(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần và hoạt tính sinh học của lipid trong một số loài rong biển ở Việt Nam

(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần và hoạt tính sinh học của lipid trong một số loài rong biển ở Việt Nam(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần và hoạt tính sinh học của lipid trong một số loài rong biển ở Việt Nam(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần và hoạt tính sinh học của lipid trong một số loài rong biển ở Việt Nam(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần và hoạt tính sinh học của lipid trong một số loài rong biển ở Việt Nam(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần và hoạt tính sinh học của lipid trong một số loài rong biển ở Việt Nam(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần và hoạt tính sinh học của lipid trong một số loài rong biển ở Việt Nam(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần và hoạt tính sinh học của lipid trong một số loài rong biển ở Việt Nam(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần và hoạt tính sinh học của lipid trong một số loài rong biển ở Việt Nam(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần và hoạt tính sinh học của lipid trong một số loài rong biển ở Việt Nam(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần và hoạt tính sinh học của lipid trong một số loài rong biển ở Việt Nam(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần và hoạt tính sinh học của lipid trong một số loài rong biển ở Việt Nam(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần và hoạt tính sinh học của lipid trong một số loài rong biển ở Việt Nam(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần và hoạt tính sinh học của lipid trong một số loài rong biển ở Việt Nam(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần và hoạt tính sinh học của lipid trong một số loài rong biển ở Việt Nam(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần và hoạt tính sinh học của lipid trong một số loài rong biển ở Việt Nam(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần và hoạt tính sinh học của lipid trong một số loài rong biển ở Việt Nam(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần và hoạt tính sinh học của lipid trong một số loài rong biển ở Việt Nam(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần và hoạt tính sinh học của lipid trong một số loài rong biển ở Việt Nam(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần và hoạt tính sinh học của lipid trong một số loài rong biển ở Việt Nam(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần và hoạt tính sinh học của lipid trong một số loài rong biển ở Việt Nam(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần và hoạt tính sinh học của lipid trong một số loài rong biển ở Việt Nam(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần và hoạt tính sinh học của lipid trong một số loài rong biển ở Việt Nam(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần và hoạt tính sinh học của lipid trong một số loài rong biển ở Việt Nam(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần và hoạt tính sinh học của lipid trong một số loài rong biển ở Việt Nam(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần và hoạt tính sinh học của lipid trong một số loài rong biển ở Việt Nam(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần và hoạt tính sinh học của lipid trong một số loài rong biển ở Việt Nam(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần và hoạt tính sinh học của lipid trong một số loài rong biển ở Việt Nam(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần và hoạt tính sinh học của lipid trong một số loài rong biển ở Việt Nam(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần và hoạt tính sinh học của lipid trong một số loài rong biển ở Việt Nam(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần và hoạt tính sinh học của lipid trong một số loài rong biển ở Việt Nam(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần và hoạt tính sinh học của lipid trong một số loài rong biển ở Việt Nam(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần và hoạt tính sinh học của lipid trong một số loài rong biển ở Việt Nam(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần và hoạt tính sinh học của lipid trong một số loài rong biển ở Việt Nam(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần và hoạt tính sinh học của lipid trong một số loài rong biển ở Việt Nam(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần và hoạt tính sinh học của lipid trong một số loài rong biển ở Việt Nam(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần và hoạt tính sinh học của lipid trong một số loài rong biển ở Việt Nam(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần và hoạt tính sinh học của lipid trong một số loài rong biển ở Việt Nam(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần và hoạt tính sinh học của lipid trong một số loài rong biển ở Việt Nam(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần và hoạt tính sinh học của lipid trong một số loài rong biển ở Việt Nam(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần và hoạt tính sinh học của lipid trong một số loài rong biển ở Việt Nam

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - - PHẠM THU HUẾ NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA LIPID TRONG MỘT SỐ LOÀI RONG BIỂN Ở VIỆT NAM LUẬN ÁN TIẾN SỸ HÓA HỌC Hà Nội- 2021 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - - PHẠM THU HUẾ NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA LIPID TRONG MỘT SỐ LOÀI RONG BIỂN Ở VIỆT NAM LUẬN ÁN TIẾN SỸ HĨA HỌC Chun ngành: Hóa học hợp chất thiên nhiên Mã số: 9.44.01.17 Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Trần Thị Thanh Vân TS Lê Tất Thành Hà Nội- 2021 i LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu cộng Các kết nghiên cứu không trùng lặp chưa công bố tài liệu khác Hà Nội, ngày tháng Tác giả luận án Phạm Thu Huế năm 2021 ii LỜI CẢM ƠN Tôi xin trân trọng cảm ơn PGS.TS Trần Thị Thanh Vân TS Lê Tất Thành định hướng khoa học, giúp đỡ tận tình suốt trình thực luận án Xin gửi đến Cơ Thầy lời biết ơn chân thành Tôi xin cảm ơn hỗ trợ GS.TS Phạm Quốc Long, anh chị bạn Viện Hóa học Hợp chất Thiên nhiên - Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam; Trung tâm Khoa học Quốc gia sinh vật biển - Viện Hàn lâm Khoa học Liên bang Nga Tôi xin cảm ơn giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi Học viện Hải Quân Học viện Khoa học Công nghệ - Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam suốt thời gian thực luận án Sau cùng, xin gửi lời cảm ơn đến gia đình, bạn bè, đồng nghiệp động viên, giúp đỡ tơi hồn thành luận án Luận án khơng tránh khỏi thiếu sót Kính mong nhận ý kiến đóng góp quý báu hội đồng Thầy Cơ để luận án NCS hồn thiện Tôi xin trân trọng cảm ơn! Hà Nội, ngày tháng năm 2021 Tác giả luận án Phạm Thu Huế iii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN .i LỜI CẢM ƠN Error! Bookmark not defined MỤC LỤC iii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT vii DANH MỤC BẢNG x DANH MỤC HÌNH xii MỞ ĐẦU CHƯƠNG I TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan rong biển 1.1.1 Giới thiệu chung 1.1.2 Đa dạng loài phân bố rong biển Việt Nam 1.1.3 Các nghiên cứu thành phần hóa học rong biển 1.2 Lipid rong biển 14 1.2.1 Khái niệm chung lipid 14 1.2.2 Các lớp chất lipid .16 1.2.2.1 Hydrocacbon sáp 17 1.2.2.2 Triacylglycerol, diacylglycerol, monoankyldiacylglycerol .17 1.2.2.3 Sterol 17 1.2.2.4 Các axit béo .18 1.2.2.5 Lipid phân cực 21 1.2.3 Các nghiên cứu giới nước lipid rong biển .23 1.3 Phổ khối phân giải cao nghiên cứu lipid phân cực 29 1.3.1 Hệ thống thiết bị LCMS-IT-TOF .29 1.3.1.1 Kỹ thuật khối tứ cực 29 1.3.1.3 Kĩ thuật thời gian bay (Time of Flight - TOF) 30 1.3.2 Ứng dụng LCMS-IT-TOF nghiên cứu lipid phân cực 31 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 33 2.1 Đối tượng nghiên cứu 33 2.2 Phương pháp nghiên cứu 39 2.2.1 Phương pháp thu bảo quản mẫu 39 iv 2.2.2 Phương pháp phân lập, chiết tách lipid, axit béo 39 2.2.2.1 Phương pháp chiết tách xác định hàm lượng lipid tổng 39 2.2.2.2 Phương pháp phân tích thành phần hàm lượng lớp chất lipid lipid tổng .39 2.2.2.3 Phương pháp phân tích thành phần hàm lượng axit béo 40 2.2.3 Phương pháp phân tích cấu tử 40 2.2.4 Phương pháp xác định dạng phân tử lipid phân cực .40 2.2.5 Phương pháp đánh giá hoạt tính sinh học 41 2.2.5.1 Hoạt tính bẫy gốc tự .41 2.2.5.2 Hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định .41 2.2.5.3 Hoạt tính gây độc tế bào ung thư 42 2.2.5.4 Hoạt tính kháng viêm 42 CHƯƠNG THỰC NGHIỆM 43 3.1 Chiết tách xác định hàm lượng lipid tổng 43 3.2 Xác định thành phần hàm lượng axit béo 44 3.3 Xác định thành phần hàm lượng lớp chất lipid tổng 44 3.4 Xác định dạng phân tử lipid phân cực 45 3.4.1 Xác định nhóm chất phân lớp lipid phân cực 46 3.4.2 Xác định dạng phân tử phân lớp phospholipid 46 3.4.2.1 Dạng phân tử phosphatic acid (PA) .46 3.4.2.2 Dạng phân tử phosphatidylglycerol (PG) 47 3.4.2.3 Dạng phân tử phosphatidylcholine (PC) 49 3.4.2.4 Dạng phosphatidyl inositol (PI) 51 3.4.3 Xác định dạng phân tử phân lớp glycolipid .53 3.4.3.1 Dạng phân tử monogalactosyldiacylglycerol (MGDG) 53 3.4.3.2 Dạng phân tử digalactosyldiacylglycerol (DGDG) 55 3.4.3.3 Dạng phân tử sulfoquinovosyl diacylglycerol (SQDG) 57 3.4.4 Xác định dạng phân tử phân lớp betaine lipid 60 3.4.4.1 Dạng phân tử diacylglyceryl-N,N,N-trimethylhomoserine (DGTS) 60 3.4.4.2 Dạng phân tử diaclyglycerylhydroxymethyl-N,N,N-trimethyl-betaalanine (DGTA) 64 3.5 Xác định hoạt tính sinh học phân đoạn lipid 67 v 3.5.1 Hoạt tính bẫy gốc tự 67 3.5.2 Hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định 68 3.5.3 Hoạt tính gây độc tế bào ung thư .69 3.5.4 Hoạt tính kháng viêm .70 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 73 4.1 Nghiên cứu sàng lọc lipid axit béo rong biển 73 4.1.1 Hàm lượng lipid tổng lớp chất lipid .73 4.1.2 Thành phần hàm lượng axit béo 80 4.1.2.1 Thành phần hàm lượng axit béo ngành rong Đỏ 80 4.1.2.2 Thành phần hàm lượng axit béo ngành rong Nâu 83 4.1.2.3 Thành phần hàm lượng axit béo ngành rong Lục 85 4.1.3 Ứng dụng liệu axit béo phân loại hoá học (Chemotaxonomy) ngành rong biển Việt Nam 88 4.2 Xác định dạng phân tử lipid phân cực rong Nâu Lobophora sp 93 4.2.1 Xác định dạng phân tử phospholipid 93 4.2.1.1 Xác định dạng phân tử phosphatic acid .93 4.2.1.2 Xác định dạng phân tử phosphatidylglycerol .94 4.2.1.3 Xác định dạng phân tử phosphatidylcholine 97 4.2.1.4 Xác định dạng phân tử phosphatidyl inositol .99 4.2.2 Xác định dạng phân tử glycolipid 101 4.2.2.1 Xác định dạng phân tử monogalactosyldiacylglycerol 101 4.2.2.2 Xác định dạng phân tử digalactosyldiacylglycerol 103 4.2.2.3 Xác định dạng phân tử sulfoquinovosyl diacylglycerol 104 4.2.3 Xác định dạng phân tử betaine lipid .107 4.2.3.1 Xác định dạng phân tử diacylglyceryl-N,N,N- trimethylhomoserine .107 4.2.3.2 Xác định dạng phân tử diaclyglycerylhydroxymethyl-N,N,Ntrimethyl-beta-alanine 109 4.3 Xác định dạng phân tử lipid phân cực rong Lục Halimeda incrasata Lamx 113 4.3.1 Xác định dạng phân tử phospholipid 113 4.3.1.1 Xác định dạng phân tử phosphatidylglycerol 113 vi 4.3.1.2 Xác định dạng phân tử phosphatidyl inositol 116 4.3.2 Xác định dạng phân tử glycolipid 118 4.3.2.1 Xác định dạng phân tử monogalactosyldiacylglycerol 118 4.3.2.2 Xác định dạng phân tử digalactosyldiacylglycerol 119 4.3.2.3 Xác định dạng phân tử sulfoquinovosyl diacylglycerol 122 4.3.3 Xác định dạng phân tử betaine lipid .123 4.4 Kết đánh giá hoạt tính sinh học 128 4.4.1 Hoạt tính bẫy gốc tự 128 4.4.2 Hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định 128 4.4.3 Hoạt tính gây độc tế bào ung thư 129 4.4.4 Hoạt tính kháng viêm .131 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 133 KẾT LUẬN 133 KIẾN NGHỊ .134 NHỮNG ĐÓNG GÓP MỚI CỦA LUẬN ÁN 135 DANH MỤC CÁC BÀI BÁO ĐÃ CÔNG BỐ 136 TÀI LIỆU THAM KHẢO 137 PHỤ LỤC .151 vii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT AA Axit arachidonic ABTS 2,2’-azinobis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonate) APCI Ion hóa hóa học áp suất khí APPI Ion hóa proton áp suất khí BHT Butylated Hydroxy Toluene CC Sắc kí cột CI Ion hóa hóa học COX Cyclooxygenase DG Diacylglycerol 10 DGDG Diglycosyldiacylglycerol 11 DGTA Diaclyglycerylhydroxymethyl-N,N,N-trimethyl- alanine 12 DGTS Diacylglyceryl-N,N,N-trimethylhomoserine 13 DHA Docosahexaenoic acid 14 DMSO Dimethyl Sulfoxide 15 DPA Docosapentaenoic acid 16 DPPH 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl 17 EI Ion hóa electron 18 EPA Eicosapentaenoic acid 19 ESI Ion hóa phun mù điện tử 20 FAB Bắn phá nguyên tử nhanh 21 FBS Fetal bovine serum (huyết phơi bị) 22 FD Giải hấp trường 23 FFA Axit béo tự 24 FI Ion hóa trường 25 FRAP Ferric reducing antioxidant power 26 FT ICR Ion hóa cộng hưởng ion cyclotron biến đổi Fourier 27 FTC Ferric thiocyanate 28 GC Sắc ký khí 29 GC-MS Sắc ký khí khối phổ viii 30 GF-GC Sắc kí rây phân tử 31 HPLC Sắc kí lỏng hiệu cao 32 HRMS Phổ khối phân giải cao 33 HW Hidrocabon sáp 34 IC50 Inhibitory concentration (Nồng độ ức chế 50%) 35 IL Interleukin 36 IT Bẫy ion 37 LB Luria bertani (môi trường nuôi cấy vi sinh) 38 LC Sắc ký lỏng 39 LCMS Sắc ký lỏng khối phổ 40 LPS Lipopolysacarit 41 MADG Monoalkyldiacylglycerol 42 MALDI Matrix-assisted laser desorption ionization (Phương pháp ion hóa mẫu hấp thụ dựa hỗ trợ chất lượng laser) 43 MGDG Monogalactosyldiacylglycerol (MGDG), 44 MGTS Monoacylglyceryl -N, N, N- trimethyl homoserine 45 MRM Quét nhiều phản ứng chọn 46 MS Phổ khối 47 MTS 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium 48 MTT 3-[4,5-dimetylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazol brom 49 NF-κB Yếu tố nhân kappa B 50 NP-GC Hấp phụ pha thường 51 NSAIDs Nonsteroidal anti-inflammatory drugs 52 NPL Neutral porlar lipid (lipid trung tính) 53 OD Optical Density (Mật độ quang học) 54 PA Phosphatidic acid 55 PC Phosphatidylcholine 56 PE Phosphatidylethanolamine 57 PG Phosphatidylglycerol 58 PI Phosphatidylinositol ... DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - - PHẠM THU HUẾ NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA LIPID TRONG MỘT SỐ LOÀI RONG BIỂN... tử betaine lipid .123 4.4 Kết đánh giá hoạt tính sinh học 128 4.4.1 Hoạt tính bẫy gốc tự 128 4.4.2 Hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định 128 4.4.3 Hoạt tính gây độc... 64 3.5 Xác định hoạt tính sinh học phân đoạn lipid 67 v 3.5.1 Hoạt tính bẫy gốc tự 67 3.5.2 Hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định 68 3.5.3 Hoạt tính gây độc tế bào ung