Thuốc thử xét nghiệm định lượng Digoxin

Thuốc thử xét nghiệm định lượng Digoxin 11820796500V5.0 Elecsys Digoxin cobas e 411 11820796190 11820796500 cobas e 601 100 cobas e 602 Tiếng Việt Thông tin hệ thống Cho máy phân tích cobas e 411: mã số xét nghiệm 620 Cho máy phân tích cobas e 601 cobas e 602: Mã số ứng dụng 115 Mục đích sử dụng Xét nghiệm miễn dịch in vitro dùng để định lượng digoxin huyết huyết tương người Xét nghiệm dùng chẩn đoán điều trị liều digoxin theo dõi nồng độ digoxin để đảm bảo chế độ điều trị phù hợp Xét nghiệm miễn dịch điện hóa phát quang “ECLIA” dùng cho máy xét nghiệm miễn dịch Elecsys cobas e Tóm tắt Digoxin glycoside tim steroid kê toa rộng rãi Digoxin hoạt động cách gắn kết ức chế Na+/K+-ATPase dẫn đến tăng nồng độ Ca2+ tế bào.1,2 Điều dẫn đến tăng co bóp tim, tác dụng làm cho digoxin loại thuốc có lợi cho suy tim Digoxin cải thiện sức co bóp tim dẫn đến tác dụng có lợi cung lượng tim tăng, phân suất tống máu thất trái tăng áp suất mặt cắt mao mạch phổi giảm.3,4 Điều trị digoxin làm nhịp thất chậm ổn định.5 Mặc dù sinh khả dụng digoxin dạng tinh thể cho phép chuẩn hóa liều dùng, việc dùng thuốc vơ tình song thường xun, dẫn đến ngộ độc thuốc Quan trọng hơn, triệu chứng ngộ độc digoxin thường giống loạn nhịp tim mà trường hợp digoxin lại thuốc định Nồng độ digoxin huyết tương huyết 0.9‑2.0 ng/mL xem khoảng có tác dụng trị liệu.6,7 Tuy nhiên, nghiên cứu sau ghi nhận nguy tử vong tăng lên với nồng độ digoxin 1.2 ng/mL cao hơn.8,9 Hướng dẫn AHA/ACC năm 2013 khuyến cáo liều digoxin đạt nồng độ thuốc huyết tương khoảng 0.5 đến 0.9 ng/mL, cho thấy chứng giới hạn có độc tính rõ ràng digoxin thường liên quan tới nồng độ digoxin huyết > 2 ng/mL.10 Ngộ độc digoxin nhiều yếu tố: Thuốc có khoảng trị liệu hẹp (nghĩa là, có chênh lệch nhỏ nồng độ trị liệu nồng độ gây độc tính mơ); Đáp ứng với digoxin khác cá thể; Sự hấp thu digoxin biến thiên khoảng gấp đôi với nhiều dạng viên nén khác nhau;11,12 Sự nhạy cảm với nhiễm độc digitalis biểu tăng theo tuổi chủ yếu liên quan đến suy thận.4,13 Cùng với kiện lâm sàng khác, việc theo dõi nồng độ huyết tương hay huyết cung cấp cho bác sĩ điều trị thông tin hữu ích giúp điều chỉnh liều bệnh nhân, đạt hiệu điều trị tối ưu, tránh trường hợp nồng độ khoảng điều trị nồng độ gây độc.14 Xét nghiệm Elecsys Digoxin dựa theo nguyên lý xét nghiệm cạnh tranh sử dụng kháng thể đơn dòng đặc hiệu kháng trực tiếp digoxin Digoxin có mẫu cạnh tranh với dẫn xuất digoxin đánh dấu biotin thêm vào vị trí gắn kết kháng thể đánh dấu phức hợp rutheniuma) a) Tris(2,2'-bipyridyl)ruthenium(II)-complex (Ru(bpy) ) Nguyên lý xét nghiệm Nguyên lý cạnh tranh Tổng thời gian xét nghiệm: 18 phút ▪ Thời kỳ ủ đầu tiên: Bằng cách ủ mẫu (10 µL) với kháng thể đặc hiệu kháng digoxin đánh dấu ruthenium, phức hợp miễn dịch thành lập, lượng phức hợp tạo tỷ lệ với nồng độ chất phân tích có mẫu 2020-11, V 5.0 Tiếng Việt ▪ Thời kỳ ủ thứ hai: Sau thêm vi hạt phủ streptavidin dẫn xuất digoxin đánh dấu biotin, vị trí chưa gắn kết kháng thể đánh dấu ruthenium bị chiếm giữ, hình thành phức hợp kháng thểhapten Tồn phức hợp trở nên gắn kết với pha rắn thông qua tương tác biotin streptavidin ▪ Hỗn hợp phản ứng được chuyển tới buồng đo, vi hạt đối từ được bắt giữ bề mặt điện cực Những thành phần không gắn kết bị thải buồng đo dung dịch ProCell/ProCell M Cho điện áp vào điện cực tạo nên phát quang hóa học được đo khuếch đại quang tử ▪ Các kết xác định thông qua đường chuẩn xét nghiệm máy tạo nên xét nghiệm 2‑điểm chuẩn thông tin đường chuẩn qua mã vạch hộp thuốc thử mã vạch điện tử Thuốc thử - dung dịch tham gia xét nghiệm Bộ thuốc thử dán nhãn DIGO M Vi hạt phủ Streptavidin (nắp trong), 1 chai, 6.5 mL: Vi hạt phủ Streptavidin 0.72 mg/mL; chất bảo quản R1 Anti-digoxin-Ab~Ru(bpy) (nắp xám), 1 chai, 10 mL: Kháng thể đơn dòng kháng digoxin (chuột) đánh dấu phức hợp ruthenium 15 µg/L; đệm phosphate 100 mmol/L, pH 7.0; chất bảo quản R2 Digoxin-derivative~biotin (nắp đen), 1 chai, 10 mL: Digoxigenin đánh dấu biotin 1.06 ng/mL; biotin 15 µg/L; đệm phosphate 100 mmol/L, pH 7.0; chất bảo quản Thận trọng cảnh báo Sử dụng chuyên viên y tế chẩn đoán in vitro Áp dụng cảnh báo thông thường cần thiết cho việc xử lý loại thuốc thử phịng thí nghiệm Chất thải lây nhiễm nhiễm khuẩn: Cảnh báo: xử lý chất thải vật liệu có tiềm nguy hiểm mặt sinh học Loại bỏ chất thải tuân theo hướng dẫn quy trình chấp thuận phịng xét nghiệm Tác hại mơi trường: Áp dụng tất quy định xử lý phù hợp địa phương để xác định cách loại bỏ an toàn Bảng liệu an tồn hóa chất có sẵn để cung cấp cho chuyên viên sử dụng có yêu cầu Hộp chứa thành phần xếp loại theo Quy định (EC) Số 1272/2008: Cảnh báo H317 Có thể gây phản ứng dị ứng da Phịng tránh: P261 Tránh hít bụi/hơi khói/khí/sương mù/hơi/bụi phun P272 Quần áo làm việc bị nhiễm không phép mang khỏi nơi làm việc P280 Đeo găng tay bảo vệ 1/6 Digitally signed by CÔNG TY TNHH ROCHE VIỆT NAM Date: 2021.08.26 21:47:59 +07'00' 11820796500V5.0 Elecsys Digoxin Xử trí: P333 + P313 Nếu bị kích ứng da phát ban: Tìm tư vấn y tế/chăm sóc y tế P362 + P364 Cởi bỏ trang phục bị nhiễm giặt rửa trước sử dụng lại Xử lý: P501 Xử lý thành phần/dụng cụ chứa nhà máy xử lý chất thải chấp thuận Nhãn an toàn sản phẩm theo hướng dẫn GHS Châu Âu Số điện thoại liên lạc: tất quốc gia: +49-621-7590 Tránh để dung dịch thuốc thử mẫu (mẫu xét nghiệm, mẫu chuẩn mẫu chứng) bị tạo bọt Sử dụng thuốc thử Các thuốc thử hộp đựng chai sẵn sàng để sử dụng tách riêng Máy phân tích tự động đọc mã vạch nhãn thuốc thử ghi nhận tất thông tin cần thiết cho việc chạy thuốc thử Bảo quản độ ổn định Bảo quản 2‑8 °C Tuổi thọ theo nghiên cứu độ ổn định: 18 tháng Không trữ đông Hạn dùng lô: xem nhãn gốc Đặt hộp thuốc thử Elecsys theo hướng thẳng đứng nhằm đảm bảo tính hữu dụng tồn vi hạt trộn tự động trước sử dụng Độ ổn định: chưa mở nắp 2‑8 °C đến ngày hết hạn sử dụng sau mở để 2‑8 °C 12 tuần máy phân tích 8 tuần Lấy chuẩn bị mẫu Mẫu máu để phân tích digoxin nên lấy nồng độ đáy trước uống liều 12 giờ, tốt 24 sau liều digoxin trước Lưu ý thời gian bán thải digoxin máu 1.5 ngày, nồng độ máu tình trạng ổn định cần khoảng tuần sau bắt đầu điều trị - kéo dài trường hợp bất thường chức thận.15 Chỉ mẫu liệt kê thử nghiệm chấp nhận Huyết lấy cách sử dụng ống chuẩn lấy mẫu ống chứa gel tách Huyết tương chống đơng Liheparin, K2‑EDTA K3‑EDTA Có thể sử dụng ống huyết tương chống đông Li‑heparin‑ chứa gel tách Tiêu chuẩn: Hệ số góc 0.9‑1.1 + tung độ gốc khoảng  0.8‑4.0 ng/mL (> 1.02‑5.12 nmol/L) độ lệch ≤ 10 % Cho nồng độ > 4.0 ng/mL (> 5.12 nmol/L) độ lệch ≤ 12 % Ở bệnh nhân dùng liều cao biotin (nghĩa > 5 mg/ngày), không nên lấy mẫu 8 giờ sau dùng liều biotin cuối Hợp chất dược phẩm Thử nghiệm in vitro tiến hành 16 loại dược phẩm thường sử dụng Không có tượng nhiễu tới xét nghiệm Ngồi cịn thử nghiệm thuốc tim mạch đặc biệt sau Không có tượng nhiễu tới xét nghiệm Thuốc tim mạch đặc biệt Thuốc Carvedilol 2020-11, V 5.0 Tiếng Việt Nồng độ thử nghiệm mg/L 37.5 Nồng độ thử nghiệm mg/L Clopidogrel 75.0 Epinephrine (adrenaline) 0.50 Insulin 1.60 Lidocaine 80.0 Lisinopril 10.0 Methylprednisolone 7.50 Metoprolol 150 Nifedipine 30.0 Phenprocoumon 3.00 Propafenone 300 Reteplase 33.3 Simvastatin 30.0 Spironolactone 15.0 Tolbutamide 1500 Torasemide 15.0 Verapamil 240 Spironolactone xác định nguyên nhân gây giá trị digoxin cao giả vượt nồng độ đề cập bảng bên Hydrocortisone xác định nguyên nhân gây giá trị digoxin cao giả nồng độ (thuốc) 10 mg/L Uzara, nabumetone, pentoxifylline canrenone xác định gây giá trị digoxin cao giả nồng độ liều hàng ngày khuyến cáo Các chất có hoạt tính miễn dịch kiểu digoxin (DLIS) tìm thấy máu bệnh nhân suy thận, suy gan phụ nữ có thai ba tháng cuối Các nghiên cứu cho thấy diện DLIS mẫu gây tăng giả digoxin xét nghiệm xét nghiệm miễn dịch có thị trường.16,17,18 Theo thông báo nhà sản xuất chất giải độc digitalis, phân đoạn kháng thể trị liệu kháng digitalis (như DigiFab, DigiBind) ảnh hưởng đến kết đo xét nghiệm miễn dịch digitalis.19 Vì vậy, nhà sản xuất DigiFab khuyến cáo lấy mẫu để xác định nồng độ digoxin trước sử dụng thuốc giải độc.19 Kết nồng độ Elecsys Digoxin cao giả đo có diện chất giải độc phân mảnh Fab thải trừ khỏi thể.19 Trong số trường hợp, nhiễu xảy nồng độ kháng thể kháng kháng thể đặc hiệu kháng chất phân tích, kháng streptavidin hay ruthenium cao mẫu phẩm phân tích Xét nghiệm thiết kế phù hợp để giảm thiểu hiệu ứng Với mục tiêu chẩn đoán, kết xét nghiệm cần đánh giá kèm theo bệnh sử, thăm khám lâm sàng phát khác Giới hạn đo khoảng đo Khoảng đo 0.2‑5.0 ng/mL hay 0.26‑6.4 nmol/L (được xác định giới hạn phát mức tối đa đường chuẩn) Giá trị giới hạn phát ghi nhận  6.4 nmol/L (hoặc lên đến 10.0 ng/mL 12.8 nmol/L cho mẫu pha loãng 2 lần) Giới hạn phương pháp đo Giới hạn mẫu trắng, Giới hạn phát Giới hạn định lượng Giới hạn mẫu trắng = 0.15 ng/mL (0.19 nmol/L) Giới hạn phát = 0.2 ng/mL (0.26 nmol/L) Giới hạn định lượng = 0.4 ng/mL (0.51 nmol/L) Giới hạn mẫu trắng, Giới hạn phát Giới hạn định lượng xác định theo quy định EP17‑A2 CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute: Viện Tiêu chuẩn Lâm sàng Phịng thí nghiệm) Giới hạn mẫu trắng giá trị phân vị thứ 95 thu từ việc đo số mẫu n ≥ 60 mẫu khơng chứa chất phân tích, xác định qua số loạt chạy độc lập Giới hạn mẫu trắng tương ứng với nồng độ mà 3/6 11820796500V5.0 Elecsys Digoxin khoảng mẫu khơng chứa chất phân tích phát với xác suất 95 % Giới hạn phát xác định dựa giới hạn mẫu trắng độ lệch chuẩn mẫu thử có nồng độ thấp Giới hạn phát tương ứng với nồng độ chất phân tích thấp phát (giá trị lớn giới hạn mẫu trắng với xác suất 95 %) Giới hạn định lượng nồng độ chất phân tích thấp mẫu định lượng xác với sai số chấp nhận ≤ 20 % Máy phân tích cobas e 411 Độ lặp lại Pha lỗng Mẫu thử có nồng độ digoxin khoảng đo pha lỗng Diluent Universal Tỷ lệ pha loãng khuyến cáo 1:2 (pha loãng tự động máy tay) Nồng độ mẫu sau pha loãng phải > 2.5 ng/mL > 3.2 nmol/L Sau pha lỗng thủ cơng, nhân kết với hệ số pha lỗng Sau pha lỗng máy phân tích, phần mềm tự động đưa hệ số pha loãng vào tính tốn nồng độ mẫu Giá trị sinh học Khoảng trị liệu khuyến cáo digoxin 0.6‑1.2 ng/mL (0.77‑1.5 nmol/L) (Hướng dẫn ESC 200820) 0.5‑1.0 ng/mL (0.64‑1.3 nmol/L).21 Đặc biệt giới hạn khoảng điều trị tranh luận nồng độ lên đến 2.0 ng/mL (2.6 nmol/L) áp dụng.6,7 Nồng độ > 2.0 ng/mL thường xem độc tính.10,22 Vì vậy, chẩn đốn lâm sàng phải dựa liệu lâm sàng kết xét nghiệm Mỗi phòng xét nghiệm nên thiết lập mẫu định dạng báo cáo kết chấp nhận thống quy trình báo cáo kết bất thường Mỗi phịng xét nghiệm nên nghiên cứu tính chuyển đổi giá trị sinh học theo quần thể bệnh nhân cần nên xác định khoảng tham chiếu riêng Độ xác trung gian Mẫu Trung bình ng/mL SD ng/mL CV % SD ng/mL CV % Huyết người 1 0.565 0.019 3.4 0.036 6.4 Huyết người 2 1.09 0.027 2.5 0.063 5.8 Huyết người 3 1.85 0.039 2.1 0.083 4.5 Huyết người 4 2.38 0.055 2.3 0.092 3.8 Huyết người 5 4.67 0.119 2.5 0.299 6.4 PC CARDII1 1.20 0.035 2.9 0.051 4.3 PC CARDII2 2.74 0.102 3.7 0.111 4.1 Máy phân tích cobas e 601 cobas e 602 Độ lặp lại Độ xác trung gian Mẫu Trung bình nmol/L SD nmol/L CV % SD nmol/L CV % Huyết người 1 0.712 0.045 6.3 0.058 8.2 Huyết người 2 1.36 0.038 2.8 0.058 4.3 Huyết người 3 2.33 0.058 2.5 0.084 3.6 Huyết người 4 2.94 0.069 2.4 0.111 3.8 Dữ liệu đặc hiệu hiệu Dữ liệu hiệu máy phân tích trình bày Kết thực phịng thí nghiệm khác khác Huyết người 5 5.49 0.147 2.7 0.276 5.0 PC CARDII1 1.55 0.037 2.4 0.056 3.6 Độ xác Độ xác xác định với việc sử dụng thuốc thử Elecsys, mẫu mẫu chứng theo đề cương (EP05‑A3) CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute - Viện Tiêu chuẩn Lâm sàng Phịng thí nghiệm): 2 xét nghiệm cho mẫu lần chạy, 2 lần chạy ngày, 21 ngày (n = 84) Kết thu trình bày đây: PC CARDII2 3.50 0.047 1.3 0.082 2.3 Máy phân tích cobas e 601 cobas e 602 Độ lặp lại Mẫu Trung bình ng/mL SD ng/mL CV % SD ng/mL CV % Huyết người 1 0.556 0.035 6.3 0.046 8.2 Huyết người 2 1.07 0.030 2.8 0.045 4.3 Huyết người 3 1.82 0.045 2.5 0.066 3.6 Máy phân tích cobas e 411 Độ lặp lại Độ xác trung gian Độ xác trung gian Mẫu Trung bình nmol/L SD nmol/L CV % SD nmol/L CV % Huyết người 4 2.29 0.054 2.4 0.087 3.8 Huyết người 1 0.724 0.025 3.4 0.046 6.4 Huyết người 5 4.29 0.115 2.7 0.216 5.0 Huyết người 2 1.39 0.035 2.5 0.080 5.8 PC CARDII1 1.21 0.029 2.4 0.044 3.6 Huyết người 3 2.37 0.049 2.1 0.106 4.5 PC CARDII2 2.74 0.037 1.3 0.064 2.3 Huyết người 4 3.05 0.071 2.3 0.117 3.8 Huyết người 5 5.98 0.152 2.5 0.382 6.4 PCb) CARDII1 1.54 0.045 2.9 0.066 4.3 PC CARDII2 3.51 0.131 3.7 0.143 4.1 Độ đặc hiệu phân tích Với chất đồng phân tích thử nghiệm, phản ứng tương đối chất đồng phân tích xảy thấy sau: Chất đồng phân tích Nồng độ ED50 ng/mL Tính phản ứng tương đối chất đồng phân tích % α-acetyldigoxin 1.18 77.9 β-acetyldigoxin 1.09 84.4 β-Methyldigoxin 1.05 87.9 Lanatoside C 1.31 65.2 Deslanoside 1.08 85.6 b) PC = PreciControl 4/6 2020-11, V 5.0 Tiếng Việt 11820796500V5.0 Elecsys Digoxin Chất đồng phân tích Nồng độ ED50 ng/mL Tính phản ứng tương đối chất đồng phân tích % Digoxigenin-bisdigitoxoside 0.853 108 Digoxigenin-monodigitoxoside 0.603 141 Với chất thử nghiệm, phản ứng chéo xảy với chất sau: Chất Nồng độ thử nghiệm ng/mL Phản ứng chéo % 250 0.522 Digitoxigenin 250 0.529 Digoxigenin 6.00 31.3 Dihydrodigoxin 1000 0.201 K-strophanthine 1250 0.137 Digitoxin Khơng có phản ứng chéo có ý nghĩa (< 0.01%) ghi nhận chất sau (nồng độ thử nghiệm 5000 ng/mL); (Cortisol 10000 ng/mL): Cortisol, prednisone, β‑estradiol, d‑aldosterone, DHEA, dexamethasone, furosemide, sulthiame, quinidine (dạng bazơ tự do) oleandrin Đối với testosterone ouabain phản ứng chéo