Nghiên cứu tác dụng chống viêm của củ tam thất Radix Notoginseng trên động vật thực nghiệm Dương Thị Ly Hương 1 , Nguyễn Trần Giáng Hương 2 1 Đại học Dược Hà Nội, 2 Đại học Y Hà Nội Tá
Trang 1Nghiên cứu tác dụng chống viêm của củ tam thất (Radix Notoginseng) trên động vật thực nghiệm
Dương Thị Ly Hương 1 , Nguyễn Trần Giáng Hương 2
1 Đại học Dược Hà Nội, 2 Đại học Y Hà Nội
Tác dụng chống viêm của củ tam thất (Radix Notoginseng) được thực hiện trên chuột cống trắng theo phương pháp gây phù lòng bàn chân chuột bằng Carrageenin 1% Kết quả cho thấy cao lỏng tam thất có tác dụng chống viêm cấp ở liều 15 g/kg và chống viêm mạn tính ở liều 2,5g/kg và 5g/kg
Tác dụng chống viêm của tam thất được thể hiện qua việc làm giảm lượng dịch rỉ viêm và ức chế sự phát triển của các u hạt thực nghiệm
i Đặt vấn đề
Nền y học cổ truyền Việt Nam đã tồn tại từ
hàng ngàn năm nay, gắn bó chặt chẽ với nhân
dân và có những đóng góp không thể phủ
nhận Tuy nhiên, nhiều vị thuốc, bài thuốc có
tác dụng tốt trên lâm sàng nhưng chưa được
nghiên cứu về tác dụng dược lý và độc tính
Trong những cây thuốc dân gian, củ tam thất
(Radix Notoginseng) được dùng nhiều trong
các trường hợp té ngã, ứ huyết, sưng đau và
được dùng để điều trị khối u, ung thư [1] Để
góp phần khẳng định tác dụng của vị thuốc và
làm tiền đề cho những ứng dụng trên lâm sàng,
chúng tôi tiến hành đề tài nghiên cứu này với
mục tiêu:
- Đánh giá tác dụng chống viêm của củ tam
thất (Radix Notoginseng) qua hai phương pháp
gây phù lòng bàn chân chuột cống trắng bằng
carrageenin và gây tràn dịch màng bụng
- Nghiên cứu tác dụng chống viêm mạn của
tam thất trên động vật thực nghiệm
ii Đối tượng và phương pháp
nghiên cứu
1 Thuốc nghiên cứu:
Tam thất do công ty cổ phần Traphaco
cung cấp, loại 6 củ/100gram
Sắc theo phương pháp đông y được dịch chiết toàn phần trong nước, tỷ lệ 1:2 (100 gram dược liệu tương ứng với 200 ml dịch chiết) Dung môi làm chứng: nước muối sinh lý 0,9%
2 Đối tượng nghiên cứu:
Chuột cống trắng khoẻ mạnh cả hai giống, trọng lượng từ 170-190g, được nuôi trong điều kiện đầy đủ thức ăn và nước uống tại phòng thí nghiệm của Bộ môn Dược lý Trường Đại học Y
Hà Nội
3 Phương pháp nghiên cứu:
3.1 Nghiên cứu tác dụng chống viêm cấp:
3.1.1 Phương pháp gây phù lòng bàn chân chuột cống trắng bằng carrageenin [2]:
Chuột cống trắng cả hai giống được chia thành 3 lô, mỗi lô 8 con
- Lô 1: uống NaCl 0,9%
- Lô 2: uống aspirin 0,05g/kg
- Lô 3: uống tam thất 5g/kg Một giờ sau khi cho chuột uống thuốc thử hoặc dung môi, gây viêm bằng cách tiêm dung dịch carrageenin 1% - 0,05ml/chuột vào dưới
da gan bàn chân sau bên phải Thể tích chân chuột được đo bằng dụng cụ chuyên biệt plethysmometer loại No7140 của hãng
Trang 2TCNCYH 25 (5) - 2003
Ugobasin - Italia trước và sau khi gây viêm 2 -
4 - 6 và 24 giờ
Mức độ phù chân chuột được tính như sau:
Vt – V0 X% =
V0 X 100
Trong đó: Vt: thể tích chân chuột sau khi
gây viêm ở thời điểm t giờ
Vo: thể tích chân chuột trước khi gây viêm
So sánh độ tăng thể tích trung bình giữa
chân chuột thử thuốc với chân chuột đối chứng
và giữa các lô thử thuốc với nhau Tác dụng
chống viêm được biểu thị bằng tỷ lệ % ức chế
phản ứng viêm
3.1.2 Phương pháp gây tràn dịch màng
bụng
Chuột cống trắng được chia thành 3 lô như
trên Một giờ sau khi uống thuốc thử, chuột
được tiêm màng bụng dung dịch (carrageenin
0,05g + formaldehyd 1,5ml + nước cất vừa đủ
100ml) với thể tích 2ml/chuột Sau khi tiêm
carrageenin 24 giờ, mở khoang màng bụng để
hút dịch và đếm số lượng bạch cầu trong dịch
tiết trên máy đếm tế bào Vet abc của công ty
Europ Continents
Tác dụng chống xuất tiết được đánh giá
thông qua hiệu quả làm giảm thể tích dịch rỉ
viêm và số lượng bạch cầu trong dịch rỉ viêm
3.2 Nghiên cứu tác dụng chống viêm
mạn:
Gây u hạt thực nghiệm theo phương pháp của Ducrot, Joulon và cộng sự [3]
Chuột cống trắng được chia thành 4 lô Cho chuột uống thuốc thử hoặc dung môi vào mỗi buổi sáng trong 5 ngày liền Ngày đầu tiên, ngay sau khi uống thuốc, tiến hành cấy sợi amiant (30mg) đã tiệt trùng ở 160oC trong 2 giờ vào dưới da lưng chuột Chiều ngày thứ năm giết chuột, bóc tách khối u, đặt vào tủ sấy 36oC trong 18 giờ, sau đó cân trọng lượng các khối
u Trọng lượng trung bình các khối u (đã trừ sợi amiant) của chuột thử thuốc được so sánh với chuột đối chứng Tác dụng chống viêm được biểu thị bằng tỉ lệ phần trăm giảm trọng lượng khối u
Tất cả số liệu nghiên cứu được xử lý bằng thuật toán thống kê t-test Student
iii Kết quả
1 Tác dụng chống viêm cấp:
1.1 Gây phù lòng bàn chân chuột cống trắng bằng carrageenin:
Kết quả thực nghiệm được ghi lại trên bảng
1 cho thấy cao nước tam thất liều 5g/kg không
có tác dụng chống viêm cấp theo phương pháp gây phù lòng bàn chân chuột cống trắng bằng carrageenin Thể tích chân chuột thử thuốc không có sự khác biệt so với chân chuột đối chứng (p > 0,05)
Bảng 1: Độ tăng thể tích chân chuột sau khi gây viêm bằng carrageenin
Thể tích chân chuột sau tiêm carrageenin Lô
thử
n Thuốc
thử
Liều
dùng
Thể tích chân chuột ban
đầu (Vo)
Sau 2h Sau 4h Sau 6h Sau 24h
VTB (ml)
11 88 NaCl
0,9%
1,00±0,07 1,75±0,14 1,95±0,21 1,82±0,18 1,31±0,22 1,57±0,35
22 88 Aspirin
50mg/kg
0,97±0,12 1,53±0,19 1,89±0,28 1,85±0,24 1,25±0,12 1,50±0,35
33 88 Tam thất
5g/kg
0,97±0,16 1,75±0,29 2,02±0,34 1,88±0,34 1,27±0,21 1,58±0,39
p so với chứng
(lô 1 và lô 3)
> 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05
Trang 31.2 Tác dụng chống viêm màng bụng của tam thất:
Kết quả nghiên cứu ở bảng 2 cho thấy tam thất liều 15g/kg có tác dụng chống viêm cấp rõ rệt, làm giảm lượng dịch rỉ viêm so với lô chứng là 36% (p<0,05) Tác dụng này của tam thất tương
đương với Aspirin liều 50mg/kg (p>0,05)
Bảng 2: Tác dụng ức chế sự hình thành dịch rỉ viêm của tam thất
Lô nghiên cứu n Dịch rỉ viêm (ml) % ức chế
viêm
p so với chứng
p so với aspirin
1 NaCl 0,9% 7 5,0±1,5
2 Aspirin 50mg/kg 7 3,5±0,5 30,0 < 0,05
3 Tam thất 5g/kg 7 3,2±0,9 36,0 < 0,05 > 0,05
Bảng 3: Tác dụng chống viêm của tam thất trên số lượng bạch cầu trong dịch rỉ viêm
Lô nghiên cứu n Số lượng bạch
cầu (nghìn/ml)
% giảm viêm p so với chứng p so với aspirin
1 Chứng 7 14,36±2,26
2 Aspirin 50mg/kg 7 11,74±1,71 18,25 < 0,05
3 Tam thất 15g/kg 7 11,16±1,22 22,28 < 0,05 > 0,05
Kết quả thực nghiệm bảng 3 còn cho thấy tam thất có tác dụng ức chế bạch cầu thoát mạch rõ rệt so với lô chứng (p < 0,05) Tác dụng này của tam thất tương đương với Aspirin liều 50mg/kg (p > 0,05)
2 Tác dụng chống viêm mạn tính:
Bảng 4: Trọng lượng trung bình u hạt của các nhóm nghiên cứu:
Lô
thử
n Thuốc dùng
và liều lượng
Trọng lượng trung bình của u hạt (mg)
Tỷ lệ % giảm trọng lượng u
p so với chứng
p so với aspirin
1 8 NaCl 0,9% 320±104
3 8 Tam thất 2,5g/kg 190±40 40,62 < 0,05 > 0,05
4 8 Tam thất 5g/kg 210±70 34,37 < 0,05 > 0,05
Qua nghiên cứu chúng tôi thấy: cao lỏng
tam thất có tác dụng chống viêm mạn tính rõ
rệt, với cả hai mức liều 2,5g/kg và 5g/kg, tam
thất đã ức chế sự phát triển của các u hạt thực
nghiệm, làm giảm 40,62% và 34,37% tương
ứng trọng lượng u hạt so với lô chứng (p <
0,05) Tác dụng này của tam thất tương đương
với aspirin 50mg/kg (bảng 4)
iv Bàn luận
Tam thất là một vị thuốc đã được dùng từ lâu trong dân gian, qua nghiên cứu trên thực nghiệm, chúng tôi thấy tam thất có tác dụng chống viêm khá rõ
1 Tác dụng chống viêm cấp:
Có nhiều phương pháp nghiên cứu tác dụng
và cơ chế tác dụng của thuốc chống viêm, trong nghiên cứu này chúng tôi chọn hai phương pháp gây phù viêm cấp chân chuột và gây viêm màng bụng
Trang 4TCNCYH 25 (5) - 2003
Theo kết quả của phương pháp gây phù
bàn chân chuột cống trắng bằng carrageenin
(bảng 1), tam thất chưa thể hiện tác dụng
chống viêm cấp ở liều 5g/kg, thể tích chân
chuột thử thuốc chưa có sự khác biệt so với
chân chuột đối chứng (p > 0,05) ở các thời
điểm sau gây viêm 2 giờ, 4 giờ, 6 giờ và 24 giờ
Có thể mức liều 5g/kg là quá nhỏ nên chưa thể
hiện được tác dụng
Khi nghiên cứu bằng phương pháp gây tràn
dịch màng bụng, chúng tôi đã tăng liều tam
thất lên 15g/kg, kết quả thực nghiệm ở bảng 2
cho thấy tam thất với liều 15g/kg có tác dụng
chống viêm cấp rõ rệt, làm giảm lượng dịch rỉ
viêm xuống 36% so với lô đối chứng (p < 0,05)
Tác dụng này của tam thất tương đương với
Aspirin liều 50mg/kg (giảm 30% lượng dịch rỉ
viêm) với p > 0,05
Kết quả nghiên cứu ở bảng 3 cũng cho thấy
tam thất ức chế bạch cầu thoát mạch rõ rệt,
làm giảm 22,28% lượng bạch cầu trong dịch rỉ
viêm so với lô chứng (p < 0,05) Tác dụng này
của tam thất cũng tương đương với Aspirin
50mg/kg (p > 0,05)
Qua kết quả thực nghiệm, chúng tôi cho
rằng cơ chế chống viêm cấp của tam thất có
thể là do tác dụng làm giảm tính thấm thành
mạch tại vị trí viêm dẫn tới làm giảm lượng dịch
rỉ viêm, đồng thời phần nào ức chế khả năng
xuyên mạch của bạch cầu, từ đó giảm số lượng
bạch cầu trong dịch rỉ viêm
2 Tác dụng chống viêm mạn tính:
Nghiên cứu này nhằm đánh giá tác dụng
của thuốc trên quá trình tăng sinh tổ chức
thông qua việc tạo thành u hạt Nguyên tắc của
phương pháp là gây u hạt thực nghiệm bằng
carrageenin và amiant: Amiant là một vật lạ
không có khả năng tiêu, carrageenin có bản
chất là một lipopolysaccharid đóng vai trò quan
trọng trong cơ chế viêm, u hạt tạo thành là do
có phản ứng viêm gây ra bởi carrageenin cùng
với sự tồn tại của vật lạ không tiêu được là
amiant Cơ thể sẽ phản ứng bằng cách tập
trung nhiều tế bào tạo ra mô bào lưới, nguyên
bào sợi vây quanh vật lạ tạo nên hình ảnh của
mô hình viêm mạn thực nghiệm Thuốc chống viêm mạn tính sẽ ức chế tạo thành u hạt, điều này được thể hiện qua việc xác định trọng lượng u hạt giữa các lô chuột dùng các thuốc khác nhau
Với suy nghĩ rằng có thể tác dụng chống viêm mạn tính sẽ không cần đến một mức liều cao như đối với tác dụng chống viêm cấp tính, chúng tôi đã nghiên cứu tác dụng này của tam thất ở hai mức liều là 2,5g/kg và 5g/kg Kết quả
ở bảng 4 cho thấy tam thất với cả hai mức liều 2,5g/kg và 5g/kg đều có tác dụng ức chế sự phát triển của u hạt rõ, làm giảm 40,62% và 34,37% (tương ứng) trọng lượng u hạt so với lô chứng (p < 0,05)
Với những kết quả trên, chúng tôi cho rằng tam thất có tác dụng chống viêm cấp và mạn tính, mức độ tác dụng vừa phải, tương đương với Aspirin liều 50mg/kg Để giải thích chi tiết cơ chế chống viêm của tam thất, cần phải tiến hành các nghiên cứu sâu thêm khác
v Kết luận Qua nghiên cứu, chúng tôi rút ra một số kết luận sau:
Tam thất có tác dụng chống viêm cấp
và mạn tính
Tác dụng chống viêm cấp của tam thất
được thể hiện qua việc làm giảm lượng dịch rỉ viêm và số lượng bạch cầu trong dịch rỉ viêm
Tài liệu tham khảo
1 Trần Văn Kỳ (1993) Sâm tam thất - Thuốc bổ đông y - Nghiên cứu và ứng dụng lâm sàng Hội y học cổ truyền thành phố Hồ Chí Minh: 32-42
2 Winter, C.A; Risley, E.A and Nuss, G.W(1962) Carrageenin induced edema in hind paw of the rat as an assay for anti-inflammatory drug - Proc, exp Biol N J, 111: 544-74
3 Ducrot,R; Joulon, L et al (1965) Turner, screening methodes in pharmacolog” - Academic press :114-5
4 Lee J H et al (2001) Lonicera japonica flower is related to inhibition of
Trang 5NF-5 Kappa B activation through reducing
I-Kappa B alpha degredation in rat liver - Int J
Mol Med; 7: 79-83
Summary
Study the anti-inflammatory effect of Radix
Notoginseng on rats
The anti inflammatoty effect of Radix Notoginseng was studied on rat’s hind paw oedema induced by carrageenin The experimental results showed that:
The aqueous extract of Tam that in dose of 15g/kg body weight exerts the anti-acute inflammatory effect This effect is exhibited through the decrease of exsudation quantity and of leucocyte number in the exsudation
The aqueous extract of Tam that also exerts the anti-chronic inflammatory effect in doses of 2,5g/kg and 5g/kg body weight
