CHĂN�NU�I�TH��Y� �TH�Y�SẢN 114 TẠP�CH��KHOA�H�C�N�NG�NGHI�P�VÀ�PHÁT�TRI�N� �S��6�(6/2022) M�T�S���ẶC��I�M�D�CH�T��B�NH�TEMBUSU���V�T�SINH�SẢN TẠI�T�NH�BẮC�GIANG Nguy�n�Th��Thu�Huy�n,�Nguy�n���nh�Nguy�[.]
CHĂN NU I TH Y - TH Y SẢN M TS ẶC I M D CH T B NH TEMBUSU TẠI T NH BẮC GIANG Nguy n Th Thu Huy n, Nguy n Th H ng Giang (Khoa Ch n nu i Thú y, Tr ng V T SINH SẢN nh Nguy n, Tr n Th Trinh, V Th Hoài Thu, Nguy n i h c N ng L m B c Giang) TÓM T T Nghi n c u tr n 984 m u v t b nh nu i t i c a t nh B c Giang (L ng Giang, Y n D ng, Hi p Hòa Vi t Y n) b ng k thu t ch n oán RT PCR xác nh c 290 v t nhi m virus Tembusu chi m 29,47%, t l ch t 59,65% Tu i c a v t kh ng nh h ng rõ r t n m c nhi m b nh (P>0,05) K t qu nghi n c u ch có s khác v t l nhi m b nh theo m a M a hè, v t nhi m b nh Tembusu cao h n rõ r t so v i m a ng, xuân thu V t nu i theo ph ng th c nu i th ao có t l nhi m virus Tembusu cao nh t (75%) t l th p nh t v t nu i theo ph ng th c nu i c ng nghi p (19,83%) T khóa D ch t , Tembusu virus, t nh B c Giang, v t TV N Virus Tembusu m t lo i virus thu c ch ng Flavivirus, h Flaviviridae B nh l n u ti n phát hi n t i Trung Qu c vào n m 2010 (Tang et al 2013) Virus gây r i lo n h mi n d ch h th n kinh tr n v t, c bi t v t sinh s n (Yun et al,2012) Nh n chung, t l m c virus Tembusu c a v t có th r t cao l n n 100% iv ivt sinh s n th ng nh h ng n s n l ng tr ng (Li et al, 2012) Do ó, B nh nh h ng rõ r t n t n th t v kinh t cho ng i ch n nu i Hi n nay, ngh ch n nu i v t ang phát tri n tr n a bàn t nh B c Giang Hi n nay, t ng s l ng v t sinh s n trung b nh tr n h c nu i t i t nh B c Giang kho ng 800 1500 con, cho thu ho ch kho ng 600 1200 tr ng/ngày Ch n nu i v t góp ph n quan tr ng phát tri n n n kinh t h gia nh c a bà n ng dân t nh Tuy nhi n, b nh v virus gây hi n t ng gi m tr n v t v n th ng xuy n x y ra, gây tác h i l n i v i ch n nu i v t gây nhi u th t h i v kinh t cho ng i ch n nu i n v n ch a có nh ng nghi n c u sâu v hi n t ng gi m virus Tembusu gây tr n v t sinh s n, v v y ch a có quy tr nh phòng b nh hi u qu T y u c u th c ti n ch n nu i v t t i t nh B c Giang, chúng t i ti n hành nghi n c u c u th c tr ng nhi m vius Tembusu tr n v t sinh s n có c s khoa h c nghi n c u xu t bi n pháp phịng b nh thích h p o n t 20 tu n tu i tr l n c nu i n ng h trang tr i t i huy n L ng Giang, Y n D ng, Hi p Hòa Vi t Y n D ng c , thi t b hóa ch t: Hóa ch t ph c v ph n ng PCR: Oligo-dt tag, mix, water, KIT tách ARN, hóa ch t i n di ; Hóa ch t d ng c làm ti u b n vi th : khu n úc, c n, thu c nhu m HE, xilen, phi n kính, kính, máy c t ti u b n microton ; Kính hi n vi có g n máy nh soi ch p nh ti u b n vi th Các hóa ch t d ng c thí nghi m khác 2.2 Ph ng pháp nghi n c u Ph ng pháp i u tra d ch t : p d ng ph ng pháp nghi n c u d ch t m t (Nguy n Nh Thanh cs, 2011) - Ph ng pháp l y m u: theo ph ng pháp l y m u ch m nhi u b c: m i huy n l y x , m i x l y th n T i m i th n l y m u ng u nhi n - Dung l ng m u c tính b ng ph n m m d ch t Win episcope 2.0., t l nhi m 50%, v i tin c y 95%, tính tốn c s m u phân t i thi u c n l y 396 Tuy nhi n, th c t chúng t i l y 984 - Ph ng pháp ch n oán b nh: chúng t i s d ng ph ng pháp RT-PCR, ph ng pháp c ti n hành nh sau: + Cách l y m u: Các m u b nh ph m g m: bu ng tr ng, ng d n tr ng, gan, th n, túi fabricius c nghi n chuy n vào ng effedorf, b o qu n t V T LI U V PH NG PH P NGHIÊN C U âm 20oC 2.1 V t li u nghi n c u + Quy tr nh tách ARN c a virus ng v t thí nghi m: 984 v t sinh s n giai ARN c a virus c tách b ng b kít Thermo 114 TẠP CH KHOA H C N NG NGHI P VÀ PHÁT TRI N - S (6/2022) CHĂN NU I TH Y - TH Y SẢN Scienti c theo ch d n c a nhà s n xu t T ng h p cDNA b ng kít random hexamers (N8080127, Invitrogen) M u l N c 17 l T ng 20 l Ch y v i quy tr nh nhi t 45oC: 60 phút; 95oC: 5phút; oC gi m u Xác nh v t m c Tembusu b ng ph ng pháp RT-PCR v i c p m i c a virus c c ng b (Li et al.,2012) v i th ng tin t i b ng L ng m u ch y ch n oán RT- PCR v i m i Tembusu theo c ng th c là: M u N c DreamTaq Prime F Prime R T ng 10 1 20 l l l l l l - Ph ng pháp x l s li u S li u c x l b ng ph n m m Excel 2007 ph n m m Minitab 16.0 K T QU V TH O LU N 3.1 T l nhi m Tembusu tr n v t sinh s n t i a ph ng B ng Tr nh t m i c a ph n ng RT-PCR M i PrM Quy tr nh Tr nh t (5 F-CGCGGATCCCTGAAGCTTGGAAATTAT R- GGAATTCGCTGTACGCTGGGGCTATT Kích th c (bp 501 95oC-4 phút, 95oC-30s, 58oC-30s, 72 oC-45s (35 vòng), 72 oC-7 phút, oC Xét nghi m b ng ph ng pháp RT-PCR tr n 984 v t nu i t i n ng h trang tr i thu c huy n (huy n L ng Giang, Y n D ng, Hi p Hòa Vi t Y n) c a t nh B c Giang K t qu t l nhi m Tembusu tr n v t sinh s n c tr nh b ng h nh v h nh nh k t qu i n di c a m u i di n c a huy n K t qu b ng cho th y, t ng s 984 v t xét nghi m ch n oán có 290 v t m c b nh, chi m 29,47%, t l ch t 173 con, chi m 59,65% T l nhi m Tembusu tr n v t sinh s n huy n có s khác nhau: v t nu i t i huy n Y n D ng có t l nhi m t l ch t cao nh t (38, 21% 76,60%); v t nu i t i huy n Vi t Y n có t l nhi m th p nh t chi m 23,58% Tuy nhi n t i huy n Hi p Hòa t l v t ch t virus Tembusu th p nh t, chi m 40,91% S khác v t l nhi m Tembusu tr n v t sinh s n t i huy n Y n D ng so v i huy n Vi t Y n Hi p Hịa có ngh a th ng k (P50 tu n tu i K t qu c th hi n b ng K t qu b ng cho th y: l a tu i v t u có nh ng t l nhi m virus Tembusu khác nh ng kh ng có ng a th ng k T l nhi m kho ng 27,64% - 31,71% TẠP CH KHOA H C N NG NGHI P VÀ PHÁT TRI N - S (6/2022) 115 CHĂN NU I TH Y - TH Y SẢN B ng T l nhi m, t l ch t virus Tembusu g y tr n v t sinh s n theo a ph ng S v t theo dõi (con) S vtm c b nh (con T l m c (% S v t ch t (con T l ch t (% L ng Giang 246 72 29,27 b 44 61,11 Y n D ng 246 94 38,21 a 72 76,60 Vi t Y n 246 58 23,58 d 30 51,72 Hi p Hòa 246 66 26,83 c 27 40,91 Tính chung 984 290 29,47 173 59,65 a ph ng (Huy n) Ghi chú:Theo hàng d c, t l nhi m mang ch khác th khác có ngh a th ng k (P50 tu n tu i nhi m nh t (27,64%) Tuy nhi n t l nhi m b nh kh ng có s sai khác giai o n tu i l a tu i v t u có nh ng t l nhi m virus Tembusu khác nh ng kh ng có ng a th ng k T l nhi m kho ng 27,64% - 31,71% V t giai o n 40-50 tu n tu i nhi m nhi u nh t (31,71%); ti p n v t 30 40 tu n tu i (30,08): v t 20 30 tu n tu i nhi m th p h n (28,46%); v t >50 tu n tu i nhi m nh t (27,64%) Tuy nhi n t l nhi m b nh kh ng có s sai khác giai o n tu i V t l ch t: v t giai o n 30-40 tu n tu i có t l ch t nhi u nh t (64,86%), v t giai o n 20-30 tu n tu i >50 tu n tu i t l ch t th p h n (64,29% 61,76%) B ng T l nhi m, t l ch t virus Tembusu g y tr n v t sinh s n theo l a tu i L a tu i (Tu n tu i S theo dõi (con S vtm c b nh (con T l m c (% S v t ch t (con T l ch t (% 20 - 30 246 70 28,46a 45 64,29 30 40 246 74 30,08a 48 64,86 40 -50 246 78 31,71 a 38 48,72 >50 246 68 27,64 a 42 61,76 Tính chung 984 290 29,47 173 59,65 Ghi chú:Theo hàng d c, t l nhi m mang ch khác th khác có ngh a th ng k (P