Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính gây độc tế bào ung thư từ hai loài sên biển aplysia dactylomela và dendrodoris fumata ở vùng biển miền trung việt nam

1 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HĨA HỌC VÀ HOẠT TÍNH GÂY ĐỘC TẾ BÀO UNG THƯ TỪ HAI LOÀI SÊN BIỂN Aplysia dactylomela VÀ Dendrodoris fumata Ở VÙNG BIỂN MIỀN TRUNG VIỆT NAM LUẬN ÁN TIẾN SĨ SINH HỌC Hà Nội-2022 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HĨA HỌC VÀ HOẠT TÍNH GÂY ĐỘC TẾ BÀO UNG THƯ TỪ HAI LOÀI SÊN BIỂN Aplysia dactylomela VÀ Dendrodoris fumata Ở VÙNG BIỂN MIỀN TRUNG VIỆT NAM Chuyên ngành: Hóa sinh học Mã số: 42 01 16 LUẬN ÁN TIẾN SĨ SINH HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: Hà Nội – 2022 i LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan luận án cơng trình nghiên cứu hướng dẫn TS Các số liệu, kết luận án hoàn toàn trung thực chưa công bố cơng trình khác Tác giả ii LỜI CẢM ƠN Luận án hồn thành Viện Hóa sinh biển, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam với hỗ trợ kinh phí thực đề tài VAST TĐ DLB 06/16-18 Trong trình thực luận án, tác giả nhận nhiều giúp đỡ vô quý báu từ thầy cô, nhà khoa học, đồng nghiệp, bạn bè gia đình Tơi xin bày tỏ lời cảm ơn sâu sắc tới TS người thầy hết lòng tận tâm hướng dẫn dạy suốt thời gian thực luận án Tôi xin chân thành cảm ơn tới Ban lãnh đạo cán đồng nghiệp phòng Dược liệu biển, Viện Hóa sinh biển, đặc biệt GS VS bảo, góp ý tạo điều kiện tốt q trình thực hiện, hồn thành luận án Tôi xin trân trọng cảm ơn Ban lãnh đạo Học viện Khoa học Công nghệ, Viện Hóa sinh biển Viện Cơng nghệ sinh học giúp đỡ, tạo điều kiện thuận lợi cho q trình học tập Tơi xin trân trọng cảm ơn Phịng Hoạt chất sinh học – Viện Hóa Sinh biển, Phịng Thử nghiệm hoạt tính sinh học – Viện Công nghệ sinh học giúp đỡ trình nghiên cứu thử hoạt tính hợp chất Tơi xin gửi lời biết ơn chân thành tới tồn thể gia đình, bạn bè người thân ln quan tâm, động viên khích lệ suốt trình thực Xin trân trọng cảm ơn! Tác giả iii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN ……………………………………………………… …… i LỜI CẢM ƠN………………………………………………………… ……… ii MỤC LỤC ……………………………………………………………… ……… iii DANH MỤC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT ……………………………… …… vii DANH MỤC BẢNG………………………………………………………… …… ix DANH MỤC HÌNH ……………………………………………………… …… xi MỞ ĐẦU …………………………………………………………………… …… CHƯƠNG TỔNG QUAN …………………………………………… ……… 11 Ung thư mối liên quan tế bào ung thư với trình apoptosis 111 Khái niệm chung ung thư………………………………………… … 112 Apoptosis tầm quan trọng apoptosis………………………… … 113 Mối liên quan tế bào ung thư trình apoptosis………… …… 12 Một số thử nghiệm đánh giá hoạt tính gây độc tế bào ……… … … 121 Thử nghiệm xác định hoạt tính gây độc tế bào kỹ thuật MTT 122 Thử nghiệm xác định khả gây apoptosis thông qua sử dụng thuốc 7 nhuộm Hoechst 33342……………………………………………… …… 123 Thử nghiệm xác định khả cảm ứng enzyme caspase-3………… … 124 Thử nghiệm đánh giá mức độ apoptosis tế bào kỹ thuật phân tích dịng chảy tế bào (flow cytometry)……………………… …… 10 13 Giới thiệu chung sên biển……………………………… ………… 11 131 Đặc điểm sinh học sên biển…………………………………… …… 11 132 Một số hợp chất có hoạt tính gây độc tế bào mạnh phân lập từ sên biển………………………………………………………………… 13 133 Tổng quan chi sên biển Aplysia…………………………………… … 16 134 Tổng quan chi sên biển Dendrodoris…………………………… …… 34 135 Tình hình nghiên cứu sên biển Việt Nam………………………… … 37 iv CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU ……… … 39 21 Đối tượng vật liệu nghiên cứu …………………………………… 39 211 Mẫu sên biển A dactylomela…………………………………… … 39 212 Mẫu sên biển D fumata …………………………………… 40 213 Vật liệu nghiên cứu…………………………………………………… … 41 22 Phương pháp nghiên cứu… …………………………………… … … 41 221 Xử lý, tạo dịch chiết methanol mẫu sên biển nghiên cứu…… …… 41 222 Phương pháp phân lập hợp chất …………………………… …… 23 Phương pháp xác định cấu trúc hóa học hợp chất………… ……… 51 231 Phương pháp phổ cộng hưởng từ hạt nhân (Nuclear magnetic resonace 42 spectrometry - NMR)………………………………………………… … 51 232 Phương pháp phổ khối lượng (Mass spectrometry - MS)…………… … 51 233 Một số phương pháp khác……………………………………………… 24 Phương pháp đánh giá hoạt tính chế gây độc tế bào ung thư… 52 241 Phương pháp nuôi cấy tế bào ung thư……………………………… …… 52 242 Phương pháp đánh giá hoạt tính gây độc tế bào ung thư (Phương pháp 51 MTT)……………………………………………………………… …… 52 243 Phương pháp đánh giá tác động cảm ứng apoptosis………………… … 53 CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU…………………………………… … 56 31 Xác định cấu trúc hóa học hợp chất từ loài A dactylomela thu vùng biển Lăng Cô tỉnh Thừa Thiên Huế 32 Xác định cấu trúc hóa học hợp chất từ lồi A dactylomela thu vùng biển Hòn Mê tỉnh Thanh Hóa………… 33 56 … 66 Xác định cấu trúc hóa học hợp chất từ loài D fumata thu vùng biển Hịn Mê tỉnh Thanh Hóa……………… … 34 Đánh giá hoạt tính gây độc tế bào hợp chất phân lập từ mẫu sên biển………………………………………………… 341 72 Đánh giá hoạt tính gây độc tế bào ung thư hợp chất phân lập từ loài A dactylomela thu tỉnh Thừa Thiên Huế… … 342 69 72 Đánh giá hoạt tính gây độc tế bào ung thư hợp chất phân lập từ mẫu sên biển A dactylomela thu tỉnh Thanh Hóa… … 74 v 343 Đánh giá hoạt tính gây độc tế bào ung thư hợp chất phân lập từ mẫu sên biển D fumata………………………… … 344 75 Đánh giá thử nghiệm hoạt tính cảm ứng apoptosis tế bào ung thư hợp chất AD02 hợp chất DN01 ……………………………… 75 CHƯƠNG BÀN LUẬN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU…………………… … 41 84 Xác định cấu trúc hóa học hợp chất phân lập từ mẫu sên biển A dactylomela thu vùng biển Lăng Cô tỉnh Thừa Thiên Huế 84 411 Hợp chất ASP01…………………………………………………… 84 412 Hợp chất ASP02…………………………………………………… 86 413 Hợp chất ASP03…………………………………………………… 86 414 Hợp chất ASP05…………………………………………………… 87 415 Hợp chất ASP06…………………………………………………… 87 416 Hợp chất ASP08…………………………………………………… 88 417 Hợp chất ASP09…………………………………………………… 88 418 Hợp chất ASP12…………………………………………………… 89 419 Hợp chất ASP14…………………………………………………… 91 10 Hợp chất ASP15…………………………………………………… 91 11 Xác định cấu trúc hợp chất lại……………………… …… 92 42 Xác định cấu trúc hóa học hợp chất phân lập từ mẫu sên biển A dactylomela thu vùng biển Hịn Mê tỉnh Thanh Hóa…… 93 421 Hợp chất AD01……………………………………………… …… 93 422 Hợp chất AD02………………………………………………… … 94 423 Hợp chất AD03………………………………………………… … 96 43 Xác định cấu trúc hóa học hợp chất phân lập từ mẫu sên biển D fumata…………… ……………………………………… 98 431 Hợp chất DN11………………………………………………… … 98 432 Xác định cấu trúc hợp chất lại………………………………… 44 Đánh giá hoạt tính gây độc tế bào ung thư hợp chất phân lập từ sên biển A dactylomela D fumata… 100 101 vi 441 Đánh giá hoạt tính gây độc tế bào ung thư hợp chất phân lập từ loài sên biển A dactylomela thu biển Lăng Cô tỉnh Thừa Thiên Huế 442 …… ……………………………………… 101 Đánh giá hoạt tính gây độc tế bào ung thư hợp chất phân lập từ loài sên biển A dactylomela thu biển Hịn Mê tỉnh Thanh Hố 104 443 Đánh giá hoạt tính gây độc tế bào ung thư hợp chất phân lập từ loài sên biển D fumata thu biển Hịn Mê tỉnh Thanh Hóa 444 107 Đánh giá thử nghiệm hoạt tính cảm ứng apoptosis tế bào ung thư hợp chất AD02 DN01…………… 109 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ…………………………………………… …… 114 NHỮNG ĐÓNG GÓP MỚI CỦA LUẬN ÁN 116 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ………………………… … 117 TÀI LIỆU THAM KHẢO………………………………………………… …… 118 PHỤ LỤC……………………………………………… -PL1- vii DANH MỤC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt H-NMR 1 H- H COSY 13 C-NMR 5-EPA 6-OHDA AD ASP ATCC CC CD DEPT DISC DMEM DMSO DN DNA FBS H2SO4 HepG2 HL-60 HMBC HPLC HR-ESI-MS Tiếng Anh Proton Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy 1 H- H Chemical Shift Correlation Spectroscopy Carbon-13 nuclear magnetic resonance Spectroscopy 5-Episinuleptolide acetate 6-Hydroxydopamine Aplysia dactylomela was collected in Hon Me island, Thanh Hoa province Aplysia dactylomela was collected in Lang Co, Thua Thien Hue province American Type Culture Collection Chromatography column Circular dichroism Spectroscopy Distortionless Enhancement by Polarization Transfer Death-inducing signaling complex Dulbecco’s Modified Eagle Medium Dimethyl sulfoxide Dendrodoris fumata was collected in Hon Me island, Thanh Hoa province Deoxyribo Nucleic Acid Fetal Bovine Serum Sulfuric acid Human hepatocellular carcinoma cell Human promyelocytic leukemia cell Heteronuclear Multiple Bond Connectivity High Performance Liquid Chromatography High Resolution Electrospray Ionization Mass Spectrometry Tiếng Việt Phổ cộng hưởng từ hạt nhân proton Phổ tương tác proton-proton Phổ cộng hưởng từ hạt nhân cacbon 13 đồng vị 5-Episinuleptolide acetate 6-Hydroxydopamine Aplysia dactylomela thu vùng biển Hòn Mê tỉnh Thanh Hóa Aplysia dactylomela thu vùng biển Lăng Cô tỉnh Thừa Thiên Huế Ngân hàng chủng chuẩn Mỹ Sắc kí cột Phổ lưỡng sắc trịn Phổ DEPT Phức hợp tín hiệu gây chết Mơi trường Dulbecco’s Modified Eagle Medium Dimethyl sulfoxide Dendrodoris fumata thu vùng biển Hịn Mê tỉnh Thanh Hóa Axit Deoxyribo Nucleic Huyết bào thai bò Axit Sunfuric Tế bào ung thư biểu mơ gan người dịng HepG2 Ung thư bạch cầu cấp người dòng HL-60 Phổ tương tác dị hạt nhân qua nhiều liên kết Sắc ký hiệu cao Phổ khối lượng phân giải cao phun mù điện viii HSQC LU-1 Heteronuclear Single Quantum Coherence Inhibitory concentration 50% Human epidemoid carcinoma cell Infrared Spectroscopy Lymph Node Carcinoma of the Prostate Liquid chromatography-mass Spectroscopy Human lung carcinoma Cell MCF-7 Human breast carcinoma cell MDA-MB231 MIC Human breast cancer cell IC50 KB IR LNCaP LC-MS MS MTT NOESY Minimum inhibitory concentration Mass Spectroscopy 3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]2,5-diphenylterazolium bromide PI3K/Akt Nuclear Overhauser Enhancement Spectroscopy An intracellular signaling pathway important in regulating the cell cycle PS SK-Mel-2 Phosphatidylserine Human Melanoma cell TNF TRAIL Tumor Necrosis Factors Tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand Thin layer chromatography TLC Phổ tương tác dị hạt nhân qua liên kết Nồng độ ức chế 50% Tế bào ung thư biểu mô người Phổ hồng ngoại Ung thư tiền liệt người Sắc kí lỏng – phổ khối Tế bào ung thư phổi người dòng LU-1 Tế bào ung thư vú người dòng MCF-7 Tế bào ung thư vú người dòng MDA-MB-231 Nồng độ ức chế tối thiểu Khối phổ 3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]2,5-diphenylterazolium bromide Phổ NOESY Một đường tín hiệu nội bào quan trọng việc điều hòa chu kỳ tế bào Phosphatidylserine Tế bào ung thư da người dòng SK-Mel-2 Yếu tố hoại tử khối u Phối tử kích hoạt apoptosis liên quan đến nhân tố hoạt tử khối u Sắc ký lớp mỏng PL -103- Phụ lục 27 Phổ 1H NMR hợp chất DN08 Phụ lục 27 Phổ 13C NMR hợp chất DN08 PL -104- Phụ lục 27 Phổ HSQC hợp chất DN08 Phụ lục 27 Phổ HMBC hợp chất DN08 PL -105Phụ lục 28 Các phổ hợp chất DN09 Cấu trúc hợp chất DN09 (3α,6β-dihydroxy-1,1,5-trimethyl-8-oxo-1,2,3,4,5,6hexahydro-benzofuran) Công thức phân tử: C11H18O4 Bảng phụ lục 28 Dữ liệu phổ NMR hợp chất DN09 STT δCa,b δHa,c (dạng pic, J = Hz) HMBC NOESY 38,04 - 2a 2b 47,19 1, 2, 4, 11, 7b 11, 10 64,21 4a 4b 7a 7b 10 47,79 177,39 21,24 23,76 1,37 (1H, m) 1,62 (1H, ddd, 3,0, 4,0, 13,5) 3,72 (1H, dddd, 4,0, 4,0, 11,5, 12,0) 1,44 (1H, m) 2,17 (1H, ddd, 2,5, 4,0, 12,5) 2,23 (1H, d, 17,5) 3,03 (1H, d, 17,5) 1,40 (3H, s) 0,96 (3H, s) 11 27,39 0,89 (3H, s) 91,04 81,98 42,36 a b c Đo CD3OD; 125MHz; 500MHz 10, 2, 3, 5, 6, 7b 1, 5, 6, 11 2a, 4a, 11 4, 5, 1, 2, 6, 11 3, 10 2b, 3, 2a, 2b, 7a, 7b 1, 2, 6, 10 PL -106- Phụ lục 28 Phổ 1H NMR hợp chất DN09 Phụ lục 28 Phổ 13C NMR hợp chất DN09 PL -107- Phụ lục 28 Phổ HSQC hợp chất DN09 Phụ lục 28 Phổ HMBC hợp chất DN09 PL -108- Phụ lục 28 Phổ COSY hợp chất DN09 Phụ lục 28 Phổ NOESY hợp chất DN09 PL -109Phụ lục 29: Kết thử nghiệm hoạt tính gây độc tế bào ung thư hợp chất phân lập từ loài A dactylomela thu vùng biển Lăng Cô tỉnh Thừa Thiên Huế Nồng độ (µg/ml) 100 20 IC50 Nồng độ (µg/ml) 100 20 08 IC50 Nồng độ (µg/ml) 100 20 08 IC50 Nồng độ (µg/ml) 100 20 IC50 Nồng độ (µg/ml) 100 20 08 IC50 Nồng độ (µg/ml) ASP01 LU-1 36 69 15 01 >100 HepG2 27 89 -1 07 >100 SK-Mel 34 12 11 51 >100 SW480 49 92 21 14 >100 KB 27 67 19 >100 MCF7 32 69 20 26 >100 HL-60 20 53 45 >100 LNCaP 39 63 14 >100 ASP02 LU-1 HepG2 89 12 38 99 15 97 47 32 21± 21 77 52 33 69 23 75 10 74 41 27± 08 LU-1 HepG2 99 01 29 36 90 41 39 86± 46 91 42 29 22 82 -1 33 41 65± 94 LU-1 HepG2 48 81 20 86 >100 41 28 22 87 >100 SK-Mel 91 25 39 39 20 93 11 22 31 51± 61 SK-Mel 93 08 28 47 11 67 19 43 02± 07 SK-Mel 492 17 27 60 >100 SW480 MCF7 HL-60 LNCaP 81 24 73 89 43 08 36 47 27 80 21 38 13 97 11 32 27 30± 40 59± 24 99 ASP03 80 18 34 74 23 60 57 35 65± 79 73 95 29 13 16 23 39 49 71± 74 75 67 30 18 18 56 98 48 47± 11 SW480 MCF7 HL-60 LNCaP 88 70 92 55 30 68 27 70 13 94 12 89 77 12 40 66± 42 90± 40 94 ASP04 81 17 30 18 14 04 -3 33 41 20± 44 74 26 23 93 11 66 -4 76 52 32± 71 82 47 28 28 15 94 63 46 66± 49 SW480 MCF7 HL-60 LNCaP 48 62 26 91 >100 KB KB KB 47 34 16 08 >100 48 60 24 56 >100 41 87 12 87 >100 33 86 11 93 >100 ASP05 LU-1 HepG2 71 78 22 70 12 88 54 59 36± 38 71 99 21 32 14 28 77 63 03± 85 LU-1 HepG2 SK-Mel 79 23 30 32 13 79 91 47 72± 86 SK-Mel SW480 KB MCF7 HL-60 LNCaP 79 28 78 55 19 74 25 87 78 15 21 -0 33 25 57 56± 52 95± 50 04 ASP06 75 87 20 15 18 97 87 63 55± 17 72 54 21 34 12 74 99 62 21± 72 70 31 24 46 10 32 46 58 79± 26 SW480 MCF7 HL-60 LNCaP KB PL -110100 20 08 IC50 Nồng độ (µg/ml) 100 20 08 IC50 Nồng độ (µg/ml) 100 20 08 IC50 Nồng độ (µg/ml) 100 20 08 IC50 Nồng độ (µg/ml) 100 20 08 IC50 Nồng độ (µg/ml) 100 82 58 33 96 10 99 01 42 21± 04 78 69 28 27 15 02 70 46 08± 37 LU-1 HepG2 96 33 38 69 17 11 12 08 32 82± 21 90 75 45 26 27 67 14 00 23 81± 39 LU-1 HepG2 97 88 56 48 33 07 11 35 13 12± 68 84 33 60 68 39 23 12 41 67± 22 84 01 44 48 17 06 21 27 83± 42 SK-Mel 82 89 51 04 24 13 11 78 19 04± 04 SK-Mel 83 22 52 93 35 66 15 88 14 39± 02 62 46 25 44 15 44 67 66 52± 46 60 07 28 89 15 75 87 67 84± 43 65 17 30 88 18 31 10 29 56 88± 73 SW480 MCF7 HL-60 LNCaP 85 83 86 15 43 08 44 44 23 46 23 22 10 47 79 27 37± 25 90± 72 73 ASP08 94 85 46 32 24 33 15 46 24 17± 30 79 86 40 85 29 93 12 85 28 60± 19 88 51 42 35 22 51 10 09 27 93± 64 SW480 MCF7 HL-60 LNCaP 98 02 55 97 31 39 14 72 14 30± 51 82 31 45 39 20 88 49 26 22± 87 92 22 56 78 34 19 17 01 12 98± 73 MCF7 HL-60 LNCaP 82 23 82 68 31 18 32 43 20 66 17 45 11 51 50 44 82± 41 21± 84 58 ASP10 87 11 37 13 13 68 79 36 56± 13 78 61 32 72 12 21 -2 10 40 86± 88 89 96 30 14 17 22 61 40 40± 47 MCF7 HL-60 LNCaP 56 46 19 34 10 25 56 82 52±6 13 75 42 14 42 98 78 69 49±4 74 80 24 00 46 52 55 88± 91 HepG2 91 50 37 42 16 49 -2 95 30 31± 48 91 58 30 03 18 66 09 39 98± 19 LU-1 HepG2 SK-Mel SW480 61 27 21 03 10 00 72 95± 07 59 19 18 63 16 11 78 97±4 93 - - LU-1 HepG2 SK-Mel SW480 88 18 97 97 82 98 77 65 35 56 12 09 92 44 59± 12 - KB KB 86 14 100 26 61 31 58 64 36 18 37 42 14 11 12 21 86± 10 87± 57 93 ASP09 LU-1 97 50 SK-Mel 78 20 72 57 42 06 23 49 12 08 11 48 67 85 33 71± 57 07± 10 08 ASP07 SW480 KB KB 72 43 26 28 94 -2 52 53 20± 72 ASP11 KB 103 07 MCF7 96 96 HL-60 84 80 LNCaP 92 54 PL -11120 08 IC50 Nồng độ (µg/ml) 100 20 IC50 Nồng độ (µg/ml) 100 20 IC50 Nồng độ (µg/ml) 100 20 IC50 Nồng độ (µg/ml) 100 20 IC50 60 08 58 17 15 57 15 30 -3 48 59 17 05± 17 15± 69 31 ASP12 59 18 11 10 -0 33 18 05± 29 53 99 12 23 -8 40 20 65± 50 66 73 10 59 -3 66 15 12± 99 SK-Mel SW480 MCF7 HL-60 LNCaP 43 69 20 22 >100 42 61 17 89 >100 60 00 12 74 57 17 74± 76 58 53 18 65 51 16 58± 49 64 34 15 21 -3 26 14 39± 72 LU-1 HepG2 48 10 10 10 >100 35 09 16 >100 KB 43 72 28 >100 30 29 19 49 >100 25 47 15 >100 26 59 19 82 >100 ASP13 LU-1 HepG2 SK-Mel SW480 KB 49 92 30 15 >100 30 81 11 79 >100 49 98 30 92 >100 48 11 33 66 >100 37 06 10 22 >100 MCF7 40 06 24 91 >100 HL-60 26 07 10 93 >100 LNCaP 38 22 18 96 >100 ASP15 LU-1 HepG2 SK-Mel SW480 KB 49 09 13 71 >100 31 69 12 26 >100 47 21 11 87 >100 40 91 23 98 >100 48 59 18 67 >100 MCF7 35 32 25 26 >100 HL-60 33 54 15 27 >100 LNCaP 30 94 10 53 >100 ASP16 LU-1 HepG2 SK-Mel SW480 20 87 76 >100 28 09 -3 03 >100 15 18 76 >100 14 95 27 >100 KB 31 01 10 97 >100 MCF7 42 81 16 14 >100 HL-60 16 04 88 >100 LNCaP 22 61 12 13 >100 PL -112Phụ lục 30: Kết thử nghiệm hoạt tính gây độc tế bào ung thư hợp chất phân lập từ loài A dactylomela thu vùng biển Hịn Mê tỉnh Thanh Hóa Nồng độ (µg/ml) 100 20 IC50 Nồng độ (µg/ml) 20 08 16 IC50 Nồng độ (µg/ml) 100 20 IC50 Nồng độ (µg/ml) 10 04 08 IC50 AD01 LU-1 - HepG2 SK-Mel SW480 KB MCF7 HL-60 LNCaP - - - - - - KB MCF7 HL-60 LNCaP 99 67 81 31 37 20 15 94 15± 07 85 64 70 13 27 46 15 10± 19 44 92 10 39 >100 - AD02 LU-1 99 60 73 33 32 10 66 61± 14 HepG2 SK-Mel 91 04 77 18 34 95 10 73 49± 15 82 43 72 96 40 68 12 00 59± 15 SW480 83 39 99 13 73 57 72 08 39 65 46 88 13 27 11 76 54± 20± 08 10 AD03 95 73 75 26 32 32 12 81 48± 09 LU-1 HepG2 SK-Mel SW480 KB MCF7 HL-60 LNCaP - 20 98 74 >100 - - - - - - - Ellipticine LU-1 98 43 79 18 49 23 21 48 43± 04 HepG2 88 87 74 22 50 54 27 69 40± 01 SK-Mel 98 17 79 49 50 99 24 87 38± 02 SW480 KB MCF7 HL-60 81 16 74 48 51 07 23 16 49± 05 99 02 79 68 49 75 24 77 39± 02 101 23 75 09 50 82 22 32 43± 02 92 20 70 33 47 23 20 01 55± 04 LNCaP 93 51 75 09 51 67 26 63 39± 02 PL -113Phụ lục 31: Kết thử nghiệm hoạt tính gây độc tế bào ung thư hợp chất phân lập từ mẫu sên biển D fumata Nồng độ (µg/ml) 100 20 08 IC50 Nồng độ (µg/ml) 100 20 IC50 Nồng độ (µg/ml) 100 20 IC50 Nồng độ (µg/ml) 10 04 08 IC50 DN01 LU-1 HepG2 SK-Mel SW480 KB MCF7 HL-60 LNCaP 97 71 67 70 37 51 13 67 85± 79 95 28 69 08 39 75 17 12 91± 44 93 85 75 57 32 34 97 22± 61 90 58 73 58 41 82 01 29± 77 94 98 76 75 31 90 33 11± 58 95 28 69 08 39 75 17 12 91± 44 95 70 82 60 38 74 28 92± 71 90 58 73 58 41 82 01 29± 77 KB MCF7 HL-60 LNCaP DN04 LU-1 40 56 10 >100 HepG2 SK-Mel 20 40 -0 88 >100 12 65 99 >100 SW480 24 74 58 >100 33 93 65 >100 34 65 12 81 >100 18 92 98 >100 17 18 73 >100 DN09 LU-1 43 98 20 95 >100 HepG2 SK-Mel 37 -1 49 >100 38 91 66 >100 SW480 60 85 10 06 >100 KB 39 94 20 >100 MCF7 HL-60 80 47 24 56 >100 26 80 36 >100 LNCaP 26 24 -2 05 >100 Ellipticine LU-1 HepG2 SK-Mel SW480 KB MCF7 HL-60 LNCaP 92 36 74 33 51 99 22 47 44± 08 93 53 78 22 49 08 20 74 37± 03 97 15 85 78 49 37 21 47 40± 05 91 46 82 06 51 11 22 37 34± 04 98 45 88 59 49 78 24 18 35± 07 89 78 89 43 66 40 57 66 21 37 47± 09 90 34 63 20 48 95 26 82 57± 06 77 57 51 17 22 42 33± 03 PL -114TÀI LIỆU THAM KHẢO F L da Silva Machado, T L Ventura, L M Gestinari, V Cassano, J A Resende, C R Kaiser, E B Lasunskaia, M F Muzitano, and A R Soares (2014), "Sesquiterpenes from the Brazilian red alga Laurencia dendroidea J Agardh", Molecules 19(3), p 3181-92 M E Y Francisco, M M Turnbull, and K L Erickson (1998), "Cartilagineol, the fourth lineage of Laurencia-derived polyhalogenated chamigrene", Tetrahedron Letters 39(30), p 5289-5292 J Y Chen, C Y Huang, Y S Lin, T L Hwang, W L Wang, S F Chiou, and J H Sheu (2016), "Halogenated Sesquiterpenoids from the Red Alga Laurencia tristicha Collected in Taiwan", J Nat Prod 79(9), p 2315-23 M Suzuki and E Kurosawa (1978), "Two new halogenated sesquiterpenes from the red alga laurencia majuscula Harvey", Tetrahedron Letters 19(48), p 4805-4808 M Suzuki, A Furusaki, N Hashiba, and E Kurosawa (1979), "The structures and absolute stereochemistry of two halogenated chamigrenes from the red alga Laurencia majuscula Harvey", Tetrahedron Letters 20(10), p 879-882 M R Brennan, K L Erickson, D A Minott, and K O Pascoe (1987), "Chamigrane metabolites from a Jamaican variety of laurencia obtusa", Phytochemistry 26(4), p 1053-1057 M E Y Francisco and K L Erickson (2001), "Ma'iliohydrin, a cytotoxic chamigrene dibromohydrin from a Philippine Laurencia Species", Journal of Natural Products 64(6), p 790-791 S E N Ayyad, M S Makki, N S Al-kayal, S A Basaif, K O El-Foty, A M Asiri, W M Alarif, and F A Badria (2011), "Cytotoxic and protective DNA damage of three new diterpenoids from the brown alga Dictoyota dichotoma", European Journal of Medicinal Chemistry 46, p 175-182 X Luo, F Li, P B Shinde, J Hong, C -O Lee, K S Im, and J H Jung (2006), "26,27-Cyclosterols and Other Polyoxygenated Sterols from a Marine Sponge Topsentia sp", Journal of Natural Products 69(12), p 1760-1768 PL -11510 M Neeman and O D Simmons (1979), "Carbon-13 nuclear magnetic resonance spectroscopy of phorbol ", Canadian Journal of Chemistry 57(2071-2072), p 2071 11 Z -L Kong, S Chi Yu, S Ai Dai, C -C Tu, M -H Pan, and Y -C Liu (2011), "Polyoxygenated Sterols from Freshwater Clam", Helvetica Chimica Acta 94(5), p 892-896 PL -116- PL -117- ... t sên biể n Chính v ậy đề tài lu ận án ? ?Nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính gây độc tế bào ung thư từ hai loài sên biển Aplysia dactylomela Dendrodoris fumata vùng biển miền Trung Việt Nam? ??... DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HĨA HỌC VÀ HOẠT TÍNH GÂY ĐỘC TẾ BÀO UNG THƯ TỪ HAI LOÀI SÊN BIỂN Aplysia. .. giá hoạt tính gây độc tế bào ung thư hợp chất phân lập từ loài sên biển A dactylomela thu biển Hịn Mê tỉnh Thanh Hố 104 443 Đánh giá hoạt tính gây độc tế bào ung thư hợp chất phân lập từ loài sên