Xây dựng quy trình nhân giống khoai lang tím nhật (beniazuma) nhập nội bằng phương pháp nuôi cấy mô in vitro

Bộ giáo dục đào tạo Tr-ờng đại học vinh Xây dựng quy trình nhân giống khoai lang tím Nhật (Beniazuma) nhập nội ph-ơng pháp nuôi cấy mô in vitro Luận văn thạc sĩ nông nghiệp Chuyên ngành: Trồng trät M· sè: 60.62.01 Ng-êi thùc hiƯn : ngun ngäc khuê Ngi hng dn khoa hc: pgs.ts nguyễn đình san NghƯ An - 2012 i LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan số liệu kết nghiên cứu luận văn trung thực chƣa đƣợc sử dụng để bảo vệ học vị, công trình nghiên cứu Tơi xin cam đoan rằng, giúp đỡ cho việc thực luận văn đƣợc cảm ơn Trong luận văn tơi có sử dụng thông tin từ nhiều nguồn khác nhau, thơng tin trích dẫn đƣợc sử dụng đƣợc ghi rõ nguồn gốc, xuất xứ Tác giả luận văn NGUYỄN NGỌC KHUÊ ii LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành đề tài này, tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc đến thầy giáo PGS TS Nguyễn Đình San – cán hướng dẫn khoa học, kỹ thuật viên CN Phùng Văn Hào hướng dẫn tận tình tạo điều kiện thuận lợi giúp đỡ suốt thời gian nghiên cứu hoàn thiện luận văn Tôi xin chân thành cảm ơn ý kiến đóng góp vơ q báu thầy giáo, cô giáo khoa Nông – Lâm – Ngư, tạo điều kiện ủng hộ cán phòng thí nghiệm Ni cấy mơ - tế bào thực vật khoa Sinh, trường Đại học Vinh Cảm ơn gia đình, bạn bè ủng hộ, động viên suốt trình thực đề tài Xin chân thành cảm ơn! Vinh, tháng 10 năm 2012 Tác giả NGUYỄN NGỌC KHUÊ iii DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ CÁI VIẾT TẮT cs Cộng CT Công thức GA3 Gibberellic acid IAA Indol acetic acid KI Kinetine mg/l Milligram/lít MS Môi trƣờng dinh dƣỡng Murashige & Skoog 1962 MT Môi trƣờng NCMTB Nuôi cấy mô tế bào α - NAA α - Naphlene acetic acid iv DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Các mốc quan trọng lịch sử nuôi cấy mô tế bào thực vật 13 Bảng 3.1.1 Ảnh hƣởng H2O2 10% thời gian khử trùng đến tỉ lệ sống mẫu nuôi cấy 36 Bảng 3.1.2 Ảnh hƣởng HgCl2 0,1% thời gian khử trùng đến tỉ lệ sống mẫu cấy 38 Bảng 3.2.1 Ảnh hƣởng nồng độ GA3 đến khả tái sinh chồi 43 Bảng 3.2.2 Ảnh hƣởng tổng hợp nƣớc dừa GA3 đến khả tái sinh chồi 45 Bảng 3.3.1 Ảnh hƣởng Kinetine đến khả bật chồi hệ số nhân chồi khoai lang 48 Bảng 3.3.2 Ảnh hƣởng nồng độ Kinetine đến khả sinh trƣởng phát triển chồi khoai lang 50 Bảng 3.3.3 Ảnh hƣởng IAA đến khả bật chồi hệ số nhân chồi khoai lang 51 Bảng 3.3.4 Ảnh hƣởng nồng độ IAA đến khả sinh trƣởng phát triển chồi khoai lang 53 Bảng 3.4.1 Ảnh hƣởng nồng độ α - NAA đến hiệu rễ khoai lang in vitro 56 Bảng 3.4.2 Ảnh hƣởng α – NAA than hoạt tính đến hiệu rễ khoai lang in vitro 59 Bảng 3.5 Ảnh hƣởng loại giá thể đến sức sống ex vitro 63 v DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Cây khoai lang phận Hình 3.1.1 Ảnh hƣởng H2O2 10% thời gian khử trùng đến tỉ lệ sống mẫu nuôi cấy 37 Hình 3.1.2 Ảnh hƣởng HgCl2 0,1% thời gian khử trùng đến tỉ lệ sống mẫu cấy 39 Hình 3.1.3 Sự phát sinh chồi từ đốt thân giai đoạn vào mẫu 41 Hình 3.2.1 Ảnh hƣởng nồng độ GA3 đến khả tái sinh chồi 43 Hình 3.2.2 Ảnh hƣởng tổng hợp nƣớc dừa GA3 đến khả tái sinh chồi 45 Hình 3.2.3 Chồi in vitro giai đoạn tái sinh chồi 47 Hình 3.3.1 Ảnh hƣởng Kinetine đến khả bật chồi hệ số nhân chồi khoai lang 49 Hình 3.3.2 Ảnh hƣởng IAA đến khả bật chồi hệ số nhân chồi khoai lang 52 Hình 3.3.3 Chồi khoai lang in vitro giai đoạn nhân nhanh 55 Hình 3.4.1 Ảnh hƣởng nồng độ α - NAA đến hiệu rễ khoai lang in vitro 57 Hình 3.4.2 Ảnh hƣởng α – NAA than hoạt tính đến hiệu rễ khoai lang in vitro 59 Hình 3.4.3 Chồi khoai lang Beniazuma giai đoạn rễ 61 Hình 3.5.1 Ảnh hƣởng loại giá thể đến sức sống ex vitro 63 Hình 3.5.2 Cây khoai lang ex vitro giai đoạn huấn luyện 65 vi MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ CÁI VIẾT TẮT iii DANH MỤC BẢNG iv DANH MỤC HÌNH v MỤC LỤC vi MỞ ĐẦU 1 Lý chọn đề tài Mục đích nghiên cứu đề tài 3 Ý nghĩa khoa học ý nghĩa thực tiễn đề tài CHƢƠNG I TỔNG QUAN TÀI LIỆU NGHIÊN CỨU 1.1 Giới thiệu chung khoai lang 1.1.1 Nguồn gốc phân bố 1.1.2 Đặc điểm sinh học khoai lang 1.1.3 Giá trị khoai lang 1.1.4 Vài nét giống khoai lang tím Nhật Bản 10 1.2 Nuôi cấy mô tế bào thực vật ứng dụng tạo giống trồng 11 1.2.1 Khái niệm sở khoa học nuôi cấy mô tế bào thực vật 11 1.2.2 Lịch sử phát triển thành tựu ứng dụng NCMTB thực vật tạo giống trồng 13 1.3 Tình hình nghiên cứu ứng dụng NCMTB thực vật việc tạo giống khoai lang giới Việt Nam 22 1.3.1 Trên giới 22 1.3.2 Ở Việt Nam 26 vii CHƢƠNG II ĐỐI TƢỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 28 2.1 Đối tƣợng địa điểm nghiên cứu 28 2.1.1 Đối tƣợng nghiên cứu 28 2.1.2 Địa điểm nghiên cứu 28 2.2 Nội dung nghiên cứu 28 2.3 Phƣơng pháp nghiên cứu 29 3.4 Xử lý số liệu 35 CHƢƠNG III KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 36 3.1 Giai đoạn vào mẫu 36 3.2 Giai đoạn tái sinh chồi 42 3.3 Giai đoạn nhân nhanh 47 3.5 Giai đoạn huấn luyện thích nghi 62 3.6 Một số lƣu ý trình nhân giống khoai lang Nhật Beniazuma phƣơng pháp in vitro 67 3.6.1 Vô trùng 67 3.6.2 Giai đoạn phịng thí nghiệm 67 3.6.3 Giai đoạn huấn luyện thích nghi 68 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 69 TÀI LIỆU THAM KHẢO 71 PHỤ LỤC MỞ ĐẦU Lý chọn đề tài Khoai lang (Ipomoea batatas L) loài lƣơng thực với rễ củ lớn, chứa nhiều tinh bột, có vị ngọt, củ khoai lang nguồn cung cấp rau ăn củ quan trọng Nó đóng vai trị rau lƣơng thực Khoai lang đƣợc trồng phân bố nhiều nơi giới nhƣ Châu Á, Châu Phi, Châu Mỹ Latinh Trong số lƣơng thực, có củ giữ vai trị quan trọng sản xuất lƣơng thực nƣớc nghèo, chậm phát triển (Trịnh Xuân Ngọ, Đinh Thế Lộc, 2004) Theo số liệu thống kê Tổ chức Nông lƣơng Liên Hợp Quốc năm 2010 giới 77% khoai lang sử dụng làm lƣơng thực, 13% làm thức ăn gia súc, 6% làm nguyên liệu chế biến thành nhiều sản phẩm khác nhƣ luộc để ăn sáng, làm mứt, làm bánh kẹo, nƣớc giải khát, rƣợu, làm thuốc, dùng thay cho bột mì để làm bánh bích quy, phần loại bỏ chiếm 3% (Cúc Phƣơng, 2005) Phần thân, lá, đƣợc sử dụng làm rau xanh cho ngƣời đồng thời nguồn thức ăn tốt cho gia súc (FAO, Horton, 1988) Vùng Bắc Trung Bộ gồm sáu tỉnh: Thanh Hóa, Nghệ An, Hà Tĩnh, Quảng Bình, Quảng Trị, Thừa Thiên Huế Đây bảy vùng kinh tế đất nƣớc có địa hình, khí hậu, đất đai phong phú gồm tiểu vùng sinh thái khác thích hợp cho nhiều loại trồng vật nuôi Dân số Bắc Trung Bộ có khoảng 10 triệu ngƣời chiếm 13% dân số nƣớc, khoảng triệu ngƣời độ tuổi lao động Tuy nhiên, đến Bắc Trung Bộ vùng kinh tế gặp nhiều khó khăn Vùng Bắc Trung Bộ dẫn đầu tám vùng nƣớc diện tích sản lƣợng khoai lang Giống khoai lang phổ biến Bắc Trung Bộ Chiêm Dâu, Hoàng Long, Sộp… suất thấp khoảng 60 – 70 tạ/ha, nhiều giống khác có diện tích nhỏ, chủ yếu để giải thức ăn chăn ni theo hình thức tự cung tự cấp Năng suất khoai lang thấp có nhiều nguyên nhân, nhƣng chủ yếu chƣa có giống tốt phù hợp cho vùng sinh thái cấu mùa vụ địa phƣơng, biện pháp thâm canh chƣa đƣợc trọng mức Trong sản xuất cịn phát triển giống cho vùng trồng thích hợp, chƣa đẩy suất trung bình lên đƣợc nhƣ có củ khác Trong vài năm gần đây, nhu cầu tiêu dùng khoai lang chất lƣợng cao tăng nƣớc khu vực Châu Á Nắm bắt thị trƣờng, số nông dân tỉnh Lâm Đồng, Tiền Giang, Đắc Nông, Vĩnh Long… sản xuất khoai lang Nhật ruột đỏ bán tƣơi ruộng, giá 5000 – 7000 đồng/kg, suất bình quân 25 tấn/ha đem lại thu nhập cao cho nông dân [30] Ở Nghệ An sản xuất giống khoai lang nhƣng diện tích trồng chƣa lớn, chủ yếu mua củ từ nơi khác bán gặp khó khăn bảo quản chế biến sản phẩm Thực tế sản xuất cho thấy, sau vài vụ trồng dây giống vụ trƣớc trồng nhiều vụ chân đất nên suất giảm rõ rệt Để cải thiện chất lƣợng giống nông dân phải mua giống gốc để trồng, thụ động tốn Nếu cải tiến giống khoai lang theo phƣơng pháp truyền thống cách gơ củ giống phải đến hai năm khơi phục gần nhƣ hồn tồn đặc tính giống gốc Vì vậy, để khoai lang thực có vị trí xứng đáng sản xuất nơng nghiệp nƣớc ta định hƣớng đẩy mạnh cơng tác chọn tạo, bình tuyển giống khoai lang ngắn ngày có suất cao, phẩm chất củ ngon để sử dụng làm lƣơng thực, thực phẩm giống có sinh khối cao để phục vụ chăn ni, mở rộng diện tích trồng tập trung vùng sản xuất nông nghiệp gắn với chế biến, đẩy mạnh công nghệ chế biến sản phẩm từ khoai lang đƣợc nhà nghiên cứu quan tâm yêu cầu cấp thiết sản xuất 69 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận Ứng dụng công nghệ nuôi cấy mô - tế bào thực vật, chúng tơi xây dựng quy trình kỹ thuật nhân nhanh in vitro giống khoai lang Nhật Beniazuma với kết luận sau: Giai đoạn vào mẫu Vật liệu thích hợp để tạo nguồn vật liệu khởi đầu giống khoai lang Nhật Beniazuma đoạn thân mang mắt ngủ gần đỉnh sinh trƣởng Xử lý sơ mẫu cấy etanol 700 thời gian phút, sau sử dụng HgCl2 0,1% 10 phút Mẫu đƣợc nuôi cấy môi trƣờng (MS + Saccarose 3% + Agar 0,8% + 10% nƣớc dừa) Thời gian cấy gây tuần Giai đoạn tái sinh chồi Môi trƣờng sử dụng để tái sinh chồi in vitro là: (MS + 0,8 % Agar + 3% saccarose + mg/l GA3 + 150% nƣớc dừa) Thời gian tái sinh tuần Giai đoạn nhân nhanh Mơi trƣờng thích hợp để nhân nhanh chồi khoai in vitro (MS + 0,8% Agar + 3% saccaroza +1 mg/l GA3 + mg/l KI) Thời gian nhân nhanh tuần Giai đoạn rễ tạo hồn chỉnh Mơi trƣờng thích hợp cho chồi khoai in vitro rễ (MS + 0,8% Agar + 3% saccaroza + 0,5 mg/l α – NAA + 1,0 g/l than hoạt tính) Thời gian rễ là tuần Điều kiện nuôi cấy giai đoạn vào mẫu, tái sinh, nhân nhanh, rễ tạo in vitro hồn chỉnh phịng thí nghiệm : 25 ± 20 C, ẩm độ 65 70%, cƣờng độ ánh sáng 2000 - 2500 lux thời gian chiếu sáng 12h/ngày Giai đoạn huấn luyện thích nghi 70 Giá thể thích hợp để huấn luyện thích nghi khoai ex vitro đất thịt Điều kiện huấn luyện là: độ ẩm khơng khí 80 - 85%, độ ẩm giá thể 65 - 80%, nhiệt độ 25 - 300C, nguồn khoáng bổ sung dung dịch dinh dƣỡng Knop phun lên dƣới dạng sƣơng mù Thời gian giai đoạn tuần Kiến nghị Theo dõi khoai ni cấy mơ ngồi vƣờn sản xuất để đánh giá khả sinh trƣởng, phát triển, suất, chất lƣợng, khả chống chịu Cần tiến hành nghiên cứu ảnh hƣởng phối hợp chất ĐTST nhƣ: Kinetin với BAP 2,4D, IBA để xem xét vai trò sinh lý chúng trình hình thành chồi khả rễ từ chồi ban đầu Cần nghiên cứu thêm ảnh hƣởng số giá thể khác nhƣ trấu hun, xơ dừa, mụn cƣa, đến khả thích nghi khoai ex vitro Từng bƣớc ứng dụng kết nghiên cứu đề tài để cung cấp giống cho sản xuất 71 TÀI LIỆU THAM KHẢO A Tài liệu tiếng Việt: Nguyễn Thị Lý Anh cộng (2000), ”Nghiên cứu làm virus nhân nhanh số dòng, giống khoai lang virus phƣơng pháp ni cấy invitro”, Tạp chí Nơng nghiệp Công nghiệp thực phẩm ( 12), tr 552-554 Lê Trần Bình, Hồ Hữu Nhị, Lê Thị Muội (1997), Công nghệ sinh học thực vật cải tiến giống trồng, NXB Nông nghiệp Hà Nội Ngô Xuân Bình, Nguyễn Thị Thúy Hà (2000), Giáo trình cơng nghệ sinh học, NXB Nông nghiệp Dai Peter, Tôn Phan Hữu, Hoàng Mai Thạch cs (2001), Hướng dẫn sử dụng khoai lang trồng khác chăn nuôi lợn miền Bắc, miền Trung Việt Nam, NXB Nông nghiệp Ƣng Định (1995), Tăng suất khoai lang, Nhà xuất Nông nghiệp Jennifer A.woolfe (1992), Cây khoai lang, NXB Đại học Cambridge, NewYork Đinh Thế Lộc (1995), Cây khoai lang, Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội Đinh Thế Lộc CS (1997), Giáo trình Cây Lương thực, tập 2, ĐHNN I, Nhà Xuất Nơng nghiệp, Hà Nội Hồng Thị Sản (1999), Phân loại thực vật, NXB Giáo dục Hà Nội, trang 178 10 Nguyễn Đức Thành (2000), Nuôi cấy mô tế bào thực vật – nghiên cứu áp dụng, NXB Nông nghiệp, tr – 54 11 Nguyễn Quang Thạch cs (2003), Bài giảng công nghệ sinh học thực vật, ĐH NNI, Hà Nội 12 Nguyễn Văn Uyển (1993), Nuôi cấy mô thực vật phục vụ công tác giống trồng, Nhà xuất Nông nghiệp 72 13 Bùi Văn Thế Vinh (2009), Bài giảng công nghệ sinh học thực vật, Trƣờng ĐH Kỹ thuật công nghệ Hồ Chí Minh 14 Đỗ Năng Vịnh (2002), Cơng nghệ sinh học trồng, NXB Nông nghiệp Hà Nội 15 Đỗ Năng Vịnh (2005), Công nghệ tế bào thực vật ứng dụng, NXB Nông nghiệp 16 Vũ Văn Vụ (chủ biên) (2005), Sinh lý học thực vật, NXB Giáo dục Hà Nội, tr 213 – 215 17 Vũ Văn Vụ, Nguyễn Mộng Hùng, Lê Hồng Điệp (2006), Công nghệ sinh học, NXB Giáo dục B Tài liệu tiếng Anh: 18 Denises, Dagnino, Maria Luiza cs (1991), Effect of Gibberellic acid on ipomoea batatas regeneration from meristem culture 19 Fowler, M.R (2002), Plant cell culture, laboratory techniques, In Encyclopedia of cell, Wiley, NewYork 20 Hans G.S., Horst W.D., Fiechter A., Yamada H., Shimizu S (2002), Biotechnology, Ullmann’s Encyclopedia of Industrial Chemistry Weinheim, Germany 21 Iftekhar Alam, Shamima Akhtar Sharmin, Mst Kamrun Naher, M Jahangir Alam, M Anisuzzaman and Mohammad Firoz Alam (2010), “Effect of growth regulators on meristem culture and plantlet establishment in sweet potato (Ipomoea batatas (L.) Lam)”, POJ 3(2), pp 35 – 39 22 Mervat M.M.El Far and A Ashoub (2009), “Utility of Thermotherapy and meristem tip for freeing sweet potato from viral infection”, Australian Journal of basic and applied sciences, 3(1), pp 153 – 159 23 Murashige T., Skoog F (1962), “A revised medium for rapid growth and bioassay with tobacco tissue culture”, J Physol Plant, vol 15, pp 473 – 479 73 24 Peru, Lima cs (1992), “Tissue culture of ipomoea batatas micro propagation and mainrtenance” 25 Taco Bottema, Pham Thanh Binh, Dang Ngoc Ha, Mai Thach Hoanh, Hoang Kim (1991), Sweet potato in Vietnam, production and markets, CGPRTNo.24 Bogor, Indonesia, pp 113 26 T Kozai, C Chun, A.F.M.S Islam, C Kubota and K Ohyama, “Efficient Production of Sweetpotato (Ipomoea batatas (L.) Lam.) Propagules and Transplants Using Single Node Leafy Cuttings in Closed Systems with Artificial Lighting”, Department of Bioproduction Science, Faculty of Horticulture, Chiba University, Matsudo, Chiba 271, Japan C Internet: 27 www.khuyennongvn.gov.vn 28 Vietbao.vn/suckhoe/rau cu khoai lang thƣc an va vi thuoc quy/ 29 www.vi.wikimedia.org 30 www.2lua.vn/kythuattrongkhoailangNhat/ PHỤ LỤC PHỤ LỤC Thành phần dinh dƣỡng môi trƣờng MS [10] Thành phần Đa lƣợng Vi lƣợng Hóa chất NH4NO3 1650 KNO3 1900 CaCl2.2H2O 440 KH2PO4 370 Na2EDTA.2H2O 37,26 FeSO4.7H2O 27,8 MnSO4 16,9 ZnSO4.7H2O 8,6 H3BO3 6,2 KI 0,83 Na2MoO4.2H2O 0,25 CuSO4.5H2O 0,025 CaCl2.6H2O 0,025 Glyxine Vitamin Các chất hữu Chất ĐTST Nồng độ (mg/ l) Myo-inositol 100 Nicotinic acid 0,5 Pyridocine 0,5 Thiamine 0,1 Saccarose 30 Agar 6-8 Cytokinin 0,1- 10 Auxin 0,1- PHỤ LỤC XỦ LÝ SỐ LIỆU BALANCED ANOVA FOR VARIATE SMS FILE H2O2 16/10/12 23:47 :PAGE Anh huong cua H2O2 va thoi gian khu trung thich hop den ti le song cua mau cay VARIATE V003 SMS LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 108.000 36.0000 72.00 0.000 * RESIDUAL 3.99999 499999 * TOTAL (CORRECTED) 11 112.000 10.1818 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE H2O2 16/10/12 23:47 :PAGE Anh huong cua H2O2 va thoi gian khu trung thich hop den ti le song cua mau cay MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 SMS 2.33333 10.3333 7.00000 4.33333 SE(N= 3) 0.408248 5%LSD 8DF 1.15125 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE H2O2 16/10/12 23:47 :PAGE Anh huong cua H2O2 va thoi gian khu trung thich hop den ti le song cua mau cay F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE SMS GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 6.0000 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 3.1909 0.70711 9.6 0.0000 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SMS FILE HGCL2MOI 17/10/12 | | | | 0: :PAGE Anh huong cua HgCl2 thoi gian khu trung thich hop den ti le song cua mau cay VARIATE V003 SMS LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 255.000 85.0000 102.00 0.000 * RESIDUAL 6.66672 833340 * TOTAL (CORRECTED) 11 261.667 23.7879 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE HGCL2MOI 17/10/12 0: :PAGE Anh huong cua HgCl2 thoi gian khu trung thich hop den ti le song cua mau cay MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 SMS 10.3333 23.0000 16.0000 14.0000 SE(N= 3) 0.527048 5%LSD 8DF 1.62865 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE HGCL2MOI 17/10/12 0: :PAGE Anh huong cua HgCl2 thoi gian khu trung thich hop den ti le song cua mau cay F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE SMS GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 15.833 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 4.8773 0.91287 5.2 0.0000 | | | | BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSN FILE GA3 17/10/12 8:11 :PAGE Anh huong cua nong GA3 den kha nang tai sinh choi VARIATE V003 HSN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 4.83600 1.20900 120.90 0.000 * RESIDUAL 10 999995E-01 999995E-02 * TOTAL (CORRECTED) 14 4.93600 352571 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE GA3 17/10/12 8:11 :PAGE Anh huong cua nong GA3 den kha nang tai sinh choi MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 HSN 1.60000 2.40000 3.20000 2.90000 2.10000 SE(N= 3) 0.577349E-01 5%LSD 10DF 0.137925 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE GA3 17/10/12 8:11 :PAGE Anh huong cua nong GA3 den kha nang tai sinh choi F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HSN GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 2.4400 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.59378 0.10000 3.9 0.0000 | | | | BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSN FILE HSNNCD 17/10/12 8:22 :PAGE Anh huong cua nuoc dua va GA3 den kha nang tai sinh choi VARIATE V004 HSN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 7.96267 1.99067 175.65 0.000 * RESIDUAL 10 113333 113333E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 8.07600 576857 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE HSNNCD 17/10/12 8:22 :PAGE Anh huong cua nuoc dua va GA3 den kha nang tai sinh choi MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 HSN 2.10000 2.56667 3.10000 4.13333 2.30000 SE(N= 3) 0.614635E-01 5%LSD 10DF 0.164674 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE HSNNCD 17/10/12 8:22 :PAGE Anh huong cua nuoc dua va GA3 den kha nang tai sinh choi F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HSN GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 2.8400 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.75951 0.10646 3.1 0.0000 | | | | BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSN FILE KI 17/10/12 8:27 :PAGE Anh huong cua Kinetine den kha nang bat choi va he so nhan choi khoai lang VARIATE V006 HSN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 21.5096 5.37740 ****** 0.000 * RESIDUAL 10 137496E-01 137496E-02 * TOTAL (CORRECTED) 14 21.5233 1.53738 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE KI 17/10/12 8:27 :PAGE Anh huong cua Kinetine den kha nang bat choi va he so nhan choi khoai lang MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 HSN 2.02500 2.18333 3.19167 5.18333 2.12500 SE(N= 3) 0.214084E-01 5%LSD 10DF 0.653587E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE KI 17/10/12 8:27 :PAGE Anh huong cua Kinetine den kha nang bat choi va he so nhan choi khoai lang F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HSN GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 2.9417 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 1.2399 0.37080E-01 1.2 0.0000 | | | | BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSN FILE IAA 17/10/12 8:31 :PAGE Anh huong cua IAA den kha nang bat choi va he so nhan choi khoai VARIATE V006 HSN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 8.44208 2.11052 422.11 0.000 * RESIDUAL 10 499996E-01 499996E-02 * TOTAL (CORRECTED) 14 8.49208 606577 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE IAA 17/10/12 8:31 :PAGE Anh huong cua IAA den kha nang bat choi va he so nhan choi khoai MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 HSN 2.82500 3.10833 4.70000 2.91667 2.61667 SE(N= 3) 0.408247E-01 5%LSD 10DF 0.573238 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE IAA 17/10/12 8:31 :PAGE Anh huong cua IAA den kha nang bat choi va he so nhan choi khoai F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HSN GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 3.2333 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.77883 0.70710E-01 0.9 0.0000 | | | | BALANCED ANOVA FOR VARIATE SRTC FILE TCHCNAA 17/10/12 8:37 :PAGE Anh huong cua NAA den hieu qua re cay khoai lang in vitro VARIATE V005 SRTC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 40.0769 10.0192 993.34 0.000 * RESIDUAL 10 100864 100864E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 40.1777 2.86984 BALANCED ANOVA FOR VARIATE DDR FILE TCHCNAA 17/10/12 8:37 :PAGE Anh huong cua NAA den hieu qua re cay khoai lang in vitro VARIATE V006 DDR LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 153.899 38.4747 66.39 0.000 * RESIDUAL 10 5.79487 579487 * TOTAL (CORRECTED) 14 159.694 11.4067 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TCHCNAA 17/10/12 8:37 :PAGE Anh huong cua NAA den hieu qua re cay khoai lang in vitro MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 SRTC 4.16667 6.37333 8.71667 8.23000 6.04667 DDR 40.1667 44.8167 46.1867 39.0033 38.2600 SE(N= 3) 0.579839E-01 0.439502 5%LSD 10DF 0.14528 1.10113 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TCHCNAA 17/10/12 8:37 :PAGE Anh huong cua NAA den hieu qua re cay khoai lang in vitro F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE SRTC DDR GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 6.7067 15 41.687 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 1.6941 0.10043 1.2 0.0000 3.3774 0.76124 1.4 0.0000 | | | | BALANCED ANOVA FOR VARIATE SRTC FILE TCHCTHT 17/10/12 8:43 :PAGE Anh huong cua NAA va than hoat tinh den hieu qua re cay khoai lang in vitro VARIATE V003 SRTC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 68.4494 17.1123 778.54 0.000 * RESIDUAL 10 219801 219801E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 68.6692 4.90494 BALANCED ANOVA FOR VARIATE DDR FILE TCHCTHT 17/10/12 8:43 :PAGE Anh huong cua NAA va than hoat tinh den hieu qua re cay khoai lang in vitro VARIATE V004 DDR LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 190.893 47.7233 831.52 0.000 * RESIDUAL 10 573930 573930E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 191.467 13.6762 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TCHCTHT 17/10/12 8:43 :PAGE Anh huong cua NAA va than hoat tinh den hieu qua re cay khoai lang in vitro MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 SRTC 4.22333 9.32000 10.1400 7.15667 6.18667 DDR 46.2167 54.5367 56.3733 52.1267 49.8133 SE(N= 3) 0.855962E-01 0.138315 5%LSD 10DF 0.209717 0.31835 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TCHCTHT 17/10/12 8:43 :PAGE Anh huong cua NAA va than hoat tinh den hieu qua re cay khoai lang in vitro F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE SRTC DDR GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 7.4053 15 51.813 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 2.2147 0.14826 1.5 0.0000 3.6981 0.23957 0.3 0.0000 | | | | BALANCED ANOVA FOR VARIATE SCS FILE HLTN 17/10/12 8:51 :PAGE Anh huong cua cac loai gia the den suc song cay ex vitro VARIATE V003 SCS LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 54.8889 27.4444 19.00 0.003 * RESIDUAL 8.66667 1.44445 * TOTAL (CORRECTED) 63.5556 7.94444 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SLM FILE HLTN 17/10/12 8:51 :PAGE Anh huong cua cac loai gia the den suc song cay ex vitro VARIATE V005 SLM LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 2.51556 1.25778 19.27 0.003 * RESIDUAL 391666 652777E-01 * TOTAL (CORRECTED) 2.90722 363403 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CCC FILE HLTN 17/10/12 8:51 :PAGE Anh huong cua cac loai gia the den suc song cay ex vitro VARIATE V006 CCC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 13.2867 6.64333 132.10 0.000 * RESIDUAL 301735 502892E-01 * TOTAL (CORRECTED) 13.5884 1.69855 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE HLTN 17/10/12 8:51 :PAGE Anh huong cua cac loai gia the den suc song cay ex vitro MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 SCS 33.0000 39.0000 36.6667 SLM 3.60000 4.86667 4.00000 CCC 5.16333 7.93000 5.59667 SE(N= 3) 0.693889 0.147510 0.129472 5%LSD 6DF 0.750027 0.310261 0.507865 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE HLTN 17/10/12 8:51 :PAGE Anh huong cua cac loai gia the den suc song cay ex vitro F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE SCS SLM CCC GRAND MEAN (N= 9) NO OBS 36.222 4.1556 6.2300 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 2.8186 1.2019 0.9 0.0030 0.60283 0.25550 3.3 0.0029 1.3033 0.22425 3.6 0.0001 | | | | ... tác giống sau này, tiến hành thực đề tài: ? ?Xây dựng quy trình nhân giống khoai lang tím Nhật (Beniazuma) nhập nội phương pháp nuôi cấy mô in vitro? ?? Mục đích nghiên cứu đề tài Bằng phƣơng pháp. .. canh, cải tiến thoái giống việc làm cần thiết 1.1.4 Vài nét giống khoai lang tím Nhật Bản Giống khoai lang tím Nhật giống khoai lang mới, có nguồn gốc Nhật Bản Hiện giống khoai đƣợc trồng nhiều... nách hình thành phơi sinh dƣỡng môi trƣờng nuôi cấy mô sẹo [16] - Cytokinin Cytokinin gồm Kinetin, IBA, Zeatin 2-iP Ngƣời ta biết môi trƣờng nuôi cấy, việc bổ sung cytokinin tạo điều kiện thuận