GIANG THỊ MINH ANH NGHIÊN cứu TỔNG hợp FLUTAMID làm NGUYÊN LIỆU THUỐC điều TRỊ UNG THƢ KHÓA LUẬN tốt NGHIỆP dƣợc sĩ

BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI GIANG THỊ MINH ANH MÃ SINH VIÊN: 1701009 NGHIÊN CỨU TỔNG HỢP FLUTAMID LÀM NGUYÊN LIỆU THUỐC ĐIỀU TRỊ UNG THƢ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ Người hướng dẫn: PGS TS Đinh Thị Thanh Hải PGS TS Vũ Trần Anh Nơi thực hiện: Bộ mơn Hóa Hữu Trƣờng Đại học Dƣợc Hà Nội HÀ NỘI – 2022 MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH DANH MỤC CÁC SƠ ĐỒ ĐẶT VẤN ĐỀ CHƢƠNG TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan ung thƣ tiền liệt tuyến 1.2 Tổng quan flutamid 1.2.1 Cấu trúc hóa học 1.2.2 Tính chất lý hóa 1.2.3 Dạng bào chế biệt dược 1.2.4 Dược lý dược động học 1.2.5 Một số tiêu chuẩn chất lượng 1.3 Các phƣơng pháp tổng hợp flutamid 1.3.1 Phương pháp Baker J W cộng (M1) 1.3.2 Phương pháp Neri R O., Gold E cộng (M2) 1.3.3 Phương pháp Peer L cộng (M3) 1.3.4 Phương pháp Morris J J cộng (M4) 1.3.5 Phương pháp Passarella D cộng (M5) 10 1.3.6 Phương pháp Stabile R G cộng (M6) 11 1.3.7 Phương pháp Bandgar B P cộng (M7) 11 1.3.8 Phương pháp Ghaffarzadeh M cộng (M8) 13 1.3.9 Phương pháp Tan B Y H cộng (M9) 14 1.3.10 Phương pháp Hoang L T cộng (M10) 15 1.3.11 Phương pháp McPherson C G cộng (M11) 16 1.3.12 Phương pháp Wang J cộng (M12) 17 1.3.13 Phương pháp Zhao Q cộng (M13) 19 1.3.14 Phương pháp Trần Văn Lộc cộng (M14) 20 CHƢƠNG NGUYÊN LIỆU, THIẾT BỊ, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 22 2.1 Nguyên liệu thiết bị 22 2.1.1 Hóa chất 22 2.1.2 Thiết bị 22 2.2 Nội dung nghiên cứu 23 2.2.1 Phương pháp tổng hợp flutamid 23 2.2.2 Phương pháp tái thu hồi cyanuric acid 23 2.2.3 Kiểm tra độ tinh khiết xác định cấu trúc sản phẩm tổng hợp 23 2.3 Phƣơng pháp nghiên cứu 23 2.3.1 Phương pháp tổng hợp flutamid 23 2.3.2 Phương pháp tái thu hồi cyanuric clorid 25 2.3.3 Xác nhận cấu trúc flutamid tổng hợp 25 CHƢƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 27 3.1 Xây dựng phƣơng pháp tổng hợp flutamid 27 3.1.1 Khảo sát giai đoạn 1: Tổng hợp 2,4,6-triacycloxy-1,3,5-triazin 27 3.1.2 Khảo sát giai đoạn 2: Tổng hợp 2-methyl-N-[3-trifluoromethyl phenyl] propionamid 30 3.1.3 Khảo sát giai đoạn 3: Tổng hợp Flutamid 31 3.2 Khảo sát phƣơng pháp tái thu hồi cyanuric clorid 33 3.3 Nâng cấp quy mô tổng hợp flutamid lên 50 g/mẻ 35 3.3.1 Sơ đồ tổng quát phản ứng: Error! Bookmark not defined 3.3.2 Mơ tả quy trình: 35 3.4 Nâng cấp quy mô tổng hợp flutamid lên 500 g/mẻ 37 Mô tả quy trình: 37 3.5 Khẳng định cấu trúc flutamid phƣơng pháp phổ 39 3.5.1 Kết phân tích phổ hồng ngoại (IR) 39 3.5.2 Kết phân tích phổ khối lượng (MS) 40 3.5.3 Kết phân tích phổ cộng hưởng từ hạt nhân (NMR) 41 CHƢƠNG BÀN LUẬN 43 4.1 Bàn luận phƣơng pháp tổng hợp flutamid 43 4.1.1 Phương pháp tổng hợp 43 4.1.2 Thiết kế quy trình tiến hành 43 4.2 Bàn luận phổ chất thu đƣợc 44 4.2.1 Về phổ hồng ngoại IR flutamid 44 4.2.2 Về phổ khối (MS) flutamid 44 4.2.3 Về phổ NMR flutamid 44 4.3 Bàn luận nâng cấp quy mô tổng hợp flutamid 50g/mẻ 500g/mẻ 46 4.4 Bàn luận tính xanh q trình thực 46 4.5 Khảo sát độ tinh khiết cyanuric clorid tái thu hồi 47 4.5.1 Khẳng định cấu trúc hóa học Cyanuric thu hồi dựa kết phân tích phổ hồng ngoại 47 4.5.2 Khẳng định cấu trúc hóa học Cyanuric thu hồi dựa kết phân tích phổ cộng hưởng từ hạt nhân 48 4.5.3 Về phổ khối lượng (MS) 48 CHƢƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 49 TÀI LIỆU THAM KHẢO TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT 13 C-NMR Phổ cộng hưởng từ carbon 13 (Carbon-13 nuclear magnetic resonance spectroscopy) H-NMR Phổ cộng hưởng từ hạt nhân proton (Proton nuclear magnetic ∆T resonance spectroscopy) Khoảng nhiệt độ nóng chảy CTPT Cơng thức phân tử DCM Dicloromethan DSC Quét nhiệt lượng vi sai (Differential scanning calorimetry) DMF N,N-Dimethyl formamid DMSO Dimethylsulfoxid đvC Đơn vị carbon, dalton Đương lượng (equivalent) eq ESI-MS Phổ khối lượng phun mù điện tử (Electrospray ionization mass spectrometry) h Giờ IR Phổ hồng ngoại (Infrared spectroscopy) Me Methyl (-CH3) MS Phổ khối lượng (Mass spectrometry) Rf Hệ số lưu giữ (Retention factor) SKLM Sắc ký lớp mỏng t°nc Nhiệt độ nóng chảy TT v/v Số thứ tự Tỷ lệ thể tích/ thể tích XRD Nhiễu xạ tia X (X-ray differaction) ̅ Số sóng δ Độ chuyển dịch hóa học 13 C-NMR Phổ cộng hưởng từ carbon 13 (Carbon-13 nuclear magnetic resonance spectroscopy) H-NMR Phổ cộng hưởng từ hạt nhân proton (Proton nuclear magnetic resonance spectroscopy) ∆T Khoảng nhiệt độ nóng chảy CTPT Công thức phân tử DCM Dicloromethan DSC Quét nhiệt lượng vi sai (Differential scanning calorimetry) DMF N,N-Dimethyl formamid DMSO Dimethylsulfoxid đvC Đơn vị carbon, dalton eq Đương lượng (equivalent) ESI-MS Phổ khối lượng phun mù điện tử (Electrospray ionization mass spectrometry) h Giờ IR Phổ hồng ngoại (Infrared spectroscopy) Me Methyl (-CH3) MS Phổ khối lượng (Mass spectrometry) Rf Hệ số lưu giữ (Retention factor) SKLM t°nc Sắc ký lớp mỏng Nhiệt độ nóng chảy DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Một số chế phẩm thị trường flutamid Bảng 1.2 Một số đánh giá chất lượng flutamid dược điển Bảng 2.1 Danh mục dung mơi, hóa chất 22 Bảng 2.2 Danh mục dụng cụ, thiết bị 22 Bảng 3.1 Kết khảo sát ảnh hưởng tỷ lệ cyanuric clorid / N-methylmorpholin tới hiệu suất phản ứng tổng hợp 2,4,6-triacycloxy-1,3,5-triazin 28 Bảng 3.2 Kết khảo sát ảnh hưởng nhiệt độ tới hiệu suất phản ứng tổng hợp 2,4,6-triacycloxy-1,3,5-triazin 28 Bảng 3.3 Kết khảo sát ảnh hưởng dung môi tiến hành phản ứng tới hiệu suất phản ứng tổng hợp 2,4,6-triacycloxy-1,3,5-triazin 29 Bảng 3.4 Kết khảo sát ảnh hưởng tỷ lệ acid isobutyric tới hiệu suất phản ứng tổng hợp 2,4,6-triacycloxy-1,3,5-triazin 29 Bảng 3.5 Kết khảo sát ảnh hưởng (trifluoromethyl)anilin tới hiệu suất tỷ lệ cyanuric clorid/ 3- phản ứng tổng hợp 2-methyl-N-[3- (trifluoromethyl)phenyl]propionamid 30 Bảng 3.6 Kết khảo sát ảnh hưởng thời gian tới hiệu suất phản ứng tổng hợp 2-methyl-N-[3-(trifluoromethyl)phenyl] propionamid 31 Bảng 3.7 Kết khảo sát ảnh hưởng dung môi kết tinh lại tới hiệu suất phản ứng tổng hợp 2-methyl-N-[3-(trifluoromethyl)phenyl] propionamid 31 Bảng 3.8 Kết khảo sát ảnh hưởng tác nhân nitrit hóa tới hiệu suất phản ứng tổng hợp flutamid 32 Bảng 3.9 Kết khảo sát ảnh hưởng thời gian tới hiệu suất phản ứng tổng hợp flutamid 32 Bảng 3.10 Kết khảo sát ảnh hưởng dung môi kết tinh lại tới hiệu suất phản ứng tổng hợp flutamid 33 Bảng 3.11 Kết khảo sát ảnh hưởng thể tích phosphoryl clorid tới hiệu suất thu hồi cyanuric clorid 34 Bảng 3.12 Kết khảo sát ảnh hưởng thời gian tới hiệu suất trình tái thu hồi cyanruic clorid 34 Bảng 3.13 Kết khảo sát ảnh hưởng dung môi kết tinh lại tới hiệu suất trình tái thu hồi cyanuric clorid 35 Bảng 3.14 Kết phân tích phổ IR flutamid quy mô 10g/mẻ 39 Bảng 3.15 Kết phân tích phổ IR flutamid quy mô 50g/mẻ 39 Bảng 3.16 Kết phân tích phổ IR flutamid quy mô 500g/mẻ 40 Bảng 3.17 Bảng kết phẩn tích phổ khối lượng (MS) flutamid 40 Bảng 3.18 Kết phân tích phổ cộng hưởng từ hạt nhân (1H-NMR, 13C-NMR) flutamid quy mô 10g/mẻ 41 Bảng 3.19 Kết phân tích phổ cộng hưởng từ hạt nhân (1H-NMR, 13C-NMR) flutamid quy mô 50g/mẻ 41 Bảng 3.20 Kết phân tích phổ cộng hưởng từ hạt nhân (1H-NMR, 13C-NMR) flutamid quy mô 500g/mẻ 42 DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1 Các tạp chất đánh gia chất lượng flutamid Hình 1.2 Tóm tắt quy trình tổng hợp flutamid Hình 1.3 Sơ đồ tổng hợp flutamid từ 4-nitro-3-(trifluoromethyl)anilin Hình 1.4 Sơ đồ tổng hợp flutamid theo phương pháp Neri R O., Gold E cộng Hình 1.5 Sơ đồ tổng hợp flutamid theo phương pháp Peer L cộng Hình 1.6 Sơ đồ phương pháp Morris J J cộng 10 Hình 1.7 Sơ đồ phương pháp Passarella D cộng (1999) 10 Hình 1.8 Sơ đồ phương pháp Stabile R G cộng (2003) 11 Hình 1.9.Sơ đồ tổng hợp flutamid theo phương pháp Bandgar B P cộng (2006) 12 Hình 1.10 Sơ đị tổng hợp theo phương pháp Ghaffarzadeh M cộng 13 Hình 1.11 Phương pháp Tan B Y H cộng (2015) 14 Hình 1.12 Sơ đồ tổng hợp flutamid từ 4-nitro-3-(trifluoromethyl)anilin sử dụng xúc tác Zr-AzoBDC 15 Hình 1.13 Sơ đồ phương pháp McPherson C G cộng (2016) 17 Hình 1.14 Sơ đồ phương pháp Wang J cộng 18 Hình 1.15 Phương pháp Zhao Q cộng (2018) 19 Hình 1.16 Phương pháp Trần Văn Lộc cộng (2018) 20 Hình 2.1 Sơ đồ tổng hợp flutamid 24 Hình 3.1 phương pháp tái thu hồi cyanuric clorid 33 ĐẶT VẤN ĐỀ Ung thư tiền liệt tuyến bệnh ung thư phổ biến thứ hai nam giới nguyên nhân gây tử vong hàng đầu [27] Tỷ lệ mắc bệnh tiếp tục gia tăng khác quần thể Ở Việt Nam, tỉ lệ ung thư tiền liệt tuyến tương đối thấp, nhiên, báo cáo bệnh viện cho thấy xu hướng tăng lên năm gần Theo báo cáo WHO năm 2020, Việt Nam có 6248 ca mắc ung thư tiền liệt tuyến nam giới, xếp thứ tỉ lệ mắc xếp thứ 10 tỉ lệ tử vong.[27] Bên cạnh phương pháp điều trị ung thư truyền thống phẫu thuật, xạ trị, hóa chất hay liệu pháp ức chế androgen cắt tinh hoàn ngoại khoa hay thuốc, nhóm thuốc nội tiết sử dụng rộng rãi cho bệnh nhân Theo báo cáo bệnh viện K bệnh viện u bướu, việc sử dụng thuốc flutamid (Eulexin) mang lại hiệu đáng kể cho bệnh nhân ung thư tiền liệt tuyến Hiện nay, flutamid sử dụng bệnh viện hoàn toàn từ nguồn nhập với giá thành cao, gây khó khăn cho nhiều bệnh nhân Cho đến nay, nghiên cứu tổng hợp flutamid Việt Nam chưa nhiều Ngồi ra, quy trình tổng hợp giới công bố chưa đáp ứng tính “xanh” gây lãng phí q trình tổng hợp Do đó, chúng tơi thực nghiên cứu tổng hợp flutamid với đề tài “ Nghiên cứu tổng hợp Flutamid làm nguyên liệu thuốc điều trị ung thư” với mục tiêu sau: - Xây dựng quy trình tổng hợp flutamid - Nâng cấp quy mô tổng hợp flutamid lên 50g/mẻ 500g/mẻ Phụ lục 1: Phổ IR flutamid quy mô 10g/mẻ Phụ lục 2: Phổ IR flutamid thu đƣợc quy mô 50g/mẻ Phụ lục 3: Phổ IR flutamid thu đƣợc quy mô 500g/mẻ Phụ lục 4: Phổ 1H-NMR flutamid tổng hợp đƣợc lô 10g/mẻ Phụ lục 5: Phổ 13C-NMR flutamid lô 10g/mẻ Phụ lục 6: Phổ 1H-NMR flutamid tổng hợp lô 50g/mẻ Phụ lục 7: Phổ 13C-NMR flutamid tổng hợp lô 50g/mẻ Phụ lục 8: Phổ 1H-NMR flutamid thu đƣợc quy mô 500g/mẻ Phụ lục 9: Phổ 13C-NMR flutamid thu đƣợc quy mô 500g/mẻ Phụ lục 10: Phổ khối lƣợng (MS) flutamid thu đƣợc lô 10g/mẻ Phụ lục 11: Phổ khối lƣợng (MS) flutamid thu đƣợc lô 50g/mẻ Phụ lục 12: Phổ khối lƣợng (MS) flutamid tổng hợp đƣợc lô 500g/mẻ Phụ lục 13: Tóm tắt phƣơng pháp tổng hợp flutamid tài liệu công bố BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI GIANG THỊ MINH ANH NGHIÊN CỨU TỔNG HỢP FLUTAMID LÀM NGUYÊN LIỆU THUỐC ĐIỀU TRỊ UNG THƢ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ HÀ NỘI – 2022 ... “ Nghiên cứu tổng hợp Flutamid làm nguyên liệu thuốc điều trị ung thư” với mục tiêu sau: - Xây dựng quy trình tổng hợp flutamid - Nâng cấp quy mơ tổng hợp flutamid lên 50g/mẻ 500g/mẻ CHƢƠNG TỔNG... nay, nghiên cứu tổng hợp flutamid Việt Nam chưa nhiều Ngồi ra, quy trình tổng hợp giới công bố chưa đáp ứng tính “xanh” gây lãng phí q trình tổng hợp Do đó, chúng tơi thực nghiên cứu tổng hợp flutamid. .. mạnh tổng hợp nguyên liệu nghiên cứu bào chế thuốc, nhóm nghiên cứu khảo sát sơ lựa chọn đường tổng hợp flutamid qua đường tạo phức với cyanuric clorid B.P Bandgar để sản xuất nguyên liệu flutamid