Các xét nghiệm trong chẩn đoán lao bệnh phổi

Các xét nghiệm chẩn đoán lao Ths Nguyễn Kim Cương Bộ môn Lao bệnh phổi Bệnh viện 71 TW Nội dung trình bầy • Các đặc tính test xét nghiệm • Giới thiệu xét nghiệm chẩn đốn bệnh lao thường dùng • Giới thiệu xét nghiệm Gen Xpert MTB/RIF Mục đích sử dụng test • Test sàng lọc: – kiểm tra bệnh nhân khơng có triệu chứng bệnh nghi ngờ • Test chẩn đốn: – bệnh nhân có triệu chứng bệnh lý nghi ngờ • Test xác định nguyên nhân: – quan hệ triệu chứng bệnh • Test tiên lượng: – dự đoán kết bệnh • Test đáp ứng: – đánh giá kết đáp ứng điều trị Các xét nghiệm cần làm???? • Một bệnh nhân 65 tuổi có triệu chứng ho khạc đờm, khó thở kéo dài tháng tới khám phịng khám anh chị • Thăm khám thấy Chẩn đoán sơ bộ?? – Gầy sút cân Xét nghiệm cần làm??? – Vã mồ đêm – Ho khạc đờm, không ho máu – Phổi rải rác rales ẩm nổ, rale rít khơng nghe thấy đặc biệt Bệnh nhân có triệu chứng nghi lao Bệnh nhân có triệu chứng tìm kiếm lao Benh nhân định làm xét nghiệm phù hợp Bệnh nhân thực có kết xét nghiệm xác Bệnh nhân chẩn đốn lao Bệnh nhân đinh điều trị cách Bệnh nhân theo dõi điều trị khỏi Các xét nghiệm chẩn đốn lao • Kỹ thuật miễn dịch – Test Mantoux – IGRs ( Interferon gamma realeas assay) – Huyết chẩn đốn • Các xét nghiệm vi sinh học – Soi đờm trực tiếp – Nuôi cấy vi khuẩn lao • Các xét nghiệm dựa sinh học phân tử – PCR, RealTime PCR – Xpert • Các xét nghiệm khác – Biomarker Bệnh phẩm sử dụng chẩn đốn • Bệnh phẩm đờm – Lấy đờm tự nhiên – Lấy đờm tác động • Bệnh phẩm ngồi đờm – Các loại dịch vơ khuẩn ( Dịch màng phổi, dịch não tuỷ, dịch phế quản….) – Các loại dịch không vô khuẩn ( nước tiểu, phân,,,,) – Tổ chức ( tổ chức hạch, nhu mô phổi, màng phổi….) Xét nghiệm miễn dịch phát vi khuẩn lao • • • • Miễn dịch tự nhiên Miễn dịch mắc phải Miễn dịch dịch thế: đáp ứng qua Ig ( Lympho bào B ) Miễn dịch tế bào: đáp ứng qua CD ( lympho bào T ) Phản ứng Mantoux Test giải phóng Interferon gamma Huyết chẩn đốn Ngun lý phân tích MTB/RIF rpoB gene mẫu dò đặc hiệu bám vào trình tự gien rpoB (khơng bám vào dạng đột biến) Molecular Beacon mẫu dò dành cho SPC (Bacillus globigii) Target chất nhuộm huỳnh quang phát đồng thời Hybrid PAGE | 9 © 2010 Cepheid Kết Có vi khuẩn lao nhạy cảm với Rifampicin Độ nhây, đặc hiệu, dự báo dương, âm kết xác định MTB xét nghiệm Nghiên cứu hiệu giá thành Giá trị Xpert MTB/Rif phát lao phổi kháng Rif: Cập nhật 2013 Hệ thống GeneXpert Cepheid đem lại cách tốt để nhận ta lợi ích kỹ thuật chẩn đốn phân tử Dễ sử dụng Trả lời nhanh Chính xác cao Quy trình thực xét nghiệm Genne Xpert với bệnh phẩm đờm Lắc mạnh ủ mẫu 15 phút Bổ sung dung dịch xử lý vào đờm theo tỉ lệ 2:1 23 © 2010 Cepheid Lắc lại ủ thêm phút Chuển 2ml vào cartridge Bắt đầu XN… Quy trình xử lý bệnh phẩm xét nghiệm Xpert MTB/RIF Làm tan bất hoạt bệnh phẩm hóa chất tyr lệ 2;1 Truyển 2ml dung dịch qua xử lý vào catridge Mẫu phẩm lọc rửa tự động Dung dải vi khuẩn sóng siêu âm để lấy DNA DNA Nhân kỹ kết hợp với PCR thuật PCR thời gian thực, lai kết hợp In kết Đưa catridge vào thiết bị xử lý Xpert MTB/RIF ( kết thúc giai đoạn thủ công ) Thời gian có kết quả, 1h 45 phút Khuyến cáo sử dụng Xpert -2010 • • • • • Xpert MTB/RIF nên sử dụng cho đối tượng người lớn có nguy MDR-TB có HIV xét nghiệm chẩn đốn ban đầu thay cho xét nghiệm soi trực tiếp, ni cấy thơng thường kháng sinh đồ • (Khuyến cáo mạnh, chứng tốt) Xpert MTB/RIF nên sử dụng cho đối tượng trẻ em có nguy MDR-TB có HIV xét nghiệm chẩn đốn ban đầu thay cho xét nghiệm soi trực tiếp, nuôi cấy thơng thường kháng sinh đồ • (Khuyến cáo mạnh, chứng kém) Xpert MTB/RIF sử dụng cho đối tượng người lớn nghi lao xét nghiệm chẩn đoán ban đầu thay cho xét nghiệm soi trực tiếp, ni cấy thơng thường • (tùy thuộc điều kiện khả cung cấp , chứng cao) Xpert MTB/RIF sử dụng cho đối tượng trẻ em nghi lao xét nghiệm chẩn đoán ban đầu thay cho xét nghiệm soi trực tiếp, ni cấy thơng thường • (tùy thuộc điều kiện khả cung cấp , chứng kém) Xpert MTB/RIF sử dụng sau xét nghiệm soi người lớn nghi lao khơng có nguy MDR-TB HIV, đặc biệt xét nghiệm đờm soi âm tính • (tùy thuộc điều kiện khả cung cấp , chứng cao) Khuyến cáo sử dụng Xpert -2010 – Bệnh phẩm đờm xử lý chưa xử lý – Dịch rửa hút dầy ( trẻ em, người lớn ) – Một mẫu bệnh phẩm • Nhiều mẫu bệnh phẩm tang độ nhậy - Điều trị lao trẻ em có triệu chứng lâm sàng nghĩ nhiều đến lao mà không cần dung Xpert Xpert khơng tìm thấy MTB – Soi, ni cấy, kháng sinh đồ sử dụng cho theo dõi điều trị Xpert detects some Rif resistant strains that are susceptible on phenotypic DST Sequencing usually in favour of Xpert Patients missed on phenotypic DST have poor treatment outcomes on FLD Khuyến cáo sử dụng Xpert - 2013 • Xpert MTB/RIF nên sử dụng thay cho soi nuôi cấy thông thường với bệnh phẩm dịch não tủy bệnh nhân nghi lao màng não ( Khuyến cáo mạnh, chứng kém) • Xpert MTB/RIF nên sử dụng thay xét nghiệm thông thường ( soi, nuôi cấy, mô bệnh ) cho bệnh phẩm đờm ( vd: hạch, tổ chức ) cho trường hợp nghi ngờ lao phổi – (tùy theo điều kiện, chứng yếu) Một số câu hỏi thực hành Xét nghiệm đờm dương tính Xpert âm tính? Xét nghiệm đờm âm tính, ni cấy dương tính, Xpert âm tính Xét nghiệm ni cấy âm tính, Xpert dương tính? Xét nghiệm Xpert kháng Rifampicin, ni cấy khơng kháng Rifampicin? • Xét nghiệm Xpert hai bệnh phẩm khác • • • • – Lần 1: Có vi khuẩn kháng Rifampicin – Lần 2: Có vi khuẩn khơng kháng Rifampicin • Xét nghiệm Xpert bệnh phẩm – Lần 1: Có vi khuẩn khơng kháng Rifampicin – Lần 2: Có vi khuẩn kháng rifampicin Mơ bệnh học • Nang lao điển hình – Chất hoại tử bã đậu – Tế bào khổng lồ, tế bào bán liên, tế bào lympho • Nang lao khơng điển hình Nang lao điển hình – Có thành phần nang lao điển hình Nang lao khơng điển hình Xin chân trọng cảm ơn kính chúc sức khỏe anh chị ... người có bệnh xét nghiệm dương tính /số người xét nghiệm dương tính a/(a+b) Xét nghiệm PCR chẩn đoán lao phổi 100 NGƯỜI NGHI NGỜ LÀ CĨ BỆNH LAO PHỔI Ni cấy vi khuẩn lao Nuôi cấy vi khuẩn lao (+)... positive predictive Xét nghiệm huyết chẩn đoán lao phổi ĐÁNH GIÁ CÁC TEST HUYẾT THANH THƯƠNG MẠI TRONG CHẨN ĐOÁN LAO 44 trường hợp lao hoạt động (33 Lao phổi/ 11 Lao ngồi phổi ; 36 ni cấy +/ 24... nghiệm phù hợp Bệnh nhân thực có kết xét nghiệm xác Bệnh nhân chẩn đốn lao Bệnh nhân đinh điều trị cách Bệnh nhân theo dõi điều trị khỏi Các xét nghiệm chẩn đốn lao • Kỹ thuật miễn dịch – Test Mantoux