SỬ DỤNG, BẢO TRÌ MÁY QUANG PHỔ KẾ TRONG PHÒNG XÉT NGHIỆM

1 SỬ DỤNG, BẢO TRÌ MÁY QUANG PHỔ KẾ TRONG PHÒNG XÉT NGHIỆM www.triphuc.com Đánh giá máy quang phổ kế • Máy quang phổ kế thường dùng phổ biến phân tích xét nghiệm hóa học lâm sàng • Thường dùng kỹ thuật khôi phục liệu hệ thống tự động tạm thời không hoạt động tốt • Ngun lý đằng sau việc phân tích nhiều xét nghiệm hóa học lâm sàng FULLY®/ScreenMaster®, máy quang phổ kế www.triphuc.com Mối liên quan hệ số truyền nồng độ • Chùm ánh sáng đơn sắc xuyên qua ống cuvet có chứa thành phần dung dịch hấp thụ lượng xạ bước sóng định • Một số ánh sáng gốc hấp thụ, số phản chiếu lại số truyền qua • Mật độ lượng xạ truyền qua (ls) tia sáng gốc (Io) www.triphuc.com Mối liên quan hệ số truyền nồng độ • Hệ số truyền (T) thành phần dung dịch tỷ lệ ánh sáng gốc truyền qua : Hệ số truyền = T = Is/Io %T= %T = Is/Io X 100% www.triphuc.com Mối liên quan hệ số truyền nồng độ Hệ số truyền = %T= T = Is/Io %T = Is/Io X 100% • Khi nồng độ thành phần dung dịch tăng lên, nhiều ánh sáng hấp thụ dung dịch ánh sáng truyền qua dung dịch • %T thay đổi cách tỷ lệ nghịch logarit với nồng độ • Chỉ có ánh sáng truyền qua đo www.triphuc.com Mối liên quan việc hấp phụ nồng độ • Số lượng ánh sáng hấp phụ dung dịch tỷ lệ với số phân tử dung dịch mà ánh sáng qua • Do vậy, nồng độ chất dung dịch tỷ lệ thuận với số lượng ánh sáng hấp phụ, tỷ lệ nghịch logarit với lượng ánh sáng truyền qua www.triphuc.com Mối liên quan việc hấp phụ nồng độ • Mối liên quan toán học ABS nồng độ : Chất hấp phụ Đinh luật BEER: A = abc Độ dài Khả hấp phụ chất đo (một số dung dịch đặc biệt bước sóng cụ thể) ống cuvet Nồng độ (thường cm) chất đo Nếu độ dài (b) khả hấp phụ (a)là số, việc hấp phụ nồng độ tỷ lệ thuận www.triphuc.com Áp dụng định luật Beer • Định luật Beer cho phép xác định nồng độ mẫu chưa biết • Để làm điều xác định việc hấp phụ tập hợp tiêu chuẩn biết vẽ ABS chuẩn với nồng độ chuẩn biểu đồ tuyến tính absorbance 1.00 0.80 0.60 0.40 0.20 0.00 20 40 60 80 100 120 concentration www.triphuc.com Áp dụng định luật Beer • Khi chất nhiễm sắc chứng minh theo định luật Beer bước sóng cụ thể (đường tuyến tính ABS với nồng độ với điểm xuất phát 0) nồng độ chưa biết liên quan đến tiêu chuẩn đơn: ABS conc STD STD = ABS test conc test www.triphuc.com Độ lệch từ định luật Beer • Sự thay đổi đường tuyến tính ABS với nồng độ xuất khi: • Nồng độ đo tăng • Năng lượng xạ đơn sắc • Chất hấp phụ hòa tan so sánh với chất hấp phụ dung dịch www.triphuc.com Độ lệch từ định luật Beer • Sự thay đổi từ đường tuyến tính ABS với nồng độ xuất khi: • Phép đo khơng thực bước sóng tối ưu • Có mặt ánh sáng phân tán • Các cạnh tế bào (cuvet) không tương đồng www.triphuc.com Kiểm tra máy quang phổ kế • Điều quan trọng cần có thực hành tốt sử dụng máy quang phổ kế: • Thực việc bảo dưỡng hàng ngày theo hướng dẫn nhà sản xuất • Kiểm tra độ tuyến tính quang phổ • Kiểm tra bước sóng thường xuyên www.triphuc.com Kiểm tra máy quang phổ kế • Nếu thiết bị dùng hàng ngày • Kiểm tra chức máy quang phổ kế hàng tuần • Ghi lại kết • Để bạn đối chiếu thay đổi sai sót www.triphuc.com Kiểm tra máy quang phổ kế • Nếu thiết bị dùng (một hai lần tháng), quy trình nên thực trước sử dụng xét nghiệm bệnh nhân • Các yếu tố việc đánh giá máy quang phổ kế gồm: • Độ xác bước sóng đường tuyến tính quang phổ www.triphuc.com 14 Kiểm tra máy quang phổ kế • Tóm tắt • Xác định thiết bị thực phạm vi cụ thể nhà sản xuất • Bảo dưỡng trang thiết bị tối ưu • Làm theo hướng dẫn nhà sản xuất đưa việc bảo dưỡng kiểm tra máy quang phổ kế tự động www.triphuc.com 15 Độ xác bước sóng • Đảm bảo lượng xạ bị loại khỏi khe máy đơn sắc giống máy chọn bước sóng • Nên kiểm tra bóng đèn thay kiểm tra định kỳ* • Phương pháp: fin lọc didymium (đỉnh bước sóng 585 nm) • Coban chlorit (đỉnh bước sóng 510 nm) * Xem phần u cầu cơng việc www.triphuc.com Đường tuyến tính quang phổ • Đảm bảo mối liên hệ tuyến tính tồn lượng xạ hấp phụ hiển thị thiết bị (sự hấp phụ với nồng độ) • Đường tuyến tính kiểm tra với độ pha lỗng khác chất cô ban chlorit hoăc dung dịch khác biết theo định luật Beer www.triphuc.com Đường tuyến tính trắc quang • Khắc phục sau có kết khơng • Kiểm tra lại độ pha lỗng việc sử dụng pipet phù hợp • Kiểm tra dư thừa ánh sáng phân tán (nguyên nhân phổ biến nhất) • Kiểm tra đèn quang có bị hỏng khơng • Sửa độ rộng khe (q lớn) www.triphuc.com Độ xác trắc quang • Kiểm tra thay đổi dải SPECTRAL BANDWIDTH (sometimes called NOMINAL BANDPASS) INTENSITY lượng lượng ánh sáng nằm đèn quang • Đảm bảo ABS ln số ổn định bước sóng thích hợp không kể đến dải thiết bị lượng lượng ánh sáng nằm đèn quang TOTAL BAND OF WAVELENGTHS PASSED (sometimes called EFFECTIVE BANDPASS) 500 nm 520 nm WAVELENGTH • Có thể kiểm tra với nicken sulphat (510 nm) www.triphuc.com Ánh sáng phân tán • Kiểm tra ánh sáng dư thừa thu hút máy phát bước sóng khác với bước sóng chọn • Quan sát đầu cực trị quang phổ nơi đáp ứng với máy phát lượng nguồn mức thấp • Ánh sáng phân tán thường gây độ lệch âm từ định luật Beer www.triphuc.com Ánh sáng phân tán • Phương pháp • Nicken Sulphat (400nm and 700nm) • Dung dịch sodium nitrite (