Kết quả thử độc lực và tính mẫn cảm với kháng sinh của vi khuẩn Pasteurella Multocida gây bệnh tụ huyết trùng dê ở Thái Nguyên Đỗ Quốc Tuấn và Đtg Tạp chí KHOA HỌC & CÔNG NGHỆ 119(05) 9 13 9 KẾT QUẢ T[.]
Đỗ Quốc Tuấn Đtg Tạp chí KHOA HỌC & CÔNG NGHỆ 119(05): - 13 KẾT QUẢ THỬ ĐỘC LỰC VÀ TÍNH MẪN CẢM VỚI KHÁNG SINH CỦA VI KHUẨN PASTEURELLA MULTOCIDA GÂY BỆNH TỤ HUYẾT TRÙNG DÊ Ở THÁI NGUYÊN Đỗ Quốc Tuấn*, Hoàng Thị Thu Trang Trường Đại học Nơng Lâm - ĐH Thái Ngun TĨM TẮT Kết kiểm tra độc lực tính mẫn cảm với kháng sinh chủng vi khuẩn gây bệnh tụ huyết trùng dê phân lập đƣợc tỉnh Thái Nguyên Trong 11 chủng Pasteurella multocida có chủng (ĐH2), giết chết 2/2 chuột (100 %) chuột tiêm thử độc lực; chủng ( ĐH4, PL3, PL4 , TP1, TP3 PL4, ĐHỷ5) giết chết 1/2 chuột tiêm thử độc lực; chủng lại ( ĐH1, PL1, TP2, ĐH3) không giết chết chuột tiêm, nhƣng gây bệnh nhẹ với triệu chứng: xù lông, lại lờ đờ, khoé mắt có nhử, nằm tụ đống, ăn vịng 14 – 28 sau dần trở lại trạng thái bình thƣờng vào ngày thứ – ) Các loại kháng sinh có phổ tác dụng rộng nhƣ: Ceftiofur (EFT 30), Norfloxacin, Neomycin có tỷ lệ mẫn cảm mạnh là: 100%, tiếp đến loại kháng sinh khác: Gentamycin 88 % - Qua phác đồ điều trị cho kết sau: Phác đồ 1: Dùng thuốc điều trị: (Ceftiofur (EFT 30; Utropin; Analgin; B.complex) điều trị 10 dê có triệu chứng bệnh tụ huyết trùng, khỏi đạt tỷ lệ 80 %; Phác đồ 2: Thuốc điều trị: Nofloxacin; Utropin; Analgin; B.complex điều trị 10 dê có triệu chứng bệnh tụ huyết trùng, khỏi đạt tỷ lệ 70 %; Nhƣ vậy, điều trị với thuốc kháng sinh Ceftiofur (EFT 30), Nofloxacin kết hợp với thuốc Vitamin, thuốc giải độc có kết tốt Từ khố: Dê, Kháng sinh, Pasteurella multocida ĐẶT VẤN ĐỀ* Hiện dịch bệnh đe doạ tới phát triển đàn gia súc, gia cầm đặc biệt bệnh truyền nhiễm, gây tổn thất đáng kể kinh tế cho ngƣời chăn ni Trong phải nói đến bệnh truyền nhiễm Bệnh tụ huyết trùng dê vi khuẩn Pasteurella multocida gây Các tác giả nghiên cứu xác định đặc tính vi sinh vật hố học, định độc lực vi khuẩn xác định khả mẫn cảm với kháng sinh vi khuẩn từ tìm kháng sinh điều trị có hiệu nhƣ: Carter cộng (1967) [1] xác định độc lực vi khuẩn tụ huyết trùng sau nuôi cấy nhiều đời môi trƣờng nhân tạo Mustafa (1978) [3], nghiên cứu độc lực vi khuẩn từ dịch đƣờng hô hấp kết luận độc lực chủng phân lập đƣợc từ dịch đƣờng hô hấp không đồng phụ thuộc vào diễn biến dịch tễ bệnh tụ huyết trùng Dƣơng Thế Long * Tel: 0912 500027, Email: tuancthssv@gmail.com (1995) [2], tiến hành thử độc lực chủng Pasteurella multocida phân lập đƣợc từ vật nuôi chết tụ huyết trùng Sơn La Nguyễn Thiên Thu (1996) [4], xác định liều LD 50 chủng vi khuẩn phân lập từ dịch ngốy mũi trâu bị Vì để đánh giá xác độc lực chủng vi khuẩn phân lập đƣợc tiến hành "Kiểm tra độc lực tính mẫn cảm kháng sinh vi khuẩn Pasteurella multocida gây bệnh tụ huyết trùng dê phân lập tỉnh Thái Nguyên ” NỘI DUNG VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Nội dung - Xác định độc lực vi khuẩn Pasteurella multocida chuột bạch - Xác định tính mẫn cảm vi khuẩn Pasteurella multocida phân lập vơí số loại hố dược; - Thử nghiệm số phác đồ điều trị bệnh tụ huyết trùng dê Đỗ Quốc Tuấn Đtg Tạp chí KHOA HỌC & CƠNG NGHỆ Vật liệu -Vi khuẩn Pasteurella multocida gây bệnh tụ huyết trùng dê ni tỉnh Thái Ngun - Động vật thí nghiệm: chuột nhắt trắng khỏe mạnh (18-20g/con) - Các loại môi trƣờng hóa chất ni cấy phân lập vi khuẩn Phƣơng pháp Dùng phƣơng pháp nghiên cứu thƣờng qui KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN: Kết xác định độc lực vi khuẩn Pasteurella multocida chuột bạch Các chủng Pasteurella multocida sau phân lập, xác định đƣợc đặt tên theo nguyên tắc: Chữ đầu địa phƣơng lấy mẫu số mẫu phân lập (Ví dụ: ĐH mẫu phân lập Đồng Hoá số thự tự số 2) Đặc tính vi khuẩn Pasteurella multocida cấy chuyển nhiều đời môi trƣờng nhân tạo thƣờng bị giảm độc lực theo thời gian bảo quản (Carter, 1967), để đánh giá xác độc lực chủng vi khuẩn phân lập đƣợc xác định sau phân lập đƣợc, số chủng đƣợc thử chuột bạch kết đƣợc thể bảng Qua bảng cho thấy: Trong 11 chủng đem thử độc lực có chủng giết 2/2 (100%) chuột tiêm, chủng giết 1/2 (50%) chuột tiêm thấy thời gian giết chuột bình quân chủng: chủng ĐH2 khuẩn lạc có dạng mạnh nhất, sau 119(05): - 13 tiêm chuột ủ rũ nhanh, vận động chết sau 30giờ Đây chủng phân lập đƣợc từ dê chết tụ huyết trùng huyện Định Hóa tỉnh Thái Nguyên Tiếp theo PL3; PL4; TP1; TP3 ĐHỷ giết chết chuột 35 Đây chủng phân lập đƣợc từ dê chết tụ huyết trùng huyện Phú Lƣơng, Thành phố Thái Nguyên huyện Đồng Hỷ Chủng TP1 giết chết chuột (50%) vịng 48 Qua chúng tơi có nhận xét: độc lực chủng phân lập đƣợc từ đƣờng hơ hấp khơng đồng đều, cịn phụ thuộc vào diễn biến dịch tễ học đàn dê trƣớc đó, bệnh tụ huyết trùng lồi động vật ni tiểu vùng địa lý mà dê sinh sống, chăn thả hàng ngày nhƣ: Tụ huyết trùng trâu bò, tụ huyết trùng lợn Độc lực Pasteurella multocida phân lập đƣợc từ bệnh phẩm dê chết tụ huyết trùng tƣơng đƣơng với kết thử độc lực chủng P multocida phân lập đƣợc từ vật nuôi chết tụ huyết trùng Sơn La Dƣơng Thế Long (1995) [2] Độc lực chủng phân lập đƣợc từ dịch đƣờng hô hấp dê thƣờng thấp, khả giết chết chuột thấp; Chúng tiến hành đánh giá mức độ mẫn cảm kháng kháng sinh vi khuẩn phân lập đƣợc theo tiêu chuẩn Hội đồng Quốc gia Hoa Kỳ (1999) Bảng 1: Kết thử độc lực chuột bạch 10 STT Tên chủng vi khuẩn 10 11 ĐHoá ĐHoá ĐHoá PL1 PL3 PL4 TP TP TP ĐHỷ ĐHỷ Số chuột tiêm (con) 2 2 2 2 2 Kết thí nghiệm độc lực Số chuột Thời gian Tỷ lệ (%) chết (con) chết (giờ) 0 100 35 50 30 0 50 35 50 35 50 48 0 50 35 50 36 0 Bệnh tích mổ khám Bao tim tích nƣớc vàng Phổi sƣng, xoang ngực tích nƣớc, gan sƣng có điểm hoại tử Đỗ Quốc Tuấn Đtg Tạp chí KHOA HỌC & CƠNG NGHỆ 119(05): - 13 Tiêu chuẩn đánh giá mức độ mẫn cảm kháng kháng sinh Kháng sinh Kháng < 10 < 11 < 12 < 12 < 14 < 14 < 10 < 17 < 10 < 16 < 11 < 14 Trimethoprim-Sulphamethoxazole Streptomycin Gentamicin Neomycin Cephalothin (KF 30) Amikacin (AK30) Apramycin (APR 15) Ceftiofur (EFT 30) Lincospectinomycin Norfloxacin Ampicillin Tetracyclin Vịng vơ khuẩn (đƣờng kính mm) Mẫn cảm trung bình Mẫn cảm 11 - 15 ≥16 12 - 14 15 13 - 17 18 13 - 14 15 15 - 17 18 15 - 16 17 11 - 14 15 18 - 20 21 11 - 13 14 17 - 19 20 12 - 14 15 15 - 18 19 Xác định tính mẫn cảm vi khuẩn Pasteurella multocida phân lập với số loại hoá dược Từ mẫu vi khuẩn phân lập đƣợc chọn 10 chủng để làm kháng sinh đồ thử khả mẫn cảm vi khuẩn phân lập đƣợc với số loại kháng sinh Kết đƣợc trình bày bảng Bảng 2: Kết thử kháng sinh đồ với chủng vi khuẩn phân lập Loại kháng sinh Ceftiofur (EFT 30) Norfloxacin Neomycin Lincomycin Gentamycin Streptomycin Hàm lƣợng 10 10 30 30 10 10 g g g g g g Số mẫu kiểm tra 19 19 19 19 19 19 Rất mẫn cảm Tỷ lệ Số mẫu (%) 18 94,74 16 84,21 14 73,68 12 63,16 13 68,42 12 63,16 Qua bảng cho thấy: Pasteurella mẫn cảm với Ceftiofur (EFT 30), tiếp đến Nofloxacin Tụ huyết trùng bệnh có khả gây chết nhanh có tốc độ xâm nhập mạnh vi khuẩn Pasteurella phát triển xâm nhập vào đƣờng hô hấp gây phù nề, xuất huyết nội độc tố Pasteurella gây nên Do trình điều trị phải: - Tiêu diệt vi khuẩn Pasteurella cách nhanh chóng - Chống phù nề, xuất huyết nội độc tố - Giảm khả giải phóng độc tố vi khuẩn tiết Kết thử nghiệm số phác đồ điều trị Chúng tiến hành số phác đồ điều trị bệnh tụ huyết trùng với loại kháng Kết Mẫn cảm Số Tỷ lệ mẫu (%) 5,26 15,79 26,32 36,84 21,05 15,79 Kháng Số Tỷ lệ mẫu (%) 0 0 0 0 10,53 21,05 sinh làm kháng sinh đồ, kết đƣợc thể bảng - Phác đồ I: Thuốc điều trị: Nofloxacin 1ml/10kg TT, tiêm bắp Thuốc kết hợp: Utropin: 2ml/10kg TT, tiêm bắp Analgin - C: 2,5ml/10kg TT, tiêm bắp Bcomplex: 3ml/10kg TT, tiêm bắp - Phác đồ II: Thuốc điều trị: Ceftiofur (EFT 30): 1,5ml/10kg TT, tiêm bắp Thuốc kết hợp: Utropin: 2ml/10kg TT, tiêm bắp Analgin - C: 2,5ml/10kg TT, tiêm bắp Bcomplex: 3ml/10kg TT, tiêm bắp Kết thử nghiệm phác đồ điều trị thể qua bảng 11 Đỗ Quốc Tuấn Đtg Tạp chí KHOA HỌC & CƠNG NGHỆ 119(05): - 13 Bảng 3: Kết điều trị bệnh Thuốc điều trị STT Nofloxacin Utropin Analgin – C Bcomplex Ceftiofur (EFT 30) Utropin Analgin – C Bcomplex Qua bảng cho thấy: sau thử nghiệm phác đồ điều trị bệnh tụ huyết trùng dê loại thuốc điều trị: Nofloxacin, Ceftiofur (EFT 30) thấy hiệu lực thuốc điều trị cao; Ceftiofur (EFT 30) đạt 80%, Nofloxacin 70% KẾT LUẬN Từ kết nghiên cứu xác định độc lực, xác định tính mẫn cảm vi khuẩn với số loại hoá dược vi khuẩn phân lập Pasteurella multocida, chúng tơi có số nhận xét sau: + Kiểm tra độc lực chủng vi khuẩn phân lập đƣợc thấy Pasteurella multocida có độc lực cao, gây chết chuột thí nghiệm; Trong 11 chủng đem thử độc lực có chủng giết 2/2 (100%) chuột tiêm, chủng giết 1/2 (50%) chuột tiêm thấy thời gian giết chuột bình quân chủng: chủng ĐH2 khuẩn lạc có dạng mạnh nhất, sau tiêm chuột ủ rũ nhanh, vận động chết sau 30giờ + Các loại kháng sinh có phổ tác dụng rộng nhƣ: Ceftiofur (EFT 30), Norfloxacin, Neomycin có tỷ lệ mẫn cảm mạnh là: 100%, tiếp đến loại kháng sinh khác: Gentamycin 88 % + phác đồ điều trị cho kết sau: 12 Số điều trị (con) Số khỏi (con) Tỷ lệ (%) 10 70 10 80 Phác đồ 1: Dùng thuốc (Ceftiofur (EFT 30); Utropin; Analgin; B.complex) điều trị 10 dê có triệu chứng bệnh tụ huyết trùng khỏi đạt tỷ lệ 80% Phác đồ 2: Dùng thuốc (Nofloxacin; Utropin; Analgin; B.complex) điều trị 10 dê có triệu chứng bệnh tụ huyết trùng khỏi đạt tỷ lệ 70%; TÀI LIỆU THAM KHẢO Carter, G.R (1967), Pasteurellosis and Pasteurella multocida and Pasteurella haemolytica In advance in Veterinary Science, 11, pp: 321-329 Dƣơng Thế Long ” Nghiên cứu số đặc điểm dịch tễ vi khuẩn học vi khuẩn tụ huyết trùng Sơn La để xác định biện pháp phịng trị thích hợp” Luận án Phó tiến sỹ Khoa học nông nghiệp Hà Nội , 1995 Mustafa, A.A., Ghalile, H W., and Shigidi, MT Carrier rate of Pasteurella multocida in a cattle herd as with an outbreak of haemorrhagic septicaemia in Sudan British Veterinary Journal, 124 1978 P 357 - 358 Nguyễn Thiên Thu (1996) “Nghiên cứu đặc tính sinh vật kháng nguyên vi khuẩn Pasteurella multocida phân lập từ trâu bò mang trùng khu vực miền Trung” Luận án Phó tiến sỹ Khoa học nông nghiệp, Viện Thú y Quốc gia, Hà Nội Đỗ Quốc Tuấn Đtg Tạp chí KHOA HỌC & CÔNG NGHỆ 119(05): - 13 SUMMARY THE RESULT TESTING OF TOXICITY AND SENSITIVITY TO ANTIBIOTICS OF PASTEURELLA MULTOCIDA WHICH WAS ISOLATED BY PASTEURELLOSIS FOR GOATS AT THAI NGUYEN Do Quoc Tuan*, Hoang Thi Thu Trang College of Agriculture and Forestry - TNU We tested the toxicity of 11 Pasteurella multocida types The results show that the DH2 is the most toxicity type, with the death rate of experimental mice being 100%, compared to 50% in different types, namely DH4, PL3, PL4, TP1, TP3 and DH5 Meanwhile, the rest of types whose name are DH1, PL1, TP3 and DH3 were not able to make death mice after they were injected toxicity However, the mice were infected slight diseases, whose prevelent symtom are bristling, difficulty & slow walking, gum on the edge of the eyelids and less eating from 14 to 28 hours After five or six days, they are become normal status The antibiotics which are the most effect on Pasteurella multocida are Ceftiofur (EFT30), Norfloxacin and Neomycin, their sensityvity ratio are 100%, followed by Gentamycin with 88% The result of treatment 1st treating procedure: After being injected Ceftiour, Utropin, Analgin and B.complex, the goats were 80% in the rate of well again 2nd treating procedure: We used Nofloxacin, Utropin, Analgin and B.complex to treat for goats, the rate of back to health was 70% Key words: Goats, antibiotics, Pasteurella multocida Ngày nhận bài:25/11/2013; Ngày phản biện:06/12/2013; Ngày duyệt đăng: 5/5/2014 Phản biện khoa học: TS Lê Minh – Trường Đại học Nông Lâm - ĐHTN * Tel: 0912 500027, Email: tuancthssv@gmail.com 13 ... hàng ngày nhƣ: Tụ huyết trùng trâu bò, tụ huyết trùng lợn Độc lực Pasteurella multocida phân lập đƣợc từ bệnh phẩm dê chết tụ huyết trùng tƣơng đƣơng với kết thử độc lực chủng P multocida phân... tính mẫn cảm vi khuẩn Pasteurella multocida phân lập với số loại hoá dược Từ mẫu vi khuẩn phân lập đƣợc chọn 10 chủng để làm kháng sinh đồ thử khả mẫn cảm vi khuẩn phân lập đƣợc với số loại kháng. .. nề, xuất huyết nội độc tố - Giảm khả giải phóng độc tố vi khuẩn tiết Kết thử nghiệm số phác đồ điều trị Chúng tiến hành số phác đồ điều trị bệnh tụ huyết trùng với loại kháng Kết Mẫn cảm Số Tỷ