Untitled 83 Soá 11 naêm 2019 Khoa học và đời sống P hương pháp thụ tinh trong ống nghiệm đã thay đổi nhanh chóng trong thời gian gần đây Nhiều kỹ thuật, công nghệ mới đã được phát triển và ứng dụng và[.]
Khoa học đời sống Xét nghiệm di truyền không xâm lấn cho sàng lọc phơi Vũ Đình Chất nhóm học thuật y sinh, california (hoa kỳ) Thụ tinh ống nghiệm (IVF - In Vitro Fertilization) ứng dụng thành công lần đầu người năm 1978 Cho đến nay, phương pháp điều trị vô sinh hiệu phổ biến Trong viết, tác giả đề cập số kết tiềm ứng dụng phương pháp xét nghiệm di truyền không xâm lấn cho sàng lọc phôi (NIPGT-A) phục vụ kỹ thuật IVF điều trị vô sinh, muộn P hương pháp thụ tinh ống nghiệm thay đổi nhanh chóng thời gian gần Nhiều kỹ thuật, công nghệ phát triển ứng dụng vào điều trị lâm sàng Một số công nghệ bật như: 1) Tiêm tinh trùng vào bào tương noãn (Intracytoplasmic Sperm Injection - ICSI) coi cách mạng điều trị vô sinh nam cần sử dụng tinh trùng để tạo phôi; 2) Xét nghiệm di truyền tiền làm tổ (Preimplantation Genetic Testing - PGT) nhằm sàng lọc bất thường di truyền trước đặt phôi vào tử cung; 3) Ứng dụng trí tuệ nhân tạo với kỹ thuật cấy ghép time-lapse để tăng khả lựa chọn phôi Xu hướng đặc biệt quan tâm Tuy có nhiều tiến vượt bậc tỷ lệ thành công IVF chưa đạt kỳ vọng Trong chu kỳ IVF, bệnh nhân tiêm thuốc để kích thích nhiều nang trứng phát triển Do đó, có nhiều trứng phơi tạo chu kỳ điều trị Công việc khó khăn sau chun viên phơi làm để lựa chọn xác phơi có khả sống làm tổ Trước đây, để trì tỷ lệ thành cơng, khoảng 30% phơi giai đoạn phân cắt chuyển đồng thời vào tử cung Điều dẫn đến tỷ lệ đa thai cao gây nhiều hệ lụy cho mẹ bé Xu hướng phát triển IVF làm mà cần chuyển phôi đạt tỷ lệ thành công cao Các nhà nghiên cứu kiên trì thực hướng khác nhằm đạt mục tiêu Các hướng phát triển là: a) Ni phơi kéo dài chuyển phôi nang ngày 5/6; b) Xét nghiệm PGT để sàng lọc bất thường; c) Nuôi cấy timelapse kết hợp với trí tuệ nhân tạo để lựa chọn phôi; d) Xét nghiệm môi trường nuôi cấy để kiểm tra trao đổi chất phơi, qua giúp chọn phơi có khả sống làm tổ Mỗi chiến lược nêu có ưu, nhược điểm khác Riêng chiến lược cuối (d) chủ yếu thực nghiên cứu mà chưa ứng dụng thường quy Tỷ lệ thành công IVF kết hợp PGT Alexander L Simon cộng (Công ty Natera) bác sĩ Trung tâm sinh sản Pacific Fertility Trung tâm Conceptions Reproductive Associates of Colorado (Hoa Kỳ) thực thể hình Hình Tỷ lệ thành cơng IVF kết hợp PGT Alexander L Simon cộng thực Số 11 năm 2019 83 Khoa học đời sống PGT ứng dụng nhằm tìm phơi khỏe mạnh từ cặp cha mẹ có mang đột biến di truyền gây bệnh Sau người ta muốn áp dụng kỹ thuật để sàng lọc phơi có bất thường số lượng nhiễm sắc thể Hiện nay, PGT sử dụng công nghệ Lai so sánh hệ gen (Array Comparative Genomic Hybridization - aCGH), Giải trình tự hệ (NGS Next generation sequencing) Đa hình đơn nucleotide (Single Nucleotide Polymorphisms SNP) kiểm tra tồn nhiễm sắc thể (ADN) phơi với độ xác cao Nhờ kỹ thuật này, chun viên phơi học lựa chọn phơi có tiềm sống làm tổ tốt nhiều so với lựa chọn hình thái thơng thường Qua nâng cao tỷ lệ thành cơng lần chuyển rút ngắn thời gian mong cho cặp vợ chồng điều trị IVF Thực tế chứng minh rằng, kết chuyển phôi sau PGT lần chuyển tốt hẳn so với thông thường Tuy nhiên, xét nghiệm PGT nêu xét nghiệm xâm lấn Trong xét nghiệm này, chuyên viên phôi phải lấy số tế bào phơi cho mục đích kiểm tra di truyền Mặc dù việc sinh thiết thực vào giai đoạn phôi nang để giảm thiểu tác động quy trình đến sức sống phơi người ta thấy rằng, phương pháp làm giảm tỷ lệ thai tích lũy Chính vậy, người ta tìm cách kiểm tra di truyền phơi mà không cần phải thực sinh thiết xâm lấn Trong cơng trình nghiên cứu Trung tâm Di truyền Hỗ trợ sinh sản thuộc Bệnh viện Istanbul Memorial Hospital (Thổ Nhĩ Kỳ), Semra Kahraman cộng đưa kết sinh thiết phơi ngày (hình 2) 84 Hình Một số hình ảnh minh họa sinh thiết phôi ngày (phôi nang) mở rộng phôi nang với trophectoderm nhô thông qua lỗ mở màng zona thực vào ngày với microlaser (a) khát vọng tế bào trophectoderm nhô thông qua zona pellucida (B) chụp laser, biểu thị vòng tròn màu đỏ, áp dụng để phá vỡ mối nối chặt chẽ tế bào trophectoderm (c) tế bào trophectoderm hút (phạm vi: 2-9 tế bào) (D) pgt phương pháp giúp sàng lọc tình trạng di truyền phơi, nhiên lại quy trình xâm lấn nên nhà khoa học mong muốn tìm phương pháp thay nguồn: Semra kahraman cộng NIPGT nhiều nhóm nghiên cứu triển khai mạnh Đối với NIPGT sử dụng mơi trường dịch xoang phôi nang cho xét nghiệm di truyền Người ta chứng minh rằng, dịch xoang phôi nang mơi trường ni cấy phơi có chứa mảnh ADN tự không nằm tế bào Dựa vào mảnh ADN tự nhỏ mà kiểm tra tình trạng di truyền phơi Gần đây, có nhiều nhóm nghiên cứu đưa kết NIPGT-A chưa thực khả quan nhiễm ADN từ mẹ, từ tinh trùng từ kỹ thuật viên phòng lab Do đó, phương pháp chưa áp dụng Năm Số 11 năm 2019 2019, hội nghị Hiệp hội sinh sản phôi học châu Âu (ESHRE) tổ chức Vienna (Áo) có báo cáo khoa học đáng ý chủ đề Đầu tiên TS Rubio Lluesa Carmen từ Công ty iGenomix hợp tác với nhóm GS Carlos Simon từ Đại học Valencia (Tây Ban Nha) tiến hành nghiên cứu liên quan Thứ hai TS Madjunkova (Trung tâm Hỗ trợ sinh sản tái tạo gen, Trường Đại học Toronto, Canada) thực Nhóm thứ lấy môi trường nuôi cấy phôi vào ngày 5, cho phân tích di truyền Đồng thời, phôi sinh thiết kiểm tra tương đồng tình trạng nhiễm sắc thể Kết Khoa học đời sống cho thấy, phân tích mơi trường vào ngày tốt so với ngày 5, 100% mẫu cho thơng tin để phân tích (so với ngày có 81,8% có thơng tin) Tuy nhiên, có khoảng 2,5% âm tính giả 8,5% dương tính giả Hiện nhóm tiến hành thử nghiệm đa trung tâm để kiểm chứng lại kết Nhóm thứ hai tiến hành lấy mơi trường nuôi cấy dịch xoang phôi nang, thực collapse đĩa cấy laser sau lấy tồn mơi trường dịch xoang phơi để phân tích Bên cạnh đó, phơi sinh thiết làm phân tích để kiểm tra tương đồng cho kết 88,7% Tồn thơng tin tương đồng với mẫu sinh thiết, kể phôi nang chất lượng tốt phơi nang chất lượng trung bình Kết cho thấy cách tiếp cận khả quan, song đặt vấn đề cần tiếp tục nghiên cứu như: 1) Chưa chứng minh rõ ràng nguồn gốc ADN tự liệu có tương đồng với ICM (Inner Cell Mass - Khối tế bào nút phôi), TE (Trophectoderm - Lớp tế bào nuôi) hay với hai; 2) Có thể nhiễm từ ADN mẹ (tế bào Cumulus) khảm; 3) ADN khỏi phơi liệu có số lượng ADN bình thường hay khơng; 4) Chưa giải thích rõ kết không tương đồng sinh thiết môi trường nuôi cấy; 5) Độ phân giải kỹ thuật chưa cao (số lượng ADN đọc trình tự so với sinh thiết TE) nên khơng phân tích đoạn nhỏ nhiễm sắc thể; 6) Lượng ADN có đủ để phân tích tình trạng khảm phơi hay khơng thực collapse laser, ADN thoát từ tế bào người thực hiện, khơng ADN đến từ dịch xoang môi trường ni cấy Nhìn tổng thể thấy, NIPGT-A phương pháp tiềm để sử dụng công cụ chọn lọc phôi trước chuyển trở lại tử cung bệnh nhân Các kết vừa đề cập củng cố thêm niềm tin cho người theo đuổi hướng nghiên cứu Tuy nhiên, nhiều việc phải làm trước phương pháp ứng dụng vào thực hành lâm sàng thường quy trung tâm IVF toàn giới Ở Việt Nam, theo kết nghiên cứu Bệnh viện Phụ sản Trung ương Trường Đại học Y Hà Nội, tỷ lệ vô sinh 7,7% Như vậy, nước ta có khoảng triệu cặp vợ chồng độ tuổi sinh sản cần hỗ trợ y tế để có thai sinh em bé khỏe mạnh Thụ tinh ống nghiệm Việt Nam sau giới 20 năm (bắt đầu từ 1998) đến nay, tồn quốc có 34 trung tâm IVF cấp phép hoạt động thực khoảng 30 nghìn chu kỳ điều trị vơ sinh, muộn năm Tuy quốc gia sau chất lượng hiệu điều trị IVF Việt Nam tương đương với nước khu vực Việc cập nhật tiếp thu kết lĩnh vực giới cần thiết để có thêm thành tựu tương lai ? TÀI LIỆU THAM KHẢO Dhruti Babariya (2019), “Noninvasive preimplantation genetic testing for aneuploidy”, Reproductive BioMedicine Online, 38, Supplement 1, pp.e10-e11 S Madjunkova, V Kuznyetsov, R Antes, G Motamedi, R Abramov, Z Ibarrientos, A Zaman, A Novoselska1, I Kuznyetsova, C Librach (2019), “Assessment of the impact of blastocyst morphology on the accuracy of non-invasive preimplantation genetic testing (NIPGT-A) utilizing culture-conditioned embryo culture medium combined with blastocoel fluid”, Oral presentation - 35th Eshre Annual Meeting Rubio Lluesa Carmen (2019), “Mosaicism in the embryo”, Oral presentation - 35th Eshre Annual Meeting Huang Lei, Berhan Tang Bogale, Lu Yaqiong Sijia, Xiaoliang Xie, Catherine Racowsky (2019), “Noninvasive preimplantation genetic testing for aneuploidy in spent medium may be more reliable than trophectoderm biopsy”, Proceedings of the National Academy of Sciences, 116 Shamonki, Mousa Jin, Helen Haimowitz, Zachary, and Lian Liu (2016), “Proof of concept: preimplantation genetic screening without embryo biopsy through analysis of cell-free DNA in spent embryo culture media”, Fertility and Sterility, 106(6), pp.1312-1318 Juanjuan Xu, Rui Fang, Chen Li, Daozhen Xiao, Jian-Ping, Weimin, Honghua Song, Xiaoqing Ma, Ting Bo, Shiping Shi, Chong Ren, Jun Huang, Lei Cai, Li-Yi Yao, Bing Xie, Sijia X Lu (2016) “Noninvasive chromosome screening of human embryos by genome sequencing of embryo culture medium for in vitro fertilization”, Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 113 Semra Kahraman, ầari Beyazyỹrek, Hỹseyin Avni Taỗ, Caroline Pirkevi, Murat Cetinkaya, Neşe Gülüm (2015), “Recent advances in preimplantation genetic diagnosis”, Advances in Genomics and Genetics, 2015(5), pp.189-203, doi: https://doi org/10.2147/AGG.S53422 Số 11 năm 2019 85 ... chuyển phôi sau PGT lần chuyển tốt hẳn so với thông thường Tuy nhiên, xét nghiệm PGT nêu xét nghiệm xâm lấn Trong xét nghiệm này, chuyên viên phôi phải lấy số tế bào phôi cho mục đích kiểm tra di truyền. .. triển khai mạnh Đối với NIPGT sử dụng môi trường dịch xoang phôi nang cho xét nghiệm di truyền Người ta chứng minh rằng, dịch xoang phôi nang môi trường nuôi cấy phơi có chứa mảnh ADN tự khơng... trophectoderm hút (phạm vi: 2-9 tế bào) (D) pgt phương pháp giúp sàng lọc tình trạng di truyền phơi, nhiên lại quy trình xâm lấn nên nhà khoa học mong muốn tìm phương pháp thay nguồn: Semra kahraman