Đang tải... (xem toàn văn)
TNU Journal of Science and Technology 228(01) 430 436 http //jst tnu edu vn 430 Email jst@tnu edu vn COMPARISION THE ANTIFUNGAL ACTIVITY AGAINST FUSARIUM OXYSPORUM OF 12 DIFFERENT ESSENTIAL OIL ENCAPS[.]
TNU Journal of Science and Technology 228(01): 430 - 436 COMPARISION THE ANTIFUNGAL ACTIVITY AGAINST FUSARIUM OXYSPORUM OF 12 DIFFERENT ESSENTIAL OIL ENCAPSULATED IN NANOEMULSION AND THEIR COMBINATION Nguyen Minh Hiep*, Tran Thi Ngoc Mai Center of Radiation Technology and Biotechnology - Nuclear Research Institute ARTICLE INFO ABSTRACT Received: 04/11/2022 The study aims to evaluate the in vitro antifungal activity against Fusarium oxysporum of 12 plant essential oils encapsulated nanoemulsion (EO-LNs) and their binary and ternary combined formulations of the EOs having the highest in vitro antifungal activity Firstly, 12 EO-LNs were prepared by a combining method of homogenization and sonication Their binary and ternary combined formulations were also prepared by mixing with an equal volume ratio of each EO-LNs In vitro antifungal activity of 12 EO-LNs and their combined formulations was evaluated using petri dish assay The results indicated that 12 EO-LNs and their combined formulations were successfully prepared with the mean particle size at the nanoscale and the zeta potential greater than -42 mV The results also showed that the combined formulations of EO-LNs had better antifungal activity against F oxysporum compared to the corresponding individual EO-LNs Specially, naTS exhibited the highest in vitro antifungal effect with the growth inhibition value of 88.14% at 500 times dilution Therefore, naTS has a great potential application as an effective biofungicide against F oxysporum Revised: 20/12/2022 Published: 27/12/2022 KEYWORDS Essential oil Nanoemulsion Fusarium oxysporum Antifungal Combination ĐÁNH GIÁ KHẢ NĂNG ỨC CHẾ NẤM FUSARIUM OXYSPORUM CỦA 12 LOẠI NANO TINH DẦU THỰC VẬT KHÁC NHAU VÀ CÁC CÔNG THỨC KẾT HỢP CỦA CHÚNG Nguyễn Minh Hiệp*, Trần Thị Ngọc Mai Trung tâm Công nghệ xạ Công nghệ sinh học - Viện Nghiên cứu Hạt nhân THÔNG TIN BÀI BÁO Ngày nhận bài: 04/11/2022 Ngày hoàn thiện: 20/12/2022 Ngày đăng: 27/12/2022 TỪ KHÓA Tinh dầu thực vật Hệ mang nano Fusarium oxysporum Kháng nấm Kết hợp TÓM TẮT Nghiên cứu nhằm mục đích đánh giá hiệu ức chế nấm Fusarium oxysporum điều kiện in vitro 12 loại tinh dầu thực vật dạng nano (EO-LNs) hệ kết hợp hai ba loại tinh dầu tốt Đầu tiên, 12 EO-LNs chuẩn bị phương pháp đồng hóa tốc độ cao kết hợp với giảm kích thước sóng siêu âm Hệ tinh dầu kết hợp hai kết hợp ba tạo thành trộn EOLNs với tỉ lệ Hiệu kháng nấm in vitro 12 EO-LNs dạng kết hợp chúng đánh giá phương pháp đĩa thạch Kết rằng, 12 EO-LNs tổng hợp thành cơng với kích thước hạt trung bình mức nano zeta lớn -42 mV Kết cho thấy, dạng kết hợp EO-LNs cho hiệu ức chế nấm F oxysporum tốt so với dạng đơn lẻ tương ứng Đặc biệt, naTS cho thấy hiệu kháng nấm tốt điều kiện in vitro với hiệu ức chế nấm đạt 88,14% độ pha loãng 500 lần Do đó, naTS có tiềm ứng dụng thuốc trị nấm sinh học chống lại nấm F oxysporum DOI: https://doi.org/10.34238/tnu-jst.6871 * Corresponding author Email: jackminhhiep@yahoo.com http://jst.tnu.edu.vn 430 Email: jst@tnu.edu.vn TNU Journal of Science and Technology 228(01): 430 - 436 Đặt vấn đề Nấm Fusarium oxysporum thuộc họ Ascomycota, loài nấm hoại sinh, tồn đất, nước khơng khí F oxysporum phân bố toàn giới coi tác nhân gây bệnh thực vật quan trọng, thường gây thối rễ, cháy lá, héo mạch [1], [2] Tuy nhiên, chủng F oxysporum gây bệnh thực vật, phần lớn chủng gây bệnh thường có tính đặc hiệu với số kí chủ chuyên biệt [3] Các bệnh nấm F oxysporum khó phịng trừ bào tử tồn qua thời gian dài đất Nhiều phương pháp phòng trừ nấm thực như: luân canh, sử dụng giống kháng bệnh, thuốc trừ nấm hóa học, sử dụng vi sinh vật đối kháng, chiết xuất thực vật,… [4], [5] Trong năm gần đây, tinh dầu có nhiều nghiên cứu ứng dụng kiểm soát nấm gây bệnh trồng Điều tinh dầu thường thân thiện với mơi trường, có thời gian phân hủy nhanh, an toàn cho người sử dụng có đa chế tác dụng nên hạn chế kháng thuốc sinh vật gây hại Tuy nhiên, nay, việc sử dụng tinh dầu thực vật điều kiện thực tế cịn thấp loại tinh dầu thường có độ phân tán nước thấp, tính thấm bền tác động điều kiện môi trường (pH, nhiệt độ, độ ẩm, hàm lượng chất hữu cơ, v.v.) nên hiệu sử dụng thực tế thường không cao [6], [7] Bên cạnh đó, việc sử dụng tinh dầu dạng thơ (dạng dầu) có chi phí cao, việc sử dụng tinh dầu thực tiễn sản xuất Do đó, để tăng hiệu sử dụng, hệ nhũ nano chất lipid sử dụng giá thành rẻ, bảo vệ hoạt chất khỏi điều kiện bất lợi mơi trường có khả làm tăng hiệu sử dụng lên từ 3-5 lần [8] Trong nghiên cứu này, với mục tiêu bước đầu đánh giá hiệu kháng nấm F oxysporum 12 loại tinh dầu thực vật dạng nano kết hợp loại tinh dầu tốt điều kiện in vitro, đầu tiên, hệ nhũ nano chất lipid chứa tinh dầu tổng hợp phương pháp đồng hóa tốc độ cao kết hợp với sóng siêu âm để giảm kích thước Sau đó, hiệu ức chế nấm in vitro thực phương pháp đĩa thạch Vật liệu phương pháp nghiên cứu 2.1 Vật liệu hóa chất Tinh dầu thực vật gồm: ớt, mù tạt, bạc hà, sả chanh, đinh hương, bạch đàn, tỏi, vỏ quế, húng quế, oải hương, sả java, gừng (Công ty TNHH tinh dầu thảo dược Dalosa, Việt Nam cung cấp); Chủng nấm F oxysporum phân lập từ chanh dây (Viện nghiên cứu hạt nhân Đà Lạt cung cấp) 2.2 Tổng hợp hệ nhũ nano chất lipid chứa tinh dầu thực vật (EO-LNs) EO-LNs tổng hợp phương pháp đồng hoá tốc độ cao kết hợp với sử dụng sóng siêu âm Nguyễn Minh Hiệp cộng (2022) có sửa đổi [8] Cụ thể, g tinh dầu (ớt, mù tạt, bạc hà, sả chanh, đinh hương, bạch đàn, tỏi, vỏ quế, húng quế, oải hương, sả java, gừng) cho vào hỗn hợp chứa g chất hoạt động bề mặt gồm lecithin tween 80 (1:1, w/w) khuấy tan nước nóng 100oC Sau đó, hỗn hợp dung dịch đồng hố 24000 vịng/phút phút giảm kích thước sóng siêu âm sử dụng thiết bị Ultrasonic Liquid Processor phút, công suất 25%, để thu dịch phân tán LNs chứa tinh dầu ớt (naO), mù tạt (naM), bạc hà (naB), sả chanh (naS), đinh hương (naĐ), vỏ quế (naQ), bạch đàn (naD), tỏi (naT), húng quế (naH), oải hương (naA), sả java (naJ), gừng (naG) Các công thức kết hợp hai kết hợp ba loại nano tinh dầu phối trộn theo tỉ lệ 1:1 (v/v) 1:1:1 (v/v/v) 2.3 Phân tích đặc điểm của hệ nano chứa tinh dầu thực vật Kích thước hạt, số phân tán, zeta, độ bền hệ nano chứa tinh dầu xác định thiết bị Zetasizer Nano ZS Cụ thể, dịch phân tán nano pha loãng 100 lần với nước cất lần, sau trộn dung dịch máy Vortex Phép đo thực 25oC với góc đo 173o Thí nghiệm lặp lại lần (n=3) cho mẫu nano tinh dầu http://jst.tnu.edu.vn 431 Email: jst@tnu.edu.vn TNU Journal of Science and Technology 228(01): 430 - 436 2.4 Khảo sát hiệu ức chế nấm F oxysporum của hệ nano chứa tinh dầu thực vật điều kiện in vitro Hiệu ức chế nấm F oxysporum chế phẩm hệ nano chứa tinh dầu thực vật dạng riêng lẻ kết hợp thực phương pháp đĩa thạch [8] Cụ thể, thí nghiệm thực mơi trường PDA, sau hấp khử trùng, để nguội môi trường khoảng 50oC, bổ sung dịch phân tán (hoặc hỗn hợp dịch phân tán) nano tinh dầu thực vật với độ pha loãng khác 250 lần (tương ứng nồng độ tinh dầu 12 µl/mL), 500 lần (tương ứng nồng độ tinh dầu µl/mL), 600 lần (tương ứng nồng độ tinh dầu µl/mL) Với mẫu đối chứng mẫu khơng có bổ sung dịch phân tán nano Cấy tản nấm với đường kính mm lên đĩa môi trường chuẩn bị Các đĩa sau ni cấy tủ ấm có nhiệt độ 25 ± 2oC, theo dõi phát triển tản nấm thơng qua đường kính tản nấm sau cấy ngày Thí nghiệm thực lặp lại lần Hiệu ức chế nấm tính theo cơng thức (1): Hiệu ức chế nấm (%) = Dc − Dt ×100 (1) Dc Trong đó: Dc đường kính tản nấm mơi trường đối chứng Dt đường kính tản nấm mơi trường có bổ sung tinh dầu 2.5 Phương pháp xử lý số liệu Số liệu tính tốn phần mềm Microsoft excel Số liệu trình bày dạng giá trị trung bình ± độ lệch chuẩn (n = 3) Ở thí nghiệm in vitro, kết Bảng 2, Bảng đánh giá độ tin cậy thơng qua phân tích thống kê SPSS, phương pháp One-way anova, phép thử Duncan (độ tin cậy p < 0,05) Kết bàn luận 3.1 Tổng hợp hệ nano chứa tinh dầu thực vật Hệ nano 12 loại tinh dầu thực vật (naO, naM, naB, naS, naĐ, naQ, naG, naJ, naT, naH, naA, naD) tổng hợp thành công phương pháp đồng hóa tốc độ cao kết hợp với sóng siêu âm Như trình bày Bảng 1, hệ nano 12 loại tinh dầu thực vật tổng hợp có kích thước trung bình cấp độ nano (nhỏ 211 nm) Trong đó, hệ nano tinh dầu mù tạt (naM) có kích thước hạt lớn (210,1 nm) hệ nano tinh dầu gừng (naG) có kích thước hạt nhỏ (82,68 nm) Điều hệ mang nano tổng hợp với tỉ lệ chất hoạt động bề mặt tween lecithin (1:1, w/w) nên có giá trị HLB (Hydrophilic Lipophilic Balance) nhau; tinh dầu sử dụng loại có giá trị RHLB (Required Hydrophilic Lipophilic Balance) khác [8] Bên cạnh đó, với kích thước hạt nhỏ tất hệ mang nano dễ dàng tiếp xúc, thấm tác dụng lên nấm gây hại Thêm vào đó, Hình cho thấy, tinh dầu đóng gói hệ mang nano có độ phân tán tốt tinh dầu dạng thông thường Cụ thể, ban đầu, tinh dầu mù tạt có màu vàng đậm lên bề mặt nước sau đóng gói vào hệ mang nano, dịch phân tán nano tinh dầu mù tạt có màu vàng nhạt, phân tán đồng nước Tương tự, loại tinh dầu lại sau tổng hợp có khả phân tán tốt mơi trường nước Từ cho thấy, 12 loại tinh dầu đóng gói thành cơng vào hệ mang nano chất lipid http://jst.tnu.edu.vn 432 Email: jst@tnu.edu.vn TNU Journal of Science and Technology 228(01): 430 - 436 Hình Độ phân tán số loại tinh dầu thực vật nước (a) dạng thông thường; (b) dạng nano Bảng Thông số đặc điểm hệ nano chứa tinh dầu thực vật (n = 3) Hệ EO-LNs Kích thước hạt Chỉ số phân tán trung bình (nm) (PDI) naO naM naB naS naĐ naQ naD naT naH naA naJ naG 185,13 ± 0,71 210,10 ± 1,00 89,93 ± 0,56 113,20 ± 0,79 181,86 ± 1,15 127,84 ± 1,72 106,23 ± 1,78 121,86 ± 1,79 92,03 ± 0,63 159,40 ± 1,92 92,43 ± 0,52 82,68 ± 0,40 0,366 ± 0,004 0,382 ± 0,003 0,214 ± 0,006 0,204 ± 0,002 0,171 ± 0,003 0,294 ± 0,004 0,372 ± 0,025 0,363 ± 0,002 0,212 ± 0,010 0,266 ± 0,002 0,203 ± 0,002 0,233 ± 0,003 Thế zeta (mV) -42,73 ± 0,47 -53,70 ± 1,26 -52,73 ± 1,32 -44,13 ± 0,52 -42,77 ± 0,82 -46,87 ± 0,45 -50,10 ± 1,02 -50,37 ± 0,75 -43,60 ± 0,53 -52,73 ± 0,59 -53,27 ± 1,21 -47,53 ± 0,75 Kích thước hạt trung bình sau tháng (nm) 186,33 ± 3,51 211,77 ± 2,51 92,53 ± 1,10 120,54 ± 0,41 184,40 ± 2,36 128,35 ± 1,24 107,45 ± 1,36 129,83 ± 1,56 93,15 ± 1,03 160,10 ± 1,62 93,98 ± 0,58 84,57 ± 0,51 Thế zeta sau tháng (mV) -40,76 ± 1,21 -51,50 ± 1,20 -50,60 ± 0,26 -43,63 ± 0,78 -40,83 ± 0,38 -45,46 ± 0,25 -48,36 ± 0,51 -47,83 ± 0,73 -42,63 ± 0,50 -50,46 ± 0,40 -51,80 ± 0,36 -45,46 ± 0,40 Hơn nữa, số phân tán (PDI) hệ mang nano không chênh lệch đáng kể có giá trị khoảng 0,2-0,4 Điều cho thấy đồng mặt kích thước hạt dịch phân tán nano Ngoài ra, giá trị tuyệt đối zeta EO-LNs hệ lớn 40 mV, từ cho thấy hệ có độ ổn định cao Theo nghiên cứu Mehnert cộng zeta hệ nano có giá trị tuyệt đối lớn 20 mV tạo lực đẩy tĩnh điện đủ lớn để giúp ngăn cản hạt kết hợp lại với để tạo hạt có kích thước lớn hơn, từ giúp cho hệ nano có độ ổn định cao [8], [9] Kết Bảng khẳng định 12 hệ EO-LNs có độ bền cao thể qua thay đổi khơng đáng kể kích thước hạt zeta Cụ thể, sau tháng, kích thước hạt hệ nano dao động từ 84,57-211,77 nm giá trị tuyệt đối zeta lớn 40 mV 3.2 Hiệu ức chế nấm điều kiện in vitro 3.2.1 Hiệu ức chế nấm F oxysporum chế phẩm hệ nano chứa tinh dầu thực vật dạng riêng lẻ Hiệu ức chế nấm điều kiện in vitro thực phương pháp đĩa thạch Từ kết Hình cho thấy, sau ngày ni cấy, mẫu đối chứng sợi nấm có màu trắng ngà, http://jst.tnu.edu.vn 433 Email: jst@tnu.edu.vn TNU Journal of Science and Technology 228(01): 430 - 436 phát triển mạnh Trong đó, mẫu có bổ sung EO-LNs cho hiệu ức chế nấm Cụ thể, nồng độ pha loãng 250 lần (tương ứng với nồng độ tinh dầu 12 µg/mL), naT, naS, naQ, naĐ naJ cho hiệu ức chế hoàn toàn đạt 100% Trong đó, hiệu ức chế nấm hệ mang nano lại thấp 63% Khi tăng nồng độ pha loãng lên 500 lần (tương ứng với nồng độ tinh dầu µg/mL), hiệu ức chế nấm loại tinh dầu khác giảm đáng kể, có naT, naS, naQ, naĐ cho hiệu cao 65% 78,81%, 66,10%, 68,64% 69,49% (Bảng 2) Từ kết cho thấy, hiệu ức chế nấm F oxysporum hệ nano tinh dầu tỏi, quế, sả chanh đinh hương tốt so với hệ nano tinh dầu cịn lại Do đó, hệ nano tinh dầu tỏi, quế, sả chanh đinh hương chọn cho công thức kết hợp hai kết hợp ba Hệ EO-LNs naT naS naQ naM naB naA naJ naĐ naG naH naD naO Bảng Hiệu ức chế nấm F oxysporum (n = 3) Nồng độ pha loãng 250 lần Nồng độ pha loãng 500 lần 100,00 ± 0,00a 78,81 ± 1,65a 100,00 ± 0,00a 66,10 ± 4,26b 100,00 ± 0,00a 68,64 ± 1,75b f 13,91 ± 1,68 -11,02 ± 5,41h c 48,70 ± 3,50 38,14 ± 2,07d g 3,48 ± 2,97 -9,32 ± 3,78g a 100,00 ± 0,00 44,92 ± 2,11c a 100,00 ± 0,00 69,49 ± 2,92b 25,22 ± 1,01e 14,41 ± 2,70e 37,39 ± 2,17d 0,85 ± 1,48f b 62,61 ± 0,51 37,29 ± 1,30d h -1,74 ± 3,12 -5,93 ± 1,52g Ghi chú: Các chữ a, b, c, d, e, f, g, h khác biệt có ý nghĩa thống kê dòng cột, với p < 0,05 qua phép thử Duncan Hình Hiệu ức chế nấm 12 hệ nano tinh dầu thực vật 3.2.2 Hiệu ức chế nấm F oxysporum chế phẩm hệ nano chứa tinh dầu thực vật dạng kết hợp Kết Bảng cho thấy, kết hợp hệ nano tinh dầu thực vật với (kết hợp hai: naQS, naQT, naTS, naTĐ, naSĐ, naQĐ kết hợp ba: naQTS, naQSĐ, naĐQT, naĐTS), dịch phân tán nano tạo thành khơng có khác biệt đáng kể kích thước hạt, số phân tán zeta Cụ thể, kích thước hạt hệ khơng vượt 231 nm với hệ kết hợp hai 217 nm với hệ kết hợp ba Thêm vào đó, dung dịch phân tán nano khơng có tượng bất thường kết tủa, tách lớp hay tạo thành phản ứng hóa học với Điều cho thấy khả kết hợp loại nano tinh dầu cách phối trộn chúng với Hơn nữa, kết cho thấy kích thước hạt giá trị tuyệt đối zeta công thức kết hợp khơng có thay đổi đáng kể sau tháng Cụ thể, kích thước hạt có tăng nhẹ nhỏ 235 nm giá trị tuyệt đối zeta hệ có giảm lớn 39 mV Từ cho thấy, hệ kết hợp giữ tính chất hệ nano tinh dầu đơn lẻ trì độ ổn định thời gian dài http://jst.tnu.edu.vn 434 Email: jst@tnu.edu.vn TNU Journal of Science and Technology 228(01): 430 - 436 Bảng Thông số đặc điểm hệ EO-LNs kết hợp (n = 3) EO-LNs naQT naĐT naQS naTS naĐQ naĐS naQTS naĐQT naĐQS naĐTS Kích thước hạt (nm) 127,68 ± 0,55 230,91 ± 1,45 210,10 ± 0,83 86,61 ± 0,56 133,80 ± 1,14 186,61 ± 1,36 216,68 ± 0,93 135,91 ± 1,17 117,81 ± 1,20 166,84 ± 0,11 Chỉ số phân tán (PDI) 0,296 ± 0,001 0,365 ± 0,004 0,205 ± 0,003 0,217 ± 0,006 0,223 ± 0,004 0,172 ± 0,003 0,295 ± 0,003 0,209 ± 0,007 0,380 ± 0,009 0,386 ± 0,005 Thế zeta (mV) -40,03 ± 2,40 -42,63 ± 0,50 -45,80 ± 0,36 -46,90 ± 0,50 -43,07 ± 0,55 -47,23 ± 0,57 -45,77 ± 0,61 -44,57 ± 0,65 -44,90 ± 1,36 -46,23 ± 0,76 Kích thước hạt sau tháng (nm) 128,61 ± 1,25 233,71 ± 1,20 212,70 ± 0,55 88,55 ± 1,24 138,54 ± 1,50 187,63 ± 2,11 217,61 ± 1,36 138,31 ± 2,07 118,45 ± 1,28 168,07 ± 1,59 Thế zeta sau tháng (mV) -39,37 ± 1,03 -41,64 ± 0,51 -43,71 ± 0,62 -45,73 ± 0,48 -40,27 ± 0,73 -46,03 ± 0,44 -44,59 ± 0,50 -41,13 ± 0,77 -43,60 ± 0,87 -42,67 ± 0,55 Bên cạnh đó, kết hợp hai hệ nano tinh dầu cho thấy hiệu ức chế nấm tốt Cụ thể, nồng độ pha loãng 500 lần (tương ứng với nồng độ tinh dầu cơng thức µg/mL), sử dụng kết hợp hệ nano tinh dầu đinh hương hệ nano tinh dầu sả chanh tạo thành hệ NaĐS cho hiệu ức chế nấm 75,42% Trong đó, nồng độ pha loãng (tương ứng với nồng độ tinh dầu µg/mL), hệ naĐ NaS đơn lẻ cho hiệu ức chế nấm thấp 70%, 69,49 66,10% Tương tự với hệ naTS, nồng độ pha loãng 500 lần, hiệu hệ kết hợp 88,14% cao hệ naT 9,33% cao hệ NaS 22,04% Kết cho thấy, kết hợp hệ nano tinh dầu đơn lẻ với hiệu ức chế nấm cao Tuy nhiên, có trường hợp cho hiệu ức chế nấm naQT hay naĐT Thêm vào đó, kết hợp ba hệ nano tinh dầu tạo thành hệ NaQTS, NaQSĐ, NaĐQT, NaĐTS cho thấy hiệu ức chế nấm tốt hệ tinh dầu đơn lẻ hệ tinh dầu kết hợp hai Cụ thể, nồng độ pha loãng 250 lần (tương ứng với nồng độ tinh dầu 12 µg/mL) hệ kết hợp ba cho hiệu ức chế nấm đạt từ 85,59 đến 88,14%, đó, tất hệ kết hợp hai cho hiệu đạt từ 91,53% đến 100% (Bảng 4) Kết cho thấy, chủng nấm F oxysporum hiệu ức chế nấm hệ kết hợp có hiệu hệ đơn lẻ hệ kết hợp ba loại nano tinh dầu cho hiệu hệ kết hợp hai loại nano tinh dầu Điều phù hợp với số nghiên cứu trước Nguyễn Minh Hiệp cộng (2022), Trần Thị Ngọc Mai cộng (2020) Cụ thể, nghiên cứu cho thấy việc kết hợp hệ nano tinh dầu vào chế phẩm cho hiệu ức chế nấm tốt hơn, nhiên lúc kết hợp ba cho hiệu cao kết hợp hai, điều phụ thuộc vào chủng nấm loại tinh dầu [8], [10] Bảng Hiệu ức chế nấm hệ nano tinh dầu kết hợp Hệ EO-LNs naQT (naQ+naT) naTS (naT+naS) naĐT (naĐ+naT) naĐS (naĐ+naS) naĐQ (naĐ+naQ) naQS (naQ+naS) naĐTS (naĐ+naT+naS) naĐQT (naĐ+naQ+naT) naĐQS (naĐ+naQ+naS) naQTS (naQ+naT+naS) Nồng độ pha loãng 250 lần 100,00 ± 0,00a 100,00 ± 0,00a 91,53 ± 3,05b 92,37 ± 2,37b 100,00 ± 0,00a 100,00 ± 0,00a 85,59 ± 1,06c 85,59 ± 1,72c 88,14 ± 2,75c 87,29 ± 2,24c Nồng độ pha loãng 500 lần 75,59 ± 1,67c 88,14 ± 3,04a 73,73 ± 2,78c 75,42 ± 3,14c 86,44 ± 3,67ab 82,20 ± 2,31b 58,47 ± 1,85d 48,31 ± 3,16e 57,63 ± 2,07d 50,00 ± 2,18e Nồng độ pha loãng 600 lần 49,17 ± 1,74c 63,33 ± 3,75a 47,83 ± 0,72c 53,33 ± 1,88b 63,33 ± 0,80a 61,67 ± 1,71a 39,17 ± 0,78d 28,33 ± 2,33e 38,33 ± 2,14d 24,17 ± 3,25f Ghi chú: Các chữ a, b, c, d, e, f khác biệt có ý nghĩa thống kê dòng cột, với p < 0,05 qua phép thử Duncan http://jst.tnu.edu.vn 435 Email: jst@tnu.edu.vn TNU Journal of Science and Technology 228(01): 430 - 436 Hình Hiệu ức chế nấm hệ nano tinh dầu kết hợp Hệ kết hợp hai: naQT, naTS, naĐT, naĐS, naĐQ, naQS; hệ kết hợp ba: naĐTS, naĐQT, naĐQS, naQTS Kết luận Bằng phương pháp đồng hóa tốc độ cao kết hợp với sóng siêu âm để giảm kích thước hạt, hệ EO-LNs 12 loại tinh dầu thực vật tổng hợp thành công với kích thước hạt trung bình nhỏ 250 nm, zeta có giá trị tuyệt đối lớn 42 mV Kết cho thấy hệ nano có độ bền cao bảo quản thời gian dài (trên tháng) Thí nghiệm in vitro chứng minh kết hợp loại tinh dầu dạng nano cho hiệu ức chế nấm F oxysporum tốt so với dạng riêng lẻ, cơng thức kết hợp hai cho hiệu tốt công thức kết hợp ba Kết công thức naTS cho hiệu ức chế nấm F oxysporum tốt đạt 88,14% nồng độ pha loãng 500 lần (tương ứng nồng độ tinh dầu µg/mL) Từ cho thấy tiềm ứng dụng hệ kết hợp hai loại nano tinh dầu tỏi, sả việc ức chế nấm F oxysporum gây bệnh trồng TÀI LIỆU THAM KHẢO/ REFERENCES [1] D Miller, “Factors that affect the occurrence of fumonisin environmental health perspectives,” Mycology, vol 109, pp 321-324, 2001 [2] T Arie, “Fusarium diseases of cultivated plants, control, diagnosis, and molecular and genetic studies,” Journal of Pesticide Science, vol 44, no 4, pp 275-281, 2019 [3] J F Leslie and B A Summerell (Eds), The Fusarium Laboratory Manual USA: Blackwell Publishing, 2006 [4] C Xiao and R Li, “Detection and Control of Fusarium oxysporum from soft rot in dendrobium officinale by loop-mediated isothermal amplification assays,” Biology (basel), vol 10, no 11, pp 2-4, 2021 [5] F J de Lamo and F L W Takken, “Biocontrol by Fusarium oxysporum using endophyte-mediated resistance,” Frontiers in Plant Science, no 11, pp 2-5, 2020 [6] A E Asbahani, K Miladi, W Badri, M Sala, E H A Addi, H Casabianca, A El Mousadik, D Hartmann, A Jilale, F N R Renaud, and A Elaissari, “Essential oils: From extraction to encapsulation,” International Journal of Pharmaceutics, vol 483, no 1-2, pp 220-243, 2015 [7] R Raveau, J Fontaine, and A L Sahraoui, “Essential oils as potential alternative biocontrol products against plant pathogens and weeds: A Review,” Foods, vol 9, no 3, pp 1-31, 2020 [8] M H Nguyen, T N M Tran, and N B D Vu, “Antifungal activity of essential oil-encapsulated lipid nanoemulsions formulations against leaf spot disease on tomato caused by Alternaria alternate,” Archives of Phytopathology and Plant Protection, vol 55, no 2, pp 235-257, 2022 [9] W Mehnert and K Mäder, “Solid lipid nanoparticles: production, characterization and applications,” Advanced Drug Delivery Reviews, no 47, pp 165-196, 2001 [10] T N M Tran, N B D Vu, N T T Nguyen, T H N Nguyen, M H Nguyen, “Investigation of inhibitory effect of mixture of nanocariers encapsulating chili, garlic and lemongrass oil on Alternaria sp causing leaf spot disease,” (in Vietnamese), TNU Journal of Science and Technology, vol 7, no 166, pp 141-145, 2020 http://jst.tnu.edu.vn 436 Email: jst@tnu.edu.vn ... minh kết hợp loại tinh dầu dạng nano cho hiệu ức chế nấm F oxysporum tốt so với dạng riêng lẻ, cơng thức kết hợp hai cho hiệu tốt công thức kết hợp ba Kết công thức naTS cho hiệu ức chế nấm F oxysporum. .. Hiệu ức chế nấm F oxysporum chế phẩm hệ nano chứa tinh dầu thực vật dạng kết hợp Kết Bảng cho thấy, kết hợp hệ nano tinh dầu thực vật với (kết hợp hai: naQS, naQT, naTS, naTĐ, naSĐ, naQĐ kết hợp. .. việc kết hợp hệ nano tinh dầu vào chế phẩm cho hiệu ức chế nấm tốt hơn, nhiên lúc kết hợp ba cho hiệu cao kết hợp hai, điều phụ thuộc vào chủng nấm loại tinh dầu [8], [10] Bảng Hiệu ức chế nấm