Xác định chỉ thị phân tử ssr liên kết với gen sh2 và su1 trên các dòng ngô ngọt tự phối

Vietnam J Agri Sci 2023, Vol 21, No 2: 149-160 Tạp chí Khoa học Nơng nghiệp Việt Nam 2023, 21(2): 149-160 www.vnua.edu.vn XÁC ĐỊNH CHỈ THỊ PHÂN TỬ SSR LIÊN KẾT VỚI GEN sh2 VÀ su1 TRÊN CÁC DỊNG NGƠ NGỌT TỰ PHỐI Nguyễn Trung Đức1*, Nguyễn Quốc Trung2, Phạm Quang Tuân1, Nguyễn Thị Nguyệt Anh1, Phạm Thu Hằng3, Phạm Xuân Hội3, Vũ Văn Liết4 Viện Nghiên cứu Phát triển trồng, Học viện Nông nghiệp Việt Nam Khoa Công nghệ sinh học, Học viện Nông nghiệp Việt Nam Viện Di truyền Nông nghiệp, Viện Khoa học Nông nghiệp Việt Nam Khoa Nông học, Học viện Nông nghiệp Việt Nam * Tác giả liên hệ: ntduc@vnua.edu.vn Ngày nhận bài: 09.08.2022 Ngày chấp nhận đăng: 02.03.2023 TÓM TẮT Nghiên cứu tiến hành xác định thị SSR tối ưu liên kết với gen shrunken2 (sh2), sugary1 (su1) kiểm soát độ ứng dụng chọn lọc 30 dịng ngơ tự phối S3 Bốn thị SSR liên kết chặt với gen sh2 (umc1320, umc2276, umc1273, bnlg1257) bốn thị SSR liên kết chặt với gen su1 (umc1142, umc1031, bnlg1937, umc2061) khảo sát ba dòng đối chứng Kết cho thấy thị umc2276 umc1031 phù hợp để xác định gen sh2 su1, tương ứng Ứng dụng hai thị khảo sát 30 dịng ngơ tự phối S3 chọn bảy dòng đồng hợp tử gen lặn sh2sh2 (D04, D09, D13, D21, D22, D24, D25), hai dòng đồng hợp tử gen lặn su1su1 (D19, D30) hai dòng đồng hợp tử lặn kép sh2sh2su1su1 (D11, D14) Đánh giá kiểu hình xác nhận tương đồng với kiểu gen cho thấy độ xác cao thị phân tử chọn Nhóm dịng đồng hợp tử lặn kép sh2sh2su1su1 có tổng lượng chất rắn hịa tan cao nhóm dịng sh2sh2 vượt trội so với nhóm dịng su1su1 Hai thị SSR mười dòng mang gen mục tiêu sở để phát triển nhanh dòng ưu tú xây dựng chương trình ứng dụng thị phân tử chọn giống ngô thực phẩm Việt Nam Từ khóa: Chỉ thị SSR, ngơ ngọt, sh2, su1, sh2sh2su1su1 Identification of SSR Markers Linked to sh2 and su1 Genes in Sweetcorn Lines ABSTRACT The objectives of this study were to identify SSR markers closely associated with shrunken2 (sh2) and sugary1 (su1) genes and application for selecting target genotypes on 30 S3 sweet corn lines Four SSR markers closely associated with the sh2 gene (umc1320, umc2276, umc1273, bnlg1257) and four SSR markers closely associated with the su1 gene (umc1142, umc1031, bnlg1937, umc2061) were investigated in three check lines The results showed that the markers umc2276 and umc1031 were suitable to identify the sh2 and su1 genes, respectively Using these markers for screening on 30 S3 sweet corn lines identified lines homozygous for recessive gene sh2sh2 (D04, D09, D13, D21, D22, D24, D25), lines homozygous for recessive gene su1su1 (D19, D30) and lines double homozygous recessive for sh2sh2su1su1 (D11, D14) Phenotypic evaluation confirmed the similarity to genotypes and proved high accuracy of the selected molecular markers Total soluble solids of the sh2sh2su1su1 lines were higher than sh2sh2 lines and superior to that of the su1su1 lines These SSR markers and 11 selected genotypes played a vital role for the rapid development of high-quality inbred lines for specialty corn hybrid breeding in Vietnam Keywords: SSR markers, sweet corn, su1, sh2, sh2sh2su1su1 ĐẶT VẤN ĐỀ Ngô (Zea mays L var rugosa Bonaf.) giống ngơ cị hm lỵng ỵng cao, kt quõ xuỗt hin t nhiờn cỷa t bin ln cỷa gen nhỵ su1, sh2, bt, se iu khin vic chuyn ỵng thnh tinh bt bờn nội nhü cûa hät ngô (Tracy & cs., 2019) Ngồi ra, ngơ cịn chĀa nhiều 149 Xác định thị phân tử SSR liên kết với gen sh2 v su1 trờn cỏc dũng ngụ ngt t phi chỗt dinh dỵng thit yu cho c th nhỵ cỏc hp chỗt axit pantothenic, folate, vitamin B6, niacin, kali, vitamin E, cỏc chỗt x, chỗt khỏng oxy húa (Zhang & cs., 2017; Baseggio & cs., 2020) Xuỗt khốu ngụ ngt ụng länh tồn cỉu trð giá 428,5 triệu USD vĆi số lỵng 412.245 tỗn, ngụ ngt bõo quõn tỵng t tr giỏ 1.002,6 triu USD vi lỵng xuỗt khốu ọt 784.282 tỗn (Faostat, 2021) Tọi Vit Nam, phổn ln cỏc ging ngụ ngt thỵng trờn th trỵng l ging lai nhỵ SW1011, GoldenCob, Hi-brix 58 nhờp ni t Thỏi Lan ỵc bỏn vi giỏ thnh họt ging cao, dao động tÿ 700.000 tĆi 1.200.000 đồng/kg Täi Việt Nam, gỉn đåy nghiên cĀu chọn täo giống ngơ ỵng Lai L89 (Nguyn Th Nhi & cs., 2020) Cỏc nghiờn cu c bõn trờn cõy ngụ ngt nhỵ ỏnh giỏ khõ nởng chu họn ỵc tin hnh bi Phọm Th Thanh Hỵng & cs (2019), phỏt trin dủng ó ỵc tin hnh bi Trổn Th Thanh H & cs (2020) v Nguyn Trung c & cs (2020) Nhỵ vờy, cỏc ging ngụ ngt ỵu th lai ỵc chn tọo v thỵng tọi Vit Nam cũn thiu, chỵa ỏp ng nhu cổu th trỵng Cỏc nghiờn cu c bõn ó ỵc tin hnh nhỵng cụng ngh ct lừi phỏt triển xác đðnh dịng ngơ mang gen cý th iu khin quỏ trỡnh chuyn hũa ỵng v tinh bt chỵa ỵc bỏo cỏo tọi Vit Nam Trong hät ngơ, phỉn nội nhü bao gồm không 80% tinh bt, 10% protein, 2% ỵng v 8% chỗt x (Tracy & cs., 2019) Tinh bt thỵng chim 73% tng trng lỵng họt, ũ 25% tinh bt l amylose, phỉn cịn läi bao gồm amylopectin (Wilson & cs., 2004) Cỏc t bin kiu hỡnh bỗt thỵng hät ngơ gịp phỉn đáng kể vào việc tìm ỵng sinh tng hp tinh bt Trong s ny, cỏc gen nhỵ brittle2 (bt2), shrunken1 (sh1) v shrunken2 (sh2) hỗ trĉ să hình thành glucose, enzyme ỵc mó húa bi amylose extender1 (ae1), sugary1 (su1) v waxy1 (wx1) sõn xuỗt cỏc sõn phốm cui cựng cûa q trình chuyển hóa tinh bột, amylose amylopectin (Whitt & cs., 2002; Tracy & cs., 2019) Trong đò, hai gen ln sh2 v su1 ó ỵc s dýng rộng rãi để phát triển giống ngô toàn giĆi (Revilla & cs., 2021) Gen su1 dài 11,7kb nìm vai ngín cûa nhiễm síc thể 4S, mã hóa 150 enzyme phân hûy tinh bột SU1 isoamylase thûy phân liên kết -1,6 glycoside đòng vai trñ quan trọng să phát triển cûa tinh thể amylopectin (Feng & cs., 2008; Tracy & cs., 2019) Các dũng ngụ ngt mang gen ln su1 s hu lỵng phytoglycogen cao gỗp 10 lổn so vi ngụ thỵng, lm cho hät đỉy đðn bóng thu hộch (Hossain & cs., 2015) Gen lðn sh2 nìm nhiễm síc thể số 3L mã hóa tiểu đĄn vð lĆn cûa AGPase (adenosine diphosphate glucose pyrophosphorylase) xỳc tỏc bỵc gii họn tc ỵng sinh tng hp tinh bt (Hu & cs., 2021; Ruanjaichon & cs., 2021), ó ỵc sā dýng rộng rãi để phát triển giống ngô ngơ siêu ngọt, chiếm không 70% thð phỉn giống ngô giĆi (Revilla & cs., 2021) Ở giai độn chín sĂa, giống siêu mang gen ln sh2 tớch tý nhiu ỵng hn (29,9% sucrose), cao hn gỗp ba lổn so vi ngụ cú t bin su1 (10,2% sucrose) v cao hn gỗp tỏm lổn ngụ bỡnh thỵng (Tracy & cs., 2019) ng dýng chợ thð phân tā chọn giống (MAS) ngô ngọt, Hossain & cs (2015) tiến hành lêp bân đồ gen xác nhên chỵ thð SSR liên kết chðt vĆi gen sh2 (umc1320, umc2276, umc1273, bnlg1257) chỵ thð SSR liên kết chðt vĆi gen su1 (umc1142, umc1031, bnlg1937, umc2061) Vi ỵu im ng tri, chi phớ thỗp, hiệu q khâ nëng tái lêp cao, chỵ th SSR ny ó v ang ỵc s dýng nghiên cĀu đa däng di truyền MAS (Mehta & cs., 2017a; Baveja & cs., 2021) Tuy nhiên, chỵng trỡnh chn ging thỵng s dýng quổn th ngụ khác Vì vêy, việc xác đðnh chỵ thð phự hp nhỗt v s dýng xỏc nh gen kiểm soát độ cûa hät giúp nhà chọn giống phát triển giống ngô lai phù hĉp vi chi phớ thỗp nhỗt thi gian ngớn nhỗt Ngơ có nguồn gốc ơn đĆi, tiến hố tÿ ngơ đá cị phổ di truyền hẹp (Tracy & cs., 2019) Việt Nam không phâi nĄi phát sinh nguồn gen ngô ngọt, vêt liệu ngô phổn ln phỏt trin t cỏc ging thỵng Đåy thách thĀc lĆn nghiên cĀu phát triển giống ngơ mĆi, thích Āng vĆi điều kiện khí hêu nhiệt đĆi täi Việt Nam Nguyễn Trung Đức, Nguyễn Quốc Trung, Phạm Quang Tuân, Nguyễn Thị Nguyệt Anh, Phạm Thu Hằng, Phạm Xuân Hội, Vũ Văn Liết Do vêy, nghiên cĀu tiến hành xác đðnh chỵ th phõn t SSR ti ỵu liờn kt vi gen sh2, su1 Āng dýng chọn lọc dòng ngụ ngt t phi phýc vý chỵng trỡnh chn ging ngụ thc phốm chỗt lỵng cao, thớch ng vi bin đổi khí hêu täi Việt Nam PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Vật liệu Vêt liệu nghiên cĀu gồm dòng thn ngơ tẻ vàng D105, dịng ngơ Sh922 (su1su1) rút dịng tÿ giống Golden Bantam, dịng ngơ SWsyn1 (sh2sh2) rút dịng tÿ giống ngơ lai Sugar75 30 dịng ngơ tă phối S3 (ký hiệu D01-D30) Ging Golden Bantam mang gen su1 ó ỵc bỏo cỏo bći Brewbaker & Martin (2015) giống ngô Sugar75 mang gen ln sh2 ó ỵc bỏo cỏo bi Mehta & cs (2017b) 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Thiết kế thí nghiệm Thí nghiệm đồng ruộng đánh giá kiểu hình 30 dịng ngơ tă phối S3 dũng thuổn i chng vý ụng 2022 ỵc b trí tn tă khơng nhíc läi, diện tích thí nghiệm 30m2, trồng mêt độ hàng cách hàng 60cm × 25cm cách cây, täi Viện Nghiên cĀu Phát trin cõy trng Chn lc chợ th SSR ti ỵu xác đðnh gen sh2 su1 ba dịng thn đối chĀng D105 (SH2SH2SU1SU1), Sh922 (SH2SH2su1su1) SWsyn1 (sh2sh2 SU1SU1) Chợ th ti ỵu ỵc (A) Dũng D105 (SH2SH2SU1SU1) chn tip týc ỵc ng dýng xỏc nhờn dũng mang gen mýc tiêu tÿ ADN tách chiết tÿ méu cûa 30 cá thể có kiểu hình đäi diện cho 30 dịng tă phối ć giai độn phun râu Các cỏ th ny ỵc t phi v xỏc nhờn biu gen mýc tiêu dăa kiểu hình Chëm sịc, bón phân phịng trÿ sâu bệnh häi theo tiêu chuèn Việt Nam TCVN 13381-2:2021 Nghiên cĀu tiến hành theo dõi 13 chỵ tiêu nơng học gồm: thąi gian tung phỗn (TP, ngy), phun rõu (PR, ngy), thi gian sinh trỵng (TGST, ngy), chờnh lch tung phỗn - phun rõu (ASI, ngày) chiều cao (CCC, cm), chiều cao đòng bớp (CDB, cm), chiu di bớp (ChDB, cm), ỵng kớnh bíp (DKB, cm), số hàng hät/bíp (HHB), số hät/hàng (HH), lỵng 100 họt (KL100, g), nởng suỗt cỏ th (NSCT, g) v tng lỵng chỗt rớn hũa tan (TSS, Brix) TSS ỵc o bỡng vi trớc k in t ATAGO PAL-1 (Nhờt Bõn) giai oọn thu bớp tỵi (20-24 ngy sau thý phỗn) theo phỵng phỏp cỷa Kleinhenz & Bumgarner (2012) 2.2.2 Tách chiết ADN ADN cûa mộu lỏ ngụ ỵc tỏch chit theo phỵng phỏp cỷa Dellaporta & cs (1983) giai oọn V3, lỏ tỵi cỷa mi cỏ th ọi din cho dủng ngụ ỵc thu thêp chuyển tÿ khu thí nghiệm đồng ruộng v phũng thớ nghim sỗy khụ v nghin Cỏc cỏ th ny ỵc ỏnh dỗu v trỡ bỡng phỵng phỏp t phi theo Shull (1909) (B) Dũng Sh922 (SH2SH2su1su1) (C) Dịng SWsyn1 (sh2sh2SU1SU1) Hình Cây dạng hạt khơ dịng bố mẹ 151 Xác định thị phân tử SSR liên kết với gen sh2 su1 dịng ngơ tự phối Bâng Các thị SSR sử dụng khâo sát có mặt gen su1 sh2 Gen sh2 su1 Tên thị Khoảng cách đến gen (cM) Trình tự xi (5’-3’) Trình tự ngược (5’-3’) umc1320 1,8 TGCGAATCTATACCATAGGCA CTCTTTTAGCAGTGTGCCGAATTT umc2276 1,2 CTAGGTAGCCAGCTAGGTACGGGT AGTGGAGCTTCTTCATTCTACCG umc1273 3,0 GTTCGCTGCTGCTTCTTATATGCT AATTGGCGCAGGCTATAGACATTT bnlg1257 5,1 CGGACGATCTTATGCAAACA ACGGCTTGCGACAGGATATT umc1142 3,2 CCGAAAACCCATTCTTCTAGCATC GTGCGGTGTTCTCTCTTTCACTCT umc1031 3,1 TTGGGTTCATACCTCCTAGGAACA ACGTGGACAACCAGTCTATCAACA bnlg1937 1,4 AATGCTCGGTCCACAGAATC AACTGGAGCCAAAAGTGGTG umc2061 0,3 GTCTGGAGAACTCCCTACCCATTC TAGCTTGAGAGACCGGAACAGC Nguồn: Hossain & cs (2015) Mộu lỏ sau lm khụ ỵc tiến hành cít nhó bìng phanh thành tÿng độn 0,5-4cm vào ống 1,5ml ghi sïn tên giống; Nghiền méu bìng máy nghiền bi (bead shocker) ć 1.800 vịng/phút, 60s, mi lổn nghợ 10s, lp lọi hai lổn; Thờm 600àl m chit xuỗt (10mM Tris, pH 8,0; 1mM EDTA, pH 8,0) (đã û ć 65C) đâo Sau đò mang méu û ć 65C 30 phút; Thêm 1/3 lỵng 5M potassium acetate so vi th tớch dung dch m chit xuỗt mộu vo tỷ lọnh thi gian 30 phút; Ly tâm ć 12.000 vòng/phút 15 phút ć 4C; Cèn thên hút phỉn dung dðch phía (khoõng 400àl) sang ng eppendorf mi; Thờm lỵng tỵng ỵng Isopropanol đâo đều; Ly tâm ć 14.000 vòng/phút 30 phút, ć 4C; Đổ bó cèn thên phỉn dung dðch phía trên, tránh để dung dðch rĆt sang giếng khác không làm rĄi kết tûa; Rāa kết tûa bỡng 200àl ethanol 70%, khụng lớc trn chợ nhú tng giọt nhẹ nhàng; Ly tâm ć 14.000 vòng/phút, 10 phút ć 4C, đổ bó phỉn dung dðch phía trên; Lội bó hết ethanol ć nhiệt độ phịng hc ć 37C; Thờm 100àl nỵc kh ion hũa tan kt tỷa ADN Kim tra ADN tng s thu ỵc bỡng cách điện di 20 phút ć 100V, sā dýng gel agarose 1% pha sïn vĆi ethidium bromide µg/ml Quan sỏt kt quõ in di dỵi ủn UV v chýp õnh Phõn ng PCR ỵc thc hin vi bỵc biến tính ć 95C phút vĆi thể tích phân Āng 20µm Điều kiện cho chu kĊ nhỵ sau: bin tớnh 95C 30 giõy, gín mồi ć 53-50C 30 giây, kéo dài mäch ć 72C 30 giây, kết 152 thúc kéo dài mäch ć 72C phút GiĂ méu PCR ć nhit dỵi 15C Sõn phốm PCR ỵc in di gel agarose 4% pha sïn vĆi Ethidium bromide µg/ml ć hiệu điện 250V thąi gian tÿ 40-50 phỳt Quan sỏt kt quõ in di dỵi ủn UV chýp ânh 2.3 Phân tích số liệu Số liu ỵc tng hp v tớnh trung bỡnh trờn phổn mềm Microsoft Excel Phân tích thành phỉn phân cým dăa thành phỉn bìng gịi “factoextra” “FactoMineR” phæn mềm R 4.1.3 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Kết quâ xác định thị phát gen su1 sh2 Kết q khâo sát chỵ th xỏc nh gen sh2 cho thỗy cõ ba chợ thð gồm umc1320, bnlg1257 umc2276 cho bëng ADN tỵng t ũ phồn bit ỵc mộu mang gen trội D105 méu mang gen lðn SWsyn1, ũ phõn bit rừ nhỗt l chợ th umc2276 (Hỡnh 2A) Dăa thơng tin không cách cûa chỵ thð đối vĆi locus gen SH2, chỵ thð umc2276 nỡm gổn gen sh2 nhỗt l 1,2 cM (Hossain & cs., 2015) Nhỵ vờy chợ th umc2276 l ti ỵu nhỗt s dýng xỏc nh gen sh2 dịng ngơ Khâo sát chỵ thð xác đðnh gen su1 cho thỗy ba chợ th gm umc1142, bnlg1937 v umc1031 phõn bit ỵc mộu mang gen tri D105 v méu Nguyễn Trung Đức, Nguyễn Quốc Trung, Phạm Quang Tuân, Nguyễn Thị Nguyệt Anh, Phạm Thu Hằng, Phạm Xuân Hội, Vũ Văn Liết mang gen lðn Sh922 (Hình 2B) Trong bốn chỵ thð umc1142, umc1031, bnlg1937 umc2061, theo cơng bố cûa Hossain & cs (2015) bân đồ gen su1 thỡ chợ th umc1142 nỡm xa gen su1 nhỗt umc2061 nỡm gổn nhỗt, khoõng 0,3cm (Hossain & cs., 2015) Tuy nhiờn chn ỵc chợ th thớch hĉp việc xác đðnh chọn lọc dòng/giống mang gen su1 kết quâ điện di sau chäy PCR chợ th ny phõi phõn bit ỵc mộu mang gen đồng hĉp tā trội SU1SU1 mang gen đồng hp t ln su1su1 Nhỵ vờy, da vo kt quõ sng lc ó chn ỵc cp mi umc1031 l thớch hp nhỗt chn lc cỏc dũng ngụ ngt mang gen su1 (Hình 2B) Trong nhĂng thêp kČ qua, nhỗt tỏm gen ó ỵc ỏp dýng cỏc chỵng trỡnh nhồn ging ngụ ngt, thnh cụng nhỗt l sh2, sau đò su1 (Tracy & cs., 2019) Mðc dù, đối vĆi ngơ thuộc nhóm siêu sh2 kiểm tra đồng hĉp tā lðn sh2 dăa kiểu hình hät nhën nheo tiến hành lai vĆi dịng sh2 biết kiểu gen Ứng dýng chỵ thð SSR giúp xác đðnh dñng đồng hĉp tā gen lðn sh2 ć giai đoän däng dð hĉp tā cûa chúng, giúp tiết kiệm thąi gian, cơng sĀc chi phí lai täo Gen lðn sh2 lm chờm quỏ trỡnh chuyn húa ỵng sang tinh bột câ không làm länh mang läi lĉi cho giống ngô siêu phù hĉp hĄn cho thu hoäch bâo quân kéo dài Do vêy, sā dýng chỵ thð phân tā tÿ nghiên cĀu ny xỏc nh ỵc cỏc dũng mang gen su1 v sh2 s cũ nghùa rỗt ln, va phỏt trin cỏc ging ngụ ngt chỗt lỵng cao v cú thể phát triển giống chín chêm ć vùng nhiệt đĆi, đðc biệt điều kiện khí hêu mùa hè ć miền Bíc Việt Nam SWsyn1 D105 D01 D02 D03 D04 D05 D06 D07 D08 D09 D10 D11 D12 D13 D14 D15 D16 D17 D18 D19 D20 D21 D22 D23 D24 D25 D26 D27 D28 D29 D30 Hình (A) Kết quâ thử nghiệm cặp mồi xác định gen sh2 phân biệt mẫu D105 (khơng có gen) mẫu SWsyn1 (đồng hợp tử gen lặn sh2); (B) cặp mồi xác định gen sh2 phân biệt mẫu D105 (không có gen) Sh922 (đồng hợp tử gen lặn su1) Hình Hình ânh điện di xác định gen sh2 30 cá thể ngô thị umc2276 153 Sh922 D105 D01 D02 D03 D04 D05 D06 D07 D08 D09 D10 D11 D12 D13 D14 D15 D16 D17 D18 D19 D20 D21 D22 D23 D24 D25 D26 D27 D28 D29 D30 Xác định thị phân tử SSR liên kết với gen sh2 su1 dòng ngơ tự phối Hình Hình ânh điện di xác định gen su1 30 cá thể ngô thị umc1031 3.2 Kết quâ xác định gen su1 sh2 dịng ngơ tự phối Ứng dýng chỵ thð umc2276 umc1031 khâo sát 30 cá thể đäi diện cûa 30 dịng ngơ t phi ó chn lc ỵc dủng mang gen đồng hĉp tā lðn sh2sh2 bao gồm D04, D09, D11, D13, D14, D21, D22, D24, D25 (Hình 3) bốn dũng ng hp t gen ln su1su1 cỹng ỵc phỏt bao gồm D11, D14, D19 D30 (Hình 4) Kết hĉp kết q kiểm tra cûa câ hai chỵ thð phân tā phát hai dñng đồng hĉp tā lðn kép sh2sh2su1su1 gồm D11 D14 Chỵ thð SSR có tính đồng trội tă nhiên chúng phân biệt thể dð hĉp tā vĆi thể đồng hĉp tā Kết quâ nghiên cĀu cüng chỵ hai dịng D15 D20 đồng hĉp tā trội SH2SH2SU1SU1, däng dð hĉp tā SH2sh2 SU1su1 cỹng ó ỵc phỏt hin Trong ũ, 10 dủng dð hĉp tā SH2sh2SU1su1 gồm D01, D02, D03, D06, D07, D08, D16, D17, D23, D28; 05 dòng di hĉp tā SH2sh2SU1SU1 gồm D10, D12, D18, D27, D29; 02 dòng D5 D26 dð hĉp tā SH2SH2SU1su1 Các giống ngô siờu ngt v ngụ ngt tiờu chuốn thỵng u khai thỏc gen ln sh2 v su1 tỵng ng, cỏc giống khác biệt hỵn mðt di truyền Să biểu cûa gen có liên quan chðt ch ti kiu hỡnh họt v hm lỵng ỵng họt thỵng ỵc o bỡng chợ s TSS Dọng họt su1su1 thỵng cũ ngt thỗp hn v họt ớt nhën hĄn so vĆi däng hät sh2sh2 (Tracy & cs., 2019) Do vêy, đánh giá kiểu hình cĄ s xỏc nhờn chớnh xỏc cỷa phỵng phỏp chọn lọc dăa chỵ thð phân tā 3.3 Kết q đánh giá đặc điểm nơng học dịng tự phối Đánh giá đðc điểm nông học cûa 30 dịng vý Đơng 2022 täi Hà Nội cho thỗy TGST cỷa nhúm dũng sh2sh2 ngớn hn khoõng 154 ngày so vĆi nhóm dịng SH2/…SU1/… (83,3 ngày), dài hĄn nhịm dđng đồng hĉp tā lðn sh2sh2 (81,3 ngày) nhịm dđng đồng hĉp tā lðn su1su1 (75,5 ngày) Nhóm dịng sh2sh2 nhóm dịng sh2sh2su1su1 có chỵ tiêu TP, PR, ASI TGST trung bình khơng có să khác biệt lĆn CCC CDB trung bình khơng có să khác biệt lĆn giĂa nhịm dđng đồng hĉp tā lðn sh2sh2 (164,3cm 48,9cm), su1su1 (161,8cm 65,2cm), sh2sh2su1su1 (155,9cm v 48,9cm), thỗp hn nhũm dủng SH2/SU1/ (172,0cm 54,5cm) Tính träng ChDB, DKB, HHB, HH trung bình cûa nhóm dịng khơng có să khác biệt đáng kể Tuy nhiên, nhóm sh2sh2, có să dao động lĆn ć tính träng Tính träng KL100, NSCT TSS có să khác biệt lĆn giĂa dịng tă phối Trong đị, KL100 ć nhóm dịng sh2sh2 (13,1g) v sh2sh2su1su1 (14,0g) thỗp nhỗt, thỗp hn hợn so vĆi nhóm dịng su1su1 (16,0g) nhóm dịng SH2/…SU1/… (19,9g) NSCT thỗp nhỗt nhúm dũng sh2sh2 (34,7g) v nhúm dũng su1su1 (38,9g), thỗp hn nhúm sh2sh2su1su1 (44,2g) v nhúm dũng SH2/SU1/ (53,3g) Tng lỵng chỗt rớn hũa tan nhịm dđng đồng hĉp tā lðn kép sh2sh2su1su1 (21,1Brix) cao hn nhũm dủng sh2sh2 (17,2Brix) v vỵt tri so vi nhóm dịng su1su1 (14,7Brix) Trong nhóm dịng sh2sh2 cüng cị să chênh lệch lĆn (không 2,2Brix) ć chỵ tiêu TSS, dao động tÿ 15,7Brix (D22) đến 17,9Brix (D09) Điều să khác biệt yếu tố phiên mã liên quan đến trình đồng hóa, tổng hĉp D-fructose, D-glucose hät să điều hịa cûa gen làm chêm q trình phân giâi ỵng cỏc dũng ngụ ngt sh2sh2 ny (Chen & cs., 2022) Kết quâ đánh giá kiểu hình xác nhên să xác cûa chỵ thð phân tā ć s khỏc bit ln v chợ tiờu tng lỵng chỗt rín hịa tan giĂa dịng tă phối Các dịng cú chỗt lỵng Nguyn Trung c, Nguyn Quc Trung, Phm Quang Tuân, Nguyễn Thị Nguyệt Anh, Phạm Thu Hằng, Phạm Xuõn Hi, V Vn Lit cao, họt thỵng nhởn nheo v nởng suỗt cỏ th thỵng thỗp hn hợn so vi cỏc dũng cú chỗt lỵng thỗp Do vờy, chọn lọc dịng ngơ ć nhĂng đąi đỉu cỉn ỏnh i gia chỗt lỵng v nởng suỗt Nh chn ging ngụ thc phốm cú th ỏp dýng phỵng phỏp chọn lọc độc lêp, chỵ dăa 1-2 tính träng quan trng sng lc s lỵng ln cỏc dũng tă phối ć nhĂng giai độn Phân tích thành phổn chớnh l mt phỵng phỏp phõn tớch a bin giỳp giõm s lỵng ln tớnh trọng cũ tỵng quan vĆi thành thành phỉn chính, dùng phân tích câ dĂ liệu kiểu hình kiểu gen, ang ỵc khai thỏc quỏ trỡnh sng lc quổn thể, xác đðnh (A) tính träng quan trọng minh cỗu trỳc quổn th thụng qua biu biplot (Greenacre & cs., 2022) Phân tích thành phỉn 13 tớnh trọng nụng hc theo dừi cho thỗy tng hai thành phỉn đỉu tiên địng gịp 56,4% tổng phỵng sai kiu hỡnh (Hỡnh 5A, B) Tr cỏc tớnh träng ASI, CDB, HH, tính träng cịn läi cị địng gịp lĆn việc phân biệt kiểu hình giĂa dịng ngơ tă phối vĆi địng gịp ln nhỗt ti tng phỵng sai kiu hỡnh l TGST NSCT Ngồi ra, tính träng TSS có vector dài v ngỵc chiu so vi cỏc tớnh trọng cũn lọi cho thỗy ồy l tớnh trọng cú s bin i v khỏc bit ln nhỗt, cú th dựng phõn biệt kiểu gen giĂa dịng tă phối (Hình 5A) (B) Hình (A) Phân tích thành phần tính trạng nơng học (B) mười thành phần Hình Phân tích cụm dựa thành phần phân nhóm đa dạng dịng ngơ tự phối dựa đặc điểm nông học 155 Xác định thị phân tử SSR liên kết với gen sh2 su1 dịng ngơ tự phối Bâng Đặc điểm nơng học dịng tự phối vụ Đông 2022 Hà Nội Kiểu gen 156 Dòng TP (ngày) PR (ngày) TGST (ngày) ASI (ngày) CCC (cm) CDB (cm) ChDB (cm) DKB (cm) HHB HH KL100 (g) NSCT (g) TSS (Brix) SH2sh2 SU1su1 D01 52,0 55,0 83,0 3,0 171,5 67,1 16,4 3,5 13,5 32,8 19,5 70,7 8,8 SH2sh2 SU1su1 D02 52,0 54,0 82,0 2,0 168,2 61,5 15,1 3,6 12,0 26,0 22,9 58,0 7,4 SH2sh2 SU1su1 D03 50,0 51,0 79,0 1,0 175,7 76,8 14,5 3,7 13,4 28,4 20,7 68,0 5,3 sh2sh2 SU1su1 D04 49,0 52,0 80,0 3,0 165,6 50,9 11,4 3,6 14,0 25,0 13,1 35,0 17,3 SH2SH2 SU1su1 D05 50,0 52,0 80,0 2,0 172,7 68,1 14,7 3,6 12,4 28,3 19,5 55,5 5,6 SH2sh2 SU1su1 D06 48,0 50,0 78,0 2,0 169,1 79,8 15,8 3,8 14,8 22,6 18,2 49,1 7,2 SH2sh2 SU1su1 D07 52,0 54,0 82,0 2,0 169,9 54,1 16,3 3,4 12,0 31,3 17,3 52,6 7,8 SH2sh2 SU1su1 D08 53,0 54,0 82,0 1,0 193,2 41,5 15,2 3,6 13,7 29,8 18,9 62,9 6,2 sh2sh2 SU1su1 D09 53,0 55,0 83,0 2,0 160,7 58,8 12,3 3,4 12,0 28,3 12,7 34,6 17,9 SH2sh2 SU1SU1 D10 53,0 55,0 83,0 2,0 173,1 33,7 16,6 3,6 14,0 34,2 17,6 68,3 7,0 sh2sh2 su1su1 D11 46,0 49,0 77,0 3,0 160,4 64,6 15,2 3,7 14,0 30,4 13,8 47,3 21,6 SH2sh2 SU1SU1 D12 51,0 53,0 81,0 2,0 168,6 49,2 15,4 3,4 12,8 30,8 18,9 60,7 6,1 sh2sh2 SU1su1 D13 50,0 51,0 79,0 1,0 154,5 38,4 14,4 3,6 14,0 32,0 13,5 48,8 17,5 sh2sh2 su1su1 D14 52,0 54,0 82,0 2,0 151,3 62,9 13,8 3,5 12,0 30,5 14,1 41,2 20,5 SH2SH2 SU1SU1 D15 57,0 60,0 90,0 3,0 181,7 36,2 12,0 3,3 11,5 22,5 21,1 43,8 5,3 SH2sh2 SU1su1 D16 51,0 53,0 81,0 2,0 163,3 40,8 15,2 3,5 12,9 15,6 20,3 32,1 6,6 SH2sh2 SU1su1 D17 54,0 56,0 84,0 2,0 158,8 50,9 14,6 3,1 12,0 16,9 19,8 31,5 5,0 SH2sh2 SU1SU1 D18 51,0 53,0 81,0 2,0 156,9 40,4 13,7 3,4 12,0 21,0 18,1 36,1 4,8 SH2sh2 su1su1 D19 43,0 45,0 75,0 2,0 165,5 75,2 13,3 3,6 14,0 22,0 16,3 41,0 14,5 SH2SH2 SU1SU1 D20 61,0 64,0 93,0 3,0 177,3 60,6 16,4 3,5 13,3 31,3 20,5 69,9 4,4 sh2sh2 SU1su1 D21 52,0 54,0 82,0 2,0 165,7 55,5 13,2 3,7 14,0 18,0 13,2 27,5 18,8 sh2sh2 SU1SU1 D22 49,0 52,0 80,0 3,0 163,2 44,4 13,5 3,5 12,0 29,0 12,6 34,6 15,7 SH2sh2 SU1su1 D23 54,0 57,0 86,0 3,0 162,6 55,4 16,1 3,4 12,0 14,9 21,9 30,6 6,3 sh2sh2 SU1su1 D24 54,0 56,0 84,0 2,0 162,5 40,9 9,5 3,5 12,0 19,0 13,8 24,1 16,1 sh2sh2 SU1su1 D25 51,0 53,0 81,0 2,0 178,0 53,3 14,0 3,6 14,0 27,0 12,7 38,2 17,2 Nguyễn Trung Đức, Nguyễn Quốc Trung, Phạm Quang Tuân, Nguyễn Thị Nguyệt Anh, Phạm Thu Hằng, Phạm Xuân Hội, Vũ Văn Liết SH2SH2 SU1su1 D26 51,0 54,0 85,0 3,0 174,4 52,8 15,5 3,6 12,7 31,0 22,1 71,3 5,8 SH2sh2 SU1SU1 D27 56,0 58,0 88,0 2,0 187,8 63,1 13,4 3,8 14,2 23,5 19,3 52,1 6,2 SH2sh2 SU1su1 D28 52,0 55,0 83,0 3,0 175,6 46,3 14,3 3,6 13,0 29,0 18,6 57,0 7,0 SH2sh2 SU1SU1 D29 51,0 53,0 81,0 2,0 167,0 57,9 10,9 3,4 10,8 21,0 23,4 42,5 4,9 SH2sh2 su1su1 D30 44,0 47,0 76,0 3,0 158,1 55,2 12,8 3,5 12,0 24,0 15,7 36,8 14,8 SH2/ SU1/… 52,6 54,8 83,3 2,2 172,0 54,5 14,8 3,5 12,8 25,8 19,9 53,3 6,2 sh2sh2 51,1 53,3 81,3 2,1 164,3 48,9 12,6 3,6 13,1 25,5 13,1 34,7 17,2 su1su1 43,5 46,0 75,5 2,5 161,8 65,2 13,1 3,6 13,0 23,0 16,0 38,9 14,7 sh2sh2su1su1 49,0 51,5 79,5 2,5 155,9 63,8 14,5 3,6 13,0 30,5 14,0 44,2 21,1 Trung bình (A) su1su1 (B) sh2sh2 (C) sh2sh2su1su1 Hình (A) Kiểu hình bắp dịng đồng hợp tử lặn su1su1, (B) dòng đồng hợp tử lặn sh2sh2 (C) đồng hợp tử lặn kép sh2sh2su1su 157 Xác định thị phân tử SSR liên kết với gen sh2 su1 dịng ngơ tự phối Kết quâ phân tích cým dăa thành phỉn phân nhóm 30 dịng tă phối thành ba nhóm chính, giĂa nhóm có să khác biệt chû yếu ć tính träng TSS (Hình 6) Trong nhóm I, chia thành ba nhóm nhó bao gồm hai dđng ng hp t ln su1su1 gm D19 v D30 ỵc phån nhịm Hai dđng đồng hĉp tā lðn kép sh2sh2su1su1 D11 D14 nìm nhóm lĆn nhỵng lọi thuc hai nhúm nhú khỏc Ba dũng D11, D13, D25 thuộc nhóm nhó dịng D14, D04, D09, D21, D22, D24 thuộc nhóm nhó cịn läi Vì dịng ngơ đồng hĉp tā sh2sh2 su1su1 có kiểu hình hät riêng biệt hät khơ hồn tồn (Hình 7), nên dễ dàng chọn lọc dăa kiểu hình, đðc biệt hiệu quâ dũng ngụ ngt ỵc chn lc bỡng phỵng phỏp chn lọc phâ hệ Tuy nhiên, tiến hành câi tiến qn thể ngơ bìng cách lai dịng ngơ sh2sh2 su1su1 vào dịng/giống ngơ tẻ hc ngụ np ỵu tỳ, vic chn lc cỏc th d hĉp tā (SH2sh2 SU1su1) trć nên khò khën hệ BC1F1 BC2F2, chúng biểu hin kiu hỡnh bỡnh thỵng nhỵ ỵc quan sỏt kiểu gen SH2SH2 SU1SU1 Mðt khác, gen lðn sh2 giúp tëng độ cûa hät có liên kết vêt lý rỗt cht vi gen sinh tng hp sớc t tím anthocyanin1 (a1) nhiễm síc thể số 3, vĆi không cách chỵ không 0,1 cM (Yao & cs., 2002) Gen trội A1 täo síc tố anthocyanin, thể đồng hĉp tā lðn (a1a1) khơng có síc tố ny Chhabra & cs (2019) nhờn thỗy rỡng thiu sớc tố tím ć gốc, thân chỵ thð hình thái hiệu quâ để chọn lọc kiểu gen sh2sh2 Trong nghiên cĀu này, đðc điểm kiểu hình khơng có síc tố anthocyanin ć dịng ngơ vàng sh2sh2 cüng tỵng t ỵc phỏt hin Tuy nhiờn, sh2 ỵc lai vo mt dũng/ging ngụ t hoc ngụ np ỵu tú, câ dịng mang gen SH2sh2 SH2SH2 s hu sớc t, ũ anthocyanin khụng th ỵc s dýng nhỵ mt chợ th hỡnh thỏi Vỡ vờy, việc lăa chọn kiểu gen dăa chỵ thð phân tā liên kết vĆi gen sh2 su1 cò ċ nghïa lĆn thể dð hĉp tā (SH2sh2 v SU1su1) cú th ỵc phõn bit vi cỏc th đồng hĉp tā (SH2SH2 SU1SU1) Kiểu hình hät cûa dịng sh2sh2 (Hình 7B) dịng sh2sh2su1su1 trơng giống 158 (Hình 7C), vêy khó chọn lọc dăa kiểu hình Do đị, việc phát triển cỏc ging ngụ ngt ỵu th lai da trờn cỏc dñng đồng hĉp tā lðn kép sh2sh2su1su1 trć nên dễ dàng hĄn Āng dýng chọn lọc có hỗ trĉ cûa chỵ thð phân tā Để tëng thêm độ cûa hät, phát triển dñng đột biến lðn kộp sh2sh2su1su1 l mt chin lỵc ó v ang ỵc ỏp dýng cỏc chỵng trỡnh chn ging ngụ ngt täi Ấn Độ (Mehta & cs., 2017a; Mehta & cs., 2017b) Các giống ngơ có kiểu gen SH2sh2su1su1 (SH2SH2su1su1 × sh2sh2su1su1) sh2sh2SU1su1 (sh2sh2SU1SU1 × sh2sh2 su1su1) kết hĉp hài hña độ ngọt, mềm thĄm cûa hai gen sh2 v su1 ỵc lai tọo t cỏc dũng b mẹ phát triển ć nghiên cĀu bổ sung la chn mi cho th trỵng ngụ thc phốm ởn tỵi tọi Vit Nam KT LUN Nghiờn cu ó xỏc nh chợ th umc2276 v umc1031 l ti ỵu phỏt hin hai gen sh2 v su1, tỵng ng Khâo sát 30 dịng ngơ tă phối S3 ó chn lc ỵc dủng ng hp t ln sh2sh2, hai dñng đồng hĉp tā lðn su1su1 hai dñng đồng hĉp tā lðn kép sh2sh2su1su1 Kết quâ đánh giá kiểu hình xác nhên să xác cûa chỵ thð phân tā ć să khác biệt lĆn chợ tiờu tng lỵng chỗt rớn hũa tan gia cỏc dũng t phi Trong ũ, tng lỵng chỗt rớn hũa tan nhịm dđng đồng hĉp tā lðn kép sh2sh2su1su1 (21,1Brix) cao hn nhũm dủng sh2sh2 (17,2Brix) v vỵt tri so vi nhúm dũng su1su1 (14,7Brix) Nghiờn cu ó cung cỗp chợ th phõn t SSR hiu quõ nhỗt chn lọc dịng ngơ su1su1, sh2sh2, sh2sh2 su1su1 11 dòng tă phối mang gen mýc tiêu phýc vý cõi tin chỗt lỵng ngụ thc phốm tọi Vit Nam LỜI CẢM ƠN Nhóm tác giâ trân trọng câm Ąn D ỏn DA15-4.0/2019 ó cung cỗp vờt liu ổu để phát triển hai dịng ngơ tă phối D21 (SH01) D30 (SU02) Nguyễn Trung Đức, Nguyễn Quốc Trung, Phạm Quang Tuân, Nguyễn Thị Nguyệt Anh, Phạm Thu Hằng, Phạm Xuân Hội, Vũ Văn Liết TÀI LIỆU THAM KHẢO Baseggio M., Murray M., Magallanes-Lundback M., Kaczmar N., Chamness J., Buckler E.S., Smith M.E., Dellapenna D., Tracy W.F & Gore M.A (2020) Natural variation for carotenoids in fresh kernels is controlled by uncommon variants in sweet corn Plant Genome 13(1): e20008 the evolution of modern sweet corn Nature Communications 12(1): 1-13 Hossain F., Nepolean T., Vishwakarma A K., Pandey N., Prasanna B.M & Gupta H.S (2015) Mapping and validation of microsatellite markers linked to sugary1 and shrunken2 genes in maize (Zea mays L.) Journal of Plant Biochemistry and Biotechnology 24(2): 135-142 Kleinhenz M.D & Bumgarner R.N (2012) Using °Brix as an indicator of vegetable quality instructions for measuring °brix in cucumber, leafy greens, sweet corn, tomato, and watermelon Fact sheet HYG-1653-12, Agriculture and Natural Resources, The Ohio State University Mehta B., Hossain F., Muthusamy V., Baveja A., Zunjare R., Jha S.K & Gupta H.S (2017a) Microsatellite-based genetic diversity analyses of sugary1-, shrunken2- and double mutant- sweet corn inbreds for their utilization in breeding programme Physiology and Molecular Biology of Plants 23(2): 411-420 Mehta B., Hossain F., Muthusamy V., Zunjare R., Sekhar J & Gupta S (2017b) Analysis of responses of novel double mutant (sh2sh2/su1su1) sweet corn hybrids for kernel sweetness under different sowing-and harvest-time Indian Journal of Agricultural Sciences 87: 1543-1548 Nguyễn Thị Nhài, Đặng Ngọc Hạ, Nguyễn Văn Diện, Đỗ Văn Dũng & Kiều Quang Luận (2020) Kết nghiên cứu chọn tạo khảo nghiệm giống ngô đường lai ĐL89 Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nơng nghiệp Việt Nam 4(113): 10-15 Nguyễn Trung Đức, Phạm Quang Tuân, Nguyễn Thị Nguyệt Anh & Vũ Văn Liết (2020) Nghiên cứu tuyển chọn số dịng ngơ phục vụ chọn tạo giống ngô trái dựa kiểu hình thị phân tử Tạp chí Khoa học Nông nghiệp Việt Nam 18(12): 1102-1113 Phạm Thị Thanh Hương, Nguyễn Thị Hoàng Anh, Lê Thị Thanh Huyền & Lê Thị Hường (2019) Đánh giá khả chịu hạn số giống ngô phương pháp gây hạn nhân tạo điều kiện nhà lưới Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển nông thôn 20: 24-28 Revilla P., Anibas C.M & Tracy W.F (2021) Sweet corn research around the world 2015-2020 Agronomy 11(3) Ruanjaichon V., Khammona K., Thunnom B., Suriharn K., Kerdsri C., Aesomnuk W., Yongsuwan A., Chaomueang N., Thammapichai P., Arikit S., Wanchana S & Toojinda T (2021) Identification of gene associated with sweetness in corn (Zea mays L.) by genome-wide association study (GWAS) and development of a functional SNP marker for predicting sweet corn Plants (Basel) 10(6) Hu Y., Colantonio V., Müller B S., Leach K A., Nanni A., Finegan C., Wang B., Baseggio M., Newton C.J & Juhl E.M (2021) Genome assembly and population genomic analysis provide insights into Shull G.H (1909) A pure-line method in corn breeding Journal of Heredity os-5(1): 51-58 Tracy W.F., Shuler S.L & Dodson-Swenson H (2019) The use of endosperm genes for sweet corn Baveja A., Muthusamy V., Panda K.K., Zunjare R.U., Das A.K., Chhabra R., Mishra S.J., Mehta B.K., Saha S & Hossain F (2021) Development of multinutrient-rich biofortified sweet corn hybrids through genomics-assisted selection of shrunken2, opaque2, lcyE and crtRB1 genes Journal of Applied Genetics 62(3): 419-429 Brewbaker J.L & Martin I (2015) Breeding tropical vegetable corns Plant Breeding Reviews 39: 125-198 Chen B., Feng S., Hou J., Zhu Y., Bao F., Han H., Tan H., Wang G & Zhao F (2022) Genome-wide transcriptome analysis revealing the genes related to sugar metabolism in kernels of sweet corn Metabolites 12 Chhabra R., Hossain F., Muthusamy V., Baveja A., Mehta B & Zunjare R.U (2019) Mapping and validation of Anthocyanin1 pigmentation gene for its effectiveness in early selection of shrunken2 gene governing kernel sweetness in maize Journal of Cereal Science 87: 258-265 Dellaporta S.L., Wood J & Hicks J.B (1983) A plant DNA minipreparation: Version II Plant Molecular Biology Reporter 1(4): 19-21 Faostat (2021) Trade data: crops and livestock products Retrieved from https://www.fao.org/ faostat/ en/#data/TP on Sep 10, 2021 Feng Z.L., Liu J., Fu F.L & Li W.C (2008) Molecular mechanism of sweet and waxy in maize International Journal of Plant Breeding and Genetics 2(2): 93-100 Greenacre M., Groenen P.J.F., Hastie T., D’enza A.I., Markos A & Tuzhilina E (2022) Principal component analysis Nature Reviews Methods Primers 2(1): 100 159 Xác định thị phân tử SSR liên kết với gen sh2 su1 dịng ngơ tự phối improvement in Plant Breeding Reviews 43(1): 215-241 Trần Thị Thanh Hà, Vũ Văn Liết, Vũ Thị Bích Hạnh, Nguyễn Văn Hà, Dương Thị Loan & Hoàng Thị Thùy (2020) Chọn lọc đánh giá khả kết hợp số dịng ngơ Tạp chí Khoa học Nơng nghiệp Việt Nam 18(12): 1067-1076 Whitt S.R., Wilson L.M., Tenaillon M.I., Gaut B.S & Buckler E.S (2002) Genetic diversity and selection in the maize starch pathway Proceedings of the National Academy of Sciences 99(20): 12959 ilson L.M., hitt , I a z A.M., oche or T.R., Goodman M.M & Buckler E.S.I.V (2004) 160 Dissection of maize kernel composition and starch production by candidate gene association The Plant Cell 16(10): 2719-2733 Yao H., Zhou Q., Li J., Smith H., Yandeau M., Nikolau B.J & Schnable P.S (2002) Molecular characterization of meiotic recombination across the 140-kb multigenic a1-sh2 interval of maize Proceedings of the National Academy of Sciences 99(9): 6157-6162 Zhang R., Huang L., Deng Y., Chi J., Zhang Y., Wei Z & Zhang M (2017) Phenolic content and antioxidant activity of eight representative sweet corn varieties grown in South China International Journal of Food Properties 20(12): 3043-3055 ... ging ngô täi Ấn Độ (Mehta & cs., 2017a; Mehta & cs., 2017b) Các giống ngơ có kiểu gen SH2sh2su 1su1 (SH2SH2su 1su1 × sh2sh2su 1su1) sh2sh2SU 1su1 (sh2sh2SU 1SU1 × sh 2sh2 su 1su1) kết hĉp hài hña độ ngọt, ... (A) su 1su1 (B) sh 2sh2 (C) sh2sh2su 1su1 Hình (A) Kiểu hình bắp dòng đồng hợp tử lặn su 1su1, (B) dòng đồng hợp tử lặn sh 2sh2 (C) đồng hợp tử lặn kép sh2sh2su1su 157 Xác định thị phân tử SSR liên kết. .. D29 D30 Xác định thị phân tử SSR liên kết với gen sh2 su1 dịng ngơ tự phối Hình Hình ânh điện di xác định gen su1 30 cá thể ngô thị umc1031 3.2 Kết quâ xác định gen su1 sh2 dịng ngơ tự phối Ứng