bai 1 thiết kế phòng thí nghiệm nuôi cấy mô

thiết kế phòng thí nghiệm nuôi cấy mô lan hồ điệp

M c l c ục lục ục lục

Chương 1:Tổng Quan Giới Thiệu Về Lan Hồ Diệp 2

1.1.Giới thiệu về lan hồ diệp 2

1.2.Giá Trị Kinh Tế Và Tiềm Năng Phát Triển Lan Hồ Điệp 3

Chương 2:Thiết Kế Mô Hình Phòng Thí Nghiệm Nuôi Cấy Mô Và Nhà Lưới Nuôi Cấy Lan Hồ Điệp 5

2.1.Phòng rửa dụng cụ,chứa Dụng Cụ Và Cất Nước 6

2.2 Phòng Chuẩn Bị Môi Trường Khử Trùng Mẫu 12

2.3 Phòng Hấp,môi trường, 21

2.4.Phòng kiểm tra môi trường trước khi cấy 23

2.5 Phòng Cấy Vô Trùng 23

2.6 Phòng Sáng 27

Chương 3 :Thiết Kế Nhà Kinh Nuôi Cấy Lan Hồ Diệp 29

3.1 Nhà Kính nuôi cấy Nuôi Lan hồ diệp 29

3.2.Bảng đầu tư với giá cả thiết kế nhà kính 44

Thảo luận kết quả tính toán chi phí 45

Chương 1:Tổng Quan Giới Thiệu Về Lan Hồ Diệp

1.1.Giới thiệu về lan hồ diệp.

Lan Hồ Điệp có tên khoa học là Phalaenopsis sp, là loại lan có hoa lớn, đẹp, bền.

Lan Hồ Điệp có màu sắc phong phú, không thua kém giống lan nào khác từ trắng, hồng,

đỏ, vàng, tím đến các loại lan Hồ Điệp có sọc nằm ngang hoặc thẳng đứng hoặc có đốm

to hay nhỏ Giống Phalaenopsis có khoảng 70 loài trong đó có 44 chủng loại, mọc từ dãy

Hymalaya đến châu Á có hơn 20 loài lan ưa nóngcó ở các nước Đông Nam Á như bánđảo Mã Lai, Indonesia, Philippine, đông Ấn Độ, (Nguyễn Công Nghiệp, 2004)

Lan Hồ Điệp được khám phá vào năm 750, đầu tiên được ông Rumphius xác định

dưới tên là Angraecum album Đến năm 1753, Linne đổi lại là Epidenndrum amabilis vào năm 1825, Blume một nhà thực vật Hà Lan định danh một lần nữa là Phalaenopsis

amabilis Bl và tên đó được dùng cho đến ngày nay.

Lan Hồ Điệp sống ở độ cao 200- 400 m (William và kramer, 1983) nên vừa chịukhí hậu nóng ẩm vừa chịu khí hậu mát, nhiệt độ trung bình từ 200 – 300 C, trong đó khíhậu lý tưởng cho việc nuôi trồng loại lan này là 220 C – 270 C

Việt Nam có khoảng 5- 6 giống nguyên chủng, gồm Phalaenopsisi gibbosa Sweet,

phalaenopsis manniiRchob.f, Phalaenopsis braceana(Hook.f) christenson, phalaenopsis fuscataRchob.f, Phalaenopsis lobbii (Rchob.f.) Hầu hết có hoa nhỏ nhưng màu sắc sặc

sỡ, hương thơm độc đáo

Hính ảnh : Một số loại lan hồ điệp phổ biến

1.2.Giá Trị Kinh Tế Và Tiềm Năng Phát Triển Lan Hồ Điệp

1.2.1.Trên Thế Giới

Hoa lan không chỉ mang vẻ đẹp đài các, sang trọng mà còn ấm áp, gần gũi và chấtchứa những giá trị tiềm ẩn, mới lạ,hấp dẫn Đặc biệt, lan Hồ Điệp được ưa thích về màusắc, kiểu dáng trang nhãnhưng cũng không kém phần kiêu sa và được mệnh danh là “ nữhoàng “ của các loài hoa lan Chính vì vậy, việc trồng lan Hồ Điệp không chỉ dừng lại ởqui mô gia đình mà đã nhanh chóng được mở rộng và trở thành lãnh vực quan trọng trongnông nghiệp mang lại hiệu quả kinh tế cao cho nhiều nước trên thế giới như ĐàiLoan,

Trong những năm gần đây, lan Hồ Điệp trở thành lan trồng chậu phổ biến và được

ưa chuộng nhất Tổng sản lượng chiếm trên 75% trong các loại lan được trồng trên thếgiới (theo Griesbach, 2002) Tại Hà Lan, Hồ Điệp cũng là loại lan được trồng trong chậuphổ biến và có giá trị cao nhất trong ngành trồng hoa Tại Mỹ, Hồ Điệp là hoa trồng chậutrang trí và quà tặng cao cấp

Lan Hồ Điệp được trồng mọi nơi trên thế giới, hầu hết là ở Đức, Nhật Bản,ĐàiLoan, Thái Lan, Hoa Kỳ vv Lợi nhuận đem về từ việc xuất khẩu cây con hay cây có hoađều lớn

1.2.2 Ở Việt Nam

Việt Nam có khí hậu thích hợp và có nhiều nguyên liệu làm giá thể tốt cho lan HồĐiệp sinh trưởng và phát triển, nhiều tiềm năng trở thành một nước sản xuất hoa lan HồĐiệp lớn trong khu vực Theo số liệu thốngkê tính đến năm 2004, diện tích trồng hoa của

cả nước xấp xỉ 9.000 ha (NguyễnXuân Linh và Nguyễn Thị Kim Lý, 2005).Nếu được đầu

tư khai thác hợp lý mang lại lợi nhuận lớn cho người trồng hoa nói riêng và sự phát triểnnông nghiệp nói chung

Năm 2009, quy mô diện tích sản xuất hoa lan Hồ Điệp ở miền Bắc đạt khoảng4.400 m2, cung cấp cho thị trường khoảng 131.000 cây, đáp ứng được 21% nhu cầu củathị trường Hiệu quả kinh tế đem lại từ sản xuất lan Hồ Điệp là rất cao Qua tính toán chothấy, lãi thu được từ sản xuất lan Hồ Điệp đạt trung bình từ 280 – 540 triệu đồng/1000m2như mô hình tại Viện Nghiên cứu rau quả Đặc biệt một số mô hình cho lãi từ 700 triệu –

1 tỷ đồng/1000m2 như công ty Cửu Long, Trung tâm ứng dụng công nghệ cao QuảngNinh…

Lan Hồ điệp, là một loài lan có độ bền bông cao trong điều kiện thích hợp, cũng

là một loài cây rất thích hợp để trồng trong nhà, dễ ra hoa Hơn nữa, trong vài thập kỉ gầnđây nền công nghệ trồng lan phát tiển giúp người trồng đã giảm giá thành đáng kể đối vớiloại lan này nên giá cả phù hợp với những người mê hoa hay người mới tập trồng, HồĐiệp rất được ưa chuộng và được trồng ở nhiều nơi

Chương 2:Thiết Kế Mô Hình Phòng Thí Nghiệm Nuôi Cấy Mô Và Nhà Lưới Nuôi

Cấy Lan Hồ Điệp

Sơ Đồ Và Thiết Bị Một Phòng Thí Nghiệm Nuôi Cấy Mô

Sơ đồ :

2.1.Phòng rửa dụng cụ,chứa Dụng Cụ Và Cất Nước

Phòng rửa dụng cụ phải có bồn rửa lớn , có đường thoát nước riêng cho axit, có kệ để cácthiết bị,có các ngăn tủ chứa các dụng cụ, nước, điện và có thể không khí nén*, ống chânkhông

 Xà phòng, axit HCl hoặc sulfuric.

 Bồn rửa dụng cụ

 Máy cất nước 1 lần (8l/lần)

 Máy cất nước 2 lần

 Tủ sấy 60 – 600oC(loại có dung tích lớn)

 Giấy bạc hoặc hộp nhựa đựng dụng cụ để tránh bị tạp nhiễm sau khi hấp tiệt trùng

 Đồng hồ định giờ

Thiết bị phòng:Bồn rửa dụng cụ chống hóa chất ăn mòn

Sink bench giá : 15.000.000 VNĐ

Được hợp thành từ 1 modul bàn thí nghiệm 1200x600(750)x800mm

Bàn thí nghiệm được thiết kế dựa theo tiêu chuẩn phòng thí nghiệm ISO 17025, BS-3202-1991,…

Mặt bàn:

Mặt bàn làm bằng vật liệu Wilsonart Phenolic-HPL(High Pressure Laminates) chịu ăn mòn , chịu hoá chất , chịu va đập, chịu nước, chịu nhiệt độ độ giãn nở sức căng, không cho vi khuẩn phát triển…

Khung bàn

Khung INOX SUS304, 30 x 60 x1.2 mm sơn tĩnh điện màu xám, kiểu Frame chịu được tải trọng 100kg/chân.

C-Bồn rửa

Một chậu rửa bằng vật liệu tổng hợp high-grade PP chịu hóa chất 510x410x300 mm, màu xám.

Bộ xả đáy

Bộ xả đáy và lọc rác: Bằng vật liệu tổng hợp chịu hóa chất.

Bộ xả được thiết kế chống tắc nghẽn đường ống thoát

Giá phơi dụng cụ thủy tinh, bằng Inox 304 20 Gía treo dụng cụ bằng nhựa

PP, có thể tháo rời, dễ dàng di chuyển vị trí các giá.

Máy lọc nước tinh khiết và khử ion dùng cho máy sinh hóa- Model RSH-2

Thương hiệu : Ricon

Điện dẫn đầu ra: theo yêu cầu khách hàng (từ 0 đến 10uSm)

Vi sinh: loại bỏ vi khuẩn tuyệt đối

Công suất lọc: 15L/H; 30L/h tùy theo nhu cầu khách hàng

Hiển thị lưu lượng

Hiển thị trạng thái hoạt động

Giấy bạc :hoặc hộp nhựa đựng dụng cụ để tránh bị tạp nhiễm sau khi hấp tiệt

trùng.

Giấy bạc để bọc: giá 29.000VNĐ

Đồng hồ định giờ: Công tắc đồng hồ Panasonic - TB118

Giá : 749.000 VNĐ

Tủ sấy Tủ Sấy Tiệt Trùng France Etuves

Giá :20.000.000 VND (Chưa bao gồm thuế VAT 10%)

Thể tích : 58 lít

Nhiệt độ sấy lên đến 3000C, độ chính xác cao, sử dung hiệu quả

Ứng dụng cho nhiều lĩnh vực khác nhau như : Sấy khô, lão hóa vật liệu…

Đối lưu bằng quạt, đảm bảo độ đồng nhất cao

Nhiệt độ làm việc tối đa : 3000C

Tốc độ gia nhiệt nhanh : 80C/ pht

Độ đồng nhất : +/- 1,20C tại 1050C

Độ chính xác : < +/-0.20C

Điều khiển bằng kỷ thuật số PID, hệ C3000

Thời gian làm việc được cài đặt tự động từ : 0 – 99h59min

Thời gian cài đặt độ trễ : 1 – 99h59min

Vật liệu chế tạo : Bên trong bằng thép không rỉ, bên ngoài bằng thép sơn tĩnh điện

Tốc độ đối lưu khí : 200M3/giờ

Cung cấp kèm theo hai khay bằng thép không rỉ

 Lò vi sóng* hay bếp đun để đun nóng môi trường khi trộn với aga

 Các dụng cụ thuỷ tinh trong suốt

 Bông không thấm nước

 Các dung dịch mẹ (stock, solutions)

 Màng lọc Millipore và giá đựng chịu nhiệt hoặc các phễu lọc thuỷ tinh xốp

 Các hoá chất diệt khuẩn để xử lý mô thực vật: nước bromine, H2O2, HgCl2,Acolhol (ethanol) cồn 70%, chất tẩy hay sodium hypochloride NaClO, Ca –hypochloride dạng bột, Clorua thuỷ ngân HgCl2, Tween 20.

Thiết bị phòng:Bồn rửa dụng cụ chống hóa chất ăn mòn

Sink bench giá : 15.000.000 VNĐ

Cân kỹ thuật

Giá thị trường: 7.420.000 VNĐ

- Dùng để cân các loại hóa chất pha môi trường nuôi cấy với lượng cân

nhỏ nhất 0.01g/l lần cân

- Ta chọn cân nhãn hiệu :357-35 do hãng KERN-ĐỨC

- Khả năng cân tối đa: 1210 g

- Độ đọc :0.01g

- Độ lặp lại :0.01g

- Độ tuyến tính: ±0.03g

- Khối lượng mẫu nhỏ nhất : 0.03g

- Giao diên GS 232 thiết bị ngoại vi

- Chức năng cân đếm với tham chiếu 1,5,10,và 20 mẫu

- Cân chuẩn ngoại

- Hiển thị kết quả bằng màn hình tinh thể lỏng

- Bàn can bàng thép không gỉ kích thước : 150mm

- Ta chọn cân nhãn hiệu : Ohaus - PA214 do hãng MỸ sản xuất

- Khả năng cân tối đa :210 g

Giá :22,

134,000VND

- Độ chính xác: 10-4g (d=e=0.1mg) (d độ lặp lại, e độ chính xác)

- Đơn vị cân: gram, kg, milli-gram, ounce, ounce troy, carat, penni, Lạng

Hong Kong, Lạng Singapore, Lạng Đài loan

- Nguồn điện: 220-240VAC, 50/60Hz

- Khoảng nhiệt độ môi trường hoạt động: 10-300C

- Màn hình hiển thị: LCD (segment)

- Thời gian ổn định cân: 3 giây

- Chuẩn cân: chuẩn trong tự động hoàn toàn

- Kích thước đĩa cân: Æ9cm

- Kích thước tổng thể: 19.6x28.7x32cm

- Trọng lượng: 4.5kg

Máy đo pH cầm tay hoặc để bàn

Máy đo pH

- Môi trường nuôi cấy mô đòi hỏi có độ pH chính xác nhất định

- Dựa vào mục đích sử dụng trên ta chọn thiết bị hiệu:pH meterdo hãng

- Vậy số lượng thiết bị cần: 01 cái

Giá bán :900.000 vnd Máy khuấy từ gia nhiệt

- Được dùng để khuấy khi pha chế môi trường nuôi cấy

- Lượng môi trường cần pha trong một ngày :

- Ta có thể chọn máy khuấy từ gia nhiệt có thể tích lớn CB 302

Chức năng diệt khuẩn và khử mùi Nano Fresh Ag+

Không chứa CFC

Thiết kế cửa mới

Khay trong suốt dễ chùi rửa, chiều cao điều chỉnh được

Luồng lạnh đa chiều

Máy vận hành êm, làm đá nhanh

Tiết kiệm điện năng

- Độ bền: trong suốt (điều kiện khử trùng 121oC, áp suất 1 atm trong thời gian

20 phút).

- Lãnh vực ứng dụng: công tác giữ giống, giai đoạn vô mẫu, nhân nhanh cụm chồi, vươn thân, nuôi cấy hạt…trong nuôi cấy mô thực vật.

Thu mua các bệnh viện : 2.000 đồng/chai

chai có thể chứa được :8 mẫu/chai

2.3 Phòng Hấp,môi trường,

Sơ đồ

Model: J-NAS103

Hãng SX: JISICO – Hàn Quốc

- Thước buồng làm việc: Ø 450 x 650mm

- Phương pháp tiệt trùng bằng áp suất cao

- Tiệt trùng tại 121oC, độ chính xác nhiệt độ +/-1oC, áp suất làm việc 1.15kgf/

cm2

- Áp suất tối đa: 2kgf/cm2

- Chức năng cài đặt thời gian tiệt trùng

Phòng cấy vô trùng nên là một phòng kín, có diện tích 16m2, có hai lớp cửa đểtránh không khí chuyển động từ bên ngoài trực tiếp đưa bụi vào, kín, nền và tường đượclát gạch men và khử trùng thường xuyên Cửa phòng cấy nên là cửa kính vì trong khithao tác cấy rất dễ bị phụt đèn cồn do đó cần phải dễ liên lạc với bên ngoài trong lúc cầnthiết Trên tường gắn đèn UV để khử trùng phòng.

- Tủ cấy vô trùng thổi khí vô trùng Trong tủ cấy có đèn trắng để dễ làm việc và có đèn

UV để khử trùng trước khi làm việc

 Quạt thông gió

 Máy lạnh 2 máy

 Đèn tử ngoại treo tường 1,2m hoặc treo trần

 Thiết bị lọc khí

 Giá và kệ để môi trường đặt trên xe đẩy bằng inox

 Bộ dụng cụ kẹp cấy, dao mổ, que cấy vòng, kim mũi nhọn, giấy lọc, bình đựngnước cất, đèn cồn (hoặc đèn gas), cốc đựng cồn 900

 Hoá chất xử lý buồng cấy trước khi cấy: fomadehyde (formalin)40%, NH3 25%

 Áo choàng, mũ vải, khẩu trang.

Tủ Cấy Vô Trùng :

 Tủ cấy dùng để cấy mô trong điều kiện vô trùng giúp nâng cao mẫu cáy trong điều kiện invitro

 Tủ cấy (lưu lượng không khí theo chiều dọc):

- Được sử dụng trong lĩnh vực nuôi cấy mô, sinh học phân tử, dược phẩm

- Máy chính bao gồm: Thân trên và chân tủ.

- Mức độ làm sạch: ≤ 0,5 μ m (US Federal 209E).

Giá Lắp Ráp : 25.000.000TR VND

Các dụng cụ cấy :

Khay cắt mẫu: giá 40.000 vnd

Một người cấy trung bình một ngày khoảng 350 mẫu Một tủ hai người cấy ,số lượng tủ cần là 4 và số lượng mẫu tạo ra trong 1 ngày là 8×350═2.800 mẫu.

Máy lạnh :Toshiba RAS-13N3KCV/SACV - Inverter tiết kiệm điện ta sử dụng một máy

 Các giàn đèn huỳnh quang nhiều ngăn, có độ chiếu sáng ở chỗ để bình nuôi cấy từ2000-3000 lux

 Máy điều hòa nhiệt độ

 Máy lắc nằm ngang 100-200 vòng/phút

Phòng nuôi sáng: tường nên sơn màu trắng Các giá đèn được lắp đèn ống để chiếu

sáng Trong phòng cần gắn các máy móc kiểm tra chính xác nhiệt độ, độ ẩm

Phòng sáng nuôi cấy: Cấy lan khoảng 2 tháng thì sản xuất ra thị trường vậy giàn đèn huỳnh quang phải phải có khả năng chứa hộp trong 2 tháng.

Thiết kế hệ thống giàn và đèn khoảng 55.000.000 tr vnđ Khả năng chứa của một giàn là:100 chai

Vậy một giàn ngăn chứa : 100 ×3 = 300 chai

Máy lạnh :Toshiba RAS-13N3KCV/SACV - Inverter tiết kiệm điện ta sử dụng ba máy

lạnh

Giá thị trường :13,050,000 vnđ

Chương 3 :Thiết Kế Nhà Kinh Nuôi Cấy Lan Hồ Diệp 3.1 Nhà Kính nuôi cấy Nuôi Lan hồ diệp

Mô hình nhà kính mái hở cố định 2 bên

Mô hình Nhà kính Mái vòm lệch hở cố định 2 bên cũng giống như cấu trúc mái hở

cố định một bên, chỉ khác ở chỗ loại này có cửa thông gió đôi Là một chọn lựa hoàn hảocho các nhà bà con nông dân và doanh nghiệp cần có một không gian trồng trọt năng suấtcao, tạo ra lợi nhuận với giá thành hạ

Mái có độ nhô lên theo dạng cung tròn, trên đỉnh mái có 2 cửa thông gió cố định,giúp giảm diện tích bị nung nóng và làm phân tầng không khí trong nhà kính, nhờ đó tăngđược hiệu quả làm mát vào mùa hè, kiểm soát tốt sự ngưng tụ của hơi nước

Đặc điểm thiết kế này có khả năng kết nối liên hoàn với các dạng nhà kính.NETkhác.tạo thành một hế thống liên hoàn với mọi qui mô, diện tích trồng trọt rộng lớn

kết nối trực tiếp giữa những thanh vòm, cột và máng xối bằng co nối phức hợpchữ Y và L tạo thành một kết cấu chắc chắn; có khả năng chịu tải tốt, việc lắp đặt đượcnhanh chóng và dễ dàng Trên máng xối có lồng ghép nẹp cài sóng ZIC ZẮC giúp choviệc gắn kết giữa màng phủ nilon với máng xối được nhanh chóng và hiệu quả hơn, quan trọng hơn không để nước mưa lọt vào nhà kính

Bằng thép mạ kẽm,chiều cao tới đỉnh 6,6m,mở mái 60cm,lợp bằng nilon 5 lớp củaIsrael…giá khoảng 175.000/m2(tùy diện tích)

đặc tính kỹ thuật:

+ Cột Omega 8412, thanh giằng C34x34 bằng thép cường độ cao

+ Chiều rộng mỗi gian: từ 8m đến 9m

+ Chiều cao máng xối: từ 3m6 đến hơn 4m

+ Chiều cao tính từ đỉnh nóc: 5m7 đến 6 m

+ Trụ cột đúc bê tông vững chắc, khoảng cách mỗi trụ là 3m

+ Mái phủ màng film polyethylene Ginegar có độ dày từ 150 µm ( micron mét) đến 200

µm tuổi thọ có thể kéo dài từ 5 năm đến 7 năm

+ Phần mái lệch lồi ra phía trên được che phủ một lớp lưới chống côn trùng

+ Phần hông xung quanh nhà kính được che phủ toàn bộ bằng màng polyethylene hoặc ½bằng lớp lưới cước chống côn trùng, ½ được che phủ bởi màng polyethylene

+ Cửa trượt 1 lớp khung thép

Chuẩn Bị Cấu Trúc Nhà Kính

Phương Pháp Lắp Đặt Đúng cho Màng Phim 5 Lớp:

- Khi lắp đặt loại màng phim thì bề mặt ngoài của màng phim (và cũng là bề mặtngoài của cuộn màng phim) sẽ được đặt tiếp xúc với khung mái (và sẽ hướngxuống đất) Khi mở nếp gấp ra thì bề mặt trong của màng phim sẽ hướng lên trời

- Để đạt được hiệu quả tốt nhất, cũng như sử dụng đúng cách loại màng phim, xinlưu ý thực hiện đúng theo hướng dẫn lắp đặt với 4 kiểu xếp màng phim dưới đây:

Đặc Tính cơ bản của Màng che phủ nhà kính Sun Selector

- Chất liệu che lợp màng kính phải cơ bản trong suốt đối với các tia ánh sáng Tỷ lệ

% ánh sáng được truyền qua màng phim lợp phủ nhà kính từ bên ngoài vào bên trongnhà kính có ý nghĩa quan trọng đối với quá trình quang hợp của các loại cây trồng Ánhsáng truyền tối đa trong phạm vi của dãy quang phổ từ 400nm- đến 700 nm, Đây là dãyquang phổ ánh sáng tối ưu cho quá trình quang hợp của cây trồng (PAR), ,tăng cườngkiểm soát sâu bệnh, côn trùng, tăng chất lượng cây trồng và cải thiện màu của hoa, lá

Lưu ý: Sự thiếu hoặc giảm ánh sáng xuyên qua vật liệu làm mái sẽ tác động xấu đến sản

lượng và chất lượng hoa màu Cần nên lưu ý rằng lớp màng phim trên máisẽ bị bám bụi

và đất và sẽ mất độ trong suốt theo thời gian Do đó cần phải rửa mái thường xuyên trong mùa vụ để sạch bụi bẩn và tăng cường ánh sáng xuyên qua