Phát hiện nhiễm Cyclospora Cayetanensis tỏng nước máy cung cấp tại Hà Nội doc

TCNCYH 23 (3) 2003 Phát hiện nhiễm Cyclospora cayetanensis trong nớc máy cung cấp tại Hà Nội Lê Công Dần 1 , Phùng Đắc Cam 2 , Nguyễn Thu Hơng 2 , J. B. Barbie 3 và M. Miegevil1e 4 1 Trung tâm Y tế dự phòng Thanh Hoá; 2 Viện Vệ sinh dịch tễ trung ơng; 3 ASTRAN (Asia Pacific Technology and Research Network), Malaysia; 4 Phòng xét nghiệm ký sinh trùng, bệnh viện Nantes, Pháp. Cyclospora cayetanensis (C. cayetanensis) là một đơn bào gây tiêu chảy cấp tính và có thể gây mãn tính. Bệnh thờng mắc ở các nớc đang phát triển thuộc vùng nhiệt đới và cận nhiệt đới. Trong khoảng thời gian 1 năm chúng tôi tiến hành giám sát hệ thống cung cấp nớc sạch tại Hà Nội, tiến hành tìm C. cayetanensis tại nguồn nớc cung cấp bao gồm nớc vòi và bể chứa, tại các điểm sử dụng nớc và ghi nhận theo mùa, chúng tôi nhận thấy tại các quận nội thành đều có C. cayetanensis với tỷ lệ: Ba Đình 25,9%, Hoàn Kiếm 19,5%, Đống đa 19,6% và Hai Bà Trng 25%. C. cayetanensis xuất hiện cả bốn mùa nhng các tháng mùa hè cao hơn. Kết quả sinh học phân tử cho thấy chủng phân lập trong nớc có cùng chuỗi gen với chủng gây bệnh cho ngời. Nớc sạch cung cấp cho nội thành Hà Nội bị nhiễm tác nhân gây bệnh quan trọng này. I. Đặt vấn đề C. cayetanensis là một tác nhân gây tiêu chảy có hình cầu kích thớc 6-10 àm. Bệnh nhân bị bệnh cấp tính và sẽ bị kéo dài khi không điều trị đúng. C. cayetanensis lần đầu tiên đợc mô tả trên bệnh nhân mắc tiêu chảy năm 1990 ở bệnh viện quốc tế Katmandu, Nepan [2]. Vi khuẩn có màu xanh đậm, tự phát sáng dới tia cực tím. Khi đào thải ra khỏi cơ thể C. cayetanensis có thể tồn tại dới dạng nha bào một thời gian dài đặc biệt trong môi trờng nớc. Bệnh có thể truyền qua nớc khi nguồn nớc bị ô nhiễm. Nhiều vụ dịch tiêu chảy đã xảy ra do đờng nớc bị ô nhiễm C. cayetanensis từ bên ngoài ở Hoa Kỳ, Vơng quốc Anh. Năm 1999 một nhóm ngời du lịch từ Pháp tới Việt Nam khi về nhà, một số trong nhóm ngời này bị mắc tiêu chảy, xác định căn nguyên là C. cayetanensis, những ngời này có uống nớc trực tiếp từ vòi. Bệnh đợc điều trị đặc hiệu bởi Cotrimoxazon C. cayetanensis lần đầu tiên đợc phát hiện tại Việt Nam vào năm 1997 ở một bệnh nhân bị tiêu chảy kéo dài trên 3 tháng [1]. Khi xét nghiệm nớc của gia đình bệnh nhân, mẫu nớc này có chứa noãn C. cayetanensis. Xuất phát từ đấy chúng tôi tiến hành tìm sự có mặt của C. cayetanensis trong nguồn nớc cấp tại Hà Nội với mục đích: - Tìm sự có mặt của C. cayetanensis trong nớc máy tại các quận nội thành Hà nội. - Tìm hiểu mùa nhiễm. II. Vật liệu và phơng pháp nghiên cứu 1. Vật liệu: 38 TCNCYH 23 (3) 2003 Mẫu nớc đợc thu thập từ tháng 6 năm 1999 đến tháng 6 năm 2000. Địa điểm thu thập là các điểm khác nhau trong bốn quận nội thành của thành phố Hà Nội là Ba Đình nằm phía Tây bắc, Hoàn Kiếm nằm phía Đông bắc, Hai Bà Trng nằm phía Đông Nam, Đống Đa nằm phía Tây Nam. Mẫu nớc đợc thu thập vào túi nilon sạch tại vòi và bể chứa. Thể tích cho mỗi mẫu là 5 lít với bể chứa và 10 lít với nớc vòi. Mẫu nớc tại nhà máy nớc trớc khi bơm vào mạng cung cấp. Thể tích là 50 lít. 2. Phơng pháp: Phơng pháp đợc tiến hành là cô đặc mẫu để tìm C. cayetanensis qua kỹ thuật lọc nớc. Màng lọc với kích thớc lỗ lọc 1,2 àm bằng máy hút chân không. Màng lọc đợc cắt nhỏ cho vào ống nghiệm cỡ 16 cùng với 5 ml nớc muối sinh lý. Ly tâm với tốc độ 5000 vòng/phút trong thời gian 10 phút. Loại bỏ giấy lọc, giữ lại nớc. Chuyển nớc lọc sang ống nghiệm cỡ 12, ly tâm với tốc độ 3000vòng/phút trong thời gian 3 phút. Loại bỏ nớc nổi, giữ lại cặn. Lấy một giọt cặn nhỏ vào lam kính, đặt lamen soi dới kính hiển vi thờng, sau đó xác định dới kính hiển vi huỳnh quang, noãn C . cayetanensis tự phát sáng và các tiểu thể bên trong cũng tự phát sáng. Kỹ thuật sinh học phân tử đợc tiến hành tại phòng xét nghiệm Ký sinh trùng, trờng Đại học Y khoa Nantes (Pháp) để xác định là chủng gây bệnh. III. Kết quả Trong thời gian tiến hành nghiên cứu, số mẫu nớc thu thập đợc là 294 từ các quận nội thành của thành phố Hà Nội. Bảng 1. Tỷ lệ thu thập mẫu nớc từ các quận nội thành Quận Hai Bà Trng Hoàn Kiếm Đống Đa Ba Đình Số mẫu 80 77 56 81 Tỷ lệ % 27,2 26,1 19 27,5 Bảng 2. Tỷ lệ mẫu dơng tính tại các quận nội thành Quận Hai Bà Trng Hoàn Kiếm Đống Đa Ba Đình Số mẫu 20 15 11 21 Tỷ lệ % 25 19,5 19,6 25,5 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 Jun- 99 Jul-99 Aug- 99 Sep- 99 Oct- 99 Nov- 99 Dec- 99 Jan- 00 Feb- 00 Mar- 00 Apr- 00 May- 00 Jun- 00 Bể chứa Vòi Biểu đồ 1: Số mẫu dơng tính ở bể chứa và nớc vòi thu thập trong các tháng. 39 TCNCYH 23 (3) 2003 IV. Bàn luận Tại Hà Nội, các nhà máy nớc cung cấp cho khu vực nội thành đợc khai thác từ các giếng ở độ sâu từ 60 đến 80 m, ở các nhà máy nớc quá trình xử lý nớc bằng hệ thống lắng lọc và cloramin trớc khi bơm vào hệ thống phân phối cho thành phố. Kiểm tra mẫu nớc ở tại nhà máy trớc khi hòa mạng cung cấp cho thành phố, không mẫu nào nhiễm C. cayetanensis. Từ kết quả nghiên cứu trên chúng tôi nhận thấy, C. cayetanensis đợc phân bố cả bốn quận nội thành. Giả thiết rằng sự ô nhiễm này là do từ môi trờng bên ngoài nhiễm vào hệ thống cung cấp. Do đờng ống bị vỡ hay do quá trình thi công xong không đợc hàn kín. Trong các quận nội thành, quận Ba Đình có tỷ lệ nhiễm cao nhất, nơi mà các mẫu nớc thu thập từ vòi và bể chứa đều có C. cayetanensis trong đó số lợng mẫu dơng tính từ bể chứa chiếm nhiều hơn. Phần lớn bể chứa nớc mà chúng tôi thu thập không kín, quá trình sử dụng nớc này bị nhiễm từ môi trờng bên ngoài do ý thức sử dụng của ngời dân cha cao. Mùa nhiễm C. cayetanensis cao vào các tháng có ma nhiều. Điều này có thể giải thích bằng quá trình ô nhiễm từ ngoài vào đờng ống bị vỡ hoặc bị hở tăng lên nên vào các tháng này với số lợng mẫu dơng tính từ mẫu nớc vòi cao lên. Từ kết quả phân tích mẫu nớc và mẫu phân ở bệnh nhân mắc tiêu chảy do C. cayetanensis bằng kỹ thuật sinh học phân tử cho thấy các chủng này có cùng chuỗi gen gây bệnh. V. Kết luận - Nớc sạch cung cấp cho nội thành, thành phố Hà Nội bị nhiễm C. cayetanensis. - Mùa nhiễm C. cayetanensis vào hệ thống cung cấp nớc sạch cao nhất vào mùa ma. Tài liệu tham khảo 1. Phùng Đắc Cam, Lê Công Dần (2000): Thông báo về trờng hợp nhiễm Cyclospora đầu tiên ở Việt Nam. Tuyển tập công trình nghiên cứu khoa học học viện Vệ sinh dịch tế trung ơng, 1997- 2000: 143. 2. Rebacca Wutz. Cyclospora (1994): A Newly Identified Intestinal Pathogen of Humans. Clinical Infectious Diseases. 18: 620 - 623. 3. Thaddeus K .Graczyk, Ynes. Ortega, and D. Bruse Conn (1998): Recovery of waterborne Oocysts of Cyclospora cayetanensis by Asian Freshwater clams. The American Journa1 of Tropica1 Medicine & Hygiene. 59 (6) : 928- 932. Summary Detection of Cyclopora cayetanensis in the water supply in Hanoi Cyclopora cayetanensis is a protozoan responsible for acute diarrheal diseases, frequently reported in inter-tropical areas. It affects the local population as well as travelers. A year-long epidemiological survey of public drinking water supply was carried out in Hanoi to determine if this pathogen was found in water, and if seasonal variation was noted. For this purpose, water sample was first examined by common microscope observation, fluorescenmicroscope and then complete identification by molecular biology assays based on PCR and sequencing. Cyclopora cayetanensis was found in water supply and tap water in Hanoi suggesting that drinking water is probably an important coccidial source of contamination. 40 . thời gian 1 năm chúng tôi tiến hành giám sát hệ thống cung cấp nớc sạch tại Hà Nội, tiến hành tìm C. cayetanensis tại nguồn nớc cung cấp bao gồm nớc vòi và bể chứa, tại các điểm sử dụng nớc và. TCNCYH 23 (3) 2003 Phát hiện nhiễm Cyclospora cayetanensis trong nớc máy cung cấp tại Hà Nội Lê Công Dần 1 , Phùng Đắc Cam 2 , Nguyễn Thu Hơng 2 ,. C. cayetanensis. Xuất phát từ đấy chúng tôi tiến hành tìm sự có mặt của C. cayetanensis trong nguồn nớc cấp tại Hà Nội với mục đích: - Tìm sự có mặt của C. cayetanensis trong nớc máy tại