H u
Họng là ống dẫn có chiều dài từ 12-15cm, có hình phễu, nằm phía trước của thực quản Đây là ống dẫn khí giúp làm nhiệm vụ đóng kín khí quản khi nuốt, ngăn không cho thức ăn rơi vào đường khí quản Họng đóng vai trò quan trọng trong hệ hô hấp và hệ tiêu hóa, dẫn dắt thức ăn từ khoang miệng vào thực quản, đồng thời dẫn khí từ khoang mũi qua thanh quản vào khí quản.
Thanh qu n
Thanh quản là một cấu trúc hình ống nằm trong hệ hô hấp, có nhiệm vụ phát âm và điều chỉnh luồng khí Nó bao gồm các sụn, màng, dây chằng và cơ, trong đó hai dây thanh âm rung chuyển và phát ra âm thanh khi không khí đi qua Bên trong, thanh quản được phủ bởi niêm mạc liên tục với niêm mạc hầu, khí quản và tạo nên các xoang cộng hưởng âm thanh.
Khí qu n
Khí quản là một ống dẫn khí nối vùng cổ và ngực, có chiều dài khoảng 10-12 cm và đường kính khoảng 12 mm Khí quản gồm 16-20 vòng sụn hình chữ C, nối với nhau bằng các dây chằng vòng Phía sau các sụn này được đóng kín bởi các cơ trơn, tạo thành màng Thành khí quản được cấu tạo bởi ba lớp: niêm mạc, lớp dưới niêm mạc và lớp ngoài Trên bề mặt niêm mạc có các tế bào tiết nhầy và lớp tế bào biểu mô với nhiều nhung mao, giúp làm ẩm, ngăn chặn và tống các vật thể lạ ra khỏi khí hô hấp Lớp dưới niêm mạc chứa các cấu trúc liên kết, bên trong có nhiều sợi chun, tuyến, mạch máu, bạch huyết và thần kinh.
Hình I.1: Nhung mao trên niêm m c khí qu n
Ph qu n
Hai phế quản chính phải và trái tách ra từ khí quản ngang mức đốt sống ngực 4, tạo thành một góc khoảng 70 độ Mỗi phế quản chính khi vào phổi sẽ phân chia nhánh tới các phế nang Sau khi qua rốn phổi, mỗi phế quản chính đi vào phổi theo hướng thẳng, gọi là thân chính, từ thân chính tách ra các phế quản phân thùy Sự phân chia này khác nhau giữa hai phế quản chính: phế quản chính phải chia thành 3 phế quản thùy, trong khi phế quản chính trái chia thành 2 phế quản thùy.
V c u t o, ph qu n đ c c u t o b i 4 l p: l p s n s i, không có các ti u ph qu n hô h p; l p c tr n x p thành th ngang khi co th t đ t ng t gây khó th ; l p d i niêm m c và l p niêm m c có các tuy n ph qu n
Hình I.2: S phân chia c a cây ph qu n
Ph i
Phổi là cơ quan chính của hô hấp, chịu trách nhiệm trao đổi không khí giữa cơ thể và môi trường Phổi nằm trong lồng ngực, với hai phổi trái và phải ngăn cách với nhau bởi trung thất Mỗi phổi có các thùy riêng, trong đó phổi phải có 3 thùy và phổi trái có 2 thùy Dung tích bình quân của phổi khoảng 4,5 - 5 lít.
Phổi được cấu tạo bởi các thành phần chính bao gồm phế quản, các phế nang, động mạch phổi và tĩnh mạch phổi, bạch huyết, các sợi thần kinh và các mô liên kết Các phế nang là đơn vị chức năng chính của phổi, với kích thước khoảng 0,1 – 0,2mm, xung quanh được bao bọc bởi các mạch máu Quá trình trao đổi khí giữa không khí trong phế nang và máu diễn ra qua thành mao mạch Mỗi phổi có khoảng 300 triệu phế nang, với tổng diện tích trao đổi khí lên đến 160m².
Phổi được bao bọc bởi màng phổi, gồm hai lớp: lớp ngoài và lớp trong, giữa hai lớp này là khoang kín chứa dịch màng phổi Màng phổi có chức năng bôi trơn bề mặt phổi và giúp cho quá trình hô hấp diễn ra dễ dàng hơn.
Viêm đường hô hấp có nhiều nguyên nhân khác nhau, bao gồm tác động của thời tiết, các loại dị nguyên trong không khí, và khói thuốc lá từ việc hút thuốc hoặc hít phải khói thuốc của người khác Ngoài ra, viêm đường hô hấp cũng có thể do vi sinh vật như vi khuẩn, virus, nấm, và đôi khi còn do ký sinh trùng gây ra.
V ph ng di n lâm sàng, các b nh nhi m khu n đ ng hô h p đ c chia thành: nhi m khu n hô h p trên và nhi m khu n hô h p d i
Viêm đ ng hô h p trên g m các b nh liên quan đ n đ ng hô h p trên, bao g m các b nh: viêm m i h ng (c m l nh), viêm h ng, viêm xoang, viêm thanh qu n, viêm thanh thi t, viêm amidan
Viêm đ ng hô h p d i g m các b nh liên quan đ n đ ng hô h p d i, bao g m các b nh: viêm khí qu n, viêm ph qu n, viêm ph i.
Viêm h ng
Viêm h ng là tình tr ng c h u và h ng đ u b viêm Viêm h ng là c h ng ng i b nh s ng, đ , r t đau và b nh có th kéo dài
B nh th ng có nh ng tri u ch ng nh ho, có đàm, đau h ng, s t Viêm h ng có th d n t i viêm amidan
Ph n l n các tr ng h p viêm h ng là do virus gây ra (chi m 40-80%), còn l i do vi khu n, n m hây các ch t kích thích nh ch t gây ô nhi m, hóa ch t.
Viêm xoang
Viêm xoang là tình trạng viêm nhiễm ở các xoang cạnh mũi, có thể xảy ra do tắc nghẽn hoặc nhiễm trùng do virus, vi khuẩn, nấm, hoặc các yếu tố dị ứng Nguyên nhân gây viêm xoang thường liên quan đến sự tích tụ chất nhầy trong xoang, dẫn đến các triệu chứng khó chịu cho người bệnh.
B nh có t t c 4 tri u ch ng chính: đau nh c các vùng xoang b viêm, ch y d ch
(d ch s có màu tr ng đ c, vàng ho c màu xanh, hôi, kh n tùy m c đ ), ngh t m i, đi c m i.
Viêm ph qu n
Viêm ph qu n là tình tr ng viêm c a l p niêm m c các ng ph qu n, ng mang không khí đ n và đi t ph i Viêm ph qu n có th là c p tính ho c m n tính
Các triệu chứng của bệnh thường gặp bao gồm ho, có đàm hoặc không có đàm, đàm có thể không màu hoặc có màu vàng, xanh, đặc Bệnh nhân thường cảm thấy khó thở, thở khò khè, mệt mỏi, sức khỏe giảm sút và cảm thấy không được khỏe.
Trường hợp triệu chứng có đàm, nếu đàm có màu trắng trong thì thường do virus gây ra Ngược lại, nếu đàm có màu vàng, xanh hoặc màu đặc nhờn, thì thường là do vi khuẩn, cần sử dụng kháng sinh để điều trị.
Viêm ph i
Viêm phổi là tình trạng viêm nhiễm ở nhu mô phổi, bao gồm phế nang và mô kẽ phổi, thường do các tác nhân gây bệnh như vi khuẩn.
Triệu chứng điển hình của viêm phổi bao gồm sốt cao, lạnh run, ho khan, đàm mủ và đau ngực khi hít sâu hoặc khi ho Để chẩn đoán chính xác bệnh, bác sĩ thường chỉ định thực hiện X-quang phổi.
Khi không đ c ch n đoán và đi u tr k p th i, viêm ph i th ng di n ti n n ng có th gây suy hô h p c p tính, nhi m khu n huy t và có th d n đ n t vong
3 CÁC TÁC NHÂN GÂY NHI M KHU Nă NG HÔ
Các tác nhân gây nhi m khu n đ ng hô h p g m virus và vi khu n, n m
Các tác nhân virus th ng g p g m: Influenza virus, Adenovirus, Respiratory syncytial virus (RSVs), Hantavirus
Các tác nhân vi khu n gây b nh nhi m khu n hô h p th ng g p g m: Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenza, Staphylococcus aureus,
Moraxella catarrhalis và các vi khuẩn Gram âm như Klebsiella pneumoniae và Pseudomonas aeruginosa thường liên quan đến viêm amidan Mặc dù virus là nguyên nhân chính gây ra khoảng 50% các trường hợp, Streptococcus pyogenes vẫn là tác nhân vi khuẩn hàng đầu được các nhà lâm sàng chú ý đến.
Ngoài các tác nhân vi khuẩn điển hình, Mycoplasma pneumoniae, Chlamydophila pneumoniae và Legionella pneumophila cũng là những tác nhân vi khuẩn không điển hình cần được chú ý.
Ngoài ra, còn m t s tác nhân có th gây nhi m khu n đ ng hô h p ít g p h n nh Mycobacterium tuberculosis, Moraxella catarrhalis, Burkholderia cepacia, Burkholderia pseudomallei, Histoplasma capsulatum…
Trong số các vi khuẩn kháng kháng sinh, đáng chú ý là các tác nhân đa kháng như Staphylococcus aureus kháng methicillin (MRSA), Pseudomonas aeruginosa, Acinetobacter spp và Enterobacteriaceae kháng đa thuốc (MDR).
Streptococci
Là m t vi khu n th ng trú đ ng hô h p trên c a ng i, có th gây viêm ph i, viêm xoang, viêm ph qu n, nhi m khu n máu, viêm màng nưo…
Streptococci là vi khuẩn Gram dương, có hình dạng chuỗi và khó nuôi cấy Chúng phát triển tốt trong môi trường giàu dinh dưỡng như BHI (Brain Heart Infusion), thạch máu BA (Blood Agar) và thạch nâu (Chocolate Agar) Streptococci cần oxy hoặc có một phần CO2 để phát triển Trên thạch BA, chúng tạo ra ba kiểu tiêu huyết tùy thuộc vào nhóm Ngoài ra, chúng có khả năng phát triển trong môi trường ẩm, mặn hoặc có ethylhydrocuprein Liên cầu nhóm A được biết đến với tính nhạy cảm với bacitracin.
Khả năng gây bệnh của Streptococci phụ thuộc vào từng loài vi khuẩn, sự đáp ứng của cơ thể và đặc điểm của vi khuẩn xâm nhập Các bệnh thường gặp do Streptococci gây ra bao gồm viêm họng, viêm nội tâm mạc, viêm cầu thận cấp, viêm màng não và nhiễm khuẩn huyết Trong số đó, Streptococcus pneumoniae là một vi khuẩn thường trú trong hệ hô hấp của con người, gây ra các bệnh lý như viêm phổi, viêm xoang và viêm phế quản.
Các Streptococci nhóm A nh y c m v i penicillin G và m t s l n v i erythromycin Liên c u viridans, liên c u đ ng ru t có đ nh y c m khác nhau tùy theo lo i kháng sinh, do đó đi u tr ph i d a vào kháng sinh đ
Staphylococci
Staphylococci là vi khuẩn Gram dương, không di động và không sinh bào tử, thường tồn tại dưới dạng chùm nho Chúng có khả năng phát triển trong nhiều điều kiện khác nhau, bao gồm hiếu khí, vi hiếu khí và kỵ khí tùy nghi Nhiệt độ tối ưu để phát triển là từ 20 – 25 độ C, với S aureus tạo ra khuẩn lạc màu vàng và S epidermidis tạo khuẩn lạc màu xám hoặc trắng Một số loài Staphylococci, đặc biệt là S aureus, có khả năng gây bệnh, gây tiêu huyết và làm đông đặc huyết tương Chúng sản xuất enzyme catalase và có khả năng lên men nhiều loại đường mà không sinh hơi Staphylococci cũng có khả năng chịu đựng điều kiện khô, nhiệt độ cao và có thể sống sót trong dung dịch NaCl 9%, đồng thời kháng lại các chất khử trùng như 3% hexachlorophene và tím gentian.
Gi ng Staphylococcus có h n 20 loài, đáng chú Ủ trong y h c g m có 3 loài:
S aureus là một loại vi khuẩn phổ biến, với khoảng 40-50% người mang vi khuẩn này trên da Đây là tác nhân chính gây ra nhiều bệnh lý nghiêm trọng, đặc biệt là các nhiễm khuẩn hô hấp, nhiễm khuẩn huyết, nhiễm khuẩn vết thương, nhiễm trùng xương và viêm ruột cấp tính.
S epidermidis: th ng trú da, đ ng hô h p và đ ng tiêu hóa ôi khi chúng gây nhi m khu n máu, viêm n i tâm m c
S saprophyticus: th ng gây nhi m khu n đ ng ti u ph n tr
Ngoài ra, S hominis, S haemolyticus, S simulans c ng có th gây b nh cho ng i
Kháng sinh là biện pháp chủ yếu điều trị các bệnh do tác nhân gây ra Tuy nhiên, tình trạng kháng thuốc ngày càng gia tăng, vì vậy cần lựa chọn kháng sinh phù hợp Khi không có kháng sinh đặc hiệu, cần kết hợp hai kháng sinh có tính chất bổ sung để đạt hiệu quả điều trị tốt nhất.
Pseudomonas aeruginosa
P aeruginosa, còn gọi là trực khuẩn mủ xanh, là một loại vi khuẩn Gram âm, hình que, di động và không sinh bào tử, có kích thước khoảng 0,6 x 2 micromet Vi khuẩn này tồn tại trong nhiều môi trường khác nhau như thạch thang, thạch máu và canh thang, thường phát ra mùi hương giống như nho P aeruginosa không lên men glucose, có phản ứng oxidase dương tính và catalase dương tính Trên thạch máu, vi khuẩn này gây hiện tượng tiêu huyết Ngoài ra, P aeruginosa có khả năng sản xuất bốn loại sắc tố: pyocyanin màu xanh lá cây, pyoverdin (fluorescein) huỳnh quang, pyorubin màu đỏ sậm, và pyomelanin màu nâu đen.
Pseudomonas aeruginosa là nguyên nhân chính gây ra các trường hợp nhiễm khuẩn trong bệnh viện, xâm nhập vào cơ thể qua các vật thể hằng ngày Khi cơ thể suy giảm sức đề kháng, vi khuẩn này có thể gây viêm ở nhiều cơ quan như đường tiết niệu, tai giữa, phổi, màng não, hoặc dẫn đến các bệnh toàn thân như nhiễm khuẩn huyết và viêm nội tâm mạc.
Pseudomonas aeruginosa có khả năng kháng lại nhiều loại kháng sinh thông dụng, vì vậy không nên sử dụng một loại kháng sinh duy nhất để điều trị Thông thường, người ta phải kết hợp kháng sinh, bao gồm một loại penicillin và một loại aminoglycoside Ngoài ra, có thể sử dụng cephalosporins thế hệ 3 như ceftazidime để tăng hiệu quả điều trị.
Klebsiella
Klebsiella pneumoniae là một loại vi khuẩn Gram âm, không di động và không sinh bào tử, thường xuất hiện trong môi trường nuôi cấy thông thường Trên môi trường đặc, vi khuẩn này có hình dạng cầu, dính và màu xám K pneumoniae có thể hiện diện trong phân hoặc đường hô hấp và là tác nhân gây ra nhiều bệnh lý nghiêm trọng Bệnh phổ biến nhất do K pneumoniae gây ra là viêm phổi, thường gặp ở người có hệ miễn dịch yếu Ngoài ra, vi khuẩn này còn có khả năng gây nhiễm khuẩn đường tiểu, viêm màng não, viêm tai giữa và viêm xoang.
Acinetobacter
Acinetobacter là một loại vi khuẩn Gram âm, đa hình, thuộc họ Neisseria Việc nuôi cấy Acinetobacter là cần thiết để phân biệt chính xác với Neisseria, do hai loại vi khuẩn này có nhiều tính chất sinh học tương đồng Acinetobacter không tạo sắc tố Trên môi trường máu, vi khuẩn này cho khuẩn lạc màu sáng, đường kính lớn và nguyên vẹn, trong khi trên môi trường MC, khuẩn lạc có màu hồng nhạt Acinetobacter không sản xuất cytochrom oxidase, lên men nhanh glucose 10%, không di động và kháng penicillin.
Acinetobacter là vi khuẩn cư trú trên da người với tỷ lệ 25%, đồng thời cũng có thể tìm thấy trong các dịch cơ thể như dịch não tủy và dịch tiết Vi khuẩn này có khả năng gây nhiễm trùng cho bệnh nhân, dẫn đến các bệnh như viêm màng não, viêm nội tâm mạc, viêm phổi và nhiễm khuẩn huyết Acinetobacter có thể được phân lập từ nhiều mẫu bệnh phẩm khác nhau, bao gồm máu, dịch não tủy, đàm, nước tiểu và dịch mủ.
Acinetobacter là một loại vi khuẩn thường kháng thuốc kháng sinh, gây khó khăn trong việc điều trị Để đạt hiệu quả điều trị, cần sử dụng những kháng sinh đặc hiệu cho các chủng Acinetobacter này Các dòng vi khuẩn Acinetobacter thường nhạy cảm với gentamicin, amikacin, cũng như các loại penicillin và cephalosporin mới.
Nh ng vi khu n khác
Enterobacter
Khu vực sinh thái đóng vai trò quan trọng trong việc gây ô nhiễm không khí, ô nhiễm nguồn nước và ảnh hưởng đến sức khỏe cộng đồng Ngoài ra, chúng cũng là nguyên nhân dẫn đến các bệnh truyền nhiễm và các vấn đề sức khỏe khác.
Trong s các loài Enterobacter đư bi t, 2 loài E cloacae và E aerogenes đ c bi t đ n nhi u nh t, trong đó E cloacae đ c ch n làm đ i bi u đi n hình c a gi ng này.
Escherichia coli
E coli thu c h vi khu n đ ng ru t Trong đ ng tiêu hóa chúng chi m đ n 80% các vi khu n hi u khí Tuy nhiên, E coli c ng có kh n ng gây b nh khi chúng xâm nh p vào các c quan khác nh đ ng ti u, đ ng hô h p, máu… Trong đó, có nh ng ch ng có kh n ng gây tiêu ch y nh EPEC, ETEC, EIEC, VTEC.
Neisseria
Neisseria là nhóm vi khuẩn Gram âm, có hình dạng giống hạt cà phê và thường xuất hiện thành từng đôi Một số loại Neisseria là vi khuẩn thường trú trong hệ hô hấp của con người, nhưng khi gây bệnh, chúng có thể được tìm thấy bên ngoài tế bào Hai loại vi khuẩn gây bệnh cho con người là N gonorrhoeae (lậu cầu) và N meningitidis (não mô cầu), thường được phát hiện bên trong tế bào bạch cầu đa nhân.
Thuốc kháng sinh là các chất có khả năng ức chế sự sống và phát triển của vi khuẩn Chúng hoạt động bằng cách can thiệp vào quá trình phân chia tế bào hoặc tác động lên một hoặc nhiều giai đoạn chuyển hóa cần thiết cho sự sống của vi khuẩn, từ đó giúp ngăn chặn sự nhân lên của chúng.
Kháng sinh là loại thuốc có tác dụng đặc hiệu, nghĩa là nó chỉ tác động lên một loại vi khuẩn hoặc một nhóm vi khuẩn nhất định Do đó, mỗi loại kháng sinh không có cùng một hoạt tính đối với tất cả các loại vi khuẩn.
Các loại kháng sinh có hoạt tính khác nhau, nghĩa là chúng có khả năng tác động đến nhiều loại vi khuẩn gây bệnh khác nhau Một số kháng sinh có hoạt tính phổ rộng, trong khi một số khác chỉ có hiệu quả đối với một hoặc một số ít loại vi khuẩn.
Kháng sinh có nhi u ngu n g c khác nhau, có th t ng h p b ng ph ng pháp hóa h c, có th ly trích t đ ng v t, th c v t ho c vi sinh v t
4.2 C ăch tácăđ ng c a kháng sinh:
Vi khuẩn có một lớp vách tế bào bên ngoài, giúp bảo vệ và duy trì hình dạng của tế bào dưới áp lực thẩm thấu cao Sự tổng hợp khung peptidoglycan bị ức chế bởi kháng sinh, khiến vi khuẩn không còn vách tế bào và dẫn đến cái chết của chúng.
Các kháng sinh có kh n ng c ch s thành l p vách g m có: Bacitracin, Cephalosporins, Cycloserine, Penicillins, Rostocetin, Vancomycin
G m: Amphotericin B, Colistin, Imidazoles, Nystatin, Polymyxins
Màng tế bào chất của vi khuẩn đóng vai trò như một hàng rào bảo vệ, kiểm soát sự di chuyển của các thành phần bên trong tế bào Khi chịu tác động của kháng sinh, cấu trúc màng tế bào có thể bị phá hủy, dẫn đến việc các phân tử và ion thoát ra ngoài, làm cho tế bào bị tổn thương.
Aminoglycosides như Amikacin, Gentamycin, Kanamycin, Neomycin, Streptomycin và Tobramycin, cùng với các loại thuốc như Chloramphenicol, Erythromycins, Lincomycins và Tetracyclines, đều là những kháng sinh có khả năng ức chế quá trình tổng hợp protein của vi khuẩn Trong quá trình tổng hợp protein, thông tin từ mRNA được truyền tải tới ribosome, hình thành nên các polysome, từ đó ảnh hưởng đến sự phát triển và sinh sản của vi khuẩn.
Nhóm Aminoglycosides, với đại diện nổi bật là Streptomycin, đã được nghiên cứu kỹ lưỡng và có tác động tương tự đến các loại aminoglycosides khác Chúng hoạt động bằng cách gắn vào một loại protein chuyên biệt trên tiểu đơn vị ribosome, tạo thành phức hợp khởi đầu cho quá trình tổng hợp chu peptide Trong giai đoạn đầu tiên, phức hợp này bao gồm mRNA, formyl methionine và tRNA Tiếp theo, thông tin từ mRNA được ribosome nhận diện sai vùng, dẫn đến việc đưa vào chuỗi peptide một amin không phù hợp, từ đó tạo ra protein không có chức năng Cuối cùng, tác động của thuốc làm phân tán các polysome thành các monosome, gây cản trở quá trình tổng hợp protein Kết quả chung của những tác động này là sự ức chế sự phát triển của vi khuẩn.
Nhóm Tetracinlines g n vào ti u ph n 30S c a ribosome, c ch s t ng h p protein b ng cách ng n ch n amino acids m i n i vào chu i peptide m i thành l p
Nhóm chloramphenicol g n vào ti u ph n 50S c a ribosome, c ch enzyme peptidyl transferase , ng n c n s g n vào c a amino acids trên chu i peptide m i thành l p
Nhóm Macrolides và Lincomycins g n vào ti u ph n 50S c a ribosome làm ng n c n quá trình dch mư các amino acids đ u tiên c a chu i polypeptide
G m Actinomycin, Mitomycin, Nalidixic acid, Novobiocin, Sulfonamides, Trimethoprim…
Nhóm Refampicin g n vào RNA-polymerase, ng n c n quá trình sao mã t o thành mRNA
Nhóm Quinolone, Fluoroquinolones (Nalidic acid, Oxolinic): c ch tác d ng c a DNA gyrase làm cho hai m ch đ n c a DNA không th du i xo n đ th c hi n quá trình nhân đôi DNA.
Nhóm Sulfonamides có cấu trúc tương tự PABA và cạnh tranh với PABA trong quá trình tổng hợp acid folic, dẫn đến việc ức chế sự phát triển của vi khuẩn.
Nhóm Trimethoprim c ch enzyme dihydrofolic acid reductase Enzyme này kh dihydrofolic acid thành tetrahydrofolic acid, m t giai đo n quan tr ng đ t ng h p purine c a DNA
D a trên c s c a tính d c lỦ ng i ta x p kháng sinh theo các h nh sau:
Macrolides và các thu c lân c n
M t s nhóm khác: Vancomycin và Ristocetion, Novobiocin, Fusidic acid, Nitrofurans, Quinolones… và m t s thu c ch ng lao, ch ng vi n m, ch ng virus
Kháng sinh có vai trò quan trọng trong việc kiểm soát sự phát triển của vi khuẩn Tuy nhiên, khi vi khuẩn phát triển trong môi trường có kháng sinh, hiện tượng kháng kháng sinh sẽ xảy ra Điều này dẫn đến việc vi khuẩn hình thành các cơ chế đề kháng đối với thuốc kháng sinh, làm giảm hiệu quả điều trị.
Vi khu n s n xu t enzyme đ phá h y ho t tính c a thu c
Vi khu n làm thay đ i kh n ng th m th u c a màng t bào đ i v i thu c
Vi khu n thay đ i đ ng bi n d ng làm m t tác d ng c a thu c
Vi khu n có enzyme đư b thay đ i
4.5.1 Ngu n g c không do di truy n (đ kháng t nhiên):
Nhiều kháng sinh có tác dụng hiệu quả đối với vi khuẩn Gram dương nhưng không có hiệu quả trên vi khuẩn Gram âm và nấm Sự kháng này được cho là liên quan đến sự khác biệt trong cấu trúc tế bào của vi khuẩn.
M t s vi khu n không nhạy cảm với một số loại kháng sinh nhất định, chẳng hạn như vi khuẩn không chịu tác động của colistin hoặc các vi khuẩn không có vách tế bào như Mycoplasma, cũng không chịu tác động của kháng sinh nhóm β-lactam.
Sự nhân lên của vi khuẩn là yếu tố quan trọng trong việc phát triển khả năng kháng thuốc Khi vi khuẩn không thể nhân lên do một nguyên nhân nào đó, chúng có thể trở thành kháng thuốc, nhưng sau đó có thể phát triển lại.
4.5.2 Ngu n g c di truy n (đ kháng thu đ c):
Ph n l n vi khu n kháng thu c là do thay đ i v m t di truy n và là h u qu c a quá trình ch n l c b i thu c kháng sinh
Kháng do nhiễm khuẩn xảy ra khi vi khuẩn phát triển khả năng kháng lại một loại kháng sinh cụ thể Sự kháng thuốc được xem như một chiến lược sinh tồn của vi khuẩn, giúp chúng tồn tại và phát triển mặc dù có sự hiện diện của thuốc kháng sinh Nguyên nhân chính dẫn đến hiện tượng này thường là do sự thay đổi cấu trúc tế bào của vi khuẩn, làm giảm hiệu quả của thuốc.
Kháng ngoài nhiễm sắc thể (kháng ngoài nhi m s c th) là hiện tượng các gen kháng có thể được truyền từ vi khuẩn này sang vi khuẩn khác thông qua nhiều hình thức di truyền khác nhau Chuyển thể (transformation) xảy ra khi vi khuẩn nhận gen DNA từ môi trường xung quanh sau khi bị ly giải Chuyển nạp (transduction) liên quan đến việc DNA plasmid được đưa vào phage và sau đó truyền sang vi khuẩn khác cùng loại Tiếp hợp (conjugation) diễn ra khi hai vi khuẩn tiếp xúc trực tiếp để trao đổi gen Cuối cùng, chuyển vị (transposition) cho phép một đoạn DNA di chuyển từ plasmid này sang plasmid khác hoặc từ plasmid sang một phân nhiễm sắc thể.
4.6 Bi n pháp h n ch gia t ng s kháng thu c:
Ch dùng kháng sinh đ đi u tr nh ng b nh nhi m khu n
S d ng kháng sinh theo k t qu kháng sinh đ , u tiên kháng sinh có ho t ph h p, tác d ng đ c hi u trên vi khu n gây b nh
Tránh không cho vi khu n quen v i thu c có giá tr đ c bi t b ng cách h n ch s d ng
Dùng kháng sinh đ li u l ng và th i gian
C ch tác đ ng c a kháng sinh
c ch s thành l p vách t bào
Vi khuẩn có màng tế bào bên ngoài là vách tế bào, có nhiệm vụ giữ hình dạng và chịu áp lực thẩm thấu cao bên trong tế bào Sự tổng hợp khung peptidoglycan bị ức chế bởi kháng sinh, dẫn đến việc vi khuẩn sinh ra không có vách tế bào và do đó dễ bị tiêu diệt.
Các kháng sinh có kh n ng c ch s thành l p vách g m có: Bacitracin, Cephalosporins, Cycloserine, Penicillins, Rostocetin, Vancomycin
G m: Amphotericin B, Colistin, Imidazoles, Nystatin, Polymyxins
Màng tế bào chất của vi khuẩn đóng vai trò như một hàng rào có khả năng thẩm thấu chọn lọc, giúp điều chỉnh sự di chuyển của các chất dinh dưỡng và ion, từ đó kiểm soát các thành phần bên trong tế bào Khi bị tác động bởi kháng sinh, cấu trúc của màng tế bào chất bị phá vỡ, dẫn đến sự rò rỉ của các ion ra ngoài và sự xâm nhập của các chất từ bên ngoài vào trong tế bào, gây ra hiện tượng tế bào chết.
c ch s t ng h p protein
Aminoglycosides như Amikacin, Gentamycin, Kanamycin, Neomycin, Streptomycin và Tobramycin, cùng với các loại thuốc như Chloramphenicol, Erythromycins, Lincomycins và Tetracyclines, đều là những kháng sinh có khả năng ức chế quá trình tổng hợp protein của vi khuẩn Trong quá trình này, thông tin từ mRNA được truyền đạt đến ribosome để thực hiện tổng hợp protein, tạo thành các polysome.
Nhóm Aminoglycosides, với điển hình là Streptomycin, đã được nghiên cứu kỹ lưỡng và cho thấy tác động tương tự nhau giữa các loại aminoglycosides khác Chúng gắn vào một loại protein đặc biệt trên tiểu đơn vị ribosome, tạo thành phức hợp khởi đầu (initiation complex) trong quá trình tổng hợp chu peptide (mRNA + formyl methionine + tRNA) Trong giai đoạn ba, thông tin mRNA bị sai lệch tại vùng nhận diện của ribosome, dẫn đến việc một amin không phù hợp được đưa vào chuỗi peptide, tạo ra protein không có chức năng Giai đoạn bốn, sự gắn kết của thuốc làm tách các polysome thành các monosome, không có khả năng tổng hợp protein Các tác động này có thể xảy ra với mức độ khác nhau và kết quả cuối cùng là vi khuẩn bị tiêu diệt.
Nhóm Tetracinlines g n vào ti u ph n 30S c a ribosome, c ch s t ng h p protein b ng cách ng n ch n amino acids m i n i vào chu i peptide m i thành l p
Nhóm chloramphenicol g n vào ti u ph n 50S c a ribosome, c ch enzyme peptidyl transferase , ng n c n s g n vào c a amino acids trên chu i peptide m i thành l p
Nhóm Macrolides và Lincomycins g n vào ti u ph n 50S c a ribosome làm ng n c n quá trình dch mư các amino acids đ u tiên c a chu i polypeptide.
c ch s t ng h p acid nucleic
G m Actinomycin, Mitomycin, Nalidixic acid, Novobiocin, Sulfonamides, Trimethoprim…
Nhóm Refampicin g n vào RNA-polymerase, ng n c n quá trình sao mã t o thành mRNA
Nhóm Quinolone, Fluoroquinolones (Nalidic acid, Oxolinic): c ch tác d ng c a DNA gyrase làm cho hai m ch đ n c a DNA không th du i xo n đ th c hi n quá trình nhân đôi DNA.
Nhóm Sulfonamides có cấu trúc tương tự PABA và hoạt động bằng cách cạnh tranh với PABA, từ đó ức chế sự tổng hợp acid folic, một yếu tố cần thiết cho sự phát triển của vi khuẩn.
Nhóm Trimethoprim c ch enzyme dihydrofolic acid reductase Enzyme này kh dihydrofolic acid thành tetrahydrofolic acid, m t giai đo n quan tr ng đ t ng h p purine c a DNA.
X p lo i
D a trên c s c a tính d c lỦ ng i ta x p kháng sinh theo các h nh sau:
Macrolides và các thu c lân c n
M t s nhóm khác: Vancomycin và Ristocetion, Novobiocin, Fusidic acid, Nitrofurans, Quinolones… và m t s thu c ch ng lao, ch ng vi n m, ch ng virus.
S kháng thu c
Kháng sinh có tác dụng tiêu diệt vi khuẩn, nhưng trong môi trường có kháng sinh, vi khuẩn vẫn có thể phát triển, dẫn đến hiện tượng kháng kháng sinh Khi tiếp xúc với thuốc kháng sinh, vi khuẩn sẽ hình thành các cơ chế chống lại thuốc, tạo ra sự kháng thuốc.
Vi khu n s n xu t enzyme đ phá h y ho t tính c a thu c
Vi khu n làm thay đ i kh n ng th m th u c a màng t bào đ i v i thu c
Vi khu n thay đ i đ ng bi n d ng làm m t tác d ng c a thu c
Vi khu n có enzyme đư b thay đ i.
Ngu n g c c a vi c kháng thu c
Ngu n g c không do di truy n (đ kháng t nhiên)
Nhi u kháng sinh chỉ có tác dụng đối với vi khuẩn Gram dương, không có hiệu quả với vi khuẩn Gram âm và nấm Sự kháng này được cho là liên quan đến sự khác biệt về cấu trúc tế bào của vi khuẩn.
M t s vi khu n không nhạy cảm với kháng sinh, chẳng hạn như vi khu n không có vách tế bào như Mycoplasma, không bị ảnh hưởng bởi các kháng sinh thuộc nhóm beta-lactam, cũng như colistin.
Sự nhân lên của vi khuẩn là yếu tố quan trọng trong tác động của kháng sinh Khi vi khuẩn không thể nhân lên do lý do nào đó và trở thành kháng thuốc, chúng có thể gây ra những thách thức nghiêm trọng trong việc điều trị.
Ngu n g c di truy n (đ kháng thu đ c)
Ph n l n vi khu n kháng thu c là do thay đ i v m t di truy n và là h u qu c a quá trình ch n l c b i thu c kháng sinh
Kháng do nhiễm sợ là hiện tượng do đột biến tự nhiên của vi khuẩn, dẫn đến khả năng kháng lại một loại kháng sinh cụ thể Sự phát triển của các chủng vi khuẩn kháng thuốc xảy ra khi vi khuẩn tiếp xúc với thuốc kháng sinh, từ đó tạo ra các biến thể có khả năng sống sót Thông thường, hiện tượng này xảy ra do thay đổi cấu trúc tế bào của vi khuẩn, khiến cho thuốc không còn hiệu quả trong việc tiêu diệt chúng.
Kháng thuốc ở vi khuẩn có thể xảy ra thông qua nhiều cơ chế di truyền khác nhau Đầu tiên, chuyển thể (transformation) cho phép vi khuẩn nhận DNA từ môi trường xung quanh, dẫn đến việc tiếp nhận gen kháng Thứ hai, chuyển nạp (transduction) là quá trình mà DNA plasmid được chuyển vào phage và sau đó được truyền sang vi khuẩn khác cùng loại Thứ ba, tiếp hợp (conjugation) xảy ra khi hai vi khuẩn tiếp xúc và trao đổi gen kháng Cuối cùng, chuyển vị (transposition) cho phép một đoạn DNA di chuyển từ plasmid này sang plasmid khác hoặc từ plasmid sang một phần nhiễm sắc thể.
Bi n pháp h n ch gia t ng s kháng thu c
Ch dùng kháng sinh đ đi u tr nh ng b nh nhi m khu n
S d ng kháng sinh theo k t qu kháng sinh đ , u tiên kháng sinh có ho t ph h p, tác d ng đ c hi u trên vi khu n gây b nh
Tránh không cho vi khu n quen v i thu c có giá tr đ c bi t b ng cách h n ch s d ng
Dùng kháng sinh đ li u l ng và th i gian
Sử dụng đồng thời hai loại thuốc không có phản ứng chéo giúp giảm thiểu những tác động bất lợi đối với loại thuốc kia, chẳng hạn như rifampicin và isoniazid trong điều trị lao.
cao các bi n pháp kh trùng và ti t trùng, ng n ng a s lan truy n vi khu n đ kháng
Liên t c giám sát s đ kháng kháng sinh c a vi khu n đ có chi n l c s d ng kháng sinh h p lý
4.7 Vi khu n ti t men 糎ậlactam ho t ph r ng (ESBL)
Men β-lactamase là các enzyme do vi khuẩn sản xuất, có khả năng phân hủy và làm mất tác dụng của kháng sinh bằng cách phá vỡ cấu trúc vòng β-lactam Những enzyme này chủ yếu ảnh hưởng đến các loại kháng sinh thuộc nhóm β-lactams, aminoglycosides và chloramphenicol, dẫn đến sự kháng thuốc trong điều trị nhiễm khuẩn.
Men 紅-lactamase ho t ph r ng (ESBL) đ c ti t b i các tr c khu n Gram âm đ ng ru t, có kh n ng phân h y ph n l n kháng sinh nhóm penicillins và cephalosporins
ESBL (Extended-Spectrum Beta-Lactamases) được phát hiện lần đầu tiên vào năm 1983, thường gặp trong các chủng vi khuẩn gram âm như Klebsiella spp và E coli Đây là những enzyme transferase có khả năng phân hủy các kháng sinh beta-lactam, đặc biệt là các cephalosporins thế hệ III, IV và monobactam (aztreonam), nhưng không ảnh hưởng đến cephamycins (cefoxitin, cefotetan) hay carbapenems (imipenem, meropenem).
ESBL (Extended-Spectrum Beta-Lactamases) là các enzyme beta-lactamase nguyên thủy, bao gồm các loại như TEM, SHV và CTX-M, và chúng thường được mã hóa bởi plasmide Các biến thể khác nhau của TEM có hoạt tính khác nhau đối với các cephalosporin, trong đó TEM-3 và một số đa dạng của SHV có hoạt tính mạnh mẽ đối với cefotaxime và ceftazidime Ngược lại, các biến thể khác như TEM-10 có sự thay đổi trong trình tự acid amin và hoạt tính kháng thuốc cũng có sự khác biệt.
TEM-26 có hoạt tính kháng cefotaxime và ceftriaxone yếu, trong khi hầu hết các men CTX-M lại có hoạt tính mạnh đối với hai loại kháng sinh này Nhiều vi khuẩn mang gen ESBL vẫn nhạy cảm với một số kháng sinh cephalosporin, tuy nhiên trong thực tế lâm sàng, nếu chúng ta sử dụng các cephalosporin này để điều trị cho bệnh nhân, thì thường gặp phải tình trạng thất bại điều trị.
Các vi khuẩn sinh ESBL thường kháng nhiều loại kháng sinh như quinolones, aminoglycosides, cotrimoxazol và cephalosporin Tuy nhiên, carbapenem, colistin, temocillin, và tigecycline vẫn còn hoạt tính đối với vi khuẩn này Một số thuốc khác như nitrofurantoin và fosfomycin cũng có hiệu quả trong điều trị nhiễm khuẩn do vi khuẩn ESBL.
Vi khuẩn sinh ESBL có khả năng lây truyền từ người này sang người khác hoặc do việc sử dụng kháng sinh không hợp lý Do đó, việc phòng chống và giảm thiểu các vấn đề do vi khuẩn này gây ra là rất cần thiết, đặc biệt là trong các trung tâm chăm sóc sức khỏe, nơi mà việc điều trị cho bệnh nhân phải sử dụng kháng sinh một cách hợp lý.
Chăm sóc bệnh nhân tại các trung tâm chăm sóc đặc biệt yêu cầu nhân viên y tế thực hiện nghiêm ngặt các biện pháp phòng ngừa, bao gồm việc cách ly bệnh nhân, sử dụng găng tay và áo choàng khi tiếp xúc Điều này giúp đảm bảo an toàn cho môi trường vô khuẩn trong quá trình thực hiện các thủ thuật xâm lấn Đối với bệnh viện, cần tránh việc sử dụng kháng sinh một cách lan tràn và thực hiện các biện pháp cách ly đối với những bệnh nhân đã được xác định mang hoặc nhiễm các vi khuẩn sinh ESBL.
4.8.1 Kháng kháng sinh trên th gi i:
Kháng kháng sinh đang trở thành một vấn đề toàn cầu nghiêm trọng Mặc dù không phải là hiện tượng mới, nhưng mức độ nghiêm trọng của nó ngày càng tăng, tạo ra mối đe dọa lớn đối với sức khỏe cộng đồng Hiện nay, việc tìm ra loại thuốc kháng sinh mới trở nên khó khăn hơn do sự gia tăng kháng kháng sinh của vi khuẩn Nguy cơ không còn thuốc kháng sinh hiệu quả để điều trị các bệnh nhiễm khuẩn trong tương lai đang hiện hữu Bằng chứng cho thấy nhiều kháng sinh thế hệ đầu không còn được lựa chọn trong nhiều trường hợp, trong khi các kháng sinh thế hệ mới cũng đang dần mất tác dụng Đặc biệt, sự lây lan của các chủng vi khuẩn kháng carbapenem ở một số quốc gia Châu Âu và Châu Á cho thấy vấn đề này đang ngày càng nghiêm trọng trên quy mô toàn cầu.
4.8.2 Kháng kháng sinh Vi t Nam:
Tình tr ng kháng kháng sinh Vi t Nam đư m c đ cao, đáng báo đ ng Các nghiên c u trong nh ng n m g n đây cho th y:
Streptococcus pneumoniae_là m t trong nh ng nguyên nhân th ng g p nh t gây nhi m khu n hô h p_kháng Penicillin (80%) và kháng khá cao v i Macrolides: Erythromycin (72%), Azithromycin (76%) và Clarithromycin (86%)
T l Haemophilus influenza kháng ampicillin đư đ c ghi nh n là vào kho ng 57% t i b nh vi n nhi Trung ng và t i các b nh vi n Nha Trang
Khu vực phân lập trẻ em có tỷ lệ kháng cao đối với virus Việc hợp tác, bù đắp và điều chỉnh là biện pháp xử lý hiệu quả nhất đối với bệnh tiêu chảy, trong đó không thể thiếu sự chăm sóc đặc biệt cho trẻ em được chẩn đoán mắc bệnh viêm ruột.
Các vi khuẩn Gram âm đa kháng thuốc đã trở thành một vấn đề nghiêm trọng tại bệnh viện TP Hồ Chí Minh, với 25% vi khuẩn phân lập được kháng kháng sinh Cephalosporin thế hệ 3 theo nghiên cứu từ năm 2000-2001 Một nghiên cứu khác vào năm 2009 cho thấy tỷ lệ vi khuẩn Gram âm kháng Ceftazidime lên tới 42%, kháng Gentamicin 63% và kháng acid nalidixic 74% Tình trạng kháng kháng sinh này đã gia tăng theo thời gian.
Nghiên c u đ c ti n hành trên m u đàm đ c g i t i phòng vi sinh c a t t c các b nh nhân b nhi m khu n đ ng hô h p đi u tr t i b nh vi n i h c Y d c
Các lo i c c th y tinh và ng đong
Que c y: que th ng và que vòng
Ph ng pháp nhu m Gram [2, 13, 14, 15]:
Trong quá trình nhuộm Gram, vi khuẩn Gram dương giữ lại màu tím của thuốc nhuộm Gentian-iod, trong khi vi khuẩn Gram âm không giữ được màu này và chuyển sang màu hồng của phẩm màu Fuchsin Điều này xảy ra do sự khác biệt trong cấu trúc tế bào của hai loại vi khuẩn.
Làm ph t b nh ph m hay vi khu n g n trên lame
Nh dung d ch tím Gentian lên ph t kính yên 1 phút R a n c
Nh dung d ch Lugon lên ph t kính 30 giây R a n c
Nh dung d ch Fuchsin lên ph t kính, đ yên 1 phút R a n c, th m khô
Quan sát b ng v t kính d u, đ phóng đ i 1.000 l n
Vi khu n Gram d ng b t màu tím Gentian, vi khu n Gram âm b t màu h ng Fuchsin
Khi tr l i k t qu nhu m Gram, tr l i v : hình d ng, cách s p x p c a vi khu n, vi khu n Gram d ng hay Gram âm.
Có th xác đnh nh m Gram (+) và Gram (-) v i nhau do:
Th i gian t y c n quá lâu hay quá nhanh
Ph t kính quá m ng hay quá dày
Do s t h y, t ng tính acid c a môi tr ng, nhi t đ c y trong thích h p, s hi n di n c a m t s đ c ch t, nên mu n xác đ nh chính xác ph i nhu m Gram v i l a c y t 18 – 24 gi
Hóa ch t b h h ng hay quá h n
Brain Heart Infusion (BHI) Broth
Proteose pepton (Difco) ho c polypeptone 10g
Hòa tan các thành ph n c a môi tr ng trong n c c t
Môi trường Brain Heart Infusion có màu vàng nhạt và giàu chất dinh dưỡng, tạo điều kiện thuận lợi cho sự sinh trưởng của nhiều loại vi khuẩn, bao gồm cả những vi khuẩn khó tính.
Cân các thành ph n theo hàm l ng hòa tan vào 1 lít n c c t, đun sôi, r i khu y đ u cho agar hòa tan h t H p thanh trùng: 121 o C/15 phút
Môi trường thí nghiệm Mueller-Hinton Agar là môi trường trong suốt, được sử dụng để kiểm tra tính nhạy cảm của vi sinh vật đối với kháng sinh Môi trường này thường được áp dụng để thử nghiệm sự thu phân tính của vi sinh vật Mueller-Hinton chứa các thành phần như hàn d ch đ ng, casamino acid và tinh bột, giúp hỗ trợ sự phát triển của vi sinh vật Ngoài ra, có thể thêm máu cừu vào công thức để thực hiện thử nghiệm tính nhạy cảm của các chủng Streptococci Khi đun nóng máu cừu, nó sẽ chuyển thành chocolate, cho phép thử nghiệm với các vi sinh vật khó tính như Haemophilus và Neisseria.
Hình 2.1: a th ch MHA Hình 2.2: Th ch MHA trong làm kháng sinh đ
pH 7,3罰0,2 un sôi trong 1 phút và l c đ làm tan agar H p 121oC/15 phút, làm ngu i đ n 50 o C, cho 5ml (ho c 10ml) máu c u vào 100ml môi tr ng th ch đang nóng ch y
Môi trường thạch máu (Blood Agar) là một loại môi trường thí nghiệm được sử dụng để nuôi cấy các vi khuẩn không khó tính Môi trường này được pha chế từ thạch triptic soy và được làm giàu bằng cách thêm 5-10% máu tươi, máu đông hoặc máu người đã được phá vỡ sợi fibrin Sự kết hợp của máu không chỉ cung cấp chất dinh dưỡng cần thiết cho vi khuẩn phát triển mà còn cho phép phát hiện tính tan máu của vi khuẩn.
Hình 2.3: a th ch BA Hình 2.4: Các ki u tiêu huy t trên BA
Eozin Metyl Blue Agar (EMB)
Th ch EMB là môi tr ng ch n l c cho các tr c khu n Gram âm Ch th Eosin
Tìnhăhìnhăđ kháng kháng sinh
Kháng kháng sinh trên th gi i
Kháng kháng sinh đang trở thành một vấn đề toàn cầu ngày càng nghiêm trọng Mặc dù không phải là mới, nhưng mức độ nghiêm trọng của nó đang gia tăng, đe dọa sức khỏe cộng đồng trên toàn thế giới Hiện nay, việc tìm ra các loại thuốc kháng sinh mới gặp nhiều khó khăn do sự gia tăng kháng kháng sinh của vi khuẩn Nguy cơ không còn thuốc kháng sinh để điều trị các bệnh nhiễm khuẩn trong tương lai là rất cao Bằng chứng cho thấy nhiều kháng sinh thế hệ đầu không còn hiệu quả trong nhiều trường hợp, trong khi các kháng sinh thế hệ mới đang dần mất tác dụng Đặc biệt, sự lây lan của các chủng vi khuẩn kháng carbapenem tại một số quốc gia châu Âu và châu Á cho thấy vấn đề này đang trở nên nghiêm trọng trên quy mô toàn cầu.
Kháng kháng sinh Vi t Nam
Tình tr ng kháng kháng sinh Vi t Nam đư m c đ cao, đáng báo đ ng Các nghiên c u trong nh ng n m g n đây cho th y:
Streptococcus pneumoniae_là m t trong nh ng nguyên nhân th ng g p nh t gây nhi m khu n hô h p_kháng Penicillin (80%) và kháng khá cao v i Macrolides: Erythromycin (72%), Azithromycin (76%) và Clarithromycin (86%)
T l Haemophilus influenza kháng ampicillin đư đ c ghi nh n là vào kho ng 57% t i b nh vi n nhi Trung ng và t i các b nh vi n Nha Trang
Khu vực phân lập trẻ em bị tiêu chảy có tỉ lệ kháng cao Đối với những trường hợp nặng, bù nước và điện giải là biện pháp xử lý hiệu quả nhất để điều trị bệnh tiêu chảy, trong đó không thể thiếu việc sử dụng thuốc kháng sinh khi cần thiết.
Các vi khuẩn Gram âm đa kháng kháng sinh đã trở thành một vấn đề nghiêm trọng tại bệnh viện TP Hồ Chí Minh, với 25% số vi khuẩn phân lập được kháng lại kháng sinh Cephalosporin thế hệ 3 trong nghiên cứu từ năm 2000-2001 Một nghiên cứu khác vào năm 2009 cho thấy tỷ lệ vi khuẩn Gram âm kháng Ceftazidime đạt 42%, kháng Gentamicin 63% và kháng acid nalidixic 74% Tình trạng kháng kháng sinh này đã gia tăng theo thời gian.
IăT NG NGHIÊN C U
V t li u
Các lo i c c th y tinh và ng đong
Que c y: que th ng và que vòng
Ph ng pháp nhu m Gram [2, 13, 14, 15]:
Vi khuẩn Gram dương và Gram âm có cấu trúc tế bào khác biệt, ảnh hưởng đến quá trình nhuộm Gram Vi khuẩn Gram dương giữ lại màu tím của thuốc nhuộm Gentian-iode do khả năng hấp thụ, trong khi vi khuẩn Gram âm không giữ được màu này và chuyển sang màu hồng của phẩm màu Fuchsin Kết quả là, vi khuẩn Gram dương xuất hiện với màu tím, còn vi khuẩn Gram âm hiển thị màu hồng.
Làm ph t b nh ph m hay vi khu n g n trên lame
Nh dung d ch tím Gentian lên ph t kính yên 1 phút R a n c
Nh dung d ch Lugon lên ph t kính 30 giây R a n c
Nh dung d ch Fuchsin lên ph t kính, đ yên 1 phút R a n c, th m khô
Quan sát b ng v t kính d u, đ phóng đ i 1.000 l n
Vi khu n Gram d ng b t màu tím Gentian, vi khu n Gram âm b t màu h ng Fuchsin
Khi tr l i k t qu nhu m Gram, tr l i v : hình d ng, cách s p x p c a vi khu n, vi khu n Gram d ng hay Gram âm.
Có th xác đnh nh m Gram (+) và Gram (-) v i nhau do:
Th i gian t y c n quá lâu hay quá nhanh
Ph t kính quá m ng hay quá dày
Do s t h y, t ng tính acid c a môi tr ng, nhi t đ c y trong thích h p, s hi n di n c a m t s đ c ch t, nên mu n xác đ nh chính xác ph i nhu m Gram v i l a c y t 18 – 24 gi
Hóa ch t b h h ng hay quá h n
Brain Heart Infusion (BHI) Broth
Proteose pepton (Difco) ho c polypeptone 10g
Hòa tan các thành ph n c a môi tr ng trong n c c t
Môi trường Brain Heart Infusion có màu vàng nhạt và chứa nhiều chất dinh dưỡng, hỗ trợ sự phát triển của vi khuẩn, bao gồm cả những loại khó tính.
Cân các thành ph n theo hàm l ng hòa tan vào 1 lít n c c t, đun sôi, r i khu y đ u cho agar hòa tan h t H p thanh trùng: 121 o C/15 phút
Môi trường thạch Mueller-Hinton Agar là môi trường trong suốt, được sử dụng để thử nghiệm tính nhạy cảm của vi sinh vật đối với kháng sinh Môi trường này thường được dùng để thử nghiệm sự thu phân tinh bột Thạch Mueller-Hinton chứa các thành phần như hạt đậu nành, casamino acid và tinh bột, giúp cho vi sinh vật phát triển tốt Ngoài ra, có thể thêm máu cừu vào công thức để thực hiện thử nghiệm tính nhạy cảm của các chủng Streptococci Khi đun nóng máu cừu, nó sẽ chuyển thành chocolate, cho phép thử nghiệm với các vi sinh vật khó tính như Haemophilus và Neisseria.
Hình 2.1: a th ch MHA Hình 2.2: Th ch MHA trong làm kháng sinh đ
pH 7,3罰0,2 un sôi trong 1 phút và l c đ làm tan agar H p 121oC/15 phút, làm ngu i đ n 50 o C, cho 5ml (ho c 10ml) máu c u vào 100ml môi tr ng th ch đang nóng ch y
Môi trường thạch máu (Blood Agar) là môi trường thí nghiệm phổ biến dùng để nuôi cấy các vi khuẩn không khó tính Môi trường này được pha chế từ thạch triptic soy, được làm giàu bằng cách thêm 5-10% máu tươi, máu thỏ hoặc máu người đã được phá vỡ sợi fibrin Sự kết hợp của máu không chỉ cung cấp chất dinh dưỡng cần thiết cho vi khuẩn phát triển mà còn cho phép phát hiện tính tan máu của các vi khuẩn.
Hình 2.3: a th ch BA Hình 2.4: Các ki u tiêu huy t trên BA
Eozin Metyl Blue Agar (EMB)
Th ch EMB là môi tr ng ch n l c cho các tr c khu n Gram âm Ch th Eosin
Methylene Blue có tác dụng ức chế sự phát triển của các vi khuẩn Gram âm trong môi trường dựa trên nguyên tắc lên men lactose Các vi khuẩn lên men lactose tạo ra acid, khiến khuẩn lạc có màu tím nhạt khi kết hợp với Methylene Blue, và có thể xuất hiện ánh kim tùy thuộc vào mức độ lên men lactose Ngược lại, nếu vi khuẩn không lên men lactose, khuẩn lạc sẽ không có màu hoặc có màu trong suốt.
Hình 2.5: a môi tr ng EMB Hình 2.6: Lactose +/- trên môi tr ng EMB
Các môiătr ng th nghi m đnh danh th ng qui tr c khu n gram âm t i b nh vi n:
Môi tr ng Kligler’s Iron Agar (KIA)
Kligler’s Iron Agar (KIA) là môi trường chứa hai đường chính là glucose và lactose, cùng với phenol red và sulfat sắt để phát hiện H2S Tỉ lệ glucose và lactose trong môi trường này là 1/10 Khi glucose được lên men, acid được sinh ra làm cho phần thạch nghiêng (slant) bị oxi hóa nhanh chóng; nếu lactose không bị lên men, thạch nghiêng sẽ giữ tính kiềm (đỏ) Ngược lại, trong điều kiện yếm khí, phần thạch đứng (butt) sẽ duy trì tính axit và không bị oxi hóa Do đó, nếu chỉ có glucose được lên men, sẽ xuất hiện phần thạch đứng có màu vàng và thạch nghiêng giữ màu đỏ Nếu lactose được lên men, cả hai phần thạch đứng và nghiêng đều sẽ chuyển sang màu vàng.
Nuôi sinh khối có ảnh hưởng lớn đến môi trường, đặc biệt là quá trình phân hủy chất hữu cơ dưới đáy ng Khi thấy màu đen xuất hiện, vi sinh vật sẽ sản sinh ra khí hydrogen sulfide từ thiosulfid Phản ứng này diễn ra sau khi nuôi cấy từ 18 đến 24 giờ.
Môi tr ng Sulfide Indole Motility (SIM):
Môi trường bán rắn được sử dụng để phát hiện H2S, Indole và khả năng di động của vi khuẩn H2S được phát hiện chủ yếu thông qua natri thiosulfate, trong khi Indole được xác định bằng thuốc thử Kovac.
Môi tr ng Simmon Citrat Agar
Môi trường thí nghiệm Simmon citrate được sử dụng để xác định khả năng sử dụng citrate như là nguồn carbon duy nhất Môi trường này có pH khoảng 6,9 và chứa sodium citrate Vi khuẩn có khả năng sử dụng citrate sẽ chuyển đổi sodium citrate thành các chất làm kiềm hóa môi trường Sử dụng chỉ thị bromothymol blue, màu sắc của môi trường sẽ chuyển từ xanh lá (pH=6,9) sang xanh da trời (pH=7,6) khi có sự tăng pH.
Th nghi m Phenyl Alanine deaminase (PAD):
M t s vi khu n có kh n ng s n xu t men deaminase đ bi n đ i phenyllalanine thành phenyl-pyruvic acid và ammonia Phenyl-pyruvic acid k t h p v i thu c th Ferric chloride 10% đ t o ph c h p màu xanh lá
Môi tr ng Stuart’s urea broth (dùng đ th nghi m urease)
Urea được pha vào môi trường có phenol red, cho phép vi khuẩn có khả năng sản xuất urease phân giải urea thành ammoniac, làm kiềm hóa môi trường Môi trường sẽ chuyển sang màu vàng khi pH < 6,8 và màu đỏ khi pH > 8,1.
Th nghi m Lysine decarboxylase (LDC):
Môi trường chứa đựng glucose và vi khuẩn lên men chuyển hóa thành màu vàng Nếu vi khuẩn sản xuất enzyme, chúng sẽ phân hủy các amino acid và alkaline amines, dẫn đến việc làm kiềm hóa môi trường và chuyển sang màu tím Chất chỉ thị pH trong môi trường này là Bromocrésol purple.
Môi tr ng Oxydative-Fermentative (OF)
Môi trường thí nghiệm Oxydative-Fermentative được sử dụng để xác định cách sử dụng carbohydrate của vi sinh vật thông qua quá trình oxy hóa, lên men hoặc hô hấp Môi trường này chứa pepton, giúp tạo ra sản phẩm kiềm, có khả năng trung hòa lượng acid sinh ra trong quá trình oxy hóa Lượng carbohydrate trong môi trường ảnh hưởng đến số lượng acid mà vi sinh vật có thể tạo ra Ngoài ra, môi trường cũng cần có chất dinh dưỡng để tạo điều kiện cho acid phát triển trên bề mặt và khuếch tán qua môi trường Màu xanh của bromthymol được sử dụng để phát hiện sự hiện diện của acid thông qua sự thay đổi pH.
Thí nghiệm với cytochrome oxidase sử dụng p-phenylenediamine dihydrochloride làm chất nhận điện tử thay thế oxy Dù ban đầu p-phenylenediamine không màu, nhưng khi có sự hiện diện của cytochrome oxidase và oxy khí trời, p-phenylenediamine sẽ bị oxi hóa và chuyển thành indophenol blue.
Hình 2.7: K t qu th nghi m ph n ng oxidase
Th c hi n các ch n đoán vi sinh v t theo chu n th c t i phòng xét nghi m vi sinh c a b nh vi n i h c Y d c TP H Chí Minh
Kh o sát đ c đi m m u và kh o sát m u qua kính hi n vi
C y phân l p, đ nh danh vi khu n.
Ph ng pháp
Phương pháp Kirby-Bauer là kỹ thuật phổ biến để xác định tính nhạy cảm và độ kháng của vi khuẩn đối với các loại kháng sinh thông dụng Kỹ thuật này sử dụng khuếch tán kháng sinh trên môi trường thạch để đánh giá khả năng ức chế sự phát triển của vi khuẩn.
Vì đàm có th b ngo i nhi m b i các vi khu n th ng trú vùng h ng, do đó c n ph i đánh giá tr c khi ti n hành nuôi c y
Ghi nh n tính ch t đ i th c a m u đàm, các tính ch t sau:
Có nhi u n c b t không? Có m không, th ng màu xanh hay vàng đ c? Có m nh y không? Có nh y không?
M u có l n nhi u n c b t là m u không thích h p đ c y
Dùng que c y l y m t ít đàm t vùng nh y m , ph t đ u lên lame kính khô t nhiên, sau đó h nh trên l a đ c đnh m u Th c hi n ph t nhu m Gram
D i quang tr ng x100 c a kính hi n vi (v t kính x10) Tìm vùng nh y nh t r i ghi nh n s l ng t bào v y và t bào b ch c u (hay t bào m )
Mụn có nhiều tế bào bạch cầu (半25), ít tế bào vảy (判10), tỷ lệ tế bào bạch cầu/vảy thấp nhất là 半2.5 Để đánh giá mụn một cách dễ dàng và khách quan, chúng ta sử dụng thang điểm Barlett, trong đó kết hợp các quan sát để đánh giá tình trạng mụn.
B ng: Thang đi m Barlett dùng đánh giá m u đàm
Tính ch t đ i th /vi th i m
M uăđƠmăhútăquaăm i,ăn i soi ph qu n
Thang đi m đ đánh giá là c ng t t c các đi m l i r i đánh giá nh sau:
Sau khi đánh giá, chuy n sang v t kính d u (x100), quan sát nh y nh t và quanh t bào b ch c u đ ghi nh n s hi n di n c a vi khu n
2.2.2 C y phân l p vi khu n gây b nh (dùng ph ng pháp c y ba chi u):
Phương pháp cấy ba chiều giúp tách biệt và phát triển vi sinh vật trong môi trường nuôi cấy Bắt đầu từ một tế bào ban đầu, sau một thời gian nuôi cấy, sẽ tạo ra các khúm vi khuẩn hoặc khuẩn lạc riêng biệt.
Kh trùng đ u que c y trên ng n l a cho đ n khi que c y đ h ng que c y ngu i
a l đ ng m u b nh ph m l i g n ng n l a và m n p l
L y 1 vòng que c y m u đàm n i nh y nh t y n p l l i
Dùng 1 tay m n p đ a petri, 1 tay b t đ u c y ria đ ng ziczac trên m t th ch, kho ng 1 /4đ a th ch
H nh que c y qua ng n l a Xoay đ a petri kho ng 1 /4 vòng
C y ria đ ng th 2 t v trí c y ria đ u tiên
Xoay đ a petri 1 /4 vòng Ti p t c c y ria đ ng th 3 t v trí c y ria th 2 Sau khi c y xong, đ t m nhi t đ 37 o C, trong 18 – 24 gi i v i BA t m có 5% CO2
K t qu : khi có vi khu n m c c n xác đnh có ph i là t p nhi m hay không, n u không thì ti n hành đ nh danh vi khu n
Thời gian gần đây, việc kiểm tra tình trạng vi khuẩn phân lập độc trên các hợp chất phân lập rất phù hợp với kết quả khảo sát trực tiếp qua phản ứng Gram Đây là các tác nhân vi khuẩn gây bệnh có thể phân lập độc từ mẫu đàm.
Th ng g p trong nhi m trùng c ng đ ng:
Th ng g p trong nhi m trùng b nh vi n:
Các tr c khu n Gram [-] d m c khác
2.2.3 K thu t kháng sinh đ theo ph ng pháp Kirby Bauer [13, 23] : a Nguyên t c:
Kháng sinh được sử dụng để ức chế sự phát triển của vi khuẩn trong môi trường nuôi cấy, nhằm ngăn chặn sự lây lan của chúng Sự phân bố của kháng sinh xung quanh môi trường nuôi cấy giúp xác định hiệu quả của thuốc đối với từng loại vi khuẩn cụ thể.
C y phân l p trên th ch BA và EMB
BA (5% CO 2 ) EMB (bình th ng)
Vi khu n m c nh danh, th c hi n kháng sinh đ
Làm ph t nhu m Gram ánh giá m u b ng thang đi m barlett
M u không tin c y b Chu n b v t li u: a kháng sinh:
Là nh ng đ a gi y có b dày 1mm, đ ng kính 6mm, đ c t m dung d ch kháng sinh v i n ng đ tiêu chu n
Có r t nhi u lo i kháng sinh Vi c l a ch n các kháng sinh đ th nghi m c n d a trên tiêu chu n c a CLSI đ a ra.
Môi tr ng c b n th c hi n kháng sinh đ :
Môi trường Mueller Hinton là tiêu chuẩn để kiểm tra độ nhạy kháng sinh của vi khuẩn Đối với các vi khuẩn khó tính, cần điều chỉnh môi trường cho phù hợp và bổ sung các chất cần thiết để đảm bảo kết quả chính xác.
Môi trường được đổ vào đĩa petri với độ dày không dưới 4mm Các hộp thức ăn nếu không được sử dụng trong ngày thì cần bảo quản ở nhiệt độ từ 2-8 độ C và chỉ nên dùng trong vòng 1 tuần Trước khi sử dụng, nên lấy hộp thức ăn ra để khô mát, đảm bảo trên bề mặt và nắp đậy không có nước đọng.
Pha huy n d ch vi khu n t khóm vi khu n m c trên m t th ch đ c nuôi c y i u ch nh huy n dch đ t đ đ c chu n 0.5McFarland c K thu t:
Dùng que gòn để nhúng vào huyết thanh vi khuẩn, sau đó ép và xoay que gòn trên thành ống nghiệm để thu được mẫu huyết thanh vi khuẩn hiệu quả.
Dùng que gòn tr i đ u vi khu n trên m t th ch MHA khô m t th ch tr c khi đ t đ a kháng sinh.
Xác đnh b đ a kháng sinh đ t trên m t th ch Khi đ t đ a nên ép nh đ đ m b o m t đ a ti p xúc hoàn toàn v i m t th ch Các đ a kháng sinh không g n nhau d i 2.4cm và cách mép h p Petri 2.5-3cm
37 o C và đ c k t qu sau 18–24h c k t qu b ng cách đo đ ng kính vòng vô khu n và bi n lu n đ ng kính vòng vô khu n d a theo tiêu chu n CLSI
Trong thời gian nghiên cứu từ tháng 1/2013 đến tháng 12/2013, Khoa Vi sinh của Bệnh viện Y Dược TPHCM đã nhận được 921 mẫu bệnh phẩm từ các bệnh nhân có độ tuổi từ 1 đến 101 Trong số đó, có 174 mẫu phân lập được nấm men, chiếm 18,89%, và 702 mẫu phân lập được vi khuẩn, chiếm 76,22% Tổng số chủng vi khuẩn phân lập được từ mẫu đàm được nghiên cứu là 777 chủng, trong đó có 78 mẫu bệnh phẩm phân lập được 2 loại vi khuẩn.
B ng 3.1 K t qu nuôi c y t ng quát n %
Bi u đ 3.1: K t qu nuôi c y t ng quát
Quan sát trong s 780 ch ng vi khu n phân l p đ c t m u đàm t i b nh vi n i h c Y d c TPHCM t tháng 1/2013 đ n 12/2013, ghi nh n th y:
T l tác nhân gây nhi m trùng
Theo đ tu i
B ng 3.2: Phân b b nh nhân b NKHH theo đ tu i (np2)
Bi u đ 3.2: Phân b b nh nhân b NKHH theo đ tu i (np2)
T l b nh nhân b nhi m khu n đ ng hô h p do vi khu n t ng theo đ tu i: càng l n tu i, t l m c b nh càng cao
Bi u đ 3.2 cho th y t l nhi m khu n nhóm b nh nhân có đ tu i trên 60 cao h n r t nhi u so v i các nhóm tu i khác v i 460 tr ng h p, chi m đ n 65,82%
B ng 3.3 Phân b b nh nhân b NKHH theo gi i tính (np2) n %
Bi u đ 3.3 Phân b b nh nhân b NKHH theo gi i tính (np2)
T l nhi m khu n đ ng hô h p do vi khu n b nh nhân nam là 380 tr ng h p (54,13%), cao h n b nh nhân n (45,87%) T l nam/n là 1,18/1
1.1.3 Theo nhóm vi khu n gây b nh:
B ng 3.4 T l các vi khu n th ng đ c phân l p trong m u đàm (nw7)
Streptococcus spp 310 39,90 Klebsiella spp 140 18,02 Acinetobacter spp 104 13,38 Staphylococcus spp 59 7,59 Enterobacter spp 36 4,63
Bi u đ 3.4 T l các vi khu n th ng đ c phân l p trong m u đàm (nw7)
Trong t ng s các vi khu n phân l p đ c t m u đàm, chúng tôi nh n th y các tác nhân vi khu n th ng g p trong m u đàm: Streptococcus spp (39,9%), Klebsiella spp (18,02%), Acinetobacter spp (13,38%), Staphylococcus spp
(7,59%), Enterobacter spp (4,63%), P aeruginosa (4,38%) Ngoài ra còn g p m t s vi khu n khác nh : E coli, Neisseria spp., S.aureus, Pantoea agglomerans,…
T bi u đ 3.4 cho th y, Streptococcus spp chi m t l cao nh t trong t ng s các vi khu n phân l p đ c v i 310 ch ng vi khu n.
K t qu đ kháng kháng sinh
B ng 3.5 T l đ kháng kháng sinh c a Streptococcus spp (n10)
Bi u đ 3.5 T l đ kháng kháng sinh c a Streptococcus spp
Pn Am Ct Va Er Lv Of cL
Kết quả nghiên cứu cho thấy tỷ lệ kháng kháng sinh của vi khuẩn Streptococcus spp rất cao, với hơn 80% các chủng kháng lại các loại kháng sinh như Erythromycin (93,87%), Clindamycin (92,58%), Ofloxacin (87,12%) và Levofloxacin (82,14%) Trong khi đó, tỷ lệ kháng thấp hơn được ghi nhận với Ampicillin (63,85%), Penicillin (52,26%) và Cefotaxime (8,8%) Đặc biệt, chỉ có 3 chủng vi khuẩn Streptococcus spp kháng lại Vancomycin, chiếm tỷ lệ rất thấp (0,97%).
B ng 3.6 T l đ kháng kháng sinh c a Klebsiella spp (n0)
Bi u đ 3.6 T l đ kháng kháng sinh c a Klebsiella spp
Klebsiella spp trong mẫu đàm cho thấy tỷ lệ kháng kháng sinh cao, với kháng Ceftriaxone đạt 38,57%, Ceftazidime 33,57%, Ciprofloxacin 36,96% và Levofloxacin 38,69% Đối với nhóm kháng sinh β-lactam/β-lactamase, tỷ lệ kháng của Klebsiella là 20% với Ticarcillin/Clavulanic acid, 18,57% với Piperacillin/tazobactam, và 10,07% với Cefoperazone/sulbactam Trong khi đó, tỷ lệ kháng với Colistin, Meropenem, Amikacin và Netilmycin là rất thấp, lần lượt là 2,19%, 15,38%, 8,57% và 9,35%.
B ng 3.7 T l đ kháng kháng sinh c a Acinetobacter spp (n4)
Pt Tc Cx Cz Co MEM Ak Nl Lv Ci Cs
Bi u đ 3.7 T l đ kháng kháng sinh c a Acinetobacter spp
Acinetobacter spp đư đ kháng l i t t c các kháng sinh th nghi m v i t l khá cao, cao h n nhi u so v i Klebsiella
Tác nhân này đư kháng l i h u h t các kháng sinh v i t l khá cao (50-60%): kháng Ceftrizone 57,69%, Meropenem 59,78%, Amikacin 58,65%, Netilmycin
51,35%, Levofloxacin 56,73%, Ciprofloxacin 59,41%, Piperacillin/tazobactam 52,53%, Ticarcillin/clavulanic acid 54,37% T l đ kháng cao nh t v i kháng sinh Ceftriaxone, kháng 64,42% (trung gian 13,46%)
Pt Tc Cx Cz Co MEM Ak Nl Lv Ci Cs
Kháng sinh Colistin_m t trong nh ng kháng sinh m nh nh t hi n nay đ đi u tr nh ng tr ng h p nhi m khu n n ng do vi khu n Gram âm_đư b Acinetobacter kháng đ n 36,54%
Cefoperazone/sulbactam_là kháng sinh ph i h p cephalosporin th h III v i ch t c ch 紅-lactamase_c ng đư b kháng đ n 27,18%
B ng 3.8 T l đ kháng kháng sinh c a Staphylococcus spp (nY)
Bi u đ 3.8 T l đ kháng kháng sinh c a Staphylococcus spp.
Staphylococcus spp exhibit a high resistance rate to various antibiotics, exceeding 80% for Penicillin, Oxacillin, Ciprofloxacin, Clindamycin, Erythromycin, and Levofloxacin The resistance rate to Cefotaxime is notably high at 56.9%, with an intermediate resistance of 12.07% Amoxicillin/clavulanic acid is considered an appropriate antibiotic, showing a significant resistance rate of 55.93% Conversely, Staphylococcus spp demonstrate low resistance rates to Amikacin and Netilmicin, with resistance levels of only 10.17% and 2.04%, respectively No resistance to Vancomycin has been detected.
Pn Ox Ac Ct Va Ak Nl Er Lv Ci cL
Bi u đ 3.9 T l đ kháng kháng sinh c a Enterobacter spp bi u đ 3.9 cho th y t l đ kháng t ng đ i cao c a Enterobacter spp đ i v i Ceftriaxone (kháng 70,27%, trung gian 18,92%), kháng Ceftazidime 48,65% (trung gian 10,81%)
Enterobacter có t l đ kháng v a và th p v i các kháng sinh: Meropenem 35,29%, Levofloxacin 38,89%, Ciprofloxacin 42,86%, Piperacillin/tazobactam 29,73%, Ticarcillin/clavulanic acid 27,03%, Cefoperazone/sulbactam 10,81% So v i Klebsiella thì t l đ kháng Colistin c a Enterbacter cao h n: kháng 10,81%
B ng 3.10 T l đ kháng kháng sinh c a P aeruginosa (n4)
Pt Tc Cx Cz Co MEM Ak Nl Lv Ci Cs
Bi u đ 3.10 T l đ kháng kháng sinh c a P aeruginosa
P aeruginosa có t l đ kháng cao v i Ceftriaxone (kháng 50%, trung gian 23,53%), đ kháng t ng đ i v i Levofloxacin (kháng 29,41%, trung gian 11,76%) và Ciprofloxacin (kháng 26,47%, trung gian 11,76%) i v i các kháng sinh còn l i, P aeruginosa v n còn nh y c m cao.
T l vi khu n sinh ESBL
Trong nghiên cứu này, trong tổng số 207 chủng vi khuẩn Gram âm được phân lập, có 85 chủng vi khuẩn sinh enzyme ESBL Các vi khuẩn sinh ESBL chủ yếu bao gồm Klebsiella spp., Enterobacter spp và E coli.
Pt Tc Cx Cz Co MEM Ak Nl Lv Ci Cs
B ng 3.11 Các vi khu n sinh ESBL
Lo i vi khu n S ch ng (n) T l (%) ESBL (+)
Bi u đ 3.11 T l vi khu n sinh ESBL
Kết quả nghiên cứu cho thấy tỷ lệ vi khuẩn sinh men beta-lactamase phổ rộng (ESBL) đạt 41,06% Trong đó, Klebsiella spp có tỷ lệ cao nhất với 37,85% (53/140 chủng), tiếp theo là Enterobacter với 55,56% (20/36 chủng) và E coli với 38,71% (12/31 chủng).
Các chủng sinh ESBL cho thấy khả năng kháng kháng sinh cao đối với Cephalosporin, đặc biệt là Cefotaxime và Ceftazidime Ngoài ra, chúng cũng có mức độ kháng cao với nhóm Fluoroquinolones, bao gồm Levofloxacin và Ciprofloxacin.
Klebsiella spp Enterobacter spp E coli
Bi u đ 3.12 T l đ kháng kháng sinh c a các vi khu n sinh ESBL
Pt Tc Cx Cz Co MEM Ak Nl Lv Ci Cs
V i s li u trong n m 2013, k t qu nghiên c u cho th y:
V i t ng s b nh nhân b nhi m khu n đ ng hô h p phân l p đ c vi khu n t m u đàm là 702, t l b nh nhân nam (54,13%) m c b nh cao h n b nh nhân n
Tỷ lệ nhiễm trùng hô hấp do vi khuẩn tăng cao ở những bệnh nhân trên 60 tuổi, đạt tới 65,53% Những bệnh nhân cao tuổi thường gặp tình trạng giãn phế nang, sức đề kháng kém và khó khăn trong việc chống lại sự xâm nhập của vi khuẩn Hơn nữa, các cơ quan bên ngoài cũng không đáp ứng hiệu quả với những thay đổi của tình trạng bệnh lý, dẫn đến nguy cơ nhiễm khuẩn hô hấp tăng cao.
Nhóm bệnh nhân dưới 20 tuổi tại Bệnh viện Y Dược TP Hồ Chí Minh gặp khó khăn do bệnh viện chưa có khoa Nhi, dẫn đến tình trạng điều trị cho nhóm tuổi này không được đáp ứng đầy đủ như các nhóm tuổi khác.
Các lo i vi khu n phân l păđ c
Kết quả từ bảng 3.4 và biểu đồ 3.4 cho thấy các vi khuẩn gây nhiễm khuẩn hô hấp thường gặp trong mẫu đàm trong nghiên cứu này bao gồm: Streptococcus spp (39,9%), Klebsiella spp (18,02%), Acinetobacter spp (13,38%), Staphylococcus spp (7,59%), Enterobacter spp (4,63%) và P aeruginosa (4,38%).
Nghiên cứu của tác giả Trần Thị Thủy Trinh chỉ ra rằng các tác nhân vi khuẩn gây bệnh thường gặp trong hệ hô hấp bao gồm Moraxella catarrhalis (27,45%), Klebsiella spp (22,35%), Acinetobacter spp (9,41%) và Enterobacter spp (9,41%) Sự khác biệt này có thể xuất phát từ sự đa dạng về môi trường và đặc trưng riêng của từng bệnh viện.
Trong nghiên cứu của tác giả Nguyễn S Minh Tuyết, Klebsiella spp (18,02%), Acinetobacter spp (13,38%) và P.aeruginosa (4,38%) được xác định là ba tác nhân chính gây nhiễm khuẩn bệnh viện, chiếm tỷ lệ lần lượt là 30,5%, 7% và 19,1% trong mẫu đàm.
So v i các nghiên c u tr c đây t i b nh vi n i h c Y d c TP HCM [17, 18] thì t l kháng thu c c a c u khu n Gram d ng trong nghiên c u c a chúng tôi cao h n r t nhi u
Trong nghiên cứu này, Streptococcus spp được xác định là tác nhân gây nhiễm khuẩn hô hấp, chiếm 39,9% trong mẫu đàm Kết quả khảo sát cho thấy Streptococcus spp có tỷ lệ kháng thuốc cao, với hơn 80% kháng lại các kháng sinh như Erythromycin (93,87%), Clindamycin (92,58%), Levofloxacin (85,14%) và Ofloxacin (87,12%) Tỷ lệ kháng với Penicillin và Ampicillin lần lượt là 52,26% và 63,85% Đáng chú ý, chỉ có 3 chủng kháng Vancomycin trong tổng số 310 chủng vi khuẩn gây bệnh, tương đương với tỷ lệ kháng 0,97%.
Staphylococcus spp là một trong những vi khuẩn gây bệnh hô hấp phổ biến, với tỷ lệ kháng thuốc cao đối với nhiều loại kháng sinh như Penicillin (93,22%), Levofloxacin (84,21%), Erythromycin (84,75%), Oxacillin (81,36%), Ciprofloxacin (81,36%), Clindamycin (79,66%), Cefotaxime (56,9%), và Amoxicilin/clavulanic acid (55,93%) Đặc biệt, chưa phát hiện Staphylococcus nào kháng với Vancomycin.
Kháng sinh Vancomycin được sử dụng trong điều trị nhiễm khuẩn do vi khuẩn Gram dương, đặc biệt trong trường hợp kháng thuốc với các kháng sinh khác Việc sử dụng Vancomycin cần được thực hiện cẩn thận để tránh tình trạng kháng thuốc, do đây là loại thuốc rất hiệu quả trong việc điều trị nhiễm khuẩn huyết.
Vi khuẩn Klebsiella là tác nhân gây nhiễm khuẩn hô hấp phổ biến, đứng hàng thứ hai trong số các vi khuẩn gây bệnh Nghiên cứu của chúng tôi cho thấy tình hình kháng kháng sinh của Klebsiella là khá thấp, với tỷ lệ kháng thuốc đối với Ceftriaxone, Ceftazidime, Levofloxacin và Ciprofloxacin lần lượt là 38,57%, 33,57%, 38,69% và 36,96% Trong khi đó, tỷ lệ kháng kháng sinh đối với các loại thuốc khác như Colistin, Cefoperazone/sulbactam, Amikacin và Netilmycin đều dưới 20%, cụ thể là 2,19%, 10,07%, 8,57% và 9,35%.
Acinetobacter là vi khuẩn gây bệnh kháng thuốc nghiêm trọng, với tỷ lệ kháng kháng sinh cao (50-60%) cho các loại thuốc như Piperacillin/tazobactam, Ticarcillin/clavulanic acid, Ceftazidime, Meropenem, Amikacin, Netilmycin, Levofloxacin và Ciprofloxacin Ceftriaxone có tỷ lệ kháng cao nhất (64,42%), trong khi Colistin (36,54%) và Cefoperazone/sulbactam (27,18%) có tỷ lệ kháng thấp hơn Việc điều trị các nhiễm trùng do Acinetobacter đang gặp nhiều khó khăn do sự gia tăng tính kháng thuốc.
Nghiên cứu của H ng Lan (2010) và Tr n Th Th y Trinh (2013) cho thấy mức độ kháng kháng sinh của Acinetobacter đối với các loại kháng sinh như Amikacin, Ciprofloxacin, Ceftriaxone, Ceftazidime, Piperacillin/tazobactam, Ticarcillin/clavulanic acid, Meropenem, và Levofloxacin là khá cao Đặc biệt, hai kháng sinh Colistin và Cefoperazone/sulbactam có mức độ kháng cao nhất trong nghiên cứu của chúng tôi.
Lan, Colistin v n còn nh y c m hoàn toàn thì trong nghiên c u c a chúng tôi đư b kháng đ n 36,54% i v i Cefoperazone/sulbactam, trong nghiên c u c a tác gi
Tr n Th Th y Trinh b đ kháng 12,8% thì trong nghiên c u c a chúng tôi là 27,18%_cao h n 14,38%.
Tỷ lệ kháng kháng sinh của Enterobacter và P aeruginosa trong nghiên cứu này cho thấy sự gia tăng đáng kể Đối với Enterobacter spp., tỷ lệ kháng cao nhất được ghi nhận đối với nhóm kháng sinh Cephalosporin, cụ thể là Ceftriaxone và Ceftazidime, với tỷ lệ kháng lần lượt là 70,27% và 48,65% Trong khi đó, P aeruginosa cũng cho thấy tỷ lệ kháng cao nhất với Ceftriaxone, đạt 50%.
4 K t qu kh o sát vi khu n sinh ESBL:
Trong nghiên cứu này, chúng tôi đã phân lập được 207 chủng Enterobacteriaceae, trong đó có 85 chủng tiềm tàng ESBL, chiếm 41,06% Tỷ lệ này cao hơn so với nghiên cứu trước đây tại bệnh viện chúng tôi năm 2008 (32,4%) và có xu hướng tăng dần theo thời gian Tỷ lệ tăng cao này được giải thích bởi việc sử dụng kháng sinh thuộc nhóm Cephalosporin và Fluoroquinolones không được kiểm soát chặt chẽ, cùng với sự quan tâm nhiều hơn đến việc phát hiện ESBL.
Trong nghiên cứu này, các vi khuẩn sản sinh enzyme ESBL được xác định bao gồm Klebsiella, Enterobacter và E coli Trong đó, Klebsiella chiếm tỉ lệ cao nhất với 62,35% Tỉ lệ Klebsiella sinh ESBL đạt 37,85% (53/140 chủng), Enterobacter sinh ESBL là 55,56% (20/36 chủng) và E coli sinh ESBL là 38,71% (12/31 chủng).
Nghiên cứu gần đây cho thấy tỉ lệ kháng kháng sinh của các vi khuẩn sinh ESBL cao hơn so với các chủng vi khuẩn không sinh ESBL Đặc biệt, mức độ kháng kháng sinh của các chủng vi khuẩn này đối với nhóm Cephalosporin và Fluoroquinolones cao hơn nhiều so với các nhóm kháng sinh khác Theo Tổ chức Y tế Thế giới, khi phân lập được vi khuẩn ESBL, dù kết quả là nhạy cảm hay trung gian, cũng không nên sử dụng kháng sinh thuộc nhóm Cephalosporin.
Qua kh o sát 777 ch ng vi khu n gây nhi m khu n đ ng hô h p th ng g p trong m u đàm trong n m 2013 t i phòng xét nghi m vi sinh c a b nh vi n i h c
Y d c TP H Chí Minh, chúng tôi rút ra m t s k t lu n sau:
1 T ng s vi khu n phân l p đ c t 702 m u b nh ph m đàm là 777 ch ng vi khu n, trong đó có 78 m u b nh ph m phân l p đ c 2 lo i vi khu n
2 T l vi khu n gây nhi m khu n đ ng hô h p có trong m u đàm phân l p b nh nhân nam cao h n b nh nhân n (54,13%)
3 T l nhi m khu n hô h p do vi khu n nhóm b nh nhân trên 60 tu i là cao nh t (65,53%) Càng l n tu i, t l nhi m khu n hô h p do vi khu n càng cao
4 Các vi khu n gây nhi m khu n đ ng hô h p đ c phân l p t m u đàm th ng g p t i b nh vi n i h c Y d c TP H Chí Minh: Streptococcus spp (39,9%), Klebsiella spp (18,02%), Acinetobacter spp (13,38%), Staphylococcus spp (7,59%), Enterobacter spp (4,63%), P aeruginosa (4,38%)
5 Tính đ kháng kháng sinh c a các vi khu n phân l p đ c:
i v i c u khu n Gram d ng, th ng g p có Streptococcus spp và Staphylococcus spp thì t l đ kháng kháng sinh nhìn chung khá cao
Streptococcus spp cho thấy khả năng kháng thuốc cao đối với nhiều loại kháng sinh, đặc biệt là Erythromycin, Clindamycin, Levofloxacin và Ofloxacin với tỷ lệ kháng trên 80% Ngoài ra, Penicillin và Ampicillin cũng bị kháng với tỷ lệ trên 50% Đối với Cefotaxime và Vancomycin, Streptococcus spp vẫn có sự kháng, trong đó đã ghi nhận 3 chủng kháng Vancomycin.
Staphylococcus spp đ kháng cao v i các kháng sinh Erythromycin, Clindamycin, Levofloxacin, Ciprofloxacin, Penicillin, Oxacillin, Amoxicillin/clavulanic acid, Cefotaxime Chúng còn nh y c m v i
Vancomycin và ch a phát hi n ch ng nào kháng l i kháng sinh này
Nghiên cứu cho thấy rằng Acinetobacter spp có tỷ lệ kháng kháng sinh cao, trong khi Klebsiella spp., Enterobacter spp và P aeruginosa có tỷ lệ kháng kháng sinh tương đối thấp hơn so với các nghiên cứu trước đây Đặc biệt, Enterobacter spp và P aeruginosa có tỷ lệ kháng kháng sinh cao nhất đối với Ceftriaxone.
K t qu kh o sát vi khu n sinh ESBL
Nghiên cứu này đã phân lập được 207 chủng Enterobacteriaceae, trong đó có 85 chủng tiềm tàng ESBL, chiếm 41,06% Tỷ lệ này cao hơn so với nghiên cứu trước đây tại bệnh viện chúng tôi năm 2008 (32,4%) và có xu hướng tăng dần theo thời gian Nguyên nhân của tỷ lệ cao này được giải thích bởi việc sử dụng kháng sinh thuộc nhóm Cephalosporin và Fluoroquinolones không được kiểm soát chặt chẽ, cùng với sự quan tâm ngày càng nhiều đến việc phát hiện ESBL.
Nghiên cứu này chỉ ra rằng các vi khuẩn sản sinh enzyme ESBL chủ yếu là Klebsiella, Enterobacter và E coli Trong đó, tỷ lệ Klebsiella là cao nhất với 62,35%, với 37,85% trong tổng số 140 chủng vi khuẩn Tỷ lệ Enterobacter sinh ESBL là 55,56% (20/36 chủng), trong khi E coli có tỷ lệ sinh ESBL là 38,71% (12/31 chủng).
Các nghiên cứu gần đây cho thấy tỷ lệ kháng kháng sinh của các vi khuẩn sinh ESBL cao hơn so với các chủng vi khuẩn không sinh ESBL Đặc biệt, mức độ kháng kháng sinh của các chủng vi khuẩn này đối với nhóm Cephalosporin và Fluoroquinolones cao hơn nhiều so với các nhóm kháng sinh khác Theo Tổ chức Y tế Thế giới, khi phân lập được vi khuẩn ESBL, dù kết quả là nhạy cảm hay trung gian, cũng không nên sử dụng kháng sinh thuộc nhóm Cephalosporin.
Qua kh o sát 777 ch ng vi khu n gây nhi m khu n đ ng hô h p th ng g p trong m u đàm trong n m 2013 t i phòng xét nghi m vi sinh c a b nh vi n i h c
Y d c TP H Chí Minh, chúng tôi rút ra m t s k t lu n sau:
1 T ng s vi khu n phân l p đ c t 702 m u b nh ph m đàm là 777 ch ng vi khu n, trong đó có 78 m u b nh ph m phân l p đ c 2 lo i vi khu n
2 T l vi khu n gây nhi m khu n đ ng hô h p có trong m u đàm phân l p b nh nhân nam cao h n b nh nhân n (54,13%)
3 T l nhi m khu n hô h p do vi khu n nhóm b nh nhân trên 60 tu i là cao nh t (65,53%) Càng l n tu i, t l nhi m khu n hô h p do vi khu n càng cao
4 Các vi khu n gây nhi m khu n đ ng hô h p đ c phân l p t m u đàm th ng g p t i b nh vi n i h c Y d c TP H Chí Minh: Streptococcus spp (39,9%), Klebsiella spp (18,02%), Acinetobacter spp (13,38%), Staphylococcus spp (7,59%), Enterobacter spp (4,63%), P aeruginosa (4,38%)
5 Tính đ kháng kháng sinh c a các vi khu n phân l p đ c:
i v i c u khu n Gram d ng, th ng g p có Streptococcus spp và Staphylococcus spp thì t l đ kháng kháng sinh nhìn chung khá cao
Streptococcus spp cho thấy khả năng kháng thuốc cao đối với nhiều loại kháng sinh, bao gồm Erythromycin, Clindamycin, Levofloxacin và Ofloxacin với tỷ lệ kháng trên 80% Ngoài ra, Penicillin và Ampicillin cũng có tỷ lệ kháng trên 50% Đáng chú ý, Cefotaxime và Vancomycin vẫn có hiệu quả, tuy nhiên đã ghi nhận 3 chủng kháng Vancomycin.
Staphylococcus spp đ kháng cao v i các kháng sinh Erythromycin, Clindamycin, Levofloxacin, Ciprofloxacin, Penicillin, Oxacillin, Amoxicillin/clavulanic acid, Cefotaxime Chúng còn nh y c m v i
Vancomycin và ch a phát hi n ch ng nào kháng l i kháng sinh này
Trong nghiên cứu về kháng kháng sinh, Acinetobacter spp thể hiện tỷ lệ kháng thuốc cao, trong khi Klebsiella spp và Enterobacter spp cùng P aeruginosa có tỷ lệ kháng thuốc tương đối thấp hơn so với các nghiên cứu trước đây Đặc biệt, Enterobacter spp và P aeruginosa ghi nhận tỷ lệ kháng cao nhất đối với Ceftriaxone.
Tỷ lệ vi khuẩn Enterobacteriaceae sản sinh enzyme beta-lactamase mở rộng (ESBL) đạt 41,06%, với sự gia tăng theo thời gian Trong đó, Klebsiella spp có tỷ lệ cao nhất với 37,85%, tiếp theo là Enterobacter với 55,56% và E coli với 38,71% Nhìn chung, các chủng sinh ESBL có tỷ lệ kháng kháng sinh cao hơn so với các chủng không sinh ESBL, đặc biệt là mức độ kháng cao đối với nhóm Cephalosporin và Fluoroquinolones.
NGH
Tình hình kháng kháng sinh của các vi khuẩn rất đa dạng và phức tạp, luôn thay đổi theo thời gian Do đó, việc nghiên cứu liên tục về tình trạng kháng kháng sinh của vi khuẩn gây bệnh là vô cùng cần thiết.
Tăng cường hợp tác chặt chẽ giữa lâm sàng và xét nghiệm vi sinh là cần thiết để hỗ trợ hiệu quả trong việc điều trị hợp lý các trường hợp nhiễm khuẩn hô hấp Cần phải có sự cải thiện trong phác đồ điều trị kháng sinh tại các bệnh viện, xem xét chúng như một chiến lược quan trọng để giảm thiểu tình trạng kháng kháng sinh hiện nay.
Việc theo dõi tỉ lệ kháng kháng sinh của các vi khuẩn, đặc biệt là vi khuẩn tiểu ESBL, là rất quan trọng trong việc điều trị hiệu quả và hạn chế sự lây lan của vi khuẩn đa kháng.
Công tác kiểm soát nhiễm khuẩn tại bệnh viện đóng vai trò quan trọng trong việc giám sát vệ sinh thiết bị, dụng cụ, khoa và phòng Điều này nhằm ngăn chặn các bệnh do vi khuẩn gây ra, bảo vệ sức khỏe bệnh nhân và nâng cao chất lượng dịch vụ y tế.
C n xem xét ph tác d ng và tình hình kháng thu c đ l a ch n kháng sinh có hi u qu u tiên l a ch n kháng sinh ph h p
1 Tr n Th Ng c Anh (2008), S đ kháng kháng sinh c a vi khu n gây b nh th ng g p t i b nh vi n nhi đ ng 2 n m 2007, T p chí Y h c TP H Chí Minh, t p 12, ph b n s 4 – 2008: 183 – 191
2 Nguy n Thanh B o (2012), Th c hành Vi sinh và mi n d ch, i h c Y d c TP.HCM
3 Nguy n Thanh B o và c ng s (2003), Vi khu n h c, i h c Y d c TP H Chí Minh – B môn vi sinh
4 B môn xét nghi m, Vi sinh h c y khoa, Tr ng i h c Y d c Thành ph
5 B Y t (2000), Tài li u t p hu n Vi sinh lâm sàng, Hà N i
6 Lê Huy Chính và c ng s (2007), Vi sinh v t y h c, nhà xu t b n Y h c
7 Hoàng Th Ph ng Dung (2010), “Kh o sát tr c khu n gram âm sinh men beta- lactamase ph r ng phân l p t i b nh vi n i h c Y d c TP H Chí Minh”, T p chí Y h c TP H Chí Minh, t p 14, ph b n s 2, 2010.
8 Tr nh Xuân àn (2008), Bài gi ng Gi i ph u h c, NXB Y h c
9 Phan Th Thu H ng (2008), “Kh o sát vi khu n ti t men beta-lactamase ph r ng t i b nh vi n Bình Dân”, T p chí Y h c TP.H Chí Minh, t p 16, ph b n s 1, 2012
10 Nguy n V n Kính (2010), Phân tích th c tr ng: s d ng kháng sinh và kháng kháng sinh Vi t Nam, Nhóm nghiên c u c a GARP – Vi t Nam, tr 34
11.Nguy n Phú H ng Lan (2010), “Kh o sát m c đ đ kháng kháng sinh c a Acinetobacter và Pseudomonas phân l p t i b nh vi n nhi t đ i n m 2010”,
12.D ng Nh t Linh (2008), Giáo trình th c t p Vi sinh gây b nh, Tr ng i h c M Thành ph H Chí Minh
13.D ng Nh t Linh, Nguy n V n Minh (2008), Giáo trình Th c t p vi sinh gây b nh, Tr ng i h c M TP HCM
14.Nguy n V n Minh, D ng Nh t Linh (2008), Giáo trình th c t p Vi sinh c s , Tr ng i h c M Thành ph H Chí Minh
15.Nguy n V n Minh (2013), K thu t phân tích vi sinh v t, Tr ng i h c M TP.HCM
16.Nguy n Tu n Minh (2008), Nghiên c u vi khu n sinh beta-lactamase ho t ph r ng gây nhi m khu n hô h p b nh nhân th máy, Lu n v n Th c s Y h c, h c vi n Quân Y, Hà N i
17.Cao Minh Nga, Nguy n Ng c Lân, Nguy n Thanh B o (2012), “S đ kháng kháng sinh c a các vi khu n gây b nh th ng g p t i b nh vi n i h c Y d c TP HCM”, T p chí Y h c TP H Chí Minh, t p 16, ph b n s 1-2012: 215-220
18 D ng H ng Phúc, Hoàng Ti n M (2010), “S đ kháng kháng sinh c a các vi khu n đ c phân l p t i b nh vi n i h c Y d c TP HCM”, T p chí Y h c TP H Chí Minh, t p 14-ph b n s 1-2010:480-486
19 Ngô Th H ng Ph ng (2013), “Tình hình kháng kháng sinh c a Acinetobacter baumannii phát hi n đ c t i vi n Pasteur TP H Chí Minh”,
20.Nguy n Quang Quy n (2011), Bài g ng Gi i ph u h c, NXB Y h c
21.Ph m Hùng Vân (2000), C m nang các k thu t xét nghi m vi sinh lâm sàng, tr ng i h c Y d c TP HCM
22.Ph m Hùng Vân, Ph m Thái Bình (2005), Nghiên c u đ kháng kháng sinh c a các tác nhân vi khu n gây nhi m khu n hô h p c p, Y h c th c hành, ISSN 0866-7241 (2005), s 513, trang 117-125
23.Ph m Hùng Vân (2006), K thu t xét nghi m vi sinh lâm sàng, NXB Y h c
24.Ph m Hùng Vân (2010), “Tác nhân vi khu n gây nhi m khu n hô h p c p –
Thách th c trong đ kháng các kháng sinh và gi i pháp ch n l a kháng sinh đi u tr kinh nghi m”, H i ngh Tai – M i – H ng Khánh Hòa M r ng n m
2010, B nh vi n a Khoa Khánh Hòa, tr 171 -174
25.Tr n Th Th y Trinh (2013), Tình hình đ kháng kháng sih c a các vi khu n gây b nh phân l p đ c t i b nh vi n An Bình t 1/10/2012 đ n 31/5/2013,
Lu n v n Th c s Y h c, H Y d c TP H Chí Minh
26.Nguy n S Minh Tuy t, V Th Châu H i, Tr ng Anh D ng, Lê Th Tuy t Nga (2009), “Kh o sát vi khu n gây nhi m khu n b nh vi n t i b nh vi n nhân
