Xác định α chaconin và α solanin trong khoai tây thương phẩm khoai tây chiên giòn bằng chiết xuất quechers và uplc ms ms

Hello! I.Giới thiệu Khoai tây loại thuộc họ Cà ,là công nghiệp ngắn ngày trồng phổ biến khắp giới để lấy củ ,chứa tinh bột Khoai tây có chứa khống chất,vitamin,và loại chất dd khác có lợi ích chất xơ, giảm nồng độ cholesterol, tăng khả nạp glucose Đa dạng hóa ăn: khoai tây nghiền ,canh súp, đặc biệt khoai tây chiên giòn 1.1 Khoai tây nhiễm glycoalkaloids steroid (GAs) - GAs chất chuyển hóa thứ cấp thực vật mà biết có độc tính cao người động vật -Hàm lượng GAs thấp gây rối loạn tiêu hóa nơn mửa, tiêu chảy đau bụng (2- 5mg/kg) cịn cao mạch nhanh, huyết áp thấp, thần kinh rối loạn trường hợp nghiêm trọng, mê tử vong(3-6mg/kg) -Các loại củ cịn xanh nảy mầm, đặc biệt quanh mắt khoai tây 1.2 Cấu tạo glycoalkaloids steroid Hình Cấu trúc phân tử α-chaconine Thành phần GAs quan trọng khoai tây α-chaconine α-solanine , hoạt động thuốc trừ sâu tự nhiên bảo vệ thực vật khỏi nấm, trùng, vi khuẩn, Hình Cấu trúc phân tử α-solanine Chiếm 95%tổng hàm lượng GAs khoai tây, chiên , luộc, dùng lị vi sóng khơng làm giảm mức độc hại 1.3 Phương pháp chuẩn bị mẫu QuEChERS QuEChERS phương pháp chiết xuất dễ thực hiệu cao phát triển để xác định dư lượng thuốc trừ sâu mặt hàng nông sản( trái rau quả) Chiết hợp chất đích từ mẫu đồng cách sử dụng axetonitril muối ống ly tâm, bước làm phân tán pha rắn thực ống nghiệm khác có chứa chất hấp thụ để loại bỏ thành phần gây nhiễu Kỹ thuật cung cấp thông lượng mẫu cao đồng thời hạn chế việc sử dụng dung môi Trongnghiên cứu tại, quy trình phân tích dựa trênUPLC-MS / MS với trích xuất QuEChERS II Thuốc thử vật liệu : α -Solanin (độ tinh khiết ≥ 95%), α –chaconine Bộ kits để chiết pha rắn phân tán (d-SPE) Amin thứ cấp (PSA) C18 (hạt kích thước 40–60 micromet) Và thuốc thử có sẵn phịng thí nghiệm 2.1Thu thập mẫu, xử lý mẫu: 20 miếng khoai tây chiên giòn Nghiền máy IKA Lắc mạnh Cho mẫu vào máy Ly tâm 8m -20̊C Ống ly tâm Teflon chứa 5ml nước Ly tâm 60s Thêm 2g MgSO4 1g NaOAc Ly tâm 180s Thêm vào ống 25ml CH3CN 1% vol HCOOH 2.2 Thiết bị đo đạc: Tách sắc ký thực hệ thống ACQUITYTM Ultra Performance LC với thiết bị lấy mẫu tự động, làm mát tủ sấy cột Dùng cột EndeavorsilTM UHPLC C18 (100 mm x 2,1 mm, 1,8 µm) để tách biệt ; nhiệt độ cột 40 °C  Pha động bao gồm 10mmol AMF CH3CN, phân giải gradient có tốc độ dịng khơng đổi Tổng thời gian hoạt động phút, máy tự động điều hòa 10˚C 5µL dung dịch mẫu bơm vào III Kết 3.1 ĐƯỜNG CONG HIỆU CHUẨN • DỰA VÀO GIỚI HẠN ĐỊNH LƯỢNG (LOQ), ĐỘ CHÍNH XÁC.ĐỂ PHÂN TÍCH HÀM LƯỢNG Α -CHACONINE VÀ Α -SOLANINE QUY TRÌNH PHÂN TÍCH DỰA TRÊNUPLC-MS / MS VỚI TRÍCH XUẤT QUECHERS • LOQ CHO Α -CHACONINE VÀ Α -SOLANINE LÀ 31 ΜG/KG VÀ 16 ΜG/KG KHỐI LƯỢNG TƯƠI, TƯƠNG ỨNG, CẢ HAI THẤP HƠN NHIỀU SO VỚI CÁC MỨC GAS TRONG THƯƠNG MẠI KHOAI TÂY CHIÊN GIỊN, DO ĐĨ CHỈ RA RẰNG PHƯƠNG PHÁP LUẬN THỂ HIỆN (BẢNG 2) Bảng đường cong hồi quy, phạm vi hiệu chuẩn (RG hiệu chuẩn), hệ số tương quan (r2), LOQ α -chaconine α -solanine Phương pháp có độ nhạy cao hợp chất 3.2 Đánh giá độ xác  Sự phục hồi tái tạo phương pháp xác định để đánh giá độ xác độ xác nó, tương ứng  Ba nồng độ khác dung dịch tiêu chuẩn (thấp, trung bình cao) thêm vào mẫu điều khiển thu phục hồi trung bình (Raverage) chất phân tích Các giá trị Raverage α-chaconine α-solanine với ba mức tăng đột biến trình bày Bảng Bảng Phục hồi trung bình (R trung bình ) RSD ba mức tăng đột biến α -chaconine α -solanine (n = 5) Phân tích α -Chaconine α -Solanin Ma trận /(ng/mL) 23,4 13,2 Đã phát /(ng/mL) Đã thêm /(ng/mL) R trung bình /% RSD /% 30,9 10 75 9,2 61 50 75,2 8,9 104,2 100 80,8 9,8 20,5 10 73 12,2 5102 50 76 8,5 96,8 100 83,6 6,1 • Độ xác phương pháp (thể dạng độ lệch chuẩn tương đối, % RSD) đánh giá cách phân tích năm lần mẫu sắc nét mẫu tăng vọt ==> Giá trị RSD ba mức tăng vọt xem xét phạm vi 6.1–12.2 % 3.3 Phục hồi (R) tính: R = (Cphát - Cma trận)/Cthêm vào× 100% Trong đó: Cphát :là nồng độ mẫu tăng vọt Cma trận : nồng độ mẫu điều khiển trước tăng đột biến Cthêm vào:là nồng độ bổ sung 3.4 Kết TN • Nồng độ GAs tìm thấy mẫu dao động từ 13,7 mg/kg đến 46,6 mg/kg αchaconine từ 2,7 mg/kg đến 13,9 mg/kg α-solanine Tỷ lệ α-chaconine/α-solanine thay đổi cho mẫu riêng lẻ; nhiên, nồng độ α-chaconine ln cao so với α-solanine • Chế phẩm giịn cơng nghiệp khơng thể loại bỏ α-chaconine α-solanine khỏi sản phẩm IV Kết luận  Ba bước rửa khác để loại trừ hiệu tạp chất mẫu công nghiệp phát triển, giúp cải thiện hình dạng cường độ đỉnh glycoal-kaloid  Các bước rửa kết hợp cho phép thực sắc ký đồ HPLC với việc ấn định đánh giá tốt  Việc tách rửa glycoalkaloid liên kết thực với thể tích nhỏ thể tích nạp dẫn đến tăng nồng độ chất phân tích, phân tích HPLC đáng tin cậy TÀI LIỆU THAM KHẢO  Bài báo cáo : Xác định a-chaconine a-solanine khoai tây chiên giòn thương mại chiết xuất QUECHERS UPLC-MS/MS  Bài giảng PT dư lượng độc tố SPNN  K.E Hellenas, C Branzell, Liquid chromatographic determination of the glycoalkaloids alpha-solanine and alpha-chaconine in potato tubers: NMKL interlaboratory study, J AOAC Int 1997, 80 (3), 549±554  M Friedman, G M McDonald, Potato glycoalkaloids: Chemistry, analysis, safety, and plant physiology, Crit Rev Plant Sci 1997, 16 (1), 55±132 17 Thanks! ... VỚI TRÍCH XUẤT QUECHERS • LOQ CHO Α -CHACONINE VÀ Α -SOLANINE LÀ 31 ΜG/KG VÀ 16 ΜG/KG KHỐI LƯỢNG TƯƠI, TƯƠNG ỨNG, CẢ HAI THẤP HƠN NHIỀU SO VỚI CÁC MỨC GAS TRONG THƯƠNG MẠI KHOAI TÂY CHIÊN GIỊN,... HPLC đáng tin cậy TÀI LIỆU THAM KHẢO  Bài báo cáo : Xác định a-chaconine a-solanine khoai tây chiên giòn thương mại chiết xuất QUECHERS UPLC-MS/ MS  Bài giảng PT dư lượng độc tố SPNN  K.E Hellenas,... đến 46,6 mg/kg αchaconine từ 2,7 mg/kg đến 13,9 mg/kg α- solanine Tỷ lệ α- chaconine /α- solanine thay đổi cho mẫu riêng lẻ; nhiên, nồng độ α- chaconine ln cao so với α- solanine • Chế phẩm giịn cơng