Xây dựng tiêu chuẩn kỹ thuật chế phẩm chứa hoạt chất nanocurcumin dạng liposom.pdf

CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự - Hạnh phúc Đơn vị chủ trì: Trường Đại học Nguyễn Tất Thành BÁO CÁO TÒNG KẾT ĐÈ TÀI NCKH DÀNH CHO CÁN Bộ - GIẢNG VIÊN 2016 - 2017 Tên đề tài: Xây dựng tiêu chuẩn kỹ thuật chế phẩm chứa hoạt chất Nanocurcumin dạng liposom Số hợp đồng: 2017.01.43 /HĐ-KHCN Chủ nhiệm đề tài: Nguyễn Tường Vân Đơn vị công tác: Khoa Dược Thời gian thực hiện: 1/2017-09/2017 TP Hồ Chỉ Minh, ngày 30 thảng năm 2017 CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự - Hạnh phúc Đơn vị chủ trì: Trường Đại học Nguyễn Tất Thành BÁO CÁO TÔNG KÉT ĐÈ TÀI NCKH DÀNH CHO CÁN Bộ - GIẢNG VIÊN 2016 - 2017 Tên đề tài: Xây dựng tiêu chuẩn kỹ thuật chế phẩm chứa hoạt chất Nanocurcumin dạng liposom Số hợp đồng: 2017.01.43 /HĐ-KHCN Chủ nhiệm đề tài: Nguyền Tường Vân Đơn vị công tác: Khoa Dược Thời gian thực hiện: 4/2017-09/2017 Các thành viên phối họp cộng tác: STT Họ tên Chuyên ngành Cơ quan công tác PGS Ts.Vĩnh Định Kiêm nghiệm thuốc-Độc chất Khoa Dược, ĐH Y Dược Tp Hồ Chí Minh Ký tên MỤC LỤC DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT ĐẬT VÁN ĐỀ CHƯƠNG TỐNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 CURCUMINOID 1.1.1 Tác dụng công dụng 1.1.2 Hấp thu - Chuyển hóa - Thải trừ 1.2 LIPOSOM 1.2.1 Giới thiệu chung liposom 1.2.2 Phân loại 1.2.3 Cấu tạo hóa học 1.2.4 ứng dụng 1.2.5 Các phuơng pháp kiêm tra kích thuớc hạt 1.3 NANOCURCUMIN LIPOSOM 1.3.1 Vai trò 1.3.3 Đặc điểm hóa lý 1.4 THIẾT BỊ ZETASIZER NANO 1.4.1 Nguyên lý hoạt động máy đo kích thuớc hạt 1.4.2 Câu tạo máy đo kích thuớc hạt 11 1.5 CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG CURCUMIN 12 CHƯƠNG NỘI DUNG VA PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN cứu 14 2.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN cúư - HÓA CHÁT - TRANG THIẾT BỊ 14 2.1.1 Đoi tuợng nghiên cứu 14 2.2.2 Chất chuấn làm việc-hóa chất -dung mơi-trang thiết bị 14 2.3 NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN cữu 15 2.3.1 Phân lập curcumin II curcumin III từ bột nghệ 15 2.3.2 Thẩm định quy trình định luợng đồng thời curcuminoid 16 2.3.3 ứng dụng quy trình định lượng vào chế phẩm 19 2.3.4 Đọ hoa tan 2.3.5 Đo kích thước hạt 21 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 22 XÁC ĐỊNH ĐẠC TÍNH CẢM QUAN, ĐỘ TINH KHIẾT VÀ CÁU TRÚC CHÁT THU ĐƯỢC ' .22 3.1.1 Cảm quan 22 3.1.2 Xác định độ tinh khiết 22 3.1.3 Xác định cấu trúc phương pháp phổ 25 3.2 THÂM ĐỊNH QUY TRINH ĐỊNH LƯỢNG ĐÒNG THỜI CƯRCUMIN I, CURCUMIN il, CURCUMIN III ’ 28 3.2.1 Tính tương thích hệ thống 28 3.2.2 Tính đặc hiệu 29 3.2.3 Độ xác 31 3.2.4 Tính tuyến tính 32 3.2.5 Độ 33 3.3 ĐỊNH TÍNH VÀ ĐỊNH LƯỢNG 33 3.3.1 Định tính 33 3.3.2 Đmh lượng 35 3.4 Độ HÒA TAN 35 3.5 KÍCH THƯỚC HẠT 36 3.6 YÊU CẦU CHÁT LƯỢNG 37 3.2 BÀN LUẬN 38 3.2.1 PHÂN LẬP VÀ XÁC ĐỊNH CÁU TRÚC CXI, CX2 TỪ BỘT NGHỆ 38 3.2.1.1 Phân lập : ' 38 3.2.1.2 Xác định cấu trúc 38 3.2.2 THÁM ĐỊNH QUY TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG ĐỒNG THỜI BA CƯRCUMIN ’ 40 3.2.3 THỬ Độ HÒA TAN CHẾ PHÁM CHỨA NANOCURCƯMIN LIPOSOM41 3.2.4 KÍCH THƯỚC HẠT NANOCURCUMIN LIPOSOM 41 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 43 HỢP ĐÓNG THUYẾT MINH ĐÈ CƯƠNG DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẤT DĐVN IV Dược điển Việt Nam IV BP British Pharmacopoeia DLS Dynamic Light Scattering DMSO Dimethyl sulfoxide DSC Differential scanning calorimetry EFSA European Food Safety Authority GRAS Generally Recognized As Safe IR Infra Red JECFA Joint FAO/WHO Expert Committee on Food Additive TEM Transmission electron microscopic FP Fluorescence Polarization MS Mass Spectrometry NIBS Non Invasive Back Scatter NMR Nuclear magnetic resonance PDA Photodiode Array Detector PDI The polydispersity index RSD Relative standar Deviation THF Tetrahydrofuran USP United States Pharmacopoeia DANH MỤC • CÁC HÌNH Hình 1.1: cấu trúc hóa học curcumin I, curcumin II, curcumin III Hình 1.2: cấu tạo hạt liposom Hình 1.3: Các dạng liposom Hình 1.4: Sự tán xạ ánh sáng chùm tia qua qua mầu đo Hình 1.5: Đồ thị biểu diễn biến đổi cường độ chùm tia tán xạ theo thời gian Hình 1.6: Sự tương quan giừa tín hiệu cường độ ánh sáng tán xạ tiếu phân thời điềm khác 10 Hình 1.7: Biểu đồ thể tương quan giừa kích thước phân tử thời gian suy biến dao động 10 Hình 1.8: Phân bố kích thước theo cường độ 11 Hình 1.9: Sơ đồ cấu tạo máy đo kích thước hạt 12 Hình 1.10: VỊ trí đầu dị so với chùm tia tới 12 Hình 2.1 Sơ đồ phân lập curcumin I, curcumin II, curcumin III 15 Hình 3.1: Ket sắc ký lớp mỏng CX2 CX3 với hệ pha động 23 Hình 3.2: Phổ DSC CX2 23 Hình 3.3: Phổ DSC CX3 23 Hình 3.4: sắc ký đồ CX2 23 Hình 3.5: Độ tinh khiết pic CX2 24 Hình 3.6: sắc ký đồ CX3 24 Hình 3.7: Độ tinh khiết pic CX3 24 Hình 3.8: sắc ký đồ mầu trắng 29 Hình 3.9: sắc ký đồ dung dịch AI 29 Hình 3.10: sắc ký đồ dung dịch All 29 Hình 3.11: sắc ký đồ dung dịch Bill 30 Hình 3.12: sắc ký đồ mẫu thử 30 Hình 3.13: sắc ký đồ mẫu thử thêm chuẩn 30 Hình 3.14: Đồ thị tương quan nồng độ dung dịch đối chiếu diện tích pic curcumin 32 Hình 3.15: Đồ thị tương quan nồng độ dung dịch đối chiếu diện tích pic curcumin II 32 Hình 3.16: Đồ thị tương quan nồng độ dung dịch đối chiếu diện tích pic curcumin III 32 Hình 3.17: sắc ký đồ dung dịch mầu thử 34 Hình 3.18: sắc ký đồ dụng dịch AI 34 Hình 3.19: sắc ký đồ dụng dịch All 34 Hình 3.20: sắc ký đồ dụng dịch AIII 35 Hình 3.21: Sơ đồ kích thước hạt phân bốkích thước hạt chế phấm 37 Hình 3.22 Sự hồ biến ceton - enol curcumin I,curcumin II, curcumin II 40 DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Một số nghiên cứu lâm sàng curcumin dịch chiết nghệ Bảng 1.2: Một số ứng dụng lâm sàng dạng bào chế liposom Bảng 2.1 Thành phần công thức cùa viên 14 Bảng 2.2 Thông tin chất chuẩn 14 Bảng 2.3 Danh mục nguyên liệu - hóa chất - dung mơi 14 Bảng 2.4 Danh mục trang thiết bị sử dụng 14 Bảng 2.5 Cách chuẩn bị dung dịch xây dựng đường tuyến tính 17 Bảng 3.1: Kết độ tinh khiết sắc ký lỏng CX2 CX3 25 Bảng 3.2: Các nhóm chức CX2 CX3 suy từ IR 25 Bảng 3.3: So sánh phổ khối ESI (MS+) CX2, CX3 với tài liệu tham khảo 25 Bảng 3.4: Phổ 'H-NMR (DMSO, 500 MHz) CX2 so với tài liệu tham khảo 26 Bảng 3.5: Phổ 13C-NMR (DMSO, 125 MHz) CX2 so với tài liệu tham khảo 26 Bảng 3.6: Phổ 'H-NMR (DMSO, 500 MHz) CX3 so với tài liệu tham khảo 27 Bảng 3.7: Phổ 1’C-NMR (DMSO, 125 MHz) CX3 so với tài liệu tham khảo 27 Bảng 3.8: Kết thẩm định tính tương thích hệ thống dung dịch B I 28 Bảng 3.9: Ket thấm định tính tương thích hệ thống cùa dung dịch B II 28 Bảng 3.10: Kết thẩm định tính tương thích hệ thống dung dịch B III 28 Bảng 3.11: Ket khảo sát độ lặp lại củaphương pháp địnhlượng 31 Bảng 3.12: Ket xây dựng đường tuyếntínhcủa curcumin 32 Bảng 3.13: Độ phục hồi cùa curcumin I 33 Bảng 3.13: Độ phục hồi curcumin II 33 Bảng 3.15: Độ phục hồi curcumin III 33 Bảng 3.16: Hàm lượng curcumin chế phẩm 35 Bảng 3.17: Ket định lượng curcumin hòa tan 30 phút, 45 phút, 60 phút 35 Bảng 3.18: Ket định lượng độ hòa tan chế phâm 35 Bảng 3.19: Bảng kết đo kích thước hạt chế phẩm 36 TÓM TẢT KẼT QUA NGHIÊN CUU Sản phẩm thực đạt Sản phẩm đăng ký thuyết minh Xây dựng tiêu chuấn kỳ thuật chế Xây dựng tiêu chuấn kỳ thuật chế phẩm chứa hoạt chất nanocurcumin dạng phẩm chứa hoạt chất nanocurcumin dạng liposom liposom Bài báo tóm tắt kết (đã nộp - đăng Bài báo tóm tẳt kết (đăng ký đăng ký đăng tạp chí nhà trường) tạp chí nhà trường) Thời gian thực : Tháng Từ tháng năm 2017 Thời gian nộp đề tài: 15/11/2017 đến tháng năm 2017 XÂY DựNG TIÊU CHUẤN SỞ VIÊN NANG MỀM CHÚ A NANOCURCUMIN Hướng dần : PGS.TS Vĩnh Định Thực : Nguyễn Tường Vân Đặt vấn đề Curcumin thành phần hợp chất curcuminoid có cù nghệ Curcuma longa L Zingiberaceae Curcuminoid có nhiều cơng dụng chừa bệnh chứng lâm sàng người khỏe người bệnh cho thấy nanocurcumin có sinh khả dụng đường uống cao curcumin Các chế phàm chứa nanocurcumin lưu hành ngày nhiều thị trường Hiện dược dien Việt Nam chưa có chuyên luận quy định che phấm chứa nanocurcumin Do đó, đề tài thực nhằm mục tiêu 'Xây dựng tiêu chuẩn sở viên nang mềm chứa nanocurcumin” Đối tượng phương pháp nghiên cứu Đối tượng Viên nang mem CLINOVA chứa nanocurcumin Phương pháp nghiên cứu Phân lập curcumin từ nguyên liệu phương pháp sắc ký cột Xây dựng tiêu chuẩn sở cho viên nang mềm chứa nanocurcumin Ket bàn luận Phân lập curcumin II, curcumin III tinh khiết 98 % từ bột nghệ Xác định phù hợp cấu trúc phương pháp IR, MS NMR Xây dựng tiêu chuẩn sở cho chế phàm chứa nanocurcumin Ket luận Tiêu chuẩn sở cho chế phàm chứa nanocurcumin gồm tiêu: tính chất, độ đong khối lượng, độ hịa tan, định tính định lượng ... CUU Sản phẩm thực đạt Sản phẩm đăng ký thuyết minh Xây dựng tiêu chuấn kỳ thuật chế Xây dựng tiêu chuấn kỳ thuật chế phẩm chứa hoạt chất nanocurcumin dạng phẩm chứa hoạt chất nanocurcumin dạng liposom... TÀI NCKH DÀNH CHO CÁN Bộ - GIẢNG VIÊN 2016 - 2017 Tên đề tài: Xây dựng tiêu chuẩn kỹ thuật chế phẩm chứa hoạt chất Nanocurcumin dạng liposom Số hợp đồng: 2017.01.43 /HĐ-KHCN Chủ nhiệm đề tài:... cấu trúc phương pháp IR, MS NMR Xây dựng tiêu chuẩn sở cho chế phàm chứa nanocurcumin Ket luận Tiêu chuẩn sở cho chế phàm chứa nanocurcumin gồm tiêu: tính chất, độ đong khối lượng, độ hòa tan, định