TRƯỜNG ĐẠI HỌC MỞ THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BÁO CÁO THỰC TẬP TỐT NGHIỆP TÊN ĐỀ TÀI Khảo sát khả năng kháng oxi hóa từ cao chiết Bí Kì Nam (Hydnophytum formicarum jack) KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC CHUYÊN NGHÀN[.]
TRƯỜNG ĐẠI HỌC MỞ THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BÁO CÁO THỰC TẬP TỐT NGHIỆP TÊN ĐỀ TÀI : Khảo sát khả kháng oxi hóa từ cao chiết Bí Kì Nam (Hydnophytum formicarum jack) KHOA CƠNG NGHỆ SINH HỌC CHUYÊN NGHÀNH Y DƯỢC GVHD: TS Nguyễn Thị Lệ Thuỷ Tp Hồ Chí Minh, tháng 02 năm 2022 NHẬN XÉT CỦA GVHD LỜI CẢM ƠN Lời em xin chân thành cảm ơn Ban giám hiệu trường Đại học Mở Thành phố Hồ Chí Minh tạo điều kiện để em có hội học tập thuận lợi Lời em xin cảm ơn đến thầy mà em có hội tiếp xúc học hỏi suốt quãng đời sinh viên em, đặc biết thầy cô khoa Công nghệ Sinh học nói chung thầy chuyên ngành y dược nói riêng Trường Đại học Mở Thành phố Hồ Chí Minh Qua hướng dẫn truyền đạt tận tình q thầy em hồn thành xong thực tập tốt nghiệp với đề tài: “KHẢO SÁT KHẢ NĂNG KHÁNG OXI HÓA TỪ CAO CHIẾT BÍ KÌ NAM (HYDNOPHYTUM FORMICARUM JACK)” Em xin dành lời cảm ơn sâu sắc chân thành đến TS Nguyễn Thị Lệ Thủy – giảng viên khoa Công nghệ Sinh học giảng viên hướng dẫn em thực đề tài thực tập Cô dành thời gian để đồng hành em, giúp đỡ hướng dẫn em tận tình để em hồn thành tốt đề tài Khơng dạy kiến thức chun ngành mà Cơ cịn chia sẻ cho em kinh nghiệm làm việc, dạy cách làm việc cho đạt hiệu cao Em xin chúc Cô khỏe mạnh, hạnh phúc đạt nhiều thành công sống Em gửi lời cảm ơn đến anh Bùi Thanh Tùng cựu sinh viên khóa 2015 cho em lời động viên, góp ý dẫn tận tình cho em kiến thức kinh nghiệm mà anh có qua nhiều năm tích lũy Và em muốn gửi lời cảm ơn đến bạn bè Những người bên cạnh giúp đỡ, động viên em gặp khó khăn Cuối em xin gửi lời tri ân sâu sắc đến ba mẹ Người sinh thành, nuôi nấng dạy dỗ em nên người, lo cho em để em có hội học hỏi tiếp xúc với sống Em xin chân thành cảm ơn! Mục Lục DANH MỤC HÌNH ẢNH VÀ SƠ ĐỒ i DANH MỤC BẢNG i DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT i ĐẶT VẤN ĐỀ PHẦN I: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tổng quan loài Hydnophytum formicarum Jack 1.1.1 Tổng quan chi Hydnophytum 1.1.2 Mô tả thực vật 1.1.3 Phân bố 1.1.4 Giá trị kinh tế 1.1.5 Các nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học PHẦN II: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Vật liệu 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 2.1.2 Địa điểm nghiên cứu 2.1.3 Hóa chất thiết bị 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Phương pháp thu thập mẫu 2.2.2 Phương pháp ngâm (Maceration) 2.2.3 Phương pháp cô lập hợp chất 2.2.4 Phương pháp xác định khả kháng oxy hóa 2.3 Nội dung nghiên cứu 2.3.1 Khảo sát ảnh hưởng q trình trích ly đến chất lượng chế phẩm cao chiết 2.3.2 Khảo Sát quà trình điều chết cao phân đoạn 2.3.3 Khảo sát khả kháng oxy hóa PHẦN III: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Kết khảo sát quy trình trích ly tạo cao chiết từ Bí Kì Nam 3.2 Kết 3.3 Kết khảo sát khả kháng oxi hóa sáu phân đoạn cao 10 PHẦN IV: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 11 TÀI LIỆU THAM KHẢO 12 DANH MỤC HÌNH ẢNH VÀ SƠ ĐỒ Hình 1:Hình ảnh trái Bí Kì Nam .2 Hình 2:Cơ chế kháng oxi hóa Hình 3:Bản sắc kí hai phương pháp chiết Hình 4:Bản sắc kí phân đoạn cao Sơ đồ 1: Sơ đồ quy trình trích ly cao chiết từ Bí Kì Nam Sơ đồ 2:Sơ đồ quy trình chạy sắc kí cột cao phân đoạn DANH MỤC BẢNG Bảng 1: Bố trí thí nghiệm khảo sát khả kháng oxy hóa từ cao chiết .8 Bảng 2:Kết thí nghiệm kháng oxi hóa phân đoạn cao 10 ĐẶT VẤN ĐỀ Từ xưa đến người biết đến cách sử dụng loài cỏ tự nhiên để chữa loại bệnh,nên thuốc quý lưu truyền nhiều dân gian,và đặc biệt vùng cao nguyên Tây Ngun nơi có nhiều cánh rừng già với vơ số loài dược liệu quý, đặc biệt Sâm Ngọc linh thảo dược quý, mang đến nhiều tác dụng tuyệt vời dành cho người sử dụng Nhiều người không ngại bỏ tiền trăm, chí tiền tỷ để mua cho thảo dược quý với mong muốn sức khỏe thân gia đình tốt lên Qua nghiên cứu thực nghiệm lâm sàng cho thấy, Sâm Ngọc Linh có tác dụng bồi bổ thể, giảm stress, chống mệt mỏi, tăng cường sinh lực, phục hồi sức khỏe Đồng thời nghiên cứu khác cho thấy Sâm Ngọc Linh có tác dụng tăng cường sức đề kháng, nâng cao hệ miễn dịch, chống suy nhược tốt.Sâm Ngọc Linh có hoạt tính tốt vậy, mơi trường khí hậu thổ nhưỡng Tây Nguyên góp phần làm cho thuốc có hợp chất sinh học có tác dụng kì diệu vậy,bên cạnh Sâm Ngọc Linh vùng Tây Ngun cịn có nhiều loại thuốc có tác dụng tốt điển Bí Kì Nam thuốc để điều trị số bệnh bệnh gan,cải thiện chức thận,ung thư,hơn Bí Kì Nam loại tìm thấy nhiều vùng cao nguyên Tây Nguyên góp mặt nhiều phương thuốc bí truyền dân gian bà vùng Tây Nguyên Từ sở trên, đề tài : “Khảo sát khả kháng oxi hóa từ cao chiết Bí Kì Nam (Hydnophytum formicarum Jack) ” đề xuất nhằm xác định khả kháng oxi hóa từ cao chiết Bí Kì Nam (Hydnophytum formicarum Jack) Mục tiêu đề tài - Khảo sát khả kháng oxy hố từ cao chiết Bí Kì Nam (Hydnophytum formicarum Jack) PHẦN I: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tổng quan loài Hydnophytum formicarum Jack 1.1.1 Tổng quan chi Hydnophytum Chi Hydnophytum chi epiphytic myrmecophytes có nguồn gốc từ Đơng Nam Á 1.1.2 - Họ: Rubioideae - Chi: Hydnophytum - Loài: Hydnophytum formicarum Jack Mơ tả thực vật Bí kỳ nam (Hydnophytum formicarum Jack.) thuộc chi Hydnophytum, họ Cà phê (Rubiaceae) Đây loài sống cộng sinh với kiến (cây kiến cộng sinh để sinh trưởng phát triển) Theo tác giả Phạm Hồng Hộ[1], Bí kỳ nam (Hydnophytum formicarum Jack.) gọi Kỳ nam kiến, có dạng củ trơn, xám vàng vàng, có lỗ hang cho kiến ở, thân 2-4, trịn, khơng lơng Lá có phiến xoan ngược, dày, không lông, gân phụ mảng 8-10 cặp; cuống ngắn, bẹ thấp nhọn Hoa không cọng, trắng; vành có ống dài mm; tiểu nhụy Quả nhân cứng cam, ngọt, cao 5-7 mm, nhân 2, cao mm 1.1.3 Phân bố Ở nước ta, bí kỳ nam thường thấy mọc tỉnh phía nam,điển hình tình Tây Nguyên Kon Tum, Gia Lai, Lâm Đồng, Đắk 1.1.4 Nơng…[1] Giá trị kinh tế Hiện Bí Kì Nam chưa nhóm nghiên cứu,nghiên cứu nhiều vềthành phần hóa học hoạt tính sinh học Hình 1:Hình ảnh trái Bí Kì Nam 1.1.5 Các nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học Trong nước Năm 2015, Nguyễn Phương Hạnh cộng sự[2], lập bốn hợp chất iridoid có tên acid asperulosidic (1), acid deacetylasperulosidic (2), 6αhydroxygeniposide (3) 10-hydroxyloganin (4) Nước Năm 2008, Prachayasittikul cộng sự[3] cô lập năm hợp chất bao gồm stigmasterol (5), isoliquiritigenin (6), protocatechualdehyde (7), butin (8) butein (9) Nhóm tác giả thử nghiệm khả kháng oxy hóa kháng khuẩn loại cao chiết từ bí kỳ nam hợp chất lập thấy nguồn dược liệu tiềm cho hai dược tính khảo sát Năm 2017, Abdullah cộng sự[4] cô lập hai hợp chất gọi tên hydnophaldehyde (10) 2-(2-methoxyphenyl)ethyl palmitate (11) Năm 2019, Nugraha cộng sự[5], cô lập hai hợp chất steroid stigmast-4-en-3-one (12) β-sitosterol (13) dẫn xuất aniline 4aminophenyl acetate (14) PHẦN II: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Vật liệu 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu Cây Bí Kì Nam (Hydnophytum formicarum Jack) thu hái rừng già Lâm Hà,Lâm Đồng, Việt Nam vào tháng năm 2020 Được định danh T.S Đặng Lê Anh Tuấn,Trưởng PTN thực vật, Bộ Môn Sinh thái – Sinh học tiến hóa,Khoa sinh học – Cơng nghệ sinh học,Đại học khoa học Tự nhiên – ĐHQG TpHCM 2.1.2 Địa điểm nghiên cứu Thí nghiệm tiến hành phịng thí nghiệm Sinh Hóa, Khoa Cơng Nghệ Sinh Học, trường Đại học Mở Thành phố Hồ Chí Minh thời gian từ tháng 8/2020 đến tháng 3/2021 2.1.3 Hóa chất thiết bị ❖ Hóa chất: - Các loại dung mơi ethanol, n-hexane, ethyl acetate, methanol, chloroform: Chemsol (Việt Nam) - Silica gel 200 – 400 (Merck) - Bản mỏng silica gel 60 F254 (Merck) 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Phương pháp thu thập mẫu Cây Bí Kì Nam (Hydnophytum formicarum Jack) thu hái rừng già LâmHà Thu hái trái,sau trái đem rửa phơi khơ nhiệt độ phịng đem xay nhuyễn thành bột 2.2.2 Phương pháp ngâm (Maceration) Bột ngâm bình chứa thủy tinh thép khơng rỉ, bình có nắp đậy (tránh sử dụng bình nhựa) Tiếp theo dung mơi rót vào bình bề mặt dung mơi ngang với bề mặt lớp bột chút Giữ n bình ngâm nhiệt độ phịng đêm ngày, dung môi xuyên thấm vào cấu trúc tế bào thực vật tách chiết hợp chất tự nhiên có Sau đó, dung dịch chiết lọc ngang qua tờ giấy lọc; thu hồi dung mơi có cao chiết Cuối cùng, rót dung mơi vào bình chứa bột tiếp tục trình chiết thêm số lần chiết kiệt chất có mẫu cây[2] 2.2.3 Phương pháp cô lập hợp chất ❖ Sắc ký cột (CC) [2] Sắc ký cột tiến hành cột thủy tinh, với chất nhồi cột silica gel pha thường pha đảo Silica gel pha thường có cỡ hạt 0,040 – 0,063 mm (240 – 430 Merck), silica gel pha đảo, Sephadex LH-20 để phân lập chất 2.2.4 Phương pháp xác định khả kháng oxy hóa Khả kháng oxy hóa phương pháp đánh bắt gốc tự thực theo phương pháp Goldschmidt Ren.[3] Nguyên tắc: Các chất có khả kháng oxy hóa trung hịa gốc DPPH• cách cho hydrogen, làm giảm độ hấp thu bước sóng cực đại màu dung dịch phản ứng nhạt dần, chuyển từ tím sang vàng nhạt Phản ứng trung hịa gốc DPPH• chất kháng oxy hóa minh họa phản ứng mơ tả Hình 2:Cơ chế kháng oxi hóa 2.3 Nội dung nghiên cứu 2.3.1 Khảo sát ảnh hưởng q trình trích ly đến chất lượng chế phẩm cao chiết 2.3.1.1 Trích ly nhiệt độ bình thường trích ly nóng Bột trái khơ (2.5 kg) tiến hành ngâm với dung môi ethanol 96o với tỷ lệ 1:3 (w/v),tại chia làm hai q trình q trình thứ tiến hành trích ly nhiệt độ phịng 3h,q trình thứ hai tiến hành trích ly nhiệt độ 600c 3h Trong suốt thời gian ngâm, ngày khuấy lần nhằm giúp q trình trích ly hợp chất bột trái diễn thuận lợi Mỗi 3h , phần dịch trích ethanol lọc qua bơng gịn để loại bã đem quay bay dung môi áp suất để thu nhận phần cao trái Phần bã lại tiếp tục ngâm với dung môi ethanol (hoặc phần dung môi thu hồi trước đó) sau lại lọc thu phần dịch trích, quay thu nhận cao Sơ đồ 1:Sơ đồ quy trình trích ly cao chiết từ Bí Kì Nam Q trình trích ly hai phương pháp tính theo cơng thức : 𝐻= 𝑚2 𝑚1 × 100 Trong : H hiệu suất trích ly M2 khối lượng sau trích ly M1 khối lượng trước trích ly 2.3.2 Khảo Sát quà trình điều chết cao phân đoạn Cao tổng ban đầu chia nhỏ phương pháp sắc ký cột silica gel (cột: 120 x ϕ cm) với hệ dung môi H:EA (100:0 – 0:100, v/v),EA:ME(100:0 – 0:100, v/v) Sau thu phân đoạn nhỏ ký hiệu từ cao phân đoạn – cao phân đoạn 6.Các dịch chiết cô quay chân không để loại dung môi thu cao chiết phân đoạn Cao tổng 240g Chạy cột sắc kí với hệ dung mơi H:EA (100:0 – 0:100, v/v),EA:ME(100:0 – 0:100, v/v) Cao phân đoạn Cao phân đoạn Cao phân đoạn Cao phân đoạn Cao phân đoạn Cao phân đoạn Sơ đồ 2:Sơ đồ quy trình chạy sắc kí cột cao phân đoạn 2.3.3 Khảo sát khả kháng oxy hóa Cách tiến hành - Cân 7,88 mg DPPH🞄 định mức cồn 960 thành 100 ml Để ổn định tối 30 phút 40 0C Lúc DPPH🞄 có nồng độ 0,2 mM - Mẫu thử: pha mẫu thí nghiệm cồn 960, lắc cho mẫu tan hoàn toàn, pha thành dãy nồng độ từ 75- 200 g/ml Tiến hành cho ml mẫu thí nghiệm với ml DPPH🞄 (0,2 mM) Lắc đều, dung dịch mẫu Để yên mẫu tối 30 phút nhiệt độ phòng, tiến hành đo độ hấp thụ bước sóng 517 nm - Mẫu đối chứng: tiến hành tương tự mẫu thí nghiệm thay dung dịch vitamin C - Mẫu chuẩn: thay cồn - Mẫu trắng: gồm dung dịch ethanol DPPH🞄 (0,2 mM) - Thí nghiệm lặp lại lần, % ức chế giá trị trung bình lần lặp lại xử lý thống kê phần mềm Statgraphicplus 3.0 Sau chuẩn bị mẫu, tiến hành khảo sát khả ức chế gốc tự bảng bố trí thí nghiệm 1,các mẫu bơm vào giếng 96 lỗ đưa vàomáy ELISA đọc kết giá trị mật độ quang 517 nm Bảng 1: Bố trí thí nghiệm khảo sát khả kháng oxy hóa từ cao chiết Nồng độ (µg/ml) Mẫu Thí Nghiệm Cao phân đoạn Cao phân đoạn Cao phân đoạn Cao phân đoạn Cao phân đoạn Cao phân đoạn 12.5 25 50 75 100 A1 A2 A3 A4 A5 B1 B2 B3 B4 B5 C1 C2 C3 C4 C5 D1 D2 D3 D4 D5 E1 E2 E3 E4 E5 F1 F2 F3 F4 F5 Khả kháng oxy hóa đánh giá giá trị IC50 Giá trị IC50 mẫu tính dựa phương pháp hồi quy từ đồ thị % ức chế gốc tự với nồng độ chất ức chế PHẦN III: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Kết khảo sát quy trình trích ly tạo cao chiết từ Bí Kì Nam Kết chạy bảng sắc kí silica gel hai phương pháp trích ly nóng nguội hình : Hình 3:Bản sắc kí hai phương pháp chiết Hai phương pháp trích ly nóng trích ly nhiệt độ bình thường thị kết hình Qua hình nhận thấy phương pháp trích ly nhiệt độ thường giữ đầy đủ hợp chất có hoạt tính sinh học phương pháp trích ly nóng.Vì phương pháp trích ly nóng có số hợp chất bị phân giải phần tác nhân nhiệt độ.Vì nhóm nghiên cứu chọn phương pháp trích ly nhiệt độ bình thường để giữ nguyên vẹn hợp chất có mẫu Hiệu suất trích ly hai q trình trích ly nóng nguội cho kết quả: - Trích ly nóng: 12% - Trích ly nguội: 8% Qua hiệu suất trích ly nhóm nghiên cứu đề nghị phương pháp trích ly nguội phương pháp có hiệu suất trích ly thấp khơng đáng kể so với phương pháp trích ly nóng giữ lại hầu hết hợp chất có cao chiết 3.2 Kết Tổng lượng cao ban đầu (240g) sau chia nhỏ phương pháp sắc ký cột silica gel (cột: 120 x ϕ6 cm) với hệ dung môi H:EA (100:0 – 0:100,v/v), EA:Me (100:0 – 0:100,v/v) thu phân đoạn Hình 4:Bản sắc kí phân đoạn cao ➢ Cao phân đoạn 1: 40.3212g ➢ Cao phân đoạn 2:32.6132g ➢ Cao phân đoạn 3:44.2651g ➢ Cao phân đoạn 4:14.2973g ➢ Cao phân đoạn 5:35.1536g ➢ Cao phân đoạn 6:46.6593g Tổng khối lượng cao phân đoạn thu 213,3097g.Cho hiệu suất trích ly 88,88% 3.3 Kết khảo sát khả kháng oxi hóa sáu phân đoạn cao Từ phân đoạn 1,2,3,4,5,6 tiến hành khảo sát khả kháng oxy hóa kết trình bày bảng: Bảng 2:Kết thí nghiệm kháng oxi hóa phân đoạn cao Mẫu Thí Nghiệm Cao phân đoạn Cao phân đoạn Cao phân đoạn Cao phân đoạn Cao phân đoạn Cao phân đoạn 12.5 Nồng độ (µg/ml) 25 50 75 100 IC50 (µg/ml) 20.05 21.29 30.21 40.51 54.12 95.03±0.033 41.67 98.88 170.2 203.21 322.65 14.64±0.034 47.84 52.56 110.1 134.63 171.23 16.23±0.05 52.98 63.82 78.46 82.79 99.32 10.65±0.015 36.97 55.37 64.82 79.15 95.60 21.04±0.03 47.89 77.22 106.96 113.50 166.03 17.01±0.02 Trên mẫu thí nghiệm nồng độ khác kết khả kháng oxy hóa khác nhau.Qua kết thể bảng nhận thấy nồng độ cao chiết từ bột Bí Kì Nam tăng lên khả kháng oxy hóa tăng Khi nồng độ mẫu thí nghiệm tăng từ 12.5 (µg/ml) đến 100 (µg/ml) khả kháng oxy hóa cao phân đoạn tăng lên từ 20.05 % đến 54,12 %, cao phân đoạn tăng lên từ 41.67% đến 322.65 %, cao phân đoạn tăng từ 47.87 % đến 171.23 %, cao phân đoạn tăng từ 52.98 % đến 99.32 %, cao phân đoạn tăng từ 36.97 % đến 95.60 %, cao phân đoạn tăng từ 47.89 % 10 đến 166.03 % Từ bảng suy tăng nồng độ mẫu khả kháng oxy hóa tăng.Do nồng độ cao chiết tăng lên lượng hợp chất có hoạt tính sinh học dung dịch tăng lên, khả ức chế gốc tự DPPH⚫ hợp chất có chứa nhiều gốc –OH trung hịa gốc tự dung dịch phản ứng làm thay đổi màu dung dịch phản ứng từ màu tím DPPH⚫ sang màu vàng nhạt nhanh so với hàm lượng hợp chất có nhóm – OH nên khả kháng oxy hóa tăng lên 3.4 Thảo Luận Khi so sánh giá trị IC50 khả kháng oxy hóa cao chiết Bí Kì Nam giá trị IC50 mẫu cao phân đoạn thấp thấp so với cao phân đoạn lại nên cao phân đoạn có khả kháng oxi hóa cao từ ta kết luận cao phân đoạn có hợp chất có khả kháng oxy hóa.Từ điều có sở để thực nghiên cứu cao khả kháng oxi hóa phân đoạn cao PHẦN IV: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 4.1 Kết luận Qua trình thực đề tài, dựa kết thu được: ― Sự ảnh hưởng q trình trích ly đến chất lượng chế phẩm cao chiết ― Thu nhận sáu phân đoạn cao ― Khả kháng oxi hóa sáu phân đoạn cao 4.2 Đề nghị Một số đề nghị nhằm hoàn thiện cơng trình nghiên cứu: ― Nghiên cứu thành phần hóa học cao chiết cịn lại Bí KìNam ― Thử hoạt tính kháng viêm và gây độc tế bào hợp chất phânlập 11 TÀI LIỆU THAM KHẢO • Tiếng Việt [1] Ho P H (2003) Cây cỏ Việt nam, Vol 2: Nhà xuất trẻ, Hà nội, 211 [2] Phụng, N K P (2007) Phương pháp cô lập hợp chất hữu Nhà xuất Đạihọc Quốc gia TP Hồ Chí Minh, 35-48 [3] Lê Trung Hiếu, Trương Thị Như Tâm, Nguyễn Thị Ánh Huyền, Lê Thùy Trang (2004), Bước đầu nghiên cứu đánh giá khả kháng oxy hóa số đối tượng làm nguồn dược liệu, Tạp chí khoa học công nghệ, Trường Đại học Khoa học Huế • Tiếng Anh [4] Abdullah N S., Ahmad W Y W and Sabri N A (2017) New compounds from Hydnophytum formicarum young tubers, Malaysian Journal of analytical sciences, 21(4), 778-783 [5] Nugraha A S., Wangchuk T., Willis A C., Haritakun R., Sujadmiko H and Keller P A (2019) Phytochemical and pharmacological studies on four Indonesian epiphytic medicinal plants: Drynaria rigidula, hydnophytum formicarum, usnea misaminensis, and calymperes schmidtii, Natural Product Communications,14(6),16 [6] Prachayasittikul S., Buraparuangsang P., Worachartcheewan A., Isarankura-NaAyudhya C., Ruchirawat S and Prachayasittikul V (2008) Antimicrobial and antioxidative activities of bioactive constituents from Hydnophytum formicarum Jack., Molecules, 13(4), 904-921 [7] Noro T., Oda Y., Miyase T., Ueno A and Fukushima S (1983) Inhibitors of xanthine oxidase from the flowers and buds of Daphne genkwa, Chemical and Pharmaceutical Bulletin, 3(11), 3984-3987 [8] Prachayasittikul, Supaluk, Prasit Buraparuangsang, Apilak Worachartcheewan, Chartchalerm Isarankura-Na-Ayudhya, Somsak Ruchirawat, and Virapong Prachayasittikul 2008 "Antimicrobial and Antioxidative Activities of Bioactive Constituents from Hydnophytum formicarum Jack." Molecules 13, no 4: 904-921 [9] Prachayasittikul S, Buraparuangsang P, Worachartcheewan A, Isarankura-NaAyudhya C, Ruchirawat S, Prachayasittikul V Antimicrobial and Antioxidative Activities of Bioactive Constituents from Hydnophytum formicarum Jack Molecules 2008; 13(4):904-921 12 [10] Ahmed T, Gilani AU, Abdollahi M, Daglia M, Nabavi SF, Nabavi SM Berberine and neurodegeneration: A review of literature Pharmacol Rep 2015; 67(5): 970-979 [11] Senawong T, Misuna S, Khaopha S, Nuchadomrong S, Sawatsitang P, Phaosiri C, et al Histone deacetylase (HDAC) inhibitory and antiproliferative activities of phenolicrich extracts derived from the rhizome of Hydnophytum formicarum Jack.: Sinapinic acid acts as HDAC inhibitor BMC Complement Altern Med 2013; 13(1): 232 [12] Prachayasittikul S, Pingaew R, Yamkamon V, Worachartcheewan A, Wanwimolruk S Chemical constituents and antioxidant activity of Hydnophytum formicarum Jack Int J Pharm 2012; 8(5): 440-444 [13] Tamatani M, Che YH, Matsuzaki H, Ogawa S, Okado H, Miyake S, et al Tumor necrosis factor induces Bcl-2 and Bcl-x expression through NFkappaB activation in primary hippocampal neurons J Biol Chem 1999; 274(13): 8531-8538 [14] Cheng Y, Takeuchi H, Sonobe Y, Jin S, Wang Y, Horiuchi H, et al Sirtuin attenuates oxidative stress via upregulation of superoxide dismutase and catalase in astrocytes J Neuroimmunol 2014; 269(1-2): 38-43 [15] Lopez-Perez E, Zhang Y, Frank SJ, Creemers J, Seidah N, Checler F Constitutive alpha-secretase cleavage of the beta-amyloid precursor protein in the furin-deficient LoVo cell line: involvement of the prohormone convertase and the disintegrin metalloprotease ADAM10 J Neurochem 2001; 76(5): 1532-1539 [16] Colciaghi F, Borroni B, Pastorino L, Marcello E, Zimmermann M, Cattabeni F, et al [alpha]-Secretase ADAM10 as well as [alpha]APPs is reduced in platelets and CSF of Alzheimer disease patients Mol Med 2002; 8(2): 67-74 13 ... Nguyên Từ sở trên, đề tài : ? ?Khảo sát khả kháng oxi hóa từ cao chiết Bí Kì Nam (Hydnophytum formicarum Jack) ” đề xuất nhằm xác định khả kháng oxi hóa từ cao chiết Bí Kì Nam (Hydnophytum formicarum. .. 2.3.3 Khảo sát khả kháng oxy hóa PHẦN III: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Kết khảo sát quy trình trích ly tạo cao chiết từ Bí Kì Nam 3.2 Kết 3.3 Kết khảo sát khả. .. 88,88% 3.3 Kết khảo sát khả kháng oxi hóa sáu phân đoạn cao Từ phân đoạn 1,2,3,4,5,6 tiến hành khảo sát khả kháng oxy hóa kết trình bày bảng: Bảng 2:Kết thí nghiệm kháng oxi hóa phân đoạn cao Mẫu Thí