BÀI : TRÍCH LY CAFEIN BẰNG PHƯƠNG PHÁP CHIẾT PHA RẮN ( SPE) TRÍCH LY DẦU HẠT THỰC VẬT BẰNG THIẾT BỊ SOXTEC TRÍCH TINH DẦU SẢ BẰNG PHƯƠNG PHÁP LÔI CUỐN HƠI NƯỚC 1.1 Lý thuyết: Dụng cụ và thiết bị: Tiến hành
BÀI : TRÍCH LY CAFEIN BẰNG PHƯƠNG PHÁP CHIẾT PHA RẮN ( SPE) Nguyên tắc kỹ thuật chiết pha rắn SPE (solid phase extraction): • Kỹ thuật chiết pha rắn SPE trình phân bố chất pha, lúc đầu chất mẫu dạng lỏng, chất chiết dạng rắn – dạng hạt nhỏ xốp đường kính 25 – 70 μm Vì nên có tên kỹ thuật vi chiết pha rắn SPE (Solid Phase Extraction), hay kỹ thuật vi chiết rắn – lỏng • Chất chiết gọi pha tĩnh, nhồi vào cột chiết nhỏ, cột chiết kích thước: x cm, hay dung lượng chiết 100-600 mg, dạng đĩa chiết có kích thước dầy 1-2 mm đường kính 3-4 cm Chất chiết hạt Silica trung tính, hạt ơxit nhơm, hay Silicagen trung tính bị alkyl hố nhóm -OH nhóm mạch carbon thẳng -C2, -C4, -C8, -C18, , hay nhân phenyl Nó chế tạo điều kiện giống pha tĩnh sắc ký HPLC, hạt có độ xốp lớn, với diện tích bề mặt xốp thường từ 50 – 300 m2/gam • Khi xử lý mẫu, dung dịch chất mẫu dội lên cột chiết Lúc pha tĩnh tương tác với chất giữ nhóm chất phân tích lại cột (trên pha tĩnh), cịn nhóm chất khác khỏi cột với dung mơi hồ tan mẫu Như thu nhóm chất cần phân tích pha tĩnh (chất chiết rắn) • Sau dùng dung mơi thích hợp hồ tan tốt chất phân tích để rửa giải chúng khỏi pha tĩnh (cột chiết), thu dung dịch có chất phân tích để xác định chúng theo cách chọn Ưu điểm phương pháp chiết pha rắn SPE: - Thao tác nhanh, đơn giản tự động hóa: mẫu phân tích chảy qua cột với tốc độ phù hợp Chất phân tích giữ lại cột rửa giải dung dịch thích hợp - Sử dụng dung môi: mẫu sau xử lý sơ điều chỉnh môi trường cho qua cột trực tiếp Sau cần lượng nhỏ dung mơi rửa giải chất cần phân tích khỏi cột - Điều kiện tách đơn giản: cân phân bố chất tan hai pha xảy nhiều lần nên cần có khác hợp lý khả chiết tách hoàn toàn hai chất tan khỏi - Hệ số làm giàu cao: hệ số phụ thuộc vào thể tích hai pha rắn lỏng I II III IV Hóa chất Methanol 50% Nước cất Ethyl acetate Bột cà phê Thiết bị dụng cụ: Bộ dụng cụ chiết pha rắn Cột SPE C18 Ống nghiệm Cốc thủy tinh, Pipet 10ml Hệ thống chiết pha mẫu chất rắn chân không Model 12- Port Vacuum SPE Manaifolds: Chuẩn bị mẫu: Mẫu cafe Cân 0,1 g Hòa tan với 10ml nước cất Lọc dịch qua giấy lọc Dịch cafe V Quy trình tiến hành: Cột C18, bật máy lên, cho máy lên áp Hoạt hóa cột : rửa cột methanol + nước cất tỉ lệ ( 50:50) lần, xả khí Bỏ dịch café vào Lấy dịch chảy xuống sử dụng lại lần, sau cho 10 ml ethyacetate vào cột SPE, hút chân không thật chậm Thu lấy dịch chiết Đem dịch sấy 105 độ C, 30 phút Thu protein thô Lưu ý: Luôn đảm bảo cột ngập dung môi Sau thu dịch chiết phải rửa cột nước cất + Methanol Trước sấy dịch, phải cân trước đĩa petri đựng trước để lấy khối lượng m1, sau sấy xong dịch chiết nảy, ta đem cân để thu khối lượng m2 VI Kết nhận xét: Kết quả: M0 m1 0,1g 46,1590g Phần trăm cafein có mẫu là: m2 46,1606g % cafein = Nhận xét Hàm lượng cafein thô thu sau trình chiết pha rắn ( SPE) 1,6 % Cafein thu tương đối, trình lọc loại bỏ cặn làm hao hụt lượng cafein có mẫu TRÍCH LY DẦU HẠT THỰC VẬT BẰNG THIẾT BỊ SOXTEC 1.1 Giới thiệu chung Hệ thống trích ly SOXTEC TM Avanti 2055- Thế hệ hệ thống trích ly dung mơi thủ cơng để xác định an toàn chất hoà tan thực phẩm, thức ăn chăn nuôi, đất, 1.2 Nguyên tắc Tinh dầu hạt điều, đậu phộng trích ly dung mơi hexan với kĩ thuật chiết Soxtec Hàm lượng tinh dầu tính từ lượng cân sau sấy đến khối lượng khơng đổi 1.3 Hố chất, thiết bị 1.3.1 Hố chất Hexan Mẫu: Đậu phộng 1.3.2 Thiết bị Hệ trích ly Soxtec TM Avanti 2055 1.4 Quá trình tiến hành 1.4.1 Mẫu đo Hạt đậu phộng xoay nhuyễn trước khiến tiến hành Cân khoảng 5g cho vào thimble dùng cho trình trích ly Dung mơi sử dụng q trình trích ly hexan 1.4.2 Q trình chiết Bước 1: Mở van nước cho hệ thống nước mát chạy tuần hoàn máy Bước 2: Gắn vọng sắt vào đầu ống lọc, đặt ống lọc vào ống đở để giữ cẩn , mang mẫu cân Bước 3: Gạt tay điều khiển lên mức cao Lắp ống đở vào giá giữ lắp vào máy Gạt tay điều khiển xuống mức thấp gạt lên lại vị trí ban đầu, lấy giá giữ Bước 4: Lắp cốc trích ly vào giá giữ cốc gắn vào máy Gạt hai tay điều khiển xuống mức thấp đóng kính lại Bước 5: Bom dung môi vào máy Bước 6: Mở công tắc nguồn mở khoá Cài thong số cho điều khiển Bước 7: Khi nhiệt độ máy lên đến nhiệt độ điều chỉnh máy báo bấm nút thay đổi chế độ Bước 8: Kết thúc q trình trích ly, lấy cốc cho vào tủ sấy, sấy đến khô Bước 9: Tắt công tắc nguồn, xã dung môi thu hồi tắt máy Bước 10: Cân mẫu sau sấy tính kết 1.5 Kết thu Mẫu Cốc dùng để chứa Cốc dùng để chứa dầu(trước dầu(sau trích trích ly) ly) 44,366g 44,825g 44,395g 44,3802g 44,261g 44,2520g 44,245g 44,5439g Hiệu xuất là: Mẫu 1: 100% = 101,03% Mẫu 2: : 100% = 99,96% Mẫu 3: 100% = 99,97% Mẫu 4: 100% = 100,67% Bài: TRÍCH TINH DẦU SẢ BẰNG PHƯƠNG PHÁP LÔI CUỐN HƠI NƯỚC 1.1 Lý thuyết: Tinh dầu hỗn hợp hợp chất hữu có mùi thơm, mùi thơm tinh dầu mùi cấu tử có nhiều tinh dầu (cấu tử chính) Ví dụ: mùi tinh dầu hoa hồng mùi phenyl etilic (cấu tử chính), mùi tinh dầu hoa nhài mùi jasmin, mùi tinh dầu chanh mùi limonen (chiếm khoảng 90% tinh dầu chanh) Đa số tinh dầu thường dễ bay với nước, có mùi thơm, khơng hòa tan nước khối lượng riêng thường nhỏ nước Có vài tinh dầu có khối lượng riêng lớn nước tinh dầu quế, tinh dầu đinh hương… Vì lý người ta thường dùng phương pháp chưng cất để tách tinh dầu Nguyên liệu tinh dầu loại thực vật có chứa tinh dầu Trong thực vật, tinh dầu có hoa, lá, rễ, thân, củ… Có số thực vật phận có chứa tinh dầu Khác với dầu béo, thành phần tinh dầu hợp chất thuộc dãy tecpen, công thức chung (C10H16)n dẫn xuất có chứa oxy tecpen rượu, xeton, andehyt Còn dầu béo hợp chất thuộc dãy parafin, olefin… không thuộc dãy tecpen Dầu béo không bay với nước nên không chưng cất được, dầu béo sau tinh chế thường mùi thơm đặc trưng, thường q trình bảo quản dầu béo, dầu có mùi bị ôi khét, hư hỏng Sả loại thân thảo, sống vài năm, trồng tép Sau trồng – tháng thu hoạch 40-50 ngày thu hoạch lứa, suất bình quân 50 lá/ha Hàm lượng tinh dầu 0,7-1,5%, thành phần tinh dầu sả geraniol (23%) xitronenlal (32 – 35%) Lá sả thường chưng cất dạng tươi khô Sả trồng vùng đồi núi chịu khơ hạn 1.2 Dụng cụ thiết bị: erlen 250ml cân kỹ thuật ống nhỏ giọt bếp đun hình cầu xiranh bếp đựng tinh dầu cất tinh dầu thớt nhựa dao 1.3 Hóa chất: 200 gam củ sả tươi Nước cất Metanol 1.4 Tiến hành 1.4.1 Tiến hành - 200g sả rửa sạch, đập dập cắt nhỏ trước cho vào bình cất tinh dầu - Nguyên liệu sả cho vào bình cầu trước lắp ráp chưng cất - Bộ cất tinh dầu lắp rắp theo hình dưới: - Cắm điện bật bếp đun bình cầu Quá trình chưng cất tiến hành 2-3 Lưu ý: Trong trình chưng cất, mực nước phận dâng cao xả nước bình erlen, giữ phần tinh dầu lại đến tinh dầu tích lại nhiều lấy tinh dầu lọ đựng tinh dầu - Vệ sinh cất tinh dầu: Sau cất xong tinh dầu, dụng cụ rửa nước tráng lại metanol 1.4.2 Tính hàm lượng tinh dầu có mẫu sả: - Kết quả: Hàm lượng tinh dầu có mẫu sả: X= = = 0,503 Trong đó: V thể tích tinh dầu (ml) m khối lượng mẫu (g) ... Phần trăm cafein có mẫu là: m2 46,1606g % cafein = Nhận xét Hàm lượng cafein thơ thu sau q trình chiết pha rắn ( SPE) 1,6 % Cafein thu tương đối, q trình lọc loại bỏ cặn làm hao hụt lượng cafein. .. làm hao hụt lượng cafein có mẫu TRÍCH LY DẦU HẠT THỰC VẬT BẰNG THIẾT BỊ SOXTEC 1.1 Giới thiệu chung Hệ thống trích ly SOXTEC TM Avanti 2055- Thế hệ hệ thống trích ly dung mơi thủ cơng để xác định... Ethyl acetate Bột cà phê Thiết bị dụng cụ: Bộ dụng cụ chiết pha rắn Cột SPE C18 Ống nghiệm Cốc thủy tinh, Pipet 10ml Hệ thống chiết pha mẫu chất rắn chân không Model 12- Port Vacuum SPE Manaifolds: