Vietnam J Agri Sci 2019, Vol 17, No 1: 29-37 Tạp chí Khoa học Nơng nghiệp Việt Nam 2019, 17(1): 29-37 www.vnua.edu.vn TÌNH TRẠNG NHIỄM KÝ SINH TRÙNG ĐƯỜNG TIÊU HĨA TRÊN ĐÀN BỊ NI TẠI PHÙ ĐỔNG, GIA LÂM, HÀ NỘI Nguyễn Thị Hoàng Yến1*, Nguyễn Thị Hồng Chiên1, Nguyễn Thân Thiện2, Vũ Thị Hà3, Cao Thị Phượng2, Nguyễn Thị Dung3 Khoa Thú y, Học viện Nông nghiệp Việt Nam Sinh viên Khoa Chăn nuôi, Học viện Nông nghiệp Việt Nam Sinh viên Khoa Thú y, Học viện Nông nghiệp Việt Nam * Tác giả liên hệ: nthyen@vnua.edu.vn Ngày nhận bài: 11.11.2018 Ngày chấp nhận đăng: 29.03.2019 TÓM TẮT Nghiên cứu tiến hành nhằm xác định lưu hành ký sinh trùng đường tiêu hóa bị ni Phù Đổng Tổng số 94 mẫu phân (50 bò thịt, 20 bò sữa, 24 bê) thu theo phương pháp ngẫu nhiên phân tầng, xét nghiệm phương pháp gạn rửa sa lắng phù Kết cho thấy 93/94 mẫu có nhiễm loại mầm bệnh Giun trịn tìm thấy 84/94 mẫu, 100% bị thịt bị nhiễm Bằng phương pháp phân biệt hình thái trứng xác định giống Strongyloides papilosus, Nematodirus spp., Cappilaria spp., Trichuris spp., Mecistocirrus spp giun trịn thuộc nhóm Strongyle Bằng phương pháp ni cấy quan sát hình thái ấu trùng chúng tơi xác định bốn giống thuộc nhóm Strongyle: Haemonchus spp., Trichostrongylus spp., Ostertagia spp Bunostomum spp Cầu trùng xác định 55/94 mẫu, bê nhiễm với tỷ lệ 100% Đã xác định loài cầu trùng, Eimeria zuernii, E bovis, E auburnensis E ellipsoidalis chiếm ưu Khơng tìm thấy sán lá, sán dây đơn bào khác Như vậy, giun trịn cầu trùng hai nhóm ký sinh trùng thường xuyên có mặt đường tiêu hóa đàn bị ni Phù Đổng Kết nghiên cứu cần phải có biện pháp tích cực cơng tác phịng trị bệnh ký sinh trùng cho đàn bị địa phương Từ khóa: Phù Đổng, bò, giun tròn, cầu trùng Prevalence of Gastrointestinal Parasites in Cattle Raised in Phu Dong, Gia Lam, Hanoi ABSTRACT This objective of this study was to determine the occurrence of the gastrointestinal parasites in cattle Ninetyfour fecal samples of beef cattle, dairy cattle and calves raised in Phu Dong were collected by stratified random sampling from August 2017 to August 2018 Fecal samples were examined by simple sedimentation and sugar floatation techniques It was found that 93/94 animals were infected with at least one parasite Nematode was found in 84/94 samples withall beef cattle (n = 50) being infected By observation of egg morphology, Strongyloides papilosus, Nematodirus spp., Cappilaria spp., Trichuris spp., Mecistocirrus spp and Strongyle- type roundworm eggs were identified In addition, other round worms belonging to Strongyle group including Haemonchus spp., Trichostrongylus spp., Ostertagia spp., and Bunostomum spp were also identified by morphology of nematode larvae Coccidia were found in 54/94 animals withall calves (n = 24) being infected Nine Eimeria species were determined, among them Eimeria zuernii, E bovis, E auburnensis, and E ellipsoidalis were predominant, especially in calves No fluke, tapeworm, and other protozoa were found in this study In conclusion, Nematode and Coccidia were usually prevalent in gastrointestines of cattle in Phu Dong Thus, effective prevention and treatment methods against gastrointestinal parasites in cattle are needed forthis locality Keywords: Phu Dong, cattle, Nematode, Coccidia 29 Tình trạng nhiễm ký sinh trùng đường tiêu hóa đàn bị ni Phù Đổng, Gia Lâm, Hà Nội ĐẶT VẤN ĐỀ Nhóm ký sinh trùng ký sinh đường tiêu hóa động vật nhai lại nói chung bị nói riêng đa dạng phong phú chủng loại giống loài, bao gồm sán lá, sán dây, giun tròn đơn bào Gia súc nhiễm ký sinh trùng bị cướp chất dinh dưỡng mà bị đầu độc độc tố Các trình làm cho vật có biểu bất thường tiêu hóa ỉa chảy xen kẽ táo bón, giảm ăn, sút cân, giảm sản lượng sữa, giảm khả sinh sản, số trường hợp dẫn đến chết, gây thiệt hại lớn cho ngành chăn nuôi (Perry et al., 1999) Ngồi lồi sán biết đến có phân bố rộng rãi động vật nhai lại nói chung trâu bị nói riêng Fasciola spp Paramphistomum spp Eurytrema pancreaticum (Nguyen et al., 2012; 2016; Holland et al., 2000), số liệu lưu hành sán gan nhỏ động vật nhai lại Dicrocoelicum sp chưa có Đối với hệ giun tròn, xác định 10 giống 50 loài ký sinh động vật nhai lại (Wyk et al., 2003) Tuy nhiên, có khoảng giống phát nước ta số giống chưa xác định đến loài (Holland et al., 2000; Guerden et al., 2000) Cầu trùng ký sinh vấn đề lớn ngành chăn ni trâu bị Có khoảng 14 lồi cầu trùng xác định, hai loài gây tác hại nặng Eimeria bovis E zuernii (Jonsson et al., 2011; Bangoura et al., 2011; Florião et al., 2016) Lương Tố Thu (1985) phát loài cầu trùng gây bệnh bê nghé Mặc dù có nhiều nghiên cứu lưu hành loài cầu trùng bê xác định E bovis, E zuernii E alabamensis) (Giáp Mạnh Hoàng, 2011; Lê Minh Đỗ Thị Lan Phương, 2015) Xuất phát từ thực tiễn, để làm rõ hệ ký sinh trùng ký sinh đường tiêu hóa động vật nhai lại nói chung đàn bị nói riêng, đồng thời đánh giá biến động thành phần ký sinh trùng ký sinh, nghiên cứu tiến hành nhằm xác định thành phần giun sán đơn bào ký sinh đường tiêu hóa đàn bị 30 ni xã Phù Đổng, huyện Gia Lâm, Hà Nội Kết nghiên cứu thơng tin hữu ích giúp cho cơng tác phịng trị bệnh ký sinh trùng bò PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Vật liệu nghiên cứu Mẫu phân (94) lấy từ đàn bò lai Holstein Friesian nuôi trang trại chăn nuôi bò tập trung (trại bò Bãi Vàng số hộ gia đình) xã Phù Đổng thời gian từ tháng 8/2017-8/2018 Mẫu lấy theo phương pháp ngẫu nhiên phân tầng, lấy từ trực tràng bò bê vào sáng sớm, bảo quản 4C chuyển phịng thí nghiệm Dựa vào độ tuổi đàn bị lấy mẫu phân chia thành: bê (1 năm tuổi) 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Xác định có mặt trứng sán dây, trứng giun trịn nỗn nang cầu trùng phương pháp phù Lấy g phân từ mẫu hòa tan 50 mL nước Dung dịch phân rửa nhẹ nhàng lọc giá lọc (đường kính mắt lưới 100 µm) cối chày sứ 20 mL dung dịch lọc chia vào ống nghiệm 15 mL Ly tâm mẫu phân ống nghiệm với tốc độ 3.000 vòng/phút/10 phút Sau ly tâm, loại bỏ dung dịch phía bên trên, giữ lại cặn Thêm vào ống nghiệm mL dung dịch đường tỷ trọng 1,27 (454 g đường hòa tan 355 mL nước), hòa tan cặn ống nghiệm Bổ sung thêm dung dịch đường đến vạch 15 mL Ly tâm với tốc độ 5.000 vòng/phút/10 phút Thêm tiếp dung dịch đường đến miệng ống nghiệm, đặt lamen (18 × 18) lên miệng ống nghiệm Sau 15 phút, lấy lamen đặt lên phiến kính sạch, soi kính hiển vi, đếm phân loại tất loại trứng giun sán nỗn nang đơn bào có lamen Xác định số lượng trứng noãn nang có g phân (OPG - oocyst per gram EPG - egg per gram) Xác định loài cầu trùng dựa theo phương pháp Florião et al (2016) Nguyễn Thị Hoàng Yến, Nguyễn Thị Hồng Chiên, Nguyễn Thân Thiện, Vũ Thị Hà, Cao Thị Phượng, Nguyễn Thị Dung 2.2.2 Xác định có mặt trứng sán đốt sán dây phương pháp gạn rửa sa lắng lớp vỏ (có hay khơng có vỏ-sheath tail, có hay khơng có filament, độ dài filament) Mỗi mẫu phân cân 10 g cho vào lưới lọc, để vào cối sứ Hòa tan phân nước lọc qua giá lọc (đường kính mắt lưới 100 µm) Để lắng dung dịch lọc khoảng 30 phút, bỏ lớp nước trên, giữ lại cặn Tiếp tục bổ sung thêm nước, để lắng Cứ làm khoảng 3-4 lần Cuối cùng, cặn đổ hộp lồng quan sát kính hiển vi soi để tìm trứng KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 2.2.3 Xác định thành phần lồi giun trịn Phương pháp nuôi ấu trùng (Harada-Mori method): từ kết xét nghiệm phương pháp phù nổi, mẫu có cường độ nhiễm giun tròn cao sử dụng để nuôi ấu trùng Mẫu phân trộn bổ sung thêm nước (nếu cần) để đạt độ ẩm vừa đủ Chuẩn bị giấy lọc có kích thước × 30 cm Phân dàn chiều ngang giấy lọc, cho cách mép giấy khoảng cm Cuộn tròn giấy lọc lại cho vào ống nghiệm loại 50 mL bổ sung nước (khoảng 15 mL) Mẫu phân giữ 27C vòng tuần Sau tuần, dùng panh lấy cuộn giấy lọc ra, phần dung dịch đổ hộp lồng Ấu trùng giun tròn phân chia chuẩn bị cho bước quan sát hình thái Quan sát hình thái ấu trùng: Mỗi ấu trùng riêng biệt đưa lên phiến kính, nhuộm dung dịch lugol’s iodine (20%) Hình thái ấu trùng quan sát kính hiển vi với độ phóng đại 10x 40x Hình thái ấu trùng xác định dựa vào số đặc điểm sau: kích thước ấu trùng; hình thái đầu (thon vuông); cấu trúc độ dài thực quản; cấu trúc độ dài 3.1 Thành phần ký sinh trùng ký sinh đàn bị ni Phù Đổng, Gia Lâm, Hà Nội Trong nghiên cứu xét nghiệm mẫu phân hai đối tượng bị chăn ni tập trung bị ni bán chăn thả Tuy nhiên, hai đối tượng không thấy ký sinh sán sán dây Ngược lại, giun tròn nhiễm với tỷ lệ cao (89,4%) Trong số loài đơn bào ký sinh xác định cầu trùng với tỷ lệ nhiễm 58,5% Đặc biệt, cầu trùng phát đàn bị ni nhốt (Bảng 1) So với nghiên cứu trước (Holland et al., 2000; Geurden et al., 2008), hệ ký sinh trùng đàn bị ni Phù Đổng có biến động thành phần lồi Mặc dù tác giả tìm thấy có mặt Fasciola spp Paramphistomum spp., chúng tơi khơng thấy lồi sán Ngun nhân dự đốn người dân khơng sử dụng phân tươi để bón cỏ nên mầm bệnh khơng bị phát tán ngồi Thức ăn cung cấp cho đàn bò Hostein Friesian cỏ voi (Pennisetum purpureum) trồng chủ yếu bãi phần xung quanh chuồng trại, vùng đất khơ Vì vậy, hạn chế có mặt ấu trùng gây nhiễm metacercaria Fasciola spp Paramphistomum spp Chúng không thấy lưu hành sán đàn bò chăn thả (mặc dù dung lượng mẫu nhỏ) Ngun nhân đàn bị thường chăn thả nơi khơ ráo, có hội tiếp xúc với ấu trùng gây nhiễm Ghi chú: a độ dài ấu trùng, b chóp ấu trùng, c độ dài vỏ đuôi (sheath tail), d độ dài filament Hình Cấu tạo ấu trùng gây nhiễm giun tròn (Borgsteede and Hendriks, 1974) 31 Tình trạng nhiễm ký sinh trùng đường tiêu hóa đàn bị ni Phù Đổng, Gia Lâm, Hà Nội Bảng Thành phần ký sinh trùng ký sinh đường tiêu hóa đàn bị Số mẫu nhiễm (Tỷ lệ nhiễm %) Đối tượng Nuôi nhốt Bán chăn thả Sán (Trematode) Sán dây (Cestode) Giun tròn (Nematode) Đơn bào (Cầu trùng - Eimeria spp.) Bò thịt (n = 45) 0 45 (100) 23 (51,1) Bò sữa (n = 20) 0 17 (85,0) (40,0) Bê (n = 24) 0 17 (70,8) 24 (100) Bò thịt (n-5) 0 (100) Tổng (n = 94) 0 84 (89,4) 55 (58,5) Bảng Thành phần giun trịn ký sinh đường tiêu hóa đàn bò Số mẫu nhiễm (min - max EPG) Đối tượng Strongyle Strongyloides papilosus Nematodirus sp Mecistocirrus sp Capillaria sp Trichuris sp Bò thịt (n = 45) 45 (1-125) (3) (1-20) (1-5) - Bò sữa (n = 20) 17 (1-20) 0 1 (1) - Bê (n = 24) (1-10) 16 (1-300) (5) 11 (1-55) Bò thịt bán chăn thả (n = 5) (2-9) 0 0 (3) Cầu trùng phát đàn bị ni nhốt, bê nhiễm với tỷ lệ 100% Kết trùng khớp với kết nhiều nghiên cứu (Ernst et al., 1984; Rehman et al., 2011; Jahanzaib et al., 2017) Điều giải thích bị chăn thả thường nguy tiếp xúc với nỗn nang cầu trùng, noãn nang lưu cữu sàn chuồng ni kẽ chuồng đặc biệt nỗn nang thường có sức đề kháng cao ngoại cảnh Vì vậy, điều kiện vệ sinh chuồng trại trọng phát có mặt đơn bào 3.2 Thành phần giun trịn ký sinh đường tiêu hóa đàn bị Quan sát hình thái trứng xác định giống giun tròn ký sinh đàn bị nhóm giun trịn thuộc giun xoăn 32 0 (Strongylida) gọi chung nhóm Strongyle (Bảng 2) Trong số giống giun tròn xác định thấy phổ biến giun lươn Strongyloides papilosus giun tóc Trichirus sp hai giống thấy nhiễm cao bê Giun tóc ký sinh xuất biểu lâm sàng vật chủ, nhiên vật bị đồng nhiễm với virus gây tiêu chảy (BVDV - bovine viral diarrihea virus) virus làm suy giảm chức miễn dịch vật chủ, tạo điều kiện cho Trichuris sp cắm sâu vào lớp nhày manh tràng trực tràng làm cho vật tiêu chảy, lờ đờ, ốm yếu, có chết (Wideman, 2004) Trong số 24 mẫu phân bê xét nghiệm, mẫu có cường độ nhiễm cao với giun tóc cầu trùng có biểu tiêu chảy Chúng không làm xét nghiệm với virus BVDV nghiên cứu này, không loại trừ khả tiêu chảy đồng nhiễm với cầu trùng Nguyễn Thị Hoàng Yến, Nguyễn Thị Hồng Chiên, Nguyễn Thân Thiện, Vũ Thị Hà, Cao Thị Phượng, Nguyễn Thị Dung Đầu trịn Khơng có filament “shoulder” 100µm A 100µm B Đầu thon Đầu hẹp, trịn, có filament C 100µm D 100µm Thực quản với phần phình E 100µm Ghi chú: A Giống Ostertagia, B Giống Bunostomum, C Giống Haemonchus, D Giống Trichostrongylus, E Giống giun lươn sống tự Hình Hình thái, cấu tạo ấu trùng giun tròn Hệ giun tròn ký sinh đường tiêu hóa động vật nhai lại nói chung bị nói riêng đa dạng phong phú, chia thành nhiều nhóm, nhóm giun trịn ký sinh dày, ruột non, ruột già manh tràng Vật chủ thường bị đồng nhiễm với nhiều giống loài (Wyk et al., 2003; Hutchinson, 2009) Phần lớn chúng thuộc vào họ giun xoăn (Strongylida), vòng đời phát triển trực tiếp phân biệt dựa vào hình thái trứng Chúng gọi chung nhóm giun trịn thuộc kiểu strongyle Trong tổng số 94 mẫu xét nghiệm, xác định 74/94 mẫu nhiễm, bị trưởng thành thấy nhiễm cao tỷ lệ cường độ so với bê Đặc điểm nhóm giun trịn ấu trùng gây nhiễm sống tự ngồi mơi trường, khơng bị bao bọc vỏ trứng Vì vậy, chúng thường xâm nhập vào ký chủ cách xuyên qua da lẫn vào thức ăn, nước uống Thời gian từ trứng phát triển thành ấu trùng thoát vỏ ấu trùng ngắn (5-7 ngày), thời gian hồn thành vịng đời ngắn (từ 0,5-1 tháng, tùy loài) Đặc biệt đàn bị chủ yếu ni nhốt, thường đàn bò trưởng thành thấy tỷ lệ cường độ nhiễm cao 33 Tình trạng nhiễm ký sinh trùng đường tiêu hóa đàn bị ni Phù Đổng, Gia Lâm, Hà Nội 3.3 Thành phần giống giun trịn qua quan sát hình thái ấu trùng Kết xác định giống giun tròn sau: Haemonchus sp., Trichostrongylus sp., Ostertagia sp Bunostomum sp Ngồi ra, chúng tơi cịn phát giống giun lươn sống tự 3.4 Tình hình nhiễm cầu trùng đàn bò nghiên cứu Bên cạnh giun tròn, chúng tơi cịn phát thấy có mặt cầu trùng đàn bò nghiên cứu Kết cho thấy bê nhiễm cầu trùng với tỷ lệ 100% bò trưởng thành nhiễm với tỷ lệ 33,0% Cầu trùng thường gây bệnh cho gia súc non (