Xây dựng quy trình nhân giống hoa đồng tiền gerbera jamesonii bolus bằng kỹ thuật nuôi cấy mô in vitro

1 TRƢỜNG ĐẠI HỌC VINH KHOA NÔNG LÂM NGƢ - NGUYỄN NHÂN NGỌC LĨNH XÂY DỰNG QUY TRÌNH NHÂN GIỐNG HOA ĐỒNG TIỀN GERBERA JAMESONII BOLUS BẰNG KỸ THUẬT NUÔI CẤY MÔ IN VITRO KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP KỸ SƢ NGÀNH NƠNG HỌC VINH - 12.2010 TRƢỜNG ĐẠI HỌC VINH KHOA NÔNG LÂM NGƢ - XÂY DỰNG QUY TRÌNH NHÂN GIỐNG HOA ĐỒNG TIỀN GERBERA JAMESONII BOLUS BẰNG KỸ THUẬT NUÔI CẤY MÔ IN VITRO KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP KỸ SƢ NGÀNH NƠNG HỌC Người thực hiện: Nguyễn Nhân Ngọc Lĩnh Lớp: 47K2 - Nông Học Người hướng dẫn: ThS Phan Thị Thu Hiền VINH - 12.2010 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan số liệu kết nghiên cứu luận văn trung thực chưa sử dụng để bảo vệ học vị Tất có nhờ nỗ lực thân dẫn dắt thầy giáo cô giáo hướng dẫn Tôi xin cam đoan điều hồn tồn trung thực, có sai thật tơi hồn tồn chịu trách nhiệm Tác giả luận văn Nguyễn Nhân Ngọc Lĩnh LỜI CẢM ƠN Để hồn thành luận văn tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới cô giáo - Th.S Phan Thị Thu Hiền - cán hướng dẫn khoa học, thầy giáo Phùng Văn Hào - cán phịng thí nghiệm, tận tình hướng dẫn tạo điều kiện thuận lợi giúp đỡ suốt thời gian nghiên cứu hồn thành khóa luận tốt nghiệp Tơi xin chân thành cảm ơn ý kiến đóng góp vơ q báu thầy Khoa Nông – Lâm - Ngư, tạo điều kiện ủng hộ cán phịng thí nghiệm nuôi cấy mô - tế bào thực vật Khoa Sinh học, Trường Đại học Vinh Xin chân thành cảm ơn giúp đỡ, cung cấp tư liệu, hóa chất, nguồn giống Viện Công Nghệ Sinh học (thuộc Viện khoa học Cơng nghệ Việt Nam) Cảm ơn gia đình, bạn bè động viên giúp đỡ suốt trình thực luận văn Đây lần tham gia nghiên cứu khoa học thân khơng tránh khỏi thiếu sót, mong nhận ý kiến đóng góp quý báu thầy giáo, cô giáo bạn bè để đề tài tơi hồn thiện Vinh, tháng 12 năm 2010 Sinh viên thực hiện: Nguyễn Nhân Ngọc Lĩnh MỤC LỤC Trang MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích Yêu cầu đề tài 1.2.1 Mục đích 1.2.2 Yêu cầu đề tài 1.3.Ý nghĩa đề tài 1.3.1 Ý nghĩa khoa học 1.3.2 Ý nghĩa thực tiễn CHƢƠNG I TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Một số nét hoa Đồng Tiền 1.1.1 Nguồn gốc, phân bố, vị trí phân loại hoa Đồng Tiền 2.1.2 Đặc điểm thực vật học yêu cầu sinh thái hoa Đồng Tiền 1.1.2.1 Đặc điểm thực vật học 2.1.2.2.Yêu cầu sinh thái 1.1.3 Giá trị sử dụng hiệu kinh tế hoa Đồng Tiền 1.1.4 Các phương pháp nhân giống hoa Đồng Tiền 1.1.5 Tình hình sản xuất, tiêu thụ hoa giới Việt Nam 10 1.1.5.1 Tình hình sản xuất, tiêu thụ hoa giới 10 1.1.5.2 Tình hình sản xuất, tiêu thụ hoa Việt Nam 12 1.1.6 Những thuận lợi, khó khăn phương hướng sản xuất hoa Việt Nam 14 1.1.7 Một số nghiên cứu nhân giống hoa phương pháp nuôi cấy mô in vitro giới Việt Nam 15 1.1.7.1 Trên giới 15 1.1.7.2 Ở Việt Nam 16 1.2 Công nghệ NCM – TB thực vật in vitro 17 1.2.1 Cơ sở khoa học công nghệ NCM – TB thực vật in vitro 17 1.2.2 Môi trường nuôi cấy mơ tế bào thực vật 18 1.2.3 Quy trình chung NCM – TB in vitro 26 CHƢƠNG II NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 28 2.1 Đối tượng, địa điểm thời gian nghiên cứu 28 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 28 2.1.2 Địa điểm nghiên cứu 28 2.1.3 Thời gian nghiên cứu 28 2.2 Nội dung nghiên cứu 28 2.3 Phương pháp nghiên cứu 30 2.4 Phương pháp xử lý số liệu 33 CHƢƠNG III KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 34 3.1 Kết nghiên cứu giai đoạn vào mẫu 34 3.2 Kết nghiên cứu giai đoạn nhân nhanh 36 3.3 Kết nghiên cứu giai đoạn rễ tạo hoàn chỉnh 44 3.4 Kết nghiên cứu giai đoạn huấn luyện thích nghi 49 3.5 Một số lưu ý trình nhân giống hoa Đồng Tiền phương pháp in vitro 55 3.5.1 Vơ trùng 55 3.5.2 Giai đoạn phịng thí nghiệm 55 3.5.3 Giai đoạn huấn luyện thích nghi 56 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 57 A Kết luận 57 B Đề nghị 58 TÀI LIỆU THAM KHẢO 59 NHỮNG CHỮ VIẾT TẮT TRONG KHĨA LUẬN NCM – TB: Ni cấy mô tế bào CNSH: Công nghệ sinh học ĐTST: Điều tiết sinh trưởng CT: Công thức HSNN: Hệ số nhân nhanh MS: (Môi trường dinh dưỡng) Murashine & Sknoog 1962 KI: Kinetin IAA: Axit Indol butyric IAA: Bezyl amino purine BAP: Axit β – Indol acetic α - NAA: Axit α – Naphtyl acetic ppm: part per millon mM: milimol ĐC: Đối chứng DANH MỤC CÁC BẢNG SỐ LIỆU Bảng 1.1 Tình hình xuất hoa số nước giới Bảng 1.2 Diện tích sản lượng hoa - cảnh Việt Nam năm 2004 Bảng 3.1 Ảnh hưởng thời gian xử lý hóa chất khử trùng HgCl2 đến tỷ lệ thành công mẫu Bảng 3.2 Ảnh hưởng nồng độ KI đến khả bật chồi hệ số nhân nhanh hoa Đồng Tiền (sau tuần nuôi cấy) Bảng 3.3 Ảnh hưởng nồng độ KI đến khả sinh trưởng, phát triển hoa Đồng Tiền in vitro (sau tuần nuôi cấy) Bảng 3.4 Ảnh hưởng nồng độ IAA đến thời gian rễ khả rễ chồi hoa Đồng Tiền in vitro (sau tuần nuôi cấy) Bảng 3.5 Ảnh hưởng nồng độ IAA đến khả sinh trưởng rễ chồi hoa Đồng Tiền in vitro (sau tuần nuôi cấy) Bảng 3.6 Ảnh hưởng loại giá thể đến sức sống hoa Đồng Tiền in vitro giai đoạn vườn ươm (sau tuần theo dõi) DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 3.1 Ảnh hưởng nồng độ KI đến khả bật chồi hệ số nhân nhanh hoa Đồng Tiền Hình 3.2 Ảnh hưởng nồng độ KI đến khả sinh trưởng, phát triển hoa Đồng Tiền in vitro Hình 3.3 Ảnh hưởng nồng độ IAA đến thời gian rễ khả rễ chồi hoa Đồng Tiền in vitro (sau tuần ni cấy) Hình 3.4 Ảnh hưởng loại giá thể đến sức sống hoa Đồng Tiền in vitro giai đoạn vườn ươm 10 MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề Ngày nay, sử dụng hoa sinh hoạt công tác hàng ngày trở thành thói quen tốt, tạo nên nét văn hóa thưởng ngoạn, giải trí tiêu dùng Hoa coi ăn tinh thần thiếu người Hoa mang cho đời màu sắc rực rỡ, hương thơm ngào Trong mn vàn lồi hoa Đồng Tiền khơng loài hoa đẹp, đa dạng chủng loại mà phong phú màu sắc Hiện nay, hoa Đồng Tiền ưa chuộng thị trường giới Việt Nam Loài hoa trồng phổ biến nhiều nước Hà Lan, Mỹ, Đức, Nhật Bản, Trung Quốc [4] Sản xuất hoa Đồng Tiền đem lại nguồn doanh thu lớn cho nước này, đồng thời nâng cao kim ngạch xuất giới Với vẻ đẹp cao, màu sắc sống động, hoa Đồng Tiền đông đảo người tiêu dùng Việt Nam ưa thích Lồi hoa khơng có mặt vườn hoa cơng viên, phịng họp, bàn làm việc cơng sở phịng khách nhiều gia đình mà cịn có lễ hội, sinh nhật Việt Nam nước có điều kiện khí hậu thuận lợi để trồng hoa Đồng Tiền Việc sản xuất hoa Đồng Tiền không nâng cao thu nhập cho người dân mà cịn góp phần quan trọng việc thúc đẩy chuyển dịch cấu trồng, đẩy nhanh tiến trình cơng nghiệp hóa, đại hóa Nơng nghiệp Nơng thơn Tuy nhiên ngành sản xuất hoa nói chung ngành sản xuất hoa Đồng Tiền nói riêng nước ta cịn gặp phải nhiều khó khăn, chất lượng hoa thấp chưa đáp ứng nhu cầu xuất Một nguyên nhân chủ yếu nguồn giống chưa đáp ứng nhu cầu chất lượng Để đáp ứng nhu cầu tiêu thụ hoa ngày tăng, nhiều giống hoa, loại hoa mới, có giá trị thẩm mỹ, giá trị kinh tế giá trị văn hóa đưa 64 3.6 Một số lƣu ý trình nhân giống hoa Đồng Tiền phƣơng pháp in vitro 3.6.1 Vô trùng Tất khâu nuôi cấy trùng: dụng cụ nuôi cấy, mẫu nuôi cấy, môi trường (giá thể) thao nuôi cấy Sự thành công hay thất bại nuôi cấy mô phụ thuộc vào công việc vô trùng Nếu có khâu khơng vơ trùng mẫu nuôi cấy bị nhiễm vi sinh vật, nấm chết Khử trùng thực dụng cụ sau: Nồi hấp, tủ sấy, phiễu lọc vô trùng, hóa chất khử trùng Trước vào mẫu cần bật đèn UV 20 - 30 phút để khử trùng phịng ni cấy, đồng thời phải vệ sinh tay xà phịng dụng cụ thí nghiệm phải xử lý cồn đốt 900 3.6.2 Giai đoạn phịng thí nghiệm Nhiễm khuẩn, nấm mốc khó khăn thường gặp trình nhân giống in vitro Các môi trường nuôi cấy giai đoạn u cầu phải vơ trùng, có sơ suất kỹ thuật điều kiện ngoại cảnh (nhiệt độ, ẩm độ phịng) khơng đảm bảo làm cho bào tử nấm mốc rơi vào bình ni cấy Mơi trường dinh dưỡng bình tạo điều kiện cho vi khuẩn, nấm mốc phát triển nhanh chóng, ảnh hưởng xấu đến môi trường nuôi cấy Kết giai đoạn vào mẫu phụ thuộc vào giai đoạn lấy mẫu Các hoa Đồng Tiền dùng làm nguyên liệu cho nghiên cứu đề tài trồng vườn thực nghiệm nên lấy mẫu điều kiện khơng khí cao (80%) thời tiết nóng làm cho sức sống mẫu hoa Đồng Tiền cấy gây bị giảm nhiều, ảnh hưởng tới khả bật chồi mẫu Mẫu sử dụng để cấy gây chồi đỉnh sinh trưởng, chồi tương đối mọng nước giòn nên dễ gãy dập thao tác xử lý Lớp lông mịn phủ bề mặt mẫu làm giảm hiệu tác động hóa chất khử trùng, cần phải làm lớp lông trước khử trùng mẫu 65 3.6.3 Giai đoạn huấn luyện thích nghi Cây in vitro đưa từ bình ni ni cấy ngồi mơi trường tự nhiên để huấn luyện thường có sức đề kháng yếu (do thay đổi đột ngột từ môi trường nuôi cấy in vitro với đầy đủ chất dinh dưỡng, ẩm độ, nhiệt độ, ánh sáng ổn định điều kiện tự nhiên với nhiều biến động) Vì giai đoạn đầu trình huấn luyện, cần tạo điều kiện huấn luyện với chế độ giữ ẩm ánh sáng hợp lý, sau tự điều chỉnh để kịp thích nghi Các in vitro khó huấn luyện thích nghi ngồi tự nhiên, dễ bị gãy đổ thường nhạy cảm với ẩm độ môi trường, ẩm độ môi trường > 80%, bị thối rữa, môi trường khô bị héo đổ rạp, cần đảm bảo chặt chẽ việc che chắn chăm sóc Khi tưới nước, thiết phải phun nước dạng sương mù để tránh làm đổ 66 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ A Kết luận Từ kết nghiên cứu thu được, chúng tơi có số kết luận sau: Giai đoạn vào mẫu Các đỉnh sinh trưởng hoa Đồng Tiền Gerbera Jamesonii Bolus khử trùng dung dịch HgCl2 0,1% khoảng thời gian 10 phút sau xử lý sơ cồn 700 30 giây Môi trường dinh dưỡng sử dụng để vào mẫu là: MS + 10 g/l Agar + 20 g/l saccaroza + ml BAP + 10% nước dừa Thời gian vào mẫu tuần Giai đoạn nhân nhanh Môi trường để sử dụng cho nhân nhanh giống hoa Đồng Tiền Gerbera Jamesonii Bolus là: MS + g/l Agar + 20 g/l saccaroza + 10% nước dừa + ppm KI Thời gian nhân nhanh tuần Giai đoạn rễ tạo in vitro hồn chỉnh Mơi trường rễ thích hợp cho chồi hoa Đồng Tiền Gerbera Jamesonii Bolus là: MS +8 g/l Agar + 20 g/l saccaroza + 10% nước dừa + 10 ppm IAA + 0,5 g/l than hoạt tính Thời gian rễ tạo in vitro hồn chỉnh tuần Điều kiện ni cấy giai đoạn (vào mẫu, nhân nhanh, rễ tạo in vitro hồn chỉnh) phịng thí nghiệm là: 25 ± 20 C, ẩm độ 65 - 70%, cường độ ánh sáng 2000 - 2500 lux thời gian chiếu sáng 10 h/ngày Giai đoạn huấn luyện thích nghi Giá thể thích hợp để huấn luyện hoa Đồng Tiền in vitro đất thịt nghiền mịn Điều kiện huấn luyện thích nghi là: Độ ẩm khơng khí 80 - 85%, độ ẩm giá thể 65 - 80%, nhiệt độ 25 - 300C, nguồn khoáng bổ sung dung dịch dinh dưỡng MS phun lên dạng sương mù Thời gian huấn luyện thích nghi tuần 67 B Đề nghị Vì thời gian nghiên cứu có hạn, nên chúng tơi có số kiến nghị sau: Tiếp tục theo dõi vườn sản xuất để đánh giá khả sinh trưởng, phát triển, khả hoa, suất, chất lượng, khả chống chịu Cần tiến hành nghiên cứu ảnh hưởng phối hợp chất ĐTST như: Kinetin với IAA, BAP 2,4D Để xem xét vai trị sinh lý chúng q trình hình thành chồi từ chồi ban đầu Nghiên cứu ảnh hưởng IBA, α-NAA, than hoạt tính đến khả rễ giống hoa Đồng Tiền Gerbera Jamesonii Bolus để từ lựa chọn chất ĐTST thích hợp khả rễ giống hoa Đồng Tiền Từng bước ứng dụng kết nghiên cứu đề tài để cung cấp giống cho sản xuất 68 TÀI LIỆU THAM KHẢO Lê Trần Bình, Hồ Hữu Nhị, Lê Thị Muội (1997), CNSH thực vật cải tiến giống trồng, Nxb Nông nghiệp Hà Nội Võ Phương Chi, Dương Đức Tiến (1998), Phân loại thực vật, Nxb Hà Nội Đặng Văn Đông, Nguyễn Xuân Linh (2000), Hiện trạng giải pháp phát triển hoa cảnh ngoại thành Hà Nội, Kết nghiên cứu khoa học rau (1998 - 2000), Nxb Văn hóa dân tộc Hà Nội, tr 32 - 47 Đặng Văn Đông, Đinh Thế Lộc (2004), Công nghệ trồng hoa cho thu nhập cao, Nhà xuất Lao động Xã hội Nguyễn Xuân Hải, Nguyễn Thị Kim Lý (2004), Nghiên cứu ảnh hưởng giá thể dinh dưỡng cho hoa cúc sau nhân giống phương pháp ni cấy mơ tế bào Tạp chí NN&PTNT, số 11, tr 1539 1541 Nguyễn Văn Hiển (2000), Chọn giống trồng, Nhà xuất Giáo dục Đặng Thị Thanh Hương (2002), Nghiên cứu giống hoa Đồng Tiền phương pháp nuôi cấy in vitro Luận văn tốt nghiệp Trường đại học Nông Nghiệp I Hà Nội Nguyễn Xuân Linh (2000), Giáo trình kỹ thuật trồng hoa cảnh, Nhà xuất Nông nghiệp Nguyễn Xuân Linh, Nguyễn Thị Kim Lý (2005), Ứng dụng công nghệ sản xuất hoa, Nxb Lao động Hà Nội 10 Trần Đình Long (1997), Chọn giống trồng, Nhà xuất Nơng nghiệp 11 Nguyễn Hồng Lộc, Lê Việt Dũng, Nuôi cấy mô tế bào thực vật, Viện tài nguyên môi trường & Công nghệ sinh học, Đại học Huế 12 Dương Minh Nga cs (2003), Những vấn đề khoa học sống, Hội nghị cơng nghệ sinh học tồn quốc 69 13 Trần Duy Quý (1997), Các phương pháp chọn tạo giống trồng, Nhà xuất Nông nghiệp 14 Albert Sason (1998), Công nghệ sinh học phát triển (tài liệu dịch), UNESCO 15 Hoàng Thị Sản (1999), Phân loại thực vật học, Nhà xuất Giáo dục 16 Vũ Quang Sáng, Nguyễn Thị Nhẫn, Mai Thị Tân, Nguyễn Thị Kim Thanh (2007), Sinh lý thực vật ứng dụng, Bộ GD & ĐT, Trường Đại học Nông nghiệp I Hà Nội 17 Nguyễn Quang Thạch, Hoàng Thị Nga, Nguyễn Thị Phương Hoa (2003), Báo cáo xây dựng quy trình nhân giống hoa Đồng Tiền kỹ thuật nuôi cấy mô, Tạp chí Nơng nghiệp & PTNT, Số 8/2003 18 Nguyễn Quang Thạch, Nguyễn Thị Lý Anh, Nguyễn Thị Phương Thảo (2004), Giáo trình cơng nghệ sinh học nơng nghiệp, Nhà xuất Nông nghiệp 19 Nguyễn Quang Thạch, Nguyễn Thị Phương Hoa (2005), Nghiên cứu thăm dò ảnh hưởng Colchicine, tia Gama nguồn Co60 hoa Đồng Tiền Nam Phi (Gerberra Jamesonii) in vitro - Luận án thạc sỹ nông nghiệp 20 Nguyễn Đức Thành (2000), Nuôi cấy mô tế bào thực vật - nghiên cứu áp dụng, Nhà xuất Nông nghiệp, tr - 54 21 Nguyễn Văn Tới (2007), Ứng dụng Khoa học công nghệ sản xuất hoa Đà Lạt, Thông tin khoa học công nghệ số 3/2007, Sở khoa học công nghệ Lâm Đồng 22 Nguyễn Huy Trí, Đồn Văn Lư, Trồng hoa cảnh gia đình, Nhà xuất Thanh Hóa 23 Nguyễn Văn Uyển chủ biên tác giả (1998), Nuôi cấy mô thực vật phục vụ cho công tác chọn giống trồng Trung tâm CNSH 24 Đào Thanh Vân, Đặng Thị Tố Nga (2006), Giáo trình hoa, Trường Đại học Nơng Lâm Thái Ngun 70 25 Đỗ Văn Vịnh (2002), Công nghệ sinh học trồng, Nxb Nông nghiệp Hà Nội 26 Vũ Văn Vụ, Nguyễn Mộng Hùng, Lê Hồng Điệp (2006), Công nghệ sinh học, tập Nxb Giáo dục Hà Nội 27 Vũ Văn Vụ (chủ biên) (2005), Sinh lý thực vật Nxb Giáo dục Hà Nội 28 http://www.Dalat.gov.nn/rauhoadl/Desktop.aspx? 29 http://www.ebook.edu.vn/?page=118&view=334 30 http://www.khoahoc.com.vn 31 http://www.Rauhoaquavietnam.vn 32 http://www.sinhhocvietnam.com/forum/showthread.php?t=1508 33 http://www.vi.wikipedia.org 71 PHỤ LỤC BALANCED ANOVA FOR VARIATE SMV FILE LINH1 21/12/10 14:10 :PAGE anh huong cua thoi gian xu li HgCl2 den ti le cong mau VARIATE V003 SMV LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 0.000000 0.000000 0.00 1.000 LLAI 0.000000 0.000000 0.00 1.000 * RESIDUAL 0.000000 0.000000 * TOTAL (CORRECTED) 11 0.000000 0.000000 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SMN FILE LINH1 21/12/10 14:10 :PAGE anh huong cua thoi gian xu li HgCl2 den ti le cong mau VARIATE V004 SMN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 458.250 152.750 5.95 0.032 LLAI 24.6667 12.3333 0.48 0.644 * RESIDUAL 154.000 25.6667 * TOTAL (CORRECTED) 11 636.917 57.9015 ANOVA FOR VARIATE SMC FILE LINH1 21/12/10 14:10 :PAGE anh huong cua thoi gian xu li HgCl2 den ti le cong mau VARIATE V005 SMC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 1016.25 338.750 169.37 0.000 LLAI 8.66667 4.33333 2.17 0.195 * RESIDUAL 12.0001 2.00002 * TOTAL (CORRECTED) 11 1036.92 94.2652 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SMBC FILE LINH1 21/12/10 14:10 :PAGE anh huong cua thoi gian xu li HgCl2 den ti le cong mau VARIATE V006 SMBC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 860.250 286.750 54.62 0.000 LLAI 10.5000 5.25000 1.00 0.424 * RESIDUAL 31.5001 5.25001 * TOTAL (CORRECTED) 11 902.250 82.0227 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE LINH1 21/12/10 14:10 :PAGE anh huong cua thoi gian xu li HgCl2 den ti le cong mau MEANS FOR EFFECT CT$ - 72 CT$ NOS 3 3 SMV 40.0000 40.0000 40.0000 40.0000 SMN 21.0000 9.00000 11.6667 4.00000 SMC 12.0000 6.00000 13.0000 30.6667 SMBC 7.00000 25.0000 20.0000 5.00000 SE(N= 3) 0.000000 2.92499 0.816501 1.32288 5%LSD 6DF 0.000000 10.1180 2.82441 4.57604 - MEANS FOR EFFECT LLAI LLAI NOS 4 SMV 40.0000 40.0000 40.0000 SMN 13.2500 9.75000 11.2500 SMC 15.7500 14.2500 16.2500 SMBC 13.0000 15.2500 14.5000 SE(N= 4) 0.000000 2.53311 0.707110 1.14564 5%LSD 6DF 0.000000 8.76244 2.44601 3.96297 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE LINH1 21/12/10 14:10 :PAGE anh huong cua thoi gian xu li HgCl2 den ti le cong mau F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE SMV SMN SMC SMBC GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 40.000 12 11.417 12 15.417 12 14.250 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.00000 0.00000 0.0 1.0000 7.6093 5.0662 44.4 0.0320 9.7090 1.4142 9.2 0.0000 9.0566 2.2913 16.1 0.0002 |LLAI | | | 1.0000 0.6436 0.1953 0.4237 | | | | 73 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SCBD FILE LINH2 21/12/10 14:13 :PAGE anh huong cua KI den he so nhan choi hoa dong tien VARIATE V003 SCBD LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 0.000000 0.000000 0.00 1.000 LLAI 0.000000 0.000000 0.00 1.000 * RESIDUAL 0.000000 0.000000 * TOTAL (CORRECTED) 14 0.000000 0.000000 BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSNN FILE LINH2 21/12/10 14:13 :PAGE anh huong cua KI den he so nhan choi hoa dong tien VARIATE V004 HSNN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 16.4269 4.10672 320.17 0.000 LLAI 602534E-01 301267E-01 2.35 0.157 * RESIDUAL 102614 128267E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 16.5897 1.18498 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE LINH2 21/12/10 14:13 :PAGE anh huong cua KI den he so nhan choi hoa dong tien MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 3 3 SCBD 120.000 120.000 120.000 120.000 120.000 HSNN 2.63000 3.80000 4.48333 5.19000 2.48000 SE(N= 3) 0.000000 0.653878E-01 5%LSD 8DF 0.000000 0.213223 MEANS FOR EFFECT LLAI LLAI NOS 5 SCBD 120.000 120.000 120.000 HSNN 3.63400 3.78800 3.72800 SE(N= 5) 0.000000 0.506492E-01 5%LSD 8DF 0.000000 0.165162 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE LINH2 21/12/10 14:13 :PAGE anh huong cua KI den he so nhan choi hoa dong tien F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE SCBD GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 120.00 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.00000 0.00000 0.0 1.0000 |LLAI | | | 1.0000 | | | | 74 HSNN 15 3.7167 1.0886 0.11326 3.0 0.0000 0.1567 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SCC FILE LINH3 21/12/10 14:15 :PAGE anh huong cua IAA den kha nang re hoa dong tien VARIATE V003 SCC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 0.000000 0.000000 0.00 1.000 LLAI 0.000000 0.000000 0.00 1.000 * RESIDUAL 0.000000 0.000000 * TOTAL (CORRECTED) 14 0.000000 0.000000 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SCRR FILE LINH3 21/12/10 14:15 :PAGE anh huong cua IAA den kha nang re hoa dong tien VARIATE V004 SCRR LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 11247.3 2811.83 148.12 0.000 LLAI 20.1333 10.0667 0.53 0.612 * RESIDUAL 151.868 18.9835 * TOTAL (CORRECTED) 14 11419.3 815.667 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE LINH3 21/12/10 14:15 :PAGE anh huong cua IAA den kha nang re hoa dong tien MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 3 3 SCC 120.000 120.000 120.000 120.000 120.000 SCRR 47.0000 113.667 117.000 117.333 113.333 SE(N= 3) 0.000000 2.51552 5%LSD 8DF 0.000000 8.20286 MEANS FOR EFFECT LLAI LLAI NOS 5 SCC 120.000 120.000 120.000 SCRR 100.400 101.400 103.200 SE(N= 5) 0.000000 1.94851 5%LSD 8DF 0.000000 6.35390 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE LINH3 21/12/10 14:15 :PAGE anh huong cua IAA den kha nang re hoa dong tien 75 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE SCC SCRR GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 120.00 15 101.67 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.00000 0.00000 0.0 1.0000 28.560 4.3570 4.3 0.0000 |LLAI | | | 1.0000 0.6116 | | | | BALANCED ANOVA FOR VARIATE SCC FILE LINH4 22/12/10 11:51 :PAGE anh huong cua IAA toi kha nang sinh truong cua choi hoa dong tien VARIATE V003 SCC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 0.000000 0.000000 0.00 1.000 LLAI 0.000000 0.000000 0.00 1.000 * RESIDUAL 0.000000 0.000000 * TOTAL (CORRECTED) 14 0.000000 0.000000 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SR/C FILE LINH4 22/12/10 11:51 :PAGE anh huong cua IAA toi kha nang sinh truong cua choi hoa dong tien VARIATE V004 SR/C LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 13.2945 3.32364 ****** 0.000 LLAI 249676E-01 124838E-01 5.74 0.028 * RESIDUAL 174099E-01 217624E-02 * TOTAL (CORRECTED) 14 13.3369 952637 BALANCED ANOVA FOR VARIATE DDR FILE LINH4 22/12/10 11:51 :PAGE anh huong cua IAA toi kha nang sinh truong cua choi hoa dong tien VARIATE V005 DDR LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 15.7796 3.94491 ****** 0.000 LLAI 348400E-01 174200E-01 5.25 0.035 * RESIDUAL 265592E-01 331990E-02 * TOTAL (CORRECTED) 14 15.8410 1.13150 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE LINH4 22/12/10 11:51 :PAGE anh huong cua IAA toi kha nang sinh truong cua choi hoa dong tien MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS SCC SR/C DDR 76 3 3 120.000 120.000 120.000 120.000 120.000 0.362000 1.50000 2.25000 3.20000 1.45000 2.17000 3.26000 4.52000 5.14000 3.75000 SE(N= 3) 0.000000 0.269335E-01 0.332661E-01 5%LSD 8DF 0.000000 0.878274E-01 0.108477 MEANS FOR EFFECT LLAI LLAI NOS 5 SCC 120.000 120.000 120.000 SR/C 1.74000 1.80740 1.70980 DDR 3.71000 3.76600 3.82800 SE(N= 5) 0.000000 0.208626E-01 0.257678E-01 5%LSD 8DF 0.000000 0.680308E-01 0.840263E-01 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE LINH4 22/12/10 11:51 :PAGE anh huong cua IAA toi kha nang sinh truong cua choi hoa dong tien F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE SCC SR/C DDR GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 120.00 15 1.7524 15 3.7680 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.00000 0.00000 0.0 1.0000 0.97603 0.46650E-01 2.7 0.0000 1.0637 0.57619E-01 1.5 0.0000 |LLAI | | | 1.0000 0.0285 0.0349 | | | | 77 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLS FILE LINH5 21/12/10 14:18 :PAGE anh huong cua cac gia the toi kha nang sinh truong phat trien hoa dong tien in v VARIATE V003 TLS LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 179.583 59.8611 22.22 0.002 LLAI 10.5000 5.25000 1.95 0.223 * RESIDUAL 16.1667 2.69445 * TOTAL (CORRECTED) 11 206.250 18.7500 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SLM FILE LINH5 21/12/10 14:18 :PAGE anh huong cua cac gia the toi kha nang sinh truong phat trien hoa dong tien in v VARIATE V004 SLM LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 1.74743 582475 6.47 0.027 LLAI 234517 117258 1.30 0.340 * RESIDUAL 539950 899917E-01 * TOTAL (CORRECTED) 11 2.52189 229263 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TTCC FILE LINH5 21/12/10 14:18 :PAGE anh huong cua cac gia the toi kha nang sinh truong phat trien hoa dong tien in v VARIATE V005 TTCC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 1.21602 405342 305.91 0.000 LLAI 171166E-01 855832E-02 6.46 0.032 * RESIDUAL 795020E-02 132503E-02 * TOTAL (CORRECTED) 11 1.24109 112827 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE LINH5 21/12/10 14:18 :PAGE anh huong cua cac gia the toi kha nang sinh truong phat trien hoa dong tien in v MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 3 3 TLS 28.3333 23.6667 34.3333 30.6667 SLM 2.30000 3.23667 3.23000 2.97000 TTCC 1.59000 2.45333 2.24000 2.06000 SE(N= 3) 0.947707 0.173197 0.210161E-01 5%LSD 6DF 3.27827 0.599116 0.726982E-01 MEANS FOR EFFECT LLAI LLAI NOS TLS SLM TTCC 78 4 28.0000 29.5000 30.2500 2.73750 3.01500 3.05000 2.04000 2.08500 2.13250 SE(N= 4) 0.820739 0.149993 0.182005E-01 5%LSD 6DF 2.83907 0.518850 0.629585E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE LINH5 21/12/10 14:18 :PAGE anh huong cua cac gia the toi kha nang sinh truong phat trien hoa dong tien in vitro F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TLS SLM TTCC GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 29.250 12 2.9342 12 2.0858 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 4.3301 1.6415 5.6 0.0016 0.47881 0.29999 10.2 0.0268 0.33590 0.36401E-01 1.7 0.0000 |LLAI | | | 0.2225 0.3397 0.0323 | | | | ... VINH - 12.2010 TRƢỜNG ĐẠI HỌC VINH KHOA NÔNG LÂM NGƢ - XÂY DỰNG QUY TRÌNH NHÂN GIỐNG HOA ĐỒNG TIỀN GERBERA JAMESONII BOLUS BẰNG KỸ THUẬT NUÔI CẤY MÔ IN VITRO KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP KỸ... tài: ? ?Xây dựng quy trình nhân giống hoa Đồng Tiền Gerbera Jamesonii Bolus kỹ thuật nuôi cấy mơ in vitro? ?? 1.2 Mục đích u cầu đề tài 1.2.1 Mục đích 12 Góp phần hồn thiện quy trình nhân giống hoa Đồng. .. (Viện sinh học nông nghiệp - Đại học Nông Nghiệp I) nghiên cứu phương pháp nuôi cấy mô in vitro giống hoa Đồng Tiền từ Tiệp Khắc, kết nghiên cứu hồn thành quy trình nhân giống hoa Đồng Tiền kỹ thuật