Luận án nghiên cứu biểu hiện microrna 21, microrna 122 huyết tương ở bệnh nhân ung thư biểu mô tế bào gan nhiễm vi rút viêm gan b

MỤC LỤC Trang TRANG PHỤ BÌA LỜI CAM ĐOAN LỜI CẢM ƠN MỤC LỤC DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC BẢNG DANH MỤC BIỂU ĐỒ DANH MỤC HÌNH ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 MỘT SỐ ĐIỂM VỀ DỊCH TỄ UNG THƯ BIỂU MÔ TẾ BÀO GAN 1.1.1 Trên giới 1.1.2 Tình hình dịch tễ ung thư biểu mô tế bào gan Việt Nam 1.2 CÁC YẾU TỐ NGUY CƠ CỦA UNG THƯ BIỂU MÔ TẾ BÀO GAN 1.2.1 Vi rút viêm gan B 1.2.2 Các yếu tố nguy khác 1.3 CƠ CHẾ BỆNH SINH VÀ VAI TRÒ CỦA VI RÚT VIÊM GAN B TRONG UNG THƯ BIỂU MÔ TẾ BÀO GAN 1.3.1 Cơ chế bệnh sinh 1.3.2 Vai trò vi rút viêm gan B ung thư biểu mô tế bào gan 10 1.4 CÁC PHƯƠNG PHÁP CHẨN ĐOÁN UNG THƯ BIỂU MÔ TẾ BÀO GAN 14 1.4.1 Các phương pháp chẩn đốn hình ảnh 14 1.4.2 Phương pháp chẩn đoán tế bào học và mô bệnh học 16 1.4.3 Một số dấu ấn sinh học chẩn đốn ung thư biểu mơ tế bào gan .18 1.4.4 Một sớ hướng dẫn chẩn đốn ung thư biểu mô tế bào gan 23 1.5 MICRORNA 24 1.5.1 Nguồn gốc sinh học chế hoạt động microRNA 25 1.5.2 Đặc tính microRNA 28 1.5.3 Các phương pháp phát và định lượng microRNA 29 1.5.4 MicroRNA và ung thư 32 1.5.5 MicroRNA-21 33 1.5.6 MicroRNA-122 34 1.5.7 Các yếu tố ảnh hưởng đến biểu microRNA-21, microRNA-122 35 1.6 MỘT SỐ NGHIÊN CỨU VỀ MICRORNA-21, MICRORNA-122 ĐỐI VỚI UNG THƯ BIỂU MÔ TẾ BÀO GAN 36 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 38 2.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 38 2.1.1 Tiêu chuẩn lựa chọn .38 2.1.2 Tiêu chuẩn loại trừ 39 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 39 2.2.1 Thiết kế nghiên cứu .39 2.2.2 Cỡ mẫu nghiên cứu 39 2.2.3 Phương tiện nghiên cứu .39 2.2.4 Phương pháp tiến hành 41 2.2.5 Các tiêu nghiên cứu 50 2.2.6 Phân tích xử lý sớ liệu .54 2.2.7 Khống chế sai số 55 2.3 ĐẠO ĐỨC NGHIÊN CỨU 56 2.4 SƠ ĐỒ NGHIÊN CỨU 57 CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 58 3.1 ĐẶC ĐIỂM NHÓM NGHIÊN CỨU 58 3.1.1 Đặc điểm lâm sàng và xét nghiệm đối tượng nghiên cứu .58 3.1.2 Đặc điểm khối u gan 64 3.2 BIỂU HIỆN MIR-21, MIR-122 Ở CÁC ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 67 3.2.1 Biểu miR-21, miR-122 bệnh nhân ung thư biểu mô tế bào gan, viêm gan B mạn và người khỏe mạnh 67 3.2.2 Biểu miR-21, miR-122 bệnh nhân ung thư biểu mơ tế bào gan có AFP ≤ 20ng/ml 80 3.2.3 Biểu miR-21, miR-122 bệnh nhân ung thư biểu mô tế bào gan giai đoạn sớm 86 3.3 LIÊN QUAN GIỮA MIR-21, MIR-122 VỚI MỘT SỐ CHỈ SỐ LÂM SÀNG, CẬN LÂM SÀNG VÀ GIAI ĐOẠN BỆNH Ở BỆNH NHÂN UNG THƯ BIỂU MÔ TẾ BÀO GAN 90 3.3.1 Liên quan miR-21 miR-122 với tuổi, giới 90 3.3.2 Liên quan miR-21 miR-122 với số triệu chứng lâm sàng 91 3.3.3 Liên quan miR-21, miR-122 với số số xét nghiệm .92 3.3.4 Mối liên quan miR-21, miR-122 với số đặc điểm khối u và giai đoạn bệnh bệnh nhân ung thư biểu mô tế bào gan 95 CHƯƠNG BÀN LUẬN 103 4.1 ĐẶC ĐIỂM NHÓM NGHIÊN CỨU 103 4.1.1 Đặc điểm tuổi, giới .103 4.1.2 Đặc điểm lâm sàng .105 4.1.3 Đặc điểm xét nghiệm 106 4.1.4 Đặc điểm khối u gan 110 4.2 BIỂU HIỆN MIR-21, MIR-122 HUYẾT TƯƠNG BỆNH NHÂN UNG THƯ BIỂU MÔ TẾ BÀO GAN 115 4.2.1 Biểu miR-21, miR-122 huyết tương bệnh nhân ung thư biểu mô tế bào gan 115 4.2.2 Giá trị miR-21, miR-122 huyết tương chẩn đốn ung thư biểu mơ tế bào gan .118 4.3 LIÊN QUAN GIỮA MIR-21, MIR-122 VỚI MỘT SỐ CHỈ SỐ LÂM SÀNG, CẬN LÂM SÀNG VÀ GIAI ĐOẠN BỆNH Ở BỆNH NHÂN UNG THƯ BIỂU MÔ TẾ BÀO GAN 125 4.3.1 Liên quan miR-21, miR-122 với tuổi, giới bệnh nhân ung thư biểu mô tế bào gan .125 4.3.2 Liên quan miR-21, miR-122 với số triệu chứng lâm sàng bệnh nhân ung thư biểu mô tế bào gan .127 4.3.3 Liên quan miR-21, miR-122 với số số xét nghiệm bệnh nhân ung thư biểu mô tế bào gan 127 4.3.4 Liên quan miR-21, miR-122 với số đặc điểm khối u và giai đoạn bệnh bệnh nhân ung thư biểu mô tế bào gan .130 4.4 HẠN CHẾ CỦA ĐỀ TÀI 135 KẾT LUẬN 136 KIẾN NGHỊ 137 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH CƠNG BỐ KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU CỦA ĐỀ TÀI LUẬN ÁN TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT STT Phần viết tắt AASLD Phần viết đầy đủ American Association for the Study of Liver Diseases (Hội nghiên cứu bệnh gan Hoa Kỳ) AFB1 Aflatoxin B1 AFP Alpha fetoprotein AFP-L3 Alpha fetoprotein-L3 ALT Alanin amino transferase APASL Asian Pacific Association for the Study of the liver (Hội nghiên cứu gan Châu Á Thái Bình Dương) AST Aspartate amino transferase AUC Area under the curve (Diện tích đường cong) BCLC Barcelona clinic liver cancer (Viện ung thư lâm sàng gan Barcelona) 10 BN Bệnh nhân 11 BV TƯQĐ 108 Bệnh viện Trung ương Quân đội 108 12 CHT Cộng hưởng từ 13 CLVT Cắt lớp vi tính 14 CI Confidence interval (khoảng tin cậy) 15 Ct Cycle threshold (Chu kỳ ngưỡng) 16 DCP Des - γ - carboxyprothrombin 17 DNA Deoxyribonucleic acid 18 ĐTNC Đối tượng nghiên cứu 19 EASL European Association for the Study of the Liver (Hội nghiên cứu Gan Châu Âu) 20 ELISA Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay STT Phần viết tắt Phần viết đầy đủ 21 HBV Hepatitis B virus (Vi rút viêm gan B) 22 HBeAg Hepatitis B e Antigen (Kháng nguyên e vi rút viêm gan B 23 HBsAg Hepatitis B surface antigen (Kháng nguyên bề mặt vi rút viêm gan B) 24 HCV Hepatitis C virus (Vi rút viêm gan C) 25 HIV Human Immunodeficiency Virus 26 IgM Immunoglobulin M 27 mRNA Messenger RNA (RNA thông tin) 28 miRNA MicroRNA 29 miR-21 MicroRNA-21 30 miR-122 MicroRNA-122 31 NKM Người khỏe mạnh 32 NSAIDs Nonsteroidal anti-inflammatory drugs (Thuốc chống viêm không steroid) 33 PET/CT Positron emission tomography/Computed Tomography 34 RNA Ribonucleic acid 35 RT-PCR Reverse transcription polymerase chain reaction 36 TMC Tĩnh mạch cửa 37 TNF Tumor necrosis factor (Yếu tố hoại tử u) 38 UTTBG Ung thư biểu mô tế bào gan 39 VGBM Viêm gan B mạn DANH MỤC BẢNG Bảng Tên bảng Trang 2.1 Thành phần phản ứng tổng hợp cDNA 47 2.2 Các mồi sử dụng để tổng hợp và định lượng miRNA 48 2.3 Thành phần phản ứng Realtime PCR .50 2.4 Mức độ viêm gan mạn .52 2.5 Phân chia giai đoạn bệnh theo BCLC 53 2.6 Đánh giá chức gan theo Child - Pugh 53 3.1 Đặc điểm tuổi, giới 58 3.2 Một số triệu chứng thực thể bệnh nhân ung thư biểu mô tế bào gan 60 3.3 Xét nghiệm huyết học nhóm ung thư biểu mơ tế bào gan và viêm gan B mạn .61 3.4 Xét nghiệm sinh hóa, miễn dịch nhóm ung thư biểu mô tế bào gan và viêm gan B mạn 61 3.5 Liên quan AFP huyết với đặc điểm khối u gan và giai đoạn bệnh theo phân loại BCLC .62 3.6 Phân loại mức độ viêm nhóm viêm gan B mạn theo điểm Knodell HAI 63 3.7 Phân loại Child - Pugh nhóm bệnh nhân ung thư biểu mô tế bào gan 63 3.8 Số lượng khối u gan 64 3.9 Kích thước khới u gan 64 3.10 Huyết khối tĩnh mạch cửa 65 3.11 Độ biệt hóa tế bào khới u gan 65 3.12 Phân loại giai đoạn bệnh ung thư biểu mô tế bào gan theo BCLC 66 Bảng Tên bảng Trang 3.13 Biểu miR-21 huyết tương bệnh nhân ung thư biểu mô tế bào gan, viêm gan B mạn và người khỏe mạnh 67 3.14 Biểu miR-122 huyết tương bệnh nhân ung thư biểu mô tế bào gan, viêm gan B mạn và người khỏe mạnh 67 3.15 Độ nhạy, độ đặc hiệu miR-21, miR-122 chẩn đốn ung thư biểu mơ tế bào gan và viêm gan B mạn .71 3.16 Diện tích đường cong phới hợp miR-21, miR-122 chẩn đốn ung thư biểu mô tế bào gan và viêm gan B mạn 72 3.17 So sánh diện tích đường cong AFP, miR-21, miR-122 chẩn đoán ung thư biểu mô tế bào gan và viêm gan B mạn 73 3.18 Diện tích đường cong phới hợp miR-21 với AFP chẩn đoán ung thư biểu mô tế bào gan và viêm gan B mạn 74 3.19 Diện tích đường cong phới hợp miR-122 với AFP chẩn đoán ung thư biểu mô tế bào gan và viêm gan B mạn 75 3.20 Diện tích đường cong phới hợp miR-21, miR-122 với AFP chẩn đoán ung thư biểu mô tế bào gan và viêm gan B mạn .76 3.21 Độ nhạy, độ đặc hiệu miR-21, miR-122 chẩn đốn ung thư biểu mơ tế bào gan và người khỏe mạnh 78 3.22 Diện tích đường cong miR-21 phới hợp với miR-122 chẩn đốn ung thư biểu mơ tế bào gan và người khỏe mạnh .79 3.23 Độ nhạy, độ đặc hiệu miR-21, miR-122 chẩn đốn ung thư biểu mơ tế bào gan có AFP ≤ 20ng/ml và viêm gan B mạn 81 3.24 Diện tích đường cong phới hợp miR-21, miR-122 chẩn đốn ung thư biểu mơ tế bào gan có AFP ≤ 20ng/ml và viêm gan B mạn .82 Bảng 3.25 Tên bảng Trang Độ nhạy, độ đặc hiệu miR-21, miR-122 chẩn đốn ung thư biểu mơ tế bào gan có AFP ≤ 20ng/ml và người khỏe mạnh 84 3.26 Diện tích đường cong phới hợp miR-21, miR-122 chẩn đốn ung thư biểu mơ tế bào gan có AFP ≤ 20ng/ml và người khỏe mạnh 85 3.27 Diện tích đường cong AFP, miR-21, miR-122 chẩn đốn ung thư biểu mơ tế bào gan giai đoạn sớm (BCLC: A) và viêm gan B mạn 87 3.28 Diện tích đường cong miR-21, miR-122 chẩn đốn ung thư biểu mơ tế bào gan giai đoạn sớm (BCLC: A) và người khỏe mạnh .89 3.29 Tương quan miR-21, miR-122 với tuổi 90 3.30 Liên quan miR-21, miR-122 với giới .90 3.31 Liên quan miR-21 với số triệu chứng lâm sàng bệnh nhân ung thư biểu mô tế bào gan .91 3.32 Liên quan miR-122 với số triệu chứng lâm sàng bệnh nhân ung thư biểu mô tế bào gan 91 3.33 Tương quan miR-21 với số số xét nghiệm bệnh nhân ung thư biểu mô tế bào gan .92 3.34 Tương quan miR-122 với số số xét nghiệm bệnh nhân ung thư biểu mô tế bào gan .93 3.35 Liên quan miR-21 với chức gan theo phân loại ChildPugh, đặc điểm khối u gan và giai đoạn bệnh theo BCLC 98 3.36 Liên quan miR-122 với chức gan theo phân loại ChildPugh, đặc điểm khối u gan và giai đoạn bệnh theo BCLC 102 DANH MỤC BIỂU ĐỒ Biểu đồ Tên biểu đồ Trang 3.1 Phân bớ tuổi nhóm bệnh nhân ung thư biểu mô tế bào gan 59 3.2 Một số triệu chứng bệnh nhân ung thư biểu mô tế bào gan 59 3.3 AFP huyết nhóm ung thư biểu mơ tế bào gan 62 3.4.a Biểu miR-21 bệnh nhân ung thư biểu mô tế bào gan và viêm gan B mạn 70 3.4.b Biểu miR-122 bệnh nhân ung thư biểu mô tế bào gan và viêm gan B mạn 70 3.5 Đường cong ROC miR-21, miR-122 nhóm bệnh nhân ung thư biểu mơ tế bào gan và viêm gan B mạn 71 3.6 Đường cong ROC phối hợp miR-21, miR-122 nhóm bệnh nhân ung thư biểu mơ tế bào gan và viêm gan B mạn 72 3.7 Đường cong ROC AFP, miR-21, miR-122 nhóm bệnh nhân ung thư biểu mơ tế bào gan và viêm gan B mạn 73 3.8 Đường cong ROC phối hợp miR-21 với AFP nhóm bệnh nhân ung thư biểu mơ tế bào gan và viêm gan B mạn 74 3.9 Đường cong ROC phối hợp miR-122 với AFP nhóm bệnh nhân ung thư biểu mơ tế bào gan và viêm gan B mạn 75 3.10 Đường cong ROC phối hợp miR-21, miR-122, AFP nhóm bệnh nhân ung thư biểu mơ tế bào gan và viêm gan B mạn 76 3.11.a Biểu miR-21 bệnh nhân ung thư biểu mô tế bào gan và người khỏe mạnh 77 3.11.b Biểu miR-122 bệnh nhân ung thư biểu mô tế bào gan và người khỏe mạnh 77 Lin X.J., Chong Y., Guo Z.W., et al (2015) A serum microRNA classifier for early detection of hepatocellular carcinoma: a multicentre, retrospective, longitudinal biomarker identification study with a nested case-control study Lancet Oncol, 16(7): 804-15 10 Toiyama Y., Takahashi M., Hur K., et al (2013) Serum miR-21 as a diagnostic and prognostic biomarker in colorectal cancer J Natl Cancer Inst, 105(12): 849-59 11 Tomimaru Y., Eguchi H., Nagano H., et al (2012) Circulating microRNA-21 as a novel biomarker for hepatocellular carcinoma J Hepatol, 56(1): 167-75 12 Li G., Shen Q., Li C., et al (2015) Identification of circulating MicroRNAs as novel potential biomarkers for hepatocellular carcinoma detection: a systematic review and meta-analysis Clin Transl Oncol: 1-10 13 Tan Y., Ge G., Pan T., et al (2014) A serum microRNA panel as potential biomarkers for hepatocellular carcinoma related with hepatitis B virus PLoS One, 9(9): e107986 14 European Association for the Study of the Liver (2018) EASL Clinical Practice Guidelines: Management of hepatocellular carcinoma Journal of Hepatology 69: 182–236 15 Mai Hồng Bàng (2016) Dịch tễ học, nguyên nhân và yếu tố nguy ung thư biểu mô tế bào gan Ung thư biểu mô tế bào gan, phương pháp điều trị can thiệp qua da, Nhà xuất Y học, 17-76 16 El-Serag H.B (2012) Epidemiology of viral hepatitis and hepatocellular carcinoma Gastroenterology, 142(6): 1264-1273 17 Dhanasekaran R., Bandoh S., Roberts L.R (2016) Molecular pathogenesis of hepatocellular carcinoma and impact of therapeutic advances F1000 Faculty Rev, 5: 1-15 18 Fu X., Song X., Li Y., et al (2016) Hepatitis B virus X protein upregulates DNA methyltransferase 3A/3B and enhances SOCS-1CpG island methylation Mol Med Rep, 13(1): 301-8 19 Ghosh A., Ghosh S., Dasgupta D., et al (2016) Hepatitis B Virus X Protein Upregulates hELG1/ ATAD5 Expression through E2F1 in Hepatocellular Carcinoma Int J Biol Sci, 12(1): 30-41 20 Park I.Y., Sohn B.H., Yu E., et al (2007) Aberrant epigenetic modifications in hepatocarcinogenesis induced by hepatitis B virus X protein Gastroenterology, 132(4): 1476-94 21 Cai M.Y., Hou J.H., Rao H.L., et al (2011) High expression of H3K27me3 in human hepatocellular carcinomas correlates closely with vascular invasion and predicts worse prognosis in patients Mol Med, 17(1-2): 12-20 22 Hayashi A., Yamauchi N., Shibahara J., et al (2014) Concurrent activation of acetylation and tri-methylation of H3K27 in a subset of hepatocellular carcinoma with aggressive behavior PLoS One, 9(3): e91330 23 Cougot D., Wu Y., Cairo S., et al (2007) The hepatitis B virus X protein functionally interacts with CREB-binding protein/p300 in the regulation of CREB-mediated transcription J Biol Chem, 282(7): 4277-87 24 Bộ Y tế (2012) Hướng dẫn chẩn đoán điều trị ung thư tế bào gan nguyên phát, Ban hành kèm theo Quyết định số: 5250/QĐ-BYT ngày 28 tháng 12 năm 2012 Bộ trưởng Bộ Y tế 25 Omata M., Cheng A.L., Kokudo N., et al (2017) Asia-Pacific clinical practice guidelines on the management of hepatocellular carcinoma: a 2017 update Hepatol Int, 11(4): 317-370 26 Mai Hồng Bàng (2016) Chẩn đoán và chẩn đoán giai đoạn ung thư biểu mô tế bào gan Ung thư biểu mô tế bào gan, phương pháp điều trị can thiệp qua da, Nhà xuất Y học, 77-168 27 Kokudo N., Hasegawa K., Akahane M., et al (2015) Evidence-based Clinical Practice Guidelines for Hepatocellular Carcinoma: The Japan Society of Hepatology 2013 update (3rd JSH-HCC Guidelines) Hepatol Res, 45(2): 123-127 28 Bruix J., Sherman M., American Association for the Study of Liver D (2011) Management of hepatocellular carcinoma: an update Hepatology, 53(3): 1020-2 29 Donati M., Brancato G., Donati A (2010) Clinical biomarkers in hepatocellular carcinoma (HCC) Front Biosci (Schol Ed), 2: 571-7 30 Gupta S., Bent S., Kohlwes J (2003) Test characteristics of alphafetoprotein for detecting hepatocellular carcinoma in patients with hepatitis C A systematic review and critical analysis Ann Intern Med, 139(1): 46-50 31 Marrero J.A., Feng Z., Wang Y., et al (2009) Alpha-fetoprotein, desgamma carboxyprothrombin, and lectin-bound alpha-fetoprotein in early hepatocellular carcinoma Gastroenterology, 137(1): 110-8 32 Yu S.J (2016) A concise review of updated guidelines regarding the management of hepatocellular carcinoma around the world: 2010-2016 Clin Mol Hepatol, 22(1): 7-17 33 Vũ Văn Khiên (2000) Giá trị chẩn đoán theo dõi tiên lượng ung thư biểu mô tế bào gan Alpha-fetoprotein (AFP) AFP có lực với Lectin, Luận án Tiến sĩ Y Học, Học Viện Quân Y 34 Nikulina D., Terentyev A., Galimzyanov K., et al (2015) Fifty years of discovery of alpha-fetoprotein as the first tumor marker Srp Arh Celok Lek, 143(1-2): 100-4 35 Khien V.V., Mao H.V., Chinh T.T., et al (2001) Clinical evaluation of lentil lectin-reactive alpha-fetoprotein-L3 in histology-proven hepatocellular carcinoma Int J Biol Markers, 16(2): 105-11 36 Sterling R.K., Jeffers L., Gordon F., et al (2009) Utility of Lens culinaris agglutinin-reactive fraction of alpha-fetoprotein and des-gamma-carboxy prothrombin, alone or in combination, as biomarkers for hepatocellular carcinoma Clin Gastroenterol Hepatol, 7(1): 104-13 37 European Association for the Study of the Liver, European Organisation for Research and Treatment of Cancer (2012) EASL–EORTC Clinical Practice Guidelines: Management of hepatocellular carcinoma Journal of Hepatology 56j: 908–943 38 Hayes C.N., Chayama K (2016) MicroRNAs as Biomarkers for Liver Disease and Hepatocellular Carcinoma Int J Mol Sci, 17(3): 1-17 39 Zhao Y.J., Ju Q., Li G.C (2013) Tumor markers for hepatocellular carcinoma Mol Clin Oncol, 1(4): 593-598 40 Lee R.C., Feinbaum R.L., Ambros V (1993) The C elegans heterochronic gene lin-4 encodes small RNAs with antisense complementarity to lin-14 Cell, 75(5): 843-54 41 Reinhart B.J., Slack F.J., Basson M., et al (2000) The 21-nucleotide let7 RNA regulates developmental timing in Caenorhabditis elegans Nature, 403(6772): 901-6 42 Kozomara A., Griffiths-Jones S (2013) miRBase: annotating high confidence microRNAs using deep sequencing data Nucl Acids Res, (42): 68-73 43 Lai E.C (2015) Two decades of miRNA biology: lessons and challenges RNA, 21(4): 675-7 44 Lee I., Ajay S.S., Yook J.I., et al (2009) New class of microRNA targets containing simultaneous 5'-UTR and 3'-UTR interaction sites Genome Res, 19(7): 1175-83 45 Wang H., Hou L., Li A., et al (2014) Expression of serum exosomal microRNA-21 in human hepatocellular carcinoma Biomed Res Int, 2014: 1-5 46 Rissin D.M., Lopez-Longarela B., Pernagallo S., et al (2017) Polymerase-free measurement of microRNA-122 with single base specificity using single molecule arrays: Detection of drug-induced liver injury PLoS One, 12(7): e0179669 47 Thirion M., Ochiya T (2013) Roles of microRNAs in the hepatitis B virus infection and related diseases Viruses, 5(11): 2690-703 48 Mahmoudian-Sani M.R., Asgharzade S., Alghasi A., et al (2019) MicroRNA-122 in patients with hepatitis B and hepatitis B virus-associated hepatocellular carcinoma J Gastrointest Oncol, 10(4): 789-796 49 Zhang G., Wang Q., Xu R (2010) Therapeutics Based on microRNA: A New Approach for Liver Cancer Curr Genomics, 11(5): 311-25 50 Hayes C.N., Akamatsu S., Tsuge M., et al (2012) Hepatitis B virusspecific miRNAs and Argonaute2 play a role in the viral life cycle PLoS One, 7(10): e47490 51 Shwetha S., Gouthamchandra K., Chandra M., et al (2013) Circulating miRNA profile in HCV infected serum: novel insight into pathogenesis Sci Rep, 3: 1-7 52 Novellino L., Rossi R.L., Bonino F., et al (2012) Circulating hepatitis B surface antigen particles carry hepatocellular microRNAs PLoS One, 7(3): e31952 53 Liu A.M., Yao T.J., Wang W., et al (2012) Circulating miR-15b and miR-130b in serum as potential markers for detecting hepatocellular carcinoma: a retrospective cohort study BMJ Open, 2(2): e000825 54 Cortez M.A., Bueso-Ramos C., Ferdin J., et al (2011) MicroRNAs in body fluids the mix of hormones and biomarkers Nat Rev Clin Oncol, 8(8): 467-77 55 Lawrie C.H., Gal S., Dunlop H.M., et al (2008) Detection of elevated levels of tumour-associated microRNAs in serum of patients with diffuse large B-cell lymphoma Br J Haematol, 141(5): 672-5 56 Varkonyi-Gasic E., Wu R., Wood M., et al (2007) Protocol: a highly sensitive RT-PCR method for detection and quantification of microRNAs Plant Methods, 3: 12 57 Bustin S.A., Benes V., Garson J.A., et al (2009) The MIQE guidelines: minimum information for publication of quantitative real-time PCR experiments Clin Chem, 55(4): 611-22 58 Peltier H.J., Latham G.J (2008) Normalization of microRNA expression levels in quantitative RT-PCR assays: identification of suitable reference RNA targets in normal and cancerous human solid tissues RNA, 14(5): 844-52 59 Xu X., Tao Y., Shan L., et al (2018) The Role of MicroRNAs in Hepatocellular Carcinoma J Cancer, 9(19): 3557-3569 60 Zhou L., Yang Z.X., Song W.J., et al (2013) MicroRNA-21 regulates the migration and invasion of a stem-like population in hepatocellular carcinoma Int J Oncol, 43(2): 661-9 61 Karakatsanis A., Papaconstantinou I., Gazouli M., et al (2013) Expression of microRNAs, miR-21, miR-31, miR-122, miR-145, miR146a, miR-200c, miR-221, miR-222, and miR-223 in patients with hepatocellular carcinoma or intrahepatic cholangiocarcinoma and its prognostic significance Mol Carcinog, 52(4): 297-303 62 Lee Y., Ahn C., Han J., et al (2003) The nuclear RNase III Drosha initiates microRNA processing Nature, 425(6956): 415-9 63 Zeng Y., Yi R., Cullen B.R (2005) Recognition and cleavage of primary microRNA precursors by the nuclear processing enzyme Drosha EMBO J, 24(1): 138-48 64 Bao L., Yan Y., Xu C., et al (2013) MicroRNA-21 suppresses PTEN and hSulf-1 expression and promotes hepatocellular carcinoma progression through AKT/ERK pathways Cancer Lett, 337(2): 226-36 65 Zhu Q., Wang Z., Hu Y., et al (2012) miR-21 promotes migration and invasion by the miR-21-PDCD4-AP-1 feedback loop in human hepatocellular carcinoma Oncol Rep, 27(5): 1660-8 66 Yoon J.S., Kim G., Lee Y.R., et al (2018) Clinical significance of microRNA-21 expression in disease progression of patients with hepatocellular carcinoma Biomark Med, 12(10): 1105-1114 67 Xu G., Zhang Y., Wei J., et al (2013) MicroRNA-21 promotes hepatocellular carcinoma HepG2 cell proliferation through repression of mitogen-activated protein kinase-kinase BMC Cancer, 13: 1-9 68 Suehiro T., Miyaaki H., Kanda Y., et al (2018) Serum exosomal microRNA-122 and microRNA-21 as predictive biomarkers in transarterial chemoembolization-treated hepatocellular carcinoma patients Oncol Lett, 16(3): 3267-3273 69 Tomimaru Y., Eguchi H., Nagano H., et al (2010) MicroRNA-21 induces resistance to the anti-tumour effect of interferon-alpha/5-fluorouracil in hepatocellular carcinoma cells Br J Cancer, 103(10): 1617-26 70 Lagos-Quintana M., Rauhut R., Yalcin A., et al (2002) Identification of tissue-specific microRNAs from mouse Curr Biol, 12(9): 735-9 71 Wienholds E., Kloosterman W.P., Miska E., et al (2005) MicroRNA expression in zebrafish embryonic development Science, 309(5732): 310-1 72 Fan C.G., Wang C.M., Tian C., et al (2011) miR-122 inhibits viral replication and cell proliferation in hepatitis B virus-related hepatocellular carcinoma and targets NDRG3 Oncol Rep, 26(5): 1281-6 73 Bai S., Nasser M.W., Wang B., et al (2009) MicroRNA-122 inhibits tumorigenic properties of hepatocellular carcinoma cells and sensitizes these cells to sorafenib J Biol Chem, 284(46): 32015-27 74 Fornari F., Gramantieri L., Giovannini C., et al (2009) MiR-122/cyclin G1 interaction modulates p53 activity and affects doxorubicin sensitivity of human hepatocarcinoma cells Cancer Res, 69(14): 5761-7 75 Lucanic M., Graham J., Scott G., et al (2013) Age-related micro-RNA abundance in individual C elegans Aging (Albany NY), 5(6): 394-411 76 Rieger J.K., Klein K., Winter S., et al (2013) Expression variability of absorption, distribution, metabolism, excretion-related microRNAs in human liver: influence of nongenetic factors and association with gene expression Drug Metab Dispos, 41(10): 1752-62 77 Bihrer V., Friedrich-Rust M., Kronenberger B., et al (2011) Serum miR122 as a biomarker of necroinflammation in patients with chronic hepatitis C virus infection Am J Gastroenterol, 106(9): 1663-9 78 Wang X., Zhang J., Zhou L., et al (2015) Significance of serum microRNA21 in diagnosis of hepatocellular carcinoma (HCC): clinical analyses of patients and an HCC rat model Int J Clin Exp Pathol, 8(2): 1466-78 79 Qiao D.D., Yang J., Lei X.F., et al (2017) Expression of microRNA-122 and microRNA-22 in HBV-related liver cancer and the correlation with clinical features Eur Rev Med Pharmacol Sci, 21(4): 742-747 80 Meng F., Henson R., Wehbe-Janek H., et al (2007) MicroRNA-21 regulates expression of the PTEN tumor suppressor gene in human hepatocellular cancer Gastroenterology, 133(2): 647-58 81 Huang J.T., Liu S.M., Ma H., et al (2016) Systematic Review and MetaAnalysis: Circulating miRNAs for Diagnosis of Hepatocellular Carcinoma J Cell Physiol, 231(2): 328-35 82 Zhou J., Yu L., Gao X., et al (2011) Plasma microRNA panel to diagnose hepatitis B virus-related hepatocellular carcinoma J Clin Oncol, 29(36): 4781-8 83 Bharali D., Banerjee B.D., Bharadwaj M., et al (2019) Expression Analysis of MicroRNA-21 and MicroRNA-122 in Hepatocellular Carcinoma J Clin Exp Hepatol, 9(3): 294-301 84 Bộ Y tế (2014) Hướng dẫn chẩn đoán điều trị bệnh viêm gan vi rút B, Ban hành kèm theo Quyết định số: 5448/QĐ-BYT ngày 30 tháng 12 năm 2014 Bộ trưởng Bộ Y tế 85 Bộ Y tế (2017) Siêu âm can thiệp - Sinh thiết nhu mô gan tổn thương u gan súng Promag Hướng dẫn quy trình kỹ thuật nội khoa, chuyên ngành tiêu hóa, Nhà xuất Y học, 265-266 86 Bộ Y tế (2017) Siêu âm can thiệp - Chọc hút tế bào khối U gan, tụy, khối u ổ bụng kim nhỏ Hướng dẫn quy trình kỹ thuật nội khoa, chun ngành tiêu hóa, Nhà xuất Y học, 242-244 87 Lardizabal M.N., Nocito A.L., Daniele S.M., et al (2012) Reference genes for real-time PCR quantification of microRNAs and messenger RNAs in rat models of hepatotoxicity PLoS One, 7(5): e36323 88 Matouskova P., Bartikova H., Bousova I., et al (2014) Reference genes for real-time PCR quantification of messenger RNAs and microRNAs in mouse model of obesity PLoS One, 9(1): e86033 89 Livak K.J., Schmittgen T.D (2001) Analysis of relative gene expression data using real-time quantitative PCR and the 2(-Delta Delta C(T)) Method Methods, 25(4): 402-8 90 Zhu Z (2016) Milan criteria and its expansions in liver transplantation for hepatocellular carcinoma Hepatobiliary Surg Nutr, 5(6): 498-502 91 Okafor O., Ojo S (2004) A comparative analysis of six current histological classification schemes and scoring systems used in chronic hepatitis reporting Rev Esp Patol, 37(3): 269-277 92 Nguyễn Thị Vân Hồng (2015) Các bảng điểm ứng dụng thực hành tiêu hóa, Nhà xuất Y học 93 Nguyễn Tiến Thịnh (2011) Nghiên cứu hiệu điều trị ung thư biểu mô tế bào gan phương pháp tắc mạch hóa dầu đơn tắc mạch hóa dầu kết hợp với đốt nhiệt sóng cao tần, Luận án Tiến sĩ Y học, Viện Nghiên cứu khoa học Y Dược lâm sàng 108 94 Thái Doãn Kỳ (2015) Nghiên cứu kết điều trị ung thư biểu mơ tế bào gan phương pháp tắc mạch hóa chất sử dụng hạt vi cầu DC BEADS, Luận án Tiến sĩ Y học, Viện Nghiên cứu khoa học Y Dược lâm sàng 108 95 El-Serag H.B., Mason A.C (1999) Rising incidence of hepatocellular carcinoma in the United States N Engl J Med, 340(10): 745-50 96 Webb G.J., Wright K.V., Harrod E.C., et al (2015) Surveillance for hepatocellular carcinoma in a mixed-aetiology UK cohort with cirrhosis: does alpha-fetoprotein still have a role? Clin Med (Lond), 15(2): 139-44 97 Tanaka H., Imai Y., Hiramatsu N., et al (2008) Declining incidence of hepatocellular carcinoma in Osaka, Japan, from 1990 to 2003 Ann Intern Med, 148(11): 820-6 98 Lu S.N., Su W.W., Yang S.S., et al (2006) Secular trends and geographic variations of hepatitis B virus and hepatitis C virus-associated hepatocellular carcinoma in Taiwan Int J Cancer, 119(8): 1946-52 99 Trần Hà Hiếu (2012) Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng, độ biệt hóa tế bào u đột biến gene HBx bệnh nhân ung thư biểu mô tế bào gan nhiễm virus viêm gan B, Luận án Tiến sĩ Y học, Viện Nghiên cứu khoa học Y Dược lâm sàng 108 100 Đào Việt Hằng (2016) Đánh giá kết điều trị ung thư biểu mô tế bào gan đốt nhiệt sóng cao tần với loại kim lựa chọn theo kích thước khối u, Luận án Tiến sĩ Y học, Trường Đại học Y Hà Nội 101 Yu M.W., Chen C.J (1993) Elevated serum testosterone levels and risk of hepatocellular carcinoma Cancer Res, 53(4): 790-4 102 Yu M.W., Yang Y.C., Yang S.Y., et al (2001) Hormonal markers and hepatitis B virus-related hepatocellular carcinoma risk: a nested casecontrol study among men J Natl Cancer Inst, 93(21): 1644-51 103 Liu C., Xiao G.Q., Yan L.N., et al (2013) Value of alpha-fetoprotein in association with clinicopathological features of hepatocellular carcinoma World J Gastroenterol, 19(11): 1811-9 104 Abbasi A., Bhutto A.R., Butt N., et al (2012) Corelation of serum alpha fetoprotein and tumor size in hepatocellular carcinoma J Pak Med Assoc, 62(1): 33-6 105 Kim S.S., Nam J.S., Cho H.J., et al (2017) Plasma micoRNA-122 as a predictive marker for treatment response following transarterial chemoembolization in patients with hepatocellular carcinoma J Gastroenterol Hepatol, 32(1): 199-207 106 Guo X., Xiaohui L., Xing L., et al (2017) Circulating miR-21 serves as a serum biomarker for hepatocellular carcinoma and correlated with distant metastasis Oncotarget, 8(27): 44050-8 107 Lê Văn Trường (2006) Nghiên cứu điều trị ung thư biểu mơ tế bào gan kích thước 5cm phương pháp tắc mạch hoá dầu chọn lọc, Luận án Tiến sĩ Y học, Học viện Quân Y 108 Kojiro M (2004) 'Nodule-in-nodule' appearance in hepatocellular carcinoma: its significance as a morphologic marker of dedifferentiation Intervirology, 47(3-5): 179-83 109 Alvite-Canosa M., Pita-Fernandez S., Quintela-Fandino J., et al (2010) Prognostic and developmental factors in patients receiving liver transplant due to hepatocellular carcinoma: one center's experience in the north of Spain Transplant Proc, 42(10): 4578-81 110 Mitchell P.S., Parkin R.K., Kroh E.M., et al (2008) Circulating microRNAs as stable blood-based markers for cancer detection Proc Natl Acad Sci U S A, 105(30): 10513-8 111 Kutay H., Bai S., Datta J., et al (2006) Downregulation of miR-122 in the rodent and human hepatocellular carcinomas J Cell Biochem, 99(3): 671-8 112 Coulouarn C., Factor V.M., Andersen J.B., et al (2009) Loss of miR-122 expression in liver cancer correlates with suppression of the hepatic phenotype and gain of metastatic properties Oncogene, 28(40): 3526-36 113 Qi P., Cheng S.Q., Wang H., et al (2011) Serum microRNAs as biomarkers for hepatocellular carcinoma in Chinese patients with chronic hepatitis B virus infection PLoS One, 6(12): 1-8 114 Xu J., Wu C., Che X., et al (2011) Circulating microRNAs, miR-21, miR122, and miR-223, in patients with hepatocellular carcinoma or chronic hepatitis Mol Carcinog, 50(2): 136-42 115 Koberle V., Kronenberger B., Pleli T., et al (2013) Serum microRNA-1 and microRNA-122 are prognostic markers in patients with hepatocellular carcinoma Eur J Cancer, 49(16): 3442-9 116 Luo J., Chen M., Huang H., et al (2013) Circulating microRNA-122a as a diagnostic marker for hepatocellular carcinoma Onco Targets Ther, 6: 577-83 117 Chen C.J., Yang H.I., Iloeje U.H., et al (2009) Hepatitis B virus DNA levels and outcomes in chronic hepatitis B Hepatology, 49(5 Suppl): 72-84 118 Waidmann O., Bihrer V., Pleli T., et al (2012) Serum microRNA-122 levels in different groups of patients with chronic hepatitis B virus infection J Viral Hepat, 19(2): 58-65 119 Cho H.J., Kim J.K., Nam J.S., et al (2015) High circulating microRNA122 expression is a poor prognostic marker in patients with hepatitis B virus-related hepatocellular carcinoma who undergo radiofrequency ablation Clin Biochem, 48(16-17): 1073-8 120 Ha S.Y., Yu J.I., Choi C., et al (2019) Prognostic significance of miR122 expression after curative resection in patients with hepatocellular carcinoma Sci Rep, 9(1): 14738 PHỤ LỤC BỆNH ÁN NGHIÊN CỨU Số hồ sơ: ………………………… Phiếu theo dõi số: …………… SỐ BỆNH ÁN: ………………… Mã lưu huyết tương: …………… Họ và tên: Năm sinh: Giới: Địa chỉ: Điện thoại NR: Điện thoại DĐ: Ngày vào viện: Ngày viện: Chẩn đoán: Tiền sử Bản thân: ………………… …… Gia đình: ………………………… Triệu chứng lâm sàng Triệu chứng Có Khơng Triệu chứng Mệt mỏi Bàn tay son Chán ăn, ăn Sao mạch Gầy sút cân Xuất huyết da (kg/tháng) Đau, tức bụng - HSP THBH Sớt Cổ trướng (ít, nhiều) Vàng da, củng mạc Gan to Phù Lách to (độ 1, 2, 3) Có Khơng Cận lâm sàng 3.1 Xét nghiệm huyết học, sinh hóa BC HC TC PT% GOT GPT (AST) (ALT) BilTP BilTT Pro Albu 3.2 Xét nghiệm miễn dịch, sinh học phân tử AFP HBsAg Anti-HCV HIV HBVDNA miR-21 miR-122 3.3 Siêu âm bụng Số lượng U Huyết khới TMC Kích thước U (cm) Hạch ổ bụng Giãn TMC Dịch ổ bụng 3.4 Chụp cắt lớp vi tính bụng Sớ lượng U Huyết khới TMC Kích thước U (cm) Hạch ổ bụng Giãn TMC Dịch ổ bụng 3.5 Xét nghiệm giải phẫu bệnh ………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………… Người lập phiếu NCS Đặng Chiều Dương ... Tương quan miR-21 với tải lượng vi rút vi? ?m gan B b? ??nh nhân ung thư biểu mô tế bào gan 94 3.24 .b Tương quan miR -122 với tải lượng vi rút vi? ?m gan B b? ??nh nhân ung thư biểu mô tế bào gan. .. ? ?Nghiên cứu biểu microRNA- 21, microRNA- 122 huyết tương b? ??nh nhân ung thư biểu mô tế b? ?o gan nhiễm vi rút vi? ?m gan B? ?? với hai mục tiêu sau Đánh giá mức độ biểu microRNA- 21, microRNA- 122 huyết tương. .. khối u gan 110 4.2 BIỂU HIỆN MIR -21, MIR -122 HUYẾT TƯƠNG B? ??NH NHÂN UNG THƯ BIỂU MÔ TẾ B? ?O GAN 115 4.2.1 Biểu miR -21, miR -122 huyết tương b? ??nh nhân ung thư biểu mô tế bào gan