Xây dựng quy trình định lượng citronellal trong tinh dầu bạch đàn chanh bằng phương pháp gc fid (eucalyptus citriodora hook) nguyễn thị tuyết nhi; huỳnh thị ngọc nhung; nguyễn ngọc thể

XÂY D TINH D U B NG CITRONELLAL TRONG -FID (Eucalyptus citriodora Hook) Nguy n Th Tuy t Nhi*, Hu nh Th Ng c Nhung, Nguy n Ng c Th Trân, Lâm Thanh Hùng ih cYD cC *Email: nttnhi10a@gmail.com TÓM T T tv : Tinh d u b ch c s d ng nhi u ngành công nghi c ph m, m ph c ph m Vi c ki m soát ch ng tinh d u, c bi t lo cd u ki n c n thi m b o tính an tồn hi u qu c a tinh d u M c tiêu nghiên c u: Chi t xu t tinh d u b t lôi cu c Xây d ng citronellal tinh d u b cb pháp s c ký khí u: Tinh d u t b c thu hái o sát qui trình chi t t u Xây d ng citronellal b c ký khí (GC, Gas Chromatography) K t qu : Kh u ki n chi c th tích tính ch t tinh d u t m 16,3%, t l c li u 6:1 (mL:g), n NaCl 2%, th i gian c t gi , t c u ki n s c ký t t Agilent c 0,32 mm ì 0,25 àm ì 30 m), nhi tiờm m u: 250oC, t l chia dòng: 1:10, nhi detector 280oC, th tích tiêm m u µL, khí mang: nitrogen, t dòng: mL t lò: 40o n 100oC v i t 10oC/phút, gi kho n 104oC t 2oC/phút, gi kho n 106oC t 2oC/phút, gi kho n 110oC t 40oC/phút, không o o gi n 200 C t 40 C/phút gi phút Kho ng n n tính 100-280 µg/mL , i qui y = 0,6589x + 21,015 v i R2= 0,9982 K t lu n: u ki n t chi t xu t tinh d u b ch ng th i xây d ng th nh l ng citronellal tinh d u b ch -FID T khóa: citronellal, b ch -FID ABSTRACT QUANTITATIVE DETERMINATION OF CITRONELLAL IN ESSENTIAL OIL OF Eucalyptus citriodora Hook BY GC-FID Nguyen Thi Tuyet Nhi*, Huynh Thi Ngoc Nhung, Nguyen Ngoc The Tran, Lam Thanh Hung Can Tho Univercity of Medicine and Pharmacy Background: Essential oil from Eucalyptus citriodora Hook is commonly used in food, cosmetic and pharmaceutical industry Quality control of essential oils, especially pharmaceutical grade, is necessary to ensure the safety and effectiveness of pharmaceutical products containing essential oils Objectives: Essential oil was isolated by steam distillation and quantitative determination of citronellal was carried out by using a validated GC with FID detector Materials and methods: Essential oil was obtained by steam distillation of the E citriodora leaves collected from Long An on May, 2019 Different gas chromatographic conditions were investigated in order to obtain an optimal condition for citronellal determination Results: Optimal parameters for essential oil extraction are: moisture content of E citriodora leaves of 16.3%, water-leave ratio of 6:1 (mL:g), NaCl concentration of 2%, distillation time of h, distillation rate of mL/min A method for quantitative determination of citronellal in essential oil was developed on Agilent 7890B gas chromatograph coupled to an FID detector; fused silica capillary HP-5 column (0.32 mm x 0.25 µm x 30 m); inlet temperature of 250oC; split ratio of 1:10; detector temperature: 280oC; inject 173 volume: 1µl; carrier gas: nitrogen; flow rate of mL/min; oven temperature program: 40oC (2 min) to 100oC at the rate of 100oC/min, hold for , to 104oC at the rate of 2oC/min, hold for min, to 106oC at the rate of 2oC/min, hold for min, to 110oC at the rate of 40oC/min, not hold, to 200oC at the rate 40oC/min and finally hold for min; linearity range from 100 to 280 µg/mL (y = 0.6589x + 21.015, R2= 0.9982) Conclusion: The optimal condition for extracting essential oil from the leaves of Eucalyptus was developed The validated GC-FID method enables a reliable quantitative determination of citronellal in E citriodora essential oil Key words: Citronellal, Eucalyptus citriodora Hook, GC-FID TV B có khí h Eucalyptus citriodora Hook) c tìm th y nh ng vùng i nhi i, m t lo i r ng quan tr l y g s n xu t m t a, tinh d u b kh n, ch ng oxi hóa có th ng d phát tri n lo i thu c m i [7] Hi n nay, có r t nhi u nghiên c u th gi i v thành ph n hóa h c có tác d a tinh d kháng khu n, kháng n m, ch i Vi t Nam, nhu c uv s d n xu t tinh d u nghiên c u v ng citronellal tinh d u b c xây d ng thành ph n tinh d u b ng s c ký khí (GC) k t h u dị ion hóa ng n l a (FID) r t c n thi ki ng citronellal tinh d u, góp ph n nâng cao tiêu chu n ki nh ch t ng tinh d u ph c v ngành công nghi cung c p nh ng d n li u khoa h c nh m phát tri n kh ng d ng khác M c tiêu nghiên c u: Chi t xu t tinh d u b t lôi cu c Xây d ng citronellal tinh d u b chi cb c ký khí U ng nghiên c u Tinh d u b c chi t xu t t b c thu hái Lo 2.2 Trang thi t b B t tinh d u, máy s u dò FID m nghiên c u Phịng nghiên c u b mơn Bào ch - Cơng nghi i h cC Phịng s c kí khí b c Li ih cC 2.4 Dung mơi hóa ch t Ethyl acetat (Bruker, M c) chu n citronellal (Sigmat tiêu chu n phân tích Toluen (Xylong, Trung Qu c), natri clorid (Xylong, Trung Qu c) 2.5 u 2.5.1 Chi t xu t tinh d u Chi t xu t tinh d u t b ch t lôi cu c 174 Kh o sát quy trình chi t t kh o sát s ng c a t l c, nhi , th i gian, t chi n th tích tính ch t tinh d u b t lôi cu c T u ki n chi t xu ng ph n m m BC Pharsoft 2.5.2 Xây d ng th ng tinh d u chi c b ng s c ký khí (GC) ghép v u dị FID Kh u ki n s c ký d ki n, ti i thông s n nh t, t l u ki n s c ký thích h p Th ng bao g m tiêu chí: tính phù h p h th ng, tính c hi u, kho ng ch i h n phát hi n (LOD, Limit of detection) gi i h ng d n c a AOAC 2.5.2.1 Chu n b m u th Cân xác kho ng 0,5 g tinh d u b nh m c 50 mL, b sung v ethylacetat, l u Hút xác 0,2 mL dung d ch v a pha cho vào bình nh m c 10 mL, b sung v ethylacetat, l u 2.5.2.2 Chu n b m u chu n Cân xác kho ng 0,5 g citronellal chu nh m c 50 mL, b sung v ethylacetat, l u Hút xác 0,2 mL dung d ch v nh m c 10 mL, b sung v ethylacetat, l u III K T QU NGHIÊN C U 3.1 K t qu kh Kh o sát ng c a y u t Kh o sát u ki n chi t xu t tinh d u ng m t s y u t n th tích tinh d c li u, th t t c t ng c a m t s y u t n tính ch t c m quan tinh d ng c a y u t c li u, th t, t l li u, t c tác c c c t Ti n hành th c nghi m theo thi t k nghiên c u ki n tt c li u 16,3%, th t gi , t l c li u 6:1, t t mL/phút n NaCl 2% Ti n hành ki m ch ng công th c t c tinh d u v i th tích 0,546 ml, p v i k t qu d a ph n m m BC Pharsoft 3.2 Xây d ng th ng citronellal tinh d u b ch b ng GC-FID 3.2.1 Xây d ng quy trình Kh u ki n s c ký u ki n thích h p cho phân tích citronellal tinh d u b C t phân tích: c c 0,32 mm x 0,25 µm x 30 m) Nhi tiêm m u: 250oC, t l chia dòng 1:10 Detector ion hóa ng n l a: nhi detector 280oC, th tích tiêm m u µL, t c dịng khí H2 80 mL/phút, dịng khơng khí 400 mL/phút, dịng khí b tr 45 mL/phút T dịng: mL/phút Th i gian phân tích: 19,4 phút B u ki n s c ký t ng citronellal tinh d u b Kh h th ng: pha dung d ch chu n citronellal dung d ch th tinh d u b 200 µg/mL 175 STT Nhi (oC) T (oC/phút) 40 100 104 106 110 120 Th (phút) 2 10 2 40 40 B ng K t qu kh M u Chu n Th Giá tr th ng kê Xtb SD RSD Xtb SD RSD Th i gian phân tích (phút) 13 16 16,1 19,4 th ng (n=6) tR S 14,8 0,001 0,06 14,8 0,001 0,001 228,9 1,2 0,5 151,4 0,60 0,39 6,6 0 6,6 0 As N Rs 1,1 0,02 1,8 1,0 0,02 1,92 308620 5524 1,8 314969 4323,4 1,4 21,42 0,01 0,02 17,5 0,01 0,05 Nh n xét: RSD c a thông s s c ký tR s, N, Rs c a m u th m u chu n u nh n tiêm liên ti th u ki n s c ký thích h ti n hành th nh 3.2.2 Th c hi u: kh o sát m u: m u dung môi, m u th , m u chu n, m u th thêm chu c k t qu nh Hình 1: S m u chu n Hình 2: S Hình 3: S th thêm chu n nh citronellal c a m u th có th nh citronellal có m u chu n S c 176 Hình 4: S m u th dung mơi i th nh có th a i th nh m u chu nh c n kh o sát c a m u th thêm chu n có s chi u cao di n tích c nh citronellal, có th i th a nh citronellal m u chu n Kho ng n tính, mi n giá tr , LOD, LOQ: B ng Kho ng n tính, mi n giá tr , LOD, LOQ c a citronellal tinh d u b ch 100-280 (µg/mL) y=0,6589x + 21,015 R2= 0,9982 3,2 (µg/mL) 9,86 (µg/mL) Kho ng n n tính ng n tính R2 LOD LOQ xác: B ng K t qu th N STT X lí k t qu xác citronellal tinh d u b citronellal ngày (µg/mL), n=6 Xtb= 125,6 µg/mL SD= 0,2 RSD= 0,4 % N citronellal ngày (µg/mL), n=6 Xtb= 125,8 µg/mL SD= 0,3 RSD= 0,4 % Nh n xét: Giá tr RSD c 0,4%, 0,4%, 1,2% Các giá tr B ng K t qu STT ng n N 80% (n=3) 100% (n=3) 120% (n=3) citronellal ngày (µg/mL), n=6 Xtb= 125,4 µg/mL SD= 0,7 RSD= 1,2% ng citronellal ngày 1, ngày 2, ngày l t là: l pl ng d n c a AOAC citronellal tinh d u b citronellal (µg/mL) 125,6 125,0 124,9 125,1 125,2 126,6 X lý k t qu Xtb= 125,4 µg/mL SD= 0,64 RSD= 0,51% B ng K t qu th M u N ub N citronellal m u (µg/mL) 125,4 125,4 125,4 125,4 125,4 125,4 125,4 125,4 125,4 ng chu n citronellal thêm vào (µg/mL) 152 152 152 190 190 190 228 228 228 Nh n xét: c th c hi n m u th Chu n b m u th có n ng chu n citronellal tìm l i (µg/mL) 277,3 277,6 278,1 317,1 315,6 314,2 352,0 352,1 350,8 T l h i ph c (%) 99,9 100,1 100,4 100,9 100,1 99,3 99,4 99,4 98,9 3n khác nhau, m i n ti n hành 200 µg/mL n citronellal có 177 m u th trung bình 125,4 µg/mL (b ng 5), m u th thêm chu n: l t cho thêm vào m u th ng chu n v i m c 80%, 100%, 120% so v ng citronellal m u th T l h i ph c c a citronellal 99,3-100,9%, t l h i ph c trung bình c a citronellal 99,8% T l h i ph c n m kho ng gi i h n cho phép, v IV BÀN LU N V u ki n chi t tinh d u t b c, tinh d c có tính ch t c m quan t ng tinh d u b ch i nghiên c c [1], [9] Nguyên nhân s khác v u ki n chi t xu t ng citronellal nghiên c u chi m 61,9% tinh d u toàn ph n K t qu ng citronellal tinh d u b chi t m khác v ng citronellal m t lồi có th n phát tri n c ng, lo t, y u t ng, nhi , khí h u th i gian thu th p m u [2] ng citronellal tinh d u b d ng dung mơi ph bi n, x lí m i n, th i gian phân tích ng n (19,4 phút) so v i nghiên c c V K T LU N u ki n chi t xu t t ub c th tích tính ch t tinh d u t m 16,3%, t l c li u 6:1 (mL:g), n NaCl 2%, th i gian c t gi , t c t mL/phút ng citronellal tinh d u b ng o o -FID v lò: 40 n 120 C kho ng th i gian phân tích 19,4 phút, th i gia c th tv c hi xác Kho ng n n tính 100-280 µg/mL v i qui y = 0,6589x + 21,015, v i R2= 0,9982 TÀI LI U THAM KH O g (2016), Nghiên c u chi t xu t tinh d u t b t lôi cu c i h c Bà R a Adilson Vidal Costa, Patricia Fontes Pinheiro, Vagner Tebaldi de Queiroz, Vando Miossi Rondelli, Andre Kulitz Marins, Wilson Rodrigues Valbon, Dirceu Pratissoli (2015), Chemical composition of essential oil from Eucalyptus citriodora leaves and insecticidal activity against Myzus persicae and Frankliniella schultzei, Journal of Essential Oil Bearing Plants, 18(2), pp.374 381 Chippendale, George M (1988), Myrtaceae Eucalyptus - Angophora, Flora of Australia, 19, pp.106-107 H Tolba, H Moghrani, A Benelmouffok, D Kellou, R Maachi (2015), Essential oil of algerian Eucalyptus citriodora: Chemical composition, antifungal activity, Journal de Mycologie Médicale, 25(4), pp.128-133 K.D.Hill & L.A.S.Johnson (1995), Lemon-scented gum, Spotted gum, Telopea, 6(2-3), pp.388 Lin SQ & Zhou ZL & Yin WQ (2016), Three new polyphenolic acids from the leaves of Eucalyptus citriodora with antivirus activity, Chemical and pharmaceutical bulletin, 64(11), pp.1641-1646 178 Miguel et al (2018), Antibacterial, antioxidant, and antiproliferative activities of corymbia citriodora and the essential oils of eight eucalyptus species, Medicines, 5(3), pp.61 Singh H.P, Kaur S., Negi K., Kumari S., Batish V.S.D.R., Kohli R.K (2012), Assessment of in vitro antioxidant activity of essential oil of Eucalyptus citriodora (lemon-scented eucalyptus, Myrtaceae) and its major constituents, LWT - Food Science and Technology, 48(2), pp.237-241 S Luqman, G R Dwivedi, M P Darokar, A Kalra 1, S P S Khanuja (2008), Antimicrobial activity of Eucalyptus citriodora essential oil, International Journal of Essential Oil Therapeutics, 2, pp.69-75 10 Sue Clarke (2008), Essential Chemistry for Aromatherapy, 2nd edition (Ngày nh n bài: 16/3/2020 - Ngày 6/8/2020) T NG QUAN V CÂY MU NG TRÂU (SENNA ALATA (L.) Roxb.) ng H 2* g *Email: loih@hiu.vn t vai trò quan tr ng vi u tr ng trâu (Senna alata (L.) Roxb.) m t nh c li u phân b r ng rãi t i khu v c nhi c s d ng r t nhi u thu c dân gian Bài báo s t p trung t ng h p thông tin nghiên c u v thành ph n hóa h c, tác d ng sinh h c tính c a Senna alata D a d li u khoa h c công b , Mu ng trâu th c s m c li u y ti ng thành ph n hóa h c ho t tính sinh h mang l i ABSTRACT SENNA ALATA (L.) ROXB.: A REVIEW Chung Khanh Linh1, Huynh Loi2* University of medicine and pharmacy at Ho Chi Minh city Hong Bang International University Herbal medicines have played a critical role in treatment and prevention for some diseases Among a diversity of natural medicinal sources, Senna alata (L.) Roxb is an outstanding plant broadly distributed in tropical region It is considered as a well-recognized traditional medicine This review article focuses to enhance and prepare a comprehensive review on phytochemical, pharmacological and cytotoxicity studies of Senna alata Based on published scientific data, this plant may suggest a gigantic biological potential of an abundant source of chemical constituents and a variety of bioactivities contributing to therapeutic values TV Mu ng trâu (Senna alata (L.) Roxb.) m t lo i b i, d ng g nh thu c h u (Fabaceae) Mu ng trâu phân b ch y u khu v c trung tâm châu M , vùng nhi i châu Á châu Phi, m t s o bi 179 ... validated GC- FID method enables a reliable quantitative determination of citronellal in E citriodora essential oil Key words: Citronellal, Eucalyptus citriodora Hook, GC- FID TV B có khí h Eucalyptus citriodora. .. ki m ch ng công th c t c tinh d u v i th tích 0,546 ml, p v i k t qu d a ph n m m BC Pharsoft 3.2 Xây d ng th ng citronellal tinh d u b ch b ng GC- FID 3.2.1 Xây d ng quy trình Kh u ki n s c ký... Chi t xu t tinh d u b t lôi cu c Xây d ng citronellal tinh d u b chi cb c ký khí U ng nghiên c u Tinh d u b c chi t xu t t b c thu hái Lo 2.2 Trang thi t b B t tinh d u, máy s u dò FID m nghiên