Đồ án tốt nghiệp ứng dụng vi khuẩn lên men lactic xử lý hạt giống đậu phộng

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ TP HỒ CHÍ MINH  ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP ỨNG DỤNG VI KHUẨN LÊN MEN LACTIC XỬ LÝ HẠT GIỐNG ĐẬU PHỘNG Ngành CÔNG NGHỆ SINH HỌC Chuyên ngành CÔNG NGHỆ SINH HỌ[.]

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ TP HỒ CHÍ MINH  ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP ỨNG DỤNG VI KHUẨN LÊN MEN LACTIC XỬ LÝ HẠT GIỐNG ĐẬU PHỘNG Ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Chuyên ngành: CƠNG NGHỆ SINH HỌC GVHD: TS NGUYỄN HỒI HƯƠNG SVTH: NGUYỄN THANH HIẾU MSSV: 1411100748 Lớp: 14DSH04 TP Hồ Chí Minh, 8/2018 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CƠNG NGHỆ TP HỒ CHÍ MINH  ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP ỨNG DỤNG VI KHUẨN LÊN MEN LACTIC XỬ LÝ HẠT GIỐNG ĐẬU PHỘNG Ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Chun ngành: CƠNG NGHỆ SINH HỌC GVHD: TS NGUYỄN HỒI HƯƠNG SVTH: NGUYỄN THANH HIẾU MSSV: 1411100748 Lớp: 14DSH04 TP Hồ Chí Minh, 8/2018 Đồ án tốt nghiệp LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu Các số liệu, kết nêu đồ án trung thực chưa cơng bố cơng trình khác Tơi xin cam đoan giúp đỡ cho việc thực luận văn cám ơn thơng tin trích dẫn Luận văn rõ nguồn gốc Sinh viên thực luận văn Nguyễn Thanh Hiếu i Đồ án tốt nghiệp LỜI CẢM ƠN Đầu tiên, em xin trân trọng cảm ơn Ban giám hiệu Trường Đại học Công nghệ TP HCM tạo điều kiện cho chúng em học tập Trường Em xin chân thành biết ơn dạy dỗ tận tình tồn thể q thầy Viện Khoa học Ứng dụng Hutech, Trường Đại học Công nghệ TP HCM cho chúng em kiến thức quan trọng suốt thời gian qua, nhờ chúng em có tri thức quý giá để làm hành trang cho đường nghiệp phía trước Em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến TS Nguyễn Hoài Hương trang bị cho em kiến thức bổ ích ln theo sát q trình làm việc em để kịp thời hướng dẫn khắc phục lỗi sai để công việc đạt kết tốt Cô chia động viên em cơng việc chưa ổn giúp em tìm niềm vui thấy thành gặt hái Em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới gia đình tiếp cho em nghị lực, bình n tâm hồn, ln bên em lúc khó khăn Em xin cảm ơn tới người bạn gắn bó, động viên giúp đỡ em suốt quãng thời gian thực đồ án tốt nghiệp Cuối cùng, em xin cảm ơn Thầy/Cô Hội Đồng Phản Biện dành thời gian đọc nhận xét đồ án tốt nghiệp Em xin gửi đến Thầy/Cô lời chúc sức khỏe va Trong trıǹ h làm đồ án, kinh nghiệm còn thiếu kiến thức chưa đầy đủ, nên có nhiều thiếu sót, mong Thầy Cơ bỏ qua TP HCM, ngày tháng 08 năm 2018 Sinh viên thực Nguyễn Thanh Hiếu ii Đồ án tốt nghiệp MỤC LỤC MỤC LỤC iii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT iv DANH MỤC BẢNG v DANH MỤC HÌNH ẢNH vi MỞ ĐẦU .1 Đặt vấn đề Tình hình nghiên cứu 2.1 Ngoài nước: .2 2.2.Trong nước: 3.Mục đích nghiên cứu: 4.Mục tiêu nghiên cứu: Nội dung nghiên cứu: Phương pháp nghiên cứu: 6.1.Phương pháp luận: 6.2.Phương pháp xử lý số liệu: .4 Kết đạt được: CHƯƠNG I: TỔNG QUAN .5 Tổng quan xử lý hạt giống: 1.1 Giới thiệu chung: .5 1.2 Các phương pháp khử nhiễm độc tố: .6 1.2.1 Phương pháp vật lý: 1.2.2 Phương pháp hóa học: 1.2.3 Phương pháp sinh học: Các vi sinh vật hỗ trợ tăng trưởng trồng: .12 iii Đồ án tốt nghiệp 2.1 Khả phân giải lân: 12 2.1.1 VSV phân giải lân hữu .13 2.1.2 VSV phân giải lân vô .14 2.2 Tạo màng sinh học biofilm 15 2.3 Khả sinh Indole-3-acetic acid (IAA) .17 Tổng quan vi khuẩn lactic 19 3.1 Đặc điểm hình thái giống Lactobacillus sp 19 3.2 Đặc điểm sinh lý 20 3.3 Đặc điểm sinh hóa 20 3.4 Nhu cầu dinh dưỡng vi khuẩn lactic 21 3.5 Quá trình trao đổi chất .23 3.6 Các yếu tố ảnh hưởng đến trình lên men, trình sinh trưởng phát triển vi khuẩn lactic .28 3.7 Khả kháng nấm vi khuẩn lactic 29 3.7.1 Khả kháng nấm chủng vi khuẩn lactic 29 3.7.2 Các hợp chất kháng nấm .30 3.7.3 Các hợp chất kháng khuẩn khác 37 3.8 Ứng dụng vi khuẩn lactic 40 CHƯƠNG II: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .42 2.1 Địa điểm nghiên cứu 42 2.2 Thời gian thực 42 2.3 Vật liệu nghiên cứu 42 2.3.1 Vật liệu 42 2.3.2 Hóa chất sử dụng 42 2.3.3 Thiết bị 43 2.3.4 Dụng cụ 43 2.4 Phương pháp luận 44 iv Đồ án tốt nghiệp 2.4.1 Mục tiêu đồ án 44 2.4.2 Nội dung .44 2.5 Phương pháp nghiên cứu 45 2.5.1 Sơ đồ nghiên cứu 45 2.5.2 Khảo sát độ khiết vi khuẩn lactic 46 2.5.2.1 Nhuộm gram 47 2.5.2.2 Nhuộm bào tử 48 2.5.2.3 Thử nghiệm Catalase 49 2.5.2.4 Thử nghiệm khả lên men đường .49 2.5.2.5 Khả di động .50 2.5.3 Khả phân giải lân 51 2.5.4 Khả sinh IAA .52 2.5.5 Khả tạo màng Biofilm 53 2.5.6 Chủng nấm mốc Aspergillus sp CĐP1 54 2.5.6.1 Khảo sát phát triển loại môi trường 55 2.5.6.2 Khảo sát hình thái 55 2.5.7 Khảo sát khả đối kháng trực tiếp vi khuẩn lactic với nấm mốc Aspergillus sp CĐP1 56 2.5.8 Phương pháp khảo sát mơi trường lên men thích hợp cho vi khuẩn lactic 56 2.5.9 Xác định acid lactic .57 2.5.10 Xác định mật độ vi khuẩn 57 2.5.11 Phương pháp khảo sát khả bảo quản hạt giống khỏi nấm mốc Aspergillus sp CĐP1 60 2.5.12 Khảo sát ảnh hưởng dịch nuôi cấy chủng Lactobacillus sp L5, L3, L2N phát triển hạt giống .68 2.5.12.1 Khảo sát ảnh hưởng dịch nuôi cấy chủng Lactobacillus sp L5, L3, L2N nảy mầm hạt 68 v Đồ án tốt nghiệp 2.5.12.2 Ảnh hưởng vi khuẩn Lactobacillussp L5, L3, L2N đến độ khỏe mầm đạu phộng 69 CHƯƠNG III: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 70 3.1 Khảo sát sinh lý – sinh hoá chủng vi khuẩn lactic: 70 3.1.1 Quan sát hình thái khuẩn lạc: .70 3.1.2 Nhuộm Gram: 71 3.1.3 Nhuộm bào tử: .71 3.1.4 Thử nghiệm Catalase: 72 3.1.5 Thử nghiệm tính di động: 73 3.1.6 Thử nghiệm lên men loại đường .74 3.2 Khảo sát phát triển chủng nấm Aspergillus sp CĐP1 76 3.3 Khảo sát môi trường lên men thích hợp .78 3.3.1 Khảo sát khả sinh acid lactic mật độ tế bào chủng Lactobacillus spp L5, L2N, L3 79 3.3.2 Khảo sát khả tạo màng sinh học biofilm chủng Lactobacillus spp L5, L2N, L3 83 3.3.3 Đánh giá khả phân giải lân chủng Lactobacillus spp L5, L2N, L3 86 3.3.4 Đánh giá khả sinh IAA chủng Lactobacillus spp L5, L2N, L3 91 3.3.5 Đánh giá khả kháng nấm invitro chủng vi khuẩn lactic 93 3.5.6 Khảo sát khả bảo quản hạt đậu phộng 96 3.3.7 Khảo sát ảnh hưởng dịch nuôi cấy Lactobacillus sp L5, L2N, L3 tới phát triển hạt giống 100 3.3.7.1 Ảnh hưởng dịch nuôi cấy Lactobacillus sp L5, L2N, L3 tới khả phát triển đậu phộng ngày sau nảy mầm 100 vi Đồ án tốt nghiệp 3.3.7.2 Khảo sát khả ảnh hưởng dịch nuôi cấy Lactobacillus sp L5, L2N, L3 tới đậu phộng 14 ngày sau nảy mầm .104 CHƯƠNG IV: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 110 4.1 Kết luận 110 4.2 Kiến nghị 110 TÀI LIỆU THAM KHẢO 111 vii Đồ án tốt nghiệp DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT LAB Lactic acid bacteria/ Lactobacillales VSV Vi sinh vật VK Vi khuẩn BVTV Bảo vệ thực vật IAA Indole-3-acetic acid EPS Extracellular polymeric substance MRS de Man, Rogosa and Sharpe PDA Potato Detrose Agar ĐC Đối chứng TN Thí nghiệm NT Nghiệm thức KĐC Khơng điều chỉnh MT Môi trường viii Đồ án tốt nghiệp DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1: Các chế khử nhiễm sinh học số chủng vi khuẩn 10 Bảng 1.2: Một số sản phẩm chuyển hóa LAB phương thức hoạt động 27 Bảng 1.3: Một số hợp chất tiềm kháng nấm mốc nấm men 30 Bảng 1.4: Cơ chế kháng nấm số hợp chất .34 Bảng 1.5: Một số bacteriocins sử dụng rộng rãi (M P Zacharof, 2012) 38 Bảng 1.6: Khả đối kháng sản phẩm biến dưỡng vi khuẩn LAB 39 Bảng 2.1: Bố trí thí nghiệm bảo quản chai 67 Bảng 3.1 Khả lên men đường chủng L5, L3, L2N 75 Bảng 3.3 Thống kê xếp hạng OD 550nm chủng vi khuẩn lactic .84 Bảng 3.3 Khả phân giải lân ba chủng vi khuẩn lactic ngày 90 Bảng 3.4: Hàm lượng IAA chủng vi khuẩn tổng hợp 92 Bảng 3.5: Tỷ lệ ức chế chủng vi khuẩn loại môi trường với chủng nấm mốc theo phương pháp cấy đường vi khuẩn .94 Bảng 3.6: Ngày xuất tơ nấm thí nghiệm bảo quản hạt đậu phộng 98 Bảng 3.7: Thành phần nghiệm thức ngâm đậu phộng .100 Bảng 3.8: Tỷ lệ nảy mầm độ khoẻ mầm nghiệm thức đậu phộng .101 Bảng 3.9: Ảnh hưởng dịch nuôi cấy vi khuẩn đến chiều dài sinh khối rễ, thân ngày sau nảy mầm 103 Bảng 3.10: Ảnh hưởng dịch nuôi cấy chiều dài đậu phộng sau 14 ngày nảy mầm .104 ix Đồ án tốt nghiệp DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình 1.1: Một số loại auxin phổ biến 18 Hình 1.2: Con đường lên men Glucose .26 Hình 1.3: Cấu trúc phân tử hợp chất kháng nấm 33 Hình 2.1: Sơ đồ nghiên cứu 45 Hình 2.2: Sơ đồ khảo sát độ khiết vi khuẩn lactic 46 Hình 2.3: Sơ đồ khảo sát khả phát triển chủng nấm CĐP1 53 Hình 2.4: Sơ đồ khảo sát khả đối kháng trực tiếp vi khuẩn lactic với nấm mốc Aspergillus sp CĐP1 .55 Hình 2.5: Sơ đồ xác định mật độ vi khuẩn 58 Hình 2.6: Sơ đồ khảo sát khả bảo quản hạt giống khỏi nấm mốc Aspergillus sp CĐP1 60 Hình 2.7: Sơ đồ khảo sát ảnh hưởng dịch nuôi cấy chủng Lactobacillus sp L5, L3, L2N phát triển hạt giống 68 Hình 3.1: Hình thái khuẩn lạc chủng Lactobacillus spp môi trường MRS agar .70 Hình 3.2: Kết nhuộm gram vi khuẩn .71 Hình 3.3: Kết nhuộm bào tử vi khuẩn .72 Hình 3.4: Thử nghiệm catalase chủng vi khuẩn Lactobacillus sp L5 73 Hình 3.5: Thử nghiệm tính di động chủng Lactobacillus sp L5 chủng vi khuẩn đối chứng Bacillus subtilis .74 Hình 3.6: Khả lên men loại đường vi khuẩn 75 Hình 3.7: Khả phát triển chủng nấm Aspergillus sp CĐP1 môi trường MRS Agar cải tiến .77 Hình 3.8: Hình thái nấm nấm Aspergillus sp CĐP1 78 Hình 3.9: Biểu đồ thể mật độ tế bào chủng vi khuẩn lactic sp L5 .79 Hình 3.10: Biểu đồ thể mật độ tế bào chủng vi khuẩn lactic L2N .80 x Đồ án tốt nghiệp Hình 3.11: Biểu đồ thể mật độ tế bào chủng vi khuẩn lactic L3 80 Hình 3.12: Hàm lượng acid tổng chủng L5 môi trường 81 Hình 3.13: Hàm lượng acid tổng chủng L2N mơi trường 82 Hình 3.14: Hàm lượng acid tổng chủng L3 môi trường 82 Hình 3.15: Biểu đồ đánh giá khả tạo màng biofilm ba chủng vi khuẩn lactic môi trường 84 Hình 3.16: Vi khẩn tạo màng biofilm thành ống nghiệm 86 Hình 3.17: Khả phân giải lân chủng vi khuẩn lactic L5 87 Hình 3.18: Khả phân giải lân chủng vi khuẩn lactic L2N 88 Hình 3.19: Khả phân giải lân chủng vi khuẩn lactic L3 89 Hình 3.20: Biều đồ so sánh khả phân giải lân tổng cộng ba chủng vi khuẩn lactic môi trường theo ngày 89 Hình 3.21: Biểu đồ thể khả phân giải lân ba chủng vi khuẩn lactic ba môi trường ngày 90 Hình 3.22 Biểu đồ thể ảnh hưởng môi trường nuôi cấy lên khả sinh IAA chủng vi khuẩn .92 Hình 3.23: Khả kháng nấm chủng vi khuẩn mơi trường khác 94 Hình 3.24: Biểu đồ thể tỷ lệ kháng nấm chủng vi khuẩn môi trường khác 95 Hình 3.25: Hình ảnh bảo quản đậu phộng chai sau 25 ngày .97 Hình 3.26: Cây đậu phộng ngày sau nảy mầm 101 Hình 3.27: Tỷ lệ nảy mầm độ khoẻ mầm nghiệm thức hạt đậu phộng 102 Hình 3.28: Biểu đồ thể ảnh hưởng dịch nuôi cấy vi khuẩn nghiệm thức TN1-TN1, TN3-NT8 TN1-NT12 đến chiều dài sinh khối rễ, thân ngày sau nảy mầm .103 xi Đồ án tốt nghiệp Hình 3.29: Đồ thị biểu thị ảnh hưởng dịch nuôi cấy nghiệm thức TN1-NT1, TN1NT12, TN3-NT8 đậu phộng 14 ngày sau nảy mầm 105 Hình 3.30: Cây đậu phộng 14 ngày sau nảy mầm 106 xii Đồ án tốt nghiệp MỞ ĐẦU Đặt vấn đề Vệ sinh an toàn thực phẩm vấn đề xã hội cần giải kịp thời để bảo vệ sức khoẻ người Ở nước ta, với đặc điểm khí hậu nhiệt đới nóng ẩm, độ ẩm khơng khí thường cao, điều kiện thuận lợi cho nấm mốc phát triển gây nhiễm độc tố cho thực phẩm thức ăn chăn nuôi, gây độc cho người gia súc, gây tổn thương gan (ung thư gan…) Tình trạng phơi nhiễm nấm mốc ảnh hưởng đến 25 % mùa màng toàn giới, làm tổn thất trung bình 418 triệu ảnh hưởng gia súc 472 triệu đô năm (theo Bô Nông Nghiệp Mỹ, 2009) Tại Việt Nam, năm bị ảnh hưởng khoảng 13-16 % lượng nông sản tuỳ loại Trong trình sinh trưởng phát triển nông sản (được bảo quản kho tàng , bao bì ), nấm mốc làm giảm nghiêm trọng chất lượng loại nông sản bảo quản Nhiều lồi nấm mốc phát triển nơng sản (thóc, ngơ, lạc, đậu tương ) làm cho sản phẩm nông nghiệp biến đổi màu sắc, mùi vị, giảm chất lượng, đặc biệt chất dinh dưỡng tinh bột, đường, protein, acid amin, lipid, vitamin khoáng chất Nấm mốc làm thối rữa sản phẩm nông nghiệp hoa quả, rau, hạt ngũ cốc tạo điều kiện cho nhiều loại vi khuẩn khác phát triển gây hại làm ảnh hưởng đến chất lượng hạt, sản lượng thu hoạch gây thiệt hại cho người sử dụng Bên cạnh sử dụng biện pháp lúc trồng trọt canh tác ruộng đất, bón phân, phun thuốc, xu hướng xử lý hạt giống Xử lý nguồn bệnh tồn hạt giống trước gieo trồng điều quan trọng việc đảm bảo chất lượng hạt giống, vừa tăng khả chống chọi hạt khỏi tác nhân gây bệnh, ngăn ngừa nguồn bệnh lan truyền từ hạt sang đồng ruộng, vừa làm tăng sản lượng thu hoạch có lợi cho người nơng dân, góp phần phát triển nông nghiệp bền vững, không ảnh hưởng môi trường Đồ án tốt nghiệp Xử lý hạt giống hóa chất ngày sử dụng rộng rãi để phòng trừ sâu bệnh hại nông nghiệp với ưu điểm tác dụng nhanh, tương đối đơn giản, đem lại hiệu kinh tế cao,…nhưng hợp chất hóa học dần có yếu điểm độc hại với môi trường gây ô nhiễm đất, nguồn nước khơng khí, hình thành lồi kháng thuốc, ảnh hưởng đến quần thể sinh vật đăc biệt ảnh hưởng đến sức khỏe người Do đó, hợp chất sinh học thay mang lại hiệu thân thiện, an tồn với mơi trường đặc biệt hợp chất sinh học từ loài vi sinh vât Một chủng nghiên cứu ứng dụng nhiều chủng sinh acid lactic Vi khuẩn dạng có hoạt tính sinh học cao, an tồn, có khả tiêu diệt vi sinh vật có hại nguồn vi sinh vật hữu ích, trì hệ cân vi khuẩn đường ruột Nhận thấy lý cần thiết cho đời sống người lý thực đề tài “Ứng dụng vi khuẩn lên men lactic xử lý hạt giống đậu phộng” Tình hình nghiên cứu: 2.1 Ngồi nước: Trên giới, có nhiều nghiên cứu khả kháng nấm vi khuẩn sinh acid lactic tạo thành, chẳng hạn như: “Khả kháng nấm chủng Lactobacillus plantarum với mốc Fusarium in vitro nấu mạch nha lúa mạch” A Laitila công (2002) Năm 2004, Cassandra De Muynck công nghiên cứu “Khả kháng nấm vi khuẩn sinh acid lactic sản xuất hợp chất kháng nấm thực phẩm” Kim Jeong Dong với “Nghiên cứu hoạt động kháng nấm vi khuẩn lactic phân lập từ kimchi kháng Aspergillus fumigatus” năm 2005 R Muñoz cộng với nghiên cứu “Ngăn cản sản xuất độc tố Aspergillus nomius vsc 23 vi khuẩn sinh acid lactic Saccharosemyces cerevisae” năm 2010 “Độc tố aflatoxin bị ức chế vi khuẩn lactic Lactobacillus casei có hoạt động mạnh chống phát triển nấm nảy mầm bào tử nấm” Kim, 2005 Đồ án tốt nghiệp 2.2 Trong nước: Hiện nay, nước ta số sản phẩm cơng trình nghiên cứu vi khuẩn kháng nấm bệnh loại hạt khác như: Cơng trình nghiên cứu Chế phẩm EM bảo vệ trồng hay ứng dụng thuỷ sản Chế phẩm Sadi Bio (là tên gọi chế phẩm vi sinh Biomix 2) Viện công nghệ Môi trường Việt Nam, sản xuất từ chủng vi sinh vật hữu ích thuộc nhóm xạ khuẩn Streptomyces ưa ấm sinh tổng hợp mạnh enzym ngoại bào, có khả sinh kháng sinh ức chế nấm mốc, vi khuẩn Gram âm “Khả giảm hàm lượng Aflatoxin từ nấm mốc vi khuẩn lactic nấm Trichoderma” Lương Thị Phương Thảo (2015) Chế phẩm vi sinh SB2 cơng ty Cơng nghệ Cát Tường có cơng dụng phịng trừ tác nhân gây bệnh cho trồng nấm, vi khuẩn, virus, xạ khuẩn,… Vi khuẩn lactic chưa ứng dụng rộng rãi xử lý hạt giống nghiên cứu nước ta Mục đích nghiên cứu: Nghiên cứu, ứng dụng vi khuẩn lên men lactic tạo chế phẩm sinh học bảo quản xử lý hạt giống Mục tiêu nghiên cứu: Khảo sát khả dịch nuôi cấy vi khuẩn Lactobacillus sp L5, L3, L2N bảo quản phát triển hạt đậu phộng Nội dung nghiên cứu: Hoạt hoá chủng vi khuẩn Lactobacillus sp L5, L2N, L3 chủng nấm Aspergillus sp CĐP1 Khảo sát đặc điểm hình thái, sinh hố chủng vi khuẩn Lactobacillus sp L5, L2N, L3 Đồ án tốt nghiệp Khảo sát khả đối kháng trực tiếp chủng Lactobacillus sp L5, L2N, L3 với chủng nấm Aspergillus sp.CĐP1 Khảo sát mơi trường lên men thích hợp chủng Lactobacillus sp L5, L2N, L3 Ứng dụng dịch nuôi cấy vi khuẩn Lactobacillus sp L5, L2N, L3 bảo quản xử lý hạt đậu phộng Xây dựng quy trình sản xuất hạt giống xử lý Phương pháp nghiên cứu: 6.1 Phương pháp luận: Để ứng dụng vi khuẩn lactic xử lý hạt giống đậu phộng thay cho chất hóa học, vi khuẩn lactic có nguồn phân lập từ thực phẩm lên men truyền thống khảo sát tuyển chọn theo khả sinh acid, tạo sinh khối, tạo màng biofilm, đối kháng nấm, phân giải lân sinh hoocmon tăng trưởng thực vật IAA Đồng thời ảnh hưởng môi trường lên men lên tính chất khảo sát Sau chọn mơi trường lên men thích hợp, thí nghiệm xử lý hạt đậu phộng nảy mầm tiến hành để so sánh độ khỏe mầm hạt đậu phộng xử lý không xử lý 6.2 Phương pháp xử lý số liệu: Phần mềm Excel để tính tốn vẽ đồ thị Phần mềm thống kê SAS 9.1 Kết đạt được: Xác định khả kháng nấm chủng vi khuẩn Lactobacillus sp L5, L3, L2N chủng nấm mốc Aspergillus sp CĐP1 phân lập từ hạt đậu phộng Xác định khả bảo quản hạt chủng Lactobacillus sp L5, L3, L2N khỏi nấm mốc Xác định ảnh hưởng dịch nuôi cấy lên phát triển hạt đậu phộng (tỷ lệ nảy mầm, độ khỏe mầm, ) Xây dựng quy trình xử lý hạt đậu phộng Đồ án tốt nghiệp CHƯƠNG I: TỔNG QUAN Tổng quan xử lý hạt giống: 1.1 Giới thiệu chung: Hiện thị trường có nhiều loại thuốc xử lý hạt giống với nhiều thương hiệu khác công ty thuốc BVTV Nông dân bắt đầu làm quen với lợi ích việc xử lý hạt giống bảo vệ trước công sâu bệnh, côn trùng, vi khuẩn, nấm gây hại Trước việc xử lý giống có mục đích giúp giữ giống không bị nấm bệnh hại công Các hạt giống áo loại thuốc trừ nấm captan, thiram carbendazim để trừ nấm bệnh bề mặt hạt giống Sau hạt giống nhuộm phẩm màu đỏ để cảnh báo người tiêu dùng không sử dụng làm thực phẩm Nhưng carbendazim số hoạt chất khác bị cấm sử dụng hoạt chất hóa học có độc tính cao, với nhiều tác động tới môi trường, hệ sinh thái sức khỏe người Thuốc trừ nấm bảo vệ hạt giống nảy mầm tránh khỏi bị sâu bệnh đất công, giúp tăng tỷ lệ nảy mầm, mọc điều kiện bất lợi thiếu thừa nước Lợi ích xử lý hạt giống: - Giúp hạt giống nảy mầm nhanh, bắt rễ sớm - Giúp hình thành nốt sần họ đậu - Tiệt kiệm lượng thuốc cơng lao động đơn vị diện tích so với phân bón gốc phân bón - Dễ áp dụng phân bón gốc phân bón lá, trộn thuốc xử lý hạt với giống gieo sạ Việc xử lý hạt giống mở nhiều triển vọng : Tăng cường tính kháng bệnh: Kích thích tính kháng bệnh trồng (kích kháng) phương pháp giúp cho giống bị nhiễm bệnh trở nên có khả kháng bệnh mức độ sau xử lý chất kích kháng Kích kháng không tác động trực Đồ án tốt nghiệp tiếp lên mầm bệnh mà kích thích q trình tự vệ trồng Chất kích kháng có nguồn gốc hóa học vi sinh vật Tăng cường chịu điều kiện bất lợi: Các vi khuẩn sống vùng rễ lúa cố định đạm Azospirillum lipoferum, Azospirillum lipoferum; vi khuẩn Pseudomonas sp, Baccilus sp kích thích khả tổng hợp chất điều hòa sinh trưởng thực vật Auxin Gibberelin giúp rễ trồng phát triển tốt hơn, gia tăng diện tích tiếp xúc rễ với đất Các vi khuẩn vừa tăng cường cung cấp dinh dưỡng cho trồng, vừa tăng cường chống chịu điều kiện bất lợi Các chất ly trích thực vật Lychnis viscaria, xoan Melia azedarach có tác dụng kích hoạt tăng cường trồng chống chịu điều kiện bất lợi gieo sạ ngập úng, hạn hán… Phòng trừ sâu bệnh: Đây xu phổ biến phần lớn sản phẩm xử lý hạt giống thị trường Điển hình thuốc xử lý hạt giống Cruiser có chứa chất Thiamethoxam hoạt chất chuyên rầy nâu bọ trỉ, chất Defenoconazole thuốc trừ nấm phổ rộng ức chế tổng hợp màng tế bào nấm, chất Fludioxonil hoạt chất trừ nấm hạt không lưu dẫn, chủ yếu bệnh lúa von Ngồi cịn có Gaucho chứa hoạt chất imidacloprid thuốc trừ sâu ức chế thần kinh trừ bọ trỉ, rầy nâu Sunato chứa hoạt chất Fipronil thuốc trừ sâu thuộc nhóm phenylpyrazole bảo vệ lúa 7-14 ngày sau sạ, với Isotianil thuốc trừ sâu thuộc nhóm Cloronicotinyl chuyên trừ rầy nâu, bọ trỉ 1.2 Các phương pháp khử nhiễm độc tố: 1.2.1 Phương pháp vật lý: Phân hủy aflatoxin khơng khí nóng: Dùng khơng khí nóng thổi qua ngun liệu có chứa aflatoxin để làm giảm thiểu lượng aflatoxin nhiều tác giả nghiên cứu, phương pháp đem lại nhiều kết đáng kể Nếu nhiệt độ khơng khí nóng đưa vào 100 °C – 145 °C ngơ hạt lượng aflatoxin B1 giảm từ 877 ppb ... cho trồng nấm, vi khuẩn, virus, xạ khuẩn, … Vi khuẩn lactic chưa ứng dụng rộng rãi xử lý hạt giống nghiên cứu nước ta Mục đích nghiên cứu: Nghiên cứu, ứng dụng vi khuẩn lên men lactic tạo chế... vi sinh vật hữu ích, trì hệ cân vi khuẩn đường ruột Nhận thấy lý cần thiết cho đời sống người lý thực đề tài ? ?Ứng dụng vi khuẩn lên men lactic xử lý hạt giống đậu phộng? ?? Tình hình nghiên cứu: 2.1... DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ TP HỒ CHÍ MINH  ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP ỨNG DỤNG VI KHUẨN LÊN MEN LACTIC XỬ LÝ HẠT GIỐNG ĐẬU PHỘNG Ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Chuyên ngành: CƠNG NGHỆ SINH