Phân tích đánh gias chất lượng thực phẩm (3)

3/6/2011 Các ph ơng pháp nhân giống vơ tính K CH ƠNG VI THU T VI GHÉP Ph ơng pháp tách • • • • • Tách Chiết cành Giâm cành Tiếp ghép Nuôi cấy mô Ph ơng pháp chiết cành • Đơn giản • Giữ đ ợc tính u việt mẹ • Bộ rễ phát triển • Dễ sống mọc nhanh  Thích hợp với bụi có rễ chùm Ph ơng pháp chiết cành Ph ơng pháp giâm hom 3/6/2011 Ph ơng pháp ghép cành K thu t ghép cành nhân giống truyền thống Ghép cành = kết hợp gốc ghép mắt ghép thành cá thể thống  ghép tăng tr ởng phát triển nh hoàn chỉnh u, nh ợc điểm Ph ơng pháp ghép cành u, nh ợc điểm • u điểm: kết hợp đ ợc khả chống chịu gốc ghép với u điểm suất phẩm chất tốt mắt ghép • Nh ợc điểm: yêu cầu cần thiết để trình tiếp hợp diễn thành công chồi ghép gốc ghép phải t ơng thích với Ghép giống • ln ln ghép thành cơng • Tr ớc tiến hành ghép, cần xác định xem có khả kết hợp với nhau, tạo thành hoàn chỉnh vĩnh viễn hay khơng • Ngun tắc: “các có mối liên hệ mặt thực vật học gần hội ghép thành cơng cao” đào ‘Elberta’ 3/6/2011 Ghép giống loài • hầu nh ghép đ ợc Pseudotsuga menziesii Ghép chi họ • hội ghép thành cơng khó mộc lê (Cydonia oblonga) lê (Pyrus communis) Q trình tạo thành vết ghép • Các vùng t ợng tầng tiếp xúc với để tế bào mơ sẹo kết hợp với tạo liên kết gốc ghép cành ghép • Nhiệt độ độ ẩm yếu tố quan trọng Ghép lồi chi • nhiều tr ờng hợp thành công, nhiều tr ờng hợp không thành công mận Nhật Bản (Prunus salicina) mận châu Âu (Prunus domestica) Ghép họ • th ờng đ ợc xem việc không khả thi cỏ ba (Melilotus alba) hướng dương (Helianthus annuus) Quá trình tạo thành vết ghép • Đáp ứng hàn gắn vết th ơng: hình thành vật chất hoại tử từ tế bào tổn th ơng 3/6/2011 Quá trình tạo thành vết ghép • Hình thành cầu nối mơ sẹo: tế bào nhu mô bắt đầu sinh sôi nảy nở cành ghép gốc ghép (từ nhu mô mạch libe phần ch a tr ởng thành mạch mộc) Quá trình tạo thành vết ghép Q trình tạo thành vết ghép • Hình thành vùng t ợng tầng nối gốc ghép cành ghép khoảng 23 tuần sau ghép Quá trình hàn gắn vết ghép (Hartman cộng sự, 1990) • Hình thành mô mạch giúp tạo thành mạch liên kết cành ghép gốc ghép Lá cành ghép kích thích mạnh mẽ khả biệt hóa thành mơ mạch dọc theo bề mặt ghép Các yếu tố ảnh h ởng đến q trình hàn gắn vết ghép • Tính khơng t ơng hợp: ghép phát triển khơng hồn chỉnh tỉ lệ ghép thành cơng thấp • Loại cây: táo dễ ghép hồ đào, sồi khó ghép dù khơng có t ợng khơng t ơng hợp • Điều kiện nhiệt độ, độ ẩm oxy sau ghép • Kỹ thuật ghép: Mạch mộc Mạch libe K thu t vi ghép Vi ghép kỹ thuật phối hợp ghép nuôi cấy đỉnh sinh tr ởng nh ng thông qua dinh d ỡng tự nhiên gốc ghép • Mắt ghép đỉnh sinh tr ởng • Gốc ghép từ hạt đoạn chồi thu đ ợc nhờ vi nhân giống 3/6/2011 K thu t vi ghép • Cây ghép đ ợc ni điều kiện vơ trùng • Cây ghép hồn tồn bệnh • Mang đặc điểm di truyền mẹ cho mắt ghép • Tận dụng đ ợc đặc tính gốc ghép hoang dại Các vị trí ghép Nghiên cứu vi ghép Cây khoai tây (Solanum tuberosum) Cây cà chua (Lycopersicon esculentum) 3/6/2011 Đối t ợng nghiên cứu Quy trình thí nghiệm Thực vật (Plantae) • Họ: Giới: • Chi: Ngành: Lycopersicon Solanum Ngọc lan (Magnoliophyta) • Lồi: Lớp: Ngọc lan (Magnoliopsida) Lycopersicon Solanum esculentum tuberosum nhân cà chua • Phân lớp: phương pháp vi ghép tăng sinh tái sinh mô sẹo môi trường nuôi cấy vi ghép Cúc (Asteridae) nhân khoai tây • Bộ: Hoa mõm sói (Scrophulariales) • Họ: Cà (Solanaceae) Thiết kế thí nghiệm • Thí nghiệm Khảo sát ảnh h ởng chất điều hoà sinh tr ởng lên tăng tr ởng cà chua • Thí nghiệm Khảo sát ảnh h ởng chất điều hoà sinh tr ởng lên tăng tr ởng khoai tây • Thí nghiệm Khảo sát khả vi ghép cà chua khoai tây số ph ơng pháp • Thí nghiệm Khảo sát khả tăng sinh tái sinh tế bào mô sẹo tạo thành vị trí ghép chồi khoai tây gốc cà chua Thí nghiệm 2: Khảo sát ảnh h ởng chất điều hoà sinh tr ởng lên tăng tr ởng khoai tây Thí nghiệm 1: Khảo sát ảnh h ởng chất điều hoà sinh tr ởng lên tăng tr ởng cà chua 4,33 ± 0,19 10 6,48 ± 0,37 Chiều cao 4,33 ± 0,19 Số Số rễ C0 0,5 mg/l BA + C1 C2 1,0 mg/l NAA C3 C4 Thí nghiệm 3: Khảo sát khả vi ghép cà chua khoai tây số ph ơng pháp 14 12,49 ± 0,48 12 9,84 ± 0,59 10 Chieàu cao Số 5,18 ± 0,63 Số rễ K0 0,1 mg/l NAA + K1 K2 K3 0,1 mg/l GA3 + 10% nước dừa K4 K5 3/6/2011 Thí nghiệm 3: Khảo sát khả vi ghép cà chua khoai tây số ph ơng pháp Thí nghiệm 3: Khảo sát khả vi ghép cà chua khoai tây số ph ơng pháp Thí nghiệm 4: Khảo sát khả tăng sinh tái sinh tế bào mô sẹo tạo thành vị trí ghép chồi khoai tây gốc cà chua Thí nghiệm 5: Khảo sát khả tăng sinh tái sinh tế bào mô sẹo tạo thành vị trí ghép chồi khoai tây gốc cà chua Quy trình cơng nghệ tuyển chọn nhân giống có múi bệnh 3/6/2011 Bệnh vàng gân xanh (Greening) Bệnh tàn lụi (Tristeza) Closterovirus Vi khuẩn Liberobacter asiaticum Tạo đầu dòng bệnh (S0) kỹ thuật vi ghép đỉnh sinh tr ởng: - Chuẩn bị gốc ghép: • Hạt giống cam b ởi chua đ ợc bóc vỏ khử trùng bề mặt • Gieo hạt mơi tr ờng MS • Tiêu chuẩn gốc ghép: 15 ngày tuổi, chiều cao 10 -12 cm, đ ờng kính thân 1,5 – mm Cắt phía cách cổ rễ – 2,5 cm; cắt bớt rễ cọc Tạo đầu dòng bệnh (S0) kỹ thuật vi ghép đỉnh sinh tr ởng: - Chuẩn bị đỉnh sinh tr ởng: • Cây giống cần làm sạch, tỉa xung quanh Sau 10 ngày, chồi non mọc vị trí tỉa • Đỉnh sinh tr ởng dài khoảng 0,1 – 0,2 mm đ ợc lấy từ chồi non Tạo đầu dòng bệnh (S0) kỹ thuật vi ghép đỉnh sinh tr ởng: - Kỹ thuật vi ghép: • Dùng dao l ỡi mỏng tách đỉnh sinh tr ởng đặt nhanh vào vị trí ghép gốc ghép • Cây vi ghép đ ợc đặt ống nghiệm có chứa mơi tr ờng lỏng • Kiểm tra PCR, ELISA 3/6/2011 Sản xuất giống bệnh: - Những giống bệnh S0 đ ợc giữ chăm sóc nhà l ới chống côn trùng cấp - Những S0 cung cấp mắt ghép để ghép lên gốc ghép thích hợp cho S1, đ ợc bảo quản nhà l ới cấp để nhân hàng loạt mắt ghép bệnh Cây S1 đ ợc kiểm tra bệnh định kỳ Sản xuất giống bệnh: - Các mắt ghép bệnh từ S1 đ ợc cung ứng cho nhà l ới cấp để sản xuất giống bệnh - Cây S1 đ ợc lấy mắt ghép để nhân giống năm, sau phải thay đợt S1 ... ơng pháp ghép cành u, nh ợc điểm • u điểm: kết hợp đ ợc khả chống chịu gốc ghép với u điểm suất phẩm chất tốt mắt ghép • Nh ợc điểm: yêu cầu cần thiết để trình tiếp hợp diễn thành công chồi ghép... nghiệm Thực vật (Plantae) • Họ: Giới: • Chi: Ngành: Lycopersicon Solanum Ngọc lan (Magnoliophyta) • Lồi: Lớp: Ngọc lan (Magnoliopsida) Lycopersicon Solanum esculentum tuberosum nhân cà chua • Phân. .. (Solanaceae) Thiết kế thí nghiệm • Thí nghiệm Khảo sát ảnh h ởng chất điều hoà sinh tr ởng lên tăng tr ởng cà chua • Thí nghiệm Khảo sát ảnh h ởng chất điều hoà sinh tr ởng lên tăng tr ởng khoai tây • Thí