KHẢO sát hàm LƯỢNG PROGESTERONE TRONG sữa BẰNG kỹ THUẬT ELISA để CHẨN đoán MANG THAI sớm, CHẬM ĐỘNG dục HOẶC PHỐI NHIỀU lần KHÔNG đậu TRÊN bõ CHO sữa tại CÔNG TY cổ PHẦN bõ sữa

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BỘ MƠN CƠNG NGHỆ SINH HỌC  KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT HÀM LƢỢNG PROGESTERONE TRONG SỮA BẰNG KỸ THUẬT ELISA ĐỂ CHẨN ĐOÁN MANG THAI SỚM, CHẬM ĐỘNG DỤC HOẶC PHỐI NHIỀU LẦN KHÔNG ĐẬU TRÊN BÕ CHO SỮA TẠI CÔNG TY CỔ PHẦN BÕ SỮA LONG THÀNH VÀ CÁC HỘ LÂN CẬN TỈNH ĐỒNG NAI Ngành học: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Niên khóa: 2003 – 2007 Sinh viên thực hiện: ĐẶNG SỸ KHA Thành phố Hồ Chí Minh Tháng 8/2007 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC NƠNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BỘ MƠN CƠNG NGHỆ SINH HỌC *********************** KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT HÀM LƢỢNG PROGESTERONE TRONG SỮA BẰNG KỸ THUẬT ELISA ĐỂ CHẨN ĐOÁN MANG THAI SỚM, CHẬM ĐỘNG DỤC HOẶC PHỐI NHIỀU LẦN KHÔNG ĐẬU TRÊN BÕ CHO SỮA TẠI CÔNG TY CỔ PHẦN BÕ SỮA LONG THÀNH VÀ CÁC HỘ LÂN CẬN TỈNH ĐỒNG NAI Giáo viên hƣớng dẫn: Sinh viên thực hiện: TS DƢƠNG NGUYÊN KHANG ĐẶNG SỸ KHA BSTY LÊ THỊ THU HÀ Thành phố Hồ Chí Minh Tháng 8/2007 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com LỜI CẢM ƠN Trƣớc tiên xin chân thành cảm ơn công lao sinh thành, dạy bảo tất tốt đẹp mà cha mẹ dành cho để có đƣợc nhƣ ngày hơm Và với tất lịng thành, xin chân thành cảm ơn: Ban Giám hiệu trƣờng Đại Học Nơng Lâm thành phố Hồ Chí Minh, Ban chủ nhiệm Bộ Môn Công Nghệ Sinh Học, tất quý thầy cô truyền đạt kiến thức cho tơi suốt q trình học trƣờng TS Dƣơng Nguyên Khang hết lòng hƣớng dẫn, động viên giúp đỡ suốt thời gian thực tập tốt nghiệp Ban Giám đốc, nhân viên phòng kỹ thuật đội ngũ chăn nuôi Công ty cổ phần bị sữa Đồng Nai nhiệt tình giúp đỡ tơi suốt thời gian thực tập BSTY Lê Thị Thu Hà quan tâm tận tình giúp đỡ tơi suốt thời gian thực tập Các hộ gia đình huyện Long Thành, Đồng Nai nhiệt tình giúp đỡ suốt thời gian thực tập Xin bày tỏ lòng cảm ơn đến ngƣời bạn gắn bó, động viên chia sẻ khó khăn với suốt ngày tháng ngồi ghế giảng đƣờng đại học Sinh viên Đặng Sỹ Kha iii LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com TÓM TẮT KHÓA LUẬN Đề tài “Khảo sát hàm lƣợng progesterone sữa kỹ thuật ELISA để chẩn đoán mang thai sớm, chậm động dục phối nhiều lần không đậu bị cho sữa Cơng ty cổ phần bị sữa Long Thành hộ lân cận tỉnh Đồng Nai” đƣợc thực từ tháng 03/2007 đến tháng 07/2007 Số liệu ghi nhận đƣợc bị sữa sinh sản bình thƣờng, bò sữa sau sinh 90 ngày trở lên mà khơng có biểu động dục phối nhiều lần khơng đậu Khảo sát 20 bị sinh sản bình thƣờng 20 bò chậm động dục phối nhiều lần không đậu, tiến hành lấy mẫu sữa xét nghiệm hàm lƣợng progesterone kỹ thuật ELISA vào ngày 0, 7, 14, 21 24 sau phối Kết xét nghiệm hàm lƣợng progesterone chẩn đốn tình trạng mang thai sớm bị kiểm tra tình trạng chậm sinh sản kết nhƣ sau:  Bò sinh sản bình thƣờng Hàm lƣợng progesterone sữa trung bình theo nhóm cao bị ngày gieo tinh 0,61 ng/ml tăng lên 2,31 ng/ml vào ngày thứ 21 Chẩn đoán mang thai 60 ngày khám qua trực tràng đạt 80%; 20% bị bị tồn hồng thể Hàm lƣợng progesterone sữa trung bình theo nhóm thấp bò ngày gieo tinh 0,34 ng/ml, tăng từ ngày đến ngày 14 lần lƣợt 0,58 1,12 ng/ml; sau giảm xuống vào ngày thứ 21 0,87 ng/ml  Bò chậm động dục phối nhiều lần không đậu Hàm lƣợng progesterone sữa trung bình theo nhóm cao bị ngày gieo tinh 0,46 ng/ml tăng lên 2,34 ng/ml vào ngày thứ 21 Chẩn đoán mang thai 60 ngày khám qua trực tràng đạt 60%; 40% bị tồn hoàng thể Hàm lƣợng progesterone sữa trung bình theo nhóm thấp bị ngày gieo tinh 0,21 ng/ml, tăng từ ngày đến ngày 14 lần lƣợt 0,61 0,87 ng/ml; sau giảm xuống vào ngày thứ 21 0,68 ng/ml Bị có buồng trứng chƣa hoạt động trở lại bị u nang noãn Tp.HCM, ngày 15 tháng 08 năm 2007 Bộ môn Công Nghệ Sinh Học iv LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com MỤC LỤC CHƢƠNG TRANG Trang tựa Lời cảm tạ iii Tóm tắt iv Mục lục .v Danh sách chữ viết tắt viii Danh sách hình ix Danh sách bảng x Chƣơng MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề…………………………………………………………………1 1.2 Mục đích yêu cầu 1.2.1 Mục đích……………………………………………………………2 1.2.2 Yêu cầu……………………………………………………… .2 Chƣơng TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Sơ lƣợc cơng ty cổ phần bị sữa Đồng Nai …………………………3 2.1.1 Quá trình hình thành……………………………………………….3 2.1.2 Nhiệm vụ công ty 2.1.3 Tổ chức sản xuất cấu đàn bị……………………………… 2.1.4 Phƣơng pháp chăm sóc, ni dƣỡng ……………………………………… …………………………5 2.2 Vài nét tình hình chăn ni nơng hộ …………………………8 2.2.1 Nguồn gốc đàn bò ……………………………………………….8 2.2.2 Đặc điểm đồng cỏ 2.2.3 Đặc điểm chuồng trại ……………………………………… 2.2.4 Phƣơng thức chăn ni ……………………………………… ……………………………………………….8 2.3 Sơ lƣợc giống bị sữa Holstein Friesian (HF) 2.4 Chu kỳ động dục ……………………… 10 …………………………………………………… 11 2.5 Hiện tƣợng chậm sinh chậm động dục sau sinh ……………… 14 v LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 2.5.1 Bệnh ấu trĩ (hay gọi chứng thiểu sinh dục) ……….14 2.5.2 Hiện tƣợng Free – matin 2.5.3 Buồng trứng teo giảm …………………………… 15 2.5.4 U nang buồng trứng ……………………………………………16 2.5.5 Thối hóa buồng trứng …………………………………….15 …………………………………….16 2.6 Vai trò progesterone sinh sản …………………………… 17 2.6.1 Nguồn gốc progesterone …………………………………….17 2.6.2 Bản chất, khối lƣợng phân tử, cấu trúc phân tử ………………17 2.6.3 Vận chuyển chuyển hóa progesterone tác dụng progesterone ………………………………………………………………………….18 2.6.4 Động thái progesterone chu kỳ động dục bình thƣờng, mang thai ………………………………………………………………… 19 2.6.5 Các định ứng dụng xét nghiệm progesterone sữa ………………………………………………………………………….21 2.7 Nguyên lý Kỹ thuật ELISA (Progesterone – Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) ……………………………………………………………22 Chƣơng NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP TIẾN HÀNH 25 3.1 Thời gian địa điểm thực đề tài …………………………………25 3.1.1 Thời gian ……………………………………………………….25 3.1.2 Địa điểm ……………………………………………………….25 3.2 Đối tƣợng khảo sát ……………………………………………………… 25 3.3 Nội dung khảo sát ……………………………………………………….25 3.4 Phƣơng pháp tiến hành ……………………………………………… 25 3.4.1 Bố trí số mẫu sữa khảo sát theo nhóm máu ………………….26 3.4.2 Bố trí số mẫu sữa khảo sát theo lứa đẻ ………………….26 3.4.3 Lấy mẫu sữa ly tâm 3.4.4 Kỹ thuật ELISA ……………………………………… 27 ……………………………………………….27 3.5 Phƣơng pháp xử lý số liệu ……………………………………………….30 Chƣơng KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 31 vi LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 4.1 Hàm lƣợng progesterone sữa bị sinh sản bình thƣờng ……………31 4.1.1 Hàm lƣợng progesterone sữa bị theo nhóm máu ………………… 34 4.1.2 Hàm lƣợng progesterone sữa bò theo lứa đẻ ………………… 36 4.2 Hàm lƣợng progesterone sữa bò chậm động dục phối nhiều lần không đậu ……………………………………………………………………….41 4.2.1 Hàm lƣợng progesterone sữa bị chậm động dục phối nhiều lần khơng đậu theo nhóm máu 50 75% HF ………………………………….43 4.2.2 Hàm lƣợng progesterone sữa bò chậm động dục phối nhiều lần không đậu theo lứa đẻ ……………………………………………………… 46 Chƣơng KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 52 5.1 Kết luận ………………………………………………………………52 5.2 Đề nghị ………………………………………………………………53 TÀI LIỆU THAM KHẢO 54 PHỤ LỤC 57 vii LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT ELISA = Enzyme-linked immunosorbent assay FSH = Follicle Stimulating Hormone GnRH = Gonadotropin Releasing Hormone HF = Holstein Friesian LH = Luteinizing Hormone PGF2 = Prostaglandin F2 RIA = Radio Immuno Assay viii LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com DANH SÁCH CÁC HÌNH HÌNH TRANG Hình 2.1 Sự thay đổi hàm lƣợng kích thích tố máu chu kỳ động dục bình thƣờng bị 12 Hình 2.2 Cơ chế tiêu hồng thể PGF2 chu kỳ động dục 14 Hình 2.3 Động thái progesterone chu kỳ động dục bình thƣờng bị 20 Hình 2.4 Động thái progesterone giúp chẩn đốn sớm có thai 21 Hình 4.1 Hàm lƣợng progesterone sữa bị sinh sản bình thƣờng 32 Hình 4.2 Hàm lƣợng progesterone sữa bị theo nhóm máu 50% 34 Hình 4.3 Hàm lƣợng progesterone sữa bị theo nhóm máu 75% 35 Hình 4.4 Hàm lƣợng progesterone sữa bò theo lứa 37 Hình 4.5 Hàm lƣợng progesterone sữa bị theo lứa 38 Hình 4.6 Hàm lƣợng progesterone sữa bò theo lứa 39 Hình 4.7 Hàm lƣợng progesterone sữa bò theo lứa 40 Hình 4.8 Hàm lƣợng progesterone sữa bị chậm động dục phối nhiều lần không đậu 42 Hình 4.9 Hàm lƣợng progesterone sữa bị chậm động dục phối nhiều lần khơng đậu theo nhóm máu 50% 44 Hình 4.10 Hàm lƣợng progesterone sữa bị chậm động dục phối nhiều lần khơng đậu theo nhóm máu 75% 45 Hình 4.11 Hàm lƣợng progesterone sữa bò chậm động dục phối nhiều lần không đậu theo lứa 47 Hình 4.12 Hàm lƣợng progesterone sữa bị chậm động dục phối nhiều lần không đậu theo lứa 48 Hình 4.13 Hàm lƣợng progesterone sữa bò chậm động dục phối nhiều lần không đậu theo lứa 49 Hình 4.14 Hàm lƣợng progesterone sữa bị chậm động dục phối nhiều lần khơng đậu theo lứa 50 ix LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com DANH SÁCH CÁC BẢNG BẢNG TRANG Bảng 2.1 Bảng cấu đàn bị cơng ty Bảng 2.2 Bảng định mức thức ăn cho đàn bò năm 2007 Bảng 3.1 Số mẫu sữa khảo sát bò sinh sản bình thƣờng 26 Bảng 3.2 Số mẫu sữa khảo sát bò chậm động dục 26 Bảng 3.3 Số mẫu sữa khảo sát theo lứa đẻ bò sinh sản bình thƣờng 26 Bảng 3.4 Số mẫu sữa khảo sát theo lứa đẻ bò chậm động dục 27 Bảng 4.1 Hàm lƣợng progesterone sữa bị sinh sản bình thƣờng 31 Bảng 4.2 Hàm lƣợng progesterone sữa bị theo nhóm máu 34 Bảng 4.3 Hàm lƣợng progesterone sữa bò theo lứa đẻ 37 Bảng 4.4 Hàm lƣợng progesterone sữa bò chậm động dục phối nhiều lần không đậu 41 Bảng 4.5 Hàm lƣợng progesterone sữa bò chậm động dục phối nhiều lần khơng đậu theo nhóm máu 43 Bảng 4.6 Hàm lƣợng progesterone sữa bị chậm động dục phối nhiều lần khơng đậu theo lứa đẻ 46 x LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com ... TẮT KHÓA LUẬN Đề tài ? ?Khảo sát hàm lƣợng progesterone sữa kỹ thuật ELISA để chẩn đoán mang thai sớm, chậm động dục phối nhiều lần khơng đậu bị cho sữa Cơng ty cổ phần bò sữa Long Thành hộ lân cận... PROGESTERONE TRONG SỮA BẰNG KỸ THUẬT ELISA ĐỂ CHẨN ĐOÁN MANG THAI SỚM, CHẬM ĐỘNG DỤC HOẶC PHỐI NHIỀU LẦN KHÔNG ĐẬU TRÊN BÕ CHO SỮA TẠI CÔNG TY CỔ PHẦN BÕ SỮA LONG THÀNH VÀ CÁC HỘ LÂN CẬN TỈNH ĐỒNG NAI... 45 Hình 4.11 Hàm lƣợng progesterone sữa bị chậm động dục phối nhiều lần không đậu theo lứa 47 Hình 4.12 Hàm lƣợng progesterone sữa bò chậm động dục phối nhiều lần không đậu theo lứa