Chẩn đoán các thương tổn biểu mô cổ tử cung tiến triển bằng DNA-image-cytometry pot

TCNCYH 33 (1) - 2005 16 Chẩn Đoán Các THƯƠNG Tổn Biểu MÔ Cổ Tử CUNG Tiến Triển Bằng DNA-IMAGE-CYTOMETRY Nguyễn Vũ Quốc Huy (1) ; Alfred Boecking (2) (1) Bộ môn & Khoa Phụ Sản, Trờng Đại học Y khoa Huế và Bệnh viện Trung ơng Huế, 6 Ngô Quyền, Huế, Việt nam (2) Institute of Cytopathology, Heinrich-Heine University Duesseldorf, Moorenstrasse 5, 40225 Duesseldorf, Germany 1. Đặt vấn đề: Nghiên cứu này nhằm so sánh hiệu lực của xét nghiệm tế bào cổ tử cung quy ớc với DNA-image-cytometry (DNA-ICM) trong việc dự báo khả năng tiến triển của thơng tổn tế bào lát bất điển hình (atypical squamous cells - ASC), thơng tổn trong liên bào lát mức độ thấp (low-grade squamous intraepithelial lesion - LSIL) và tế bào tuyến bất điển hình (atypical glandular cells - AGC). 2. Đối tợng và phơng pháp: Có 196 phụ nữ với phiến đồ cổ tử cung đợc xếp loại ASC, LSIL hoặc AGC đã đợc đa vào một nghiên cứu tiến cứu thuần tập. Các tiêu bản đợc phân loại theo Danh pháp Bethesda 2001. DNA-ICM đợc tiến hành tuân theo các yêu cầu về kỹ thuật của Hiệp hội bệnh học tế bào phân tích Châu Âu (European Society of Analytical Cellular Pathology - ESACP). 3. Kết quả: Trong số 196 đối tợng, có 108 đối tợng đã đợc khảo sát mô học hoặc tế bào học đủ tiêu chuẩn tham chiếu. Tỷ lệ lệch bội ADN (DNA-aneuploidy) của các phiến đồ cổ tử cung gia tăng một cách đáng kể từ nhóm CIN 1 (54%) và CIN 2 (64,3%) cho đến CIN 3 hoặc cao hơn (83,3%) trong các mẫu sinh thiết (p < 0,05). Sử dụng ASC/LSIL/AGC nh là tiêu chuẩn tế bào học ở đầu vào và CIN2 hoặc cao hơn nh là tiêu chuẩn mô học ở đầu ra, giá trị dự báo dơng tính (positive predictive value - PPV) của tế bào học quy ớc và DNA-ICM tơng ứng là 35,2% và 65,9% (p < 0,001). Giá trị dự báo âm tính (negative predictive value - NPV) của DNA-ICM là 85,0%. Nếu dùng CIN3 hoặc cao hơn nh là tiêu chuẩn mô học ở đầu ra, tế bào học quy ớc có PPV là 22,2%. PPV và NPV của DNA-ICM tơng ứng là 43,9% và 93,3%. 4. Kết luận: Nghiên này chỉ ra rằng DNA-ICM thực hiện trên phiến đồ cổ tử cung đợc chẩn đoán ASC, LSIL hoặc AGC đã làm tăng một cách đáng kể độ chính xác chẩn đoán của tế bào học quy ớc, đồng thời khẳng định giá trị tiên lợng của DNA-ICM trong việc xác định các tổn thơng tiến triển trong nhóm các chẩn đoán ASC, LSIL và AGC. I. Đặt Vấn Đề Loạn sản cổ tử cung là các thơng tổn không đồng nhất, đặc biệt trong khả năng tiến triển hay thoái triển của nó. Khảo sát mô học hay tế bào học không thể dự báo đợc sự tiến triển của tế bào loạn sản thành ung th trong từng trờng hợp cụ thể. Có khoảng 15 - 30% các phụ nữ với thơng tổn trong liên bào mức độ thấp (low-grade squamous intraepithelial lesion - LSIL) trên phiến đồ cổ tử cung sẽ biểu hiện tân sinh trong liên bào cổ tử cung (cervical intraepithelial neoplasia - CIN) mức độ trung bình hoặc nặng khi đ ợc TCNCYH 33 (1) - 2005 17 sinh thiết 1,6,8 . Nh vậy trong chơng trình tầm soát ung th cổ tử cung, một lợng lớn các thủ thuật trong theo dõi, đặc biệt là khoét chóp cổ tử cung đã đợc tiến hành mà không có bằng chứng của thơng tổn CIN 2, 3 hoặc ung th xâm lấn. Lệch bội ADN (DNA-aneuploidy) đợc đo bằng phơng pháp DNA-image- cytometry (DNA-ICM) là giá trị định lợng tơng đơng của lệch bội nhiễm sắc thể và đợc chấp nhận trên bình diện quốc tế nh một dấu chỉ điểm của sự chuyển dạng ác tính tế bào 1,2,3,5,7 . Nhiều nghiên cứu đã cho thấy rằng nó có thể chỉ ra thơng tổn ung th xâm lấn cũng nh các loạn sản cổ tử cung mà về sau chuyển thành ung th xâm lấn. Ngoài ra, hiện nay đang ngày càng có nhiều bằng chứng sinh học về việc lệch bội có thể đóng một vai trò nh là nguyên nhân trong bệnh sinh ung th. Nhóm công tác số 8 tại Hội nghị thế giới Phòng chống ung th cổ tử cung đã khuyến cáo sử dụng DNA-ICM nh một phơng pháp hỗ trợ hữu ích để xác định các thơng tổn trong liên bào cổ tử cung đòi hỏi phải đợc xử trí trên lâm sàng 3 . Theo các tìm kiếm mới nhất của chúng tôi, tất cả các nghiên cứu về DNA-ICM trên loạn sản cổ tử cung đều thuộc loại hồi cứu. Do vậy nghiên cứu này đợc thực hiện với các mục tiêu: - Khảo sát đặc điểm đẳng bội và/hoặc lệch bội ADN của các thơng tổn biểu mô cổ tử cung bao gồm tế bào lát bất điển hình (atypical squamous cells - ASC), thơng tổn trong liên bào lát mức độ thấp (low-grade squamous intraepithelial lesion - LSIL) và tế bào tuyến bất điển hình (atypical glandular cells - AGC) bằng phơng pháp DNA-ICM. - Khảo sát giá trị của DNA-ICM trong chẩn đoán các thơng tổn biểu mô lát cổ tử cung tiến triển. II. Đối Tợng Và PHƯƠNG Pháp NGHIÊN Cứu 1. Bệnh nhân và bệnh phẩm Có 274 phiến đồ cổ tử cung đợc phân loại ASC, LSIL hoặc AGC trong khoảng thời gian 12.1997 - 11.2003 tại Viện Tế bào bệnh học, Đại học Duesseldorf, Đức, trong số đó 78 trờng hợp không đợc xét nghiệm DNA-ICM. Số 196 phiến đồ đợc đa vào nghiên cứu này bao gồm 35 ASC; 130 LSIL và 31 AGC. Có 24 bệnh nhân đợc xét nghiệm tế bào học/DNA- ICM lần thứ 2. Đối với các trờng hợp này chỉ kết quả các biểu đồ ADN của lần đo đầu mới đợc đa vào nghiên cứu. Tuổi trung bình của các bệnh nhân là 39 tuổi (16 - 78 tuổi). 2. Xử lý và đánh giá mẫu nghiệm Bệnh phẩm đợc lấy từ cổ tử cung, cố định bằng cồn và nhuộm Papanicolaou. Danh pháp Bethesda 2001 đợc sử dụng để phân loại tế bào học 10 . Các tiêu bản đợc đọc trớc khi có Danh pháp Bethesda 2001 đợc đánh giá lại khi tổng hợp dữ liệu cuối cùng. Ngay sau đánh giá hình thái, các tiêu bản đợc khử nhuộm và nhuộm lại theo phơng pháp Feulgen. Trớc tiên phiến đồ đợc ngâm vào xylol để gỡ bỏ lá kính. Nhuộm Feulgen đợc thực hiện tự động bằng máy nhuộm Varistain 24-4 (Shandon, Pittsburgh, Pennsylvania, USA) nh đã đợc mô tả bởi Chatelain và cộng sự 2 . Phản ứng thuỷ phân diễn ra trong một hộp chứa có thể điều khiển nhiệt độ đợc làm từ vật TCNCYH 33 (1) - 2005 18 liệu bền với acid. Nhiệt độ của hộp này đợc giữ ổn định ở mức 27,0 o C. Sau khi tái hydrat hoá trong cồn ethanol với nồng độ giảm dần và tái cố định trong formol 10% có đệm, thuỷ phân bằng HCl 5N đợc tiến hành ở 27,0 o C trong 60 phút, tiếp sau đó là nhuộm Schiff (Merck, Darmstadt, Germany, No. 1.09033.0500) cũng trong 60 phút ở nhiệt độ phòng, cuối cùng là rửa trong dung dịch SO 2 và tái hydrat hoá trong cồn ethanol với nồng độ tăng dần. Dung dịch sulfur đợc chuẩn bị ngay tức thì bằng cách cho 5g Na hoặc K metabisulfite và 50ml HCl 1N vào nớc cất cho đến khi đạt đợc 1000 ml. Lá kính đợc gắn lên phiến kính bằng keo Entellan (Merck, Darmstadt, Germany, No. 1.07961.0500). Phiến kính sau khi nhuộm và phủ lá kính sẽ đợc giữ trong bóng tối cho đến khi đo ADN. Đo lờng gián tiếp hàm lợng ADN trong nhân tế bào đợc tiến hành bằng cách sử dụng một hệ thống ghi và xử lý hình ảnh, bao gồm một kính hiển vi Zeiss Axioplan 2 và một video-camera CCD. Phần mềm xử lý hình ảnh đợc dùng là AutoCyte QUIC-DNA-Workstation (AutoCyte Inc., Burlington, N.C., USA). Trong mỗi trờng hợp ADN nhân tế bào của 30 tế bào lát trung gian bình thờng sẽ đợc đo và sử dụng với t cách trị số tham chiếu nội tại. Hệ số biến thiên của các giá trị tham chiếu luôn dới 5%. Có ít nhất 200 nhân tế bào biểu mô bất thờng đã đợc đo ADN một cách ngẫu nhiên. Tất cả các phơng tiện, quy trình kỹ thuật đều tuân thủ các yêu cầu của Hiệp hội bệnh học tế bào phân tích Châu Âu (European Society for Analytical Cellular Pathology - ESACP) 4 . 3. Theo dõi Các thông tin theo dõi đợc thu thập bằng cách liên lạc với thầy thuốc gia đình của các bệnh nhân. Tiêu chuẩn tham chiếu để kết luận là mô học, đợc phân loại dựa theo hệ thống CIN. Theo các chuẩn mực của Hội Ung th Hoa kỳ (American Cancer Society), so sánh kết quả với theo dõi tế bào học cũng có thể đợc chấp nhận với trong một số tình huống nhất định 10 . Chúng tôi xem theo dõi tế bào học sau ít nhất 6 tháng cũng có giá trị tơng đơng với tiêu chuẩn tham chiếu, nếu trong 2 phiến đồ liên tiếp không có tình trạng thoái triển hoặc tiến triển của bệnh. Việc thu thập cuối cùng các dữ liệu theo dõi tế bào học và mô học đợc tiến hành vào tháng 12 - 2003. 4. Phân tích thống kê Giá trị chẩn đoán của các nhóm tế bào học và DNA-ICM trong mẫu nghiên cứu đợc đánh giá bằng cách tính tần suất và các giá trị dự báo. Các khác biệt trong tỷ lệ đợc so sánh bằng test X 2 và test X 2 McNemar với mức có ý nghĩa là p < 0,05. III. Kết Quả 1. Mô tả mẫu nghiên cứu Trong số 196 bệnh nhân, 89 bệnh nhân đã có tiền sử bệnh lý cổ tử cung - âm đạo trớc khi đợc xét nghiệm phiến đồ cổ tử cung lần này và đợc đa vào nghiên cứu. Có 108 trờng hợp có đầy đủ tiêu chuẩn tham chiếu: 8 sinh thiết, 49 khoét chóp cổ tử cung, 2 nạo ống cổ tử cung và 50 theo dõi tế bào học trong ít nhất 6 tháng với ít nhất hai kết quả nh nhau. Trung vị khoảng cách giữa lần xét nghiệm tế bào học / DNA-ICM và lần TCNCYH 33 (1) - 2005 19 khảo sát mô học là 3 tháng (tối thiểu: 1 tháng, tối đa 30 tháng). Các trờng hợp sử dụng theo dõi tế bào học làm tham chiếu chuẩn có trung vị thời gian theo dõi lên đến 25 tháng (tối thiểu 6 tháng, tối đa 66 tháng). 2. Tần suất lệch bội ADN Tần suất lệch bội chung của nhóm nghiên cứu thuần tập bao gồm 196 trờng hợp ASC, LSIL hay AGC là 31,6% (Bảng 1). Tần suất lệch bội thay đổi theo các nhóm tế bào học và tơng ứng với mức độ thơng tổn về mô học (phân loại CIN), tuy vậy xu hớng này không đạt đợc ý nghĩa thống kê (X 2 < 1,55, p > 0,11). Tỷ lệ lệch bội đờng phân bố cao nhất đợc quan sát thấy trong nhóm AGC (X 2 > 3,73; p < 0,05). Nếu tính chung thì lệch bội tế bào là loại thờng gặp nhất, chiếm đến 85,5% tất cả các trờng hợp có biểu đồ phân bố ADN bất thờng (Bảng 2). Bảng 1. Lệch bội AND theo các nhóm tế bào học khác nhau DNA-ICM Đầu ra (PPV) Tế bào học N Lệch bội tế bào (%) Lệch bội đờng phân bố (%) Lệch bội tế bào và đờng phân bố (%) T ổ ng (%) N RS > CIN2 (%) > CIN3 (%) ASC 35 7 (20,0) 1 (2,9) 1 (2,9) 7 (20,0) 7 1 (14,3) 1 (14,3) LSIL 130 39 (30,0) 11 (8,5) 7 (5,4) 43 (33,1) 84 29 (34,5) 17 (20,2) AGC 31 7 (22,6) 7 (22,6) 2 (6,5) 12 (38,7) 17 8 (47,1) 6 (35,3) Tổng 196 53 (27,0) 19 (9,7) 10 (5,1) 62 (31,6) 108 38 (35,2) 24 (22,2) Nhận xét: PPV: giá trị dự báo dơng tính (positive predictive value); N RS : số trờng hợp có khảo sát mô học. Lệch bội tế bào: Single cell-aneuploidy, Lệch bội đờng phân bố: Stemline- aneuploidy Bảng 2. Giá trị dự báo dơng tính và âm tính của DNA-ICM Đầu ra DNA-ICM N Tỷ lệ trờng hợp lệch bội N RS > CIN2 > CIN3 Lệnh bội 62 62/62 (100%) 41 65,9% 43,9% Lệch bội tế bào 53 53/62 (85,5%) 34 61,8% 41,2% Lệch bội đờng phân bổ 19 19/62 (30,7%) 13 92,3% 76,3% Lệch bội tế bào và đờng phân bố 10 10/62 (16,1%) 6 100,0% 100,0% Đẳng bội 123 - 60 85,0% 93,3% TCNCYH 33 (1) - 2005 20 Nhận xét: N RS : số trờng hợp có khảo sát mô học, PPV: giá trị dự báo dơng tính (positive predictive value); NPV: giá trị dự báo âm tính (negative predictive value). 3.3. Kết quả theo dõi tế bào học/mô học và tình trạng lệch bội ADN Tỷ lệ ASC/LSIL và AGC chuyển thành CIN 3 hoặc ung th xâm lấn cổ tử cung một cách tơng ứng là 19,8% (18/91) và 35,3% (6/17) (Bảng 1). Xét nghiệm mô học đợc sử dụng nh tiêu chuẩn vàng trong tất cả các trờng hợp tiến triển. Sự phát hiện lệch bội ADN là nguyên nhân đa đến chỉ định xét nghiệm mô học trong ngay cả một số trờng hợp ASC/LSIL. Bảng 3 mô tả mối liên quan giữa chẩn đoán mô học với kết quả DNA- ICM thực hiện trên phiến đồ đầu vào. Tần suất lệch bội ADN gia tăng từ 54% trong nhóm CIN 1 đến 64,3% trong nhóm CIN 2 và đến 83,3% ở nhóm CIN 3 hoặc cao hơn (CIN 1,2 so sánh với CIN 3+, X 2 = 3,71; p < 0,05). Phối hợp lệch bội tế bào và lệch bội đờng phân bố chỉ đợc tìm thấy trong nhóm CIN3. Bảng 3. Tần suất của lệch bội ADN đối chiếu với kết quả theo dõi mô học Mô học N Lệch bội tế bào (%) Lệch đờng phân bố (%) Lệch bội tế bào & đờng phân bố (%) Tổng số lệch bội (%) WNL 8 2 (25,0) - - 2 (25,0) CIN1 13 6 (46,2) 1 (7,7) - 7 (53,9) CIN2 14 7 (50,0) 2 (14,3) - 9 (64,3) CIN3 23 13 (56,5) 10 (54,2) 6 (26,9) 19 (82,6) Ung th xâm lấn 1 1 (100) - - 1 (100) Nhận xét: WNL: trong giới hạn bình thờng (within normal limits). 3.4. Độ chính xác của chẩn đoán tế bào học và DNA-ICM Độ chính xác chẩn đoán của tế bào học và DNA-ICM đã đợc tính toán bằng cách so sánh kết quả tế bào học/DNA- ICM ban đầu và kết quả theo dõi bằng tế bào học và/hoặc mô học (Bảng 1 và 2). Sử dụng CIN 2 hoặc cao hơn (CIN2+) làm tiêu chuẩn mô học đầu ra, giá trị dự báo dơng tính của chẩn đoán tế bào học quy ớc và DNA-ICM lần lợt là 35,2% và 65,9%. Nếu dùng CIN3+ làm tiêu chuẩn mô học đầu ra, giá trị dự báo dơng tính tơng ứng là 22,2% đối với chẩn đoán tế bào học và 43,9% đối với DNA-ICM. Sự cải thiện PPV đạt đợc nhờ DNA-ICM trong tất cả các nhóm đều có ý nghĩa thống kê (X 2 ghép cặp 29,4; p < 0,001). Cũng nh PPV, giá trị dự báo âm tính (negative predictive value - NPV) của DNA-ICM cũng phụ thuộc vào tiêu chuẩn đầu ra (Bảng 2). TCNCYH 33 (1) - 2005 21 IV. bàn luận Đây là một nghiên cứu tiến cứu thuần tập đợc thiết kế trong bối cảnh hoạt động thờng quy, vì vậy có giá trị phản ánh kết quả hoạt động trong bối cảnh đó chứ không phải trong điều kiện nghiên cứu lý tởng. Nghiên cứu này cho thấy rằng DNA-ICM thực hiện trên phiến đồ cổ tử cung đợc xếp loại ASC, LSIL hoặc AGC đã cải thiện đáng kể độ chính xác của chẩn đoán bằng tế bào học quy ớc. Sử dụng CIN 2 hoặc cao hơn (CIN2+) làm tiêu chuẩn mô học đầu ra, giá trị dự báo dơng tính của chẩn đoán tế bào học quy ớc và DNA-ICM lần lợt là 35,2% và 65,9% (p < 0,001). Bên cạnh đó DNA- ICM đã đạt đợc giá trị NPV lên đến 85%. Theo thông tin chúng tôi thu thập đợc, đây là nghiên cứu thuần tập tiến cứu đầu tiên về độ chính xác chẩn đoán của DNA- ICM trong tế bào học cổ tử cung. Các giá trị dự báo phụ thuộc rất lớn vào định nghĩa các tiêu chuẩn đầu vào và đầu ra. Các tiêu chuẩn đầu vào thờng dùng là các nhóm tế bào học ASC+ hoặc LSIL+, tiêu chuẩn đầu ra là chẩn đoán mô học CIN2+, CIN3+ hoặc HSIL+ 6,8 . Trong nghiên cứu của chúng tôi, ASC và LSIL có các PPV từ 14,3 đến 34,5%, phù hợp với các nghiên cứu trớc đây trong đó cũng sử dụng các tiêu chuẩn đầu vào và đầu ra nh trên 6,8 . Một yếu tố quan trọng cần xem xét đến là khoảng thời gian giữa thời điểm làm phiến đồ và xét nghiệm mô học. Một thơng tổn loạn sản nhẹ hoặc trung bình có thể cần đến từ nhiều tháng cho đến 10 năm để phát triển thành ung th xâm lấn 7 . Vì vậy kết quả xét nghiệm mô học đợc lấy gần sát với thời điểm làm tế bào học có thể cha đủ để đánh giá giá trị dự báo của xét nghiệm tế bào học cũng nh các phơng pháp bổ trợ khác. Lỗi khi lấy bệnh phẩm vẫn còn là một trong những nguyên nhân chính của sự bất đồng giữa kết quả tế bào học và mô học. Các thơng tổn nhỏ và nhẹ nhàng chỉ có thể đợc lấy dới quan sát bằng máy soi cổ tử cung. Các thơng tổn trong liên bào lát mức độ thấp có thể nằm ở ngoại vi của thơng tổn trong liên bào lát mức độ cao hoặc thậm chí ung th xâm lấn 3 . Nh vậy lấy bệnh phẩm không đại diện cũng có thể giải thích phần nào cho lý do bất đồng kết quả tế bào học/DNA- ICM với mô học trong nghiên cứu này. Trớc năm 1995, các kết quả DNA- ICM và cách diễn giải chúng phụ thuộc rất nhiều vào quy trình tiến hành và thuật toán chẩn đoán. Điều này làm cho việc diễn giải kết quả các nghiên cứu về DNA- ICM trớc đây trên loạn sản cổ tử cung rất khó khăn. Kể từ 1995, các quy trình và thuật toán chẩn đoán DNA-ICM đã đợc chuẩn hoá thông qua các Chuẩn mực của Hiệp hội Bệnh học tế bào phân tích châu Âu (European Society of Analytical Cellular Pathology - ESACP) 4 . Gần đây, Nguyễn và cộng sự đã báo cáo về độ tơng hợp giữa các ngời đo khác nhau khi khảo sát dị bội ADN trên phiến đồ cổ tử cung lên đến 94% 9 . Độ tơng hợp này cao hơn khoảng 20% so với độ tơng hợp giữa nhiều ngời đánh giá khác nhau khi phân loại tế bào học hoặc mô học mà chỉ đơn thuần dựa trên hình thái học 6,8 . Nh vậy DNA-ICM đợc chuẩn hoá là một phơng pháp khách quan và có độ khả lặp chẩn đoán cao. Không một lệch bội nào đợc tìm thấy TCNCYH 33 (1) - 2005 22 trong 4 trờng hợp CIN3 đã đợc khẳng định bằng mô học. Trong các trờng hợp này, trung vị khoảng thời gian theo dõi giữa DNA-ICM và khoét chóp cổ tử cung là 15 tháng (ít nhất 8, nhiều nhất 23 tháng) có nghĩa là dài hơn đáng kể so với các trờng hợp lấy mô học làm tiêu chuẩn tham chiếu. Hai trong 4 trờng hợp này cho thấy có lệch bội trong phiến đồ đợc làm sát ngay trớc khoét chóp. Có hai trờng hợp có lệch bội tế bào nhng không phát hiện đợc thơng tổn loạn sản: 1 trờng hợp ASC đợc chẩn đoán là viêm cổ tử cung nang lympho (follicular cervicitis) trên mô học. Theo dõi tế bào học sau đó một lần nữa cho kết quả ASC nhng đến 14 tháng sau thì kết quả trở về âm tính (không có bất thờng tế bào biểu mô). Trong trờng hợp thứ hai, lệch bội tế bào đã đợc chẩn đoán chỉ sau khi phát hiện một tế bào với hàm lợng ADN 9,2c. Có 4 trong số 7 trờng hợp đã đợc xạ trị (vì lý do khác với bệnh lý cổ tử cung) trớc khi đợc đa vào nghiên cứu đã có biểu đồ phân bố đa bội với lệch bội tế bào (tối đa 28c). Tất cả 7 trờng hợp này đều đợc xếp loại là đẳng bội bởi vì không phát hiện một lệch bội đờng phân bố nào. Có 5 trờng hợp không tiến triển, hai trờng hợp còn lại không có tiêu chuẩn tham chiếu. Lệch bội ADN đờng phân bố chủ yếu phản ánh sự phát triển của một dòng tế bào với bộ nhiễm sắc thể bất thờng tơng đối đồng nhất, ngợc lại lệch bội tế bào lại đặc trng cho một số tế bào bất thờng với các bộ nhiễm sắc thể rất khác nhau, có số lợng lớn các nhiễm sắc thể và hiếm khi có hiện tợng tăng sinh 1,2 . Nh vậy sự phát hiện lệch bội tế bào trên phiến đồ cổ tử cung chỉ xác nhận một hiện tợng chuyển dạng tế bào ác tính hơn là chỉ ra đặc điểm tế bào của một khối u đang phát triển. Điều này có thể giải thích cho giá trị dự báo dơng tính rất cao của lệch bội đờng phân bố so với lệch bội tế bào (92,3% so với 61,8% đối với CIN2+). Khi phối hợp cả hai loại lệch bội ta đạt đợc giá trị PPV cao nhất (100% đối với CIN2+). Do chẩn đoán tế bào học ban đầu của tất cả các phiến đồ đợc đa vào nghiên cứu tối thiểu là ASC/AGC, chúng tôi không thể tính các NPV của các chẩn đoán tế bào cũng nh độ nhạy và độ đặc hiệu của cả hai chẩn đoán tế bào và DNA-ICM. V. Kết luận Qua nghiên cứu 196 trờng hợp ASC, LSIL và AGC bằng DNA-ICM, có đối chiếu với các kết quả tế bào học và mô học tham chiếu, chúng tôi có các kết luận sau: - Tần suất lệch bội chung của nhóm nghiên cứu là 31,6%, tần suất này thay đổi theo các nhóm tế bào học và tơng ứng với mức độ thơng tổn về mô học (phân loại CIN) nhng xu hớng gia tăng này cha có ý nghĩa thống kê (X 2 < 1,55; p > 0,11). Lệch bội tế bào là loại thờng gặp nhất, chiếm 85,5% các trờng hợp có biểu đồ phân bố ADN bất thờng. - Với tiêu chuẩn mô học đầu ra là CIN2+, DNA-ICM giúp cải thiện PPV của chẩn đoán tế bào học quy ớc lên 1,88 lần (65,9% so với 35,2%). Nếu dùng CIN3+ làm tiêu chuẩn mô học đầu ra, DNA-ICM giúp cải thiện PPV của chẩn đoán tế bào học quy ớc lên 1,98 lần (43,9% so với 22,2%). Trong tất cả các nhóm tế bào học, DNA-ICM đã cải thiện một cách đáng kể PPV (X 2 ghép cặp 29,4; p < 0,001). TCNCYH 33 (1) - 2005 23 Tµi LiÖu THAM Kh¶o 1. Boecking A, Hilgarth M, Auffermann W, Hack-Werdier C, Fischer-Becker D, Kalkreuth von G. DNA-cytometric diagnosis of prospective malignancy in borderline lesions of the uterine cervix. Acta Cytol. 1986;30:608- 615. 2. Chatelain R, Schmunck T, Schindler EM, Schindler AE, Boecking A. Diagnosis of prospective malignancy in koilocytic dysplasia of the cervix with DNA cytometry. J Reprod Med. 1989;34:505-510. 3. Hanselaar AGJM, Boecking A, Gundlach H, et al. Summary Statement on Quantitative Cytochemistry (DNA and Molecular Biology): Task Force 8. Acta Cytol. 2001;45:499-501. 4. Haroske G, Baak JPA, Danielsen H, et al. Fourth Updated ESACP Consensus Report on diagnostic DNA image cytometry. Anal Cell Pathol. 2001;23:89-95. 5. Hering B, Horn LC, Nenning H, Kuhndel K. Predictive value of DNA cytometry in CIN1 and 6. Image analysis of 193 cases. Anal Quant Cytol Histol. 2000;22:333-337. 7. Jones BA, Novis DA. Cervical biopsy-cytology correlation: a College of American Pathologists Q-Probes study of 22439 correlations in 348 laboratories. Arch Pathol Lab Med. 1996;120:523-531. 8. Kashyap V, Das DK, Luthra UK. Microphotometric nuclear DNA analysis in cervical dysplasia of the uterine cervix: its relation to the progression to malignancy and regression to normalcy. Neoplasma. 1990;37:487-500. 9. Lonky NM, Sadeghi M, Tsadik GW, Petitti D. The clinical significance of the poor correlation of cervical dysplasia and cervical malignancy with referral cytologic results. Am J Obstet Gynecol. 1999;181:560-566. 10. Nguyen VQH, Grote HJ, Pomjanski N, Boecking A. Interobserver variability of DNA-image-cytometry in ASCUS+ cervical cytology. Cell Oncol. 2004; 26(3):143-50. 11. Solomon D, Davey D, Kurman R, et al. The 2001 Bethesda System. Terminology for reporting results of cervical cytology. JAMA. 2002;287:2114- 2119. Summary IDENTIFICATION OF PROGRESSIVE CERVICAL EPITHELIAL CELL ABNORMALITIES USING DNA-IMAGE-CYTOMETRY 1. Introduction: This study aims to compare capabilities of conventional cervical cytology and of DNA-image-cytometry (DNA-ICM) for the prediction of progressive or regressive behavior of atypical squamous cells (ASC), low-grade squamous intraepithelial lesions (LSIL), and atypical glandular cells (AGC). 2. Materials & methods: One hundred ninety-six women with Papanicolaou (Pap) smears diagnosed as ASC, LSIL or AGC were included into a prospective cohort study. Slides were classified according to the Bethesda System 2001. DNA-ICM was TCNCYH 33 (1) - 2005 24 performed according to the consensus reports of the European Society of Analytical Cellular Pathology (ESACP). 3. Results: Reference standard verification was available in 108 patients. The rate of DNA-aneuploidy in Pap smears increased significantly from cervical intraepithelial neoplasia (CIN) 1 (54%) and CIN2 (64.3%) to CIN3 or above (83.3%) in subsequent biopsies (p<0.05). Using ASC/LSIL/AGC as input cytological and CIN2 or above as output histological diagnosis, positive predictive value (PPV) of conventional cytology and DNA-ICM was 35.2% and 65.9%, respectively (p<0.001). Negative predictive value (NPV) of DNA-ICM was 85.0%. Using CIN3 or above as output histological diagnosis, conventional cytology showed a PPV of 22.2%. PPV and NPV of DNA-ICM were 43.9% and 93.3%, respectively. 4. Conclusions: This study showed the ability of DNA-ICM performed on Pap smears classified as ASC, LSIL and AGC to increase the diagnostic accuracy of conventional cytology and confirmed the prognostic validity of DNA-ICM in identification of progressive lesions in ASC, LSIL and AGC diagnoses. . 16 Chẩn Đoán Các THƯƠNG Tổn Biểu MÔ Cổ Tử CUNG Tiến Triển Bằng DNA-IMAGE-CYTOMETRY Nguyễn Vũ Quốc Huy (1) ; Alfred Boecking (2) (1) Bộ môn &. trong việc xác định các tổn thơng tiến triển trong nhóm các chẩn đoán ASC, LSIL và AGC. I. Đặt Vấn Đề Loạn sản cổ tử cung là các thơng tổn không đồng nhất,