v i 'i ch ng cho 1 v Cá bi t nh Th%a Thiên Hu v chiêm n m 2010, k t qu cho n ng su t bình quân ≈ 33% so v i 'i ch ng

Ví d , gi'ng KD18, cho 1ha lúa 1 v cho t ng n ng su t 1568 kg thóc,

t ng ng t ng 33,7% và s b tính thì t ng thêm c kho ng 5 tri u ng/ha

- S n ph+m c áp d ng cho rau qu , n ng su t t ng r t cao và giá tr kinh t còn cao h n so v i lúa

3 Tình hình th(c hi n ch! báo cáo, ki1m tra c a tài, d( án:

S

Th i gian

- M t s' khó kh n: + V t t hóa ch t cho tài: có m t s'

lo i t ng giá r t cao

so v i thuy t minh tài

+ Thi t b : Do thay

"i t4 giá nên giá thi t b do các nhà cung c p ngh cao h n giá ã duy t trong thuy t minh tài

metacrylat lên chitosan v i tác nhân

kh i mào amoni pesulfat

th& nghi m phun cho lúa t i Qu

Võ- B$c Ninh cho gi'ng lúa Vi t

lai 24, i H i- K Sách – Sóc

15/3/09 tài ã th c hi n các

n i dung nghiên c u theo úng ti n c a Thuy t minh tài

Tr ng v i gi'ng lúa CK96, 732

- ã ch t o 5 kg ch t kích thích sinh

tr ng d ng b t (KTST-B)

- ã mua thi t b xác nh kh'i

l ng phân t& ISOMAT 090 o

- Xác nh kh'i l ng phân t& và

phân b' kh'i l ng phân t&

th& nghi m c b n

- Xác nh nh h ng c a ch t kích thích sinh tr ng t% nanochitosan cho cây lúa theo mô hình trên di n

r ng quy mô: 3 v ; 3 v trí (3 vùng: ng b,ng mi n B$c (t#nh

H ng Yên), mi n Trung (Th%a Thiên-Hu ho c à N-ng) và mi n Nam ( ng b,ng sông C&u Long)

b n gel, nhi t h hóa

- Xây d ng thành ph n bào ch thu'c

i u tr v t th ng ph n m m bên ngoài t% nanochitosan-Ag: d ng kem

- Nghiên c u i u ch thu'c th& nghi m d ng t m v i n n là chitin

ho c chitosan có ch a b c-chitosan nanocompozit

- i u ch th& nghi m thu'c i u tr

v t th ng ph n m m bên ngoài

d ng past, kh'i l ng: 2000g

- Ch t o 40.000 lít ( ã quy "i) s n ph+m ch t kích thích sinh tr ng LA.01 th& nghi m cho cây lúa trên di n r ng (50 ha)

- Th& nghi m ch t kích thích sinh

tr ng trên cây lúa

- tài ã dùng nguyên li u trong

n c c ánh giá cao; bám sát n i dung ã ra; ã rút

ra các k t qu

ph c v nông nghi p

- Ti n bám sát thuy t minh;

- +y nhanh ti n mua thi t b và v t

t hóa ch t và hoàn thi n quy ch chi tiêu và nh t ký tài

Hi n

* Các k t qu chính

- tài hi n i và có tính th c ti.n cao,

th c hi n t't n i

- Nghiên c u các ch công ngh

- Mua thi t b ông khô và thi t b o

kh'i l ng phân t&

dung ã ng ký trong h p ng và

Hi n

* Các k t qu chính

- tài th c hi n r t t't các n i dung

- Có các minh ch ng

v tri n khai

- M r ng thêm nghiên c u và ng

d ng nanochitosan trong l2nh v c y

d c

- Nên xu t d án

s n xu t th& nghi m

v ch t kích thích sinh tr ng

nghi m thu c p C s

1.2.2 Ph ng pháp t"ng h p v t li u nano trên c s chitin/chitosan 11 1.2.2.1 Ph ng pháp liên k t ngang nh! t ng (emulsion cross-linking) 11 1.2.2.2 Ph ng pháp t gi t/k t t a (coacervation/precipitation) 13

1.2.2.4 Ph ng pháp k t t nh! t ng (emulsion-droplet coalescence) 14 1.2.2.5 Ph ng pháp gelatin hoá ion (ionic gelation) 15 1.2.2.6 Ph ng pháp mixen ng c (Reverse micellar) 16 1.2.2.7 T"ng h p v t li u chitosan-kim lo i nanocomposit 17 1.2.3 M t s' tính ch t c a v t li u nanochitosan và kim lo i nano-chitosan 20 1.2.4 7ng d ng c a các lo i v t li u nanochitosan 21

Ch ng 1.3: QUANG H P VÀ VAI TRÒ C%A CÁC Y U T*

1.3.5 Ch c n ng c a các nguyên t' dinh d ng 30 1.3.6 Vai trò c a ch t i u ti t sinh tr ng 'i v i cây tr ng 33 1.3.6.1 Phân lo i các ch t i u ti t sinh tr ng cây tr ng 34 1.3.6.2 Ch t kích thích sinh tr ng trên c s nanochitosan 35

Ch ng 1.4 HO T TÍNH SINH H C & THU*C BÔI NGOÀI DA 39

14.2.1 Ngu n g'c các d ng thu'c bôi ngoài da thông d ng nh t 40 1.4.2.2 C ch tác d ng c a thu'c bôi ngoài da 40

2.3.2.2 Công ngh ionic gelation và khâu m ch nh! t ng 53 2.4 Nghiên c u v kh'i l ng phân t& và phân b' kh'i l ng phân t& s&

d ng thi t b OSMOMAT 090

54

2.5 Nghiên c u tính ch t kháng vi sinh v t ki m nh, kháng n m 55

2.6 Th& c tính bán tr ng di.n c a nanochitosan-Ag 57 2.7 Th& nghi m ánh giá tác d ng kích thích sinh tr ng cho cây lúa 59

3.1.1 Nghiên c u bi n tính chitosan b,ng ph n ng c$t m ch oxy hoá 63

3.1.1.2 i u ch chitosan có kh'i l ng phân t& khác nhau 65 3.1.1.3 Kh o sát c u trúc c a chitosan và chitosan kh'i l ng phân

succinic

105

3.1.6.1 D ng h t nanochitosan t% chitosan v i axit succinic 106 3.1.6.2 Tính tan trong n c c a nanochitosan t% chitosan v i axit

và chitosan

114

3.1.7.3 Kh o sát th zeta, b n "n nh c a h nano 116 3.1.8 T"ng h p nanochitosan t% ph n ng ng trùng ghép metyl

metacrylat lên chitosan (CSM)

3.2.1.2 Ho t tính c a b c-chitosan nanocompozit v i khu+n gram

3.4.1 Nghiên c u ch t o ch t kích thích sinh tr ng d ng dung d ch có

ch a nanochitosan tan trong n c (KTST-LA.01)

175

3.4.2 Nghiên c u ch t o ch t kích thích sinh tr ng d ng b t có ch a 178

nanochitosan

Ch ng 3.5: THA NGHI M TÁC D NG KÍCH THÍCH SINH

TR <NG CHO CÂY LÚA

181

3.5.1.1 8nh h ng c a nanochitosan n m tr c khi c y 181 3.5.1.2 8nh h ng c a nanochitosan n ng thái t ng tr ng chi u

KTST-A Kích thích sinh tr ng d ng l*ng KTST-B Kích thích sinh tr ng d ng b t

KTST-LA.01 Ch t kích thích sinh tr ng cho lúa KTST-RQ.01 Ch t kích thích sinh tr ng cho rau qu

Mn Kh'i l ng phân t& trung bình s'

MV Kh'i l ng phân t& trung bình nh t N,N-diCMC N,N-dicacboxymetyl chitosan

NanoCS-GLA Nano chitosan-glutaraldehit

NanoCS-PAA Nano chitosan–polyacrylic

NanoCS-PMA Nanochitosan-polymetacrylat

NanoCS-TPP Nano chitosan-tripolyphotphat

NanoTMC Nano trimetyl chitosan

O-CMC O-cacboxymetyl chitosan

TEM Kính hi n vi i n t& truy n qua

B ng 3.1.8: d ch chuy n hoá h c ph" 13C-NMR cho reducing-end

(unit-M) c a trime N-acetyl (A-A-(unit-M) trong D2O và pH 5,0