(LUẬN án TIẾN sĩ) nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính gây độc tế bào ung thư từ hai loài sên biển aplysia dactylomela và dendrodoris fumata ở vùng biển miền trung việt nam

1 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - Phạm Thị Mai Hương NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ HOẠT TÍNH GÂY ĐỘC TẾ BÀO UNG THƯ TỪ HAI LOÀI SÊN BIỂN Aplysia dactylomela VÀ Dendrodoris fumata Ở VÙNG BIỂN MIỀN TRUNG VIỆT NAM LUẬN ÁN TIẾN SĨ SINH HỌC Hà Nội-2022 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - Phạm Thị Mai Hương NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ HOẠT TÍNH GÂY ĐỘC TẾ BÀO UNG THƯ TỪ HAI LOÀI SÊN BIỂN Aplysia dactylomela VÀ Dendrodoris fumata Ở VÙNG BIỂN MIỀN TRUNG VIỆT NAM Chuyên ngành: Hóa sinh học Mã số: 9.42.01.16 LUẬN ÁN TIẾN SĨ SINH HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: TS Nguyễn Văn Thanh PGS.TS Đỗ Thị Thảo Hà Nội – 2022 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan luận án công trình nghiên cứu tơi hướng dẫn TS Nguyễn Văn Thanh PGS TS Đỗ Thị Thảo Các số liệu, kết luận án hoàn toàn trung thực chưa công bố cơng trình khác Tác giả Phạm Thị Mai Hương LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com ii LỜI CẢM ƠN Luận án hoàn thành Viện Hóa sinh biển, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam với hỗ trợ kinh phí thực đề tài VAST.TĐ.DLB.06/16-18 Trong q trình thực luận án, tác giả nhận nhiều giúp đỡ vô quý báu từ thầy cô, nhà khoa học, đồng nghiệp, bạn bè gia đình Tơi xin bày tỏ lời cảm ơn sâu sắc tới TS Nguyễn Văn Thanh PGS TS Đỗ Thị Thảo người thầy hết lịng tận tâm hướng dẫn dạy tơi suốt thời gian thực luận án Tôi xin chân thành cảm ơn tới Ban lãnh đạo cán đồng nghiệp phòng Dược liệu biển, Viện Hóa sinh biển, đặc biệt GS VS Châu Văn Minh bảo, góp ý tạo điều kiện tốt q trình thực hiện, hồn thành luận án Tôi xin trân trọng cảm ơn Ban lãnh đạo Học viện Khoa học Công nghệ, Viện Hóa sinh biển Viện Cơng nghệ sinh học giúp đỡ, tạo điều kiện thuận lợi cho tơi q trình học tập Tơi xin trân trọng cảm ơn Phịng Hoạt chất sinh học – Viện Hóa Sinh biển, Phịng Thử nghiệm hoạt tính sinh học – Viện Công nghệ sinh học giúp đỡ q trình nghiên cứu thử hoạt tính hợp chất Tôi xin gửi lời biết ơn chân thành tới tồn thể gia đình, bạn bè người thân ln quan tâm, động viên khích lệ suốt trình thực Xin trân trọng cảm ơn! Tác giả Phạm Thị Mai Hương LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com iii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN ……………………………………………………….…… i LỜI CẢM ƠN………………………………………………………….……… ii MỤC LỤC ……………………………………………………………….……… iii DANH MỤC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT ……………………………….…… vii DANH MỤC BẢNG………………………………………………………….…… ix DANH MỤC HÌNH ……………………………………………………… …… xi MỞ ĐẦU …………………………………………………………………….…… CHƯƠNG TỔNG QUAN …………………………………………… ……… 1.1 Ung thư mối liên quan tế bào ung thư với trình apoptosis 1.1.1 Khái niệm chung ung thư………………………………………….… 1.1.2 Apoptosis tầm quan trọng apoptosis………………………….… 1.1.3 Mối liên quan tế bào ung thư trình apoptosis………… …… 1.2 Một số thử nghiệm đánh giá hoạt tính gây độc tế bào ……….….… 1.2.1 Thử nghiệm xác định hoạt tính gây độc tế bào kỹ thuật MTT 1.2.2 Thử nghiệm xác định khả gây apoptosis thông qua sử dụng thuốc nhuộm Hoechst 33342……………………………………………….…… 1.2.3 Thử nghiệm xác định khả cảm ứng enzyme caspase-3………… … 1.2.4 Thử nghiệm đánh giá mức độ apoptosis tế bào kỹ thuật phân tích dịng chảy tế bào (flow cytometry)……………………….…… 10 1.3 Giới thiệu chung sên biển……………………………… ………… 11 1.3.1 Đặc điểm sinh học sên biển…………………………………….…… 11 1.3.2 Một số hợp chất có hoạt tính gây độc tế bào mạnh phân lập từ sên biển………………………………………………………………… 13 1.3.3 Tổng quan chi sên biển Aplysia…………………………………… … 16 1.3.4 Tổng quan chi sên biển Dendrodoris…………………………… …… 34 1.3.5 Tình hình nghiên cứu sên biển Việt Nam………………………… … 37 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com iv CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU ……… … 39 2.1 Đối tượng vật liệu nghiên cứu.…………………………………… 39 2.1.1 Mẫu sên biển A.dactylomela…………………………………….… 39 2.1.2 Mẫu sên biển D fumata …………………………………… 40 2.1.3 Vật liệu nghiên cứu…………………………………………………….… 41 2.2 Phương pháp nghiên cứu… …………………………………… … … 41 2.2.1 Xử lý, tạo dịch chiết methanol mẫu sên biển nghiên cứu…….…… 41 2.2.2 Phương pháp phân lập hợp chất …………………………….…… 42 2.3 Phương pháp xác định cấu trúc hóa học hợp chất………….……… 51 2.3.1 Phương pháp phổ cộng hưởng từ hạt nhân (Nuclear magnetic resonace spectrometry - NMR)………………………………………………….… 51 2.3.2 Phương pháp phổ khối lượng (Mass spectrometry - MS)…………….… 51 2.3.3 Một số phương pháp khác……………………………………………… 51 2.4 Phương pháp đánh giá hoạt tính chế gây độc tế bào ung thư… 52 2.4.1 Phương pháp nuôi cấy tế bào ung thư……………………………….…… 52 2.4.2 Phương pháp đánh giá hoạt tính gây độc tế bào ung thư (Phương pháp MTT)……………………………………………………………… …… 52 2.4.3 Phương pháp đánh giá tác động cảm ứng apoptosis………………… … 53 CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU…………………………………… … 56 3.1 Xác định cấu trúc hóa học hợp chất từ lồi A dactylomela thu vùng biển Lăng Cơ tỉnh Thừa Thiên Huế 56 3.2 Xác định cấu trúc hóa học hợp chất từ lồi A dactylomela thu vùng biển Hịn Mê tỉnh Thanh Hóa………… … 66 3.3 Xác định cấu trúc hóa học hợp chất từ lồi D fumata thu vùng biển Hịn Mê tỉnh Thanh Hóa……………… … 69 3.4 Đánh giá hoạt tính gây độc tế bào hợp chất phân lập từ mẫu sên biển………………………………………………… 72 3.4.1 Đánh giá hoạt tính gây độc tế bào ung thư hợp chất phân lập từ loài A dactylomela thu tỉnh Thừa Thiên Huế….… 72 3.4.2 Đánh giá hoạt tính gây độc tế bào ung thư hợp chất phân lập từ mẫu sên biển A dactylomela thu tỉnh Thanh Hóa….… 74 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com v 3.4.3 Đánh giá hoạt tính gây độc tế bào ung thư hợp chất phân lập từ mẫu sên biển D fumata………………………… … 75 3.4.4 Đánh giá thử nghiệm hoạt tính cảm ứng apoptosis tế bào ung thư hợp chất AD02 hợp chất DN01 ……………………………… 75 CHƯƠNG BÀN LUẬN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU…………………….… 84 4.1 Xác định cấu trúc hóa học hợp chất phân lập từ mẫu sên biển A dactylomela thu vùng biển Lăng Cô tỉnh Thừa Thiên Huế 84 4.1.1 Hợp chất ASP01…………………………………………………… 84 4.1.2 Hợp chất ASP02…………………………………………………… 86 4.1.3 Hợp chất ASP03…………………………………………………… 86 4.1.4 Hợp chất ASP05…………………………………………………… 87 4.1.5 Hợp chất ASP06…………………………………………………… 87 4.1.6 Hợp chất ASP08…………………………………………………… 88 4.1.7 Hợp chất ASP09…………………………………………………… 88 4.1.8 Hợp chất ASP12…………………………………………………… 89 4.1.9 Hợp chất ASP14…………………………………………………… 91 4.1.10 Hợp chất ASP15…………………………………………………… 91 4.1.11 Xác định cấu trúc hợp chất lại……………………… …… 92 4.2 Xác định cấu trúc hóa học hợp chất phân lập từ mẫu sên biển A dactylomela thu vùng biển Hịn Mê tỉnh Thanh Hóa…… 93 4.2.1 Hợp chất AD01……………………………………………… …… 93 4.2.2 Hợp chất AD02………………………………………………… … 94 4.2.3 Hợp chất AD03………………………………………………… … 96 4.3 Xác định cấu trúc hóa học hợp chất phân lập từ mẫu sên biển D fumata…………… ……………………………………… 98 4.3.1 Hợp chất DN11………………………………………………… … 98 4.3.2 Xác định cấu trúc hợp chất lại………………………………… 100 4.4 Đánh giá hoạt tính gây độc tế bào ung thư hợp chất phân lập từ sên biển A dactylomela D fumata… 101 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com vi 4.4.1 Đánh giá hoạt tính gây độc tế bào ung thư hợp chất phân lập từ loài sên biển A dactylomela thu biển Lăng Cô tỉnh Thừa Thiên Huế .…… ……………………………………… 101 4.4.2 Đánh giá hoạt tính gây độc tế bào ung thư hợp chất phân lập từ loài sên biển A dactylomela thu biển Hòn Mê tỉnh Thanh Hố 104 4.4.3 Đánh giá hoạt tính gây độc tế bào ung thư hợp chất phân lập từ loài sên biển D fumata thu biển Hịn Mê tỉnh Thanh Hóa 107 4.4.4 Đánh giá thử nghiệm hoạt tính cảm ứng apoptosis tế bào ung thư hợp chất AD02 DN01…………… 109 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ…………………………………………… …… 114 NHỮNG ĐÓNG GÓP MỚI CỦA LUẬN ÁN 116 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ………………………… … 117 TÀI LIỆU THAM KHẢO………………………………………………… …… 118 PHỤ LỤC……………………………………………… -PL1- LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com vii DANH MỤC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt H-NMR Tiếng Anh Proton Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy 1 H- H COSY 1H-1H Chemical Shift Correlation Spectroscopy 13 C-NMR Carbon-13 nuclear magnetic resonance Spectroscopy 5-EPA 5-Episinuleptolide acetate 6-OHDA 6-Hydroxydopamine AD Aplysia dactylomela was collected in Hon Me island, Thanh Hoa province ASP Aplysia dactylomela was collected in Lang Co, Thua Thien Hue province ATCC American Type Culture Collection CC Chromatography column CD Circular dichroism Spectroscopy DEPT Distortionless Enhancement by Polarization Transfer DISC Death-inducing signaling complex DMEM Dulbecco’s Modified Eagle Medium DMSO Dimethyl sulfoxide DN Dendrodoris fumata was collected in Hon Me island, Thanh Hoa province DNA Deoxyribo Nucleic Acid FBS Fetal Bovine Serum H2SO4 Sulfuric acid HepG2 Human hepatocellular carcinoma cell HL-60 Human promyelocytic leukemia cell HMBC Heteronuclear Multiple Bond Connectivity HPLC High Performance Liquid Chromatography HR-ESI-MS High Resolution Electrospray Ionization Mass Spectrometry Tiếng Việt Phổ cộng hưởng từ hạt nhân proton Phổ tương tác proton-proton Phổ cộng hưởng từ hạt nhân cacbon 13 đồng vị 5-Episinuleptolide acetate 6-Hydroxydopamine Aplysia dactylomela thu vùng biển Hòn Mê tỉnh Thanh Hóa Aplysia dactylomela thu vùng biển Lăng Cô tỉnh Thừa Thiên Huế Ngân hàng chủng chuẩn Mỹ Sắc kí cột Phổ lưỡng sắc trịn Phổ DEPT Phức hợp tín hiệu gây chết Mơi trường Dulbecco’s Modified Eagle Medium Dimethyl sulfoxide Dendrodoris fumata thu vùng biển Hịn Mê tỉnh Thanh Hóa Axit Deoxyribo Nucleic Huyết bào thai bò Axit Sunfuric Tế bào ung thư biểu mơ gan người dịng HepG2 Ung thư bạch cầu cấp người dòng HL-60 Phổ tương tác dị hạt nhân qua nhiều liên kết Sắc ký hiệu cao Phổ khối lượng phân giải cao phun mù điện LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com viii HSQC LU-1 Heteronuclear Single Quantum Coherence Inhibitory concentration 50% Human epidemoid carcinoma cell Infrared Spectroscopy Lymph Node Carcinoma of the Prostate Liquid chromatography-mass Spectroscopy Human lung carcinoma Cell MCF-7 Human breast carcinoma cell MDA-MB231 MIC Human breast cancer cell IC50 KB IR LNCaP LC-MS MS MTT NOESY PI3K/Akt PS SK-Mel-2 TNF TRAIL TLC Phổ tương tác dị hạt nhân qua liên kết Nồng độ ức chế 50% Tế bào ung thư biểu mô người Phổ hồng ngoại Ung thư tiền liệt người Sắc kí lỏng – phổ khối Tế bào ung thư phổi người dòng LU-1 Tế bào ung thư vú người dòng MCF-7 Tế bào ung thư vú người dòng MDA-MB-231 Nồng độ ức chế tối thiểu Minimum inhibitory concentration Mass Spectroscopy Khối phổ 3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]2,5-diphenylterazolium bromide 2,5-diphenylterazolium bromide Nuclear Overhauser Phổ NOESY Enhancement Spectroscopy An intracellular signaling Một đường tín hiệu nội bào pathway important in quan regulating the cell cycle trọng việc điều hòa chu kỳ tế bào Phosphatidylserine Phosphatidylserine Human Melanoma cell Tế bào ung thư da người dòng SK-Mel-2 Tumor Necrosis Factors Yếu tố hoại tử khối u Tumor necrosis factor-related Phối tử kích hoạt apoptosis liên apoptosis-inducing ligand quan đến nhân tố hoạt tử khối u Thin layer chromatography Sắc ký lớp mỏng LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com PL -103- Phụ lục 27.1 Phổ 1H NMR hợp chất DN08 Phụ lục 27.2 Phổ 13C NMR hợp chất DN08 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com PL -104- Phụ lục 27.3 Phổ HSQC hợp chất DN08 Phụ lục 27.4 Phổ HMBC hợp chất DN08 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com PL -105Phụ lục 28 Các phổ hợp chất DN09 Cấu trúc hợp chất DN09 (3α,6β-dihydroxy-1,1,5-trimethyl-8-oxo-1,2,3,4,5,6hexahydro-benzofuran) Công thức phân tử: C11H18O4 Bảng phụ lục 28.1 Dữ liệu phổ NMR hợp chất DN09 STT δCa,b δHa,c (dạng pic, J = Hz) HMBC NOESY 38,04 2a 1,37 (1H, m) 11, 7b 47,19 1, 2, 4, 2b 1,62 (1H, ddd, 3,0, 4,0, 13,5) 11, 10 3,72 (1H, dddd, 4,0, 4,0, 11,5, 64,21 10, 12,0) 4a 1,44 (1H, m) 7b 47,79 2, 3, 5, 6, 4b 2,17 (1H, ddd, 2,5, 4,0, 12,5) 91,04 81,98 7a 2,23 (1H, d, 17,5) 11 42,36 1, 5, 6, 7b 3,03 (1H, d, 17,5) 2a, 4a, 11 177,39 21,24 1,40 (3H, s) 4, 5, 3, 10 10 23,76 0,96 (3H, s) 1, 2, 6, 11 2b, 3, 2a, 2b, 7a, 11 27,39 0,89 (3H, s) 1, 2, 6, 10 7b a b c Đo CD3OD; 125MHz; 500MHz LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com PL -106- Phụ lục 28.1 Phổ 1H NMR hợp chất DN09 Phụ lục 28.2 Phổ 13C NMR hợp chất DN09 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com PL -107- Phụ lục 28.3 Phổ HSQC hợp chất DN09 Phụ lục 28.4 Phổ HMBC hợp chất DN09 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com PL -108- Phụ lục 28.5 Phổ COSY hợp chất DN09 Phụ lục 28.6 Phổ NOESY hợp chất DN09 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com PL -109Phụ lục 29: Kết thử nghiệm hoạt tính gây độc tế bào ung thư hợp chất phân lập từ lồi A dactylomela thu vùng biển Lăng Cơ tỉnh Thừa Thiên Huế Nồng độ (µg/ml) 100 20 IC50 Nồng độ (µg/ml) 100 20 0.8 IC50 Nồng độ (µg/ml) 100 20 0.8 IC50 Nồng độ (µg/ml) 100 20 IC50 Nồng độ (µg/ml) 100 20 0.8 IC50 Nồng độ (µg/ml) ASP01 LU-1 36.69 15.01 >100 HepG2 27.89 -1.07 >100 SK-Mel 34.12 11.51 >100 SW480 49.92 21.14 >100 KB 27.67 0.19 >100 MCF7 32.69 20.26 >100 HL-60 20.53 8.45 >100 LNCaP 39.63 5.14 >100 ASP02 LU-1 HepG2 89.12 38.99 15.97 5.47 32.21± 1.21 77.52 33.69 23.75 10.74 41.27± 2.08 LU-1 HepG2 99.01 29.36 7.90 0.41 39.86± 2.46 91.42 29.22 6.82 -1.33 41.65± 3.94 LU-1 HepG2 48.81 20.86 >100 41.28 22.87 >100 SK-Mel 91.25 39.39 20.93 11.22 31.51± 1.61 SK-Mel 93.08 28.47 11.67 4.19 43.02± 3.07 SK-Mel 492.17 27.60 >100 SW480 MCF7 HL-60 LNCaP 81.24 73.89 43.08 36.47 27.80 21.38 13.97 11.32 27.30± 40.59± 1.24 2.99 ASP03 80.18 34.74 23.60 4.57 35.65± 2.79 73.95 29.13 16.23 5.39 49.71± 3.74 75.67 30.18 18.56 8.98 48.47± 3.11 SW480 MCF7 HL-60 LNCaP 88.70 92.55 30.68 27.70 13.94 12.89 2.77 2.12 40.66± 42.90± 2.40 2.94 ASP04 81.17 30.18 14.04 -3.33 41.20± 1.44 74.26 23.93 11.66 -4.76 52.32± 3.71 82.47 28.28 15.94 5.63 46.66± 2.49 SW480 MCF7 HL-60 LNCaP 48.62 26.91 >100 KB KB KB 47.34 16.08 >100 48.60 24.56 >100 41.87 12.87 >100 33.86 11.93 >100 ASP05 LU-1 HepG2 71.78 22.70 12.88 2.54 59.36± 2.38 71.99 21.32 14.28 5.77 63.03± 4.85 LU-1 HepG2 SK-Mel 79.23 30.32 13.79 8.91 47.72± 3.86 SK-Mel SW480 KB MCF7 HL-60 LNCaP 79.28 78.55 19.74 25.87 7.78 15.21 -0.33 7.25 57.56± 52.95± 4.50 5.04 ASP06 75.87 20.15 18.97 6.87 63.55± 6.17 72.54 21.34 12.74 4.99 62.21± 2.72 70.31 24.46 10.32 2.46 58.79± 3.26 SW480 MCF7 HL-60 LNCaP KB LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com PL -110100 20 0.8 IC50 Nồng độ (µg/ml) 100 20 0.8 IC50 Nồng độ (µg/ml) 100 20 0.8 IC50 Nồng độ (µg/ml) 100 20 0.8 IC50 Nồng độ (µg/ml) 100 20 0.8 IC50 Nồng độ (µg/ml) 100 82.58 33.96 10.99 8.01 42.21± 2.04 78.69 28.27 15.02 0.70 46.08± 4.37 LU-1 HepG2 96.33 38.69 17.11 12.08 32.82± 2.21 90.75 45.26 27.67 14.00 23.81± 1.39 LU-1 HepG2 97.88 56.48 33.07 11.35 13.12± 0.68 84.33 60.68 39.23 12.41 9.67± 0.22 84.01 44.48 17.06 5.21 27.83± 2.42 SK-Mel 82.89 51.04 24.13 11.78 19.04± 1.04 SK-Mel 83.22 52.93 35.66 15.88 14.39± 1.02 62.46 25.44 15.44 5.67 66.52± 6.46 60.07 28.89 15.75 9.87 67.84± 6.43 65.17 30.88 18.31 10.29 56.88± 5.73 SW480 MCF7 HL-60 LNCaP 85.83 86.15 43.08 44.44 23.46 23.22 10.47 9.79 27.37± 25.90± 1.72 0.73 ASP08 94.85 46.32 24.33 15.46 24.17± 1.30 79.86 40.85 29.93 12.85 28.60± 1.19 88.51 42.35 22.51 10.09 27.93± 1.64 SW480 MCF7 HL-60 LNCaP 98.02 55.97 31.39 14.72 14.30± 0.51 82.31 45.39 20.88 7.49 26.22± 2.87 92.22 56.78 34.19 17.01 12.98± 0.73 MCF7 HL-60 LNCaP 82.23 82.68 31.18 32.43 20.66 17.45 11.51 6.50 44.82± 41.21± 1.84 1.58 ASP10 87.11 37.13 13.68 8.79 36.56± 1.13 78.61 32.72 12.21 -2.10 40.86± 1.88 89.96 30.14 17.22 3.61 40.40± 1.47 MCF7 HL-60 LNCaP 56.46 19.34 10.25 0.56 82.52±6 13 75.42 14.42 8.98 3.78 69.49±4.0 74.80 24.00 6.46 0.52 55.88± 4.91 HepG2 91.50 37.42 16.49 -2.95 30.31± 2.48 91.58 30.03 18.66 4.09 39.98± 2.19 LU-1 HepG2 SK-Mel SW480 61.27 21.03 5.10 0.00 72.95± 5.07 59.19 18.63 8.16 2.11 78.97±4 93 - - LU-1 HepG2 SK-Mel SW480 88.18 97.97 82.98 77.65 35.56 12.09 7.92 44.59± 3.12 - KB KB 86.14 100.26 61.31 58.64 36.18 37.42 14.11 12.21 9.86± 10.87± 0.57 0.93 ASP09 LU-1 97.50 SK-Mel 78.20 72.57 42.06 23.49 12.08 11.48 3.67 0.85 33.71± 57.07± 3.10 3.08 ASP07 SW480 KB KB 72.43 26.28 7.94 -2.52 53.20± 3.72 ASP11 KB 103.07 MCF7 96.96 HL-60 84.80 LNCaP 92.54 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com PL -11120 0.8 IC50 Nồng độ (µg/ml) 100 20 IC50 Nồng độ (µg/ml) 100 20 IC50 Nồng độ (µg/ml) 100 20 IC50 Nồng độ (µg/ml) 100 20 IC50 60.08 58.17 15.57 15.30 -3.48 3.59 17.05± 17.15± 1.69 1.31 ASP12 59.18 11.10 -0.33 18.05± 1.29 53.99 12.23 -8.40 20.65± 1.50 66.73 10.59 -3.66 15.12± 0.99 SK-Mel SW480 MCF7 HL-60 LNCaP 43.69 20.22 >100 42.61 17.89 >100 60.00 12.74 6.57 17.74± 1.76 58.53 18.65 1.51 16.58± 0.49 64.34 15.21 -3.26 14.39± 0.72 LU-1 HepG2 35.09 9.16 >100 48.10 10.10 >100 KB 43.72 9.28 >100 30.29 19.49 >100 25.47 0.15 >100 26.59 19.82 >100 ASP13 LU-1 49.92 30.15 >100 HepG2 SK-Mel SW480 30.81 11.79 >100 49.98 30.92 >100 48.11 33.66 >100 KB 37.06 10.22 >100 MCF7 40.06 24.91 >100 HL-60 26.07 10.93 >100 LNCaP 38.22 18.96 >100 ASP15 LU-1 49.09 13.71 >100 HepG2 SK-Mel SW480 31.69 12.26 >100 47.21 11.87 >100 40.91 23.98 >100 KB 48.59 18.67 >100 MCF7 35.32 25.26 >100 HL-60 33.54 15.27 >100 LNCaP 30.94 10.53 >100 ASP16 LU-1 20.87 2.76 >100 HepG2 SK-Mel SW480 28.09 -3.03 >100 15.18 0.76 >100 14.95 1.27 >100 KB 31.01 10.97 >100 MCF7 42.81 16.14 >100 HL-60 16.04 4.88 >100 LNCaP 22.61 12.13 >100 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com PL -112Phụ lục 30: Kết thử nghiệm hoạt tính gây độc tế bào ung thư hợp chất phân lập từ loài A dactylomela thu vùng biển Hòn Mê tỉnh Thanh Hóa Nồng độ (µg/ml) 100 20 IC50 Nồng độ (µg/ml) 20 0.8 0.16 IC50 Nồng độ (µg/ml) 100 20 IC50 Nồng độ (µg/ml) 10 0.4 0.08 IC50 AD01 LU-1 - HepG2 SK-Mel SW480 KB MCF7 HL-60 LNCaP - - - - - - KB MCF7 HL-60 LNCaP 99.67 81.31 37.20 15.94 1.15± 0.07 85.64 70.13 27.46 7.15 2.10± 0.19 44.92 10.39 >100 - AD02 LU-1 99.60 73.33 32.10 5.66 1.61± 0.14 HepG2 SK-Mel 91.04 77.18 34.95 10.73 1.49± 0.15 82.43 72.96 40.68 12.00 1.59± 0.15 SW480 83.39 99.13 73.57 72.08 39.65 46.88 13.27 11.76 1.54± 1.20± 0.08 0.10 AD03 95.73 75.26 32.32 12.81 1.48± 0.09 LU-1 HepG2 SK-Mel SW480 KB MCF7 HL-60 LNCaP - 20.98 5.74 >100 - - - - - - - Ellipticine LU-1 98.43 79.18 49.23 21.48 0.43± 0.04 HepG2 88.87 74.22 50.54 27.69 0.40± 0.01 SK-Mel SW480 KB MCF7 HL-60 98.17 79.49 50.99 24.87 0.38± 0.02 81.16 74.48 51.07 23.16 0.49± 0.05 99.02 79.68 49.75 24.77 0.39± 0.02 101.23 75.09 50.82 22.32 0.43± 0.02 92.20 70.33 47.23 20.01 0.55± 0.04 LNCaP 93.51 75.09 51.67 26.63 0.39± 0.02 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com PL -113Phụ lục 31: Kết thử nghiệm hoạt tính gây độc tế bào ung thư hợp chất phân lập từ mẫu sên biển D fumata Nồng độ (µg/ml) 100 20 0.8 IC50 Nồng độ (µg/ml) 100 20 IC50 Nồng độ (µg/ml) 100 20 IC50 Nồng độ (µg/ml) 10 0.4 0.08 IC50 DN01 LU-1 HepG2 SK-Mel SW480 KB MCF7 HL-60 LNCaP 97.71 67.70 37.51 13.67 7.85± 0.79 95.28 69.08 39.75 17.12 6.91± 0.44 93.85 75.57 32.34 5.97 8.22± 0.61 90.58 73.58 41.82 9.01 7.29± 0.77 94.98 76.75 31.90 2.33 7.11± 0.58 95.28 69.08 39.75 17.12 6.91± 0.44 95.70 82.60 38.74 4.28 6.92± 0.71 90.58 73.58 41.82 9.01 7.29± 0.77 KB MCF7 HL-60 LNCaP DN04 LU-1 40.56 5.10 >100 HepG2 SK-Mel 20.40 -0.88 >100 12.65 1.99 >100 SW480 24.74 1.58 >100 33.93 7.65 >100 34.65 12.81 >100 18.92 3.98 >100 17.18 8.73 >100 DN09 LU-1 43.98 20.95 >100 HepG2 SK-Mel 1.37 -1.49 >100 38.91 5.66 >100 SW480 60.85 10.06 >100 KB 39.94 9.20 >100 MCF7 HL-60 80.47 24.56 >100 26.80 7.36 >100 LNCaP 26.24 -2.05 >100 Ellipticine LU-1 HepG2 SK-Mel SW480 KB MCF7 HL-60 LNCaP 92.36 74.33 51.99 22.47 0.44± 0.08 93.53 78.22 49.08 20.74 0.37± 0.03 97.15 85.78 49.37 21.47 0.40± 0.05 91.46 82.06 51.11 22.37 0.34± 0.04 98.45 88.59 49.78 24.18 0.35± 0.07 89.78 89.43 66.40 57.66 21.37 0.47± 0.09 90.34 63.20 48.95 26.82 0.57± 0.06 77.57 51.17 22.42 0.33± 0.03 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com PL -114TÀI LIỆU THAM KHẢO F L da Silva Machado, T L Ventura, L M Gestinari, V Cassano, J A Resende, C R Kaiser, E B Lasunskaia, M F Muzitano, and A R Soares (2014), "Sesquiterpenes from the Brazilian red alga Laurencia dendroidea J Agardh", Molecules 19(3), p 3181-92 M E Y Francisco, M M Turnbull, and K L Erickson (1998), "Cartilagineol, the fourth lineage of Laurencia-derived polyhalogenated chamigrene", Tetrahedron Letters 39(30), p 5289-5292 J Y Chen, C Y Huang, Y S Lin, T L Hwang, W L Wang, S F Chiou, and J H Sheu (2016), "Halogenated Sesquiterpenoids from the Red Alga Laurencia tristicha Collected in Taiwan", J Nat Prod 79(9), p 2315-23 M Suzuki and E Kurosawa (1978), "Two new halogenated sesquiterpenes from the red alga laurencia majuscula Harvey", Tetrahedron Letters 19(48), p 4805-4808 M Suzuki, A Furusaki, N Hashiba, and E Kurosawa (1979), "The structures and absolute stereochemistry of two halogenated chamigrenes from the red alga Laurencia majuscula Harvey", Tetrahedron Letters 20(10), p 879-882 M R Brennan, K L Erickson, D A Minott, and K O Pascoe (1987), "Chamigrane metabolites from a Jamaican variety of laurencia obtusa", Phytochemistry 26(4), p 1053-1057 M E Y Francisco and K L Erickson (2001), "Ma'iliohydrin, a cytotoxic chamigrene dibromohydrin from a Philippine Laurencia Species", Journal of Natural Products 64(6), p 790-791 S E N Ayyad, M S Makki, N S Al-kayal, S A Basaif, K O El-Foty, A M Asiri, W M Alarif, and F A Badria (2011), "Cytotoxic and protective DNA damage of three new diterpenoids from the brown alga Dictoyota dichotoma", European Journal of Medicinal Chemistry 46, p 175-182 X Luo, F Li, P B Shinde, J Hong, C.-O Lee, K S Im, and J H Jung (2006), "26,27-Cyclosterols and Other Polyoxygenated Sterols from a Marine Sponge Topsentia sp", Journal of Natural Products 69(12), p 1760-1768 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com PL -11510 M Neeman and O D Simmons (1979), "Carbon-13 nuclear magnetic resonance spectroscopy of phorbol ", Canadian Journal of Chemistry 57(2071-2072), p 2071 11 Z.-L Kong, S Chi Yu, S Ai Dai, C.-C Tu, M.-H Pan, and Y.-C Liu (2011), "Polyoxygenated Sterols from Freshwater Clam", Helvetica Chimica Acta 94(5), p 892-896 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com PL -116- LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com PL -117- LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com ... VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - Phạm Thị Mai Hương NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ HOẠT TÍNH GÂY ĐỘC TẾ BÀO UNG THƯ TỪ HAI. .. 36 Gây độc tế bào, [100] gây độc, diệt côn trùng Gây độc tế bào [96] A dactylomela Gây độc tế bào, kháng khuẩn A dactylomela Kháng khuẩn, Gây độc tế bào A dactylomela Chống ký sinh trùng, gây độc. .. A fasciata Gây độc tế bào Chống số bệnh kí sinh trùng nhiệt đới Gây độc tế bào Gây độc tế bào Gây độc tế bào Aplykurodin A A kurodai Gây độc tế bào, [72] chống lại AXIN1 (tế bào ung thư gan) Terpenoid