(TIỂU LUẬN) đồ án chuyên ngành đề tài khảo sát các yếu tố ảnh hưởng đến quá trình trích ly anthocyanin từ bã bụp giấm

BỘ CÔNG THƯƠNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM TP HCM KHOA SINH HỌC VÀ MÔI TRƯỜNG ĐỒ ÁN CHUYÊN NGÀNH ĐỀ TÀI: KHẢO SÁT CÁC YẾU TỐ ẢNH HƯỞNG ĐẾN Q TRÌNH TRÍCH LY ANTHOCYANIN TỪ BÃ BỤP GIẤM Giảng viên hướng dẫn: ThS Huỳnh Phan Phương Trang Sinh viên thực hiện: Phan Công Thịnh - 2008181162 Phạm Thị Kim Hương - 2008180232 Võ Nguyễn Khánh Như - 2008181130 TP Hồ Chí Minh, tháng năm 2022 BỘ CÔNG THƯƠNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM TP HCM KHOA SINH HỌC VÀ MÔI TRƯỜNG ĐỒ ÁN CHUYÊN NGÀNH ĐỀ TÀI: KHẢO SÁT CÁC YẾU TỐ ẢNH HƯỞNG ĐẾN Q TRÌNH TRÍCH LY ANTHOCYANIN TỪ BÃ BỤP GIẤM Giảng viên hướng dẫn: ThS Huỳnh Phan Phương Trang Sinh viên thực hiện: Phan Công Thịnh - 2008181162 Phạm Thị Kim Hương - 2008180232 Võ Nguyễn Khánh Như - 2008181130 TP Hồ Chí Minh, tháng năm 2022 LỜI CẢM ƠN Trong suốt q trình làm khóa luận tốt nghiệp, em thầy hướng dẫn tận tình Đặc biệt, chúng em gửi lời cảm ơn đến Th.S Huỳnh Phan Phương Trang giúp đỡ, động viên chúng em để hoàn thành đề tài Chúng em xin chân thành cảm ơn cô nhiều Chúng em cảm ơn Quý thầy cô khoa Công Nghệ Sinh Học tạo điều kiện, hướng dẫn cho chúng em suốt trình làm khóa luận Cảm ơn tất bạn sinh viên khóa 09DHSH ln giúp đỡ chúng em, chia sẻ, động viên vượt qua khó khăn q trình hồn thành khóa luận Do cịn giới hạn nhiều kiến thức, kinh nghiệm thực tế nên việc hồn thành khóa luận thời gian ngắn cịn nhiều thiếu sót Kính mong nhận nhận xét, góp ý q thầy để em hoàn thiện kiến thức Chúng em xin chân thành cảm ơn tất TP HCM, tháng năm 2022 Sinh viên thực Phan Công Thịnh Phạm Thị Kim Hương Võ Nguyễn Khánh Như i LỜI CAM KẾT Chúng em xin cam đoan đồ án chuyên nghành thành từ nghiên cứu thực tế sở số liệu thực tế thực theo hướng dẫn giảng viên hướng dẫn, số liệu kết nghiên cứu đồ án chuyên nghành hoàn toàn trung thực Mọi giúp đỡ cho việc thực đồ án chuyên nghành cảm ơn thơng tin trích dẫn báo cáo rõ nguồn gốc TP HCM, tháng năm 2022 Sinh viên thực Phan Công Thịnh Phạm Thị Kim Hương Võ Nguyễn Khánh Như ii MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN .i LỜI CAM KẾT ii DANH MỤC HÌNH ẢNH vi DANH MỤC BẢNG vii LỜI MỞ ĐẦU: viii CHƯƠNG TỔ̉NG QUAN 1.1 TỔ̉NG QUAN VỂ̀CÂY BUP ̣̉ GIẨ́M 1.1.1 Tên goị ̉̉ sinh trưở̉ng 1.1.2 Hỉ̀ nh thai, ̉́ đăc̣̉điêm 1.1.3 Phân bổ́ 1.1.4 Giả́tri ̣̉ sử̉dung ̣̉ củ̉a bup̣̉ giẩ́m 1.1.5 Thả̀ nh phẩ̀n hỏ́a hoc̣̉củ̉a hoa bup̣̉ giẩ́m 1.2 Tổ̉ng quan vể̀Anthocyanin 1.2.1 Giở́i thiêụ̉ 1.2.2 Cẩ́ u tr̉́uc h̉́oa hoc̣củ̉a Anthocyanin 1.2.3 Sư ̣̉phân bổ́ cua Anthocyanins ̉̉ 1.2.4 Lơị̉ỉ́ ch củ̉a Anthocyanin 1.2.5 Cả́ c yể́ u tổ́anh n chiể́ t xuất anthocyanin ̉̉ hương ̉̉ để́ 1.3 Tỉ̀ nh hỉ̀ nh nghiên cử́u vả̀trên thể́giở́i 11 1.3.1 Trên thể́ giơi 11 ̉́ 1.3.2 Nghiên cưu ̉́ nưở́c 12 CHƯƠNG VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 14 2.1 Vật liệu 14 2.2 Phương pháp nghiên cứu 14 2.2.1 Bố trí thí nghiệm 14 iii 2.2.2 Khảo sát ảnh hưởng nồng độ ethanol đến trình tách chiết anthocyanin từ bã bụp giấm 15 2.2.3 Khảo sát ảnh hưởng thời gian chiết đến trình tách chiết anthocyanin từ bã bụp giấm 15 2.3 Các phương pháp sinh hóa sử dụng đề tài 15 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ BIỆN LUẬN 17 3.1 Ảnh hưởng nồng độ dung mơi đến khả trích ly anthocyanin từ bã bụp giấm 17 Bảng 1: Phần trăm anthocyanin dịch chiết với nồng độ 17 dung môi khác 17 3.2 Ảnh hưởng thời gian đến khả trích ly anthocyanin từ bã bụp giấm 18 Bảng 2: Phần trăm anthocyanin dịch chiết với 18 thời gian chiết khác 18 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 20 TÀI LIỆU THAM KHẢO: 21 PHỤ LỤC 24 iv v DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình 1: Hoa bup̣̉ giẩ́m Hình 2: Cẩ́u truc cua mơṭsớAnthocyanins ̉́ ̉ Hình 3: Ảnh hưởng pH lên tốc độ thủy phân dâu đun nóng 450C oxygen nitrogen Hình 4: Sự biến tính anthocyanin với phản ứng oxy hóa catechol 10 Hình 5: Sơ đờJurd đới vơi phan ưng thuâṇnghic̣ h SO2 anthocyanin 11 ̉́̉́ Hình 1: Sơ đồ bố trí thí nghiệm 14 Hình 1: Biểu đồ thể phần trăm Anthocyanin dịch chiết với nồng độ dung môi khác 17 Hình 2: Biểu đồ thể phần trăm Anthocyanin dịch chiết với thời gian chiết khác 19 vi DANH MỤC BẢNG Bảng 1: Sựphụthuôc̣mau sắc anthocyanin vao vi ̣tri va nhom thếthế(Harborne ̉̀̀́ cộng sự, 2013) Bảng 2: Anthocyanins số loại Bảng 1: Phần trăm anthocyanin dịch chiết với nồng độ dung môi khác Error! Bookmark not defined Bảng 2: Phần trăm anthocyanin dịch chiết với thời gian chiết khác Error! Bookmark not defined vii LỜI MỞ ĐẦU: Trong thời gian gần đây, người ta ngày quan tâm đến nguyên liệu tự nhiên tách chiết chất chống oxy hóa Vì nghiên cứu liên quan đến việc tách chiết chất chống oxy hóa tăng lên đáng kể Anthocyanin chất chống oxy hóa từ thiên nhiên có mặt phổ biến loại thực vật có màu đỏ đến tím nho đen, dâu tây, bắp cải tím,…Trong đó, hoa bụp giấm ngun liệu có hàm lượng Anthocyanin cao Nhiều nghiên cứu cho thấy hoa bụp giấm ngồi việc dùng để làm chất tạo màu tự nhiên cịn có nhiều lợi cho sức khỏe Trong hoa bụp giấm chứa nhiều loại axit amin, vitamin A, B1, B2, B, C, E, F nhiều loại khoáng chất khác sắt, đồng, magie, kẽm,…Bã bụp giấm phụ phẩm rẻ tiền từ quy trình sản xuất trà chế phẩm lên men từ nước hoa bụp giấm Sau tách nước bã bụp giấm lại nhiều chất dinh dưỡng Việc sử dụng bã bụp giấm để tách chiết anthocyanin giảm thiểu rác thải mơi trường, giảm giá thành chế phẩm anthocyanin Cho đến nay, việc nghiên cứu hoa bụp giấm, đặc biệt chiết xuất anthocyanin từ hoa bụp giấm hạn chế Việc khảo sát yếu tố ảnh hưởng đến việc tách chiết anthocyanin từ bã bụp giấm chưa thực Chính vậy, đề tài “ Khảo sát ảnh hưởng yếu tố đến q trình trích ly Anthocyanin từ bã bụp giấm” thực Mục tiêu đề tài: Xác định số yếu tố có ảnh hưởng đến q trình trích ly anthocyanin từ bã bụp giấm Nội dung nghiên cứu -Khảo sát ảnh hưởng nồng độ ethanol đến trình tách chiết -Khảo sát ảnh hưởng thời gian ủ viii môi/ nguyên liêụ̉ lần lươṭlả̀ 10/1 Muc̣đich ̉̉ nghiên cưu ̉́ nhăm thu nhâṇchếphẩm ̉́ cua anthocyanin ̣̉ bôṭđểưng duṇg thưc̣phẩm ̉́ 13 CHƯƠNG VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 2.1 Vật liệu Bã hoa bụp giấm cung cấp từ phịng thí nghiệm Sau rửa sấy khô nhiệt độ 70oC thời gian 16 đến độ ẩm bã bụp giấm lại 5% Sau đem xay nhỏ lọc qua rây có kích thước 4mm (Linh cộng sự, 2019) Hóa chất sử dụng: ethanol, đệm kali clorua pH=1, đệm acetat pH=4,5,… Thiết bị dụng cụ: Ống ly tâm, ống nghiệm, tủ ấm, tủ sấy, máy ly tâm,… 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Bơ trí thí nghiệm Chuẩn bị mẫu nguyên liệu Khảo sát ảnh hưởng nồng độ ethanol đến trình tách chiết Anthocyanin Khảo sát ảnh hưởng thời gian đến trình tách chiết Anthocyanin Hình 1: Sơ đồ bơ trí thí nghiệm 14 2.2.2 Khảo sát ảnh hưởng nồng độ ethanol đên trình tách chiêt anthocyanin từ bã bụp giâm Dung môi dùng tách chiết anthocyanin ethanol với nồng độ: 20°, 40°, 60°, 80°, 98o (Nhi cộng sự, 2020) Thí nghiệm bố trí tiến hành với nhiệt độ phòng, tỷ lệ bã bụp giấm/ ethanol 1:10 (Nguyên Trần, 2019), thời gian chiết 120 phút(Nguyên Trần, 2019) Tiến hành thí nghiệm: Cho 25g bã bụp giấm vào bình tam giác 250 ml, sau cho 50ml nồng độ ethanol 20°, 40°, 60°, 80°, 98o vào bình đậy kín để nhiệt độ phịng 120 phút Sau ly tâm 5000 vịng/phút 15 phút thu dịch bổ sung dung dịch đệm pH 1, pH 4,5 xác định hàm lượng Anthocyanin theo phương pháp pH vi sai Lăp lại thí nghiệm lần Nồng độ ethanol có hàm lượng anthocyanin cao chọn để làm thí nghiệm sau 2.2.3 Khảo sát ảnh hưởng thời gian chiêt đên trình tách chiêt anthocyanin từ bã bụp giâm Khảo sát ảnh hưởng thời gian: 60 phút, 90 phút, 120 phút, 150 phút, 180 phút đến khả trích ly anthocyanin, từ tìm thời gian cho khả trích ly cao Tiến hành thí nghiệm: Cho 25g bã bụp giấm vào bình tam giác 250 ml, sau cho 50ml dung mơi ethanol với nồng độ thích hợp xác định thí nghiệm vào bình đậy kín để nhiệt độ phòng khoảng thời gian khác 60 phút, 90 phút, 120 phút, 150 phút, 180 phút Sau thời gian tương ứng ly tâm 5000 vòng/phút 15 phút thu dịch bổ sung dung dịch đệm pH 1, pH 4,5 xác định hàm lượng Anthocyanin theo phương pháp pH vi sai Thí nghiệm lặp lại lần 2.3 Các phương pháp sinh hóa sử dụng đê tài Xác định hàm lượng anthocyanin băng phương pháp pH vi sai (Wrolstad, 1976) Dựa nguyên tắc: chất màu anthocyanin thay đổi theo pH Tại pH 1,0 anthocyanin tồn dạng oxonium flavium có độ hấp thụ cực đại, cịn pH 4,5 chúng lại dạng carbinol khơng màu Đo mật độ quang mẫu pH 1,0 pH 4,5 bước sóng hấp thụ cực đại, so với độ hấp thụ bước sóng 700 nm Hàm lượng sắc tố anthocyanin tính theo cơng thức: 15 a= 퐴×퐴×퐴×퐴 퐴×퐴 (g) Trong đó: a: hàm lượng Anthocyanin, (g) A: Mật độ quang, A = {(퐴퐴 Max,pH=1 − 퐴퐴 700,pH=1) − (퐴퐴 Max,pH=4,5 − 퐴퐴 700,pH=4,5)} 퐴퐴 520,pH=1,0, 퐴퐴 700,pH=4,5: Độ hấp thụ bước sóng cực đại 520 nm 700 nm pH 1,0 pH 4,5 M: Khối lượng phân tử Anthocyanin (g/mol), M = 449,2 (g/mol) F: Hệ số pha lỗng V: Thể tích dịch chiết, (lít) 퐴: Hệ số hấp thụ phân tử, 퐴= 26900 (mol-1 cm-1) L: Là chiều dày cuvet (1 cm) Phần trăm Anthocyanin toàn phần: 퐴 % Anthocyanin = 퐴×(100−퐴)×10−2 × 100 Trong đó: a: Lượng Anthocyanin (g) m: Khối lượng nguyên liệu ban đầu (g) w: Độ ẩm nguyên liệu (%) 16 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ BIỆN LUẬN 3.1 Ảnh hưởng nồng độ dung môi đên khả trích ly anthocyanin từ bã bụp giâm Anthocyanin chất phân cực nên có khả tan tốt dung môi phân cực Việc lựa chọn dung môi thích hợp để chiết anthocyanin thu hàm lượng cao giữ cho màu bền Để xác định giá trị tối ưu nồng độ dung môi cồn, tiến hành xác định hàm lượng anthocyanin theo phương pháp pH vi sai Kết thể bảng 3.1 Bảng 1: Phần trăm anthocyanin dịch chiêt với nồng độ dung môi khác STT Nồng độ cồn 20° 40° 60° 80° 99o % Anthocyanin toàn phần 0,438 ± 0,034c 0,665 ± 0,018b 0,864 ± 0,015a 0,729 ± 0,052b 0,352 ± 0,119c a, b, c theo sau giá trị trung bình cột thể khác biệt nghiệm thức với mức ý nghĩa P≤0,05 0.864 0.9 0.8 0.729 0.665 0.7 0.6 0.5 0.438 0.352 0.4 0.3 0.2 0.1 20° 40° 60° 80° 99° Nồng độ cồn (°) Hình 1: Biêu đồ thê phần trăm Anthocyanin dịch chiêt với nồng độ dung môi khác 17 Qua kết bảng 3.1 ta thấy phần trăm anthocyanin tăng dần đến 0,864% nồng độ dung môi 60% sau giảm xuống 0,729% nồng độ dung mơi 80% thấp 0,352% nồng độ cồn 99o Anthocyanin chất hữu thơm đa vòng nên hòa tan tốt dung môi hữu ethanol Điều giải thích tăng nồng độ ethanol lên lượng anthocyanin chiết tăng lên Tuy nhiên anthocyanin có chứa nhóm chức OH- nên có khả hồ tan nước dung mơi phân cực khác Vì tăng nồng độ ethanol cao làm cho tính phân cực hệ dung mơi giảm, dẫn đến khả hòa tan anthocyanin giảm theo Đó lý ban đầu tăng nồng độ ethanol hàm lượng anthocyanin thu tăng đạt cao nồng độ 60° sau giảm Vì vậy, ethanol 60° nồng độ dung mơi thích hợp để chiết anthocyanin từ bã bụp giấm Thí nghiệm tác giả Ghasemzadeh A, Baghdadi A, Z E Jaafar H, Swamy MK, Megat Wahab (Ghasemzadeh cộng sự, 2018) cho thấy kết tách chiết flavonoid gạo lức gạo huyết rồng cao hệ dung môi ethanol/ nước Kết thí nghiệm gần tương đồng với nghiên cứu tối ưu hóa chiết xuất giàu anthocyanin từ gạo đen tác dụng khả tiêu hóa ống nghiệm In Young Bae cộng (Bae cộng sự, 2017), tác giả đưa nồng độ ethanol 50,78% (v/v) tối ưu cho trình tách chiết Anthocyanin 3.2 Ảnh hưởng thời gian đên khả trích ly anthocyanin từ bã bụp giâm Bã bụp giấm bổ sung ethanol 60° theo tỷ lệ 1:10 đặt nhiệt độ phòng khoảng thời gian 30 phút, 60 phút, 90 phút, 120 phút, 150 phút Kết thí nghiệm thể qua bảng 3.2 hình 3.2 Bảng 2: Phần trăm anthocyanin dịch chiêt với thời gian chiêt khác STT Thời gian chiết 30p 60p 90p 120p 150p % Anthocyanin toàn phần 0,441 ± 0,012d 0,663 ± 0,026c 0,904 ± 0,038a 0,772 ± 0,036b 0,680 ± 0,025c 18 a, b, c, d theo sau giá trị trung bình cột thể khác biệt nghiệm thức với mức ý nghĩa P≤0,05 0.904 0.9 0.772 0.8 0.68 0.663 0.7 0.6 0.5 0.441 0.4 0.3 0.2 0.1 30p 60p 90p 120p 150p Thời gian trích ly (phút) Hình 2: Biêu đồ thê phần trăm Anthocyanin dịch chiêt với thời gian chiêt khác Qua kết bảng 3.2 ta thấy phần trăm Anthocyanin thấp 0,441% 30 phút, tăng dần đến 0,904% 90 phút, sau giảm xuống Tại thời điểm 30 phút, thời gian chiết ngắn, dung mơi chưa hịa tan hết anthocyanin dẫn đến % Anthocyanin thu thấp Do tăng thời gian lên % Anthocyanin thu tăng đạt cao 90 phút Sau lượng Anthocyanin giảm xuống mốc thời gian 120 phút 150 phút Jaafar NF cộng (Jaafar cộng sự, 2020) đưa thời gian tối ưu để tách chiết anthocyanin 90 phút Thời gian trích ly ảnh hưởng đến q trình trích ly anthocyanin Nếu thời gian q ngắn, dung mơi khơng hịa tan hết anthocyanin nguyên liệu Ngược lại, thời gian dài ảnh hưởng đến chất lượng sản phấm chiết, dung mơi hịa tan chất khác ngun liệu Ngồi thời gian trích ly q dài có thề làm giảm lượng anthocyanin trích ly anthocyanin bị phân hủy tiếp xúc với khơng khí ánh sáng thời gian dài 19 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 4.1 Kết luận Nghiên cứu xác định số yếu tố hưởng đến q trình trích ly anthocyanin từ bã bụp giấm như: -Ethanol dung môi sử dụng q trình Tỷ lệ dung mơi ethnol: nước -Thời gian chiết 90 phút cho phần trăm anthocyanin toàn phần cao 0,904 4.2 Kiến nghị -Khảo sát thêm yếu tố có ảnh hưởng đến trình chiết tách Anthocyanin từ bụp giấm: enzyme, tác động nhiệt, -Đánh giá khả kháng oxy hóa Anthocyanin từ bụp giấm 20 TÀI LIỆU THAM KHẢO: TÀI LIỆU TIẾNG VIỆT ̉́ TỐ Ả̉NH HƯỞ̉NG ĐÊN ̉́ Cúc, Nguyên Thị Hồng (2015) "KHẢ̉O SÁT CÁC YÊU ̉́ ANTHOCYANIN TỪ HOA BỤP GIẤM, KHẢ̉O SÁT QUÁ TRÌNH TÁCH CHIÊT ̉́ KHẢNĂNG KHÁNG OXY HÓA VÀ ĐỘ BỀN CỦA DỊCH CHIÊT ANTHOCYANIN." Linh, Đào Thị Mỹ, et al (2019) "Nghiên cứu trình tạo bột màu betacyanin thu nhận từ vỏ long (Hylocereus undatus)." 17(1): 21 Nguyên, Thị Lan and Lạc Quyên Lê Thị (2004) "NGHIÊN CỨU ẢNH HƯỞNG CỦA HỆ DUNG MÔI ĐẾN KHẢ NĂNG CHIẾT TÁCH CHẤT MÀU ANTHOCYANIN CÓ ĐỘ MÀU CAO TỪ QUẢ DÂU HỘI AN." Nguyên, Thị Tuyết and Thị Duyên Trần (2019) "Nghiên cứu tách chiết chất màu ANTHOCYANIN từ hoa đậu biếc (CLITORIA TERNATEAN)." Nhi, Kiều Thị, et al (2020) "NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH CHIẾT TÁCH ANTHOCYANIN HIỆU QUẢ TỪ HÀNH TÍM, HÀNH LÁ, TỎI TÍA, CẦN TÂY, CẦN TA." 12(1): 100 TÀI LIỆU TIẾNG ANH Abu‐Tarboush, Hamza M, et al (1997) "Some nutritional and functional properties of karkade (Hibiscus sabdariffa) seed products." Ademiluyi, A O and G Oboh (2013) "Aqueous extracts of Roselle (Hibiscus sabdariffa Linn.) varieties inhibit α-amylase and α-glucosidase activities in vitro." J Med Food Bae, In Young, et al (2017) "Optimized preparation of anthocyanin-rich extract from black rice and its effects on in vitro digestibility." 26: 1415-1422 Bridle, P 퐴 and CF %J Food chemistry Timberlake (1997) "Anthocyanins as natural food colours—selected aspects." Brouillard, R, et al (1993) "Polyphenols and pigmentation in plants." Brouk, Bohuslav (1975) Plants consumed by man, Academic Press Inc.(London) Ltd 21 Chewonarin, T, et al (1999) "Effects of roselle (Hibiscus sabdariffa Linn.), a Thai medicinal plant, on the mutagenicity of various known mutagens in Salmonella typhimurium and on formation of aberrant crypt foci induced by the colon carcinogens azoxymethane and 2-amino-1-methyl-6-phenylimidazo [4, 5-b] pyridine in F344 rats." 37: 591-601 Dahiru, D, et al (2003) "Effect of Hibiscus sabdariffa calyx extract on carbon tetrachloride induced liver damage." Francis, Frederick John, et al (1989) "Food colorants: anthocyanins." 28(4): 273314 Ghasemzadeh, Ali, et al (2018) "Optimization of flavonoid extraction from red and brown rice bran and evaluation of the antioxidant properties." Harborne, JB %J Plant pigments (1988) "The flavonoids: recent advances." Harborne, Jeffrey B, et al (2013) The flavonoids, Springer Herrera-Arellano, A, et al (2004) "Effectiveness and tolerability of a standardized extract from Hibiscus sabdariffa in patients with mild to moderate hypertension: a controlled and randomized clinical trial." Jaafar, Nurjamalina Fasihah, et al (2020) "Optimum extraction condition of Clitorea ternatea flower on antioxidant activities, total phenolic, total flavonoid and total anthocyanin contents." 31: Khazaei, K Mahdavee, et al (2016) "Optimization of anthocyanin extraction from saffron petals with response surface methodology." 9(7): 1993-2001 Kong, Jin-Ming, et al (2003) "Analysis and biological activities of anthocyanins." Mahadevan, N and Pradeep Kamboj (2009) "Hibiscus sabdariffa Linn.–an overview." Mat Isa, A, et al (1985) "Analisis kimia dan pemprosesan roselle (Hibiscus sabdariffa L.)." Mat Isa, A, et al (1985) "Analisis kimia dan pemprosesan roselle (Hibiscus sabdariffa L.)." 13: 68-74 Mazza, G, et al (1993) "Introduction pp 1-28." Morton, J and FL %J Fruits of warm climates Editor: JF Morton Miami, Miami, Florida, USA (1987) "Tamarind in: fruits of warm climates." 22 Omobuwajo, TO, et al (2000) "Physical properties of sorrel (Hibiscus sabdariffa) seeds." Peng, Chiung-Huei, et al (2011) "Hibiscus sabdariffa polyphenolic extract inhibits hyperglycemia, hyperlipidemia, and glycation-oxidative stress while improving insulin resistance." Robert, SM (2005) "Roselle production: Botanical description." Wrolstad, RE %J Journal of Food Science (2004) "Anthocyanin pigments— Bioactivity and coloring properties." Wrolstad, Ronald E (1976) "Color and pigment analyses in fruit products." 23 PHỤ LỤC Cách pha dung dịch đệm Chuẩn bị dung dịch đệm kali clorua 0,025 M (pH = 1): cân 1,86 g KCl cho vào cốc thủy tinh, bổ sung nước cất đến khoảng 980 mL Điều chỉnh pH dung dịch đệm ± 0,05 băng dung dịch HCl (khoảng 6,3 mL) Cho vào bình định mức L bổ sung nước cất đến vạch Chuẩn bị dung dịch đệm natri acetate 0,4 M (pH = 4,5): cân 54,43 g CH3 CO2 Na.3H2O cho vào cốc thủy tinh, bổ sung nước cất đến khoảng 980 mL Điều chỉnh pH dung dịch đệm 4,5 ± 0,05 băng dung dịch HCl (khoảng 6,3 mL) Cho vào bình định mức L bổ sung nước cất đến vạch Hình ảnh q trình thí nghiệm Hình ảnh bã bụp giâm sau khi sây khơ xay nhỏ 24 Hình ảnh hỗn hợp bã bụp giâm dung môi ethanol sau ly tâm Hình ảnh dịch anthocyanin bổ sung dung dịch đệm đem đo OD Kêt xử lý ANOVA cho thí nghiệm Thí nghiệm 1: Khảo sát ảnh hưởng nồng độ ethanol đên trình tách chiêt Anthocyanin Nồng độ ethanol (%) 20 20 20 20 pH 520 nm 700nm 0,409 0,003 0,434 0,003 0,53 0,069 0,454 0,003 pH 4,5 520 nm 700 nm 0,067 0,004 0,062 0,003 0,004 0,001 0,064 0,003 25 Hàm lượng Anthocyanin (%) 0,390429139 0,436671657 0,465955015 0,457800931 40 40 40 40 60 60 60 60 80 80 80 80 99 99 99 99 0,618 0,639 0,74 0,659 0,738 0,715 0,858 0,735 0,6195 0,671 0,681 0,677 0,196 0,356 0,4 0,386 Summary Statistics for so lieu % Anthocyanin Count Average 0,43775 20 0,665 40 60 0,864 0,72925 80 tuyet doi 0,352 20 Total 0,6096 0,006 0,003 0,116 0,003 0,002 0,006 0,123 0,006 0,022 0,035 0,113 0,035 0,044 0,07 0,02 0,07 0,063 0,072 0,003 0,073 0,09 0,068 0,005 0,07 0,152 0,104 0,013 0,105 0,029 0,053 0,023 0,054 Standard deviation 0,0341016 0,0177951 0,0148549 0,0519254 0,119992 0,201097 ANOVA Table for so lieu by % Anthocyanin Source Sum of Squares Df Mean Square 0,711979 Between groups 0,177995 0,0563835 Within groups 15 0,0037589 0,768363 Total (Corr.) 19 0,003 0,004 0,002 0,004 0,005 0,004 0,008 0,004 0,035 0,022 0,018 0,022 0,012 0,028 0,006 0,028 Coeff of variation 7,79019% 2,67596% 1,71931% 7,12039% 34,0885% 32,9884% F-Ratio 47,35 0,647964394 0,666745971 0,655676799 0,689049093 0,879959551 0,848905921 0,854379495 0,872596319 0,6665859 0,768550653 0,703563306 0,775487031 0,177677984 0,371362993 0,44571288 0,412625547 Minimum 0,39 0,648 0,849 0,667 0,178 0,178 Maximum 0,466 0,689 0,88 0,775 0,446 0,88 Range 0,076 0,041 0,031 0,108 0,268 0,702 P-Value 0,0000 Multiple Range Tests for so lieu by % Anthocyanin Method: 95,0 percent LSD % Anthocyanin Count tuyet doi 20 40 80 60 Mean 0,352 0,43775 0,665 0,72925 0,864 Homogeneous Groups X X X X X Thí nghiệm 2: Khảo sát ảnh hưởng thời gian chiêt đên trình tách chiêt anthocyanin từ bã bụp giâm Nồng độ ethanol (%) 30p 30p 30p 30p pH 520 nm 700nm 0,452 0,003 0,43 0,003 0,518 0,069 0,431 0,003 pH 4,5 520 nm 700 nm 0,062 0,004 0,063 0,003 0,003 0,001 0,064 0,003 26 Hàm lượng Anthocyanin (%) 0,445066452 0,430802414 0,454763956 0,430802414 Stnd skewness -1,07095 0,791122 0,0747258 -0,370234 -1,32444 -0,673059 60p 60p 60p 60p 90p 90p 90p 90p 120p 120p 120p 120p 150p 150p 150p 150p Summary Statistics for Ket qua Thoi gian Count Average 30 0,440558 60 0,662639 90 0,904006 120 0,771595 150 0,680015 Total 20 0,691763 0,657 0,628 0,728 0,635 0,735 0,724 0,94 0,771 0,639 0,661 0,778 0,672 0,587 0,592 0,56 0,586 0,006 0,003 0,116 0,003 0,002 0,006 0,123 0,006 0,022 0,035 0,114 0,035 0,045 0,08 0,02 0,07 Standard deviation 0,0117134 0,021589 0,0382076 0,0356922 0,0253379 0,157944 ANOVA Table for Ket qua by Thoi gian Source Sum of Squares Df 0,462042 Between groups 0,0119372 15 Within groups 0,473979 19 Total (Corr.) 0,063 0,072 0,003 0,073 0,08 0,069 0,005 0,07 0,102 0,104 0,012 0,106 0,032 0,054 0,023 0,054 Coeff of variation 2,65878% 3,25803% 4,22648% 4,62577% 3,72608% 22,8321% Mean Square 0,11551 0,000795811 F-Ratio 145,15 Multiple Range Tests for Ket qua by Thoi gian Method: 95,0 percent LSD Thoi gian Count Mean 30 0,440558 60 0,662639 0,680015 150 0,771595 120 90 0,904006 0,003 0,003 0,002 0,004 0,004 0,005 0,008 0,003 0,019 0,022 0,018 0,022 0,015 0,029 0,006 0,025 Homogeneous Groups X X X X X 27 Minimum 0,431051 0,643331 0,860155 0,740915 0,642033 0,431051 P-Value 0,0000 0,693744487 0,652659788 0,64304739 0,660876728 0,888069777 0,86075112 0,949310549 0,918660982 0,740805142 0,754677898 0,822665646 0,767163378 0,690969936 0,69292635 0,642170348 0,69292635 Maximum 0,455071 0,693298 0,949092 0,822503 0,693318 0,949092 Range 0,0240194 0,0499668 0,0889368 0,0815886 0,0512847 0,518041 Stnd skewness 0,484297 1,13037 0,0639039 1,17836 -1,62677 -0,54066 ... bụp giấm hạn chế Việc khảo sát yếu tố ảnh hưởng đến việc tách chiết anthocyanin từ bã bụp giấm chưa thực Chính vậy, đề tài “ Khảo sát ảnh hưởng yếu tố đến trình trích ly Anthocyanin từ bã bụp giấm? ??... Mục tiêu đề tài: Xác định số yếu tố có ảnh hưởng đến q trình trích ly anthocyanin từ bã bụp giấm Nội dung nghiên cứu -Khảo sát ảnh hưởng nồng độ ethanol đến trình tách chiết -Khảo sát ảnh hưởng. .. THỰC PHẨM TP HCM KHOA SINH HỌC VÀ MÔI TRƯỜNG ĐỒ ÁN CHUYÊN NGÀNH ĐỀ TÀI: KHẢO SÁT CÁC YẾU TỐ ẢNH HƯỞNG ĐẾN Q TRÌNH TRÍCH LY ANTHOCYANIN TỪ BÃ BỤP GIẤM Giảng viên hướng dẫn: ThS Huỳnh Phan Phương