CH Ấ T LI Ệ U - ĐỐI TƯỢ NG - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨ U
Ch ấ t li ệ u nghiên c ứ u
- ACNECA được bào chế dạng cốm tan hạt nhỏ màu nâu đồng, vị đắng thơm mùi dược liệu, đóng gói màng thiếc bạc, mỗi gói chứa 6gram cốm tan
- ACNECA được sản xuất tại khoa Dược - Bệnh viện Y học cổ truyền Trung ương.
-Tất cả dược liệu đạt tiêu chuẩn dược điển Việt Nam IV hoặc dược điển Trung Quốc 2009 và chế phẩm ACNECA tiêu chuẩn đạt tiêu chuẩn cơ sở
-Liều lâm sàng: 0,12g/kg/ngày
-Cách dùng: Hòa tan 6gram cốm tan ACNECA vào 300ml nước cất hoặc nước lọc trước khi uống, có thể uống trước trong và sau khi ăn.
2.2 Đối tượng - Địa điểm – Thời gian nghiên cứu
2.2.1 Xác định độ c tính c ấp, bán trườ ng di ễ n và tác d ụng điề u tr ị b ệ nh tr ứ ng cá c ủ a ACNECA trên th ự c nghi ệ m 2.2.1.1 Xác định độc tính cấp, bán trường diễn
- Xác định độc tính cấp: 60 con chuột nhắt trắng chủng Swiss, cả hai giống, khoẻ mạnh, trọng lượng 20 ± 2g do Viện Vệ sinh Dịch tễ Trung ương cung cấp
Nghiên cứu xác định độc tính bán trường diễn được thực hiện trên 30 con chuột cống trắng chủng Wistar khỏe mạnh, mỗi con có trọng lượng khoảng 160g ± 20g, được cung cấp bởi Trung tâm động vật thí nghiệm Đan Phượng - Hà Tây.
-Nghiên cứu xác định độc tính cấp, bán trường diễn được tiến hành tại
Bộmôn Dược Lý trường Đại học Y Hà Nội từ tháng 3 năm 2016 đến tháng 8 năm 2016.
2.2.1.2 Tác dụng điều trị bệnh trứng cá
-Tác dụng kháng khuẩn: Các chủng vi khuẩn C acnes ATCC 6919 (C acnes), Staphylococcus aureus ATCC 25925 (S aureus), Staphylococcus epidermidis ATCC 12228 (S epidermidis) sản xuất bởi hãng Microbiologics -
Mỹ sở hữu chứng chỉ ATCC (American Type Culture Collection), một ngân hàng chủng chuẩn uy tín Vào tháng 2 năm 2019, vi khuẩn đã được nuôi cấy và tiến hành thí nghiệm tại Khoa Vi khuẩn thuộc Viện Vệ sinh Dịch tễ Trung ương.
Nghiên cứu về tác dụng chống viêm được thực hiện trên mô hình phù tai chuột, sử dụng 80 con chuột nhắt trắng chủng Swiss, khỏe mạnh, trọng lượng 25 ± 2g, do Viện Vệ sinh Dịch tễ Trung ương cung cấp Thí nghiệm diễn ra tại Bộ môn Dược Lý, trường Đại học Y Hà Nội vào tháng 2 năm 2019.
Nghiên cứu tác dụng điều trị trên mô hình trứng cá động vật được thực hiện với 70 con chuột cống trắng Wistar giống đực trưởng thành, khỏe mạnh, từ 10 đến 12 tuần tuổi và trọng lượng từ 180g đến 220g Các mẫu chuột này được cung cấp bởi Trung tâm cung cấp động vật thí nghiệm Đan Phượng - Hà Tây và nghiên cứu được tiến hành tại Bộ môn Dược.
Lý trường Đại học Y Hà Nội từ tháng 7 năm 2017đến tháng 10 năm 2017
2.2.2 Đánh giá hiệ u qu ả c ủa ACNECA trên lâm sàng trong điề u tr ị b ệ nh tr ứng cá thông thườ ng m ức độ v ừ a
- Tiêu chuẩn lựa chọn đối tượng nghiên cứu:
+ 100 bệnh nhân được chẩn đoán trứng cá thể thông thường, mức độ vừa (có tổng số nhân mụn từ 30 đến 125) và tương ứng với thể thấp nhiệt theo
Y học cổ truyền (da bóng nhờn, chủ yếu sẩn đỏ, mụn mủ, đau, miệng hôi, táo bón, tiểu vàng, lưỡi đỏ, rêu vàng nhớt, mạch hoạt sác) [125],[44],[84]
+ Đồng ý, tự nguyện tham gia nghiên cứu
+ Bệnh nhân ≥15 tuổi (nếu từ 15 - 18 tuổi phải được sự đồng ý của bố mẹ hoặc người giám hộ)
+ Phụ nữ có thai hoặc đang cho con bú + Dịứng với bất cứ thành phần nào của thuốc
+ Suy giảm nghiêm trọng chức năng gan, thận, rối loạn lipid máu, đái tháo đường, loãng xương, trầm cảm
+ Không tuân thủ liệu trình điều trị
Nghiên cứu được thực hiện tại Bệnh viện Da liễu Trung ương và Bệnh viện Y học cổ truyền Trung ương trong khoảng thời gian từ tháng 3 năm 2018 đến tháng 2 năm 2019, với đối tượng là bệnh nhân được khám và điều trị ngoại trú.
Phương tiệ n và trang thi ế t b ị nghiên c ứ u
2.3.1 Xác định độ c tính c ấp, bán trườ ng di ễ n và tác d ụng điề u tr ị b ệ nh tr ứ ng cá c ủ a ACNECA trên th ự c nghi ệ m 2.3.1.1 Xác định độc tính cấp, bán trường diễn
-Xác định độc tính cấp: Kim đầu tù, cốc chia vạch, kim tiêm 1 ml, cân điện tử nhãn hiệu của hãng YMC.Co.Ltd Nhật Bản
Để xác định độc tính bán trường diễn, cần sử dụng các thiết bị như kim đầu tù, cốc chia vạch, kim tiêm 1ml, và cân điện tử của hãng YMC.Co.Ltd Nhật Bản Việc định lượng các enzym và chất chuyển hoá trong máu như alanin aminotransferase (ALT), aspartat aminotransferase (AST), bilirubin toàn phần, albumin, cholesterol toàn phần và creatinin được thực hiện bằng kit của Hospitex Diagnostics (Italy) và DIALAB GmbH (Áo) trên máy sinh hóa bán tự động Erba của Ấn Độ Ngoài ra, các dung dịch xét nghiệm máu của hãng Exigo được định lượng trên máy Exigo - Boule Medical AB của Thụy Điển, cùng với các hóa chất xét nghiệm và làm tiêu bản mô bệnh học.
2.3.1.2 Tác dụng điều trị bệnh trứng cá
Brain heart infusion broth (BHI broth) produced by Oxoid Microbiology Product in the UK, with code dPA-255509.05, is an effective antibacterial medium Additionally, BDTM Brucella Blood Agar with Hemin and Vitamin K1BD from Japan (code PA-255509.05) supplemented with 5% sheep blood is utilized for microbial studies Essential laboratory equipment includes petri dishes, test tubes, pipettes, plastic tips, test tube racks, and tools for determining Minimum Bactericidal Concentration (MIC), such as a stainless steel 32-well tray and dipper Furthermore, a Class II biosafety cabinet, anaerobic culture incubator, and anaerobic indicators are critical for ensuring safe and effective microbial research.
Dầu croton, sản phẩm từ Hãng Sigma - Đức, đã được nghiên cứu với tác dụng chống viêm trên mô hình phù tai chuột Nghiên cứu sử dụng dung môi aceton, pipet, đầu típ, kim đầu tù, cốc chia vạch, và compa điện tử đo ngoài với độ chia nhỏ nhất 0,01mm Để thực hiện lấy mẫu, thiết bị kim loại sinh thiết (biopsy punch) có đường kính 7 mm và cân điện tử với độ chia nhỏ nhất 0,001g cũng được sử dụng.
Trong nghiên cứu điều trị trên mô hình trứng cá động vật, các dụng cụ cần thiết bao gồm bơm kim tiêm 1ml với kim đầu tù, dung môi PBS từ công ty Bio-rad – Singapore, và compa điện tử có khả năng đo từ 0-10mm với độ chia nhỏ nhất 0,01mm Ngoài ra, thiết bị kim loại sinh thiết (biopsy punch) với đường kính 3mm cũng được sử dụng Các loại thuốc như viên nang Doxycycline 100mg và viên nang Isotretinoin 20mg dạng uống, cùng với các hóa chất dùng để xét nghiệm và làm tiêu bản mô bệnh học, là những thành phần quan trọng trong quá trình điều trị.
2.3.2 Đánh giá hiệ u qu ả c ủa ACNECA trên lâm sàng trong điề u tr ị b ệ nh tr ứng cá thông thườ ng m ức độ v ừ a Đánh giá hiệu quả điều trị trên người: Bệnh án nghiên cứu, máyvà hóa chất phân tích công thức máu, máyvà hóa chấtphân tích các chỉ số sinh hóa máu.
Thuốc đối chứng là viên nang mềm isotretinoin 20mg, được sản xuất tại Thái Lan Liều dùng lâm sàng khuyến cáo là 0,5mg/kg/ngày, uống một lần vào buổi tối sau bữa ăn Phụ nữ cần thực hiện biện pháp tránh thai trong suốt thời gian điều trị với isotretinoin.
Phương pháp nghiên cứ u
2.4.1 Xác định độ c tính c ấp, bán trườ ng di ễ n và tác d ụng điề u tr ị b ệ nh tr ứ ng cá c ủ a ACNECA trên th ự c nghi ệ m 2.4.1.1 Xác định độc tính cấp, bán trường diễn
Xác định độc tính cấp
-Thiết kế nghiên cứu theo phương pháp Litchfied - Wilcoxon [126]
-Cỡ mẫu và chọn mẫu: 60 con chuột nhắt trắng chủng Swiss, cả hai giống, khoẻ mạnh, trọng lượng 20 ± 2g được chia thành 6 lô khác nhau, mỗi lô 10 con
Trong nghiên cứu này, 60 con chuột nhắt trắng được nhịn đói qua đêm và sau đó được cho uống ACNECA với liều lượng tăng dần từ 50g/kg/ngày đến 75g/kg/ngày, sử dụng kim cong đầu tù Mục tiêu là xác định liều thấp nhất gây chết 100% chuột và liều cao nhất không gây chết chuột, với mỗi con chuột nhận 0,2ml/10g trọng lượng cơ thể mỗi ngày.
Đo lường kết quả nghiên cứu bao gồm việc theo dõi tình trạng chung của chuột, các dấu hiệu nhiễm độc như nôn mửa, co giật, kích động và bài tiết, cũng như số lượng chuột chết trong vòng 72 giờ sau khi uống ACNECA Tất cả chuột chết sẽ được mổ để đánh giá tổn thương đại thể, và từ đó xây dựng đồ thị tuyến tính nhằm xác định mối quan hệ giữa các chỉ tiêu này.
LD 50 của thuốc thử Chuột còn sống được tiếp tục theo dõi đến hết ngày thứ 14 sau khi uốngthuốc thử.
Xác định độc tính bán trường diễn
- Thiết kế nghiên cứu theo hướng dẫn Tổ chức Y tế Thế giới [127]
- Cỡ mẫu và chọn mẫu: 30 con chuột cống trắng chủng Wistar, cả hai giống khỏe mạnh, trọng lượng 160g ± 20g, được chia ngẫu nhiên làm 3 lô, mỗi lô 10 con
+ Lô 1 (Chứng sinh học) n: Uống nước cất 1ml/100g chuột/ngày
+ Lô 2 (ACNECA liều 0,72 g/kg/ngày) n: Uống ACNECA liều 0,72g/kg/ngày, tương đương với liều lâm sàng, tính theo hệ số 6, uống, 1ml/100g chuột/ngày
+ Lô 3 (ACNECA liều 2,16 g/kg/ngày) n: Uống ACNECA liều 2,16 g/kg/ngày liều gấp 3 liều lâm sàng, tính theo hệ số 6, uống 1ml/100g chuột/ngày
Chuột được uống nước cất hoặc ACNECA bằng kim cong đầu tù 90 ngày liên tục, mỗi ngày một lần vào buổi sáng
- Đo lường kết quả bằng các chỉ tiêu theo dõi trước và trong quá trình nghiên cứu bao gồm:
+ Tình trạng chung của chuột và cân nặng của chuột
Chức năng tạo máu được đánh giá qua các chỉ số như số lượng hồng cầu, hàm lượng hemoglobin, hematocrit, thể tích trung bình hồng cầu, số lượng bạch cầu, công thức bạch cầu và số lượng tiểu cầu.
+ Các chỉ số đánh giá chức năng gan thông qua định lượng hoạt độ enzym ALT và AST trong máu
+ Các chỉ số đánh giá chức năng thận thông qua định lượng nồng độ creatinin huyết thanh
+ Mô bệnh học bao gồm hình ảnh đại thể toàn thể các cơ quan và cấu trúc vi thể gan, thận
Các chỉ tiêu theo dõi được kiểm tra trước khi uống, sau 30, 60 và 90 ngày sử dụng nước cất hoặc thuốc thử Đặc biệt, chỉ tiêu mô bệnh học sẽ được đánh giá sau 90 ngày Trong quá trình này, chuột sẽ được mổ để quan sát đại thể toàn bộ các cơ quan và kiểm tra ngẫu nhiên cấu trúc vi thể gan, thận của 30% số chuột ở mỗi lô.
2.4.1.2 Tác dụng điều trị bệnh trứng cá
Nguyên tắc nghiên cứu vi khuẩn sử dụng đĩa thạch Brucella HK với các nồng độ thuốc thử khác nhau nhằm xác định nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) và nồng độ diệt khuẩn tối thiểu (MBC) MIC được xác định khi khuẩn lạc vi khuẩn thay đổi về hình thái hoặc giảm đáng kể về mật độ, trong khi MBC là nồng độ thấp nhất tại đó vi khuẩn bị tiêu diệt hoàn toàn, không còn sự phát triển nào.
Để tiến hành thí nghiệm, đầu tiên pha 8,544g thuốc thử vào 10 ml nước cất vô trùng để tạo ra dung dịch bậc 1 đồng nhất Tiếp theo, pha loãng dung dịch thuốc thử bậc 2 vào các ống nghiệm vô trùng khác nhau (1, 2, 4, 8, 16…) bằng nước cất vô trùng và đánh số thứ tự cho từng ống nghiệm theo độ pha loãng Cuối cùng, chuyển 1,5ml dung dịch dược chất sang đĩa petri vô trùng đã được đánh số với nồng độ và tên tương ứng.
Thêm 13,5ml thạch Brucella HK vào đĩa thạch đã chứa 1,5ml dược chất, sau đó lắc đều đĩa theo chuyển động tròn Đậy nắp đĩa thạch và để yên trong 15 phút cho đến khi thạch nguội.
Để tiến hành thí nghiệm, đầu tiên pha canh khuẩn với độ đục tương đương McFarland 0,5 (10^8 CFU/ml) và sau đó pha loãng 100 lần để đạt nồng độ 10^6 CFU/ml Nhỏ canh khuẩn này vào các giếng của khay inox 32 giếng và cấy vào đĩa thạch Ủ đĩa thạch có C acnes ở tủ kỵ khí 37°C trong 44 - 48 giờ, trong khi đĩa thạch có S aureus và S epidermidis được ủ ở tủ hiếu khí 37°C trong 24 giờ Sau khi ủ, kiểm tra sự mọc của vi khuẩn trên các đĩa thạch, đọc kết quả từ đĩa chứng trước Nếu các chủng vi khuẩn mọc tốt và thuần khiết, tiếp tục đọc kết quả ở các đĩa thạch có nồng độ thuốc từ thấp đến cao Nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) được xác định tại đĩa mà khuẩn lạc vi khuẩn thay đổi hình thái hoặc giảm đáng kể mật độ, trong khi nồng độ thấp nhất có tác dụng diệt khuẩn (MBC) là ở đĩa mà vi khuẩn bị tiêu diệt hoàn toàn.
Hình 2.2 Các bướ c nghiên c ứ u tác d ụ ng kháng khu ẩ n c ủ a ACNECA
Tác dụng chống viêm trên mô hình phù tai chuột
Nghiên cứu của Andre Barbosa vào năm 2017 đã chỉ ra tác dụng chống viêm của dầu croton trên mô hình viêm cấp và bán cấp ở chuột nhắt trắng.
Dầu croton được pha chế trong aceton với tỷ lệ 40 mg dầu croton trong 2 mL aceton, tương đương với 0,4 mg dầu croton trong mỗi 20 µL hỗn hợp Để gây mụn hình viêm tai, sử dụng pipet để nhỏ 20 µL dung dịch dầu croton vào tai chuột, mỗi bên 10 µL.
- Tác dụng chống viêm cấp
Chuột nhắt trắng được chia ngẫu nhiên thành 4 lô, mỗi lô 10 con, được gây mô hình và dùng thuốc như sau:
+ Lô 1 (Mô hình) n = 10: Gây mô hình bằng cách bôi 20μL dầu croton tai phải; Uống nước cất 0,2mL/10g chuột
+ Lô 2 (Chứng dương) n = 10: Gây mô hình bằng cách bôi 20μL dầu croton đã pha tai phải chuột và uống methylprednisolone liều 6 mg/kg/ngày, uống 0,2mL/10g chuột
Trong nghiên cứu này, nhóm Lô 3 sử dụng ACNECA với liều 1,44g/kg/ngày trên 10 con chuột Mô hình được gây ra bằng cách bôi 20μL dầu croton đã pha lên tai phải của chuột, kết hợp với việc cho chuột uống ACNECA với liều tương đương lâm sàng, tính theo hệ số 12, với liều 0,2mL cho mỗi 10g trọng lượng cơ thể chuột.
Trong nghiên cứu với lô 4 (ACNECA liều 4,32g/kg/ngày, n = 10), mô hình viêm được tạo ra bằng cách bôi 20μL dầu croton lên tai phải của chuột và cho uống ACNECA với liều gấp 3 lần lâm sàng (tính theo hệ số 12), tương đương 0,2mL/10g chuột Kết quả cho thấy tai trái của tất cả các chuột không bị ảnh hưởng do không bôi croton.
Trước khi tiến hành mô hình, cần đo chiều dày tai phải của chuột ở tất cả các lô Sau khi bôi 20μL dầu croton pha trong aceton lên cả hai mặt của tai phải, chuột sẽ được cho uống thuốc sau 1 giờ Sau 6 giờ, tiếp tục đo chiều dày tai phải và lấy mẫu tổ chức da ở phần trung tâm của hai tai với đường kính 7 mm bằng dụng cụ sinh thiết để tiến hành đo cân nặng.
Các chỉtiêu theo dõi và đánh giá bao gồm:
*Độ dày tai chuột và khối lượng tai chuột
*Phần trăm thay đổi độ dày tai và khối lượng tai chuột được tính theo công thức:
%D = (D tai phải sau bôi dầu croton – D tai phải trước bôi dầu croton)/ Dtai phải trước bôi dầu croton x100%
Trong đó: D là độ dày tai chuột
%P = (P tai phải – P tai trái)/ P tai trái x100 Trong đó: P là khối lượng tai chuột
*Mức độức chế viêm ở mỗi lô được tính theo công thức A(%):
(KL tai ph ả i – KL tai trái) nhóm mô hình– (KL tai ph ả i – KL tai trái) nhóm u ố ng thu ố c ×100%
(KL tai ph ả i – KL tai trái) nhóm mô hình
(Công thức A) Chú thích: KL – Khối lượng
So sánh độ dày, khối lượng tai, mức độức chế viêm giữa các lô để đánh giá kết quả
Hình 2.3 Các bướ c nghiên c ứ u tác d ụ ng ch ố ng viêm c ấ p c ủ a ACNECA
Chú thích: P là tai phải chuột
- Tác dụng chống viêm bán cấp
Chuột nhắt trắng được chia ngẫu nhiên thành 4 lô, mỗi lô 10 con, được gây mô hình và dùng thuốc như sau:
-Lụ 1 (Mụ hỡnh) n = 10: Gõy mụ hỡnh bằng bụi 20 àL dung dịch croton đã pha lên tai phải chuột vào ngày 1, 3, 5, 7 và uống nước cất 0,2mL/10g chuột/ngày
Trong nghiên cứu này, chuột được chia thành nhóm 2 (Chứng dương) với số lượng n = 10 Vào các ngày 1, 3, 5 và 7, dung dịch dầu croton được pha và bôi lên tai phải của chuột Đồng thời, methylprednisolon được cho chuột uống với liều 6 mg/kg/ngày, tương ứng với 0,2 mL/10g chuột, vào các ngày 5, 6, 7 và 8.
K ỹ thu ậ t phân tích s ố li ệ u
-Nhập số liệu bằng Excel và Epidata 3.1
-Phân tích số liệu bằng phần mềm SPSS 18 và STATA 12
Số liệu định tính được thể hiện qua tần số và tỷ lệ phần trăm, trong khi số liệu định lượng được trình bày dưới dạng trung bình và độ lệch chuẩn (X̅ SD) Để kiểm định sự khác biệt và mối tương quan giữa các biến, các phương pháp thống kê như kiểm định χ2, kiểm định Fisher-exact (đối với biến định tính) và T-test Student (đối với biến định lượng) được áp dụng Sự khác biệt được coi là có ý nghĩa thống kê khi p0,05).
Bảng 3.4 Ảnh hưởng của ACNECA đến hàm lượng hemoglobin trong máu chuột
Sau 30, 60 và 90 ngày sử dụng ACNECA, hàm lượng hemoglobin ở lô 2 (liều 0,72 g/kg/ngày) và lô 3 (liều 2,16 g/kg/ngày) không có sự khác biệt so với lô 1 (uống nước cất) và cũng không khác biệt so với thời điểm trước khi sử dụng thuốc thử (p>0,05).
Bảng 3.5 Ảnh hưởng của ACNECA đến hematocrit trong máu chuột
Sau 30, 60 và 90 ngày sử dụng ACNECA, mức hematocrit ở lô 2 (liều 0,72 g/kg/ngày) và lô 3 (liều 2,16 g/kg/ngày) không khác biệt so với lô 1 (uống nước cất) và cũng không có sự thay đổi so với thời điểm trước khi sử dụng thuốc thử (p>0,05).
Bảng 3.6 Ảnh hưởng của ACNECA đến thể tích trung bình hồng cầu trong máu chuột
Thể tích trung bình hồng cầu (fl) p 1-3
Sau 30, 60 và 90 ngày sử dụng ACNECA, thể tích trung bình hồng cầu ở lô 2 (liều 0,72 g/kg/ngày) và lô 3 (liều 2,16 g/kg/ngày) không có sự khác biệt so với lô 1 (uống nước cất) và không khác biệt so với thời điểm trước khi uống thuốc thử (p>0,05).
Bảng 3.7 Ảnh hưởng ACNECA đến số lượng bạch cầu trong máu chuột
Sau 30, 60 và 90 ngày sử dụng ACNECA, số lượng bạch cầu ở lô 2 (liều 0,72 g/kg/ngày) và lô 3 (liều 2,16 g/kg/ngày) không có sự khác biệt so với lô 1 (uống nước cất) và cũng không khác biệt so với thời điểm trước khi sử dụng thuốc thử (p>0,05).
Bảng 3.8 Ảnh hưởng của ACNECA đến công thức bạch cầu trong máu chuột
Lympho Trung tính Lympho Trung tính Lympho Trung tính
Sau 30, 60 và 90 ngày sử dụng ACNECA, công thức bạch cầu ở lô 2 (liều 0,72 g/kg/ngày) và lô 3 (liều 2,16 g/kg/ngày) không cho thấy sự khác biệt so với lô 1 (uống nước cất) cũng như so với thời điểm trước khi sử dụng thuốc thử, với p>0,05.
Bảng 3.9 Ảnh hưởng của ACNECA đến số lượng tiểu cầu trong máu chuột
Sau 30, 60 và 90 ngày sử dụng ACNECA, số lượng tiểu cầu ở lô 2 (liều 0,72 g/kg/ngày) và lô 3 (liều 2,16 g/kg/ngày) không khác biệt so với lô 1 (uống nước cất) và cũng không có sự khác biệt so với thời điểm trước khi sử dụng thuốc thử (p>0,05).
Bảng 3.10 Ảnh hưởng của ACNECA đến hoạt độ enzym AST trong máu chuột
Sau 30, 60 và 90 ngày sử dụng ACNECA, hoạt độ enzym AST ở lô 2 (liều 0,72 g/kg/ngày) và lô 3 (liều 2,16 g/kg/ngày) không có sự khác biệt đáng kể so với lô 1 (uống nước cất) và cũng không khác biệt so với mức trước khi sử dụng thuốc thử (p>0,05).
Bảng 3.11 Ảnh hưởng của ACNECA đến hoạt độ hoạt độ enzym ALT trong máu chuột
Sau 30, 60 và 90 ngày sử dụng ACNECA, hoạt độ enzym ALT ở cả lô 2 (liều 0,72 g/kg/ngày) và lô 3 (liều 2,16 g/kg/ngày) không khác biệt so với lô 1 (uống nước cất) và cũng không có sự khác biệt so với thời điểm trước khi dùng thuốc thử (p>0,05).
Bảng 3.12 Ảnh hưởng của ACNECA đến nồng độ bilirubin toàn phần trong máu chuột
Sau 30, 60 và 90 ngày sử dụng ACNECA, nồng độ bilirubin ở lô 2 (liều 0,72 g/kg/ngày) và lô 3 (liều 2,16 g/kg/ngày) không khác biệt so với lô 1 (uống nước cất) và cũng không có sự khác biệt so với mức trước khi sử dụng thuốc thử (p>0,05).
Bảng 3.13 Ảnh hưởng của ACNECA đến nồng độ albumin trong máu chuột
Sau 30, 60 và 90 ngày sử dụng ACNECA, nồng độ albumin ở lô 2 (liều 0,72 g/kg/ngày) và lô 3 (liều 2,16 g/kg/ngày) không khác biệt so với lô 1 (uống nước cất) và cũng không có sự khác biệt so với mức nồng độ trước khi sử dụng thuốc (p>0,05).
Bảng 3.14 Ảnh hưởng của ACNECA đến nồng độ cholesterol toàn phần trong máu chuột
Sau 30, 60 và 90 ngày sử dụng ACNECA, nồng độ cholesterol ở lô 2 (liều 0,72 g/kg/ngày) và lô 3 (liều 2,16 g/kg/ngày) không khác biệt so với lô 1 (uống nước cất) và cũng không có sự thay đổi so với mức trước khi uống thuốc thử (p>0,05).
Đánh giá chức năng thận
Bảng 3.15 Ảnh hưởng của ACNECA đến nồng độ creatinin trong máu chuột
Hi ệ u qu ả c ủa ACNECA trên lâm sàng trong điề u tr ị b ệ nh tr ứ ng cá thông thườ ng m ức độ v ừ a
3.2.1 Đặc điể m chung c ủ a b ệ nh nhân nghiên c ứ u
Bảng 3.23 Đặc điểm chung bệnh nhân nghiên cứu tại thời điểm T0
S ố lượ ng t ổ n thương Đầu đen, đầ u tr ắ ng 31,30±19,91 31,04±16,15 p>0,05 31,17±18,04
Các yếu tố như giới tính, nhóm tuổi, thời gian mắc bệnh, yếu tố thuận lợi mọc mụn và số lượng tổn thương giữa nhóm nghiên cứu và nhóm đối chứng trước điều trị không có sự khác biệt đáng kể (p>0,05) Điều này cho thấy rằng hai nhóm có sự tương đồng, cho phép tiến hành so sánh hiệu quả điều trị một cách hợp lý.
3.2.2 Hi ệ u qu ả điề u tr ị trên ngườ i
Bảng 3.24 Sốlượng tổn thương cơ bản sau 30 ngày và sau 60 ngày điều trị
Tổn thương Thời điểm Nhóm nghiên cứu (nP)
Nhóm đối chứng (nP) p Đầu đen, đầu trắng (𝐗̅ ± 𝐒𝐃)
Kết quả điều trị sau 30 và 60 ngày ở nhóm nghiên cứu và đối chứng cho thấy tổng số lượng tổn thương giảm đáng kể so với trước điều trị với sự khác biệt có ý nghĩa thống kê (p0,05) Đến 60 ngày, nhóm đối chứng vẫn giảm tổng số lượng tổn thương nhiều hơn nhóm nghiên cứu, với sự khác biệt có ý nghĩa thống kê (p0,05) Tuy nhiên, sau 60 ngày, nhóm đối chứng cho thấy hiệu quả điều trị tốt hơn rõ rệt so với nhóm nghiên cứu, với sự khác biệt có ý nghĩa thống kê (p2 < 0,01).
Bảng 3.26 Mức độ tổn thương trứng cá theo Jerry KL Tan -2008
Tại thời điểm T30 và T60, cả nhóm nghiên cứu và nhóm đối chứng đều ghi nhận sự giảm đáng kể mức độ tổn thương trứng cá so với trước khi bắt đầu điều trị (p0,05).
Như vậy, nhóm nghiên cứu và nhóm đối chứng cải thiện mức độ tổn thương trứng cá là như nhau.
Bảng 3.27 Chỉ tiêu theo dõi chứng trạng y học cổ truyền
(nP) Nhóm đố i ch ứ ng
(T-test Student); p 1 (trước điề u tr ị 2 nhóm); p 2 (Sau điề u tr ị 2 nhóm)
Nhận xét về chỉ tiêu chứng trạng YHCT cho thấy, tất cả các chỉ tiêu trong nhóm nghiên cứu đều giảm đáng kể so với trước nghiên cứu với sự khác biệt có ý nghĩa thống kê (p
