PHẠM THỊ PHƯƠNG MAI NGHIÊN cứu đặc điểm THỰC vật, đa DẠNG DI TRUYỀN một số LOÀI THUỘC CHI ĐINH LĂNG POLYSCIAS j r forst g forster KHÓA LUẬN tốt NGHIỆP dược sĩ

BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI PHẠM THỊ PHƯƠNG MAI NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT, ĐA DẠNG DI TRUYỀN MỘT SỐ LOÀI THUỘC CHI ĐINH LĂNG POLYSCIAS J.R.Forst & G.Forster KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ NỘI - 2022 BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI PHẠM THỊ PHƯƠNG MAI Mã sinh viên: 1701364 NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT, ĐA DẠNG DI TRUYỀN MỘT SỐ LOÀI THUỘC CHI ĐINH LĂNG POLYSCIAS J.R.Forst & G.Forster KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng dẫn: PGS TS Trần Văn Ơn NCS Vũ Hương Thủy Nơi thực hiện: Bộ môn Thực vật Công ty Cổ phần Traphaco HÀ NỘI - 2022 LỜI CẢM ƠN Trước tiên, em xin gửi lời cảm ơn đến tồn thể thầy giáo Trường Đại học Dược Hà Nội, người dạy dỗ truyền đạt kiến thức quý báu cho em suốt thời gian học tập rèn luyện trường Em xin chân thành cảm ơn thầy cô môn Thực vật, trường Đại học Dược Hà Nội Em xin cảm ơn anh chị phòng Nghiên cứu phát triển Đông dược - Công ty cổ phần Traphaco tạo điều kiện thuận lợi tận tình hướng dẫn em trình thực tập, nghiên cứu Em xin chân thành cảm ơn NCS ThS.Vũ Hương Thủy định hướng ý tưởng nghiên cứu, tận tình hướng dẫn thí nghiệm, thường xun dạy kiến thức chuyên môn tạo điều kiện tốt giúp em học tập, rèn luyện thực khóa luận suốt q trình thực tập phịng Nghiên cứu phát triển - Công ty cổ phần Traphaco Đặc biệt, em gửi lời cảm ơn lòng biết ơn sâu sắc tới PGS TS Trần Văn Ơn Thầy người thầy tận tâm giúp em tìm đam mê mình, giúp em định hướng bước đường học tập nghiên cứu khoa học, mà thầy điểm tựa cho em lời khuyên chân thành sống, tiếp thêm động lực cho em suốt thời gian qua Đây hành trang quý giá để em tự tin, vững chãi đường nghiệp sống mai Cuối cùng, em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới ba mẹ, người thân gia đình, bạn bè ln bên cạnh, động viên tiếp thêm niềm tin, động lực cho em đường học tập rèn luyện thân Em xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 19 tháng 05 năm 2022 Sinh viên Phạm Thị Phương Mai MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Chi Đinh lăng (Polycias J.R.Forst & G.Forster) 1.1.1 Vị trí phân loại chi Polycias I.R.Forst & G.Forster 1.1.2 Đặc điểm thực vật chi Đinh lăng (Polycias J.R.Forst & G.Forster) 1.1.3 Khóa phân loại chi Đinh lăng (Polycias J.R.Forst & G.Forster) 1.2 Một số phương pháp phân loại thực vật .5 1.2.1 Phân loại thực vật dựa đặc điểm hình thái 1.2.2 Phân loại thực vật dựa đặc điểm di truyền 1.2.2.1 Đánh giá đa dạng di truyền dựa vào thị sinh hóa isozyme .6 1.2.2.2 Đánh giá đa dạng di truyền dựa vào thị phân tử DNA .6 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 10 2.1 Đối tượng nghiên cứu 10 2.2 Nguyên liệu thiết bị .10 2.2.1 Dung mơi, hóa chất 10 2.2.2 Thiết bị nghiên cứu 11 2.3 Phương pháp nghiên cứu 11 2.3.1 Mơ tả đặc điểm hình thái 11 2.3.2 Đánh giá đa dạng di truyền dựa thị ITS 12 CHƯƠNG KẾT QUẢ THỰC NGHIỆM 15 3.1 Đặc điểm hình thái tên khoa học mẫu nghiên cứu 15 3.1.1 Đặc điểm hình thái thực vật 15 3.1.2 Giám định tên khoa học mẫu nghiên cứu 24 3.2 Đa dạng di truyền mẫu nghiên cứu 25 3.2.1 Tách chiết DNA tổng số 25 3.2.2 Phân tích sản phẩm khuếch đại 25 3.2.3 Trình tự vùng ITS-rDNA mẫu Đinh lăng nghiên cứu 26 3.2.3.1 Khảo sát trình tự vùng ITS1-5,8SrRNA-ITS2 mẫu 26 3.2.3.2 Kết so sánh trình tự nucleotide vùng ITS-rDNA mẫu Đinh lăng 28 3.2.3.3 Kết xây dựng quan hệ phát sinh mẫu nghiên cứu thuộc chi Polyscias dựa trình tự nucleotide vùng ITS1-rRNA-ITS2 32 CHƯƠNG BÀN LUẬN 33 4.1 Đặc điểm hình thái phân loại chi Polyscias Việt Nam .33 4.2 Đa dạng di truyền số loài thuộc chi Polyscias 35 4.3 Bàn luận phân loài dựa đặc điểm thực vật đa dạng di truyền Polyscias .37 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 39 5.1 Kết luận .39 5.1.1 Về đặc điểm hình thái tên khoa học 39 5.1.2 Về đa dạng di truyền 39 5.2 Kiến nghị 39 DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT Viết tắt CTAB Tiếng Anh DAD Cetyltrimethylammonium Bromide Diode Array Detector DNA Deoxyribonucleic Acid dNTPs Deoxynucleotide triphosphates Tiếng Việt/Giải thích Một dung dịch đệm phân tích DNA Máy dị mảng diot Phân tử acid nucleic D/R EtBr Ethidium bromide Dài/ Rộng Chất nhuộm màu DNA ETS EDTA External transcribed spacer Ethylen diamin tetraacetic Vùng phiên mã bên Acid ethylen diamin tetraacetic acid FID GS Flame ionization Gas Chromatography Ion hóa lửa Sắc ký khí HPLC Sắc ký lỏng hiệu cao HPTLC High Performance Liquid Chromatography High Perfromance Thin ITS Layer Chromatography Internal Transcribed Spacer Sắc ký lớp mỏng hiệu cao Vùng phiên mã bên Intergenic spacer Inter Simple Sequence Repeat Large Subunit Malondialdehyde National Center for Biotechnology Information Vùng biến động bên Chuỗi lặp lại đơn giản Cộng hưởng từ hạt nhân Phép phân tích thành phần PCR PFS Nuclear Magnetic Resonance Principal Component Analysis Polymerase Chain Reaction Polyscias Fruticosa Saponin PVP Polyvinyl pyrrolidone rRNA Ribosomal Ribonucleic acid IGS ISSR LSU MDA NCBI NMR PCA Tiểu đơn vị lớn Malondialdehyd Trung tâm thông tin Công nghệ sinh học Quốc gia Phản ứng chuỗi trùng hợp 3-O- [β-d-glucopyranosyl- (1 → 4) β-d glucuronopyranosyl] acid oleanolic 28-O-β-d-glucopyranosyl este- Saponin Triterpenoid Polymer tan nước Vietnam Type Culture Bảo tàng giống chuẩn Vi sinh vật Collection Việt Nam RAPD Random Amplified Polymorphic DNA DNA đa hình khuếch đại ngẫu nhiên RFLP Restriction fragment length Đa hình chiều dài đoạn cắt giới hạn SCARs polymorphism Sequence Characterized Vùng khuếch đại mang tính đặc SDS Amplified Region Sodium Dodecyl Sulfate trưng chuỗi Chất hoạt động bề mặt anion SSU Small subunit Tiểu đơn vị nhỏ TAE Tris-acetat-EDTA Dung dịch đệm chứa hỗn hợp base TE Tris-EDTA Tris, acid acetic EDTA Dung dịch đệm chứa hỗn hợp base Tris, EDTA TLC Thin layer chromatography Sắc ký lớp mỏng VTCC DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Bảng phân loại chi Đinh lăng có mặt Việt Nam Bảng 2.1 Ký hiệu, thông tin mẫu Đinh lăng nghiên cứu .10 Bảng 2.2 Bảng thành phần phản ứng PCR 12 Bảng 2.3 Bảng chu trình chạy PCR 13 Bảng 3.1 Bảng hình ảnh tồn cành mang mẫu điển hình nhóm mẫu mang tên Đinh lăng Việt Nam 15 Bảng 3.2 Bảng hình ảnh quan sinh dưỡng mẫu Đinh lăng nhóm I Việt Nam .16 Bảng 3.3 Bảng hình ảnh quan sinh dưỡng mẫu Đinh lăng nhóm II Việt Nam .17 Bảng 3.4 Bảng hình ảnh quan sinh dưỡng mẫu Đinh lăng nhóm III Việt Nam .18 Bảng 3.5 Bảng hình ảnh quan sinh dưỡng mẫu Đinh lăng nhóm IV Việt Nam .19 Bảng 3.6 Bảng hình ảnh quan sinh dưỡng mẫu Đinh lăng nhóm V Việt Nam .20 Bảng 3.7 Bảng hình ảnh quan sinh dưỡng mẫu Đinh lăng nhóm VI Việt Nam .21 Bảng 3.8 Bảng so sánh đặc điểm thân nhóm Đinh lăng 22 Bảng 3.9 Bảng so sánh đặc điểm nhóm Đinh lăng 22 Bảng 3.10 Bảng so sánh đặc điểm chét nhóm Đinh lăng 23 Bảng 3.11: Tên khoa học mẫu nghiên cứu .24 Bảng 3.12 Độ dài trình tự thuộc mẫu Đinh lăng nghiên cứu 26 Bảng 3.13 Thành phần bốn loại nucleotide mẫu nghiên cứu 27 Bảng 3.14: Bảng so sánh hệ số tương đồng 15 cặp mẫu .30 Bảng 4.1 Bảng đặc điểm hình thái lồi Polyscias fruticosa (L.) Harms 33 Bảng 4.2 Bảng đặc điểm hình thái lồi Polyscias filicifolia (C.Moore ex E.Fourn.) L.H.Bailey .33 Bảng 4.3 Bảng đặc điểm hình thái lồi Polyscias guilfoylei (Bull) L.H.Bailey 34 Bảng 4.4 Bảng đặc điểm hình thái loài Polyscias balfouriana (André) L.H.Bailey 35 Bảng 4.5 Bảng đặc điểm hình thái lồi Polyscias scutellaria (Burm.f.) Fosberg 35 DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 3.1 Ảnh điện di DNA tổng số 15 mẫu Đinh lăng 25 Hình 3.2 Phổ điện di sản phẩm PCR với cặp mồi ITS1/ITS4 15 mẫu Đinh lăng với thang chuẩn Marker: 1Kb 26 Hình 3.3: So sánh gióng hàng trình tự nucleotide đoạn ITS-rDNA mẫu Đinh lăng đại diện 31 Hình 3.4 Cây quan hệ phát sinh mẫu khảo sát .32 ĐẶT VẤN ĐỀ Chi Polyscias phân bố rộng khắp Đông Nam Á khu vực Thái Bình Dương Các nghiên cứu loài thuộc chi cung cấp liệu thiết yếu thành phần hóa học tác dụng dược lý cao chiết số loài Polyscias chất chuyển hóa thứ cấp phân lập Rất nhiều nghiên cứu sinh học chứng minh cao chiết từ số loài chi Polyscias hợp chất mang hoạt tính sinh học chúng có tác dụng kháng khuẩn, kháng nấm, gây độc tế bào, kích thích miễn dịch, chữa lành vết thương chống hen suyễn [16] Tại Việt Nam, Đinh lăng trồng lâu đời nhiều địa phương coi vị thuốc bổ có giá trị Đinh lăng đối tượng đề tài nghiên cứu Nguyễn Trần Châu, Ngô Ứng Long, Nguyễn Thị Thu Hương, … nhiều năm [2], [6], [10] Như việc nhận biết phân biệt loài thuộc chi Polyscias đặc biệt quan trọng ứng dụng sau Mặc dù nội dung nghiên cứu trước chủ yếu xoay quanh mục tiêu xác định cấu trúc hợp chất, đánh giá tác dụng sinh học số lồi Đinh lăng định Trong có nghiên cứu Nguyễn Mạnh Tuyển đặc điểm thực vật Đinh lăng (P guilfoylei cv quinquefolia) [12]; nghiên cứu đa hình di truyền sử dụng kỹ thuật RAPD Nguyễn Thị Ngọc Trâm [15],… góp phần cung cấp liệu phân biệt loài thuộc chi Polyscias, nhiên đề cập đến loài P fruticosa thứ loài P guilfoylei Nhận tính cấp thiết việc làm rõ đầy đủ vấn đề trên, thực đề tài: “Nghiên cứu đặc điểm thực vật, đa dạng di truyền số loài thuộc chi Đinh lăng Polyscias J.R.Forst & G.Forster” với mục tiêu sau: (1) Mô tả đặc điểm thực vật giám định tên khoa học số loài thuộc chi Polyscias trồng Việt Nam (2) Đánh giá đa dạng di truyền số loài thuộc chi Polyscias trồng Việt Nam dựa thị ITS Mẫu Hình dạng lá/ Số chét Hình Cách dạng mép mọc kép Tỉ lệ Màu bẹ sắc cuống Lá kép có Xanh chét nhạt, có IV1.2 Uốn Mọc /1 lượn cách Lá kép có chét loang trắng Thế Kích cuống thước so với thân (dài, rộng) (cm) 18-25 1/4 Đứng 12-15 bạc mép Lá kép có 1-3-5 chét VI1.1 /1 Lá kép có 1-3-5 35-40 Uốn lượn Mọc cách Xanh đậm 1/3 Đứng 25-30 chét Lá kép có 1-3-5 Một chét mặt VI1.3 /1 Lá kép có 1-3-5 chét Uốn lượn Mọc cách xanh, mặt có mầu xanh bạc ánh tím 35-40 1/3 Đứng 25-30 Lá kép lần lông chim lẻ III4.1 35-40 Răng cưa gai Mọc cách Xanh đậm 1/3-1/4 Đứng Có 5-7-9 chét 20-25 Lá kép lần lông chim lẻ Răng cưa gai III4.2 Có 5-7-9 chét Mọc cách Xanh đậm, có loang trắng bạc 35-40 1/3-1/4 Đứng 15-20 Mẫu Hình dạng lá/ Số chét Hình Cách dạng mép mọc kép Tỉ lệ Màu bẹ sắc cuống Thế Kích cuống thước so với thân (dài, rộng) (cm) mép Lá kép có 1-3-5 chét VI1.2 Uốn Mọc Xanh /1 lượn cách đậm Lá kép có 1-3-5 chét 25-30 1/3 Đứng 20-25 Đặc điểm phân tích chét 15 mẫu Mẫu Dạng gân chét Thùy chét Đỉnh chét Gốc chét Kích thước chét (cm) I1.1/1 Hình mạng lơng chim Chia nhiều thùy nhọn không đều, gốc phiến thuôn nhọn thn dài, có nhiều gai nhọn thn dài, lệch xịe hẹp, tù I1.2/1 I1.3/1 Hình mạng lơng chim Hình mạng lơng chim Khơng có Xẻ thùy nhẹ hình trừng ngươc đầu, gai ngắn thn, có gai nhọn đầu Dài 2-3 Rộng 0,7-1,2 Hình dạng Răng cưa chét mép chét Elip Trung hẹp bình Elip rộng Trung bình Elip hẹp Trung bình 5-7 thường lệch 2-4 3-5 thường lệch 2-3 Thn dài dạng II1.1/ Hình mạng mũi mác hẹp Xẻ lông chim thùy nhẹ đầu non, khơng xẻ thn, có gai ngắn mềm 7-12 Mũi mác Cân đối Yếu hẹp 3-5 thùy già II1.2/ Hình mạng lơng chim Thn dài dạng mũi mác hẹp Xẻ thn, có gai thùy theo hình lơng ngắn mềm 10-16 Mũi mác Cân đối Yếu hẹp 1,5-3,5 chim III1.1 /1 III1.2 /1 Hình mạng lơng chim Hình mạng lơng chim III1.3 Hình mạng /1 chân vịt Hình mạng, IV1.1 tỏa từ /1 phần gốc Xuất chét gốc phiến lá, xẻ thùy nhẹ đỉnh chét Xuất chét gốc phiến lá, xẻ thùy nhẹ đỉnh chét Xẻ nhiều thùy cúc cần tây Xẻ nhẹ mép, tương ứng với gân bên tù, có cưa gai 5-9 Cân đối 3-5 Cân đối tròn cân tù đối trịn tù hình tim, cân đối 4-6 1,5-3 Trứng, 1,5-3 hình thận 10-12 10-12 Mạnh ovan Trứng, gần trịn, ovan 7-8 tù, có cưa gai Trứng, gần tròn, Tròn, ovan gần tròn giống vỏ sò Mạnh Trung bình Yếu Trịn, Hình mạng, IV1.2 tỏa từ /1 phần gốc Xẻ nhẹ mép, tương ứng với trịn tù gân bên hình tim, cân đối 10-12 ovan gần tròn 10-12 Yếu giống vỏ sò Tròn, Xẻ nhẹ VI1.1 /1 Hình mạng mép, tương trịn ứng với tù gân bên III4.1 Hình mạng Hình mạng lơng chim mép, tương ứng với gân bên 10-12 12-15 trịn tù hình tim, cân đối 15-20 lõm 12-15 giống Hình mạng lơng chim Yếu đĩa tù, phiến lá, xẻ thùy nhẹ có cưa gai 7-9 Trứng, gần 4-6 tròn, ovan 5-8 Trứng, gần 4-6 tròn, ovan Cân đối đỉnh chét III4.2 Yếu Tròn, Xuất chét gốc Xuất chét gốc phiến lá, xẻ thùy nhẹ đỉnh chét lõm giống đĩa Xẻ nhẹ VI1.3 /1 hình tim, cân đối tù, có cưa gai Cân đối Mạnh Mạnh Trịn, VI1.2 /1 Hình mạng Xẻ nhẹ mép, tương ứng với gân bên tròn tù hình tim, cân đối 12-15 10-15 lõm giống đĩa Yếu Phụ lục 1.3: Ảnh giấy chứng nhận mã số tiêu Phụ lục 1.4: Ảnh chụp tiêu ép khô mẫu nghiên cứu HNIP/18683/22 HNIP/18681/22 HNIP/18682/22 HNIP/18684/22 HNIP/18685/22 HNIP/18686/22 HNIP/18687/22 HNIP/18688/22 HNIP/18689/22 HNIP/18690/22 HNIP/18691/22 HNIP/18680/22 HNIP/18692/22 HNIP/18693/22 HNIP/18679/22 Phụ lục 1.5: Ảnh chụp phiếu giám định tên khoa học mẫu nghiên cứu PHỤ LỤC PHẦN ĐA DẠNG DI TRUYỀN Phụ lục 2.1: Ảnh chụp mẫu phân tích DNA 10 11 12 13 14 15 Phụ lục 2.2: Trình tự đoạn ITS-rDNA 15 mẫu Đinh lăng Polyscias sau xử lí LVI1.3 AGAGCTTTTA CTGGCGACGG GTCACCGCAC GACAGGAGAA GAGGGCATTT CACAACCACC 61 ACTTGTCGTG ACGTCCGTCG CCAATGACTC ACATTTGGGC CAACCGTGCG GTGAAACACG 121 GGAGGCCAAT ATCCGCCCCT CTGCCTCTAC TCCCGTGAGG GAATGCGGGG TTGGGGGGGG 181 ACGCGATGCG TGACGCCCAG GCAGACGTGC CCTCGACCTA CTGGCTTCGG GCGCAACTTG 241 CGTTCAAAGA CTCGATGGTT CACGGGATTC TGCAATTCAC ACCAAGTATC GCATTTCGCT 301 ACGTTCTTCA TCGATGCGAG AGCCGAGATA TCCGTTGCCG AGAGTCGTTT GTGTTTTAGA 361 AAGACGCCTC CGCCGCCCGC GAACGGGGGG GACGCGTGCA ATTCGGTTTG ATTTTCTTGG 421 CACATTCCGC GCCGGAGGTT CGTTGTCCGG TCGAGGAACG CCCGAGAGCG GTCCCCGGCC 481 ATGGGCTCAC GACTTGGGGA GCTTGCGCAC CCTTGGTCCC TCACCCGGTG TTTGCAGTAA 541 CGTGTTCGCG GGTCGTTCTG CTGTGCAGGT TTCGACAATG ATCCTTCCGC AGGTTCACCT 601 ACGGAAACCT TGTTACGACT TCTCCTT LI1.1 AGAGCTTTTA CTGGCGACGG GTCACCGCAC GACAGGAGAA GAGGGCATTT CACAACCACC 61 ACTTGTCGTG ACGTCCGTCG CCAATGACTC ACATTTGGGC CAACCGTGCG GTGAAACACG 121 GGAGGCCAAT ATCCGCCCCT CCGCCTCTAC TCCAGTGAGG GAATGCGGGG TTGGGGGGCG 181 ACGCGATGCG TGACGCCCAG GCAGACGTGC CCTCGACCTA CTGGCTTCGG GCGCAACTTG 241 CGTTCAAAGA CTCGATGGTT CACGGGATTC TGCAATTCAC ACCAAGTATC GCATTTCGCT 301 ACGTTCTTCA TCGATGCGAG AGCCGAGATA TCCGTTGCCG AGAGTCGTTT GTGTTTTAGA 361 AAGACGCCTC CGCCGCCCGC GAACGGGGGG GACGCGTGCA ATTCGGTTTG ATTTTCTTGG 421 CACATTCCGT GCCGGAGGTT CGTTGTCCGG TCGAGGAACG CCCGAGAGCG GTCCCCGGCC 481 ATGGGCTCAC GACTTGGGGA GCTTGCGCAC CCTTCGTCCC TCGCCCGGTG TTTGCAGTAA 541 CGTGTTCGCG GGTCGTTCTG CTGTGCAGGT TTCGACAATG ATCCTTCCGC AGGTTCACCT 601 ACGGAAACCT TGTTACGACT TCTCCTT LIII1.3 AGAGCTTTTA CTGGCGACGG GTCACCGCAC GACAGGAGAA GAGGGCATTT CACAACCACC 61 ACTTGTCGTG ACGTCCGTCG CCAATGACTC ACATTTGGGC CAACCGTGCG GTGAAACACG 121 GGAGGCCAAT ATCCGGCCCT CCGCCTCCAC TCCCGTGAGG GAATGCGGGG TTGGGGGGGG 181 ACGCGATGCG TGACGCCCAG GCAGACGTGC CCTCGACCTA CTGGCTTCGG GCGCAACTTG 241 CGTTCAAAGA CTCGATGGTT CACGGGATTC TGCAATTCAC ACCAAGTATC GCATTTCGCT 301 ACGTTCTTCA TCGATGCGAG AGCCGAGATA TCCGTTGCCG AGAGTCGTTT GTGTTTTAGA 361 AAGACGCCTC CGCCGCCCGC GAACGGGGGG GACGCGTGCA ATTCGGTTTG ATTTTCTTGG 421 CGCATTCCGC GCCGGAGGTT CGTTGTCCGG TCGAGGAACG CCCGAGGGCG GTCCCCGGCC 481 ATGGGCTCAC GACTTGGGGA GCTTGCGCAC CCTTCGTCCC TCACCCGGTG TTTGCAGTAA 541 CGTGTTCGCG GGTCGTTCTG CTGTGCAGGT TTCGACAATG ATCCTTCCGC AGGTTCACCT 601 ACGGAAACCT TGTTACGACT TCTCCTT LIV1.1 AGAGCTTTTA CTGGCGACGG GTCACCGCAC GACAGGAGAA GAGGGCATTT CACAACCACC 61 ACTTGTCGTG ACGTCCGTCG CCAATGACTC ACATTTGGGC CAACCGTGCG GTGAAACACG 121 GGAGGCCAAT ATCCGGCCCT CCGCCTCCAC TCCCGTGAGG GAATGTGGGG TTGGGGGGCG 181 ACGCGATGCG TGACGCCCAG GCAGACGTGC CCTCGACCTA CTGGCTTCGG GCGCAACTTG 241 CGTTCAAAGA CTCGATGGTT CACGGGATTC TGCAATTCAC ACCAAGTATC GCATTTCGCT 301 ACGTTCTTCA TCGATGCGAG AGCCGAGATA TCCGTTGCCG AGAGTCGTTT GTGTTTTAGA 361 AAGACGCCTC CGCCGCCCGC GAACGGGGGG GACGCGTGCA ATTCGGTTTG ATTTTCTTGG 421 CGCATTCCGC GCCGGAGGTT CGTTGTCCGG TCGAGGAACG CCCGAGGGCG GTCCCCGGCC 481 ATGGGCTCAC GACTTGGGGA GCTTGCGCAC CCTTCGTCCC TCACCCGGTG TTTGCAGTAA 541 CGTGTTCGCG GGTCGTTCTG CTGTGCAGGT TTCGACAATG ATCCTTCCGC AGGTTCACCT 601 ACGGAAACCT TGTTACGACT TCTCCTT LIII1.2 AGAGCTTTTA CTGGCGACGG GTCACCGCAC GACAGGAGAA GAGGGCATTT CACAACCACC 61 ACTTGTCGTG ACGTCCGTCG CCAATGACTC ACATTTGGGC CAACCGTGCG GTGAAACACG 121 GGAGGCCAAT ATCCGCCCCT CTGCCTCTAC TCCCGTGAGG GAATGCGGGG TTGGGGGGCG 181 ACGCGATGCG TGACGCCCAG GCAGACGTGC CCTCGACCTA CTGGCTTCGG GCGCAACTTG 241 CGTTCAAAGA CTCGATGGTT CACGGGATTC TGCAATTCAC ACCAAGTATC GCATTTCGCT 301 ACGTTCTTCA TCGATGCGAG AGCCGAGATA TCCGTTGCCG AGAGTCGTTT GTGTTTTAGA 361 AAGACGCCTC CGCCGCCCGC GAACGGGGGG GACGCGTGCA ATTCGGTTTG ATTTTCTTGG 421 CACATTCCGT GCCGGAGGTT CGTTGTCCGG TCGAGGAACG CCCGAGAGCG GTCCCCGGCC 481 ATGGGCTCAC GACTTGGGGA GCTTGCGCAC CCTTGGTCCC TCGCCCGGTG TTTGCAGTAA 541 CGTGTTCGCG GGTCGTTCTG CTGTGCAGGT TTCGACAATG ATCCTTCCGC AGGTTCACCT 601 ACGGAAACCT TGTTACGACT TCTCCTT LII1.2 AGAGCTTTTA CTGGCGACGG GTCACCGCAC GACAGGAGAA GAGGGCATTT CACAACCACC 61 ACTTGTCGTG ACGTCCGTCG CCAATGACTC ACATTTGGGC CAACCGTGCG GTGAAACACG 121 GGAGGCCAAT ATCCGCCCCT CCGCCTCTAC TCCCGTGAGG GAATGCGGGG TTGGGGGGCG 181 ACGCGATGCG TGACGCCCAG GCAGACGTGC CCTCGACCTA CTGGCTTCGG GCGCAACTTG 241 CGTTCAAAGA CTCGATGGTT CACGGGATTC TGCAATTCAC ACCAAGTATC GCATTTCGCT 301 ACGTTCTTCA TCGATGCGAG AGCCGAGATA TCCGTTGCCG AGAGTCGTTT GTGTTTTAGA 361 AAGACGCCTC CGCCGCCCGC GAACGGGGGG GACGCGTGCA ATTCGGTTTG ATTTTCTTGG 421 CACATTCCGT GCCGGAGGTT CGTTGTCCGG TCGAGGAACG CCCGAGAGCG GTCCCCGGCC 481 ATGGGCTCAC GACTTGGGGA GCTTGCGCAC CCTTCGTCCC TCGCCCGGTG TTTGCAGTAA 541 CGTGTTCGCG GGTCGTTCTG CTGTGCAGGT TTCGACAATG ATCCTTCCGC AGGTTCACCT 601 ACGGAAACCT TGTTACGACT TCTCCTT LIV1.2 AGAGCTTTTA CTGGCGACGG GTCACCGCAC GACAGGAGAA GAGGGCATTT CACAACCACC 61 ACTTGTCGTG ACGTCCGTCG CCAATGACTC ACATTTGGGC CAACCGTGCG GTGAAACACG 121 GGAGGCCAAT ATCCGGCCCT CCGCCTCCAC TCCCGTGAGG GAATGTGGGG TTGGGGGGCG 181 ACGCGATGCG TGACGCCCAG GCAGACGTGC CCTCGACCTA CTGGCTTCGG GCGCAACTTG 241 CGTTCAAAGA CTCGATGGTT CACGGGATTC TGCAATTCAC ACCAAGTATC GCATTTCGCT 301 ACGTTCTTCA TCGATGCGAG AGCCGAGATA TCCGTTGCCG AGAGTCGTTT GTGTTTTAGA 361 AAGACGCCTC CGCCGCCCGC GAACGGGGGG GACGCGTGCA ATTCGGTTTG ATTTTCTTGG 421 CGCATTCCGC GCCGGAGGTT CGTTGTCCGG TCGAGGAACG CCCGAGGGCG GTCCCCGGCC 481 ATGGGCTCAC GACTTGGGGA GCTTGCGCAC CCTTCGTCCC TCACCCGGTG TTTGCAGTAA 541 CGTGTTCGCG GGTCGTTCTG CTGTGCAGGT TTCGACAATG ATCCTTCCGC AGGTTCACCT 601 ACGGAAACCT TGTTACGACT TCTCCTT LVI1.2 AGAGCTTTTA CTGGCGACGG GTCACCGCAC GACAGGAGAA GAGGGCATTT CACAACCACC 61 ACTTGTCGTG ACGTCCGTCG CCAATGACTC ACATTTGGGC CAACCGTGCG GTGAAACACG 121 GGAGGCCAAT ATCCGGCCCT CCGCCTCCAC TCCCGTGAGG GAATGTGGGG TTGGGGGGCG 181 ACGCGATGCG TGACGCCCAG GCAGACGTGC CCTCGACCTA CTGGCTTCGG GCGCAACTTG 241 CGTTCAAAGA CTCGATGGTT CACGGGATTC TGCAATTCAC ACCAAGTATC GCATTTCGCT 301 ACGTTCTTCA TCGATGCGAG AGCCGAGATA TCCGTTGCCG AGAGTCGTTT GTGTTTTAGA 361 AAGACGCCTC CGCCGCCCGC GAACGGGGGG GACGCGTGCA ATTCGGTTTG ATTTTCTTGG 421 CGCATTCCGC GCCGGAGGTT CGTTGTCCGG TCGAGGAACG CCCGAGGGCG GTCCCCGGCC 481 ATGGGCTCAC GACTTGGGGA GCTTGCGCAC CCTTCGTCCC TCACCCGGTG TTTGCAGTAA 541 CGTGTTCGCG GGTCGTTCTG CTGTGCAGGT TTCGACAATG ATCCTTCCGC AGGTTCACCT 601 ACGGAAACCT TGTTACGACT TCTCCTT LI1.3 AGAGCTTTTA CTGGCGACGG GTCACCGCAC GACAGGAGAA GAGGGCATTT CACAACCACC 61 ACTTGTCGTG ACGTCCGTCG CCAATGACTC ACATTTGGGC CAACCGTGCG GTGAAACACG 121 GGAGGCCAAT ATCCGCCCCT CCGCCTCTAC TCCAGTGAGG GAATGCGGGG TTGGGGGGCG 181 ACGCGATGCG TGACGCCCAG GCAGACGTGC CCTCGACCTA CTGGCTTCGG GCGCAACTTG 241 CGTTCAAAGA CTCGATGGTT CACGGGATTC TGCAATTCAC ACCAAGTATC GCATTTCGCT 301 ACGTTCTTCA TCGATGCGAG AGCCGAGATA TCCGTTGCCG AGAGTCGTTT GTGTTTTAGA 361 AAGACGCCTC CGCCGCCCGC GAACGGGGGG GACGCGTGCA ATTCGGTTTG ATTTTCTTGG 421 CACATTCCGT GCCGGAGGTT CGTTGTCCGG TCGAGGAACG CCCGAGAGCG GTCCCCGGCC 481 ATGGGCTCAC GACTTGGGGA GCTTGCGCAC CCTTCGTCCC TCGCCCGGTG TTTGCAGTAA 541 CGTGTTCGCG GGTCGTTCTG CTGTGCAGGT TTCGACAATG ATCCTTCCGC AGGTTCACCT 601 ACGGAAACCT TGTTACGACT TCTCCTT LI1.2 AGAGCTTTTA CTGGCGACGG GTCACCGCAC GACAGGAGAA GAGGGCATTT CACAACCACC 61 ACTTGTCGTG ACGTCCGTCG CCAATGACTC ACATTTGGGC CAACCGTGCG GTGAAACACG 121 GGAGGCCAAT ATCCGCCCCT CCGCCTCTAC TCCAGTGAGG GAATGCGGGG TTGGGGGGCG 181 ACGCGATGCG TGACGCCCAG GCAGACGTGC CCTCGACCTA CTGGCTTCGG GCGCAACTTG 241 CGTTCAAAGA CTCGATGGTT CACGGGATTC TGCAATTCAC ACCAAGTATC GCATTTCGCT 301 ACGTTCTTCA TCGATGCGAG AGCCGAGATA TCCGTTGCCG AGAGTCGTTT GTGTTTTAGA 361 AAGACGCCTC CGCCGCCCGC GAACGGGGGG GACGCGTGCA ATTCGGTTTG ATTTTCTTGG 421 CACATTCCGT GCCGGAGGTT CGTTGTCCGG TCGAGGAACG CCCGAGAGCG GTCCCCGGCC 481 ATGGGCTCAC GACTTGGGGA GCTTGCGCAC CCTTCGTCCC TCGCCCGGTG TTTGCAGTAA 541 CGTGTTCGCG GGTCGTTCTG CTGTGCAGGT TTCGACAATG ATCCTTCCGC AGGTTCACCT 601 ACGGAAACCT TGTTACGACT TCTCCTT LVI1.1 AGAGCTTTTA CTGGCGACGG GTCACCGCAC GACAGGAGAA GAGGGCATTT CACAACCACC 61 ACTTGTCGTG ACGTCCGTCG CCAATGACTC ACATTTGGGC CAACCGTGCG GTGAAACACG 121 GGAGGCCAAT ATCCGGCCCT CCGCCTCCAC TCCCGTGAGG GAATGTGGGG TTGGGGGGCG 181 ACGCGATGCG TGACGCCCAG GCAGACGTGC CCTCGACCTA CTGGCTTCGG GCGCAACTTG 241 CGTTCAAAGA CTCGATGGTT CACGGGATTC TGCAATTCAC ACCAAGTATC GCATTTCGCT 301 ACGTTCTTCA TCGATGCGAG AGCCGAGATA TCCGTTGCCG AGAGTCGTTT GTGTTTTAGA 361 AAGACGCCTC CGCCGCCCGC GAACGGGGGG GACGCGTGCA ATTCGGTTTG ATTTTCTTGG 421 CGCATTCCGC GCCGGAGGTT CGTTGTCCGG TCGAGGAACG CCCGAGGGCG GTCCCCGGCC 481 ATGGGCTCAC GACTTGGGGA GCTTGCGCAC CCTTCGTCCC TCACCCGGTG TTTGCAGTAA 541 CGTGTTCGCG GGTCGTTCTG CTGTGCAGGT TTCGACAATG ATCCTTCCGC AGGTTCACCT 601 ACGGAAACCT TGTTACGACT TCTCCTT LIII4.1 AGAGCTTTTA CTGGCGACGG GTCACCGCAC GACAGGAGAA GAGGGCATTT CACAACCACC 61 ACTTGTCGTG ACGTCCGTCG CCAATGACTC ACATTTGGGC CAACCGTGCG GTGAAACACG 121 GGAGGCCAAT ATCCGCCCCT CTGCCTCTAC TCCCGTGAGG GAATGCGGGG TTGGGGGGCG 181 ACGCGATGCG TGACGCCCAG GCAGACGTGC CCTCGACCTA CTGGCTTCGG GCGCAACTTG 241 CGTTCAAAGA CTCGATGGTT CACGGGATTC TGCAATTCAC ACCAAGTATC GCATTTCGCT 301 ACGTTCTTCA TCGATGCGAG AGCCGAGATA TCCGTTGCCG AGAGTCGTTT GTGTTTTAGA 361 AAGACGCCTC CGCCGCCCGC GAACGGGGGG GACGCGTGCA ATTCGGTTTG ATTTTCTTGG 421 CACATTCCGT GCCGGAGGTT CGTTGTCCGG TCGAGGAACG CCCGAGAGCG GTCCCCGGCC 481 ATGGGCTCAC GACTTGGGGA GCTTGCGCAC CCTTGGTCCC TCGCCCGGTG TTTGCAGTAA 541 CGTGTTCGCG GGTCGTTCTG CTGTGCAGGT TTCGACAATG ATCCTTCCGC AGGTTCACCT 601 ACGGAAACCT TGTTACGACT TCTCCTT LIII1.1 AGAGCTTTTA CTGGCGACGG GTCACCGCAC GACAGGAGAA GAGGGCATTT CACAACCACC 61 ACTTGTCGTG ACGTCCGTCG CCAATGACTC ACATTTGGGC CAACCGTGCG GTGAAACACG 121 GGAGGCCAAT ATCCGCCCCT CTGCCTCTAC TCCCGTGAGG GAATGCGGGG TTGGGGGGCG 181 ACGCGATGCG TGACGCCCAG GCAGACGTGC CCTCGACCTA CTGGCTTCGG GCGCAACTTG 241 CGTTCAAAGA CTCGATGGTT CACGGGATTC TGCAATTCAC ACCAAGTATC GCATTTCGCT 301 ACGTTCTTCA TCGATGCGAG AGCCGAGATA TCCGTTGCCG AGAGTCGTTT GTGTTTTAGA 361 AAGACGCCTC CGCCGCCCGC GAACGGGGGG GACGCGTGCA ATTCGGTTTG ATTTTCTTGG 421 CACATTCCGT GCCGGAGGTT CGTTGTCCGG TCGAGGAACG CCCGAGAGCG GTCCCCGGCC 481 ATGGGCTCAC GACTTGGGGA GCTTGCGCAC CCTTGGTCCC TCGCCCGGTG TTTGCAGTAA 541 CGTGTTCGCG GGTCGTTCTG CTGTGCAGGT TTCGACAATG ATCCTTCCGC AGGTTCACCT 601 ACGGAAACCT TGTTACGACT TCTCCTT LII1.1 AGAGCTTTTA CTGGCGACGG GTCACCGCAC GACAGGAGAA GAGGGCATTT CACAACCACC 61 ACTTGTCGTG ACGTCCGTCG CCAATGACTC ACATTTGGGC CAACCGTGCG GTGAAACACG 121 GGAGGCCAAT ATCCGCCCCT CCGCCTCTAC TCCCGTGAGG GAATGCGGGG TTGGGGGGCG 181 ACGCGATGCG TGACGCCCAG GCAGACGTGC CCTCGACCTA CTGGCTTCGG GCGCAACTTG 241 CGTTCAAAGA CTCGATGGTT CACGGGATTC TGCAATTCAC ACCAAGTATC GCATTTCGCT 301 ACGTTCTTCA TCGATGCGAG AGCCGAGATA TCCGTTGCCG AGAGTCGTTT GTGTTTTAGA 361 AAGACGCCTC CGCCGCCCGC GAACGGGGGG GACGCGTGCA ATTCGGTTTG ATTTTCTTGG 421 CACATTCCGT GCCGGAGGTT CGTTGTCCGG TCGAGGAACG CCCGAGAGCG GTCCCCGGCC 481 ATGGGCTCAC GACTTGGGGA GCTTGCGCAC CCTTCGTCCC TCGCCCGGTG TTTGCAGTAA 541 CGTGTTCGCG GGTCGTTCTG CTGTGCAGGT TTCGACAATG ATCCTTCCGC AGGTTCACCT 601 ACGGAAACCT TGTTACGACT TCTCCTT LIII4.2 AGAGCTTTTA CTGGCGACGG GTCACCGCAC GACAGGAGAA GAGGGCATTT CACAACCACC 61 ACTTGTCGTG ACGTCCGTCG CCAATGACTC ACATTTGGGC CAACCGTGCG GTGAAACACG 121 GGAGGCCAAT ATCCGCCCCT CTGCCTCTAC TCCCGTGAGG GAATGCGGGG TTGGGGGGCG 181 ACGCGATGCG TGACGCCCAG GCAGACGTGC CCTCGACCTA CTGGCTTCGG GCGCAACTTG 241 CGTTCAAAGA CTCGATGGTT CACGGGATTC TGCAATTCAC ACCAAGTATC GCATTTCGCT 301 ACGTTCTTCA TCGATGCGAG AGCCGAGATA TCCGTTGCCG AGAGTCGTTT GTGTTTTAGA 361 AAGACGCCTC CGCCGCCCGC GAACGGGGGG GACGCGTGCA ATTCGGTTTG ATTTTCTTGG 421 CACATTCCGT GCCGGAGGTT CGTTGTCCGG TCGAGGAACG CCCGAGAGCG GTCCCCGGCC 481 ATGGGCTCAC GACTTGGGGA GCTTGCGCAC CCTTGGTCCC TCGCCCGGTG TTTGCAGTAA 541 CGTGTTCGCG GGTCGTTCTG CTGTGCAGGT TTCGACAATG ATCCTTCCGC AGGTTCACCT 601 ACGGAAACCT TGTTACGACT TCTCCTT ... TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI PHẠM THỊ PHƯƠNG MAI Mã sinh viên: 1701364 NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT, ĐA DẠNG DI TRUYỀN MỘT SỐ LOÀI THUỘC CHI ĐINH LĂNG POLYSCIAS J. R. Forst & G. Forster KHÓA LUẬN TỐT... trí phân loại chi Polycias I .R. Forst & G. Forster 1.1.2 Đặc điểm thực vật chi Đinh lăng (Polycias J. R. Forst & G. Forster) 1.1.3 Khóa phân loại chi Đinh lăng (Polycias J. R. Forst & G. Forster) ... vấn đề trên, thực đề tài: ? ?Nghiên cứu đặc điểm thực vật, đa dạng di truyền số loài thuộc chi Đinh lăng Polyscias J. R. Forst & G. Forster? ?? với mục tiêu sau: (1) Mô tả đặc điểm thực vật giám định