Nghiên cứu dịch tễ học một số loài ấu trùng sán lá truyền lây qua cá chép (Cyprinus carpio) và biện pháp phòng, trị
BăGIỄOăDCăVĨăĐĨOăTO TRNGăĐIăHCăNỌNGăNGHIPăH̀ăṆI KIMăVĔNăVN NGHIÊN CU DCH T HC MT S LOÀI U TRÙNG SÁN LÁ TRUYN LÂY QUA CÁ CHÉP (Cyprinus carpio) VÀ BIN PHÁP PHÒNG, TR CHUYÊN NGÀNH: KÝ SINH TRÙNG VÀ VI SINH VT HC THÚ Y MẩăS: 62 64 01 04 NGIăHNGăDNăKHOA HC: PGS.ăTS.ăNGUYNăVĔNăTH PGS.ăTS.ăNGUYNăTHăLAN HĨăNI,ă2013 i LIăCAMăĐOAN TôiăxinăcamăđoanărằngănhữngăsăliuătrongăbáoăcáoănƠyălƠ hoàn toàn trungăthựcăvƠăchínhăxác,ălƠăktăquăcaăquáătrìnhăthựcăhinăLunăánăTinăsƿ, khôngăsaoăchépăcaăbtăkỳătácăgiănƠoăkhác. TôiăxinăcamăđoanămiătƠiăliuăthamăkhoăđưătríchădnăđuăđcănêuătên trongăphnătƠiăliuăthamăkho. ảà Nội, ngày 2 tháng 12 năm 2013 Nghiên cứu sinh KimăVĕnăVn ii LICMN Để đạt đ- ợc kết quả nh- ngày hôm nay Nghiên cứu sinh nhận đ- ợc rất nhiều sự giúp đỡ quý báu, tận tình từ tập thể thầy, cô h- ớng dẫn. Nhân đây xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến PGS. TS. Nguyễn Văn Thọ, PGS. TS. Nguyễn Thị Lan (Khoa Thú Y, Tr- ờng ĐHNN Hà Nội), GS.TS. Kurt Buchmann, GS.TS. Anders Dalgaard (ĐH Copenhagen, Đan Mạch) và PGS.TS. Lê Thanh Hoà (Viện CNSH); Không thể có kết quả này nếu không có sự giúp đỡ, tạo điều kiện từ các cán bộ trong các Bộ môn: Nuôi trồng Thủy sản; Môi tr- ờng và Bệnh Thủy sản; Ký sinh trùng Thú Y (ĐHNN Hà Nội) và anh chị em Phòng Miễn Dịch (Viện CNSH). Nhân đây xin cảm ơn sự giúp đỡ chân thành từ các thầy, cô, anh chị em đồng nghiệp; Mọi nghiên cứu dù thành công hay ch- a thành công không thể không nhắc đến kinh phí, trong nghiên cứu này ngoài sự nỗ lực từ gia đình Nghiên cứu sinh còn nhận đ- ợc sự giúp đỡ kinh phí từ Dự án Ký sinh trùng truyền lây FIBOZOPA (Viện Nghiên cứu Nuôi trồng Thủy sản 1), Trung tâm Phát triển liên ngành Việt-Bỉ (Tr- ờng ĐHNN Hà Nội). Nhân đây NCS xin gửi lời cảm ơn đến các nhà tài trợ; Trong quá trình thực hiện Luận án Nghiên cứu sinh còn nhận đ- ợc nhiều sự giúp đỡ từ các đối tác cùng thực hiện Dự án FIBOZOPA nh- Trung tâm Quan trắc, cảnh báo Môi tr- ờng và Dịch bệnh (Viện NCNTTTS1), Bộ môn Ký sinh trùng (Viện Thú Y-Quốc gia), Bộ môn KST (Viện KST, sốt rét TW), Bộ môn KST (Viện Sinh thái Tài nguyên Sinh vật), Bộ môn KST (Tr- ờng Đại học Y Mahidol-Thái Lan). Nhân đây tôi xin gửi lời cảm ơn tới toàn thể các anh chị em trong Dự án đã chia sẻ, cung cấp nguồn mẫu cũng nh- thông tin khoa học. Cây có cội, n- ớc có nguồn, không thể không nhắc tới sự động viên, sẻ chia tinh thần từ bố, mẹ, anh chị em hai bên gia đình cùng vợ và 2 con thân yêu đã động viên, khích lệ kịp thời để hoàn thành tốt nghiên cứu này. Hà Nội, ngày 2 tháng 12 năm 2013 Nghiên cứu sinh Kim Văn Vạn iii MCăLC Trang Liăcamăđoan i Li cmăn ii Mc lc iii Danh mc các chữ vit tắt vi Danh mc các bng vii Danh mc các hình ix M ĐU 1 Tính cp thit caăđ tài nghiên cu 1 Mc tiêu nghiên cu 3 ụănghƿaăkhoaăhc và thực tin caăđ tài 4 Nhữngăđóngăgópămi ca Lun án 4 Chngă1.ăTNG QUAN TÀI LIU 5 1.1. Tng quan v vùng nghiên cu 5 1.2. Khái nim v dch t hcăvƠăphngăphápănghiênăcu dch t hc 6 1.3. Tng quan v điătng nghiên cu 7 1.3.1. Hình thái, phân loiăvƠăđặcăđim sinh hc cá chép 7 1.3.2. Cácăgiaiăđon phát trin ca cá chép 10 1.3.3. H thngăng,ănuôiăcáăchép 10 1.4. Tng quan v ký sinh trùng ký sinh trên cá chép 12 1.5. Tng quan v các loài sán lá truyn lây qua cá 14 1.6. Dch t hc các loài u trùng sán lá truyn lây qua cá 16 1.6.1. Vòngăđi ca sán lá truyn lây qua cá 16 1.6.2. Đặcăđim hình thái mt s u trùng sán lá ký sinh trên cá 17 1.6.3. Mt s nghiên cu v u trúng sán lá ký sinh trên cá chép 18 1.7. Tng quan v gen ITS2 đng vt và sán lá 19 1.8. Tng quan v nghiên cu u trùng C. formosanus cá trên th gii và Vit Nam 21 1.8.1. Đặcăđim sinh hc và chu kỳ phát trin 21 1.8.2. Tình hình nghiên cu trên th gii và Vit Nam v C. formosanus 23 1.9. Phòng bnh tng hp do u trùng sán lá trên cá nuôi 27 iv 1.9.1. Ngĕnăchặn sự xâm nhp và kìm hãm sự phát trin u trùng sán lá trong h thng nuôi 27 1.9.2. Nâng cao scăđ kháng ca cá nuôi 32 1.9.3. QunălỦămôiătrng nuôi thích hp và năđnh 33 1.10.ăNgĕnăchặn và xử lý u trùng sán ký sinh trên cá 40 1.11. Mt s hoá chtăthngă dùngă điu tr bnh ký sinh trùng trong nuôi trng thy sn 43 1.11.1.ăSulphatăđng - Copper sulphate - CuSO 4 . 5 H 2 O 43 1.11.2. Formalin - Formol (36 - 38%) 44 Chngă2.ăNIăDUNGăVĨăPHNGăPHỄPăNGHIểNăCU 46 2.1. Ni dung nghiên cu 46 2.2. Vt liu, thiăgianăvƠăđaăđim nghiên cu 46 2.2.1. Vt liu, thiăgianăvƠăđaăđim nghiên cu dch t hc u trùng sán lá 46 2.2.2. Vt liu, thiăgianăvƠăđaăđim nghiên cu gii trình tự gen ITS2 mt s loài sán lá rut nh 47 2.2.3. Vt liu, thiăgianăvƠăđaăđim nghiên cu sự nhăhng ca u trùngă sánă lênă sinhă trng ca cá chép và thử nghim thuc, hoá chtăđiu tr bnh 48 2.3. Phngăpháp nghiên cu 49 2.3.1.ăPhngăphápăthuămu 49 2.3.2. Phngăphápăépămô 52 2.3.3. Phngăphápătiêuăc 52 2.3.4. Nhn dng u trùng sán lá 53 2.3.5.ăPhngăphápăgii trình tự gen ITS2 sán lá rut nh 53 2.3.6. Phngăphápătheoădõiănhăhng caăATSLălênăsinhătrng ca cá chépăhngăvƠăcáăchépăging 55 2.3.7. Thử nghimăđiu tr bnh kênh mang cá chép do ATSL C. formosanus 56 2.3.8. PhngăphápătínhătoánăvƠăxử lý s liu 57 Chngă3.ăKT QU VÀ THO LUN 59 3.1. Kt qu nghiên cu u trùng sán lá ký sinh trên cá chép 59 v 3.1.1. Kt qu kim tra u trùng sán lá trên cá chép bt 59 3.1.2. Kt qu kim tra uătrùngăsánăláătrênăcáăchépăhng 60 3.1.3. Kt qu kim tra u trùng sán lá trên cá chép ging 68 3.1.4. Kt qu kim tra uătrùngăsánăláătrênăcáăchépăthngăphm 83 3.2. Kt qu và tho lun vic gii trình tự gen ITS2 mt s loài sán lá rut nh 89 3.2.1. Kt qu chy PCR 90 3.2.2. Kt qu gii trình tự gen ITS2 91 3.2.3. So sánh sự tngăđng nucleotide trong gen ITS2 95 3.2.4. Kt qu phân tích và xây dựng cây ph h 97 3.3. Kt qu theo dõi nhăhng ca uătrùngăsánăláălênăsinhătrng ca cá chépăhngăvƠăcáăchépăging 98 3.4. Bin pháp phòng bnh do u trùng sán lá mt cách tng hp 101 3.4.1. Chun b tt ao, rungătrcăkhiăng,ănuôiăcáăchép 101 3.4.2. Khử trùngăncăaoătrc khi th ging 101 3.4.3. Chun b cá ging 102 3.4.4. ChĕmăsócăvƠăqun lý cá sau khi th ging 102 3.5. Kt qu thử nghimăđiu tr bnh kênh mang cá chép ging 104 3.5.1. Kt qu dùng CuSO 4 điu tr bnh kênh mang cá chép do ATSL C. formosanus 105 3.5.2. Kt qu dùngă Formalină điu tr bnh kênh mang cá chép do ATSL C. formosanus 108 3.5.3. Kt qu dùngăPraziquantelăđiu tr bnh kênh mang cá chép ging do u trùng sán lá C. formosanus gây ra 110 KT LUN VÀ KIN NGH 113 KT LUN 113 KIN NGH 114 DANH MC CÔNG TRÌNH Ðà CÔNG B CA TÁC GI LIÊN QUAN ÐN LUN ÁN 115 TÀI LIU THAM KHO 116 vi DANHăMCăCÁCăCHăVITăTT Từăvitătt Nghĩaăđyăđ ATSL uătrùngăsánălá CĐN C. formosanus cs. C. sinensis Cngăđănhim Centrocestus formosanus Cộng sự Clonorchis sinensis ĐBSCL ĐngăbằngăsôngăCửuălong ĐBSH H. pumilio H. taichui ĐngăbằngăsôngăHng Haplorchis pumilio Haplorchis taichui FIBOZOPA Fishborne Zoonotic Parasites (Ký sinh trùng truynălơyăquaăcá) HTX Hpătácăxã KHV Kínhăhinăvi KSH Khí sinh hc KST Ký sinh trùng NTTS Nuôi trngăThyăsn TBX Trùng bánh xe TLN Tỷălănhim vii DANHăMCăCÁCăBNG TT Tênăbng Trang 2.1. Danh sách và ngun gc mu sán Haplorchis spp. trong nghiên cu 48 2.2. Thông tin v vic thu mu cá chép gingăđ phân tích ATSL ký sinh 50 2.3. Thông tin v vic thu mu cá chép ging theo mùa 50 2.4. Thông tin v vic thu muăcáăchépăthngăphm 51 2.5. B trí thí nghim thử thuc, hoá chtăđiu tr bnh kênh mang cá chép do ATSL C. formosanus gây ra 57 3.1. Kt qu kim tra u trùng sán lá trên cá chép bt 60 3.2. Kt qu kimătraăATSLăkỦăsinhătrênăcáăchépăhngătừ cácăaoăng 61 3.3. Tỷ l vƠăCngăđ nhimăATSLăkỦăsinhătrênăcáăchépăhng 62 3.4a. Thành phn và tỷ l nhimăATSLăkỦăsinhătrênăcáăchépăhng 64 3.4b. Tn sut xut hinăloƠiăATSLăkỦăsinhătrênăcáăchépăhng 64 3.5. Cngăđ nhimăATSLăvƠăcăquanăkỦăsinhătrênăcáăchépăhng 66 3.6. Kt qu kim tra ATSL cá chép ging trong các h thng nuôi 69 3.7. Cngăđ nhim ATSL cá chép ging trong các h thng nuôi 70 3.8. Thành phn loài và tỷ l nhim ATSL ký sinh trên cá chép ging 71 3.9. Tn sut nhim các loài ATSL trên cá chép ging 73 3.10. Tng s ATSL từng loài ký sinh trên cá chép ging trong các h thng nuôi 73 3.11. Kt qu kim tra ATSL trên cá chép ging theo mùa 75 3.12. Kt qu kimătraăcngăđ nhim ATSL trên cá chép ging theo mùa 77 3.13. Thành phn loài, s cá chép ging nhim và tng s ATSL trong v Xuân-Hè 78 3.14. Thành phn loài và tỷ l ATSL ký sinh trên cá chép ging trong v Xuân-Hè 79 3.15. Cngăđ nhim ATSL ký sinh trên cá chép ging trong v Xuân-Hè 80 3.16. Thành phn loài, s cá chép ging nhim và tng s ATSL trong v Thu-Đông 81 viii 3.17. Thành phn loài và tỷ l ATSL ký sinh trên cá chép ging trong v Thu-Đông 82 3.18. Cngăđ nhim từng loi ATSL ký sinh trên cá chép ging trong v Thu-Đông 83 3.19. Kt qu kim tra tỷ l nhim ATSLătrênăcáăchépăthngăphm 84 3.20. Cngăđ nhimăATSLătrênăcáăchépăthngăphm 85 3.21. Thành phn loài và s mu cá chép thngăphm nhim ATSL 87 3.22. Sự tngăđng các nucleotides trong vùng gen ITS2 giữa các Haplorchis spp. 96 3.23. Kt qu theo dõi sự nhăhng ca ATSL C. formosanus lên tcă đ sinhătrng ca cá chép ging 99 3.24. Tỷ l vƠăCĐNăATSLăC. formosanus mang cá chép ging 100 3.25. Kt qu điu tr bnh kênh mang cho cá chép 106 3.26. Kt qu điu tr bnh kênh mang cho cá chép 107 3.27. Kt qu điu tr bnh kênh mang cho cá chép do ATSL C. formosanus bằngăphngăphápăngơmăFormalin 108 3.28. Kt qu điu tr bnh kênh mang cho cá Chép do ATSL C. formosanus bằng phngăphápătắm Formalin 109 3.29. Kt qu điu tr bnh kênh mang cho cá chép do u trùng sán lá C. formosanus bằngăphngăphápătrn thuc Praziquantel vào thcăĕn 111 ix DANHăMCăCÁCăHỊNH TT Tên hình Trang 1.1. Cá chép (Cyprinus carpio) 8 1.2. Vòngăđi ca sán lá truyn lây qua cá 17 1.3. u trùng sán lá rut nh Haplorchis pumilio 18 1.4. u trùng sán lá rut nh Haplorchis taichui 18 1.5. Vùng gen ribosom ca h gen nhân t bào (18S - 5,8S - 28S)ăvƠăđim bám mi (3SF - BD2R)ănhơnăđon gen ITS2. 20 1.6. u trùng sán lá song ch Centrocestus formosanus 22 1.7. Cu trúc phân tử ca Praziquantel (C 19 H 24 N 2 O 2 ) 41 3.1. Thành phn loài ATSL kỦăsinhătrênăcáăchépăhngă21ăngƠyătui 65 3.2. Thành phn loài ATSL kỦăsinhătrênăcáăchépăhngă28ăngƠyătui 66 3.3. Cá chépăhngăb kênh nắp mang do nhim ATSL C. formosanus 67 3.4. Cngăđ nhim ATSL ký sinh trên cá ging 74 3.5. Tỷ l loài ATSL ký sinh trên cá chép ging trong v Xuân-Hè 79 3.6. Tỷ l loài ATSL ký sinh trên cá chép ging trong v Thu-Đông 82 3.7. Tỷ l nhim từng loi ATSL trong cá chépăthngăphm 87 3.8. Cngăđ nhim ATSL cá chépăthngăphm 88 3.9. Sn phm PCR vùng gen ITS2 trên thch agarose 1%. 91 3.10. Trình tự vùng gen ITS2 ca sán lá Haplorchis spp. thu Bắc Vit Nam và Thái lan 94 3.11. Phân tích cây ph h ca sán lá Haplorchis spp. dựa trên trình tự nucleotide caăđon gen ITS2 97 3.12. Cá chépăhngăb bnh kênh mang do ATSL 99 3.13. u trùng sán lá C. formosanus sng ký sinh trên mang cá chép ging 112 3.14. u trùng sán lá C. formosanus chtă sauă khiă điu tr bằng thuc Praziquantel 112 [...]... m l n trong phân lo i và nh n d ng m t s ATSL truy n lây qua cá Xu t phát từ những lý do trên chúng tôiă đưă ti n hành thực hi nă đ tài: Nghiên c u d ch t h c một s loài u trùng sán lá truyền lây qua cá chép (Cyprinus carpio ) và bi n pháp phòng, tr ” M cătiêu nghiên c u Tìmăraăsựăphơnăb ăcácălo iăATSL truy n lây trên cá chép các giaiăđo n phát tri n, trong các h th ng nuôi và tác h i c a ATSL nhằm... nă cá đ ă kỦă sinhă trênă da,ă mắt,ă vơy,ă mang, c ă c aă cá hìnhă thƠnhă uă trùng metacercariae.ă Vòngăđ iă c aă sán lá truy nă lơyă qua cá đ că tómă tắt,ă môă ph ngă l iătrongăHình 1.2 Nguồn: Dự án FẤBOZOPA Hình 1.2 Vòngăđ i c a sán lá truyền lây qua cá 1.6.2 Đặc điểm hình thái một số ấu trùng sán lá ký sinh trên cá 1.6.2.1 u trùng sán lá ruột nhỏ ảaplorchis pumilio, Loos 1896 u trùng sán cóăhìnhăôvanădƠiăkho... ă hi nă cá chép ă giaiă đo nă nh ă ngătừ cá b tătrongăkho ngă1ătháng Cá chép gi ng: Cá chép gi ngălƠ cá đ că ngălênătừ cá chép h ng, cá cóă đ ătu iătừă1,5 thángătr ălên,ătuỳătheoăkíchăcỡămƠăcóăkháiăni m cá chép gi ngăc pă1,ă2ă và 3 t ngăđ ng cá gi ngănh ă5 - 10ăg/con, cá gi ngănhỡă20 - 50ăg/conăvƠ cá gi ngă l nă100 - 300g/con Cá chép th ngăph m: Cá chép th lƠmăthực ph măchoăng ngăph mălƠ cá chép đ... cácămùaătrongănĕmăvƠătrongăcácăh ăth ngănuôi 1.3 T ngăquanăvềăđ iăt ng nghiên c u 1.3.1 Hình thái, phâ n lo i và đặc điểm sinh học cá chép V ăphơnălo i cá chép: B cá chép: Cypriniformes H cá chép: Cyprinidae Gi ng cá chép: Cyprinus Loài cá chép: Cyprinus carpio (Linnaeus, 1758) Cá chép Cyprinus carpio (Linnaeus,ă 1758)ă lƠă loƠiă cá ngon,ă cóă giáă tr ă kinhă t ă cao, cá đ căphơnăb ăr tăr ngătrênăth ăgi i,ătrừăNamăMỹ,ăMadagascaăvƠăChơuăÚc,ă... iăchu i Nguồn: Dự án FẤBOZOPA Hình 1.3 u trùng sán lá ruột nh Hình 1.4 u trùng sán lá ruột nh Haplorchis pumilio Haplorchis taichui 1.6.3 Một số nghiên cứu về ấu trúng sán lá ký sinh trên cá chép Khi nghiên c uăv ăvòngăđ iăc a sán lá ru tă H pumilio nĕmă2006ăUmadeviă vƠă Madhaviă choă th yă ATSL nhi mă vƠoă c ă đuôiă c aă cá chép ă ngƠyă tu iă th ă 15.ă Theoă nghiên c uă c aă Nguy nă Th ă H pă vƠă... nălơy qua cá chép m tăcáchăđ ngăb ătrênăcácăgiaiăđo năphátătri năvƠăcác h ăth ngănuôi cá chép ăkhuăvựcăphíaăBắc,ăVi tăNam.ăĐặcăbi tăk tăqu nghiên c uă gi i trìnhătựăgenăc aăcác các loài sán lá ăcácăgiaiăđo năphátă tri nă choăth yăsựăsaiă khácăgiữaă2ăloƠi sán lá ru tănh ăcóăỦănghƿaăkhoaăh căchuyênăsơuătrongăv năđ ăphơnă lo i sán lá d iăgócăđ ăsinhăh căphơnătửăvƠăxơyădựngăcơyăph ăh choăth yăm i liên quanăchặtăgiữaăcácăgiaiăđo... nuôi cá chép Đ iăv i cá chép trongăgiaiăđo nă ngătừ cá b tălên cá h ngăch ăy uălƠă ngă trongăcácăaoăđ tăbằngăcáchăgơyămƠuăt oăth căĕnătựănhiênăvƠăcóădùngăthêmăth căĕnă b ăsungăhoặcăcámăcôngănghi p,ătrongăgiaiăđo nănƠyăaoă khôngăth ăl n cá khácădo cá chép th ngăch ă ngămình cá chép ngăđẻăs m h năkhiămƠ các cá khácăch aăchoă đẻ.ăH nănữaăgiaiăđo nănƠy cá ĕnăđ ngăv tăphùăduălƠăchínhăgi ngăcácăloƠi cá khácă... lênă cá chép gi ng (cá- lúa).ă M că đíchă đ uă t nă d ngă mặtă n c,ăt năd ngăth căĕnătựănhiênầ Nuôi cá chép th cácăloƠi cá n chép th ngăph m:ăKhuăvựcăphíaăBắc cá chép đ cănuôiăghépăv iă căng tăkhácătrongăaoălƠăchính.ăTrongăcácăaoănuôi cá thôngăth ngăđ ng cá cănuôiăghépăv iătỷăl ă7 - 10%ăt ngăs cá th ,ăn uătĕngătỷăl ăth cá chép s ă ch mă l nă doă khôngă cungă c pă đ ă th că ĕnă choă cá. ă Mặcă dùă cá ... Trong các loài cá nuôi ghép truy n th ng, cá chép là loài cá có ch tă l ng th tă th m,ă ngonă đ bi n nhi uă mónă ĕn.ă Cá chép đ c nhi uă ng că i tiêu dùng lựa ch n trong ch ng,ă nuôiă quanhă nĕmă trongă nhi u h th ng nuôi và trong tự nhiên Trong quáătrìnhă ngănuôi cá chép ch a n nhi u lo i u trùng sán cóănguyăc ătruy n lây sang ng iăvƠăđ ng v t khi sử d ng thực ph m khôngăđ c n uăđ nhi tămƠăch aăcó nghiên c... nayăđưănh păcácădòng cá chép từăIndonesia,ăHungaryầăđưălai v i cá chép Vi tăđ ă t oă conă laiă vƠă đ că nuôiă ph ă bi n.ă Doă đặcă đi m uă th ă laiă c aă conă laiă giữaă cá chép Vi tă (chép trắng)ă v iă cá chép Hungă vƠă cá chép Indonesiaă lƠă cá cóă t că đ ă sinhătr ng,ătỷăl ăs ngăvƠăkh ănĕngăkhángăb nhăcaoăh n cá thu nănênăhi nănayă cácăh ădơnătrongăc ăn căsửăd ngăch ăy u cá chép laiăđ ănuôiăth . lây qua cá 14 1.6. Dch t hc các loài u trùng sán lá truyn lây qua cá 16 1.6.1. Vòngăđi ca sán lá truyn lây qua cá 16 1.6.2. Đặcăđim hình thái mt s u trùng sán lá ký sinh trên cá. hc cá chép 7 1.3.2. Cácăgiaiăđon phát trin ca cá chép 10 1.3.3. H thngăng,ănuôi cá chép 10 1.4. Tng quan v ký sinh trùng ký sinh trên cá chép 12 1.5. Tng quan v các loài sán lá. KIMăVĔNăVN NGHIÊN CU DCH T HC MT S LOÀI U TRÙNG SÁN LÁ TRUYN LÂY QUA CÁ CHÉP (Cyprinus carpio) VÀ BIN PHÁP PHÒNG, TR CHUYÊN NGÀNH: KÝ SINH TRÙNG VÀ VI SINH VT HC