khảo sát đa hình gene prolactin và heat shock protein trên tổ hợp lai vịt hướng thịt (trống star53, mái biển) bằng phương pháp PCR RFLP

ỦY BAN NHÂN DÂN THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH SỞ KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ THÀNH ĐỒN TP HỒ CHÍ MINH TRUNG TÂM PHÁT TRIỂN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ TRẺ CHƯƠNG TRÌNH KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ CẤP THÀNH PHỐ BÁO CÁO TỔNG HỢP KẾT QUẢ NHIỆM VỤ NGHIÊN CỨU KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ KHẢO SÁT ĐA HÌNH GENE PROLACTIN VÀ HEAT SHOCK PROTEIN TRÊN TỔ HỢP LAI VỊT HƯỚNG THỊT (TRỐNG STAR53, MÁI BIỂN) BẰNG PHƯƠNG PHÁP PCR-RFLP Cơ quan chủ trì nhiệm vụ: Trung tâm Phát triển Khoa học Công nghệ Trẻ Chủ nhiệm nhiệm vụ: ThS Phạm Thị Như Tuyết Thành phố Hồ Chí Minh - 2021 ỦY BAN NHÂN DÂN THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH SỞ KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ THÀNH ĐỒN TP HỒ CHÍ MINH TRUNG TÂM PHÁT TRIỂN KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ TRẺ CHƯƠNG TRÌNH KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ CẤP THÀNH PHỐ BÁO CÁO TỔNG HỢP KẾT QUẢ NHIỆM VỤ NGHIÊN CỨU KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ KHẢO SÁT ĐA HÌNH GEN PROLACTIN VÀ HEAT SHOCK PROTEIN TRÊN TỔ HỢP LAI VỊT HƯỚNG THỊT (TRỐNG STAR53, MÁI BIỂN) BẰNG PHƯƠNG PHÁP PCR-RFLP (Đã chỉnh sửa theo kết luận Hội đồng nghiệm thu ngày 13/12/2021) Chủ tịch Hội đồng nghiệm thu Chủ nhiệm nhiệm vụ: (Ký ghi rõ họ tên) (ký tên) Dương Xuân Tuyển Phạm Thị Như Tuyết Cơ quan chủ trì nhiệm vụ Đồn Kim Thành Thành phố Hồ Chí Minh - 2021 THÀNH ĐỒN TP HỒ CHÍ MINH TRUNG TÂM PHÁT TRIỂN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ TRẺ CỘNG HOÀ XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự - Hạnh phúc Hồ Chí Minh, ngày 20 tháng 12 năm 2021 BÁO CÁO THỐNG KÊ KẾT QUẢ THỰC HIỆN NHIỆM VỤ NGHIÊN CỨU KH&CN I THÔNG TIN CHUNG Tên nhiệm vụ: Khảo sát đa hình gene prolactin heat shock protein tổ hợp lai vịt hướng thịt (trống Star53, mái Biển) bằng phương pháp PCR-RFLP Thuộc: Chương trình/lĩnh vực (tên chương trình/lĩnh vực): Vườn ươm Sáng tạo Khoa học Công nghệ trẻ Chủ nhiệm nhiệm vụ: Họ tên: Phạm Thị Như Tuyết Ngày, tháng, năm sinh: 22/08/1989; Nam/ Nữ: Nữ Học vị: Thạc sỹ Chức danh khoa học: Nghiên cứu viên; Chức vụ: Phó trưởng trạm ấp trứng gia cầm VIGOVA Mobile: 0983005812 E-mail: nhutuyet1901.vgv@gmail.com Tên tổ chức công tác: Trung tâm Nghiên cứu Phát triển Chăn nuôi Gia cầm VIGOVA Địa tổ chức: 496/101 Dương Quảng Hàm, phường 6, quận Gò Vấp, TP Hồ Chí Minh Địa nhà riêng: Tổ chức chủ trì nhiệm vụ: Tên tổ chức chủ trì nhiệm vụ: Trung tâm Phát triển Khoa học Công nghệ Trẻ Điện thoại: 028.38.230.780 E-mail: khoahoctre@gmail.com Website: khoahoctre.com.vn Địa chỉ: Số 01 Phạm Ngọc Thạch, Phường Bến Nghé, Quận 1, Tp HCM Họ tên thủ trưởng tổ chức: Đoàn Kim Thành Số tài khoản: 3713.0.1083277.00000 - Tại Kho bạc Nhà nước Quận Tên quan chủ quản đề tài: Sở Khoa học Công nghệ Tp HCM II TÌNH HÌNH THỰC HIỆN Thời gian thực nhiệm vụ: - Theo Hợp đồng ký kết: từ tháng 12/năm 2020 đến tháng 11/năm 2021 - Thực tế thực hiện: từ tháng 12/năm 2020 đến tháng 12/năm 2021 - Được gia hạn (nếu có): - Lần từ tháng… năm… đến tháng… năm… - Lần … Kinh phí sử dụng kinh phí: a) Tổng số kinh phí thực 80 tr.đ, đó: + Kính phí hỗ trợ từ ngân sách khoa học: 80 tr.đ + Kinh phí từ nguồn khác: tr.đ b) Tình hình cấp sử dụng kinh phí từ nguồn ngân sách khoa học: Số TT … Theo kế hoạch Thời gian (Tháng, năm) 6/2021 Ghi (Số đề nghị toán) Thực tế đạt Thời gian (Tháng, năm) 6/2021 Kinh phí (Tr.đ) 40 Kinh phí (Tr.đ) 40 40 c) Kết sử dụng kinh phí theo khoản chi: Đơn vị tính: Triệu đồng Số TT Nội dung khoản chi Trả công lao động (khoa học, phổ thông) Nguyên, vật liệu, lượng Thiết bị, máy móc Theo kế hoạch Tổng NSKH 40 40 Nguồn khác Thực tế đạt Tổng NSKH 40 40 Nguồn khác Xây dựng, sửa chữa nhỏ Chi khác Tổng cộng - Lý thay đổi (nếu có): Các văn bản hành trình thực đề tài/dự án: (Liệt kê định, văn quan quản lý từ cơng đoạn xét duyệt, phê duyệt kinh phí, hợp đồng, điều chỉnh (thời gian, nội dung, kinh phí thực có); văn tổ chức chủ trì nhiệm vụ (đơn, kiến nghị điều chỉnh có) Số Số, thời gian ban hành TT văn 35e-QĐ/KHCNT ngày 25/11/2020 Ghi Tên văn QĐ thành lập hội đồngét duyệt đề tài nghiên cứu khoa học thuộc chương trình Vườn ươm sáng tạo Khoa học Công nghệ Trẻ 70-TB/KHCNT ngày Thông báo việc phê duyệt 29/12/2020 cấp kinh phí nghiên cứu khoa học cơng nghệ thuộc chương trình Vườn ươm sáng tạo Khoa học Công nghệ Trẻ 30/2020-HĐ-KHCNT-VƯ Hợp đồng th khốn chun mơn ngày 31/12/2020 thực nhiệm vụ Vườn ươm sáng tạo Khoa học Công nghệ Trẻ Tổ chức phối hợp thực nhiệm vụ: Số TT Tên tổ chức đăng ký theo Thuyết minh Tên tổ chức tham gia thực Nội dung tham gia chủ yếu Sản phẩm chủ yếu đạt Ghi chú* - Lý thay đổi (nếu có): Cá nhân tham gia thực nhiệm vụ: (Người tham gia thực đề tài thuộc tổ chức chủ trì quan phối hợp, khơng q 10 người kể chủ nhiệm) Số TT Tên cá nhân đăng Tên cá nhân Nội dung tham gia Sản phẩm chủ yếu đạt Ghi chú* ký theo Thuyết minh ThS Phạm Thị Như Tuyết tham gia thực ThS Phạm Xây dựng thuyết Thị Như minh, triển khai, Tuyết thực báo cáo tổng kết CN Nguyễn CN Xây dựng thuyết Ngọc Liên Nguyễn minh, Thu nhận Ngọc Liên ly trích DNA tổng số TS Hoàng Tuấn Thành CN Lê Văn Trang CN Nguyễn Hữu Thức Bài báo chấp nhận đăng, báo cáo tổng hợp đề tài Thuyết minh khoa học, rõ ràng Thu nhận ly trích 60 mẫu DNA (30 mẫu vịt trống 30 mẫu vịt mái Khuếch đại đoạn gen mục tiêu PRL với kích thước 441 bp 536 bp TS Hoàng Khuếch đại đoạn gen mục tiêu Tuấn PRL mẫu Thành DNA vịt primer phù hợp CN Lê Khuếch đại đoạn Khuếch đại đoạn Văn Trang gen mục tiêu gen mục tiêu HSP70 HSP70 mẫu với kích thước 572 bp DNA vịt 424 bp primer phù hợp CN Đánh giá tính đa Đánh giá đa hình gen hình gen PRL enzyme Nguyễn Hữu Thức PRL gen XbaI PstI HSP70 vịt Đánh giá đa hình gen HSP70 enzyme BamHI HhaI - Lý thay đổi ( có): Tình hình hợp tác quốc tế: Số TT Theo kế hoạch (Nội dung, thời gian, kinh phí, địa điểm, tên tổ chức hợp tác, số đoàn, số lượng người tham gia ) Thực tế đạt (Nội dung, thời gian, kinh phí, địa điểm, tên tổ chức hợp tác, số đoàn, số lượng người tham gia ) Ghi chú* - Lý thay đổi (nếu có): Tình hình tổ chức hội thảo, hội nghị: Theo kế hoạch Thực tế đạt Số (Nội dung, thời gian, kinh (Nội dung, thời gian, kinh TT phí, địa điểm ) phí, địa điểm ) 1 hội thảo, 20 người tham hội thảo, 20 người tham dự dự Đạt 100% - Lý thay đổi (nếu có): Tóm tắt nội dung, cơng việc chủ yếu: Ghi chú* (Nêu mục 15 thuyết minh, không bao gồm: Hội thảo khoa học, điều tra khảo sát nước nước ngoài) Thời gian Các nội dung, công Số việc chủ yếu TT (Các mốc đánh giá chủ yếu) Người, - tháng … năm) quan Theo kế Thực tế đạt hoạch đoạn 50 mẫu thực 60 mẫu TT VIGOVA, ThS gen mục tiêu PRL 02 cặp (120%) Phạm Thị Như mẫu DNA vịt primer 02 cặp primer Tuyết primer phù hợp (100%) TS Hoàng Tuấn Khuếch đại (Bắt đầu, kết thúc Thành 60 mẫu TT VIGOVA, ThS gen mục tiêu HSP70 02 primer (120%) Phạm Thị Như mẫu DNA vịt 02 cặp primer Tuyết primer phù hợp (100%) CN Lê Văn Trang Đánh giá tính đa 50 mẫu 60 mẫu TT VIGOVA, ThS hình gen PRL 04 (120%) Phạm Thị Như gen HSP70 vịt 04 enzyme Tuyết (100%) CN Nguyễn Hữu Khuếch đại đoạn 50 mẫu enzyme Thức - Lý thay đổi (nếu có): III SẢN PHẨM KH&CN CỦA NHIỆM VỤ Sản phẩm KH&CN tạo ra: a) Sản phẩm Dạng I: Số Tên sản phẩm TT tiêu chất lượng chủ yếu - Lý thay đổi (nếu có): Đơn vị đo Số lượng Theo kế hoạch Thực tế đạt b) Sản phẩm Dạng II: Số TT Tên sản phẩm Báo cáo tổng hợp kết nghiên cứu Yêu cầu khoa học cần đạt Theo kế hoạch Thực tế đạt 01 01 (100%) Ghi - Lý thay đổi (nếu có): c) Sản phẩm Dạng III: Số TT Tên sản phẩm Bài báo khoa học “Bước đầu nghiên cứu đa hình gen prolactin intron vịt lai Star53” Khuếch đại đoạn gen mục tiêu PRL Yêu cầu khoa học cần đạt Theo Thực tế kế hoạch đạt 01 01 (100%) Khuếch đại đoạn gen Khuếch đại đoạn gen mục Số lượng, nơi cơng bố (Tạp chí, nhà xuất bản) 01, Tạp chí KHKT Chăn ni (kèm giấy xác nhận) mẫu DNA vịt mục tiêu PRL primer phù 02 cặp hợp primer Khuếch đại đoạn Khuếch đại gen mục tiêu đoạn gen HSP70 mẫu mục tiêu HSP70 DNA vịt bằng 02 cặp primer phù hợp primer Đánh giá tính đa Đánh giá đa hình gen PRL hình gen PRL gen HSP70 với 02 enzyme vịt cắt XbaI PstI Đánh giá đa hình gen HSP70 với 02 enzyme cắt HhaI BamHI tiêu PRL 02 cặp primer (100%) Khuếch đại đoạn gen mục tiêu HSP70 02 cặp primer (100%) Đánh giá đa hình gen PRL với 02 enzyme cắt XbaI PstI Đánh giá đa hình gen HSP70 với 02 enzyme cắt HhaI BamHI (100%) - Lý thay đổi (nếu có): d) Kết đào tạo: Số TT Cấp đào tạo, Chuyên ngành đào tạo Thạc sỹ Tiến sỹ Số lượng Theo kế Thực tế đạt hoạch Ghi (Thời gian kết thúc) - Lý thay đổi (nếu có): đ) Tình hình đăng ký bảo hộ quyền sở hữu công nghiệp: Số TT Tên sản phẩm đăng ký Kết Theo Thực tế kế hoạch đạt - Lý thay đổi (nếu có): Ghi (Thời gian kết thúc) e) Thống kê danh mục sản phẩm KHCN ứng dụng vào thực tế Số Tên kết TT ứng dụng Địa điểm Thời gian (Ghi rõ tên, địa nơi ứng dụng) Kết sơ 2 Đánh giá hiệu quả nhiệm vụ mang lại: a) Hiệu khoa học công nghệ: (Nêu rõ danh mục công nghệ mức độ nắm vững, làm chủ, so sánh với trình độ cơng nghệ so với khu vực giới…) Tiếp cận kỹ thuật liên quan đến di truyền phân tử sở tảng cho việc ứng dụng di truyền phân tử hỗ trợ chọn lọc dựa vào giá trị kiểu hình Phát triển lực nghiên cứu khoa học cho lực lượng cán nghiên cứu khoa học trẻ, nguồn nhân lực tham gia nghiên cứu đề tài trưởng thành phát triển b) Hiệu kinh tế xã hội: (Nêu rõ hiệu làm lợi tính tiền dự kiến nhiệm vụ tạo so với sản phẩm loại thị trường…) Kết đề tài mang tính thăm dị sở nghiên cứu Con giống ban đầu nhận diện di truyền, nhân giống tạo nguồn nguyên liệu nghiên cứu cho Trung tâm VIGOVA từ định hướng cho nghiên cứu tiếp theo, sau đưa vào chăn nuôi thử nghiệm số trại chăn nuôi tư nhân khu vực Đông Nam Bộ, đặc biệt khu vực ven biển TP HCM để đánh giá hiệu kinh tế xã hội vịt lai (trống Star53, mái Biển) mang lại 10 Theo kết phân tích để dị tìm enzyme phân cắt Nebcutter (V2.0) cho thấy enzyme có phân cắt sản phẩm khuếch đại gen HSP70 5‘UTR (424 bp) dự kiến có ba kiểu gen Tuy nhiên theo kết Hình 19 cho kết đơn hình không phân cắt sản phẩm gen HSP70 5‘UTR (424 bp) khác biệt cần nghiên cứu sâu để làm sáng tỏ Kết khác với số nghiên cứu trước Harriet cs (1992) nghiên cứu đa hình gen HSP70 chuột, Givisiez cs (2001) cho kết phân cắt đoạn có kích thước 2.200, 6500, 41.000 1.600 bp KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ Kết luận Khảo sát đoạn gen mục tiêu PRL với kích thức 441 bp, 536 bp HSP70 với kích thước 572 bp 424 bp Kết đánh giá đa hình gen PRL/XbaI cho thấy đa hình vùng intron có kích thước 441 bp, có 02 alen (T-0,89; G-0,11) 02 kiểu gen (TT0,78; TG-0,22) nhận diện, alen T kiểu gen TT trội quần thể vịt nghiên cứu Hệ số dị hợp (He) 0,196, hệ số đa hình (PIC) 0,177 Kết nghiên cứu xác định alen T kiểu gen TT trội Đa hình gen PRL/PstI vùng exon có kính thước 536 bp nhận diện 02 alen 02 kiểu gen C (0,85); T (0,15); CC (0,70); CT (0,30) Hệ số dị hợp (He) 0,255, hệ số PIC 0,223 Trong alen C kiểu gen CC trội quần thể vịt nghiên cứu Đa hình gen HSP70/HhaI phát vùng exon có kích thước 572 bp với vị trí cắt 1696G>A 1762T>C Tại vị trí cắt phát alen kiểu gen Như với locus HSP70/HhaI tổ hợp kiểu gen GG/CT, GG/TT AG/CT Đề nghị Tiến hành nghiên cứu thử nghiệm tổ hợp lai vịt hướng thịt (trống Star53, mái Biển) sản xuất 30 TÀI LIỆU THAM KHẢO Abdel- Kafy EM, Hussein AB, Abdel-Ghany SM, GamalEl-Din AY, Badawi YM (2015) Single nucleotidepolymorphisms in the growth hormone gene are associated with some performance traits in the rabbit (IJBPAS) (2):490-504 Vương Thị Lan Anh, Nguyễn Văn Duy, Mai Hương Thu, Nguyễn Văn Tuấn Hoàng Văn Tiệu (2019) Đánh giá suất vịt Biển 15 Đại Xuyên môi trường nước ngọt, nước mặn Tạp chí KHCN Chăn ni, 103(9.2019): 21-34 Aryani, A., Solihin, D D., Sumantri, C., Afnan, R., & Sartika, T (2019) Genetic Diversity of the Structure of HSP70 Gene in Kampung Unggul Balitbangtan (KUB), Walik, and Kate Walik Chickens Tropical Animal Science Journal, 42(3), 180-188 Ben-Jonathan N., John L Mershon F, Donald L Allen, And Rosemary W Steinmetz Extrapituitary Prolactin: Distribution, Regulation, Functions, and Clinical Aspects Endocrine Reviews, Volume 17, Issue 6, December 1996, Pages 639–669 Bukau, B and A.L Horwich, 1998 The Hsp70 and Hsp60 chaperone machines Cell, 92: 351-366 Carmen Maria Mazzi, Jesus Aparecido Ferro, Maria Ines Tiraboschi Ferro, Vicente José Maria Savin, Antonio Augusto Domingos Coelh, Marcos Macari, 2003 Polymorphism analysis of the HSP70 stress gene in Broiler chickens (Gallus gallus) of different breeds Genetics and Molecular Biology, 26, 3, 275-281 Craig E.A., Gross C.A., 1991 Is HSP70 the cellular thermometer? Trends Biochem Sci 16(4): 135–140 31 Chen ZY, Zhang WW, Gan JK, Kong LN, Zhang XQ, Zhang DX, Luo QB (2016) Genetic effect of an A/G polymorphism in the HSP70 gene on thermotolerance in chicken Genet Mol Res 15: gmr.15028271 Chuekwon, K., & Boonlum, S (2016) Association of Prolactin Gene with Egg Production in Khaki Campbell Ducks Walailak Journal of Science and Technology (WJST), 14(11), 849–853 10 Etches, R.J., J.M John and A.M.V Gibbins, 2008 Behavioural, Physiological, Neuroendocrine and Molecular Responses to Heat Stress In: Poultry Production in Hot Climates, Daghir, N.J (Ed.) CABI International, Cambridge, MA., pp: 48-79 11 Gabriel JE, Ferro JA, Stefani RMP, Ferro MIT, Gomes SL and Macari M (1996) Effect of acute heat stresson the heat shock protein 70 messenger RNA on the heat shock protein expression in the liver of broilers Br Poult Sci 37:443-9 12 Ghanem HM, Ateya AI, Saleh RM, Hussein MS (2017) Artificial insemination vs natural mating and genetic prl/psti locus polymorphism and their effect on different productive and reproductive aspects in duck Adv Anim Vet Sci 5(4): 179-184 13 Givisiez, PEN, Silva MM, Mazzi CM, Ferro MIT, Ferro JA, Gonzalez E and Macari M (2001) Heat or cold chronic stress affects organ weights and Hsp70 levels in chicken embryos Can J Anim Sci 82:83-7 14 Givisiez, PEN, Silva MM, Mazzi CM, Ferro MIT, Ferro JA, Gonzalez E and Macari M (2001) Heat or cold chronic stress affects organ weights and Hsp70 levels in chicken embryos Can J Anim Sci 82:83-7 15 Lê Thanh Hải, Lê Văn Trang, Dương Xuân Tuyển, Phạm Thị Như Tuyết, Nguyễn Thanh Sơn Nguyễn Văn Duy, 2020 Kết chọn tạo hai dòng vịt Biển trại vịt giống VIGOVA phục vụ sản xuất vùng bị xâm ngập mặn Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Chăn ni.Số 114: 15-28 32 16 Hamet P., Kong D., Pravenec M,, Kunes J, Kren V., Klir P., Sun Y., and Trembla J., 1992 Restriction Fragment Length Polymorphism of hsp70 Gene, Localized in the RT1 Complex, Is Associated With Hypertension in Spontaneously Hypertensive Rats Hypertension Vol 19, No 6, Part 2: 611-614 17 Huỳnh Thị Hồng Phượng, Nguyễn Trọng Ngữ, Bùi Thị Hoàng Trang, 2017 Ảnh hưởng stress nhiệt lên tiêu sinh lý biểu gen protein sốc nhiệt (HSP70) bị sữa Tạp chí khoa học kỹ thuật Chăn nuôi số 216(2017), trang: 14-21 18 Kansaku N., Ohkubo T., Okabayashi H., Guémené D., Kuhnlein U., Zadworny D and Shimada K (2005) Cloning of duck PRL cDNA and genomic DNA Gen Comp Endocrinol., 141: 39-47 19 Phạm Doãn Lân, Lê Quang Nam, Nguyễn Văn Ba, Trần Thị Thu Thủy, Giang Thị Thanh Nhàn, Nguyễn Thị Nga Hồ Xuân Tùng, 2019 Đa dạng di truyền gen hsp70 số giống gà ni Việt Nam tạp chí Khoa học Công nghệ Chăn nuôi – Số 106 tháng 12/2019, trang 31-41 20 Lý Thị Thu Lan, 2018 Chọn lọc nâng cao suất sinh sản cút Nhật Bản thị phân tử Luận án tiến sĩ trường Đại Học Cần Thơ 21 Li H.F., Zhu W.Q., Chen K.W., Zhang T.J and Song W.T (2009) Association of polymorphisms in the intron of duck prolactin with egg performance Turk J Vet Anim Sci., 33(3): 193-97 22 Mazurowski Artur, Frieske Anna, Wilkanowska Anna, Kokoszyński Dariusz, Mroczkowski Sławomir, Bernacki Zenon & Maiorano Giuseppe (2016) Polymorphism of prolactin gene and its association with growth and some biometrical traits in ducks Italian Journal of Animal Science, 15:2, 200-206 23 Milani V., Noessner E., Ghose S., Kuppner M., Ahrens B., Scharner A., Gastpar R., Issels R D, 2002 Heat shock protein 70: role in antigen 33 presentation and immune stimulation Int J Hyperthermia Nov-Dec 2002;18(6):563-75 24 Mohamed, M.M.Osman, Shaaban, A.Hemeda, Abeer A.I.Hassanin, Walaa A Husseiny Polymorphism of Prolactin Gene and Its Association with Egg Production Trait in Four Commercial Chicken Lines J HELLENIC VET MED SOC 2017, 68(3): 391-404 25 Purwantini D., Singgih Sugeng Santosa R., Santosa S., Susanto A., Candrasari D., and Ismoyowati I., (2020) Prolactin gene polymorphisms and associations with reproductive traits in Indonesian local Ducks Vet World 2020 Nov; 13(11): 2301–2311 26 Trần Thị Bình Nguyên, Nguyễn Hữu Đức, Nguyễn Thị Diệu Thuý, 20128 Đa hình gen prolactin liên quan tính trạng sản xuất trứng giống gà liên minh Tạp chí Cơng nghệ Sinh học 16(2): 259-266, 2018 27 Rashidi, H.; Ghodrat, R.M.; Ayoub, F and Mohsen, G (2012) Association of prolactin and prolactin receptor gene polymorphisms with economic traits in breeder hens of indigenous chickens of Mazandaran province Iran J Biotech, 10: 129-135 28 Rohmah L, Darwati S, Ulupi N, Khaerunnisa I, Sumantri C Novel Mutation of Exon Prolactin Gene in IPB-D1 Chicken JITV Vol 25 No Th 2020: 173-181 29 Sodhi M., Mukesh M., Kishore A., Mishra B P, Kataria R S, Joshi B K, 2013 Novel polymorphisms in UTR and coding region of inducible heat shock protein 70.1 gene in tropically adapted Indian zebu cattle (Bos indicus) and riverine buffalo (Bubalus bubalis) Elsevier 2013 Sep 25;527(2):606-15 30 Subekti K., Duryadi Solihin D., Afnan R., Gunawan A and Sumantri C., 2019 Research Article Polymorphism of Duck HSP70 Gene and mRNA 34 Expression under Heat Stress Conditions International Journal of Poultry Science, nt J Poult Sci., 18 (12): 591-597 31 Talbot R.T and Sharp P.J (1994) A radio immunoassay for recombinant derived chicken prolactin suitable for the measurement of prolactin in other avian species Gen Comp Endocrinol., 96: 361-69 32 Nguyễn Hoàng Thịnh, Nguyễn Thị Châu Giang, 2018 Đa hình 24-BP insertion-deletetion C2402T gen prolactin hai giống gà địa Việt Nam: gà Ri gà Mía Tạp chí Khoa học Nơng nghiệp Việt Nam 2018, 16(4): 332-338 33 Walker AM, Robertson MT, Jones CJ 1989 Distribution of a prolactin-like material in human eccrine sweat glands J Invest Dermatol 93:50-53 34 Wang C, Liang Z, Yu W, Feng Y, Peng X, Gong Y, Li S (2011).Polymorphism of the prolactin gene and its association withegg production traits in native Chinese ducks S Afr J Anim.Sci 41:64–69 35 PHỤ LỤC Phụ lục Nồng độ DNA giá trị tỷ số OD260/280 đo mẫu TT Giới tính 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 Mái Mái Mái Mái Mái Mái Mái Mái Mái Mái Mái Mái Mái Mái Mái Mái Mái Mái Mái Mái Mái Mái Mái Mái Mái Mái Mái Mái Tên mẫu Tinh OD (260/280) 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 1.793 1.776 1.812 1.880 1.834 1.803 1.821 1.817 1.828 1.788 1.822 1.778 1.825 1.839 1.837 1.862 1.838 1.844 1.809 1.846 1.840 1.852 1.826 1.863 1.841 1.859 1.855 1.971 36 Nồng độ DNA (ng/µl) 176.4 66.38 84.82 51.26 87.97 60.64 122.0 60.06 114.8 68.08 212.8 95.98 369.3 153.5 122.9 121.0 87.57 222.9 194.3 117.8 87.62 113.0 187.9 101.5 170.8 108.2 158.4 38.40 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 Mái Mái Trống Trống Trống Trống Trống Trống Trống Trống Trống Trống Trống Trống Trống Trống Trống Trống Trống Trống Trống Trống Trống Trống Trống Trống Trống Trống Trống Trống Trống Trống 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 1.834 1.840 1.849 1.838 1.841 1.832 1.825 1.818 1.843 1.830 1.829 1.846 1.833 1.846 1.824 1.838 1.865 1.870 1.829 1.860 1.939 1.826 1.826 1.818 1.811 1.819 1.831 1.835 1.810 1.851 1.791 1.829 37 107.8 131.4 150.3 193.1 116.0 118.9 176.9 104.4 133.4 132.3 139.0 89.44 94.62 89.48 166.1 127.2 81.92 92.43 75.02 88.67 49.56 318.2 203.4 368.9 134.0 215.4 85.92 90.13 216.8 111.0 471.0 108.1 Phụ lục Hình ảnh kết quả điện di DNA tổng số ly trích từ mẫu máu vịt Phụ lục Các tiêu kỹ thuật tổ hợp lai vịt hướng thịt (trống Star53, mái Biển) Bảng tiêu kỹ thuật tổ hợp lai trống Star53, mái Biển) Stt Nội dung Đơn vị Kết quả tuần 10 Tuổi xuất bán Tỷ lệ nuôi sống % 95,25 Khối lượng xuất bán kg 3,0-3,1 Tiêu tốn thức ăn kg/con 2,68 38 ĐA HÌNH GEN PROLACTIN TRÊN INTRON Ở VỊT LAI STAR53 Phạm Thị Như Tuyết1 , Lê Tấn Lợi2, Nguyễn Thị Khánh Ly2, Hoàng Tuấn Thành1, Lê Văn Trang1 và Nguyễn Ngọc Liên3 Ngày nhận báo: 18/11/2021 - Ngày nhận phản biện: 01/12/2021 Ngày báo chấp nhận đăng: 02/12/2021 TÓM TẮT Mục tiêu nghiên cứu khảo sát đa hình gen prolactin vùng intron nhóm vịt lai Star53 (trớng Star53×mái Biển) kỹ thuật PCR-RFLP với tổng số 60 cá thể vịt lai (30 trống 30 mái) lấy mẫu máu để phân tích ADN ly trích sử dụng thực phản ứng PCR để khuếch đại vùng intron gen PRL với kích thước 441bp Sản phẩm PCR sau đó phân cắt enzyme cắt hạn chế HphI XbaI Kết cho thấy phân cắt đơn hình ở locus PRL/HphI đa hình ở locus PRL/XbaI với 02 kiểu alen T G nhận diện với tần số xuất kiểu gen TT TG 0,78 0,22 Kết phân tích thơng sớ đa hình cho thấy chỉ sớ PIC 0,177 tần số dị hợp mong đợi 0,196 Từ kết thu có thể chỉ đa hình gen PRL locus PRL/XbaI nhóm vịt lai Star53 với alen T kiểu gen TT trội Ảnh hưởng kiểu gen đến tính trạng sinh trưởng sinh sản nhóm vịt lai cần được làm sáng tỏ ở nghiên cứu Từ khóa: Vịt lai, gen prolactin, đa hình gen, PCR-RFLP ABSTRACT Prolactin gene polymorphism in intron on Star53 crossbred ducks Prolactin (PRL) have been showed a potential candidate gene for growth and reproductive traits in chicken and ducks that have revealed in many works Thus, the aims of this study were to evaluate the polymorphism of prolactin gene in crossbred duck (Star53xBien) A totally 60 blood samples were collected for conducting PCR-RFLP Genomic DNA was isolated by ABT kit (Vietnam) Based on the purified genomic DNA, PCR-RFLP was applied A total of 60 crossbred ducks were genotype for HphI XbaI restriction site The result indicated that the monomorphic was found at PRL/HphI site The polymorphic site at PRL/XbaI was observed and allele frequencies for T and G were 0.89 and 0.11 Two genotypes were observed and the genotype frequencies were 0.78 and 0.22 for TT and TG/XbaI, respectively Additionally, the PIC and expected heterozygoty were 0.177 and 0.196, respectively In conclusion, the polymorphic site at locus PRL/XbaI was detected and T allele and TT genotype were dominant In order to understand more insight the association of PRL/XbaI with growth and reproductive traits of crossbed duck, further study is required Keywords: Crossbred duck, Prolactin gene, gene polymorphism, PCR-RFLP ĐẶT VẤN ĐỀ Trong chăn ni thủy cầm vịt lồi nuôi phổ biến để cung cấp thịt trứng cho nhu cầu tiêu dùng người Chọn lọc lai tạo nhằm nâng cao suất chất lượng sản phẩm thịt trứng vịt đã vấn đề ưu tiên Nhiều nghiên cứu gần đã tập trung vào giải pháp chọn lọc lai tạo kết hợp giữa kiểu gen kiểu hình mang lại nhiều kết triển vọng ứng dụng tốt vào thực tiễn sản xuất Nhiều gen ứng cử cho tính trạng kinh tế vật nuôi quan tâm, đó với gia cầm hay thủy cầm gen prolactin nhiều nhà khoa học quan tâm Prolactin (PRL) một polypeptide hormone tiết bởi thùy trước tuyến yên cho thấy có chức phổ tác động sinh học rộng động vật có xương sống (Li ctv, 2009) Ở động vật có vú, prolactin đóng vai trò quan trọng tiết sữa, đó ở cá tham gia điều hịa áp suất thẩm thấu Ở chim, vai trò prolactin chưa hiểu biết sâu song chức chủ yếu cho quan trọng viêc tính ấp trứng hay ni dưỡng chim non Ở gia cầm thủy cầm, prolactin có ảnh hưởng đến sản xuất trứng tập tính ấp trứng gây nên tăng hormone prolactin kết mang lại giảm sản xuất tế bào trứng buồng trứng (Talbot ctv, 1994), từ đó làm giảm sản xuất trứng Ở gà, trình tự gen prolactin giải mã hoàn chỉnh (Ohkubo ctv, 2000; Au ctv, 2002) đa hình gen PRL cũng ảnh hưởng đa hình gen đến thành tích sản xuất trứng đã báo cáo (Cui ctv, 2005, 2006) Ở vịt, gen prolactin khoảng 10 kb chứa exon intron, mã hóa cho 229 amino acid (Li ctv, 2009) Trình tự gen prolactin vịt cho thấy có tính tương đờng ở mức 92,0; 91,7; 91,4% so với gà, gà Tây, chim Cút ảnh hưởng kiểu gen prolactin Trung tâm NC&PT Chăn nuôi Gia cầm VIGOVA Đại học Nơng Lâm Tp Hờ Chí Minh tâm Phát triển Khoa học Công nghệ trẻ * Tác giả để liên hệ: Phạm Thị Như Tuyết - Trung tâm NC&PT Chăn nuôi Gia cầm VIGOVA - Phân viện Chăn nuôi Nam Bộ; Điện thoại: 0983005812; Email: nhutuyet1901.vgv@gmail.com Trường Trung 40 đến sản xuất trứng có khác ở dòng vịt khác (Kansaku ctv, 2005) Mục tiêu nghiên cứu nhằm bước đầu khảo sát tính đa hình gen prolactin vùng intron ở nhóm vịt lai Star53 VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Vật liệu, hóa chất, thời gian địa điểm Nguồn mẫu và thu mẫu máu: Vịt lai Star53 (trống Star53 x mái Biển) lai tạo chăm sóc nuôi dưỡng Trung tâm Nghiên cứu Phát triển Chăn nuôi Gia cầm VIGOVA-Phân viện Chăn nuôi Nam Bộ; mẫu máu thu thập từ 60 cá thể (30 trống, 30 mái), giữ ống chống đông chứa EDTA, bảo quản ở 4oC, đưa về phòng thí nghiệm bảo quản ở -30oC Hóa chất: Tách chiết DNA tổng sớ bợ kit TopPURE ® blood DNA exctraction (ABTViệt Nam) theo hướng dẫn nhà sản xuất Phản ứng khuếch đại PCR thực hóa chất bộ kit MyTaqTM Mix 2X (Bioline-Anh) Phản ứng cắt thực bộ enzyme cắt XbaI HphI (Thermo Scientific–Mỹ) Hóa chất điện di: Agarose 1,5% (Bioline), GelRed 0,6X (TBR), ladder 100bp (Thermo Scientific–Mỹ), dung dịch đệm TBE 0,5X (Việt Nam) Thời gian: Từ tháng 5/2021 đến tháng 11/2021 Địa điểm: Phòng thí nghiệm Cơng nghệ Sinh học – Phân viện Chăn nuôi Nam Bộ 2.3 Nội dung phương pháp 2.3.1 Khuếch đại gen mục tiêu PCR Tách chiết ADN hệ gen: ADN tách chiết bộ KIT theo hướng dẫn nhà sản xuất Sản phẩm ADN hệ gen kiểm tra thông qua điện di gel agarose 0,8% đo quang phổ hấp thụ bước sóng 260 280nm máy Nanodrop Thiết kế mồi: Cặp mời thiết kế dựa mạch khn có mã sớ truy cập AB158611.1 (Anas platyrhynchos, genbank https://www.ncbi.nlm.nih.gov) Trình tự (5’-3’) mời xi ATCGAGGTAAACTCCACGAC mời ngược TTCAGTGACACTGCTCAGTG, kích thước khoảng 441bp nằm vùng intron gene PRL từ vị trí 102 đến 542 Khuếch đại đoạn gen PCR: Khuếch đại gen mục tiêu với kích thước 441 bp Phản ứng PCR (25µl) chứa thành phần: 12,5µl MyTaqTM Mix 2X, 0,8µl primer, 2µl DNA khn mẫu 8,9µl H2O Chu trình nhiệt thực theo bước: (1) 95 oC phút; (2) 95oC 30 giây; (3) 59oC 30 giây; (4) 72oC 30 giây; (5) lặp lại 35 chu kỳ từ bước đến 4; (6) 72oC phút (7) giữ nhiệt độ 4oC 10 phút máy MasterCycler Pro S (Eppendorf, Đức) Các sản phẩm khuếch đại điện di gel agarose 1,5% (30 phút, 100V), quan sát chụp hình ảnh điện di máy GelDoc It2 (UVP, USA) với thang chuẩn 100bp 2.3.2 Phân tích đa hình enzyme cắt giới hạn Sử dụng phần mềm phân tích NEBcutter V2.0 để xác định loại enzyme cắt có thể dự kiến cắt đoạn trình tự gene mục tiêu Kết xác định loại enzyme cắt có khả phù hợp để khảo sát tính đa hình đoạn gene mục tiêu, thơng tin trình bày ở Bảng Bảng Thơng tin về enzyme, kích thước sản phẩm dự kiến sau phân cắt kiểu gen gen PRL Enzyme HphI XbaI Nhiệt độ ủ Kích thước (oC) đoạn DNA (bp) 329/112 37oC 441/329/112 441 274/167 37oC 441/274/167 441 41 Kiểu gen AA AB BB TT TG GG 2.4 Xử lý số liệu Xác định tần số alen, kiểu gen trắc nghiệm χ2 phần mềm POPGENE 1.31 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Kết khuếch đại gen mục tiêu với kích thước 441bp 3.1.1 Tối ưu nhiệt độ bắt cặp cho phản ứng PCR Sử dụng 02 mẫu DNA (23 54) sau ly trích để thực phản ứng khảo sát nhiệt độ gắn mồi tối ưu (với mức nhiệt độ 54,4; 57,9; 59; 60,5; 63,5 65,1oC) cho phản ứng PCR Hình Nhiệt độ gắn mồi gen PRL với 441bp L: Ladder (100bp); 23 và 54: ký hiệu mẫu cá thể vịt lai Kết Hình cho thấy ở tất mức nhiệt độ đều có thể khuếch đại sản phẩm, song ở nhiệt độ 59oC có band sáng, rõ chọn nhiệt độ tối ưu cho phản ứng PCR khuếch đại gen mục tiêu cho mẫu còn lại 3.1.2 Khuếch đại gen mục tiêu với kích thước 441bp Sau thực tối ưu nhiệt độ phản ứng gắn mồi, sử dụng nhiệt độ 59oC cho phản ứng PCR khuếch đại vùng gen có kích thước 441bp vùng intron1 phần exon cho tất mẫu vịt lai đã thu nhận Hình Kết điện di sản phẩm PCR khuếch đại gen PRL mục tiêu với kích thước 441bp Kết ở hình cho thấy đoạn gen mục tiêu từ mẫu cá thể khuếch đại có kích thước 441bp, đúng với kích thước mong đợi Kết cũng phù hợp với một số nghiên cứu trước đã công bố (Ge ctv, 2001; Nicolini ctv, 2013) Bên cạnh đó, kết giải trình tự mẫu đại diện cho sản phẩm 441bp sau đó BLAST để kiểm trình tự với mạch khuôn dùng để thiết kế mồi Kết cho thấy tính tương đờng trình tự vị trí chọn làm primer khn khớp với trình tự mẫu phân tích (Hình 3) Hình Giải trình tự đoạn gen PRL khuếch đại cặp primer thiết kế (Trình tự gạch chân là vị trí primer) 42 3.2 Phân tích đa hình enzyme cắt giới hạn 3.2.1 Nhận diện đa hình enzyme HphI Tiến hành phân cắt sản phẩm PCR (441bp) với enzyme HphI, kết cho thấy vị trí cắt locus PRL/HphI cho kết phân cắt đờng hình (329/112bp) kết trình bày ở Hình Hình Kết phản ứng phân cắt enzyme HphI: Đờng hình mợt kiểu gen AA (329/112bp) Theo kết phân tích để dò tìm enzyme phân cắt bởi Nebcutter (V2.0) cho thấy enzyme có phân cắt sản phẩm khuếch đại gen PRL intron (441bp) dự kiến có ba kiểu gen Tuy nhiên, nghiên cứu cho thấy kết cắt đờng hình khác biệt cần nghiên cứu sâu để làm sáng tỏ 3.2.2 Nhận diện đa hình enzyme XbaI Tương tự, tiến hành khảo sát phân cắt sản phẩm PCR (441bp) với enzyme XbaI, kết cho thấy vị trí cắt locus PRL/XbaI cho kết phân cắt đa hình kết trình bày ở Hình Hình Kết phản ứng phân cắt enzyme XbaI: Kiểu gen TT (274/167bp) và TG (441/274/167bp) Từ kết ở Hình cho thấy kết điện di sản phẩm PCR sau phân cắt bởi enzyme XbaI có kiểu alen T G, có kiểu gen TT TG đã nhận biết Tổng hợp dữ liệu phân tích PCR-RFLP cho 60 cá thể, kết tính tốn tần sớ alen, kiểu gen, hệ sớ dị hợp tổng hợp trình bày ở Bảng Bảng Tần số alen, kiểu gen, hệ số dị hợp mong đợi hệ số đa hình Chỉ tiêu Sớ cá thể Tần số quan sát Tần số mong đợi TT 47 0,78 0,792 Kiểu gen Alen TG GG T G 13 0,22 0,00 0,89 0,11 0,196 0,012 Hệ số dị hợp mong đợi (He) Hệ số đa hình (PIC) χ2 0,196 0,177 0,015 Ghi chú: χ2 bảng = 3.841 Kết ở Bảng cho thấy tần số alen T G tương ứng 0,89 0,11 Hai kiểu gen TT TG nhận biết với tần số kiểu gen tương ứng 0,78 0,22 Kết ở Bảng cũng cho thấy tần số alen T kiểu gen TT trội quần thể vịt nghiên cứu Wang ctv (2011), nghiên cứu một số giống vịt lai (F2) Trung Quốc cũng cho thấy tần số alen T dao động 0,409-0,738 tùy theo giống (Shanma, Shaoxing, Jinyun, Jingjiang, Youma) trội so với alen G ở quần thể F2 alen G tỏ trợi Ngược lại, nghiên cứu vịt Khaki Campbell cũng ở vị trí PRL/XbaI intron kết cho thấy tần số alen G 43 kiểu gen GG trội, đồng thời có ảnh hưởng đến suất trứng (Chuekwon Oonlum, 2017) Kết nghiên cứu gà cũng cho thấy tần số alen T cao C (Begli ctv, 2010; Alipanah ctv, 2011) Bên cạnh đó, một số nghiên cứu vịt cũng cho thấy chỉ có hai kiểu gen nhận diện (Wang ctv, 2011; Chuekwon Oonlum, 2017), đó ở gà có ba kiểu gen nhận diện (Begli ctv, 2010) Như vậy, khác về tần số alen, kiểu gen có thể yếu tố giống hay tác động chọn lọc đến locus Điều đã minh chứng bởi nhiều nghiên cứu ở lồi vật ni khác bò (Patel ctv, 2017; Abdelmanova ctv, 2021), lợn (Sevillano ctv, 2016) Bên cạnh đó, Andrews ctv (2010) cũng cho thấy chọn lọc tự nhiên có tác động đến tần số alen hay kiểu gen vật nuôi Hệ sớ đa hình gen PRL/XbaI nghiên cứu ở mức thấp (0,196): một quần thể cho có tính đa hình cao PIC>0,5 đa hình thấp PICHe Theo Botstein ctv (1980), quần thể nghiên cứu có hệ số dị hợp tử quan sát lớn hệ sớ dị hợp tử mong đợi (Ho>He) quần thể đó có giao phối ngẫu nhiên chiếm ưu KẾT LUẬN Đây nghiên cứu về đa hình gen PRL/XbaI vùng intron vịt lai Star53, kết cho thấy có 02 alen 02 kiểu gen nhận diện, đó alen T kiểu gen TT trội quần thể vịt lai Star53 nghiên cứu Cần làm sáng tỏ ảnh hưởng đa hình gen PRL/XbaI đến khả sản xuất vịt lai Star53 nghiên cứu LỜI CẢM ƠN Đề tài được thực nguồn kinh phí hỗ trợ từ Chương trình Vườn ươm Sáng tạo Khoa học và Công nghệ Trẻ, được quản lý Trung tâm Phát triển Khoa học và Công nghệ Trẻ - Thành Đoàn thành phố Hồ Chí Minh và Sở Khoa học và Công nghệ Tp Hồ Chí Minh, theo hợp đồng số 30/HĐ-KHCNT-VƯ TÀI LIỆU THAM KHẢO 10 11 12 13 14 15 16 17 Abdelmanova A.S., Kharzinova V.R., Volkova V.V., Dotsev A.V., Sermyagin A.A., Boronetskaya O.I., Chinarov R.Y., Lutshikhina E.M., Sölkner J and Brem G (2021) Comparative study of the genetic diversity of local steppe cattle breeds from Russia, Kazakhstan and Kyrgyzstan by microsatellite analysis of museum and modern samples Diversity, 13(351): 1-5 Alipanah M., Shojaian K and Bandani H.K (2011) The polymorphism of prolactin gene in native chicken Zabol region., J Anim.Vet Sci., 10(5): 619-21 Andrews C.A (2010) Natural selection, genetic drift, and gene flow not act in isolation in natural populations Nature Education Knowledge 3(10):5 Au W.L and Leung F.C (2002) Rapid Communication: complete nucleotide sequence of the chicken prolactin gene J Anim Sci., 80: 1381 Basumatary K., Bula D., Borah P and Barkalita L (2019) Polymorphism of prolactin receptor gene in indigenous ducks of Assam J Entomol Zool Stu., 7(1): 922-25 Begli E.H., Zerehdaran S., Hassani S., Abbasi M.A and Ahmadi A.K (2010) Polymorphism in prolactin and PEPCKC genes and its association with economic traits in native fowl of Yazd province, Iran J Biotech., 8(3), 172-177 Botstein D., White R.L., Skolnick M and Davis R.W (1980) Construction of a genetic linkage map in man using restriction fragment length polymorphisms Am J Hum Genet., 32: 314-31 Chuekwon K., and Oonlum S.B (2017) Association of prolactin gene with egg production in Khaki Campbell ducks J Sci Tech., 14(11): 849-53 Cui J.X., Du H.L and Zhang X.Q (2005) Polymorphisms and bioinformatics analysis of chicken prolactin gene Hereditas, 27: 208-14 Cui J.X., Du H.L., Liang Y., Deng X.M., Li N and Zhang X.Q (2006) Association of polymorphisms in the promoter region of chicken prolactin with egg production Poult Sci., 85: 26-31 Kansaku N., Ohkubo T., Okabayashi H., Guémené D., Kuhnlein U., Zadworny D and Shimada K (2005) Cloning of duck PRL cDNA and genomic DNA Gen Comp Endocrinol., 141: 39-47 Li H.F., Zhu W.Q., Chen K.W., Zhang T.J and Song W.T (2009) Association of polymorphisms in the intron of duck prolactin with egg performance Turk J Vet Anim Sci., 33(3): 193-97 Ohkubo T., Tanaka M and Nakashima K (2000) Molecular cloning of the chicken prolactin gene and activation by Pit-1 and cAMP induced factor in GH3 cells Gen Comp Endocrinol., 119: 208-16 Patel J.B., and Chauhan J.B (2017) Polymorphism of the Prolactin Gene and Its Relationship with Milk Production in Gir and Kankrej Cattle J Nat Sci Bio Med., 8(2): 167-70 Sevillano C.A., Vandenplas J., Bastiaansen J.W.M and Calus M.P.L (2016) Empirical determination of breed-oforigin of alleles in three-breed cross pigs Genet Sel Evo., 48(55): 1-12 Talbot R.T and Sharp P.J (1994) A radio immunoassay for recombinant derived chicken prolactin suitable for the measurement of prolactin in other avian species Gen Comp Endocrinol., 96: 361-69 Wang C., Liang Z., Yu W., Feng Y., Peng X and Gong Y and Li S (2011) Polymorphism of the prolactin gene and its association with egg production traits in native Chinese ducks S Afr J Anim Sci., 41: 63-69 44 ... NGHIÊN CỨU KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ KHẢO SÁT ĐA HÌNH GEN PROLACTIN VÀ HEAT SHOCK PROTEIN TRÊN TỔ HỢP LAI VỊT HƯỚNG THỊT (TRỐNG STAR53, MÁI BIỂN) BẰNG PHƯƠNG PHÁP PCR- RFLP (Đã chỉnh sửa theo kết luận... THÔNG TIN CHUNG Tên nhiệm vụ: Khảo sát đa hình gene prolactin heat shock protein tổ hợp lai vịt hướng thịt (trống Star53, mái Biển) bằng phương pháp PCR- RFLP Thuộc: Chương trình/lĩnh vực (tên... Hsp70 vịt 2.543 bp chứa 15 nucleotide đa hình (SNP), tần số đa hình SNP 127 bp (Subekti cs, 2019) Mục tiêu nghiên cứu - Mục tiêu tổng quát: Khảo sát đa hình gen prolactin heat shock protein tổ hợp