ĐỊNH DANH và PHÂN NHÓM nấm trichoderma spp PHÂN lập tại VIỆT NAM

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP HCM - - KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỊNH DANH VÀ PHÂN NHÓM NẤM Trichoderma spp PHÂN LẬP TẠI VIỆT NAM Ngành học: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Niên khóa: 2003 – 2007 Sinh viên thực hiện: NGUYỄN THỊ KHẢ TÚ Thành phố Hồ Chí Minh Tháng 9/2007 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP HCM BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC - ĐỊNH DANH VÀ PHÂN NHÓM NẤM Trichoderma spp PHÂN LẬP TẠI VIỆT NAM Giáo viên hƣớng dẫn Sinh viên thực TS LÊ ĐÌNH ĐƠN NGUYỄN THỊ KHẢ TÚ Thành phố Hồ Chí Minh Tháng 9/2007 iii LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com “Khơng so sánh đƣợc tình u tơi dành cho mẹ, ba, chị em tôi, ngƣời nắm giữ trái tim trọn đời Tôi cảm thấy ấm áp quan tâm tình thƣơng chân thành ngƣời thân tộc dành cho Không quên quan tâm, chia sẻ lời dạy dỗ Thầy TS Lê Đình Đơn, ngƣời thầy lớn Tơi ln tự hào đƣợc học tập rèn luyện trƣờng Đại học Nông Lâm Thành phố Hồ Chí Minh nói chung mơn Cơng nghệ sinh học nói riêng Gởi lời cảm ơn sâu sắc đến anh Nguyễn Văn Lẫm, chị Trần Thị Vân, Nguyễn Thị Thùy Dƣơng, Phạm Thị Minh Kiều, Trịnh Thị Phƣơng Vy Anh, Chị viện Nghiên cứu Công nghệ sinh học Công nghệ môi trƣờng, trƣờng Đại học Nơng Lâm Thành phố Hồ Chí Minh ln quan tâm, tận tình giúp đỡ hƣớng dẫn tơi suốt thời gian thực đề tài Luôn nhớ đến bạn lớp DH03SH với bạn khoa Nơng học làm chung phịng 105, môn Bảo vệ Thực vật, khoa Nông học, trƣờng Đại học Nơng Lâm Thành phố Hồ Chí Minh, ngƣời thật đáng mến Có giai đoạn thật khó khăn sống tơi thật may mắn có đƣợc ngƣời bạn chịu đựng làm cảm thấy ấm áp Cảm ơn mày nhiều Tuyền” Nguyễn Thị Khả Tú iii LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com TÓM TẮT Đề tài: “Định danh phân nhóm nấm Trichoderma spp phân lập Việt Nam” Nguyễn Thị Khả Tú thực từ 19/3/2007 đến ngày 19/8/2007 môn Bảo vệ thực vật, khoa Nông học, trƣờng Đại học Nông Lâm Thành phố Hồ Chí Minh phịng Cơng nghệ sinh học thực vật, viện Nghiên cứu Công nghệ sinh học Công nghệ môi trƣờng, trƣờng Đại học Nông Lâm Thành phố Hồ Chí Minh Mục đích Định danh tên lồi 11 dịng nấm Trichoderma spp phân lập Việt Nam Phân nhóm xác định mối qua hệ di truyền 11 dòng Trichoderma spp Xác định mối quan hệ di truyền 11 dòng Trichoderma spp (Trichoderma) với liệu chúng vùng sinh thái, địa lý khác giới Phƣơng pháp thực Kết định danh dựa vào hình thái kết hợp với kết so sánh trình tự vùng bảo tồn ITS – rDNA (Internal Transcribed Space – rDNA) phần vùng chức tef1 (4th large intron) (EF – 1α, Translation Elongation Factor – alpha) với liệu chúng NCBI phần mềm ClustalX 1.83 So sánh trình tự vùng ITS – rDNA phần vùng tef1 11 dòng Trichoderma phần mềm ClustalX 1.83 đọc kết phần mềm TreeView 1.6.6 Trình tự vùng ITS – rDNA phần vùng tef1 11 dòng Trichoderma đƣợc so sánh với liệu chúng vùng sinh thái, địa lý khác giới phần mềm ClustalX 1.83 đọc kết phần mềm TreeView 1.6.6 Kết đạt đƣợc Khẳng định tên lồi xác 10 dịng Trichoderma Thiết lập thể rõ đƣợc mối quan hệ di truyền 11 dòng Trichoderma 11 dòng Trichoderma Việt Nam thuộc loài T longibrachiatum, T asperellum, T atroviride, T harzianum, T virens (trừ dịng T asperellum (T6)) có quan hệ di truyền xa so với dòng giới 10 dịng có nguồn gốc địa dịng iv LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com T asperellum (T6) dòng ngoại lai du nhập vào nƣớc ta Mối quan hệ di truyền loài bền vững phù hợp với mối quan hệ hình thái Kết luận Với kết định danh dựa vào hình thái kết hợp trình tự vùng ITS – rDNA phần vùng tef1 định danh xác tên lồi xác định đƣợc mối quan hệ di truyền loài nhƣ dịng lồi Trichoderma Sử dụng trình tự vùng ITS – rDNA trình tự phần vùng tef1 phân biệt dịng Trichoderma địa với dòng ngoại lai Mở triển vọng cho nghiên cứu ứng dụng phƣơng pháp định danh đề tài v LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com ABSTRACT “Identifying and grouping of Trichoderma spp collected in Viet Nam”, thesis is carried out by Nguyen Thi Kha Tu, from 19 Mar, 2007 to 19 Aug, 2007 at Plant Protection Pepartment, Argonomy Faculty, Nong Lam University and Phytobiotechnology Laboratory, Reseach Institute Biological and Enviromental Technology, Nong Lam University This thesis was based on molds identified results then using Clustal 1.83 and Treeview 1.6.6 software to compare ITS – rDNA (Internal Transcribed Space – rDNA) stable and apart of tef1 (EF – 1α, Translation Elongation Factor – alpha) funtional regions with their data on NCBI to identifying species and grouping of 11 Trichoderma genus Finally, ITS – rDNA and apart of tef1 regions of 11 Trichoderma genus were compared with their data at different ecological, geographic areas on over the world to clear the genetic relationship The results show that confirming exactly the species of 10 Trichoderma genus, T68 genus was identified T atroviride Establishing and clearing the genetic relationship among 11 Trichoderma genus In which, 11 Trichoderma genus in Viet Nam of species T longibrachiatum, T asperellum, T atroviride, T harzianum , T virens (except T asperellum genus (T6)) have a rather far genetic relationship from others in the world 10 genus orginated from locality and T asperellum (T6) is the one migrated in our country Genetic relationship among species is stable and suitable with morphological characteristics vi LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com MỤC LỤC TÓM TẮT iv ABSTRACT vi MỤC LỤC vi DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT .x DANH SÁCH CÁC BẢNG xii DANH SÁCH CÁC HÌNH xii Chƣơng .0 MỞ ĐẦU .0 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích 1.3 Yêu cầu Chƣơng .2 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Giới thiệu nấm Trichoderma .2 2.1.1 Phân loại 2.1.2 Nguồn gốc 2.1.3 Đặc điểm hình thái 2.1.4 Đặc điểm sinh lý, sinh hóa, sinh học .4 2.1.5 Cơ chế đối kháng với nấm gây bệnh trồng .4 2.2 Cấu tạo tế bào Trichoderma 2.3 Các phƣơng pháp định danh tên loài nấm Trichoderma 2.4 Giới thiệu vùng rDNA vùng ITS – rDNA 2.5 Giới thiệu vùng tef1 .10 2.6 Phƣơng pháp định lƣợng nồng độ DNA phân tử Mass .10 2.7 Các nghiên cứu có liên quan đến Trichoderma vùng rDNA 11 2.8 Các nghiên cứu có liên quan đến định danh phân nhóm Trichoderma 13 Chƣơng 15 vii LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP 15 3.1 Thời gian, địa điểm, đối tƣợng nghiên cứu 15 3.1.1 Thời gian địa điểm nghiên cứu 15 3.1.2 Đối tƣợng nghiên cứu 15 3.2 Hoá chất .16 3.3 Dụng cụ thiết bị .17 3.4 Phục hồi dòng Trichoderma .17 3.5 Nhân thu sinh khối Trichoderma 17 3.6 Ly trích DNA tổng số Trichoderma .18 3.7 Kiểm tra kết ly trích pha lỗng DNA .18 3.8 Phản ứng PCR 19 3.9 Đánh giá kết PCR 21 3.10 Định danh tên lồi dịng Trichoderma 22 3.11 Phân nhóm tạo phổ hệ di truyền 24 3.12 Xác định mối quan hệ di truyền 11 dòng Trichoderma Việt Nam với liệu chúng vùng sinh thái, địa lý khác giới 24 Chƣơng 25 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 25 4.1 Kết ly trích DNA 25 4.2 Kết PCR khuếch đại vùng ITS – rDNA phần vùng tef1 26 4.3 Kết định danh tên loài 27 4.4 Kết phân nhóm tạo phổ hệ di truyền .35 4.4.1 Kết phân nhóm từ trình tự vùng ITS – rDNA phần vùng tef1 35 4.4.2 Kết phân nhóm từ trình tự vùng ITS1, 5.8S ITS2 – rDNA 37 4.5 So sánh vùng ITS1 ITS2 – rDNA với liệu chúng NCBI 39 4.6 Xác định mối quan hệ di truyền vùng ITS – rDNA phần vùng tef1 với liệu chúng giới .41 Chƣơng 44 viii LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ .44 5.1 Kết luận 44 5.2 Đề nghị 44 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC ix LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT µg: microgram µl: microlite µM: micromol/lite dNTP: Deoxyribonucleotide triphosphate DNA: Deoxyribonucleic acid EDTA: Ethylene diamin tetracetic acid PCR: Polymerase chain reaction RAPD: Random amplified polymorphism DNA RNA: Ribonucleic acid SDS: sodium dodecyl sulfate Taq: Thermus aquaticus TAE: Tris-glacial acetic acid- ethylenne diamine tetra acetic acid TE: Tris ethylene diamine tetra acetate Tm: Melting Tempereture (nhiệt độ nóng chảy) U: Đơn vị hoạt tính x LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Kết đọc trình tự dạng peak dịng 14 với primer ITS4 Kết đọc trình tự dạng peak dòng T14 với primer ITS5 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Dòng T85 – T harzianum 557 bq 18S ITS1 10 208 5.8S 209 366 ITS2 367 540 28S 541 557 61 121 181 241 301 361 421 481 541 GGATCATTACCGAGTTTACAACTCCCAAACCCAATGTGAACGTTACCAAACTGTTGCCTC GGCGGGATCTCTGCCCCGGGTGCGTCGCAGCCCCGGACCAAGGCGCCCGCCGGAGGACCA ACCAAAACTCTTTTTGTATACCCCCTCGCGGGTTTTTTATGATCTGAGCCTTCTCGGCGC CTCTCGTAGGCGTTTCGAAAATGAATCAAAACTTTCAACAACGGATCTCTTGGTTCTGGC ATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATAAGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCA TCGAATCTTTGAACGCACATTGCGCCCGCCAGTATTCTGGCGGGCATGCCTGTCCGAGCG TCATTTCAACCCTCGAACCCCTCCGGGGGGTCGGCGTTGGGGATCGGCCCTGCCTCTTGG CGGTGGCCGTCTCCGAAATACAGTGGCGGTCTCGCCGCAGCCTCTCCTGCGCAGTAGTTT GCACACTCGCATCGGGAGCGCGGCGCGTCCACAGCCGTTAAACACCCAACTTCTGAAATG TTGACCTCGGATCAGGT Kết đọc trình tự dạng peak dịng T85 với primer ITS4 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Kết đọc trình tự dạng peak dịng T85 với primer ITS5 Dòng T88 – T.asperellum 540 bq 18S ITS1 10 191 5.8S 192 349 ITS2 350 523 28S 524 540 61 121 181 241 301 361 421 481 GGATCATTACCGAGTTTACAACTCCCAAACCCAATGTGAACGTTACCAAACTGTTGCCTC GGCGGGGTCACGCCCCGGGTGCGTCGCAGCCCCGGAACCAGGCGCCCGCCGGAGGAACCA ACCAAACTCTTTCTGTAGTCCCCTCGCGGACGTATTTCTTACAGCTCTGAGCAAAAATTC AAAATGAATCAAAACTTTCAACAACGGATCTCTTGGTTCTGGCATCGATGAAGAACGCAG CGAAATGCGATAAGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCA CATTGCGCCCGCCAGTATTCTGGCGGGCATGCCTGTCCGAGCGTCATTTCAACCCTCGAA CCCCTCCGGGGGATCGGCGTTGGGGATCGGGACCCCTCACACGGGTGCCGGCCCCGAAAT ACAGTGGCGGTCTCGCCGCAGCCTCTCCTGCGCAGTAGTTTGCACAACTCGCACCGGGAG CGCGGCGCGTCCACGTCCGTAAAACACCCAACTTTCTGAAATGTTGACCTCGGATCAGGT Kết đọc trình tự dạng peak dịng T88 với primer ITS4 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Kết đọc trình tự dạng peak dịng T88 với primer ITS5 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Dòng T6 – T asperellum 540 bq 18S ITS1 10 191 5.8S 192 349 ITS2 350 523 28S 524 540 61 121 181 241 301 361 421 481 GGATCATTACCGAGTTTACAACTCCCAAACCCAATGTGAACGTTACCAAACTGTTGCCTC GGCGGGGTCACGCCCCGGGTGCGTCGCAGCCCCGGAACCAGGCGCCCGCCGGAGGAACCA ACCAAACTCTTTCTGTAGTCCCCTCGCGGACGTATTTCTTACAGCTCTGAGCAAAAATTC AAAATGAATCAAAACTTTCAACAACGGATCTCTTGGTTCTGGCATCGATGAAGAACGCAG CGAAATGCGATAAGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCA CATTGCGCCCGCCAGTATTCTGGCGGGCATGCCTGTCCGAGCGTCATTTCAACCCTCGAA CCCCTCCGGGGGATCGGCGTTGGGGATCGGGACCCCTCACACGGGTGCCGGCCCCGAAAT ACAGTGGCGGTCTCGCCGCAGCCTCTCCTGCGCAGTAGTTTGCACAACTCGCACCGGGAG CGCGGCGCGTCCACGTCCGTAAAACACCCAACTTTCTGAAATGTTGACCTCGGATCAGGT Kết đọc trình tự dạng peak dịng T6 với primer ITS4 Kết đọc trình tự dạng peak dịng T6 với primer ITS5 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Dòng T68 – T atroviride 554 bq 18S ITS1 10 194 5.8S 195 352 ITS2 353 528 28S 529 545 61 121 181 241 301 361 421 481 541 GGATCATTACCGAGTTTACAACTCCCAAACCCAATGTGAACCATACCAAACTGTTGCCTC GGCGGGGTCACGCCCCGGGTGCGTCGCAGCCCCGGAACCAGGCGCCCGCCGGAGGGACCA ACCAAACTCTTTACTGTAGTCCCCTCGCGGACGTTATTTCTTACAGCTCTGAGCAAAAAA TTCAAAATGAATCAAAACTTTCAACAACGGATCTCTTGGTTCTGGCATCGATGAAGAACG CAGCGAAATGCGATAAGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAAC GCACATTGCGCCCGCCAGTATTCTGGCGGGCATGCCTGTCCGAGCGTCATTTCAACCCTC GAACCCCTCCGGGGGGTCGGCGTTGGGGATCGGGAACCCCTCAGACGGGATCCCGGCCCC GAAATACAGTGGCGGTCTCGCCGCAGCCTCTCCTGCGCAGTAGTTTGCACAACTCGCACC GGGAGCGCGGCGCGTCCACGTCCGTAAAACACCCAACTTTCTGAAATGTTGACCTCGGAT CAGGT Kết đọc trình tự dạng peak dòng T68 với primer ITS4 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Kết đọc trình tự dạng peak dòng T68 với primer ITS5 Phụ lục 2: Kết giải trình tự phần vùng tef1 với primer EF1 – 728F EF1 – 986R cơng ty Macrogen, Hàn Quốc Dịng T37 – T longibrachianum 275 bq 61 121 181 241 ATCCCTTCAATTTTCGGACGATTTCCTTTGCCTCTGCCCAACATCTGTCGACCAGGTGGT CTGCGTCGATGGACTTTTTTTCACCACCCCGCTTTCTCCTACCCCTCCTTTGGGCGACGC AAATTTTTTTTGTTGCGTTTCGGGTTTTAGTGGGGATGCACCTCCAGCAAACCACTATCC TCTGCCGCCCTCTGCTCTCGTCTCCAACACCTTTGGCGCTTGCGTCATCAACCTTCCAAC AGTCTGCGCAGCAATGCTAATCATTTCCCCCTCAA LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Kết đọc trình tự dạng peak dịng T37 với primer EF1 – 728F Kết đọc trình tự dạng peak dòng T37 với primer EF1 – 986R Dòng T42 – T asperellum 290 bq 61 121 181 241 TGCTTTTCCCATCAATTTTTGGCACAATTATATGCCCGACAATTCTGTTCTCAGTTTTGT CTTTCTTTTTTCAGCATCACCCCGCTTTGCCAGCCTACCTACCCCTCCTTTGGCACAGCA AAAAATTTTCTCGCTGCCTTGTTTGGCTTTTAGTGGGGTGTCAATTTTGTTTGACGGCAA CCCCACTATCGCCACTGTACCTCTTTCCATCATCCACCACATGCTTTTGTTCAATCGCAT CGTCTATTTTCAATATCTCTTGTTCATTATGCTGATCATGCTTCAATCAA LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Kết đọc trình tự dạng peak dòng T42 với primer EF1 – 728F Kết đọc trình tự dạng peak dịng T42 với primer EF1 – 986R Dòng T38 – T virens 278 bq 61 121 181 241 TGCTTTCGCATCAATTTCCCCTTCACATTCAATTGTGCTCGACAATTCTCTTCAGAATCA TCGAAGCAACAATTTTTTTCGTCACCCCGCTTTCGTTCCATTACCCCTCCTTTGCAGCGA CGCAAAATTTTTTGCTGCCTCTGGTTTTTAGTGGGGGTGCACCAGCAACCCCACCACTAC CTCGCTGCTCTTTGCCCTTGTCCTATCACCTCCCAGTCCTCGTCCAACGATCTGTGTCTC GATAATTGCAGCGATGCTAACCACCGTTCCCTCAACAG LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Kết đọc trình tự dạng peak dịng T38 với primer EF1 – 728F Kết đọc trình tự dạng peak dòng T38 với primer EF1 – 986R Dòng T33 – T asperellum 290 bq 61 121 181 241 TGCTTTTCCCATCAATTTTTGGCACAATTATATGCCCGACAATTCTGTTCTCAGTTTTGT CTTTCTTTTTTCAGCATCACCCCGCTTTGCCAGCCTACCTACCCCTCCTTTGGCACAGCA AAAAATTTTCTCGCTGCCTTGTTTGGCTTTTAGTGGGGTGTCAATTTTGTTTGACGGCAA CCCCACTATCGCCACTGTACCTCTTTCCATCATCCACCACATGCTTTTGTTCAATCGCAT CGTCTATTTTCAATATCTCTTGTTCATTATGCTGATCATGCTTCAATCAA LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Kết đọc trình tự dạng peak dòng T33 với primer EF1 – 728F Kết đọc trình tự dạng peak dịng T33 với primer EF1 – 986R Dòng T2 – T asperellum 290 bq 61 121 181 241 TGCTTTTCCCATCAATTTTTGGCACAATTATATGCCCGACAATTCTGTTCTCAGTTTTGT CTTTCTTTTTTCAGCATCACCCCGCTTTGCCAGCCTACCTACCCCTCCTTTGGCACAGCA AAAAATTTTCTCGCTGCCTTGTTTGGCTTTTAGTGGGGTGTCAATTTTGTTTGACGGCAA CCCCACTATCGCCACTGTACCTCTTTCCATCATCCACCACATGCTTTTGTTCAATCGCAT CGTCTATTTTCAATATCTCTTGTTCATTATGCTGATCATGCTTCAATCAA LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Kết đọc trình tự dạng peak dịng T2 với primer EF1 – 728F Kết đọc trình tự dạng peak dịng T2 với primer EF1 – 986R Dòng T85 – T harzianum 276 bq 61 121 181 241 TGATTTTCGCCTCGATTCCTCTTCTTTCATATTCAATTGTGCCCGACAATTCTTCAGAGA CTTTTTGGGTCGACAATTTTTCGTCACCCCGCTTTCCATTACCCCTCCTTTGCAGCGACG CAAATTTTTTTTGCTGCCGTTTGATTTTTAGTGGGGTTCTCTGTGCAACCCCACTAGCTC ACTGCTTTTTTTGTGCTTCATTCACTTCCCAGTCATCATTCAACGTGCTCTGTGTCTTTG GTTATTCAACGATGCTAACCACTTTTCCATCAATAG LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Kết đọc trình tự dạng peak dịng T85 với primer EF1 – 728F Kết đọc trình tự dạng peak dòng T85 với primer EF1 – 986R Dòng T88 – T.asperellum 290 bq 61 121 181 241 TGCTTTTCCCATCAATTTTTGGCACAATTATATGCCCGACAATTCTGTTCTCAGTTTTGT CTTTCTTTTTTCAGCATCACCCCGCTTTGCCAGCCTACCTACCCCTCCTTTGGCACAGCA AAAAATTTTCTCGCTGCCTTGTTTGGCTTTTAGTGGGGTGTCAATTTTGTTTGACGGCAA CCCCACTATCGCCACTGTACCTCTTTCCATCATCCACCACATGCTTTTGTTCAATCGCAT CGTCTATTTTCAATATCTCTTGTTCATTATGCTGATCATGCTTCAATCAA LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Kết đọc trình tự dạng peak dòng T88 với primer EF1 – 728F Kết đọc trình tự dạng peak dịng T88 với primer EF1 – 986R Dòng T6 – T asperellum 290 bq 61 121 181 241 TGCTTTTCCCATCAATTTTTGGCACAATCATATGCCCGACAATTCTGCTCTCAGTTTTTG TCTTTTTTTTCCAGCGTCACCCCGCTTTGCCAGTCTACCTACCCCTCCTTTGGCACAGCA AAAATTTTCTGGCTGCCTTGTTTGGCTTTTAGTGGGGTGTCAAATTTTTTGGCAGCAACC CCGCTATCGCCACTGCACCTCTTCCATCACCCACCACATGCTATTTGCTCAATCGCGTCG TCTTTTTTTGTTCATTATGCTGATCATGCTTCAATCAA 10 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Kết đọc trình tự dạng peak dịng T6 với primer EF1 – 728F Kết đọc trình tự dạng peak dòng T6 với primer EF1 – 986R 11 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com ... đích Định danh tên lồi 11 dịng nấm Trichoderma spp phân lập Việt Nam Phân nhóm xác định mối qua hệ di truyền 11 dòng Trichoderma spp Xác định mối quan hệ di truyền 11 dòng Trichoderma spp (Trichoderma) ...BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP HCM BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC - ĐỊNH DANH VÀ PHÂN NHÓM NẤM Trichoderma spp PHÂN LẬP TẠI VIỆT NAM Giáo viên hƣớng dẫn Sinh... thổ nƣớc ta 1.2 Mục đích Định danh tên lồi và phân nhóm xác định mối qua hệ di truyền Trichoderma phân lập Việt Nam 11 dòng Xác định mối quan hệ di truyền 11 dòng Trichoderma với liệu chúng