(LUẬN văn THẠC sĩ) nghiên cứu đặc điểm lâm học và nhân giống trà hoa vàng (camellia chrysantha (hu) tuyama) bằng phương pháp giâm hom​

i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu khoa học riêng tơi, cơng trình đƣợc thực thời gian từ tháng đến tháng 10 năm 2016 Các số liệu, kết nghiên cứu trình bày luận án trung thực chƣa đƣợc cơng bố cơng trình khác Hà nội, ngày 29 tháng 10 năm 2016 Ngƣời viết cam đoan Phan Đặng Hoàng download by : skknchat@gmail.com ii LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành đƣợc luận văn này, nhận đƣợc bảo, giúp đỡ tận tình TS Nguyễn Văn Việt TS Trần Việt Hà Cùng với giúp đỡ, động viên thầy cô giáo khoa Lâm học, Phòng đào tạo Sau đại học – Trƣờng Đại Học Lâm Nghiệp – Hà Nội, Hạt Kiểm lâm huyện Ba Chẽ, Trƣờng Cao Đẳng Nông lâm Đông bắc – Quảng ninh Nhân dịp cho phép đƣợc bày tỏ lòng biết ơn chân thành sâu sắc tới TS Nguyễn Văn Việt TS Trần Việt Hà, bảo, giúp đỡ tận tình thời gian qua Tơi xin chân thành cảm ơn đến lãnh đạo, cán Hạt Kiểm lâm huyện Ba chẽ, Trƣờng Cao Đẳng Nông lâm Đông bắc – Quảng ninh, tạo điều kiện giúp đỡ tơi suốt q trình thực luận văn Tơi xin chân thành cảm ơn gia đình bạn đồng nghiệp động viên, giúp đỡ trình thực luận văn! Hà nội, ngày 29 tháng 10 năm 2016 Ngƣời viết luận văn Phan Đặng Hoàng download by : skknchat@gmail.com iii MỤC LỤC Trang Trang phụ bìa LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC VÀ CÁC KÍ HIỆU VIẾT TẮT v DANH MỤC CÁC BẢNG vi ĐẶT VẤN ĐỀ Chƣơng TỔNG QUAN VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU 1.1 Giới thiệu Trà hoa vàng (Camellia chrysantha (Hu) Tuyama) .3 1.1.1 Hệ thống phân loại phân bố 1.1.2 Đặc điểm sinh học .3 1.1.3 Giá trị sử dụng 1.2 Tổng quan mã vạch ADN (DNA barcode) 1.2.1 Trên Thế Giới 1.2.2 Ở Việt Nam .6 1.3 Nghiên cứu đặc điểm lâm học loài 1.3.1.Trên giới .8 1.3.2 Ở nƣớc 12 1.4 Cơ sở khoa học nhân giống hom 14 1.4.1 Cơ sở phƣơng pháp giâm hom 15 1.4.2 Nhu cầu sinh lý cành cắt rời 16 1.5 ngh a nhân giống hom 16 1.6 Những nghiên cứu chi Camellia 17 1.6.1 Những nghiên cứu chi Camellia Thế Giới 17 1.6.2 Những nghiên cứu chi Camellia Việt Nam .19 Chƣơng MỤC TIÊU, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 24 2.1 Mục tiêu nghiên cứu 24 download by : skknchat@gmail.com iv 2.2 Đối tƣợng nghiên cứu .24 2.3 Địa điểm nghiên cứu 24 2.4 Nội dung nghiên cứu 24 2.5 Phƣơng pháp nghiên cứu 24 2.5.1 Nghiên cứu mã vạchADN (DNA barcode) cho Trà hoa vàng Ba Chẽ 24 2.5.2 Nghiên cứu số đặc điểm Lâm học Trà hoa vàng .26 2.5.3 Thí nghiệm giâm hom Trà hoa vàng .29 Chƣơng KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 32 3.1 Kết xác định mã vạch AND (DNA barcode) 32 3.1.1 Tách chiết ADN khuyếch đại PCR (Polymerase Chain Reaction) 32 3.1.2 Phân tích trình tự nucleotide từ ba vùng ADN .33 3.2 Một số đặc điểm Lâm học Trà hoa Vàng 36 3.2.1 Đặc điểm hình thái lồi Trà hoa vàng Ba chẽ 36 3.2.2 Đặc điểm sinh thái phân bố loài Trà hoa vàng Ba chẽ 39 3.2.3 Đặc điểm cấu trúc hồn cảnh rừng nơi có lồi Trà hoa vàng phân bố tự nhiên 40 3.3 Nhân giống Trà hoa vàng Ba chẽ phƣơng pháp giâm hom .46 3.3.1 Ảnh hƣởng nồng độ chất điều hòa sinh trƣởng đến khả sống khả rễ hom .46 3.3.4 Ảnh hƣởng giá thể ruột bầu đến hiệu giâm hom .53 3.3.5 Ảnh hƣởng ánh sáng đến khả sống hom 54 KẾT LUẬN, TỒN TẠI VÀ KIẾN NGHỊ 56 TÀI LIỆU THAM KHẢO download by : skknchat@gmail.com v DANH MỤC VÀ CÁC KÍ HIỆU VIẾT TẮT Nghĩa đầy đủ TT Viết tắt ABT Indol acetic acid ADN Axit đêoxiribonucleic CT CTTN D1,3 Đƣờng kính 1,3m Dg Đƣờng kính gốc ĐHST Dt Đƣờng kính tán F1 Đời lai thứ 10 F2 Đời lai thứ 11 H Chiều cao 12 HDC Chiều cao dƣới tán 13 Hvn Chiều cao vút 14 IBA Indol butiric acid 15 IV % Importance Value (Giá trị quan trọng) 16 N 17 NAA Napthalen acetic acid 18 ODB Ô dạng 19 OTC Ô tiêu chuẩn 20 pH 21 QXTV 22 TB Cơng thức Cơng thức thí nghiệm Điều hịa sinh trƣởng Số Chỉ số đo độ hoạt động ion hiđrô (H+) dung dịch Quần xã thực vật Trung bình download by : skknchat@gmail.com vi DANH MỤC CÁC BẢNG STT Tên bảng Trang 3.1 Đánh giá ba vùng ADN đề xuất 33 3.2 Kích thƣớc Trà hoa vàng Ba chẽ, Quảng ninh 36 3.3 Kết đo kích thƣớc Trà hoa vàng 37 3.4 Đặc điểm vật hậu loài 37 3.5 Cấu trúc tổ thành OTC tính theo số 41 3.6 Mật độ tầng cao lâm phần với Trà hoa vàng 43 3.7 Thành phần loài gỗ kèm với Trà hoa vàng OTC 44 3.8 Thành phần loài bụi, thảm tƣơi nơi Trà hoa vàng phân bố trạng thái rừng 45 3.9 Đặc điểm độ tàn che tầng cao trạng thái rừng 45 3.10 Ảnh hƣởng nồng độ chất ĐHST thực vật đến tỷ lệ sống 47 3.11 Ảnh hƣởng nồng độ chất ĐHST thực vật đến khả rễ 50 3.12 Ảnh hƣởng loại hom đến hiệu giâm hom 52 3.13 Ảnh hƣởng giá thể ruột bầu đến hiệu giâm hom 53 3.14 Ảnh hƣởng ánh sáng đến khả sống hom 54 download by : skknchat@gmail.com vii DANH MỤC CÁC BIỂU STT Tên biểu Trang 3.1 Ảnh hƣởng nồng độ chất ĐHST thực vật ABT đến tỷ lệ sống 47 3.2 Ảnh hƣởng nồng độ chất ĐHST thực vật IBA đến tỷ lệ sống 48 3.3 Ảnh hƣởng nồng độ chất ĐHST thực vật NAA đến tỷ lệ sống 48 3.4 Ảnh hƣởng nồng độ chất ĐHST thực vật đến khả rễ 50 3.5 Ảnh hƣởng loại hom đến hiệu giâm hom 52 3.6 Ảnh hƣởng giá thể ruột bầu đến hiệu giâm hom 53 3.7 Ảnh hƣởng ánh sáng đến khả sống hom 54 download by : skknchat@gmail.com viii DANH MỤC CÁC HÌNH STT Tên hình Trang 1.1 Trà hoa vàng Ba chẽ 3.1 ADN tổng số từ 06 mẫu nghiên cứu 32 3.2 Sản phẩm PCR với vùng rbcL từ 06 mẫu nghiên cứu 33 3.3 3.4 3.5 So sánh trình tự nucleotide vùng matK Trà hoa vàng Sơn Động Trà hoa vàng Ba Chẽ So sánh trình tự nucleotide vùng rbcL Trà hoa vàng Sơn Động Trà hoa vàng Ba Chẽ So sánh trình tự nucleotide vùng ITS2 Trà hoa vàng Sơn Động Trà hoa vàng Ba Chẽ 34 35 35 3.6 Cây Trà hoa vàng Ba chẽ 38 3.7 Cành mang nụ Trà hoa vàng 38 3.8 Quả Trà hoa vàng 38 3.9 Mặt trƣớc, mặt sau 38 3.10 Một số hình ảnh giâm hom Trà hoa vàng Ba chẽ 51 3.11 Loại hom 53 3.12 Một số hình ảnh chăm sóc hom Trà hoa vàng vƣờng ƣơm 55 download by : skknchat@gmail.com ĐẶT VẤN ĐỀ Cây Trà hoa vàng thuộc chi trà (Camellia) chi thực vật có hoa họ Chè (Theaceae), giới Việt Nam có nhiều lồi thuộc chi Camellia có hoa đẹp với đủ màu sắc khác nhƣ trắng, đỏ, hồng nhiều màu sắc lạ mắt, độc đáo đƣợc lai tạo thu hút quan tâm nhiều nhà chơi cảnh có ngƣời chơi cảnh Việt Nam Trong số đó, lồi Trà hoa vàng loài phát Việt Nam Trung Quốc Cũng nhƣ nhiều loài khác chi Camellia, giá trị dễ nhận thấy Trà hoa vàng làm cảnh Màu vàng Trà hoa vàng đặc trƣng, Khó tạo đƣợc phƣơng pháp lai hữu tính (Trần Ninh – Hakoda Naotoshi, 2010) Trà hoa vàng cịn có giá trị kinh tế y dƣợc cao nhƣ: Sử dụng để lấy gỗ, làm trồng tầng dƣới đai rừng phòng hộ, hoa làm đồ uống cao cấp, có tác dụng phịng chống bệnh huyết áp, tim mạch, tiểu đƣờng, u bƣớu (Zhu Ji Yu et al…, 2006) Các nhà thực vật giới xem loài Trà hoa vàng nguồn gen quý cần đƣợc bảo vệ nghiêm ngặt (Trần Ninh cs, 2010)[25] Trong 10 năm qua, nhà khoa học phát Việt Nam có tới 24 loài Trà hoa vàng Tuy vậy, Trà hoa vàng bị đe dọa nghiêm trọng môi trƣờng sống bị thu hẹp nhƣ việc thu lƣợm giống thái dẫn đến suy giảm nhanh số lƣợng cá thể tự nhiên Theo quy hoạch tỉnh Quảng Ninh, Ba Chẽ ba vùng dƣợc liệu tỉnh Để chủ động cho hƣớng phát triển, huyện Ba Chẽ xây dựng quy hoạch vùng trồng dƣợc liệu ba nghìn ha, trà hoa vàng đƣợc trồng với tổng diện tích 500 địa bàn xã, thị trấn Đến nay, toàn huyện trồng đƣợc 100ha trà hoa vàng từ nguồn vốn doanh nghiệp hộ dân địa bàn Công ty cổ phần Phú Khang HT lập dự án trồng 250 trà hoa vàng tập trung xã Thanh Sơn, kết hợp chế biến dƣợc liệu chỗ phát triển du lịch sinh thái[57] Vì việc nghiên cứu phƣơng pháp nhân giống, chăm sóc để bảo tồn phát triển loài Trà hoa vàng việc làm cần thiết Tuy nhiên download by : skknchat@gmail.com nghiên cứu lồi Trà hoa vàng cịn hạn chế Trong số loài Trà hoa vàng quý tỉnh Quảng Ninh lồi Trà hoa vàng Camellia chrysantha loài trà quý cần đƣợc quan tâm, bảo tồn phát triển Từ lý trên, tiến hành nghiên cứu đề tài: Nghiên cứu đặc điểm Lâm học nhân giống Trà hoa vàng (Camellia chrysantha (Hu) Tuyama) phương pháp giâm hom Nhằm phục vụ công tác bảo tồn phát triển dƣợc liệu quý download by : skknchat@gmail.com ... rbcL Trà hoa vàng Sơn Động Trà hoa vàng Ba Chẽ So sánh trình tự nucleotide vùng ITS2 Trà hoa vàng Sơn Động Trà hoa vàng Ba Chẽ 34 35 35 3.6 Cây Trà hoa vàng Ba chẽ 38 3.7 Cành mang nụ Trà hoa vàng. .. 3.2 Một số đặc điểm Lâm học Trà hoa Vàng 36 3.2.1 Đặc điểm hình thái lồi Trà hoa vàng Ba chẽ 36 3.2.2 Đặc điểm sinh thái phân bố loài Trà hoa vàng Ba chẽ 39 3.2.3 Đặc điểm cấu trúc... Nội dung nghiên cứu 24 2.5 Phƣơng pháp nghiên cứu 24 2.5.1 Nghiên cứu mã vạchADN (DNA barcode) cho Trà hoa vàng Ba Chẽ 24 2.5.2 Nghiên cứu số đặc điểm Lâm học Trà hoa vàng