Xây dựng quy trình nhân giống in vitro cây mẫu đơn (paeonia suffruticosa andr ) (năm thứ hai)

BAN QUẢN LÝ KHU NÔNG NGHIỆP CÔNG NGHỆ CAO TP.HCM TRUNG TÂM ƯƠM TẠO DOANH NGHIỆP NÔNG NGHIỆP CÔNG NGHỆ CAO BÁO CÁO NGHIỆM THU NHIỆM VỤ KHOA HỌC CÔNG NGHỆ CẤP CƠ SỞ XÂY DỰNG QUY TRÌNH NHÂN GIỐNG IN VITRO CÂY MẪU ĐƠN (Paeonia suffruticosa Andr.) (NĂM THỨ HAI) THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH THÁNG 12/2020 BAN QUẢN LÝ KHU NÔNG NGHIỆP CÔNG NGHỆ CAO TP.HCM TRUNG TÂM ƯƠM TẠO DOANH NGHIỆP NÔNG NGHIỆP CÔNG NGHỆ CAO BÁO CÁO NGHIỆM THU NHIỆM VỤ KHOA HỌC CÔNG NGHỆ CẤP CƠ SỞ XÂY DỰNG QUY TRÌNH NHÂN GIỐNG IN VITRO CÂY MẪU ĐƠN (Paeonia suffruticosa Andr.) (NĂM THỨ HAI) CƠ QUAN CHỦ TRÌ PHĨ GIÁM ĐỐC CHỦ NHIỆM Hồng Anh Tuấn Nguyễn Văn Tồn THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH THÁNG 12/2020 MỤC LỤC MỤC LỤC i DANH MỤC BẢNG iii DANH MỤC HÌNH iv DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT vi TÓM TẮT vii THÔNG TIN CHUNG ix PHẦN MỞ ĐẨU CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tổng quan Mẫu đơn 1.1.1 Giới thiệu chung Mẫu đơn 1.1.2 Dược tính giá trị dược tính Mẫu đơn 1.1.3 Một số thuốc Mẫu đơn 1.2 Những nghiên cứu liên quan đến Mẫu đơn chi 1.2.1 Tình hình nghiên cứu nước 1.2.2 Tình hình nghiên cứu ngồi nước 1.3 Đánh giá trạng cơng trình nghiên cứu 10 1.4 Các kết đạt năm thứ 11 CHƯƠNG NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 14 2.1 Nội dung nghiên cứu 14 2.2 Địa điểm thời gian nghiên cứu 14 2.3 Vật liệu nghiên cứu 14 2.3.1 Nguồn giống 14 2.3.2 Dụng cụ, hóa chất, thiết bị 14 2.4 Phương pháp nghiên cứu 15 2.4.1 Thí nghiệm 5: Khảo sát môi trường rễ tạo Mẫu đơn in vitro hoàn chỉnh 15 2.4.2 Thí nghiệm 6: Khảo sát ảnh hưởng mơi trường khống dinh dưỡng cho sinh trưởng Mẫu đơn in vitro hoàn chỉnh 16 2.4.3 Thí nghiệm 7.1: Khảo sát số loại giá thể ảnh hưởng đến phát triển Mẫu đơn in vitro 17 2.4.4 Thí nghiệm 7.2: Khảo sát ảnh hưởng nồng độ phân bón Growmore đến phát triển Mẫu đơn in vitro vườn ươm 19 2.5 Phương pháp thu thập, xử lý số liệu tiêu theo dõi 20 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 21 3.1 Ảnh hưởng NAA IBA đến khả tạo Mẫu đơn in vitro hoàn chỉnh 21 3.2 Ảnh hưởng mơi trường khống dinh dưỡng cho sinh trưởng Mẫu đơn in vitro hoàn chỉnh 33 3.3 Ảnh hưởng số loại giá thể đến phát triển Mẫu đơn in vitro 37 3.4 Ảnh hưởng nồng độ phân bón Growmore đến phát triển Mẫu đơn in vitro vườn ươm 42 i 3.5 Sản phẩm nhiệm vụ 45 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 50 Kết luận 50 Đề nghị 50 TÀI LIỆU THAM KHẢO 51 PHỤ LỤC 54 ii DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1 Bố trí thí nghiệm ảnh hưởng NAA IBA đến khả tạo Mẫu đơn in vitro hoàn chỉnh 15 Bảng 2.2 Bố trí thí nghiệm ảnh hưởng giá thể đến sinh trưởng Mẫu đơn 18 Bảng 3.1 Ảnh hưởng NAA IBA đến tỷ lệ tạo rễ Mẫu đơn 22 Bảng 3.2 Ảnh hưởng NAA IBA đến số lượng chiều dài rễ Mẫu đơn 26 Bảng 3.3 Ảnh hưởng NAA IBA đến chiều cao số lượng Mẫu đơn 31 Bảng 3.4 Ảnh hưởng mơi trường khống dinh dưỡng đến sinh trưởng Mẫu đơn in vitro hoàn chỉnh 34 Bảng 3.5 Ảnh hưởng số loại giá thể đến phát triển Mẫu đơn in vitro sau tuần 38 Bảng 3.6 Ảnh hưởng số loại giá thể đến phát triển Mẫu đơn in vitro sau tuần 39 Bảng 3.7 Ảnh hưởng nồng độ Growmore đến phát triển Mẫu đơn in vitro sau tuần 43 iii DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Cây củ hoa Mẫu đơn Hình 1.2 Hạt Mẫu đơn sau tuần khử trùng mơi trường MS 11 Hình 1.3 Cây Mẫu đơn in vitro sau 45 ngày nuôi cấy 12 Hình 1.4 Đoạn thân Mẫu đơn sau 45 ngày nuôi cấy 12 Hình 1.5 Cụm chồi Mẫu đơn sau 45 ngày nuôi cấy 13 Hình 2.1 Chồi cụm chồi Mẫu đơn 14 Hình 2.2 Chồi Mẫu đơn sau cấy chuyền sang môi trường rễ 16 Hình 2.3 Cây Mẫu đơn sau tuần nuôi cấy môi trường WPM 17 Hình 2.4 Cây Mẫu đơn phát triển giá thể sau tuần 18 Hình 2.5 Cây Mẫu đơn huấn luyện tuần trước ngồi vườn ươm 19 Hình 2.6 Cây Mẫu đơn chuyển sang chậu giá thể 20 Hình 3.1 Chồi Mẫu đơn môi trường tạo rễ sau tuần 23 Hình 3.2 Biểu đồ thể tương quan nồng độ NAA IBA đến tỷ lệ tạo rễ Mẫu đơn 24 Hình 3.3 Biểu đồ bề mặt thể tương quan nồng độ NAA IBA đến tỷ lệ tạo rễ Mẫu đơn 25 Hình 3.4 Biểu đồ thể tương quan nồng độ NAA IBA đến số lượng rễ Mẫu đơn 28 Hình 3.5 Biểu đồ bề mặt thể tương quan nồng độ NAA IBA đến số lượng rễ Mẫu đơn 28 Hình 3.6 Rễ Mẫu đơn sau 12 tuần nuôi cấy môi trường MS bổ sung chất điều hòa sinh trưởng thực vật 29 Hình 3.7 Biểu đồ bề mặt thể tương quan nồng độ NAA IBA đến chiều dài rễ Mẫu đơn 30 Hình 3.8 Biểu đồ thể tương quan nồng độ NAA kết hợp IBA đến chiều dài rễ Mẫu đơn 30 Hình 3.9 Mẫu đơn sau 12 tuần nuôi cấy môi trường MS bổ sung chất điều hòa sinh trưởng thực vật 32 Hình 3.10 Cây Mẫu đơn mơi trường khống dinh dưỡng sau tuần ni cấy 36 Hình 3.11 Biểu đồ so sánh tỷ lệ sống Mẫu đơn giá thể sau tuần tuần 40 iv Hình 3.12 Biểu đồ so sánh số lượng Mẫu đơn giá thể sau tuần tuần 41 Hình 3.13 Cây Mẫu đơn công thức giá thể sau tuần 42 Hình 3.14 Cây Mẫu đơn chuyển sang chậu lớn chứa giá thể 42 Hình 3.15 Cây sau tuần ngồi vườn ươm 44 Hình 3.16 Cây Mẫu đơn sau tuần tưới 0,5 mg/L Growmore 44 Hình 3.17 Cây Mẫu đơn Cây Mẫu đơn sau tuần tưới mg/L Growmore 45 Hình 3.18 Cây Mẫu đơn ex vitro 45 Hình 3.19 Hạt Mẫu đơn sau khử trùng 47 Hình 3.20 Cây mẫu đơn nảy mầm sau 45 ngày 47 Hình 3.21 Đoạn thân Mẫu đơn mang chồi 48 Hình 3.22 Cụm chồi Mẫu đơn 48 Hình 3.23 Cây mẫu đơn in vitro hồn chỉnh mơi trường rễ 48 Hình 3.24 Cây Mẫu đơn môi trường WPM 49 Hình 3.25 Cây Mẫu đơn ex vitro 12 tuần 49 v DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT BA – Benzyladenine NAA α – Naphthaleneacetic acid MS Murasighe Skoog GA3 Gibberellic acid IBA Indole-3-butyric acid WPM Woody Plant Medium (Lloyd and McCown 1980) TDZ – phenyl – (1,2,3 thiadiazol – – yl) IAA Indole – – acetic acid MS Murashige Skoog vi TÓM TẮT Nhiệm vụ “ Xây dựng quy trình nhân giống in vitro Mẫu đơn (Paeonia suffruticosa Andr.)” thực hai năm (2019 – 2020) Phòng Hỗ trợ Công nghệ tế bào thực vật thuộc Trung Tâm Ươm tạo Doanh nghiệp Nông nghiệp Công nghệ cao phương pháp nuôi cấy mô môi trường bán rắn Mục tiêu nhiệm vụ nhằm xây dựng quy trình vi nhân giống Mẫu đơn (Paeonia suffruticosa Andr.) hoàn thiện từ giai đoạn vô mẫu hạt đến giai đoạn giống vườn ươm đạt tiêu chuẩn Trong năm 2019, nhiệm vụ xây dựng thành cơng quy trình vi nhân giống Mẫu đơn từ giai đoạn khử trùng mẫu hạt tạo nguồn mẫu ban đầu đến giai đoạn nhân nhanh cụm chồi thu kết sau: Để khử trùng hạt Mẫu đơn, vỏ hạt loại bỏ, sau sử dụng dung dịch Sodium hypochlorite 2,5% 10 phút để khử trùng hạt cho kết mẫu nhiễm 32,5%, tỷ lệ mẫu sống đạt 67,5% Hạt cấy chuyền qua môi trường MS có bổ sung mg/L BA + mg/L GA3 cho tỷ lệ hình thành đạt 63,33% Đoạn thân mang chồi ngủ vị trí đốt thân thứ Mẫu đơn in vitro nuôi cấy mơi trường MS bổ sung mg/L BA có tỷ lệ bật chồi 61,67% Chồi Mẫu đơn tạo cụm chồi mơi trường MS có bổ sung mg/L BA 0,25 mg/L NAA cho kết hệ số nhân 3,58 Trong năm 2020, nhóm tác giả tiến hành thực nội dung thí nghiệm tiếp theo: sử dụng phương pháp nuôi cấy mô thường quy tạo rễ môi trường MS bổ sung chất điều hịa sinh trưởng thực vật, khảo sát mơi trường dưỡng in vitro giá thể trồng cây, chế độ chăm sóc ngồi vườn ươm Kết Mẫu đơn rễ, tạo hồn cỉnh mơi trường MS + mg/L IBA + mg/L NAA với tỷ lệ tạo rễ 88,89% Cây phát triển tốt mơi trường khống WPM Cây Mẫu đơn trồng giá thể phối trộn đất/ tro trấu/ phân trùn/ xơ dừa với tỉ lệ 1:1:1:2 tuần, sau chuyển chậu chăm sóc với chế độ phân Growmore nồng độ 0,5 mg/L tuần lần cho tỉ lệ sống cao, đạt mức 71,67% Từ đó, nghiên cứu hồn chỉnh quy trình vii nhân giống in vitro Mẫu đơn, với đưa chế độ chăm sóc cho Mẫu đơn thích nghi ngồi vườn ươm Kết năm 2019 2020, xây dựng thành công quy trình nhân giống in vitro Mẫu đơn (Paeonia suffruticosa Andr.)” hoàn chỉnh từ giai đoạn tạo nguồn mẫu ban đầu đến giai đoạn hậu nuôi cấy mô với tỷ lệ sống sót ngồi vườn ươm đạt 71,67% viii cm cm Hình 3.17 Cây Mẫu đơn Cây Mẫu đơn sau tuần tưới mg/L Growmore Như vậy, điều kiện chăm sóc ngồi vườn ươm, cụ thể chế độ bón phân cho Mẫu đơn giai đoạn chuyển chậu từ môi trường giá thể huấn luyện đến sau tuần ảnh hưởng trực tiếp đến tỉ lệ sống chất lượng Sử dụng phân Growmore nồng độ 0,5 g/L tuần lần cho tỉ lệ sống cao hơn, đạt mức 71,67% 3.5 Sản phẩm nhiệm vụ Nhiệm vụ thành công tạo Mẫu đơn in vitro hồn chỉnh tìm điều kiện thích hợp để huấn luyện đưa Mẫu đơn in vitro vườn ươm, hồn thành quy trình nhân giống in vitro Mẫu đơn với nguồn nguyên liệu ban đầu hạt Hình 3.18 Cây Mẫu đơn ex vitro A,B: Cây Mẫu đơn ex vitro 12 tuần tuổi C: Cây Mẫu đơn ex vitro tuần tuổi 45 Quy trình nhân giống in vitro Mẫu đơn (12 – 13 tháng) (Đề xuất) Hạt Mẫu đơn to, chắc, thời gian bảo quản không tháng Khử trùng mẫu (dung dịch Sodium hypochlorite 2,5% 10 phút) tuần Tạo Mẫu đơn in vitro từ hạt (Môi trường MS + mg/L BA + mg/L GA3) 1,5 tháng Tạo chồi Mẫu đơn in vitro từ đốt thân thứ (Môi trường MS + mg/L BA) 1.5 tháng Tạo cụm chồi Mẫu đơn in vitro (Môi trường MS + mg/L BA + 0,25 mg/L NAA) 1,5 tháng Tạo Mẫu đơn in vitro (Môi trường MS + mg/L IBA + mg/L NAA) 12 tuần Tăng trưởng Mẫu đơn in vitro (Môi trường WPM) Trồng điều kiện phịng thí nghiệm (Đất: Tro trấu: Mụn dừa: Phân trùn = 1:1:2:1) Huấn luyện thích nghi tuần Trồng vườn ươm (Đất: Tro trấu: Mụn dừa: Phân trùn = 1:1:2:1; 0,5 g/L Growmore/ lần/ tuần 46 DIỄN GIẢI QUY TRÌNH Từ kết nhiệm vụ, nhóm tác giả đề xuất quy trình vi nhân giống Mẫu đơn đến giai đoạn nhân chồi từ vật liệu ban đầu hạt Mẫu đơn : Giai đoạn khử trùng mẫu: Chọn hạt Mẫu đơn to, đều, thời gian thu hoạch không tháng để khử trùng tạo nguồn mẫu ban đầu dung dịch Sodium hypochlorite 2,5% 10 phút Hình 3.19 Hạt Mẫu đơn sau khử trùng Giai đoạn tạo Mẫu đơn in vitro trực tiếp từ hạt Mẫu đơn môi trường nuôi cấy bán rắn Môi trường nuôi cấy: môi trường MS + mg/L GA3 + mg/L BA + 30 g/L đường + g/L agar, pH = 5,8 Hình 3.20 Cây mẫu đơn nảy mầm sau 45 ngày Giai đoạn tạo chồi: Các đoạn thân mang chồi ngủ vị trí thứ cấy chuyền sang môi trường bật chồi để tạo chồi phục vụ cho giai đoạn nhân chồi Môi trường nuôi cấy: môi trường MS + mg/L BA + 30g/L đường + g/L agar, pH = 5,8 47 Hình 3.21 Đoạn thân Mẫu đơn mang chồi Giai đoạn tạo cụm chồi: Các chồi đạt chuẩn cấy chuyền sang môi trường nuôi cấy: môi trường MS + mg/L BA + 0,25 mg/L NAA + 30g/L đường + g/L agar, pH = 5,8 Hình 3.22 Cụm chồi Mẫu đơn Giai đoạn rễ dưỡng hoàn chỉnh: Các chồi khỏe mạnh đạt chuẩn cấy chuyền sang môi trường tạo rễ để tạo Mẫu đơn in vitro hồn chỉnh, sau Mẫu đơn tiếp tục chuyển sang môi trường dưỡng để tăng tỷ lệ sống ngồi vườn ươm Mơi trường rễ: môi trường MS + mg/L IBA + mg/L NAA + 30g/L đường + g/L aga,r pH = 5,8 Hình 3.23 Cây mẫu đơn in vitro hồn chỉnh môi trường rễ 48 Môi trường dưỡng cây: WPM + 30g/L đường + g/L aga,r pH = 5,8 Hình 3.24 Cây Mẫu đơn mơi trường WPM Giai đoạn huấn luyện chăm sóc ngồi vườn ươm: Mẫu đơn in vitro trồng giá thể phối trộn đất, tro trấu, phân trùn, xơ dừa với tỉ lệ 1:1:1:2 (v/v) tuần điều kiện phịng ni cấy cây, sau chuyển huấn luyện điều kiện tự nhiên tuần sau chuyển hẳn vào chậu trồng chăm sóc, sau tuần ngày bắt đầu bón phân Growmore nồng độ 0,5 g/L tuần lần Hình 3.25 Cây Mẫu đơn ex vitro 12 tuần 49 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ Kết luận Nhiệm vụ bước đầu thực thành cơng quy trình nhân giống in vitro Mẫu đơn từ giai đoạn hạt giai đoạn vườn ươm Cây Mẫu đơn rễ, tạo hoàn cỉnh sau 12 tuần nuôi cấy môi trường MS + mg/L IBA + mg/L NAA với tỷ lệ tạo rễ 88,89% Cây phát triển tốt mơi trường khống WPM tuần Cây cao 5,17 cm, có từ – rễ, rễ dài trung bình 5,83 cm Bước đầu xác định số điều kiện chăm sóc phù hợp để Mẫu đơn in vitro chuyển vườn ươm thích nghi với mơi trường tự nhiên: giá thể huấn luyện hỗn hợp phối trộn đát/ tro trấu/ phân trùn/ xơ dừa với tỉ lệ 1:1:1:2 tuần, sau chuyển chậu chăm sóc với chế độ phân Growmore nồng độ 0,5 g/L tuần lần cho tỉ lệ sống cao, đạt mức 71,67% Đề nghị Đề xuất số hướng nghiên cứu sau: Tiếp tục nghiên cứu tạo rễ cho chồi Mẫu đơn môi trường khoáng khác để nâng cao tỉ lệ tạo rễ chất lượng in vitro Tiếp tục nghiên cứu khả hoa Mẫu đơn có nguồn gốc in vitro khu vực thành phố Hồ Chí Minh 50 TÀI LIỆU THAM KHẢO An BY 2005 Studies on the establishment of in vitro regenera-tion system of Paeonia suffruticosa Andr Northeast Forestry University MSc Thesis Beruto M, Lanteri L, Portogallo C 2004 Micropropagation of tree peony (Paeonia suffruticosa) Plant Cell, Tiss Org Cult 79: pp 249 - 255 Brukhin VB, Batygina TB 1994 Embryo culture and somatic embryogenesis in culture of Paeonia anomala Phytomorphology 44: pp 154 – 157 Cerna K, Dedicova B, Borbelyova D 2001 Micropropagation of Paeonia arborea Donn, Syn P.suffruticosa Andr Acta fytotechnica et zootechnica, Vol 4: pp 51 – 54 Chen XL 2005 The preliminary research on tissue culture of Paeonia suffruticosa Henan Agricultural University MSc Thesis Chen YP, Ding L, Zhao MJ 2001 The study of inducing callus with different organs of Paeonia rockii T.Hong et J.J.Li J Northwest Normal Univ (Natural Science) 37: pp 66-69 Constantine D.R 1986 Plant tisue culture and its agricultural applications Withers, A.L – Anderson: pp 175 – 186 Franc P 1996 Zahradnictví: roc.21, c.3, pp16 – 18 Gao ZM, Wang Y, Wang LY 2001 The recent development of research on propagation and breeding of peony J Beijing For Univ.23: pp 75-79 10 He GM 2006 Studies on distant cross – breeding and embryo in vitro culture and somatic embryogenesis in tree peonies Beijing Forestry University Ph.D Thesis 11 He GM, Cheng FY, Li P 2006 Preliminary studies on culture in vitro of ovule and immature embryo of two tree – peony culti – vars Acta Hoftic Sin 33: pp 185 12 Huang SY 1987 Embryo culture and plantlets regeneration of Paeonia suffruticosa Plant Physiol Comm 2: pp 54 – 55 51 13 Jiang ZH 2000 Chinese peony-cultivation and the appreciation and cultural origin Beijing: China Forestry Publishing House, pp – 14 Kong XS, Zhang MX 1998 The research of peony propagation technology in vitro Northwest Hortic 3: pp 87 – 89 15 Li JY 2000 Study of the origin of Chinese Peony Beijing For Univ J 20: pp 22-26 16 Li P 2007 Studies on the micropropagation of tree peonies Beijing Forestry University MSc Thesis 17 Li YL, Wu DY, Pan SL 1984 The research of peony tube seedlings reproduction technology Sci Bull 8: pp 500 – 502 18 Li YM 2004 Studies on the tissue culture of three cultivars of Paeonia suffruticosa Andr Beijing For Univ MSc Thesis 19 Liu SM, Wang LY 1987 Peony Beijing: China Building Industry Press 20 Raghavan V 2003 One hundred years of zygotic embryo culture investigation Cell Dev Biol Plant 39: pp 437 – 442 21 Tian D, Tilt KM, Dane F, Woods Fm, Sibley JL 2010 Comparison of shoot induction ability of different explants in herbaceous peony (Paeonia lactiflora Pall.) Scientia Horticulturae 123: pp 385 – 389 22 Wang JG 2001 Chinese Peony, China Forestry Publishing House, Beijing 23 Xu GJ 2002 Studies on micropropagation of Chinese tree peonies Beijing Forestry University MSc Thesis 24 Zeng DX, Yin WL, Zhao XQ 2000 Peony propagation J Beijing For Univ 22: pp 90 – 95 25 Zhou RC, Yao CH 2001 Embryo culture regeneration of Paeonia rockii Subtropical Plant Sci 30: pp 62 – 68 26 Wen SS, Cheng FY, Zhong Y, Wang X, Li LZ, Zhang YX, Qiu JM 2016 Efficient protocols for the micropropagation of tree peony (Paeonia sufruticosa ‘Jin Pao Hong’ P suffruticosa ‘Wu Long Peng Sheng’, and P x lemoinei ‘High Noon’) and application of arbuscular 52 mycorrhizal fungi to improve Horticulturae: pp 10 -17 53 plantlet establishment Scientia PHỤ LỤC Xử lý số liệu tỷ lệ hình thành rễ nội dung Analysis of Variance for tylere - Type III Sums of Squares Source Sum of Squares Df Mean Square MAIN EFFECTS A:IBA 2,08405 1,04203 B:NAA 0,343428 0,171714 INTERACTIONS AB 0,500303 0,125076 RESIDUAL 0,0434865 18 0,00241592 TOTAL (CORRECTED) 2,97127 26 Multiple Range Tests for tylere by IBA F-Ratio P-Value 431,32 71,08 0,0000 0,0000 51,77 0,0000 F-Ratio P-Value 1006,67 234,13 0,0000 0,0000 238,56 0,0000 Method: 95,0 percent LSD IBA Count LS Mean LS Sigma Homogeneous Groups X 0,422451 0,016384 X 0,974071 0,016384 X 1,04341 0,016384 Multiple Range Tests for tylere by NAA Method: 95,0 percent LSD NAA Count LS Mean LS Sigma 0,674061 0,016384 0,5 0,815584 0,016384 0,950289 0,016384 Multiple Range Tests for tylere by ct Method: 95,0 percent Duncan ct Count Mean HM1 0,100167 HM4 0,460026 HM7 0,707159 HM2 0,841197 HM9 0,909157 HM6 0,932237 HM5 1,05449 HM3 1,08082 HM8 1,23455 Homogeneous Groups X X X Homogeneous Groups X X X X XX X X X X Xử lý số liệu số rễ nội dung Analysis of Variance for so re - Type III Sums of Squares Source Sum of Squares Df Mean Square MAIN EFFECTS A:IBA 1,72999 0,864993 B:NAA 0,402363 0,201181 INTERACTIONS AB 0,819948 0,204987 RESIDUAL 0,0154667 18 0,000859259 TOTAL (CORRECTED) 2,96776 26 Multiple Range Tests for So re by IBA Method: 95,0 percent LSD IBA Count LS Mean LS Sigma Homogeneous Groups X 1,19222 0,00977104 X 1,68333 0,00977104 X 1,76556 0,00977104 Multiple Range Tests for So re by NAA Method: 95,0 percent LSD NAA Count LS Mean LS Sigma Homogeneous Groups X 1,37778 0,00977104 X 0,5 1,60222 0,00977104 X 1,66111 0,00977104 Multiple Range Tests for so re by ct Method: 95,0 percent Duncan ct Count Mean Homogeneous Groups 54 HM1 HM4 HM7 HM9 HM2 HM6 HM5 HM3 HM8 3 3 3 3 0,71 1,35667 1,51 1,58667 1,64667 1,68667 1,76333 1,77667 1,88667 X X X X X X X X X Xử lý số liệu chiều dài rễ nội dung Analysis of Variance for CDR - Type III Sums of Squares Source Sum of Squares Df Mean Square MAIN EFFECTS A:IBA 0,32865 0,164325 B:NAA 0,197428 0,0987141 INTERACTIONS AB 0,412061 0,103015 RESIDUAL 0,00168584 18 0,0000936577 TOTAL (CORRECTED) 0,939825 26 Multiple Range Tests for CDR by IBA Method: 95,0 percent LSD IBA Count LS Mean LS Sigma Homogeneous Groups X 0,358065 0,0032259 X 0,559846 0,0032259 X 0,614642 0,0032259 Multiple Range Tests for CDR by NAA Method: 95,0 percent LSD NAA Count LS Mean LS Sigma Homogeneous Groups X 0,389921 0,0032259 X 0,5 0,570846 0,0032259 X 0,571786 0,0032259 Multiple Range Tests for CDR by ct Method: 95,0 percent Duncan ct Count Mean Homogeneous Groups X HM1 0,0 X HM9 0,501948 X HM4 0,513926 X HM7 0,560269 X HM2 0,56413 X HM6 0,571957 X HM3 0,605635 X HM5 0,626656 X HM8 0,653141 F-Ratio P-Value 1754,53 1053,99 0,0000 0,0000 1099,91 0,0000 F-Ratio P-Value 7393,38 5210,04 0,0000 0,0000 5831,07 0,0000 Xử lý số liệu chiều cao nội dung Analysis of Variance for CCC - Type III Sums of Squares Source Sum of Squares Df Mean Square MAIN EFFECTS A:IBA 0,332722 0,166361 B:NAA 0,234466 0,117233 INTERACTIONS AB 0,524828 0,131207 RESIDUAL 0,000405024 18 0,0000225014 TOTAL (CORRECTED) 1,09242 26 Multiple Range Tests for CCC by IBA Method: 95,0 percent LSD IBA Count LS Mean LS Sigma Homogeneous Groups X 0,408264 0,00158119 X 0,631676 0,00158119 X 0,654205 0,00158119 Multiple Range Tests for CCC by NAA Method: 95,0 percent LSD NAA Count LS Mean LS Sigma Homogeneous Groups X 0,432942 0,00158119 X 0,5 0,628934 0,00158119 X 0,632269 0,00158119 55 Multiple Range Tests for CCC by ct Method: 95,0 percent Duncan ct Count Mean Homogeneous Groups X HM1 0,0 X HM4 0,59473 X HM9 0,596211 X HM7 0,630062 X HM6 0,641465 X HM2 0,641474 X HM5 0,650607 X HM3 0,657351 X HM8 0,670533 Xử lý số liệu số nội dung Analysis of Variance for SO LA - Type III Sums of Squares Source Sum of Squares Df Mean Square MAIN EFFECTS A:IBA 0,434463 0,217231 B:NAA 0,184493 0,0922463 INTERACTIONS AB 0,38233 0,0955825 RESIDUAL 0,00428968 18 0,000238316 TOTAL (CORRECTED) 1,00558 26 Multiple Range Tests for SO LA by IBA Method: 95,0 percent LSD IBA Count LS Mean LS Sigma Homogeneous Groups X 0,34623 0,00514583 X 0,590494 0,00514583 X 0,63468 0,00514583 Multiple Range Tests for SO LA by NAA Method: 95,0 percent LSD NAA Count LS Mean LS Sigma Homogeneous Groups X 0,408034 0,00514583 X 0,5 0,567613 0,00514583 X 0,595757 0,00514583 Multiple Range Tests for SO LA by ct Method: 95,0 percent Duncan ct Count Mean Homogeneous Groups X HM1 0,0 X HM4 0,486464 X HM7 0,552224 XX HM9 0,563399 XX HM6 0,571286 X HM2 0,587304 X HM3 0,636797 X HM5 0,645088 X HM8 0,671647 F-Ratio P-Value 911,53 387,08 0,0000 0,0000 401,08 0,0000 Xử lý số liệu số rễ nội dung ANOVA Table for so re by CT Source Sum of Squares Between groups 0,415717 Within groups 0,0204752 Total (Corr.) 0,436192 Multiple Range Tests for so re by CT Method: 95,0 percent Ducan CT Count Mean MS 2,09469 1/2 MS 2,10461 MS1 2,31291 1/2 WPM 2,38048 WPM 2,52979 Df 10 14 Mean Square 0,103929 0,00204752 F-Ratio 50,76 P-Value 0,0000 F-Ratio P-Value Homogeneous Groups X X X X X Xử lý số liệu chiều dài rễ nội dung ANOVA Table for chieu dai re by CT Source Sum of Squares Df Mean Square 56 Between groups 0,526272 0,131568 Within groups 0,00901914 10 0,000901914 Total (Corr.) 0,535291 14 Multiple Range Tests for chieu dai re by CT Method: 95,0 percent Duncan CT Count Mean MS 2,11411 1/2 MS 2,12827 MS1 2,1447 1/2 WPM 2,50567 WPM 2,51593 145,88 0,0000 F-Ratio 39,83 P-Value 0,0000 F-Ratio 48,81 P-Value 0,0000 Homogeneous Groups X X X X X Xử lý số liệu chiều cao nội dung ANOVA Table for chieu cao cay by CT Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 0,205145 0,0512862 Within groups 0,0128753 10 0,00128753 Total (Corr.) 0,21802 14 Multiple Range Tests for chieu cao cay by CT Method: 95,0 percent Duncan CT Count Mean MS 2,12566 1/2 MS 2,13754 MS1 2,36005 1/2 WPM 2,36848 WPM 2,3809 Homogeneous Groups X X X X X Xử lý số liệu số nội dung ANOVA Table for so la1 by CT Source Sum of Squares Df Between groups 0,191808 Within groups 0,00982475 10 Total (Corr.) 0,201633 14 Multiple Range Tests for so la1 by CT Method: 95,0 percent Duncan CT Count Mean MS 2,16762 1/2 MS 2,23584 MS1 2,29562 1/2 WPM 2,33015 WPM 2,50393 Mean Square 0,047952 0,000982475 Homogeneous Groups X X X X X Xử lý số liệu tỷ lệ sống giá thể tuần nội dung ANOVA Table for TY LE SONG_GIA THE by CT Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 2667,56 1333,78 Within groups 16,0 2,66667 Total (Corr.) 2683,56 Multiple Range Tests for TY LE SONG_GIA THE by CT Method: 95,0 percent LSD CT Count Mean Homogeneous Groups CT2 50,6667 X X CT1 80,6667 X CT3 91,3333 F-Ratio 500,17 P-Value 0,0000 Xử lý số liệu số giá thể tuần nội dung ANOVA Table for SO LA_GIA THE by CT Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 6,97556 3,48778 Within groups 0,26 0,0433333 Total (Corr.) 7,23556 Multiple Range Tests for SO LA_GIA THE by CT Method: 95,0 percent LSD CT Count Mean Homogeneous Groups CT2 2,66667 X F-Ratio 280,49 57 P-Value 0,0000 CT1 CT3 3 3,16667 4,73333 X X Xử lý số liệu tỷ lệ sống giá thể tuần nội dung ANOVA Table for TLMS by CT Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 3690,61 1845,3 Within groups 1,51927 0,253211 Total (Corr.) 3692,13 Multiple Range Tests for TLMS by CT Method: 95,0 percent LSD CT Count Mean Homogeneous Groups CT2 42,5333 X X CT1 78,2 X CT3 90,22 F-Ratio 787,61 P-Value 0,0000 Xử lý số liệu số giá thể tuần nội dung ANOVA Table for SL by CT Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 0,133199 0,0665997 Within groups 0,000127312 0,0000212187 Total (Corr.) 0,133327 Multiple Range Tests for SL by CT Method: 95,0 percent LSD CT Count Mean Homogeneous Groups X CT2 0,400247 X CT1 0,493224 X CT3 0,691921 F-Ratio 338,73 P-Value 0,0000 Xử lý số liệu chiều cao giá thể tuần nội dung ANOVA Table for CC by CT Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 0,00381047 0,00190523 Within groups 0,000695753 0,000115959 Total (Corr.) 0,00450622 Multiple Range Tests for CC by CT Method: 95,0 percent LSD CT Count Mean Homogeneous Groups X CT2 0,78746 X CT1 0,794951 X CT3 0,83437 F-Ratio 16,43 P-Value 0,0037 Xử lý số liệu tỷ lệ sống phân bón nội dung ANOVA Table for ty le song by ct Source Sum of Squares Df Between groups 1066,67 Within groups 166,667 Total (Corr.) 1233,33 Multiple Range Tests for ty le song by ct Method: 95,0 percent LSD ct Count Mean PB2 43,3333 PB1 70,0 Mean Square 1066,67 41,6667 F-Ratio 25,60 P-Value 0,0072 F-Ratio 68,41 P-Value 0,0012 Homogeneous Groups X X Xử lý số liệu số phân bón nội dung ANOVA Table for so la by ct Source Sum of Squares Between groups 0,170642 Within groups 0,00997822 Total (Corr.) 0,180621 Multiple Range Tests for so la by ct Method: 95,0 percent LSD ct Count Mean PB2 1,46023 PB1 1,79752 Df Mean Square 0,170642 0,00249456 Homogeneous Groups X X Xử lý số liệu chiều cao phân bón nội dung 58 ANOVA Table for chieu cao by ct Source Sum of Squares Df Between groups 0,143615 Within groups 0,010257 Total (Corr.) 0,153872 Multiple Range Tests for chieu cao by ct Method: 95,0 percent LSD ct Count Mean PB2 2,93792 PB1 3,24734 Mean Square 0,143615 0,00256425 F-Ratio 56,01 Homogeneous Groups X X 59 P-Value 0,0017 ... dựng quy trình nhân giống in vitro Mẫu đơn (Paeonia suffruticosa Andr. ) năm thứ 2” nhằm xây dựng quy trình nhân giống in vitro Mẫu đơn hoàn chỉnh Mục tiêu nhiệm vụ Xây dựng quy trình nhân giống in. .. quy trình vii nhân giống in vitro Mẫu đơn, với đưa chế độ chăm sóc cho Mẫu đơn thích nghi ngồi vườn ươm Kết năm 2019 2020, xây dựng thành cơng quy trình nhân giống in vitro Mẫu đơn (Paeonia suffruticosa. .. CƠ SỞ XÂY DỰNG QUY TRÌNH NHÂN GIỐNG IN VITRO CÂY MẪU ĐƠN (Paeonia suffruticosa Andr. ) (NĂM THỨ HAI) CƠ QUAN CHỦ TRÌ PHĨ GIÁM ĐỐC CHỦ NHIỆM Hồng Anh Tuấn Nguyễn Văn Tồn THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH THÁNG