Nghiên cứu hoạt tính mọc tóc từ nanoemulsion cedrol

NỘI DUNG Tổng quan bệnh hói đầu Cơ chế bệnh Thí nghiệm Kết Tài liệu tham khảo Tổng quan bệnh hói đầu • Định nghĩa Rụng tóc (Alopecia) bệnh ngồi da phổ biến, xảy nam lẫn nữ Ảnh hưởng không nhỏ đến sức khỏe tinh thần, chất lượng sống vẻ bên ngồi người bị hói đầu Độ tuổi mắc phải bệnh 25% tuổi 25 30% tuổi 30 40% tuổi 35 65% tuổi 60 70% tuổi 80 80% tuổi 85 Độ tuổi mắc phải bệnh thường sau khoảng 40-50 tuổi, xuất hiên người mắc bệnh độ tuổi trẻ Nguyên nhân gây bệnh hói đầu Ngày có nhiều trường hợp gây bệnh ghi nhận, nguyên nhân do:  Bẩm sinh, di truyền  Suy giảm chức miễn dịch  Bệnh da  Căng thẳng làm thay đổi nội tiết tố  Tác dụng phụ việc sử dụng thuốc  Các yếu tố môi trường Phương pháp điều trị Minoxidil Những tác dụng phụ gây ra: Hoa mắt, chóng mặt Các bệnh tim mạch Viêm da dị ứng Phù mặt, chân,… Vị giác thay đổi Vì vậy, việc trị bệnh có xu hướng tìm sản phẩm có nguồn từ tự nhiên để thay cho thuốc có thị trường Cedrol (CE) thành phần hoạt tính có lồi thực vật Trắc bách/Trắc bá (Platycladus orientalis) thuộc họ Hoàng Đàn (Cupressaceae) Cây trắc bách Nguyên nhân sử dụng nhũ tương nano Nhũ tương nano sử dụng để khắc phục vấn đề cơng thức hịa tan thuốc Nhờ vào việc kích thước hạt nhỏ, hấp thu qua da nhanh, vật liệu nano có lợi phân bố thuốc tốt so với phác đồ thuốc thông thường Các giai đoạn phát triển tóc Giai đoạn anagen Giai đoạn tăng triển (anagen phase): 85% số tóc giai đoạn tăng triển Giai đoạn kéo dài từ đến năm nam giới, đến năm phụ nữ 10 Giai đoạn catagen Giai đoạn ngừng triển/chuyển đổi (catagen phase): 1% số tóc giai đoạn ngừng triển Giai đoạn kéo dài từ đến tuần 11 Công dụng nhũ tương cedrol  Thúc đẩy yếu tố tăng trưởng nội mô mạch máu (VEGF)  Điều chỉnh tín hiệu nội bào hoạt hóa protein MAPK  Giúp phát triển cân chu kỳ tóc Thuốc điều trị bệnh hói tóc nhũ tương cedrol hồn tồn thay minoxidil thị trường nhờ độ an toàn hiệu cao => 14 Thí nghiệm • Vật liệu CE – NE (nhũ tương nano cedrol) thuốc mỡ tạo từ phịng thí nghiệm với độ tinh khiết > 98% Dung dịch Minoxidil 2% mua thị trường Trung Quốc Máy siêu âm XO-250 mua Công ty Xianou Trung Quốc Hệ thống máy Agilent GC-FID 6890 sử dụng cột (30 m X 0.32 mm X 0.25µm) sản xuất Mỹ • Động vật Chuột tuần tuổi C57BL/6 (lớp SPF) cân nặng 20 ± (g) Tất chuột nuôi điều kiện chuẩn 15 • Điều chế nhũ tương nanocedrol Cân bột CE sàng rây pha dầu (gồm dầu trung tính Span 80) Đun cách thủy 70oC giữ nguyên nhiệt độ Chuẩn bị beaker chứa pha nước (Tween 80, Kali Sorbate, nước cất), đun cách thủy 70oC Sau cho giọt pha dầu vào pha nước, khuấy 60 phút tạo dung dịch nhũ tương Dùng máy siêu âm làm phân tán dung dịch 12 phút Sau để nguội đến nhiệt độ phòng Chuẩn bị beaker chứa pha nước (Tween 80, Kali Sorbate, nước cất), đun cách thủy 70oC Sau cho giọt pha dầu vào pha nước, khuấy 30 phút Lấy beaker ra, khuấy đũa thủy tinh tạo thành thuốc mỡ Sau để nguội đến nhiệt độ phịng • Điều chế thuốc mỡ Cân bột CE sàng rây pha dầu (gồm Vaseline, stearic acid, glycerol monostearate, lipid paraffin) Đun cách thủy 80oC giữ nguyên nhiệt độ 16 • Mơ hình in vitro Lượng thuốc CE-NE chuẩn bị túi thẩm tách vặn chặt nắp đặt beaker 100 mL có mơi trường pH đệm phosphate 4.0 7.8 Khuấy nhiệt độ 37oC tốc độ quay 50 rpm Sau mốc thời gian, lượng mẫu với thể tích mL lấy lần, lọc đem phân tích GC để dựng đường cong giải phóng thuốc theo thời gian => Đánh giá khả giải phóng dược chất in vitro dạng bào chế chứa tiểu phân nano 17 • Mơ hình in vivo Đun nóng wax/resin (1:1) Control Oinment CE-NE Minoxidil 25 mg/kg 50 mg/kg 100 mg/kg 18 Kết thực nghiệm 4.1 Kết mơ hình thử nghiệm in vitro Bảng 1: Các phương trình thử nghiệm với kết đo điểm đồ thị phần trăm giải phóng tích lũy pH=4 Bảng 2: Các phương trình thử nghiệm với kết đo điểm đồ thị phần trăm giải phóng tích lũy pH=7.8 Đồ thị phần trăm giải phóng tích lũy - Ở pH khác nhau, thử nghiệm in vitro giải phóng thuốc CE từ nhũ tương nano tuân theo phương trình động học bậc - Sau 6h, pH =4, phần trăm phóng thích CE từ nano nhũ tương gia tăng nhanh chóng lên đến 36.7% so với 22.6% pH = 7.8 gia tăng chậm  Môi trường acid thuận lợi tiến vào bên vật liệu nano hòa tan cedrol 19 4.2 Kết mơ hình thử nghiệm in vivo Đồ thị thang đo độ xám lông chuột ngày thứ 12 Bảng Thời gian tái tạo lại lông chuột tác dụng cedrol Hình chụp so sánh tác dụng tái tạo lông cedrol theo liều lượng 20 Bảng 4: Tác dụng cedrol đến độ dài sợi lông ngày 13,18,21 Bảng 5: Tác dụng cedrol đến khối lượng sợi lông ngày 21 Biểu đồ độ dài sợi lông ngày 13, 18, 21 Sau 21 ngày, độ dài khối lượng sợi lông sử dụng CENE (50mg/kg) đạt kết tốt thuốc mỡ cedrol Minoxidil 2% 21 Ảnh chụp ảnh hưởng thuốc CE-NE, minoxidil 2% thuốc mỡ lên nang lông chuột C57BL/6(a): hình ảnh mặt cắt dọc (a), theo mặt cắt ngang (b) Ảnh chụp hiển vi I: nang lông nhóm control; II: nang lơng nhóm CE-NE (25 mg/kg); III: nang lơng nhóm CE-NE (50 mg/kg); IV: nang lơng nhóm thuốc mỡ; V: nang lơng nhóm minoxidil 2%; VI: nang lơng nhóm CE-NE (100 mg/kg) Bảng 6: Tác dụng cedrol đến độ dài nang lơng Hình chụp (a), (b) bảng cho thấy nang tóc nhóm độ dài nang lơng CE-NE (50mg/kg) dài chu kì anagen  Có thể nghiên cứu phát triển dạng CENE thay minoxidil tương lai việc thúc đẩy kích thích mọc tóc 22 Tài liệu tham khảo [1] Y Deng et al., “Hair growth promoting activity of cedrol nanoemulsion in C57BL/6 mice and its bioavailability,” Molecules, vol 26, no 6, pp 1–15, 2021 [2] N nan Zhang, D K Park, and H J Park, “Hair growth-promoting activity of hot water extract of Thuja orientalis,” BMC Complement Altern Med., vol 13, 2013 [3] M Q Shan, J Shang, and A W Ding, “Platycladus orientalis leaves: A systemic review on botany, phytochemistry and pharmacology,” Am J Chin Med., vol 42, no 3, pp 523–542, 2014 [4] B Zhang et al., “Inhibitory activities of some traditional Chinese herbs against testosterone 5α-reductase and effects of Cacumen platycladi on hair re-growth in testosterone-treated mice,” J Ethnopharmacol., vol 177, pp 1–9, 2016 [5] Y Zhang, L Han, S S Chen, J Guan, F Z Qu, and Y Q Zhao, “Hair growth promoting activity of cedrol isolated from the leaves of Platycladus orientalis,” Biomed Pharmacother., vol 83, pp 641–647, 2016 23 Tài liệu tham khảo [6] S S Chen, Y Zhang, Q L Lu, Z Lin, and Y Zhao, “Preventive effects of cedrol against alopecia in cyclophosphamide-treated mice,” Environ Toxicol Pharmacol., vol 46, pp 270–276, 2016 [7] Y Zhang, J W Wang, F Z Qu, Y M Zhang, G Y Su, and Y Q Zhao, “Hair growth promotion effect of cedrol cream and its dermatopharmacokinetics,” RSC Adv., vol 8, no 73, pp 42170–42178, 2018 [8] Y C Kenkyusho, F Application, P Data, P E M Naff, and T L Juneau, “United States Patent (19),” no 19, 1998 [9] A Zgonc Škulj, N Poljšak, N Kočevar Glavač, and S Kreft, “Herbal preparations for the treatment of hair loss,” Arch Dermatol Res., vol 312, no 6, pp 395–406, 2020 24 Thanks for watching Trả lời câu hỏi 1/ Tại phải thử nghiệm độ hòa tan thuốc mơ hình in vitro? Khi phát triển chế phẩm thuốc, phép thử độ hịa tan hay giải phóng dược chất dùng công cụ để xác định yếu tố bào chế ảnh hưởng quan trọng tới sinh khả dụng thuốc Hơn nữa, phép thử dùng để chứng minh cho sinh khả dụng thuốc đánh giá ưu điểm Đó lý thứ nhất, lý thứ mơ hình vận hành theo điều kiện sink tức thơng qua mơ hình xác định nồng độ đạt bão hòa thuốc hịa tan 2/ Tại người già bị hói đầu nhiều người trẻ? Khi già, da đầu lớp dầu bảo vệ làm cho tóc độ đàn hồi, dễ gãy hơn, chu kì tóc bị cân giai đoạn anagen ngắn telogen dài Đồng thời tuyến bã nhờn nang lơng co lại sx dầu đi, phải cung cấp lớp dầu hay lớp dưỡng ẩm thuốc Minoxidil cedrol 3/ Công dụng máy siêu âm XO-250 thí nghiệm ? Máy siêu âm mẫu XO-250 thiết bị đa chức năng, sử dụng sóng siêu âm mạnh để tạo hiệu ứng tạo bọt chất lỏng Chúng sử dụng để tạo nhũ tương, tách, đồng nhất, chiết xuất, khử bọt, làm tăng tốc độ phản ứng hóa học,… 4/ Chức túi thẩm tách gì? Quá trình thẩm tách là trình phân tách cấu tử dung dịch chênh lệch tốc độ khuếch tán chúng qua màng bán thấm (semipermeble membrace) mục đích để tách chất tan (khỏi dung dịch ban đầu) Trong nghiên cứu túi thẩm tách đóng vai trị màng bán thấm chất tan di chuyển qua màng cedrol Trả lời câu hỏi 5/ Span 80, tween 80 kali sorbate lại sử dụng ? Tween 80 thường sử dụng với Span 80 chất nhũ hóa có công thức thuốc tạo thành lớp áo kép bao phủ bề mặt phân cách hai pha giúp ổn định trạng thái phân tán nhũ tương Còn kali sorbate sử dụng để làm chất bảo quản chống vi sinh phát triển mơi trường nhũ tương điều kiện lý tưởng cho vi khuẩn xâm nhập 6/ Làm biết nhũ tương dạng O/W hay W/O? (A): khuếch tán sau thêm giọt thị methylene vào nhũ tương (B): khuếch tán sau thêm giọt thị sudan đỏ vào nhũ tương Từ hình A B, thấy tốc độ khuếch tán thuốc nhuộm xanh nhanh nhiều so với thuốc nhuộm màu đỏ Điều cho biết nhũ tương sử dụng loại O/W (hệ dầu nước) 7/ Tại lại sử dụng giống chuột C57BL/6 mà không sử dụng giống bình thường ? Chuột thuộc dịng C57BL dễ bị rụng lông nhiều so với chủng khác sử dụng phổ biến gây rụng tóc hầu hết nghiên cứu kích thích mọc tóc Trả lời câu hỏi 8/ Tại mơ hình thử nghiệm vủa CE/NE (100 mg/kg) ko có ý nghĩ thống kê? Do tác dụng phụ CE/NE (100 mg/kg) đến ngày thứ 12 lông chuột bắt đầu rụng, đến ngày bắt đầu mọc lại chưa phát triển tốt trở lại ngày thứ 19 ngày đầu khơng đủ số liệu => khơng có ý nghĩa thống kê 9/ Chuột sử dụng thống kê chuột cái, lại chọn chuột mà tượng hói đầu lại thường xảy nam giới ? Thứ mục tiêu báo kích thích mọc tóc nên theo cedrol khơng giúp người rụng tóc muốn mọc tóc lại mà cịn giúp người có tóc muốn tóc dài thêm, gãy rụng Thứ hai chuột & nữ giới giống hàm lượng testosteron thể nên bị ảnh hưởng chế rụng tóc DHT nguyên nhân gây rụng vĩnh viễn, mà chủ yếu rụng tạm thời mơi trường, có thai Chuột bị ảnh hưởng chế làm in vivo đốn nang lơng nở rộng (giai đoạn anagen) ảnh hưởng cedrol đến yếu tố tăng trưởng bất hoạt 5- reductase hay cerol antagonist gắn lên androgen receptor 10/ Tại lại thử in vitro với pH thí nghiệm (pH = pH = 7.5) Do nhóm nghiên cứu muốn thử khả phóng thuốc hai loại da đầu da đầu khô (pH= 7-9) da đầu nhiều dầu pH=3-4.5 11/ Minoxdil cedrol tác động đến giai đoạn nang tóc ? Minoxidil cedrol tác động đến giai đoạn anagen ... khoảng từ 50 tới 100 sợi tóc bình thường Sau tóc rụng, tóc mọc từ chân tóc chu kỳ tăng trưởng bắt đầu trở lại 12 Cơ chế bệnh hói đầu (1) (DHT) (2) IGF-1, VEGF, FGF 13 Công dụng nhũ tương cedrol. .. thường xảy nam giới ? Thứ mục tiêu báo kích thích mọc tóc nên theo cedrol khơng giúp người rụng tóc muốn mọc tóc lại mà cịn giúp người có tóc muốn tóc dài thêm, gãy rụng Thứ hai chuột & nữ giới... dịng C57BL dễ bị rụng lông nhiều so với chủng khác sử dụng phổ biến gây rụng tóc hầu hết nghiên cứu kích thích mọc tóc Trả lời câu hỏi 8/ Tại mơ hình thử nghiệm vủa CE/NE (100 mg/kg) ko có ý nghĩ